用于慢性障碍的化合物的制作方法

有机化合物处理,合成应用技术用于慢性障碍的化合物1.相关申请的交叉引用2.本技术要求2020年4月6日提交的美国临时申请号63/005,730和2020年1月10日提交的印度申请号202041001163的权益和优先权，其中的每一件申请通过引用以其全文并入本文中。背景技术：3.慢性病症是一种持续或以其他方式其作用长期存在的人类健康状况或疾病，或者是一种随时间推移而出现的疾病。当病程持续超过三个月时，通常适用术语慢性。常见的慢性疾病包括关节炎、哮喘、癌症、慢性阻塞性肺病、糖尿病和一些病毒疾病，如丙型肝炎和获得性免疫缺陷综合征。4.癌症，也称为恶性肿瘤，是细胞的异常生长。当身体的正常控制机制停止工作时，癌症就会发展。旧细胞不会死亡，而是不受控制地生长，形成新的异常细胞。这些额外的细胞可能形成大量的组织，称为肿瘤。一些癌症，如白血病，不会形成肿瘤。5.存在超过100种类型的癌症，包括乳腺癌、皮肤癌、肺癌、结肠癌、前列腺癌和淋巴瘤。症状根据类型而变化。6.治疗方案取决于癌症的类型和其阶段。疗法的目的是杀死尽可能多的癌细胞，同时减少对附近正常细胞的损害。7.三种主要的治疗是：8.●手术：直接除去肿瘤；9.●化疗：使用化学物质杀死癌细胞；10.●放射疗法：使用x射线杀死癌细胞。11.转移性癌症的主要未解决的问题是接受化疗的客观应答后的复发、一线化疗的药物诱导的副作用以及对二线治疗的延迟应答。不幸地，很少有选择可以被用作三线治疗。因此，对于找到可有效预防和/或管理慢性病症(如癌症)的新化学预防剂存在不断增长的需要。12.天然产物(如类黄酮)可用于预防或治疗慢性障碍。然而，由于降低的溶解度和生物利用度，天然产物不是当前治疗剂的有效替代品。因此，在现有技术中存在对开发新颖药物的需要，所述新型药物为靶向递送提供增加的生物利用度、溶解度和组织分布能力。此类药剂可以对多种慢性病症具有活性，并且在一些实施方案中，可以表现出抗癌或抗病毒活性。附图说明13.结合附图，从以下描述和所附权利要求中，本公开的前述和以下信息以及其他特征将变得更加显而易见。应当理解，这些附图仅描绘了根据本公开的若干个实施方案，因此不应被认为是对其范围的限制，将通过使用附图以额外的特征和细节来描述本公开。14.图1描绘了化合物i的谱15.a.质谱16.b.ir谱17.c.1h nmr谱18.d.13c nmr谱19.图2描绘了化合物ii的谱20.a.质谱21.b.ir谱22.c.1h nmr谱23.d.13c nmr谱24.图3描绘了化合物iii的谱25.a.质谱26.b.ir谱27.c.1h nmr谱28.d.13c nmr谱29.图4描绘了化合物iv的谱30.a.质谱31.b.ir谱32.c.1h nmr谱33.d.13c nmr谱34.图5描绘了化合物v的谱35.a.质谱36.b.ir谱37.c.1h nmr谱38.d.13c nmr谱39.图6描绘了化合物vi的谱40.a.质谱41.b.ir谱42.c.1h nmr谱43.d.13c nmr谱44.图7描绘了化合物vii的谱45.a.质谱46.b.ir谱47.c.1h nmr谱48.d.13c nmr谱49.图8描绘了化合物viii的谱50.a.质谱51.b.ir谱52.c.1h nmr谱53.d.13c nmr谱54.图9描绘了化合物ix的谱55.a.质谱56.b.ir谱57.c.1h nmr谱58.d.13c nmr谱59.图10a描绘了化合物i在不同细胞系上的抗癌活性。60.a：分子对不同癌细胞系的作用；61.b：分子对正常细胞系的作用；62.c：与其他标准药物的比较：63.缩写64.mcf-7(人乳腺癌细胞)；65.mdamb 231(三阴性乳腺癌细胞系)；66.panc-1(人胰腺癌细胞系)；67.ht-29(人结肠癌细胞系)；68.t-all(t细胞急性淋巴母细胞性白血病)；69.hdf(人真皮成纤维细胞)；70.ac-16(人心肌细胞)；71.hbmsc(人骨髓间充质干细胞)；72.mcf-12a(人正常乳腺细胞)；73.crl2989(人正常胰腺细胞)；74.ncm 60(正常结肠上皮细胞系)75.图10b描绘了对照与化合物i的细胞凋亡诱导和线粒体膜电位。76.图11描绘了用于阐明抑制组蛋白脱乙酰酶(hdac)活性的本公开化合物(例如，化合物i)的作用机制的一系列图表。77.图12描绘了化合物i诱导的神经元细胞类型形成的一系列图表。78.a.人干细胞-分子的神经元分化79.b.分子的肿瘤基因表达分析80.图13描绘了化合物i对癌症干细胞标志物的抑制。81.图14描绘了常规药物与本发明化合物的癌细胞动力学和治疗。82.图15描绘了由本公开的化合物实现的突破。83.图16描绘了癌症干细胞和受体。84.图17描绘了癌症干细胞中的异常信号转导途径，并显示了癌症干细胞作为靶标。85.图18描绘了本公开的化合物针对各种类型的癌症所靶向的基因。86.图19a-19b描绘了通过测量对一组正常细胞系的ic50来评估抗癌剂的细胞毒性，所述正常细胞系未经化合物1处理的(图19a)和与化合物i组合处理的(图19b)。87.图20a-20c描绘了在比较常规药物与本公开化合物i的iv期易位肿瘤模型中的体内研究。88.图21a-21d提供了评估与吉西他滨相比化合物i的功效的panc-1小鼠异种移植模型。89.图22描绘了由本公开的化合物靶向的冠状病毒复制途径中的步骤。90.图23描绘了ace-2抑制剂的结合如何破坏病毒与受体之间的相互作用。91.图24a描绘了nsp15的分子结合位点。92.图24b描绘了显示小分子与nsp15的结合的模型。93.图24c描绘了显示被建议与本公开的化合物相互作用的结合位点残基的模型。94.图25a描绘了正常vero细胞和用sars-cov-2、以0.1的moi感染的vero细胞，用不同剂量的指定抗病毒药物处理48h。然后通过qrt-pcr定量细胞上清液中的病毒产率。95.图25b描绘了分别代表病毒产率的平均％抑制和药物(例如，化合物i)的细胞毒性的图。实验按一式三份进行。96.图25c描绘了在化合物i处理后病毒感染的免疫荧光显微术。在感染后48h，将经感染的细胞固定，并然后分别用抗sars相关cov的核蛋白(np)的兔血清作为第一抗体，并且用alexa 488标记的山羊抗兔igg作为第二抗体。将细胞核用hoechst染料染色。标尺，20μm。97.图25d描绘了在用sars-cov-2，以0.1的moi感染的细胞中，在感染后(p.i.)24h，核蛋白(np)表达的蛋白质印迹分析。98.图25e描绘了代表归一化为gapdh的核蛋白(np)表达的图。通过qrt-pcr定量经感染的细胞上清液中的病毒产率。实验按一式三份进行。99.图25f-25h描绘了显示在来自用1μm化合物i处理的样品中的上清液和细胞沉淀中发现病毒rna减少的图。100.图26a描绘了用不同浓度的化合物i处理的calu-3细胞的细胞生存力测定。101.图26b描绘了在用不同浓度的化合物i处理的calu-3细胞中的蚀斑减少百分比测定。102.图27a描绘了来自裸小鼠组织分布研究的肝和肾样品的h&e染色分析，所述裸小鼠被施用按化合物i的重量计单剂量10mg/kg。103.图27b描绘了在裸小鼠的心脏、肺、肌肉、脾、胫骨和股骨中，从0.5h至96h的组织分布研究的结果，所述裸小鼠被施用按化合物i的重量计单剂量10mg/kg。104.图28a-28e是显示在口服施用各种量的化合物i后对雄性和雌性wistar大鼠的器官重量(图28a-28b)、肝重量(图28c)和体重(图28d-28e)的影响的图。105.图28f-28i是显示当雄性和雌性wistar大鼠被口服施用各种量的化合物i时，对血液学参数(尿素、肌酸酐等)的影响的图。106.图28j-28k是显示当雄性和雌性wistar大鼠被口服施用各种量的化合物i时对电解质的影响的图。107.图28l-28o是显示在口服施用各种量的化合物i后，对雄性和雌性wistar大鼠肝功能的影响的图。108.图28p-28q是显示在口服施用各种量的化合物i后，对雄性和雌性小鼠肾功能的影响的图。109.图29a-29b描绘了对来自雄性(图29a)和雌性大鼠s(图29b)的肝、肾、骨骼肌、心脏和脾器官样品分析的组织病理性研究。在治疗期的最后一天收集组织样品。技术实现要素：110.本公开涉及具有抗癌和抗病毒活性的化合物。化合物可用于治疗患有慢性障碍的受试者。化合物具有呈式1a的结构[0111][0112]或其任何衍生物、其药学上可接受的盐或其组合。[0113]其中：[0114]r1是h、oh或烷氧基；[0115]r2是烷氧基或oh；[0116]r3是烷氧基或oh；[0117]x是c1-c15烷基、c2-c15烯基、c2-c15炔基、或芳烷基链，其各自独立地被至少一个烷氧基、oh、＝nh或氧代基团取代；[0118]y是h或烷基；并且[0119]x位于r2的邻位，或r1的对位。具体实施方式[0120]定义[0121]“烷基”或“烷基基团”是指具有一至十五个碳原子的完全饱和的直链或支链烃链，并且其通过单键与分子的其余部分附接。除非说明书中另外具体说明，否则烷基基团可以被任选地取代。[0122]“烯基”或“烯基基团”是指具有两个至十五个碳原子并具有一个或多个碳-碳双键的直链或支链烃链。每个烯基基团通过单键与分子的其余部分附接。除非说明书中另外具体说明，否则亚烷基链可以被任选地取代。[0123]“亚烯基”或“亚烯基链”是指直链或支链二价烃链基团，具有两个至十二个碳原子，并具有一个或多个碳-碳双键。亚烯基链通过单键与分子的其余部分附接，并通过单键与自由基附接。除非说明书中另外具体说明，否则亚烯基链可以被任选地取代。[0124]“烷氧基”是指具有式-ora的基团，其中ra是如上定义的含有一个至十二个碳原子的烷基、烯基或炔基。除非说明书中另外具体说明，否则烷氧基基团可以被任选地取代。[0125]芳烷基”或“芳基烷基”是指具有式-rb-rc的基团，其中rb是如上定义的亚烷基或亚烯基基团，并且rc是如上定义的一个或多个芳基，例如、苄基、二苯甲基等。除非说明书中另外具体说明，否则芳烷基基团可以被任选地取代。[0126]“氧代”是指具有与氧原子的双键的下列基团。[0127]本文使用的术语“取代的”是指以上基团中的任一个，其中至少一个氢原子被与非氢原子的键取代，包括但不限于：卤素原子，如f、cl、br和i；在如羟基基团、烷氧基基团和酯基团的基团中的氧原子；在如硫醇基团、硫代烷基基团、砜基团、磺酰基基团和亚砜基团的基团中的硫原子；在如胺、酰胺、烷基胺、二烷基胺、芳基胺、烷基芳基胺、二芳基胺、n-氧化物、酰亚胺和烯胺基团中的氮原子；在如三烷基甲硅烷基基团、二烷基芳基甲硅烷基基团、烷基二芳基甲硅烷基基团和三芳基甲硅烷基基团的基团中的硅原子；以及在各种其他原子中的其他杂原子。“取代的”也指以上基团中的任一个，其中一个或多个氢原子被与杂原子(如氧代、羰基、羧基和酯基)中的氧；和如亚胺、肟、腙和腈基团中的氮的高阶键(如双键或三键)取代。例如，“取代的”包括其中一个或多个氢原子被以下替代的以上基团中的任一者：-nrgrh、-nrgc(＝o)rh、-nrgc(＝o)nrgrh、-nrgc(＝o)orh、-nrgso2rh、-oc(＝o)nrgrh、-org、-srg、-sorg、-so2rg、-oso2rg、-so2org、＝nso2rg和-so2nrgrh。“取代的”也指其中一个或多个氢原子被以下各项替代的上述基团中的任一个：-c(＝o)rg、-c(＝o)org、-c(＝o)nrgrh、-ch2so2rg、-ch2so2nrgrh。