用于预防和治疗非洲猪瘟病毒科的病毒感染的组合物的制作方法

食品,饮料机械,设备的制造及其制品加工制作,储藏技术1.本发明总体上涉及用于预防和治疗非洲猪瘟病毒科的病毒感染的方法的领域，所述非洲猪瘟病毒科例如非洲猪瘟病毒(asfv)。背景技术：2.近年来，几种病毒的爆发已经挑战了农业行业，例如世界范围的猪产业。在2015年，猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea，ped)震惊了行业，现在非洲猪瘟(asf)正在改变全球猪生产图景。非洲猪瘟病毒(asfv)是一种传染性的、快速传播的、跨边界的动物疾病，并且是对猪肉生产的全球性的主要威胁。处理这类威胁需要各种各样的手段，包括生物安全性测量、兽医预防措施、营养适配和饲料安全性测量，以阻止疾病传播。3.来自先前的外来动物疾病爆发的学习已经将焦点从诊断和治疗转向预防和控制。将病原体拒之门外是有效的农场中生物安全程序的第一步。然而，在生物安全计划中经常被忽视的方面是饲料和饲料成分的作用。特别地，已知饲料可携带对动物健康和安康有害的病原体。因此，正在增加的担忧的一个实例是病毒颗粒经由饲料的传播。为此，通常使用诸如甲醛等消毒产品来对饲料进行消毒。4.wo2019169256描述了对抗非洲猪瘟病毒或经典猪瘟病毒的化学缓解剂。wo2009150281和cn106234770讨论了使用共轭脂肪酸在动物中对抗病毒感染。5.尽管有这些已提出的解决方案，但行业迄今为止缺乏足够的方法来防止病毒颗粒的传播，并因此防止由非洲猪瘟病毒科引起的病毒感染。本发明旨在提供一种用于治疗和预防非洲猪瘟病毒科的病毒感染(例如非洲猪瘟)的解决方案。技术实现要素：6.本发明旨在提供根据权利要求1所述的应用于治疗、抑制和/或预防非洲猪瘟(asf)的组合物。更具体地，本发明提供包含一种或多种中链脂肪酸(mcfa)和/或其衍生物的组合物。优选实施方式在权利要求2至17中示出。7.本发明的另一个方面涉及根据权利要求18所述的应用于治疗、抑制和/或预防非洲猪瘟病毒科的病毒感染的饲料或饮用水。8.另外的方面分别涉及根据权利要求20所述的mcfa和/或其衍生物在制备药物中的应用，以及根据权利要求21所述的抑制动物饲料或饮用水中的非洲猪瘟病毒科的病毒的方法。9.本发明的另一个方面涉及根据权利要求31所述的降低动物饲料或饮用水中的非洲猪瘟病毒的病毒滴度的方法。附图说明10.图1显示了与支持在动物饲料中非洲猪瘟病毒(asfv)对中链脂肪酸(mcfa)的易感性的数据相关的图。11.图2示出了与支持在动物饮用水中非洲猪瘟病毒(asfv)对中链脂肪酸(mcfa)的易感性的数据相关的图。具体实施方式12.本发明涉及一种组合物，例如饲料添加剂，其用于预防、抑制和/或治疗非洲猪瘟病毒科(asfarviridae)，优选非洲猪瘟。特别地，所述组合物包含一种或多种中链脂肪酸(mcfa)和/或其衍生物。13.除非另有定义，否则用于公开本发明的所有术语(包括技术和科学术语)具有本发明所属领域的普通技术人员通常理解的含义。借助于进一步的指导，包括术语定义以更好地理解本发明的教导。14.如本文所用，以下术语具有以下含义：15.如本文所用，“一个”、“一种”和“所述”是指单数和复数指示物，除非上下文另有明确说明。举例而言，“一个隔室”是指一个或多于一个隔室。16.如本文所用，涉及诸如参数、量、持续时间等可测量值的“约”意味着涵盖+/-20％以下、优选地+/-10％以下、更优选地+/-5％以下、甚至更优选地+/-1％以下、并且还更优选地+/-0.1％以下的变化加上指定值，在这个范围内，这种变化适于在所公开的发明中执行。然而，应当理解，修饰语“约”所涉及的值本身也被具体公开。17.如本文所用，“包含(comprise,comprising,comprises,comprised of)”与“包含(include,including,includes)”或“含有(contain,containing,contains)”同义，并且是包含或开放式的术语，其规定存在后接的术语(例如组件)，并且不排除或排斥存在附加的、未记载的组件、特征、元件、部件、步骤，它们在本领域中是已知的或在其中公开的。18.端点对数值范围的叙述包括该范围内所包含的所有数字和分数，以及所叙述的端点。19.除非另外定义，否则表达“重量％”、“重量百分比”、“％重量”或“重量％”在本文和整个说明书中是指基于制剂的总重量的相应组分的相对重量。