在上文中，rg和rh是相同或不同的，并且独立地是氢、烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷基氨基、硫代烷基、芳基、芳烷基、环烷基、环烯基、环炔基、环烷基烷基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、杂环基、n-杂环基、杂环基烷基、杂芳基、n-杂芳基和/或杂芳基烷基。“取代的”进一步指以上基团中的任一个，其中一个或多个氢原子与氨基、氰基、羟基、亚氨基、硝基、氧代、硫代、卤素、烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷基氨基、硫代烷基、芳基、芳烷基、环烷基、环烯基、环炔基、环烷基烷基、卤代烷基、卤代烯基、卤代炔基、杂环基、n-杂环基、杂环基烷基、杂芳基、n-杂芳基和/或杂芳基烷基基团的键取代。此外，前述取代基中的每个也可以被以上取代基中的一个或多个任选地取代。[0128]如本文所用，符号(在下文可被称为“附接键联点”)表示两个化学实体之间的附接点，其中一个被描绘为附接到附接点，并且另一个未被描绘为附接到附接点。例如，表示化学实体“xy”经由附接键联点与另一个化学实体结合。此外，与未描述的化学实体的具体附接点可以通过推断来指定。例如，化合物ch3-r3，其中r3是h或是指当r3是“xy”时，附接键联点是与r3被描述为与ch3结合的键相同的键。[0129]“药学上可接受的盐”在适当时包括药学上可接受的碱加成盐和酸加成盐，例如金属盐(如碱金属和碱土金属盐)、铵盐、有机胺加成盐和氨基酸加成盐以及磺酸盐。酸加成盐包括无机酸加成盐，如盐酸盐、硫酸盐和磷酸盐；和有机酸加成盐，例如烷基磺酸盐、芳基磺酸盐、乙酸盐、马来酸盐、富马酸盐、酒石酸盐、柠檬酸盐和乳酸盐。酸加成盐的其他实例包括乙酸盐、苯磺酸盐(benzenesulfonic，besylate)、苯甲酸盐、樟脑磺酸盐、柠檬酸盐、乙烯磺酸盐、富马酸盐、葡萄糖酸盐、谷氨酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、羟乙磺酸盐、乳酸盐、马来酸盐、苹果酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、粘酸盐、硝酸盐、棕榈酸盐、泛酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、对甲苯磺酸盐等。金属盐的实例是碱金属盐，如锂盐、钠盐和钾盐；碱土金属盐，如镁盐和钙盐、铝盐和锌盐。铵盐的实例是铵盐和四甲基铵盐。有机胺加成盐的实例是含有吗啉和哌啶的盐。氨基酸加成盐的实例是含有甘氨酸、苯丙氨酸、谷氨酸和赖氨酸的盐。磺酸盐包括甲磺酸盐、甲苯磺酸盐和苯磺酸盐。当化合物含有酸性侧链时，合适的药学上可接受的碱加成盐包括由铝、钙、锂、镁、钾、钠和锌制成的金属盐，或由赖氨酸、n，n′‑二苄基乙二胺、氯普鲁卡因、胆碱、二乙醇胺、乙二胺、葡甲胺(n-甲基葡糖胺)和普鲁卡因制成的有机盐。[0130]应用于剂量或量的术语“治疗上有效的”是指化合物或药物制剂足以在对向有需要的患者施用后产生期望的临床益处的量。[0131]在以下详细描述中，参考了附图，这些附图构成了描述的一部分。在附图中，除非上下文另有指示，否则相似的符号通常标识相似的部件。在详细描述、附图和权利要求中描述的说明性实施例不意味着是限制性的。在不脱离本文呈现的主题的精神或范围的情况下，可以利用其他实施例，并且可以进行其他改变。将容易理解的是，如在本文一般描述的和在附图中示出的，本公开的方面能以各种不同的配置来布置、替换、组合、分离和设计，所有这些都在本文中明确考虑。[0132]总的来说，本发明公开了用于治疗慢性障碍(包括癌症)的新颖的治疗性化合物。[0133]在一些实施方案中，本发明公开了具有式1a的结构的化合物，[0134][0135]或其任何衍生物、其药学上可接受的盐或其组合。[0136]其中：[0137]r1是h、oh或烷氧基；[0138]r2是烷氧基或oh；[0139]r3是烷氧基或oh；[0140]x是c1-c15烷基、c2-c15烯基或芳烷基链，其各自独立地被至少一个烷氧基、oh、＝nh或氧代基团取代；[0141]y是h或烷基；并且[0142]x位于r2的邻位，或r1的对位。[0143]在具有式1a的化合物的一些实施方案中，[0144]r1是h。[0145]r2是-oh；[0146]r3是c1-c3烷氧基；并且[0147]x是被2个氧代基团取代的c4-c8烯基。[0148]y是c1-c3烷基。[0149]在一些实施方案中，具有式1a的化合物具有式1的结构[0150][0151]或其任何衍生物、其药学上可接受的盐或其组合。[0152]其中：[0153]r1是h、烷氧基或oh；[0154]r2是烷氧基或oh；[0155]r3是烷氧基或oh；[0156]x是c1-c15烷基、c2-c15烯基、或芳烷基链，其各自独立地被至少一个烷氧基、oh、＝nh或氧代基团取代。[0157]在式1的一些实施方案中，x是[0158](i)被四个取代基取代的c6-c10烯基，所述取代基独立地选自由以下组成的组：氧代、-oh和c1-c3烷氧基；[0159](ii)被氧代和c1-c3烷氧基取代的c8-c12烯基；[0160](iii)被2个氧代基团取代的c4-c8烯基；[0161](iv)被氧代和c1-c3烷氧基取代的c2-c6烯基；[0162](v)被＝nh取代的c1-c6烷基；[0163](vi)被-oh取代的c2-c3烯基；[0164](vii)被氧代和2个c1-c3烷氧基基团取代的c8-c12烯基；或[0165](viii)包含c6-c8烷基和c6芳基的芳烷基，其中所述烷基被氧代取代，并且所述芳基被两个烷氧基基团取代。[0166]在式1的一些实施方案中，[0167]r1是h；[0168]r2是c1-c3烷氧基；[0169]r3是c1-c3烷氧基；并且[0170]x是c6-c10烯基，被氧代、-oh和2个c1-c3烷氧基基团取代；[0171]在式1的一些实施方案中，[0172]r1是h；[0173]r2是c1-c3烷氧基；[0174]r3是c1-c3烷氧基；并且[0175]x是被氧代和c1-c3烷氧基取代的c8-c12烯基；[0176]在式1的一些实施方案中，[0177]r1是oh；[0178]r2是c1-c3烷氧基；[0179]r3是c1-c3烷氧基；并且[0180]x是被两个氧代基团取代的c4-c8烯基；[0181]在式1的一些实施方案中，[0182]r1是c1-c3烷氧基；[0183]r2是oh；[0184]r3是c1-c3烷氧基；并且[0185]x是被2个氧代基团取代的c4-c8烯基；[0186]在式1的一些实施方案中，[0187]r1是h；[0188]r2是oh；[0189]r3是oh；并且[0190]x是被＝nh取代的c1-c6烷基；[0191]在式1的一些实施方案中，[0192]r1是oh；[0193]r2是c1-c3烷氧基；[0194]r3是c1-c3烷氧基；并且[0195]x是被oh取代的c2-c3烯基。[0196]在式1的一些实施方案中，[0197]r1是h；[0198]r2是c1-c3烷氧基；[0199]r3是c1-c3烷氧基；并且[0200]x是被氧代和两个c1-c3烷氧基基团取代的c8-c12烯基。[0201]在式1的一些实施方案中，[0202]r1是oh；[0203]r2是c1-c3烷氧基；[0204]r3是c1-c3烷氧基；并且[0205]x是包含c6-c8烷基和c6芳基的芳烷基，其中所述烷基被氧代取代，并且所述芳基被两个c1-c3烷氧基基团取代。[0206]在一些实施方案中，具有式1a的化合物具有式2的结构[0207][0208]或其任何衍生物、其药学上可接受的盐或其组合。[0209]其中[0210]r1是h或oh；[0211]r2是烷氧基或oh；[0212]r3是烷氧基或oh；并且[0213]r4是c1-c15烷基、c2-c15烯基、芳烷基，其各自被至少一个烷氧基、-oh或氧代取代。[0214]在式2的一些实施方案中，r4是：[0215][0216]在式2的一些实施方案中，[0217]r1是h；[0218]r2是och3；[0219]r3是och3；并且[0220]r4是[0221]在式2的一些实施方案中，[0222]r1是h；[0223]r2是och3；[0224]r3是och3；并且[0225]r4是。[0226]在式2的一些实施方案中，[0227]r1是oh；[0228]r2是och3；[0229]r3是och3；并且[0230]r4是[0231]在式2的一些实施方案中，[0232]r1是oh；[0233]r2是och3；[0234]r3是och3；并且[0235]r4是[0236]在式2的一些实施方案中，[0237]r1是h；[0238]r2是och3；[0239]r3是och3；并且[0240]r4是[0241]在一些实施方案中，式1a具有式3的结构[0242][0243]或其任何衍生物、其药学上可接受的盐或其组合。[0244]其中：[0245]r1是h、烷氧基或oh；[0246]r2是烷氧基或oh；[0247]r3是烷氧基或oh；并且[0248]r5是c1-c12烷基或c2-c12烯基，其独立地被1或2个选自由以下组成的组的取代基取代：＝nh或氧代。[0249]在式3的一些实施方案中，[0250]r1是h；[0251]r2是oh；[0252]r3是oh；并且[0253]r5是＝nh。[0254]在一些实施方案中，r5位于r2的邻位。[0255]在式3的一些实施方案中，[0256]r1是-oc2h5；[0257]r2是oh；[0258]r3是-och3；并且[0259]r5是[0260]在式3的一些实施方案中，r5位于r1的对位。[0261]在一些实施方案中，具有式1a的化合物具有式4的结构[0262][0263]或其任何衍生物、其药学上可接受的盐或其组合。[0264]其中：[0265]r1是oh；[0266]r2是c1-c3烷氧基；[0267]r3是c1-c3烷氧基；并且[0268]r6是c(ch2)oh。[0269]在式4的一些实施方案中，[0270]r1是oh；[0271]r2是och3；[0272]r3是och3；并且[0273]r6是c(ch2)oh。[0274]在一些实施方案中，本发明提供了药物组合物，其包含一种以上所述的化合物和药学上可接受的载剂。[0275]在本公开的一些实施方案中，药学上可接受的载剂包括阿拉伯胶、动物油、苯甲醇、苯甲酸苄酯、硬脂酸钙、卡波姆、鲸蜡硬脂醇、鲸蜡醇、胆固醇、环糊精、右旋糖、二乙醇胺、乳化蜡、乙二醇棕榈酸硬脂酸酯、甘油、单硬脂酸甘油酯、硬脂酸甘油酯、单油酸甘油酯、单硬脂酸甘油酯、水合物、组氨酸、盐酸、羟丙基纤维素、羟丙基-β-环糊精(hpbcd)、羟丙甲纤维素(羟丙基甲基纤维素(hpmc))、羊毛脂、羊毛脂醇、卵磷脂、中链甘油三酯、金属皂、甲基纤维素、矿物油、磷酸二氢钠、单乙醇胺、油酸、聚乙二醇(peg 3350、peg 4000、peg 6000)、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物(泊洛沙姆)、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯蓖麻油衍生物、聚氧乙烯山梨醇酐脂肪酸酯、聚氧乙烯硬脂酸酯、聚山梨醇酯、聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单月桂酸酯(吐温20、聚山梨醇酯20)、聚氧乙烯(20)脱水山梨醇单油酸酯(吐温80、聚山梨醇酯80)、聚维酮、藻酸丙二醇酯、盐水、氯化钠、柠檬酸钠、柠檬酸钠二水合物、氢氧化钠、十二烷基硫酸钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠、脱水山梨醇酯、硬脂酸、硬脂醇、向日葵油、黄芪胶、三乙醇胺、植物油、水、黄原胶，或其组合。[0276]可以根据本文公开的示例合成路线来制备任何式1a-4的化学结构。[0277]在一个实施方案中，可以通过以下提供的方案i制备具有式1a的示例化合物i。[0278][0279]化学合成：在干燥的三颈烧瓶中，将乙酰丙酮(5mmol，0.51ml)和氧化硼(3.5mmol，0.244g)溶解于无水乙酸乙酯中，并在40℃下搅拌30min。然后添加相应的醛(10mmol)和硼酸三丁酯(10mmol，2.4ml)，并再搅拌30min。将正丁胺(7.5mmol)溶解于无水乙酸乙酯中，并然后在15min的时间段内添加。将混合物加热至40℃保持24h。然后添加5ml hcl(10％)，并加热至60℃再持续一小时。将水相用乙酸乙酯萃取若干次，将有机层经na2so4干燥，并将溶剂蒸馏出。将不溶解的沉淀(部分产物)过滤出，并用残留物从各种溶剂中重结晶。用柱色谱(洗脱液甲苯/乙酸乙酯8∶2)进行纯化，并从乙醇(80％)中结晶。[0280]接下来使合成的具有式1a-4的化合物进行分子表征以确定化合物的结构。[0281]表征：[0282]通过熔点、薄层色谱法、hplc、ir、质谱和nmr分析验证了合成产物的纯度。从图1-9中，合成的具有式1a-4的化合物的结构被阐明为如下表1中的化合物i至ix。[0283]表1[0284][0285][0286][0287][0288]在一些实施方案中，具有式1a-4的化合物和化合物i-ix可以涵盖顺式异构体、反式异构体，或顺式异构体和反式异构体。在一些实施方案中，具有式1a-4的化合物和化合物i-ix可以是顺式异构体和反式异构体的混合物。在一些实施方案中，具有式1a-4的化合物和化合物i-ix可以是顺式异构体(即，z-异构体)。在一些实施方案中，具有式1a-4的化合物和化合物i-ix可以是反式-异构体(即，e-异构体)。[0289]在一些实施方案中，具有式1a-4的化合物和化合物i-ix可以涵盖r或s立体异构体以及立体异构体的混合物(例如，非对映异构体的混合物)。在一些实施方案中，具有式1a-4的化合物可以是外消旋混合物或对映异构体纯的。[0290]在一些实施方案中，具有式1a-4的化合物和化合物i-ix是对映异构体纯的(例如，包含r或s对映异构体)、非对映异构体纯的，或包含立体异构体的混合物(例如，外消旋混合物或非对映异构体的混合物)。在一些实施方案中，具有式1a-4的化合物是外消旋混合物。在一些实施方案中，具有式1a-4的化合物是对映异构体纯的。在一些实施方案中，式1a-4的化合物是非对映异构体纯的。[0291]在一些实施方案中，对映异构体纯的化合物是具有对映异构体过量(ee)大于约75％、大于约80％、大于约85％、大于约90％、大于约95％或大于约99％的化合物。[0292]在一些实施方案中，非对映异构体纯的化合物是具有非对映异构体过量(de)大于约75％、大于约80％、大于约85％、大于约90％、大于约95％、或大于约99％的化合物。[0293]本发明的化合物可用于进行或提供本文所述的任何生物学功能。[0294]药物组合物[0295]本公开还包括药物组合物，所述厌恶组合物包含治疗有效量的一种或多种本文公开的化合物。在一些实施方案中，药物组合物包含治疗有效量的一种或多种具有式1a、2、3和/或4的化合物，或其药学上可接受的盐。在其他实施方案中，药物组合物包含选自表1的治疗有效量的一种或多种化合物，或其药学上可接受的盐。[0296]在各个方面，可以将具有式1a-4的化合物(包括表1中的化合物)或其药学上可接受的盐按约0.001mg/kg至约100mg/kg体重(例如，约0.01mg/kg至约10mg/kg或约0.1mg/kg至约5mg/kg)施用。[0297]在药学上可接受的混合物中所公开的化合物的浓度将根据若干个因素而变化，包括有待施用的化合物的剂量、所用的一种或多种化合物的药代动力学特征以及施用途径。可以单剂量或重复剂量施用药剂。根据多种因素选择使用本发明化合物的剂量方案，这些因素包括患者的类型、种类、年龄、体重、性别和医学状况；待治疗的病症的严重程度；施用途径；患者的肾功能和肝功能；以及所用的特定化合物或其盐。治疗可以是每天施用一次或更频繁地施用，这取决于许多因素，包括患者的整体健康状况，以及所选的一种或多种化合物的制剂和施用途径。[0298]可以按单个或多个单位剂量形式制造和/或施用本公开的化合物或药物组合物。[0299]在一些实施方案中，将本公开的化合物(具有式1-4的化合物，和表1)向患有慢性病症的患者施用。在本发明的一些实施方案的上下文中，术语“慢性障碍”是指但不限于急性淋巴母细胞性白血病、急性淋巴母细胞性白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性髓细胞性白血病、急性髓性白血病、肾上腺皮质癌、aids相关淋巴瘤、肛门癌、阑尾癌、基底细胞癌、膀胱癌、脑癌、脑干胶质瘤、乳腺癌、支气管腺瘤/类癌瘤、伯基特淋巴瘤、类癌瘤、小脑或脑星形细胞瘤、宫颈癌、胆管癌、软骨肉瘤、慢性淋巴细胞性或慢性淋巴细胞性白血病、慢性粒细胞白血病或慢性髓细胞白血病、慢性骨髓增殖性障碍、结肠癌、皮肤t细胞淋巴瘤、促结缔组织增生性小圆形细胞瘤、子宫内膜子宫癌、室管膜瘤、食管癌、尤因氏肉瘤、颅外生殖细胞瘤、性腺外生殖细胞瘤、肝外胆管癌、胆囊癌、胃部(胃)癌、胃肠类癌瘤、胃肠道间质瘤(gist)、妊娠滋养细胞肿瘤、脑干的胶质瘤、毛细胞白血病、头颈癌、心脏癌、肝细胞(肝)癌、霍奇金淋巴瘤、下咽癌、下丘脑和视觉通路胶质瘤、眼内黑色素瘤、胰岛细胞癌、卡波西肉瘤、喉癌、白血病、唇癌和口腔癌、脂肪肉瘤、淋巴瘤、男性乳腺癌、恶性间皮瘤、髓母细胞瘤、黑色素瘤、默克尔细胞皮肤癌、间皮瘤、转移性鳞状颈部癌、口部癌、多发性内分泌瘤综合征、多发性骨髓瘤、多发性骨髓瘤/浆细胞瘤、蕈样霉菌病、骨髓发育不良/骨髓增生性疾病、鼻腔和鼻窦癌、鼻咽癌、神经母细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、非黑色素瘤皮肤癌、非小细胞肺癌、寡树突胶质瘤、口腔癌、口咽癌、骨肉瘤和恶性纤维组织细胞瘤、卵巢癌、卵巢生殖细胞瘤、卵巢上皮癌(表面上皮-间质瘤)、卵巢低恶性潜在肿瘤、胰腺癌、鼻窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、阴茎癌、鼻咽癌、嗜铬细胞瘤、松果体星形细胞瘤、松果体生殖细胞瘤、松果体母细胞瘤和幕上原始神经外胚层肿瘤、垂体腺瘤、浆细胞瘤、胸膜肺母细胞瘤、原发癌、原发性中枢神经系统淋巴瘤、原发性肝癌、前列腺癌、直肠癌、肾细胞癌、肾盂和输尿管癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、塞扎里综合征、小细胞肺癌、小肠癌、软组织肉瘤、鳞状细胞癌、胃癌、幕上原始神经外胚层肿瘤、睾丸癌、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、甲状腺癌、肾盂和输尿管的移行细胞癌、尿道癌、子宫肉瘤、阴道癌、视觉通路与下丘脑胶质瘤、外阴癌、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、威尔姆氏瘤、帕金森氏病和帕金森障碍、亨廷顿氏舞蹈病、阿尔茨海默病、多发性硬化、肌萎缩性脊髓侧索硬化症、施-德腊奇综合征(shy-drager syndrome)、进行性核上性麻痹、路易体痴呆病、脊髓缺血、脊髓损伤、缺血性卒中、脑梗死、脊髓损伤、以及癌症相关的脑和脊髓损伤、多发性梗死性痴呆、老年痴呆、其他认知损害、抑郁、甲癣(指甲的真菌感染)、齿龈炎和牙周疾病(牙龈疾病)、肥胖症和糖尿病。本文公开的化合物也是严重急性呼吸综合征(sars)和冠状病毒疾病2019(covid-19)以及具有kras癌基因突变的不同癌症的良好候选物。[0300]在一些实施方案中，慢性病症是癌症。在一些实施方案中，癌症是结肠癌、前列腺癌、乳腺癌或白血病。在一些实施方案中，癌症是4期癌症。在一些实施方案中，结肠癌、前列腺癌、乳腺癌或白血病是4期。在一些实施方案中，慢性病症是各种癌症中的kras癌基团突变。[0301]在一些实施方案中，慢性病症是病毒感染，例如sars或covid-19。[0302]在某些实施方案中，将本文所述的方法、化合物和组合物与以下的一种或多种组合施用：其他的抗体分子、化疗、其他抗癌疗法(例如，靶向的抗癌疗法、基因疗法、病毒疗法、rna疗法、骨髓移植、纳米疗法或溶瘤细胞药物)、细胞毒性剂、基于免疫的疗法(例如，细胞因子或基于细胞的免疫疗法)、外科手术(例如，乳房肿瘤切除术或乳房切除术)或放射疗法，或前述任一者的组合。[0303]可替代地，或与前述组合合并，可以将本文所述的方法和组合物与以下的一种或多种组合施用：疫苗(例如，治疗性癌症疫苗)；或其他形式的细胞免疫疗法。[0304]在另一个实施方案中，将本文所述的方法、化合物和组合物与奥沙利铂、甲酰四氢叶酸或5-fu(例如，folfox共治疗)中的一种、两种或全部组合使用。可替代地或合并地，所述组合进一步包括vegf抑制剂(例如，如本文公开的vegf抑制剂)。[0305]可以与本文公开的方法组合的额外治疗剂的非限制性实例包括：他克唑(taxol)、伊马替尼(imatinif)、多柔比星、紫杉醇、氟尿嘧啶(5-fu)和长春碱。[0306]在一些实施方案中，可以将本文所述的方法和组合物与一种或多种抗病毒剂组合施用。[0307]可以与本文公开的方法组合使用的额外治疗剂(例如，抗病毒剂)的非限制性实例包括：瑞德西韦、洛匹那韦/利托那韦、法维拉韦(favilavir)、氯喹、羟基氯喹、阿奇霉素或其组合。[0308]带编号的实施方案：[0309]1.一种具有式1a的化合物，[0310][0311]或其药学上可接受的盐，[0312]其中：[0313]r1是h、oh或烷氧基；[0314]r2是烷氧基或oh；[0315]r3是烷氧基或oh；[0316]x是c1-c15烷基、c2-c15烯基、c2-c15炔基、或芳烷基链，其各自独立地被至少一个烷氧基、oh、＝nh、或氧代基团取代；[0317]y是h或烷基；并且[0318]x位于r2的邻位，或r1的对位。[0319]2.如实施方案1所述的化合物，其中：[0320]r2是c1-c3烷氧基。[0321]3.如实施方案1或2所述的化合物，其中：[0322]r3是c1-c3烷氧基。[0323]4.如实施方案1-3所述的化合物，其中：[0324]x是c1-c15烷基或c2-c15烯基，其各自独立地被1、2、3或4个选自由以下组成的组的取代基取代：烷氧基、oh、＝nh或氧代基团。[0325]5.如实施方案1-4所述的化合物，其中：[0326]r1是h或oh。[0327]6.如实施方案1-5所述的化合物，其中：[0328]y是h。[0329]7.如实施方案1-5所述的化合物，其中：[0330]r1是h；[0331]r2是-oh；[0332]r3是c1-c3烷氧基l；[0333]x是被两个氧代基团取代的c4-c8烯基；并且[0334]y是c1-c3烷基。