20.如本文所用，术语“中链脂肪酸”或“mcfa”是指具有中链长度的脂肪酸，其中脂肪酸可以是饱和的或不饱和的。在本发明中，mcfa的最长连续链可以由5至12个碳原子组成，例如戊酸(c5)、己酸(c6)、辛酸(c8)、壬酸(9)、癸酸(c10)或月桂酸(c12)。术语mcfa还指化学改性的中链脂肪酸，和提供有侧链的中链脂肪酸，所述侧链例如但不限于一个或多个烷基，优选c1-c10烷基。如本文所述，术语“中链脂肪酸(mcfa)衍生物”是指其中羧基可逆地转化为不同基团的脂肪酸链，优选但不限于酰胺、盐、酯或甘油酯(例如，单甘油酯、二甘油酯或三甘油酯)。21.出于本发明的目的，术语“非洲猪瘟病毒科(asfarviridae)”是指主要感染昆虫和哺乳动物(例如猪)的双链dna病毒家族。22.如本文所用，术语“非洲猪瘟”是指由非洲猪瘟病毒(asfv)引起的传染病，该病毒是属于非洲猪瘟病毒科的dna病毒。存在至少22种爆发能够溯源的类型。它对腐败和阳光非常有抵抗力，并且可以在冷冻肉和屠体中持续长达6个月，并且在冷冻时长得多。感染通常通过来自受感染的排出物的气溶胶和粪便、通过软蜱叮咬、虱子和苍蝇叮咬从猪到猪传播，以及通过从受污染的注射器直接接种而传播。感染也可以在受污染的器具上和运输过程中传播。病毒可以在载体猪中、在感染的建筑物上存活，并且在感染的钝缘蜱属(ornithodorus)蜱中可存活至多4年。非洲猪瘟是高度传染性的，并且感染快速地传播通过单元，其中在感染后4至5天开始发烧的临床征兆，并且导致发烧伴随迟钝、呼吸困难、呕吐、咳嗽、鼻和眼分泌物、怀孕母猪流产、四肢发绀和7天内死亡。23.术语“饲料转化率”或“fcr”描述动物将饲料转化为期望的输出的效率。对于肉用饲养的动物(例如肉牛、猪、鸡和鱼)，输出是肉，即动物获得的体重，以动物的最终质量或加工后的输出质量表示。24.如本文所用，术语“抗病毒体外测定”是指适于确定抗病毒物质、化合物或组合物对所选病毒或病毒科的潜在功效的任何方法。已知的方法包括tcid50测定、ec50/cc50测定、噬斑测定、hai(血凝抑制)测定和elisa/luminex。25.细胞病变效应或致细胞病变效应(缩写为cpe)应理解为由病毒侵入引起的宿主细胞中的结构变化。感染病毒引起宿主细胞的裂解或没有由于不能繁殖而引起的裂解时细胞死亡。这两种效应都由于cpe而发生。如果病毒引起宿主细胞中的这些形态学变化，则认为是细胞病变性的。cpe的常见实例包括感染细胞的圆化、与相邻细胞的融合以形成合胞体，以及核或细胞质包涵体的出现。细胞形态的cpe和其它变化仅是杀细胞性病毒的许多影响中的几个。当杀细胞性病毒感染容许细胞时，病毒通过细胞形态、细胞生理学和随后的生物合成事件的变化杀死宿主细胞。这些变化对于有效的病毒复制是必要的，但以宿主细胞为代价。26.在第一方面，本发明提供一种应用于治疗、抑制和/或预防非洲猪瘟病毒科、优选非洲猪瘟的组合物，其中，所述组合物包含一种或多种中链脂肪酸(mcfa)或其衍生物。mcfa是具有中链长度的脂肪酸，其中脂肪酸可以是饱和的或不饱和的。根据本发明，mcfa的最长连续链由5至12个碳原子(c5至c12)组成。使用mcfa作为抗菌剂已被广泛描述。此外，其抗病毒感染的用途也已有记载。在猪中，mcfa被认为具有抗病毒病原体的活性，所述病毒性病原体例如为猪流行性腹泻病毒(pedv)、猪繁殖和呼吸综合征病毒(prrsv)和塞尼卡谷病毒(seneca valley virus，sva)。27.优选地，本发明的组合物包含一种或多种选自c5至c12或其衍生物的mcfa。术语mcfa是指mcfa的游离脂肪酸形式。此外，还可以使用mcfa的衍生物，其中mcfa的所述衍生物是化学改性的中链脂肪酸，和提供有侧链的中链脂肪酸，例如但不限于一个或多个烷基，优选c1-c10烷基。mcfa衍生物包括其中羧基可逆地转化为不同基团的mcfa，优选但不限于酰胺、盐、酯或甘油酯，例如单甘油酯、二甘油酯或三甘油酯。在优选的实施方式中，使用的所述mcfa是游离形式或盐形式，例如mcfa的钠盐、钾盐或钙盐。28.非洲猪瘟病毒科、特别是非洲猪瘟是畜牧业尤其是养猪业面临的重大健康挑战，影响生产力和盈利能力，导致该疾病对该行业造成巨大的经济影响。发明人已经发现包含至少一种mcfa或mcfa衍生物的组合物对于预防、抑制和/或治疗这种疾病出人意料地有效，因此允许显著提高生产力和盈利能力。