[0335]8.如实施方案1所述的化合物，其具有式1的结构[0336][0337]或其药学上可接受的盐，[0338]其中：[0339]r1是h、烷氧基或oh；[0340]r2是烷氧基或oh；[0341]r3是烷氧基或oh；并且[0342]x是c1-c15烷基、c2-c15烯基、c2-c15炔基或芳烷基链，其各自独立地被至少一个烷氧基、oh、＝nh或氧代基团取代；[0343]9.如实施方案8所述的化合物，其中：[0344]r1是h或oh；[0345]r2是c1-c3烷氧基或oh；[0346]r3是c1-c3烷氧基或oh；并且[0347]x是c1-c12烷基、c2-c12烯基、或芳烷基，其各自独立地被1、2、3或4个独立地选自由以下组成的组的取代基取代：烷氧基、oh、＝nh和氧代基团。[0348]10.如实施方案8或9所述的化合物，其中x是：[0349](i)被四个取代基取代的c6-c10烯基，所述取代基独立地选自由以下组成的组：氧代、-oh和c1-c3烷氧基；[0350](ii)被氧代和c1-c3烷氧基取代的c8-c12烯基；[0351](iii)被2个氧代基团取代的c4-c8烯基；[0352](iv)被氧代和c1-c3烷氧基取代的c2-c6烯基；[0353](v)被＝nh取代的c1-c6烷基；[0354](vi)被-oh取代的c2-c3烯基；[0355](vii)被氧代和两个c1-c3烷氧基基团取代的c8-c12烯基；和[0356](viii)包含c6-c8烷基和c6芳基的芳烷基，其中所述烷基被氧代取代，并且所述芳基被两个烷氧基基团取代。[0357]11.如实施方案8-10所述的化合物，其中r2是烷氧基。[0358]12.如实施方案11所述的化合物，其中r2是c1-c3烷氧基。[0359]13.如实施方案12所述的化合物，其中r2是-och3。[0360]14.如实施方案8-13所述的化合物，其中r3是烷氧基。[0361]15.如实施方案14所述的化合物，其中r3是c1-c3烷氧基。[0362]16.如实施方案15所述的化合物，其中r3是-och3。[0363]17.如实施方案8或9所述的化合物，其中：[0364]r1是h；[0365]r2是c1-c3烷氧基；[0366]r3是c1-c3烷氧基；并且[0367]x是被氧代、-oh或两个c1-c3烷氧基基团取代的c6-c10烯基；[0368]18.如实施方案8或9所述的化合物，其中[0369]r1是h；[0370]r2是c1-c3烷氧基；[0371]r3是c1-c3烷氧基；并且[0372]x是被氧代和c1-c3烷氧基取代的c8-c12烯基；[0373]19.如实施方案8或9所述的化合物，其中[0374]r1是oh；[0375]r2是c1-c3烷氧基；[0376]r3是c1-c3烷氧基；并且[0377]x是被两个氧代基团取代的c4-c8烯基。[0378]20.如实施方案8或9所述的化合物，其中[0379]r1是c1-c3烷氧基；[0380]r2是oh；[0381]r3是c1-c3烷氧基；并且[0382]x是被两个氧代基团取代的c4-c8烯基。[0383]21.如实施方案8或9所述的化合物，其中[0384]r1是h；[0385]r2是oh；[0386]r3是oh；并且[0387]x是被＝nh取代的c1-c6烷基。[0388]22.如实施方案8或9所述的化合物，其中[0389]r1是oh；[0390]r2是c1-c3烷氧基；[0391]r3是c1-c3烷氧基；并且[0392]x是被oh取代的c2-c3烯基。[0393]23.如实施方案8或9所述的化合物，其中[0394]r1是h；[0395]r2是c1-c3烷氧基；[0396]r3是c1-c3烷氧基；并且[0397]x是被氧代和两个c1-c3烷氧基基团取代的c8-c12烯基。[0398]24.如实施方案8或9所述的化合物，其中[0399]r1是oh；[0400]r2是c1-c3烷氧基；[0401]r3是c1-c3烷氧基；并且[0402]x是包含c6-c8烷基和c6芳基的芳烷基，其中所述烷基被氧代取代，并且所述芳基被两个烷氧基基团取代。[0403]25.如实施方案1所述的化合物，其具有式2的结构[0404][0405][0406]或其药学上可接受的盐；[0407]其中：[0408]r1是h或oh；[0409]r2是烷氧基或oh；[0410]r3是烷氧基或oh；并且[0411]r4是c1-c15烷基、c2-c15烯基、c2-c15炔基或芳烷基，其各自被至少一个烷氧基、-oh或氧代取代。[0412]26.如实施方案25所述的化合物，其中r4选自由以下组成的组：[0413][0414]27.如实施方案25或26所述的化合物，其中r2是烷氧基。[0415]28.如实施方案27所述的化合物，其中r2是c1-c3烷氧基。[0416]29.如实施方案28所述的化合物，其中r2是-och3。[0417]30.如实施方案25-29所述的化合物，其中r3是烷氧基。[0418]31.如实施方案30所述的化合物，其中r3是c1-c3烷氧基。[0419]32.如实施方案31所述的化合物，其中r3是-och3。[0420]33.如实施方案25或26所述的化合物，其中[0421]r1是h；[0422]r2是烷氧基；[0423]r3是烷氧基；并且[0424]r4是[0425]34.如实施方案25或26所述的化合物，其中[0426]r1是h；[0427]r2是烷氧基；[0428]r3是烷氧基；并且[0429]r4是[0430]35.如实施方案25或26所述的化合物，其中[0431]r1是oh；[0432]r2是烷氧基；[0433]r3是烷氧基；并且[0434]r4是[0435]36.如实施方案25或26所述的化合物，其中[0436]r1是oh；[0437]r2是烷氧基；[0438]r3是烷氧基；并且[0439]r4是[0440]37.如实施方案25或26所述的化合物，其中[0441]r1是h；[0442]r2是烷氧基；[0443]r3是烷氧基；并且[0444]r4是[0445]38.如实施方案1所述的化合物，其具有式3的结构[0446][0447]或其药学上可接受的盐，[0448]其中：[0449]r1是h、烷氧基或oh；[0450]r2是烷氧基或oh；[0451]r3是烷氧基或oh；并且[0452]r5是c1-c12烷基或c2-c12烯基，其独立地被1或2个选自由以下组成的组的取代基取代：＝nh和氧代。[0453]39.如实施方案38所述的化合物，其中r5是＝nh。[0454]40.如实施方案38或39所述的化合物，其中r5位于r2的邻位。[0455]41.如实施方案38-40中任一项所述的化合物，其中r2是oh。[0456]42.如实施方案38-41中任一项所述的化合物，其中r3是oh。[0457]43.如实施方案38-42中任一项所述的化合物，其中r1是h。[0458]44.如实施方案38所述的化合物，其中r5是：[0459][0460]45.如实施方案38或44所述的化合物，其中r3是烷氧基。[0461]46.如实施方案38、44或45中任一项所述的化合物，其中r3是c1-c3烷氧基。[0462]47.如实施方案38或44-46中任一项所述的化合物，其中r3是-och3。[0463]48.如实施方案38或44-47中任一项所述的化合物，其中r1是烷氧基。[0464]49.如实施方案38或44-48中任一项所述的化合物，其中r1是c1-c3烷氧基。[0465]50.如实施方案38或44-49中任一项所述的化合物，其中r1是-oc2h5。[0466]51.如实施方案38或44-50中任一项所述的化合物，其中r2是-oh。[0467]52.如实施方案44-51中任一项所述的化合物，其中r5位于r1的对位。[0468]53.如实施方案1所述的化合物，其具有式4的结构；[0469][0470]或其药学上可接受的盐；[0471]其中：[0472]r1是oh；[0473]r2是c1-c3烷氧基；[0474]r3是c1-c3烷氧基；并且[0475]r6是c(ch2)oh。[0476]54.如实施方案53所述的化合物，其中[0477]r1是oh；[0478]r2是och3；[0479]r3是och3；并且[0480]r6是c(ch2)oh。[0481]55.一种药物组合物，其包含如实施方案1-54中任一项所述的化合物和药学上可接受的载剂。[0482]56.一种在有需要的患者中治疗慢性障碍的方法，所述方法包括施用如实施方案1-54所述的化合物或如实施方案55所述的药物组合物。[0483]57.如权利要求56所述的方法，其中所述慢性障碍是急性淋巴母细胞性白血病、急性淋巴母细胞性白血病、急性淋巴细胞性白血病、急性髓细胞性白血病、急性髓性白血病、肾上腺皮质癌、aids相关淋巴瘤、肛门癌、阑尾癌、基底细胞癌、膀胱癌、脑癌、脑干胶质瘤、乳腺癌、支气管腺瘤/类癌瘤、伯基特淋巴瘤、类癌瘤、小脑或脑星形细胞瘤、宫颈癌、胆管癌、软骨肉瘤、慢性淋巴细胞性或慢性淋巴细胞性白血病、慢性粒细胞白血病或慢性髓细胞白血病、慢性骨髓增殖性障碍、结肠癌、皮肤t细胞淋巴瘤、促结缔组织增生性小圆形细胞瘤、子宫内膜子宫癌、室管膜瘤、食管癌、尤因氏肉瘤、颅外生殖细胞瘤、性腺外生殖细胞瘤、肝外胆管癌、胆囊癌、胃部(胃)癌、胃肠类癌瘤、胃肠道间质瘤(gist)、妊娠滋养细胞肿瘤、脑干的胶质瘤、毛细胞白血病、头颈癌、心脏癌、肝细胞(肝)癌、霍奇金淋巴瘤、下咽癌、下丘脑和视觉通路胶质瘤、眼内黑色素瘤、胰岛细胞癌、卡波西肉瘤、喉癌、白血病、唇癌和口腔癌、脂肪肉瘤、淋巴瘤、男性乳腺癌、恶性间皮瘤、髓母细胞瘤、黑色素瘤、默克尔细胞皮肤癌、间皮瘤、转移性鳞状颈部癌、口部癌、多发性内分泌瘤综合征、多发性骨髓瘤、多发性骨髓瘤/浆细胞瘤、蕈样霉菌病、骨髓发育不良/骨髓增生性疾病、鼻腔和鼻窦癌、鼻咽癌、神经母细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、非黑色素瘤皮肤癌、非小细胞肺癌、寡树突胶质瘤、口腔癌、口咽癌、骨肉瘤和恶性纤维组织细胞瘤、卵巢癌、卵巢生殖细胞瘤、卵巢上皮癌(表面上皮-间质瘤)、卵巢低恶性潜在肿瘤、胰腺癌、鼻窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、阴茎癌、鼻咽癌、嗜铬细胞瘤、松果体星形细胞瘤、松果体生殖细胞瘤、松果体母细胞瘤和幕上原始神经外胚层肿瘤、垂体腺瘤、浆细胞瘤、胸膜肺母细胞瘤、原发癌、原发性中枢神经系统淋巴瘤、原发性肝癌、前列腺癌、直肠癌、肾细胞癌、肾盂和输尿管癌、视网膜母细胞瘤、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、塞扎里综合征、小细胞肺癌、小肠癌、软组织肉瘤、鳞状细胞癌、胃癌、幕上原始神经外胚层肿瘤、睾丸癌、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、甲状腺癌、肾盂和输尿管的移行细胞癌、尿道癌、子宫肉瘤、阴道癌、视觉通路与下丘脑胶质瘤、外阴癌、瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症、威尔姆氏瘤、帕金森氏病和帕金森障碍、亨廷顿氏舞蹈病、阿尔茨海默病、多发性硬化、肌萎缩性脊髓侧索硬化症、施-德腊奇综合征(shy-drager syndrome)、进行性核上性麻痹、路易体痴呆病、脊髓缺血、脊髓损伤、缺血性卒中、脑梗死、脊髓损伤、以及癌症相关的脑和脊髓损伤、多发性梗死性痴呆、老年痴呆、其他认知损害、抑郁、甲癣(指甲的真菌感染https：//en.wikipedia.org/wiki/nail_(anatomy))、齿龈炎和牙周疾病(牙龈疾病)、肥胖症、糖尿病、sars、covid-19或kras癌基因突变的癌症。