29.此外，非洲猪瘟是一种严重的疾病，它对动物健康的影响不容小觑。不幸的是，感染在许多情况下会导致动物死亡。本发明因此提供了一种组合物，该组合物可以对减少动物痛苦和改善动物福祉做出相当大的贡献。30.迄今为止，还没有真正的解决方案来预防或阻止非洲猪瘟的爆发。目前还没有疫苗可用。本发明为治疗和预防非洲猪瘟病毒科、特别是asfv提供了一种有效的解决方案。31.本发明人发现，向动物饲料提供c5-c12范围内的特定mcfa、它们的衍生物和/或它们的混合物可以预防和治疗由非洲猪瘟病毒科引起的疾病。据认为，存在的病毒颗粒被mcfa根除。32.在一个实施方式中，所述组合物包含一种或多种选自包括己酸(c6)、辛酸(c8)、壬酸(c9)、癸酸(c10)、月桂酸(c12)及其衍生物的组的mcfa。本发明人已经发现，这些mcfa和其衍生物对于诸如非洲猪瘟等非洲猪瘟病毒科特别有效。33.在一个实施方式中，使用一种mcfa或其衍生物。给予动物包括己酸(c6)、辛酸(c8)、壬酸(c9)、癸酸(c10)或月桂酸(c12)及其衍生物的饲料补充剂。在优选实施方式中，给予动物c8。34.在另一个实施方式中，使用包含特定的不同mcfa的混合物的组合物/饲料添加剂，各个mcfa含有不同数目的碳原子。可能的混合物包括至少c8，补充有一种或多种选自己酸(c6)、壬酸(c9)、癸酸(c10)或月桂酸(c12)的mcfa。在另一个实施方式中，混合物可以基于壬酸(c9)，补充有一种或多种选自己酸(c6)、辛酸(c8)、癸酸(c10)或月桂酸(c12)的mcfa。在另一个实施方式中，混合物可以基于c10，补充有一种或多种选自己酸(c6)、壬酸(c9)、辛酸(c8)或月桂酸(c12)的mcfa。混合物也可以基于c12，补充有一种或多种选自己酸(c6)、壬酸(c9)、癸酸(c10)或辛酸(c8)的mcfa。35.在一个实施方式中，所述组合物包含等量的c8和c10以及任选的选自c6-c12的另一种mcfa。在一个实施方式中，所述组合物中c8和c10两者的浓度各为所述组合物总量的20％至50％。36.在一个实施方式中，基于所述mcfa的总重量，所述mcfa优选地包括：[0037]-30％至100％的辛酸(c8)或其衍生物；[0038]-0％至40％的己酸(c6)或其衍生物；[0039]-0％至40％的癸酸(c10)或其衍生物；[0040]-0％至20％的月桂酸(c12)或其衍生物；和[0041]-0％至10％的壬酸(c9)或其衍生物。[0042]本发明人已经发现，包含如上所述的mcfa或mcfa衍生物的混合物的组合物对负责引起非洲猪瘟病的病毒显示出最佳的预防和治疗性质。[0043]在一个实施方式中，所述mcfa部分包含至少40％辛酸(c8)，更优选至少50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、90％、95％、99％c8(基于所述mcfa部分的总重量)。根据其它或另一个实施方式，所述mcf由100％辛酸(c8)组成。[0044]本发明的其它或另一个实施方式涉及一种组合物，其中所述mcfa包括c8和c9两者。在一个实施方式中，所述组合物的所述mcfa部分包含至少30％c8和至少30％c9，更优选至少40％c8和至少30％c9，更优选至少40％c8和至少40％c9，更优选至少45％c8和至少45％c9。在另一个实施方式中，所述组合物中的所述mcfa部分包含至少40％c8，并且进一步包含一定量的c9，例如1％c9、5％c9、10％c9、15％c9、20％c9、25％c9、30％c9、35％c9、40％c9、45％c9、50％c9、55％c9或60％c9。在更优选的实施方式中，所述mcfa部分包含1:1比例的c8和c9，例如50％c8和50％c9。[0045]由于这种在预防、抑制和/或治疗非洲猪瘟方面的突出效果，仅需要使用小剂量的本发明组合物来获得对动物健康的期望结果以及伴随的对生产力的积极影响。因此，本发明为农民带来了更高的收入，同时降低了疾病预防、治疗和/或抑制的成本。[0046]在另一个实施方式中，基于组合物的总重量，mcfa和/或mcfa衍生物的总量占基于组合物/饲料添加剂的总重量的1％至100％，优选为5％至90％，更优选为15％至80％，甚至更优选为30％至80％。发明人已经发现，在上述范围内，用于预防、治疗和/或抑制非洲猪瘟的组合物/饲料添加剂的功效进一步增加。[0047]在一个实施方式中，如本文所述，中链脂肪酸的浓度计为组合物/饲料添加剂的至少1重量％、5重量％、10重量％、15重量％、20重量％、25重量％、30重量％、35重量％、40重量％、45重量％、50重量％、55重量％、60重量％、65重量％、70重量％、75重量％、80重量％、85重量％、90重量％、95重量％、99重量％。在另一个实施方式中，如本文所述，中链脂肪酸的量(基于干重)计为1g/100g组合物(1重量％)至100g/100g组合物(100重量％)，优选为50g/100g至99g/100g(50重量％至99重量％)，50g/100g至95g/100g(50重量％至95重量％)，更优选50g/100g至90g/100g组合物(50重量％至90重量％)，更优选为60g/100g至80g/100g。应当理解，如本文所述的mcfa的浓度最大计为组合物的100重量％。[0048]本发明的组合物可方便地用于治疗、抑制和/或预防非洲猪瘟，因为其可以口服施用至动物。[0049]通过将组合物饲喂给动物来获得组合物的口服施用。这种施用方法提供了易于执行并且不对农民造成新型设备大投资的负担的优点。[0050]在另一个实施方式中，所述组合物/饲料添加剂还包含维生素、矿物质、微量元素或它们的组合。维生素包括但不限于维生素a、维生素d3、维生素e、维生素k3、硫胺素、核黄素、泛酸、生物素、叶酸、维生素b12、烟酸、吡哆醇、抗坏血酸、肌醇和胆碱。矿物和微量元素包括但不限于镁、钠、锰、铁、锌、铜、硒、磷、钴和碘。这些组分的添加进一步有助于动物的完整且健康的饮食，并且积极地影响其畜牧学性能。在组合物中包含这些组分简化了饲喂动物所需的步骤，因为不再需要将这些组分单独添加到饲料中，从而提高饲喂过程的效率。此外，发现在动物饲料中提供mcfa和/或mcfa衍生物导致饲料适口性的增加，这又导致动物进食更多、长得更大、更快和/或更健康，这最终导致猪生产的盈利能力的增加。[0051]在另一个实施方式中，如本文所述的根据本发明的组合物/饲料添加剂配制为液体或固体形式。术语“固体形式”特别是指粉末、颗粒或粒料。术语“液体形式”特别是指在水中的溶液或者是指在油中的溶液并且包括粘性糊剂和非粘性溶液。如上所述的mcfa和/或mcfa衍生物是油溶性的，并且可以作为粉末和油溶液提供。具体地，所述组合物适用于口服施用。包括根据本发明的实施方式的组合物的饲料通过本领域技术人员已知的方式生产或制造。在一个实施方式中，包含根据本发明的组合物的饲料提供为干燥的挤出饲料粒料。该制剂允许相对较长的保质期，也允许大量饲料的包装和储存。[0052]组合物的口服施用可以通过在喂养之前将所述动物饲料与本发明的组合物混合、通过将已经包含组合物的动物饲料饲喂给动物来进行。因此，本发明提供一种饲料或饲料成分，其包含如上所述的饲料添加剂/组合物，其中基于所述饲料的总重量，所述饲料或饲料成分中的所述组合物的剂量是500ppm至10000ppm(重量)，500ppm至9000ppm(重量)，1000至8000ppm(重量)，更优选1000至7000ppm(重量)，更优选1000至6000ppm(重量)，甚至更优选1000至5000ppm(重量)，如1250ppm、1500ppm、2000ppm或3750ppm。[0053]或者，所述饲料、饲料成分或饮用水中mcfa部分的剂量为500ppm至10000ppm(重量)，500ppm至9000ppm(重量)，1000至8000ppm(重量)，更优选1000至7000ppm(重量)，更优选1000至6000ppm(重量)，甚至更优选1000至5000ppm(重量)，如1250ppm、1500ppm、2000ppm或3750ppm。[0054]根据又一个或另一个实施方式，本文所述的剂量导致以150ppm至3000ppm、优选200ppm至2500ppm、更优选300ppm至2000ppm mcfa的日剂量治疗动物。[0055]在另一个实施方式中，饲料还包含其他公知的成分，以便提供营养平衡的完整食物，包括但不限于植物物质，例如面粉、膳食、淀粉或从作物植物(例如小麦或其他谷类、苜蓿、玉米、燕麦、马铃薯、大米、大豆或其他豆类)生产的经破碎或加工的谷物；可以从木浆、草、植物叶和废物植物物质(例如稻壳或大豆壳或玉米棒)获得的形式的纤维素；动物物质，例如鱼或甲壳动物的膳食、油、蛋白质或可溶物和提取物、磷虾、肉粉、骨粉、羽毛粉、血粉或油渣(cracklings)；藻类物质；酵母；细菌；维生素、矿物质和氨基酸；有机粘合剂或粘结剂；以及螯合剂和防腐剂。