[0484]58.如实施方案56或57所述的方法，其中所述慢性障碍是癌症。[0485]59.如实施方案58所述的方法，其中所述癌症是结肠癌、前列腺癌、乳腺癌或白血病。[0486]60.如实施方案58或59所述的方法，其中所述癌症具有kras癌基因突变。[0487]61.如实施方案56或57所述的方法，其中慢性障碍是sars或covid-19。[0488]实例[0489]实施例1.抗癌活性研究(图10)[0490]评估合成的具有式1-4的化合物的细胞增殖、细胞凋亡、细胞周期停滞，分别使用mtt测定和流式细胞术测量活性氧簇和钙的产生。通过蛋白质印迹法确定细胞凋亡和增殖相关蛋白的表达。通过rt-pcr检测分子对癌细胞中细胞凋亡相关mrna表达的影响。[0491]分子在胰腺癌细胞系(panc)中诱导细胞凋亡和细胞周期停滞[0492]当按不同剂量(1-100μg/ml)的化合物i处理胰腺癌细胞(panc)持续24和48h时，细胞生存力以时间和剂量依赖性方式显著降低。与显示在3h活细胞减少30.21±0.21％的标准5-氟尿嘧啶(10μm)相比，panc细胞暴露于10μg/ml导致活细胞减少约65.5±0.88％。在暴露24小时后，发现ic50值为5.74±0.02μg/ml和5-fu的5.21±0.19μm。最重要地，这些分子显示出对正常胰腺细胞的保护增加了85.29％±0.98，其中ic50为109.24μg/ml，而5-fu显示出在6h的40.32±0.98％毒性。通过细胞膜起泡、染色质浓缩和凋亡小体的形成来检测细胞形态的变化(图10a)。[0493]体外研究显示，所公开的化合物潜在地靶向g2/m检查点中涉及的蛋白质(图10a和10b)，因为已经显示其在乳腺癌、胰腺癌和其他癌症中诱导该检查点中的停滞，这防止细胞通过该检查点并进入有丝分裂。[0494]通过以胱天蛋白酶依赖性方式通过内在途径(胱天蛋白酶3和9)诱导细胞凋亡来证明细胞生长抑制，这导致随后线粒体电位(δψm)的丧失(图10b)，ros产生增加和dna损伤，从而以剂量和时间依赖性方式导致细胞周期停滞在g0/g1期。[0495]新颖的分子被认为诱导细胞周期停滞和衰老变化，可能通过靶向stat-3、β-连环蛋白/wnt信号传导、mapk和/或jak-1/2/3极光激酶a，从而诱导有丝分裂停滞、改变细胞周期相关蛋白的表达和破坏微管。[0496]实施例2.分子抑制组蛋白脱乙酰酶(hdac)活性[0497]接下来检测在胰腺肿瘤发生过程中i类hdac表达。简单地，添加不同浓度的化合物i，并且孵育24h。蛋白质印迹分析证实，与对照相比，i类hdac的蛋白质表达以剂量依赖性方式降低(p＜0.05)。化合物i显著抑制了来自i类的hdac1、hdac2、hdac3和hdac8。总的来说，这些数据表明分子对i类hdac的抑制足以诱导panc细胞系中的细胞死亡。这些结果表明分子是有效的hdac抑制剂。对i类hdac的抑制与组蛋白h3乙酰化和p21 mrna和蛋白质表达的上调相关，这与抗增殖活性相关。还报道hdac6功能作为α-微管蛋白脱乙酰酶，调节微管蛋白稳定性。因为α-微管蛋白和组蛋白h3是hdac的共同下游靶标，所以进一步研究蛋白质表达和分子功能之间的关系。使用蛋白质印迹分析研究了化合物i对panc细胞中组蛋白h3乙酰化的影响。与对照组相比，化合物i诱导了组蛋白h3更强的超乙酰化，这与其对i类hdacl的有效抑制作用是一致的，但是没有检测到乙酰-α-微管蛋白。[0498]作用机制(图11)[0499]不受任何特定理论的束缚，本文公开的化合物可以表现出以下作用机制中的一种或多种：[0500]■可能通过靶向stat-3、β-连环蛋白/wnt信号传导、mapk、jak-1/2/3极光激酶a诱导细胞周期停滞和衰老变化，诱导有丝分裂停滞，并改变细胞周期相关蛋白的表达，并破坏微管。[0501]■导致线粒体膜电位丧失、细胞色素c释放、bax上调、bcl-2下调和胱天蛋白酶-3裂解，从而显示线粒体介导的细胞凋亡的激活。[0502]■多靶向的激酶抑制剂通过多种途径抑制多种人类癌细胞、癌症干细胞在体外和体内的增殖。[0503]■组蛋白脱乙酰酶(hdac)抑制剂和组蛋白甲基转移酶(hmt)抑制剂。[0504]■在mrna和蛋白质水平上下调hdac2和hdac3的水平，并且还具有下调klf4水平的潜力，所述klf4在干细胞形成中起重要作用。[0505]■分别与标准药物辛二酰苯胺异羟肟酸(saha)相比，下调htert水平。[0506]为了阐明抗增殖作用潜在的机制，研究了panc细胞的细胞周期分布和细胞凋亡。早在6小时就通过膜联蛋白v-荧光素与细胞膜的结合观察到早期细胞凋亡。化合物i-ix通过诱导胱天蛋白酶-3和胱天蛋白酶-9激活了细胞凋亡的内在途径。可以看到线粒体中内在途径的参与，其中线粒体通透性和细胞色素c释放显著增加，而线粒体膜电位下降。细胞凋亡在蛋白质水平上得到证实，包括bax、bcl-2和生存蛋白，而细胞周期的中断用于细胞凋亡的最终验证。碘化丙锭/膜联蛋白v双重染色显示了在3h时用panc处理的细胞的前凋亡细胞群。此外，我们观察到经荧光激活的细胞分选(facs)分析表明，分子诱导的细胞周期停滞与重要的检查点控制蛋白p21waf1/kip1、p27kip1、p53和细胞周期素a的调节相关，导致panc细胞系中的g0/g1停滞，下调细胞周期素d3、细胞周期素e1、cdk2、cdk4和cdk6的表达，并经由hdac抑制上调p21、p27和p53的表达。[0507]实施例3.神经发生和神经元发育人类脐带干细胞中的分子-分子诱导的神经元细胞类型形成(图12)[0508]在诱导开始时，humsc培养物在表型上表现为大而薄的扁平细胞体，具有大细胞核。经历用分子处理的msc在48-72h内显示出形态上的变化。此时，msc群体表现出球形折光性细胞体，具有树突状突起，以及从细胞体伸出的细长轴突状突起，这是神经元的典型特征。处理72h后，神经元样细胞比例达到高峰，其中胞体收缩，并且突起进一步延长。msc在诱导期间保持这种形态。[0509]实施例4.kras降解[0510]简言之，本公开提供了能够调节g12c突变体kras蛋白质的化合物。在一些情况下，化合物作为亲电试剂，能够与在突变体蛋白k-ras4bg12c/g12d/g12v-gtp/gdp、k-ras4bg13d-gtp/gdp、k-ras4bq61h-gtp/gdp的位置处的半胱氨酸残基形成共价键。还提供了使用此类化合物治疗各种疾病或病症(如癌症)的方法。另外的机制研究表明，化合物ab-rev-001可以在体外阻断三磷酸鸟苷(gtp)与kras复合物的形成。此外，ab-rev-001抑制kras下游信号传导途径raf/mek/erk和raf/pi3k/akt。[0511]实施例5.癌症干细胞抑制[0512]癌症干细胞(csc)被认为表现出独特的自我更新、增殖和分化能力，并因此在癌症的各个方面发挥重要作用。csc对不同类型恶性肿瘤的肿瘤进展、耐药性、复发和转移有重要影响。常规的癌症化疗经常失败，因为大多数抗癌药物对耐药csc无效。这些存活的csc导致复发和转移。大多数研究报告称，由于其低氧微环境和远离脉管系统的位置，常规治疗剂对csc的作用有限，这阻碍了抗csc药物的疗效(图14)。然而，所公开的化合物可以克服这种限制，并且可以渗透到更深的位置并破坏csc。因此，在实施方案中，本发明提供了抑制癌症干细胞存活和/或自我更新的方法，包括向癌症干细胞施用有效量的本文公开的化合物，例如化合物i(图13)。[0513]图17说明了csc中异常的信号转导途径和靶向csc的策略。csc的信号转导途径在自我更新、耐药性、肿瘤复发和远距离转移中起着重要作用。信号传导途径notch、wnt和hedgehog信号传导以及下游效应物，包括转录因子-连环蛋白(-cat)、信号转导因子和转录激活因子3(stat3)和nanog在csc特征中起关键作用。在与xct相互作用后，cd44变体(cd44v)增强了谷胱甘肽合成和防御活性氧簇(ros)的能力。由于这种异常状态，csc获得了独特的表型。根除csc的最佳方法是识别负责csc的特定特性的分子，而不是正常细胞的特定特性。靶csc表型包括：δ样配体(dll)、frizzled(fzd)、janus激酶(jak)、脂蛋白受体相关蛋白(lrp)、patched(ptch)、sonic hedgehog(shh)和smoothened(smo)。[0514]已经证明，本公开的化合物选择性地靶向肿瘤微环境中的癌症干细胞，并通过调节自我更新和分化的基因来破坏csc。本公开内容的化合物抑制下列癌症中基因的表达(图18)：[0515]乳腺癌：cd44+cd24-/低谱系-，aldh-1高[0516]肝癌：cd133+、cd49f+、cd90+[0517]结肠癌：cd133+、cd44+、cd166+、epcam+、cd24+[0518]胰腺癌：cd133+、cd44+、epcam+、cd24+[0519]白血病：cd34+cd38-[0520]肺癌：cd133+，abcg2高[0521]白血病：cd34+、cd38-、hla-、dr-、cd71-、cd90-、cd117-、cd123+[0522]干细胞表面标志物表达的减少在1小时内和最多15小时内可见。与其他标准药物相比，在治疗24小时后没有观察到癌症干细胞标志物。[0523]实施例6：用化合物i进行的体外癌症研究[0524]化疗是一种药物治疗，使用强大的化学物质杀死体内快速生长的细胞。然而，治疗表现出不利的副作用，可能是简单的胃炎和脱发到严重的骨髓阻抑、心脏毒性等。就细胞毒性而言，研究了本发明化合物i与化疗药物组合的效果。如下文详述的，如果在治疗化疗药物之前用本发明的化合物i处理细胞，则化疗药物(例如，多西他赛、紫杉醇、帕唑巴尼(pazobanib)、恩度森(endoxon)、依托泊苷、阿霉素、达克罗霉素(dacromycin)、安维汀(avastin)、吉西他滨、顺铂和奥沙利铂)的细胞毒性显著降低。[0525]使用一组单独的人正常细胞系和与本发明化合物i的组合研究了抗癌剂的细胞毒性。通过mtt测定确定细胞毒性作用。使用以下细胞系：人表皮角质细胞(hacat)、人真皮成纤维细胞(hdf)、人骨髓间充质干细胞(hbmsc)、人正常肝细胞(thle2)、人心肌细胞(ac-16)、人肠上皮细胞(hiec-6)、人神经元细胞(shsy-5y)、人血管内皮细胞(huvec)、人肺上皮细胞(calu-3)、人肺纤维母细胞(mrc 5)。[0526]根据数据，在用不同浓度(1-500μm)的抗癌剂处理后，与对照相比，正常细胞显著减少(p＞0.05)，并观察到形态学变化。发现多柔比星、吉西他尼(gemicitanib)、5-fu、顺铂、来那度胺(lenolidamide)、伊立替康(irinotecan)、氯喹、羟氯喹、长春新碱和长春碱的ic50值分别为从12.90μm-40.50μm(图19a)。与阴性对照相比，在所有经处理的正常细胞系中观察到显著水平的细胞凋亡，这显示了其独特的特征特点。[0527]接下来，用抗癌剂结合本发明的化合物i处理细胞。