[0056]优选地，动物的治疗每天进行至少一次，更优选每天两次以上，例如每天2至6次或4至6次。优选地，通过口服施用治疗的任何过量食物在饲喂期之后被除去，例如通过冲洗出通道系统，或通过从进料线中移出。[0057]组合物或mcfa的口服施用也可通过将动物饮用水与本发明的组合物混合来进行。因此，本发明提供一种饮用水，其包含如上所述使用的饲料添加剂/组合物，其中基于所述饮用水的总重量，所述饲料中所述组合物或mcfa的剂量为250ppm至10000ppm(重量)，500ppm至9000ppm(重量)，1000ppm至8000ppm(重量)，更优选1000ppm至7000ppm(重量)，更优选1000ppm至6000ppm(重量)，甚至更优选1000ppm至5000ppm(重量)，如1250ppm、1500ppm、2000ppm或3750ppm。[0058]根据其它或另一个实施方式，所述组合物还包含一种或多种有机酸，所述有机酸选自丙酸、乙酸、乳酸、甲酸、柠檬酸、草酸、苹果酸或它们的组合。本文所包括的有机酸产生可溶于水的组合物，且因此理想地适合于通过将组合物与动物饮用水混合而口服施用。优选地，所述有机酸以组合物总重量的60％至80％的浓度存在于组合物中。[0059]根据一些实施方式的组合物还包含一种或多种稳定剂和/或乳化剂，其改善组合物在动物饮用水中的可混合性。此类稳定剂可包括甘油。优选地，所述组合物包含浓度为组合物总重量的10％至20％的所述乳化剂。在其它或另一个实施方式中，所述组合物包含浓度为组合物总重量的0.5％至2.5％的所述稳定剂。[0060]优选地，动物是(家)猪或疣猪。[0061]应当理解，如上文所有本发明实施方式中描述的发明同样适用于mcfa在制造用于治疗和预防非洲猪瘟病毒科(例如asfv)的感染的药物中的用途。[0062]本发明的另一方面涉及抑制动物饲料或饮用水中的非洲猪瘟病毒科、优选非洲猪瘟病毒的方法，所述方法包括将组合物配入所述动物饲料或饮用水，所述组合物包含一种或多种中链脂肪酸(mcfa)和/或其衍生物。根据本发明的方法使用有效量的化学缓解剂以抑制动物饲料或饮用水中的猪病毒，优选asfv，例如抑制至低于通过细胞病变效应(cpe)、rt-pcr和/或细胞培养中的病毒分离的检测水平的浓度。如本文所用，“有效量”是指能够提供足以实现所需性能改善的活性化合物(例如，中链脂肪酸)的生物利用度水平的量。[0063]在一个或多个实施方式中，用于本发明的mcfa包括己酸、辛酸、癸酸、壬酸和/或月桂酸。因此，在某些实施方式中，所述化学抑制剂选自包括己酸、辛酸、癸酸、壬酸、月桂酸及其混合物的组。[0064]如上文所讨论，在一个或多个实施方式中，可以使用中链脂肪酸的共混物。据认为，上述优选实施方式适用于抑制动物饲料或饮用水中的病毒的目的。例如，在一个或多个实施方式中，可将两种以上中链脂肪酸的共混物引入到饲料或饮用水中。优选地，根据所述方法，所述mcfa的总重量的至少40％是辛酸(c8)。在优选实施方式中，使用100％c8 mcfa部分。[0065]在另一个实施方式中，将辛酸和壬酸的共混物(例如以约1:1的重量比)引入到饲料或饮用水中。在进一步优选的实施方式中，所使用的mcfa部分包括50％c8和50％c9。应当理解，如本文所述的方法优选是指上述的组合物及其所有实施方式，并且其效果和优点同样适用于本方法。[0066]优选地，所述组合物或mcfa部分以所述动物饲料或饮用水的总重量的250ppm至10000ppm的剂量配入所述动物饲料或饮用水中。更优选地，基于所述动物饲料或饮用水的总重量，掺入的所述组合物或mcfa部分为500ppm至9000ppm(重量)，1000ppm至8000ppm(重量)，更优选1000ppm至7000ppm(重量)，更优选1000ppm至6000ppm(重量)，甚至更优选1000ppm至5000ppm(重量)，如1250ppm、1500ppm、2000ppm或3750ppm。[0067]本发明的另一方面同样涉及一种降低动物饲料或饮用水中的非洲猪瘟病毒的病毒滴度的方法，所述方法包括向所述动物饲料或饮用水添加包含一种或多种中链脂肪酸(mcfa)和/或其衍生物的组合物。应当理解，如本文所述的方法优选是指上述的组合物及其所有实施方式，并且其效果和优点同样适用于本方法。[0068]在另一个实施方式中，所述方法包括使用mcfa，所述mcfa选自包括己酸(c6)、辛酸(c8)、壬酸(c9)、癸酸(c10)、月桂酸(c12)、其衍生物或它们的组合的组。[0069]优选地，该方法包括使用至少辛酸(c8)和任选的一种或多种选自己酸(c6)、壬酸(c9)、癸酸(c10)、月桂酸(c12)和/或其衍生物的另外的mcfa。[0070]在另一个实施方式中，该方法包括使用至少40％总重量的辛酸(c8)。根据其它或另一个实施方式，该方法包括使用100％辛酸(c8)。[0071]在另一个实施方式中，该方法还包括使用壬酸(c9)。更优选地，该方法包括使用以约1:1的重量比引入到饲料或饮用水的辛酸和壬酸的共混物，例如包含50％c8和50％c9的mcfa部分。[0072]应当理解，如本文所述的mcfa的浓度为组合物的重量或体积的最小1％且最大100％。[0073]优选地，所述组合物或mcfa部分以所述动物饲料或饮用水中的总重量的250ppm至10000ppm的剂量配入所述动物饲料或饮用水中。更优选地，基于所述动物饲料或饮用水的总重量，掺入的所述组合物或mcfa部分为500ppm至9000ppm(重量)，1000ppm至8000ppm(重量)，1000ppm至7000ppm(重量)，更优选1000ppm至6000ppm(重量)，甚至更优选1000ppm至5000ppm(重量)，如1250ppm、1500ppm、2000ppm或3750ppm。[0074]本发明的实施方式有利地提供了预防或减少在动物饲料或饮用水中非洲猪瘟病毒科(例如非洲猪瘟病毒(asfv))的病毒感染的安全替代方法。使用有害化学物质的现有方法对动物的蛋白质和氨基酸代谢具有负面影响。与现有方法不同，本发明使用在发现的剂量下通常非危险性的化学缓解剂，以实现非洲猪瘟病毒科的病毒感染的有效缓解。根据本发明使用的化学缓解剂是对工人或环境的安全基本上没有风险的天然替代方案。[0075]通过阅读本文的公开内容和下面的工作实施例，本发明的各种实施方式的另外的优点对于本领域技术人员将是显而易见的。应当理解，除非本文指明，否则本文描述的各种实施方式不一定是相互排斥的。例如，在一个实施方式中描述或描绘的特征也可以包括在其他实施方式中，但并非一定包括在内。因此，本发明涵盖本文所述的具体实施方式的多种组合和/或整合。[0076]本发明通过以下非限制性实施例来进一步描述，这些非限制性实施例进一步说明了本发明，并且并非旨在也不应当被解释为对本发明的范围的限制。[0077]实施例[0078]实施例1.在掺有非洲猪瘟病毒的饲料和水中的中链脂肪酸(mcfa)的易感性[0079]a.mcfa组合物相关信息[0080]1.用于动物饲料应用的组合物[0081]a.组合物f1:[0082]100％辛酸(c8)；[0083]b.组合物f2:[0084]33％己酸(c6)、33％辛酸(c8)和33％癸酸(c10)；[0085]c.组合物f3:[0086]50％辛酸(c8)、35％癸酸(c10)和15％月桂酸(c12)；[0087]d.组合物f4:[0088]95％辛酸(c8)和5％壬酸(c9)。[0089]2.用于饮用水应用的组合物[0090]a.组合物w1:[0091]14％mcfa、15％乳化剂、70％有机酸和1％甘油，mcfa由100％辛酸(c8)组成；[0092]b.组合物w2:[0093]14％mcfa、15％乳化剂、70％有机酸和1％甘油，mcfa由33％己酸(c6)、33％辛酸(c8)和33％癸酸(c10)组成；[0094]c.组合物w3:[0095]14％mcfa、15％乳化剂、70％有机酸和1％甘油，mcfa由50％辛酸(c8)、35％癸酸(c10)和15％月桂酸(c12)组成；[0096]d.组合物w4:[0097]14％mcfa、15％乳化剂、70％有机酸和1％甘油，mcfa由95％辛酸(c8)和5％壬酸(c9)组成。[0098]b.非洲猪瘟病毒(asfv)相关信息[0099]用于所有实验的asfv菌株分离自红河三角洲地区(样品来自越南河内)。该菌株已通过由oie(世界动物健康组织)推荐的病毒分离、had测定和实时pcr来确认。