在组合治疗后，观察到细胞生存力增加，并且没有观察到细胞变圆、颗粒化和细胞收缩的迹象，这表明用化合物i处理正常细胞降低了由抗癌剂诱导的毒性作用。发现与单独用抗癌剂处理相比，ic50有所增加。对所有细胞系中的平均处理显示ic50＞100μm，这显示了化合物i的细胞保护作用(图19b)。在组合研究中未观察到显著的细胞凋亡作用，表明化合物i降低了由化学治疗剂产生的细胞毒性。即使在最高浓度下，在正常细胞系中也未观察到显著的细胞毒性作用。[0528]实施例7：用化合物i进行的体内癌症研究[0529]转移研究[0530]体内研究表明，与标准药物治疗相比，在具有改善的治疗窗的异种移植裸小鼠模型中，肿瘤生长可以被阻抑。值得注意地，在6个月后的随访研究中没有观察到肿瘤的复发或再发。[0531]与其他标准药物相比，本公开的化合物在三阴性乳腺癌、胰腺癌模型、肝癌模型和结肠癌模型中显示出具有90％的tgi(肿瘤生长抑制)的体内功效，而没有任何死亡率生长抑制(图20)。[0532]此外，与吉西他滨和5-氟尿嘧啶治疗相比，本公开的化合物显著破坏了周围的ecm组织，导致静止增加、细胞凋亡、化学敏感性提高、侵入性降低、转移扩散和体内肿瘤体积和癌症进展减少6倍。[0533]当单次施用本公开的化合物与标准药物方案组合时，证明了进一步的抗癌效果，显示了对体内肿瘤复发的显著抑制。[0534]胰腺癌异种移植模型(panc-1)[0535]研究设计：根据图21a中描述的实验设计进行panc-1异种移植小鼠模型。在单独施用pbs(载体对照)、25mg/kg吉西他滨和10mg/kg化合物i后的30天内监测肿瘤体积。[0536]结果：如图21b所示，从第5至第30天，在用25mg/kg吉西他滨治疗的小鼠(n＝12)中，肿瘤体积稳步增加。相比之下，用10mg/kg化合物i治疗的小鼠在同一时期肿瘤体积减小。这一结果通过成像研究得到证实，显示在用化合物i治疗的小鼠中未检测到肿瘤(图21c)。[0537]将肿瘤体积的减小转换为用化合物i治疗的小鼠的存活率提高(图21d)。[0538]与标准药物比较[0539]与当前的治疗标准药物相比(以下表1)：瑞复美(revlimid)、安维汀(avastin)、赫塞汀(herceptin)、5-氟脲嘧啶和吉西他滨，本公开的化合物在减少肿瘤球的数量方面更有效50倍，并且在减少csc群体和预防肿瘤复发方面更有效100倍。[0540]与治疗iv期癌症的标准药物如瑞复美(100％死亡率)、安维汀(60％死亡率)、赫塞汀(60％死亡率)、5-氟脲嘧啶(70％死亡率)和吉西他滨(50％死亡率)相比，在重要器官中未观察到显著的毒性和死亡率。[0541]此外，当与标准药物组合施用时，本公开的化合物降低了死亡率并增强了对肿瘤细胞的敏感性，从而提高了治疗效果。[0542]表1：9种突破性小分子与标准药物[0543][0544]迁移基因和信号传导途径的下调[0545]与由于缺氧环境而表现出对csc的有限接近的标准药物相比，本文公开的化合物可以通过抑制转移前器官中的淋巴管生成和血管生成(vrgfr)来防止向肺和淋巴结的转移。[0546]不受任何特定理论的束缚，多酪氨酸激酶抑制剂可通过抑制激活的nf-κb、akt、erk2、tyk2和pkc来诱导细胞凋亡并阻抑癌细胞的侵袭。不受理论的束缚，这些化合物还通过抑制pi3k/akt/mtor信号传导途径来减弱迁移和侵入。不受任何特定理论的束缚，所述化合物经由erk1/2-、akt/nf-κb/mtor-和p38 mapk依赖性nf-κb信号传导途径有效地阻抑转移、血管生成和癌细胞侵入。[0547]上皮间质转化(emt)的调节[0548]本文公开的全部9种化合物抑制异种移植小鼠模型中的肿瘤生长，并调节间质和上皮标志物的表达。它们阻抑间质基因(如纤连蛋白、波形蛋白、n-钙黏蛋白、twist和snail)的表达，并且经由特异性靶向典范的wnt/β-连环蛋白/hedgehog、tgfβ/bmp-smad途径增加上皮基因(如闭塞和e-钙粘蛋白)的表达。[0549]免疫调节[0550]本公开的化合物增加了细胞毒性t细胞的数量和活性，并促进了巨噬细胞、nk细胞和dc的激活，这些细胞通过经由i类和ii类mhc分子捕获、内化、加工和呈递肿瘤抗原来促进apc向cd4+和cd8+的转化。[0551]用所述分子治疗的体内肿瘤进一步显示出减少的ecm沉积和受损的cd31+内皮细胞、α-sma+癌症相关的纤维母细胞以及f4/80+巨噬细胞的浸润，这表明治疗产生了阻抑性肿瘤微环境，这反过来阻抑了肿瘤生长、侵入和转移。[0552]实施例8：靶向肺癌症干细胞[0553]化合物i对靶向特定的肺癌干细胞具有显著效果，并诱导细胞凋亡和抑制转移，而不损害正常细胞，这有助于癌症疗法的治疗。化合物i是具有120种靶蛋白的口服生物可利用的多酪氨酸-激酶抑制剂，其诱导细胞凋亡并阻抑肺癌干细胞的侵入，而对正常细胞没有毒性。在整个研究期间，在施用后，在动物中没有观察到不适或任何心血管或呼吸障碍的迹象。[0554]实施例9：作为抑制剂ace-2和nsp15的本公开化合物[0555]目标：为确定本公开的化合物(例如，化合物i)是否是ace-2和nsp15的潜在抑制剂，所述ace-2和nsp15是负责病毒(如sars-cov-2)在人类细胞中进入和复制的蛋白质。[0556]背景：为感染人类宿主，病毒必须能够进入个体人类细胞。病毒利用宿主细胞机制产生它们自身的副本，然后溢出并传播到新的细胞。研究已经表明，sars-cov-2通过其刺突蛋白(s)和宿主细胞蛋白血管紧张素转换酶-2(ace-2，一种在细胞表面发现的跨膜酶)之间的相互作用附接于靶细胞。宿主细胞表面上的这种相互作用非常重要，因为它启动了感染过程(图22)。因此，调节ace-2生物活性的药物被认为是用于治疗这种病毒感染的潜在候选物。[0557]从严重急性呼吸综合征冠状病毒2(sars-cov-2)中鉴定出的另一种可能在病毒进展中起作用的蛋白质是nsp15(图22)。nsp15与sars-cov的早期爆发的蛋白质具有89％同一性。对sars-cov的分析显示，对nsp15的抑制可以减缓病毒复制。新绘制的蛋白质在冠状病毒中是保守的，并且在其生命周期和毒力中是必不可少的。最初，nsp15被认为直接参与病毒复制，但最近提出可能通过干扰宿主的免疫应答来帮助病毒复制。[0558]结果：为评估本公开的化合物靶向ace-2和nspl5的潜力，使用计算机模拟方法和分子对接进行了研究。从这些分析中发现化合物i与所有经测试的病毒蛋白具有高结合亲和力(图22-24)。具体地，图21显示了化合物i对ace-2结合位点的亲和力，这导致病毒和受体之间相互作用的破坏。还发现化合物i对nsp15结合位点具有亲和力，如图24a-c所示。[0559]总结：本公开提供了靶向介导sars-cov-2进入人类细胞的s-ace-2的小分子抑制剂。此外，本公开的化合物还靶向nsp15，其可以减缓病毒复制。因此，具有式1-4的化合物具有开发为抗covid-19的有效药物的潜力。[0560]实施例10：化合物i在vero细胞中的体外抗病毒活性[0561]研究设计：进行标准测定以测量化合物i对sars-cov-2的细胞毒性、病毒产率和感染率的影响(图25)。首先，在vero细胞上测试化合物i的细胞毒性。然后在不同浓度的化合物i的存在下，用sars-cov-2(图25a)以0.1pfu/个细胞的感染复数(moi)感染vero细胞，将dmso用作载体。经由定量实时rt-pcr(qrt-pcr)对细胞上清液中的病毒拷贝数进行定量来评估功效，并在感染(p.i.)后48h通过免疫荧光分析对病毒核蛋白(np)表达的可视化进行确认(图25c)。此外，在感染后，将细胞暴露于测试化合物以进一步评估其作为抗冠状病毒的预防和治疗的潜力。还评估了化合物i在肺上皮(calu-3)细胞系中的保护作用。[0562]抗病毒活性和细胞毒性：为测试化合物i的抗病毒活性，用sars-cov-2分离物以0.1的moi感染vero细胞2h(图25b)，随后添加不同浓度的化合物i(分别为0.001μm、0.01μm、1μm、3μm、5μm)。根据对从剂量-应答曲线获得的数据的评估，发现化合物i有效地显示出抗病毒活性，其中ic50为1μm(图25b，蓝线，代表对病毒的平均％抑制)，并且cc50为＞15μm(图25b，红线，代表药物的细胞毒性)。[0563]为进一步确定化合物i的有效性，将被sars-cov-2感染的细胞用化合物i的系列稀释液进行处理，并在感染后2h收集上清液和细胞沉淀用于实时rt-pcr(图25f-25h)。[0564]在24h，与载体dmso相比，在用化合物i处理的样品的上清液中存在的病毒rna(指示释放的病毒体)减少了100％。类似地，用化合物i治疗观察到细胞相关病毒rna减少99％(表示未释放和未包装的病毒体)。在36h，这种作用增加到化合物i治疗中病毒rna的减少，当与对照样品比较时，这显示出统计学显著性，表明化合物i治疗导致在36h时基本上所有病毒物质的有效损失。[0565]在48h，在用1μm化合物i处理的样品的上清液和细胞沉淀中都观察到病毒rna的减少，相当于与对照样品相比，这些样品中的病毒rna减少了99％。同样，用在任何测试浓度下的化合物i都没有观察到毒性。[0566]在用化合物i处理后，进行经病毒感染的细胞的免疫荧光显微术。具体地，用sars-cov-2以0.1的moi感染vero细胞，并且用1μm和1μm的化合物i治疗。在48h p.i.后，将经感染的细胞固定，并然后分别用抗sars相关cov的np的兔血清作为第一抗体和alexa 488标记的山羊抗兔igg作为第二抗体进行探测。将细胞核用hoechst染料染色。标尺，20μm。染色结果显示，在用任一剂量的化合物i处理的vero细胞中，通过核蛋白表达测量的病毒载量显著降低(图25c)。通过对24h p.i.后的感染细胞的蛋白质印迹分析证实了这些结果(图25d)并且通过归一化为gapdh进行量化(图25e)。[0567]实施例11：化合物i在肺上皮细胞中的体外活性[0568]在calu-3培养物中再次评估化合物i对sars-cov-2的抗病毒活性。在0.1-5μm处观察到在复制接近中的剂量依赖性减少，并且如与未经处理的对照相比其中平均ic50值为0.01μm(sars-cov-2)。为确定化合物i是否能够抑制复制，我们首先在连续的人肺上皮细胞系calu-3细胞中评估了抗病毒活性和细胞毒性。化合物i抑制了细胞中的sars-cov-2复制，其中平均半最大有效浓度(ic50)值为1.5μm(图25b)。重要地，我们在高达100μm的浓度下没有观察到任何细胞毒性，因此证明化合物i在calu-3细胞中的50％细胞毒性浓度(即cc50)超过100μm。综上所述，这些结果表明在肺上皮细胞中在低微摩尔浓度下将实现对sars-cov-2复制的实质性抑制。[0569]实施例12：化合物i对病毒感染阶段的影响[0570]假设化合物i将通过抑制病毒rna合成来抑制早期复制的sars-cov-2。为测验中这一假设并确定化合物i在病毒复制周期的哪个阶段抑制sars-cov-2，用0.1pfu/个细胞的感染复数(moi)感染vero细胞，导致单周期感染，并从感染前2h至感染后10h以2h的间隔用1μm化合物i处理它们。当在感染前2h和感染后2h之间添加化合物i时，观察到最大的抑制作用。当在感染后6和8h之间添加化合物i时，检测到较少的抑制，并且当在感染后10h后添加化合物i时，没有观察到抑制。这些结果证明化合物i在感染的早期抑制sars-cov-2。