[0100]本文使用的asfv菌株具有以下遗传表征，属于基因型ii、血清型viii并且包含trs基因，表明其非常接近并且因此被认为是代表在中国和比利时于2018年检测到的asfv菌株，并且与在2007年在格鲁吉亚中分离的asfv不同。本文所用的病毒储备液滴度等于107had50/ml(血红素吸附剂量)。[0101]c.实验设计[0102]1.动物饲料实验设计[0103]对照组[0104]在被asfv污染之前用动物饲料组合物处理饲料。[0105]-阳性对照：含有105had50/g asfv的完全饲料[0106]-阴性对照：完全饲料，没有添加asfv[0107]-采样时间点：在24小时暴露之后[0108]-在室温(实验室条件)下温育样品24小时[0109]-通过基于oie方案的实时pcr进行评估[0110]实验组[0111]-饲料实验1[0112]将以不同剂量(1250、2500、3750和5000ppm)的组合物f1处理的饲料掺杂asfv，并且最终的病毒滴度为105had50/g饲料。[0113]-饲料实验2[0114]将以不同剂量(1250、2500、3750和5000ppm)的组合物f2处理的饲料掺杂asfv，并且最终的病毒滴度为105had50/g饲料。[0115]-饲料实验3[0116]将以不同剂量(1250、2500、3750和5000ppm)的组合物f3处理的饲料掺杂asfv，并且最终的病毒滴度为105had50/g饲料。[0117]-饲料实验4[0118]将以不同剂量(1250、2500、3750和5000ppm)的组合物f4处理的饲料掺杂asfv，并且最终的病毒滴度为105had50/g饲料。[0119]2.饮用水实验设计[0120]对照组[0121]在被asfv污染之用前饮用水组合物处理饲料。[0122]-阳性对照：用101had50、102had50和103had50不同剂量的分离自越南的asfv处理的淡水。[0123]-阴性对照：淡水(通过实时pcr为asfv阴性)[0124]-取样时间点：在室温下病毒温育后30分钟、1小时、3小时、6小时、12小时和24小时[0125]-通过基于oie方案的实时pcr进行评估。[0126]实验组[0127]-水实验1[0128]将以不同剂量(1250、2500、3750和5000ppm)的组合物w1处理的水掺杂asfv，并且最终的病毒滴度为101had50、102had50和103had50/ml。[0129]-水实验2[0130]将以不同剂量(1250、2500、3750和5000ppm)的组合物w2处理的水掺杂asfv，并且最终的病毒滴度为101had50、102had50和103had50/ml。[0131]-水实验3[0132]将以不同剂量(1250、2500、3750和5000ppm)的组合物w3处理的水掺杂asfv，并且最终的病毒滴度为101had50、102had50和103had50/ml。[0133]-水实验4[0134]将以不同剂量(1250、2500、3750和5000ppm)的组合物w4处理的水掺杂asfv，并且最终的病毒滴度为101had50、102had50和103had50/ml。[0135]3.产品处理[0136]动物饲料处理(堪萨斯州立大学，2019)[0137]-使用106had50/ml的病毒工作储备液[0138]-为了确保组合物在饲料上的均匀散布，用不同剂量(1250、2500、3750和5000ppm)的每种组合物处理100g完全饲料[0139]-然后将22.5g经处理的饲料置于玻璃瓶(250ml)中并保持在室温下24h[0140]-将2.5ml病毒工作储备液加入到每个瓶中，获得105had50/g饲料的最终病毒滴度[0141]-将样品在室温下温育24小时[0142]-样品制备：将100ml pbs缓冲液放入每个含有22.5g经处理过的饲料的瓶中，使用qiaamp dna mini试剂盒将来自每个样品的200μl上清液用于dna提取[0143]-通过基于oie方案的实时pcr进行评估[0144]饮用水处理[0145]-使用104had50、103had50和102had50的病毒工作储备液[0146]-用不同剂量(1250、2500、3750和5000ppm)的每种组合物处理200ml淡水[0147]-将经处理的水涡旋并保持在室温下24h[0148]-将22.5ml的经处理的水置于50ml管中，每个管掺杂2.5ml的104had50、103had50和102had50的asfv，获得103had50、102had50和101had50/ml水的最终病毒滴度。