因为病毒rna在感染早期合成，并且化合物i与抑制病毒rna合成有关，所以在用化合物i处理后，接下来通过实时定量pcr(qpcr)测定病毒rna的细胞水平。用浓度增加的化合物i处理导致病毒rna水平降低，观察到与滴度降低相关。这些结果表明化合物i通过干扰病毒rna复制抑制感染后早期的sars-cov-2。[0571]在人肺上皮细胞(calu-3细胞系)的正常上皮细胞sars-cov-2感染模型中，研究了化合物i以观察其是否还能够抑制人细胞中的sars-cov-2复制。这些结果表明，化合物i能够在与vero细胞中相同的浓度下抑制sars-cov-2复制(ic 50 10μm化合物i经处理细胞＝＜102tcid50/ml)，表明化合物i的抗病毒活性不依赖于细胞的类型(图26a)。至于其他冠状病毒，sars-cov基因组的表达是由基因组rna和一组“嵌套”亚基因组信使rna的翻译介导的，这是由rna合成过程中涉及不连续转录的独特机制产生的。为确定在sars cov-2的情况下，化合物i是否通过阻断病毒rna合成起作用，在病毒吸附期后不久，用sars-cov-2感染calu-3细胞，并用不同浓度(1.5和10μm)的化合物i处理。在p.i.后24h提取总rna，并通过rt-pcr进行分析。如图26b所示，化合物i处理导致细胞内sars-cov-2 rna水平剂量依赖性降低，在不影响未经感染的细胞中rna合成的化合物i浓度下，达到超过对照的95％的抑制。在澄清的上清液中通过定量逆转录聚合酶链反应(qrt-pcr)对病毒基因组rna定量。像对感染滴度的影响一样，在病毒基因组rna中发现了剂量依赖性的减少，并且类似地计算出ic50为5μm。总的来说，这些数据证明化合物i对两种遗传上不同的新出现的cov具有有效的抗病毒作用。[0572]实施例13：本公开化合物的免疫应答[0573]化合物i具有激活cd4+辅助性t细胞和cd8+细胞毒性t细胞的能力，并在体内产生免疫应答以防御病毒感染。具体地，化合物i增加了细胞毒性t细胞的数量和活性，并促进了巨噬细胞nk细胞和dc的激活，这些细胞经由i和ii类mhc分子通过对抗原的捕获、内化、加工和呈递，促进apc向cd4+和cd8+的转化。[0574]实施例14：提出的在肺中的作用机制[0575]在异种移植4期转移的乳腺癌动物模型中，化合物i减少了细胞因子(肿瘤坏死因子α[tnf-α]和白细胞介素-6[il-6])和趋化因子(cxcl10、ccl2、ccl3、ccl5)的产生，并且与天然杀伤细胞和巨噬细胞的迁移相关，并且在肺中观察到。从qpcr基因表达研究收集的数据来看，在第7天，组织病理学证据显示正常肺病理学，没有观察到任何肺炎，并且在肺中检测到细胞因子细胞因子(tnf-α、il-6、γ干扰素[ifn-γ]、il-2和il-5)、趋化因子(cxcl9、cxcl10、ccl2、ccl3和ccl5)和受体(cxcr3、ccr2和ccr5)的表达降低，这与t淋巴细胞的流入相关。没有观察到以细支气管炎、间质性肺炎、弥漫性肺泡损伤和纤维化疤痕为特征的临床疾病和疾病的组织病理学证据的迹象。[0576]实施例15：通过减少covid-19治疗中的副作用来增强羟氯喹[0577]冠状病毒疾病(covid-19)是由病毒sars-cov-2引起的传染性疾病。这种疾病导致呼吸道疾病，其中症状包括咳嗽、发烧，并且在更严重的情况下，呼吸困难。目前，一种可能在治疗covid-19中有效的药物是羟氯喹。然而，羟氯喹药物会导致严重的副作用，包括心血管疾病、眼损伤、轻度或重度支气管痉挛，并且还会影响精神健康。根据本领域已知的方法研究了本发明化合物i在减少与羟氯喹相关的副作用方面的效果。发现本发明的化合物i通过减少covid-19治疗中的副作用而有助于增强羟氯喹(图20和21)。[0578]实施例16：药代动力学(pk)、组织分布和毒性[0579]在裸小鼠模型中研究了化合物i在体内的药代动力学和毒性[0580]pk研究：[0581]数据分析显示，在整个6h取样期间，化合物i的平均血浆浓度显著高于对照组。在静脉施用后，化合物i广泛分布于若干组织中，包括海马体、心脏、肺、胃、肝、乳腺、肾、脾、股骨和胫骨(图27a-27b)。如与对照组相比，治疗组的最大血浆浓度(cmax)增加29倍，并且曲线下面积(auc)增加28倍(p＞0.05)。[0582]值得注意地，化合物i广泛分布于若干器官中，并且尤其是那些具有高孔隙率的器官，这与其在这些器官中的药效动力学活性一致。此外，当与对照相比时，发现在iv给药后化合物i的分布体积显著，这意味着良好的组织分布。当前研究中的组织分布显示，在10mg/kg iv时化合物i在海马体、股骨、胫骨和乳腺中达到适当的药效动力学活性水平，这与神经退行性疾病和其他慢性疾病的预防和治疗目标相关(图27b)。未观察到毒性。[0583]在施用后1h、2h、4h、24h，在动物中记录化合物i的组织与血浆的比率。在60min时，在肺、脑、胃、肝、乳腺和小肠中发现最高水平的化合物i，所有这些器官都是高度灌注的器官，其次是脾和心脏。直到72h，在大多数器官中检测到化合物i，但在股骨和肾中未检测到。大多数器官中的比率持续增加至4h。有趣地，从给药后1、2和24小时开始，海马体和脑中化合物i的组织与血浆比率显著且持续增加。在在施用后和在整个研究期间，在动物中没有观察到不适或任何心血管或呼吸障碍的迹象。在药物施用后的7天时间里，所监测的体重没有变化。[0584]pk结果：用本文公开的化合物进行的药代动力学研究揭示了在全身血液循环中的延长的持久性，并且与显示了严重的心脏毒性、肝毒性、胃肠毒性和呼吸障碍的其他标准药物相比，没有观察到肾毒性、心脏毒性和肝毒性。[0585]总结：当与标准药物施用相比时，本公开的新颖分子显示出增强的药代动力学、生物分布和耐受性。体内生物分布研究显示，在动物模型的肿瘤中，新颖分子的累积显著高于所分析的其他器官(p＜0.01)。[0586]急性口服毒性研究：[0587]实验设计：根据经济合作与发展组织(oecd)指南423(oecd，2001a)进行急性毒性测定。将体重在27和37g之间的总共60只小鼠随机分成六个实验组，每组10只小鼠(每组5只雄性和5只雌性)。禁食过夜后，向每个治疗组分别按200mg/kg、500mg/kg、1000mg/kg、2000mg/kg的单剂量通过口服管饲法施用化合物i。用相同体积的蒸馏水处理对照组。给药后，在最初的30min，内，然后在治疗后的2h、4h、6h、10h和24h，分别观察所有动物的死亡率和一般行为的变化。在施用不同剂量后，评估毒性症状，例如活动减退、毛发竖立、呼吸困难、震颤和惊厥。根据由oecd指南423(oecd，2001a)所述的方法确定ld 50值。在剩余的实验期间，在14天的给药后期间，每天至少进行一次动物观察。在治疗开始时以及施用后的第4天、第7天、第11天和第14天测量体重。在第14天，在麻醉状态下处死小鼠，并且取出重要器官(心脏、肾、肺、脾和肝)用于肉眼检查。[0588]亚毒性研究：[0589]实验设计：根据测验化学品的oecd测验指南408(oecd，2008)进行亚慢性毒性研究。将体重在170和240g之间的总共48只雄性和雌性wister大鼠随机分成四组(n＝6只雄性和6只雌性/组)。治疗组的大鼠按200mg/kg/天、500mg/kg/天、1000mg/kg/天和2000mg/kg/天的剂量口服接受化合物i。将化合物i通过口服管饲法按10ml/kg体重，基于每天，持续28天施用。用相同体积的蒸馏水(载体)口服施用对照组的大鼠。在实验期间，每周测量一次所有组的体重。还目测观察动物的死亡率、行为模式的变化、身体外观的变化和疾病症状。在治疗期结束时，将所有大鼠禁食过夜(12h-16h)，并然后用乌拉坦通过腹膜内注射(1ml/100g体重)麻醉。采集血样用于血液学(edta-2k涂覆的试管)和生化(干燥的试管)参数的测量。安乐死后，处死大鼠，并且取出器官进行尸检、器官重量测量和组织病理学检查。[0590]尿液分析：在治疗期的最后一周，在所有大鼠组中进行尿检。整夜从所有动物收集新鲜尿液，以确定比重、ph、白细胞、亚硝酸盐、蛋白质、葡萄糖、酮、血液、尿胆素原和胆红素的水平。使用自动化尿液分析仪和测试条分析尿液样品。[0591]血液学和血清生物化学：对于血液学研究，所有动物禁食过夜，但允许随意饮水。然后将大鼠麻醉，并且从腹主动脉收集血样。将全血收集在edta试管中(含有乙二胺四乙酸的钾盐)，并立即处理用于血液学分析。测量的参数是红血细胞计数(rbc)、血细胞比容(hct)、血红蛋白(hgb)、平均红细胞体积(mcv)、平均红细胞血红蛋白浓度(mchc)、平均红细胞血红蛋白(mch)、白血细胞计数(wbc)、中性粒细胞(neu)、嗜酸性粒细胞(eos)、嗜碱性粒细胞(baso)、淋巴细胞(lym)和单核细胞(mono)。使用自动化血液分析仪进行血液分析。为测量生化参数，将含有经收集的血液的干燥试管在5℃下以3000rpm离心15min以获得血清。使用自动化生化分析仪分析血清样品。临床生化参数包括：血清总蛋白(tp)、白蛋白(alb)、总胆红素(t-bil)、碱性磷酸酶(alp)、丙氨酸氨基转移酶(alt)、天冬氨酸氨基转移酶(ast)、尿酸(uric)、尿素(urea)、肌酸酐(crea)、低密度脂蛋白-胆固醇(ldl-c)、高密度脂蛋白-胆固醇(hdl-c)、总胆固醇(tc)、甘油三酯(tg)和葡萄糖(glu)。还测定了血清电解质，如钙(ca2+)、钠(na+)、钾(k+)和氯(cl-)。[0592]尸检和器官重量：对所有大鼠组进行总体尸检，包括检查胸部器官、外表面器官和所有内部器官。对重要器官进行了仔细的肉眼检查，以发现任何类型的异常。此后，通过手术取出各种器官(包括心脏、肝、肾、胃、肺、脾、肾上腺、胸腺、附睾、睾丸、子宫和卵巢)，用冰冷的盐水溶液清洗，放在吸水纸上，然后称重(以克计的绝对器官重量)。然后将每只动物的相对器官重量(row)计算如下：row＝[绝对器官重量(g)÷处死日的大鼠体重(g)]×100。[0593]组织病理性：取出主要器官(肺、心脏、肝、肾)和生殖器官(睾丸和卵巢)进行组织病理学检查。测量重量后，将器官快速固定在10％缓冲的福尔马林(ph 7.4)中。固定后，将组织标本在分级系列的乙醇(70％-100％)中脱水，在甲苯中清洗，并且最后用石蜡包裹。此后，使用切片机(leica)制备5μm薄切片，并在显微镜检查前用苏木精和伊红(h&e)染色。将处理组的器官的显微特征与对照组进行比较，并记录显微照片。[0594]统计分析：所有数据均表示为平均值±标准偏差(sd)。通过单向方差分析(anova)确定对照组和处理组之间的统计显著性，随后进行dunnett事后检验。将针对windows的graph pad prism 6.0版用于统计分析。分开进行来自雄性组合雌性组的数据分析，并且差异被认为在p＜0.05时具有统计学显著性。[0595]毒性结果：[0596]一般迹象和行为分析[0597]■临床迹象和症状是监测药物对器官的毒性作用的重要观察指标(jothy等人.，2011)。在我们目前的研究中，在化合物i的特定口服剂量的急性和亚急性毒性研究中，在两种性别的动物中没有观察到与治疗相关的死亡。[0598]■在14天(急性)和28天(亚急性)观察期，动物在身体行为、食物和水消耗方面没有表现出任何不利变化。[0599]■在两组(急性和亚急性毒性)的所有动物中均未观察到明显或肉眼可见的异常。因此，药物的半数致死剂量(ld50)可被视为大于2,000mg/kg。[0600]■根据全球统一分类系统(ghs)，具有ld50＞2,000mg的物质被认为是相对安全的(miyagawa，2010)。因此，根据ghs，化合物i可被分为第5类。[0601]化合物i对体重和器官重量的影响(图28a-28e)[0602]■暴露于具有潜在毒性的药物将导致大鼠体重增加急剧下降(teo等人.，2002)。体重和相对器官重量的变化是实验动物毒性和健康评估的指标(piao等人.，2013)。[0603]■对照组和治疗组大鼠的体重如图28d-28e所示。在本研究中，在每个剂量组中的所有大鼠在实验期间都表现出持续的体重增加，这表明化合物i在急性和亚急性毒性组中没有引起任何对体重的有害影响。[0604]■此外，在治疗组和对照组之间比较的体重增加的百分比中没有显著差异。[0605]相对器官重量(row)[0606]■显示了两种测验的肝、脑、肾、心脏、脾的相对器官重量(row)。当针对对照组进行评估时，对照组和治疗组的row之间的差异具有统计学意义。[0607]■在所有器官中没有观察到显著变化，因此可以确定化合物i的施用没有对重要器官产生任何副作用。[0608]化合物i对食物和水摄入的影响。[0609]■图描绘了在亚急性治疗中化合物i对食物和水摄入的影响。[0610]■当与对照组相比时，化合物i按研究剂量每日单次施用28d导致食物和水摄入方面没有显著变化(p＞0.05)。[0611]化合物i对血液学参数的影响(图28f-28i)。[0612]■血液学参数在确定由药物诱导的毒性方面起着至关重要的作用(petterino和argentino-storino，2006)。当数据来自对实验室动物的实验时，血液参数的改变具有对人类安全性评估的更好的预测性评价(olson等人.，2000)。血液学参数的评估对于确定个体的健康状况非常重要。[0613]■rbc、wbc、pcv、mch和mchc的参考值分别为7-10×10^6/μl、6-18×10^3/μl、35％-64％、14.3-19.5pg和26.2-40g/dl。在目前的研究中，当与对照组相比时，两组(急性和亚急性毒性研究)的血液学参数的平均值(如治疗组的wbc、rbc、pcv和血红蛋白)没有显著变化(loha等人.，2019)。[0614]■这一结果表明，化合物i可能不具有任何可导致像贫血或其他异常的病症的有毒物质。[0615]■wbc释放的增加是压力的明显生物标志物，并且也有助于保护身体对抗一些炎症状况，如细菌感染、白血病和大出血。[0616]■从该研究中获得的结果表明，相对于对照组，化合物i在任何剂量下都没有引起wbc计数水平或其亚型(包括嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞和嗜酸性粒细胞)中的任何显著变化。这表明化合物i是无毒的。[0617]化合物i对生化参数的影响(图28l-28q)[0618]■生化评价对于评价药物对肝和肾功能的安全性至关重要。关于对照组和治疗组的生化参数的数据呈现在图28l-28q。在本研究中，急性和亚急性研究组的所有经测量的生化参数未显示任何显著变化。[0619]■在目前的工作中，通过测量氨基转移酶(alat和asat)的酶活性来评估化合物i的潜在肝毒性-参见图28l-28m。[0620]■氨基转移酶活性(alat and asat)的异常升高可能经常涉及肝毒性[fortson等人.，1985]。[0621]■结果表明，当与对照组相比时，具有达到最高剂量(2000mg/kg体重)的治疗组的生化参数没有受到直接影响(p＞0.05)。[0622]■这些发现与急性毒性的发现一致，所述急性毒性显示在用类似剂量治疗的小鼠中没有出现临床症状或行为变化。[0623]■然而，当与对照组相比时，对治疗组的氨基转移酶活性没有影响(p＞0.05)。[0624]■在动物的两种性别中，在200mg/kg、500mg/kg、1000mg/kg和2000mg/kg的剂量下，ast、alt、alp活性的血浆水平变化不显著，这清楚地表明化合物i没有对肝造成损害。[0625]肾功能测试(图28j-28k)[0626]■还通过测量尿素和肌酸酐浓度来评估肾功能的由药物诱导的潜在毒性作用，因为这些参数的任何显著变化都可能涉及诱导性肾毒性[mukinda等人.，2010；gnanamani，a等人.，2008]。[0627]■肌酸酐、电解质、尿素和尿酸在体内的滞留是肾损害的指标。一些电解质(如na+、k+、cl-和mg2+)水平的变化还可以是肾损伤的迹象。[0628]■我们的发现显示，当与对照组相比时，在大鼠的两种性别中，在所有剂量下，肌酸酐、电解质、尿素或尿酸的水平没有显著差异，并且化合物i对血清电解质(na+、ca2+、mg2+和c1-)也没有影响。(图28j-28k)。[0629]■此外，当与对照组相比时，总蛋白、白蛋白、结合胆红素和胆红素的水平没有显著差异。[0630]■这为化合物i在这些剂量下的安全性提供了进一步的支持，因为肾功能没有改变。[0631]组织病理学研究(图29a-29b)[0632]■在治疗期的最后一天，对雄性和雌性大鼠的肝、肾、胰腺、心脏、肺、胃和生殖器官的器官样品进行组织病理学分析，并且将这些组织中的一些的结果制表在图29a-29b。[0633]肝癌：[0634]■在化合物i治疗组中，雄性的肝的多个切片显示正常的肝细胞以及正常的门脉三联管、窦状隙和中央静脉系统。[0635]■来自治疗组的雌性大鼠肝的切片显示几乎正常的细胞结构和正常的肝细胞。还存在正常外观的门脉三联管，包括肝门静脉、小叶间胆管和肝动脉分支。来自对照组的雄性和雌性大鼠的肝切片显示正常的肝结构。[0636]肾：[0637]■从治疗组的雄性和雌性大鼠的肾活检中取出的多个切片显示肾小球、小管、肠和血泡的几乎正常的大小和形状。[0638]■对于化合物i治疗组没有急性肾小管坏死和肾小球变化的有力证据。对照组雄性和雌性大鼠的肾活检切片显示正常的结果。[0639]胰腺(未显示)：[0640]■在对照处理组中，雄性和雌性大鼠胰腺的切片显示正常的结构，而在化合物i治疗组中，在胰腺腺泡和胰岛的结构中几乎没有观察到异常。[0641]心脏：[0642]■取自雄性和雌性大鼠的心脏切片在对照处理组的大鼠以及化合物i治疗的大鼠中显示正常，然而在雄性大鼠中没有观察到显著变化。[0643]肺(未显示)：[0644]■在雄性和雌性大鼠中，在对照处理组中，肺的多个切片显示正常的细胞结构、肺泡和淋巴管。在化合物i处理组中，雄性和雌性大鼠中均为观察到淋巴细胞性浸润。[0645]胃(未显示)[0646]■在对照处理组中，来自两种性别的大鼠的胃切片显示正常结果。在化合物i治疗组中，雌性大鼠显示正常的细胞结构，具有正常的粘膜、粘膜下层、外肌层和浆膜，而雄性大鼠显示正常的细胞结构，没有观察到息肉形成或增生性变化。[0647]生殖器官(未显示)[0648]对于对照组和化合物i治疗组，生殖器官(即雄性的睾丸和雌性的卵巢)的切片显示正常的病理学。[0649]实施例17：在施用化合物i后covid-19患者的预期康复[0650]剂量：po施用250mg化合物i，b.i.d.，经7天[0651]第01天：[0652]口服生物可利用的药物化合物i在肠内被吸收并分布于全身。它靶向sars-cov-2病毒入口，抑制复制和蛋白水解过程，并关闭病毒进入宿主细胞的蛋白质生产机制。[0653]第02天：[0654]化合物i通过充当免疫调节剂、增加抗炎性细胞因子和干扰素的产生、并抑制靶向抗病毒感染的宿主细胞中的溶酶体活性，来刺激机体自身的免疫系统。循环il-6升高的水平将会降低，这与受控水平的肺弹性和防御更严重的支气管肺泡炎症相关。[0655]第03天：[0656]诱导的免疫应答抑制了进一步的病毒复制，促进病毒从呼吸道的清除，诱导组织修复，并引发了针对病毒的延长的适应性免疫应答，从而减缓疾病的进展。治疗后，外周淋巴细胞将会增加，c反应蛋白减少，并且过度激活的分泌细胞因子的免疫细胞(cxcr3+cd4+t细胞、cxcr3+cd8+t细胞、cxcr3+nk细胞)将在3-5天内减少，从而减少由sars-cov-2诱导的细胞因子风暴。[0657]第04-06天：[0658]总的来说，用化合物i的治疗抑制了侵入呼吸道粘膜和感染其他细胞的sars-cov-2病毒颗粒，这反过来触发了一系列免疫应答和体内细胞因子风暴的产生，这可能与covid-19患者的危急状况相关。在施用化合物i后，患者的肺功能和症状将在4-5天内得到改善，并且可以减轻由对sars-cov-2的过度免疫应答引起的肺损伤。[0659]总结[0660]化合物i对类似冠状病毒(如sars-cov)的许多关键蛋白已经显示出显著的抑制作用(图22)。该化合物抑制病毒酶(包括蛋白酶ace-2受体和病毒复制蛋白nsp15)，从而大大减少宿主细胞内病毒的感染和复制。对小鼠的体内研究进一步表明，对正常细胞没有毒性，并且在施用9个月后动物的健康、正常功能没有疾病复发。不受理论的束缚，据信本发明的分子具有激活cd4+辅助性t细胞和cd8+细胞毒性t细胞的能力，并在体内产生免疫应答以防御病毒感染。[0661]此外，在直接暴露于化合物i时观察到sars-cov-2的剂量依赖性失活，并且在1μm时达到50％的减少(ic50)。总之，这些数据支持进一步开发用于治疗cov的化合物i，并提出了化合物i与cov复制复合物相互作用的新机制，这可能阐明复制的关键方面。如上所解释的，药代动力学研究调查了在口服施用或静脉注射后不同时间间隔的化合物i的浓度。在组织分布中，发现化合物i主要集中在心脏、肺、肝脏和其他器官中。在胃肠道中，大量的化合物i积累在胃中，这意味着化合物i可以通过胃组织吸收并分布到全身。此外，少于2％的化合物i在尿液或粪便中排泄，表明大约98％的化合物i被吸收或分布到重要器官。总之，我们目前的发现将提供对化合物i体内生物作用的更完整理解。[0662]根据上文，可以理解，出于说明的目的，本文已经描述了本公开的各种实施方案，并且在不脱离本公开的范围和精神的情况下，可以做出各种修改。因此，本文公开的各种实施例不旨在是限制性的，其中真实的范围和精神由所附权利要求指示。









图片声明：本站部分配图来自人工智能系统AI生成,觅知网授权图片,PxHere摄影无版权图库。本站只作为美观性配图使用,无任何非法侵犯第三方意图,一切解释权归图片著作权方,本站不承担任何责任。如有恶意碰瓷者,必当奉陪到底严惩不贷!




内容声明：本文中引用的各种信息及资料（包括但不限于文字、数据、图表及超链接等）均来源于该信息及资料的相关主体（包括但不限于公司、媒体、协会等机构）的官方网站或公开发表的信息。部分内容参考包括:(百度百科,百度知道,头条百科,中国民法典,刑法,牛津词典,新华词典,汉语词典,国家院校,科普平台)等数据,内容仅供参考使用,不准确地方联系删除处理！本站为非盈利性质站点,发布内容不收取任何费用也不接任何广告!




免责声明：我们致力于保护作者版权，注重分享，被刊用文章因无法核实真实出处，未能及时与作者取得联系，或有版权异议的，请联系管理员，我们会立即处理，本文部分文字与图片资源来自于网络，部分文章是来自自研大数据AI进行生成,内容摘自(百度百科,百度知道,头条百科,中国民法典,刑法,牛津词典,新华词典,汉语词典,国家院校,科普平台)等数据,内容仅供学习参考,不准确地方联系删除处理!的,若有来源标注错误或侵犯了您的合法权益，请立即通知我们，情况属实，我们会第一时间予以删除，并同时向您表示歉意,谢谢!