[0149]-样品制备：在病毒温育后30分钟、1小时、3小时、6小时、12小时和24小时的时间点，收集样品用于dna提取，并将dna存储在-80℃直到实时pcr。[0150]-通过基于oie方案的实时pcr进行评估[0151]4.dna制备[0152]对于dna制备，使用qiaamp dna mini试剂盒(qiagen)。[0153]5.实时pcr[0154]基于2018年的oie方案“通过实时聚合酶链反应(pcr)检测非洲猪瘟病毒(asfv)的sop/cisa/asf/pr/2标准操作程序”，采用实时pcr来评估mcfa对分离自越南的asfv的影响。实时pcr方案的结果以检测病毒核酸所需的定量周期(cq)表示。因此，高cq值需要解释为意味着存在较少的病毒核酸。[0155]6.统计分析[0156]使用ibm spss软件(用于windows的spss 23.0；ibm，chicago，il，美国)进行统计分析。p值《0.05被认为是统计学显著的。通过邓肯多重比较法测试各组之间的差异。[0157]d.结果[0158]1.非洲猪瘟病毒(asfv)对动物饲料中的中链脂肪酸(mcfa)的易感性[0159]关于经处理的动物饲料的上述实验结果示于图1中。结果表明，在3750ppm和5000ppm的最高剂量下，当与阳性对照相比时，所有组合物(包括f1、f2、f3和f4)显著地增加了asfv的cq值(p《0.01)。[0160]在更低剂量下，当与阳性对照相比时，浓度为2500ppm的组合物f3显著提高cq值(p《0.05)。组合物f2显示特别有效，因为当与阳性对照相比时，所有剂量(1250、2500、3750和5000ppm)诱导了显著的cq值增加(p《0.05)。[0161]从本文讨论的结果可以得出结论，用于饲料处理的所有测试组合物显示出抑制/减少动物饲料中的asfv的显著功效。[0162]2.非洲猪瘟病毒(asfv)对饮用水中的中链脂肪酸(mcfa)的易感性[0163]关于经处理的饮用水的上述实验的结果在图2中示出。结果表明，在3750ppm和5000ppm的最高剂量下，当与阳性对照相比时，所有组合物(包括wl、w2、w3和w4)显著地增加了asfv的cq值(p《0.01)。[0164]在更低剂量下，当与阳性对照相比时，浓度为2500ppm的组合物w3显著提高了cq值(p《0.05)。组合物w2显示特别有效，因为当与阳性对照相比时，所有剂量(1250、2500、3750和5000ppm)诱导了显著的cq值增加(p《0.05)。[0165]从本文讨论的结果可以得出结论，用于饲料处理的所有测试组合物显示出抑制/减少饮用中的asfv的显著功效。[0166]实施例2.体外实验显示了mcfa混合物的功效[0167]使vero细胞被病毒颗粒感染。通过确定细胞病变效应(cpe)来测量对细胞的影响。在感染后5天后使用倒置显微镜检查cpe。在添加到组织培养物中的0.1％浓度下测试不同的mcfa混合物。测试一式两份进行。简言之，将病毒悬浮液与待测试的mcfa混合物混合，并立即添加至96孔板中的汇合细胞单层(添加200μl/孔的总体积)。在温育5天后检查cpe，结果在表1中给出。100％c12溶液的测试结果受到观察到溶解度问题的事实的干扰，影响了结果。[0168]用包含c8的混合物获得了最佳结果。虽然表1中的评分无法区分各种c8设定，但是视觉评分能够推断，具有更高c8浓度的混合物通常更具针对病毒的细胞病变效应的保护性。此外，包含c8和c9的混合物取得了极好的评分。100％c8混合物和1:1的c8:c9评分最佳。[0169]表1[0170]添加的mcfa混合物cpe*(第一次和第二次测试)100％c63/3100％c82/2100％c92/2100％c102/4100％c12n.a.1:1:1c6/c8/c103/21:1:1:1c6/c8/c9/c102/21:1c8/c92/2阳性对照(无病毒颗粒/无mcfa)1/1阴性对照(病毒颗粒/无mcfa)4/4[0171]*4＝细胞被完全破坏/3＝中等破坏/2＝低破坏/1＝无破坏。









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