獐牙菜提取物和包含其的化妆品组合物的制作方法

医药医疗技术的改进;医疗器械制造及应用技术1.本发明涉及獐牙菜(swertia chirata)提取物、其获得方法、包含其 的化妆品组合物以及各种化妆品用途。背景技术：2.皮肤主要由三层组成，即从最表面开始，表皮、真皮和皮下组织。3.皮肤的外层(即表皮)由角质形成细胞(大部分)、黑素细胞(参 与皮肤色素沉着)和朗格汉斯细胞组成。其功能是保护机体免受外部环 境的影响并确保其完整性，特别是减缓微生物或化学物质的渗透，以及 防止包含在皮肤中的水分的蒸发。4.为此，角质形成细胞经历连续定向的成熟过程，期间位于表皮基底 层的角化细胞在其分化的最终阶段形成角质层细胞，该角质层细胞是由 蛋白质和脂质(如神经酰胺)组成的角质化包膜形式的完全角质化的死 细胞。在该分化过程中，角膜间细胞表皮脂质也形成，然后在角质层中 以双层(片)的形式组织。它们与上述角质化包膜一起参与表皮的屏障 功能。5.随着皮肤老化，其变得更薄，失去体积和弹性，并且其屏障功能受 损。真皮表皮连接是皮肤老化的优选目标之一。其主要功能是允许表皮 和真皮之间的粘着，以确保皮肤的粘着和营养功能。这些功能主要基于 由角化细胞产生的细胞外基质的作用。该基质由几种大分子的组装组成， 包括胶原蛋白、蛋白聚糖、糖胺聚糖(包括透明质酸)、弹性蛋白和结 构糖蛋白。细胞老化和环境因素(如uv辐射或污染)的作用将不利地 改变这些细胞外基质组分。它们将经历酶促降解，特别是通过基质金属 蛋白酶(mmp)的作用；基质将不再能够正确执行其功能，这将导致脆 性和细胞再生能力的降低，并将导致皮肤上出现皱纹和细纹。6.细胞外基质及其降解，特别是由酶(如mmp)的作用引起的降解的 预防，已经成为预防和减少皮肤老化的优选靶标。7.因此，真正需要提供能够作用于维持细胞外基质功能，特别是防止 细胞外基质降解的活性剂，以对抗由皮肤老化引起的不利改变。8.此外，由于消费者对包含尽可能少的合成成分的天然产品的日益增 长的需求，以及影响衍生自化学工业的化合物的日益广泛的监管限制， 将有利的是此类活性剂衍生自植物提取物。9.还需要寻找使用可回收和无毒的溶剂，同时允许选择性提取目标分 子而不降解它们的更加环境友好的提取方法。10.发明概述11.獐牙菜是獐牙菜属植物，其是属于龙胆科(gentianaceae)并且含 有约150种物种的属。獐牙菜特别用于其来源的印度、不丹和尼泊尔的 传统医学中。它的根被认为是植物的最具生物活性的部分，用于治疗各 种病症，如发热、疟疾、哮喘、某些肝脏病理、糖尿病或某些类型的精 神障碍。12.完全令人惊讶的是，本发明的作者成功地证明了通过用超临界co2对獐牙菜的醇提取物进行提取步骤可以获得具有显著抗老化和屏障功能 保护性能的獐牙菜提取物。本发明人特别证明，这些提取物一方面可以 抑制由表皮角化细胞介导的细胞外基质的炎症和降解过程，另一方面可 以刺激角化细胞的脂质代谢并刺激细胞外基质组分的合成。因此，这些 提取物可用于预防/减缓由胞外基质的破坏和降解引起的皮肤老化，而且 还可用于改进皮肤的屏障功能和水合作用。13.此外，根据本发明的獐牙菜提取物有利地与所有药物呈现形式相容： 它们不仅可用于化妆品组合物(如霜剂或凝胶霜剂)中，而且它们还可 有利地被引入到仅包含水相的组合物(如洗剂)，或仅包含非水相的组 合物中，例如以油的形式。14.因此，根据第一方面，本发明涉及用于制备獐牙菜提取物的方法， 其包括在40-80℃，优选50-70℃的温度下并且在20-60mpa，优选25-35mpa的压力下用超临界co2提取獐牙菜的醇提取物的步骤。15.本发明的主题还在于通过这种方法获得的獐牙菜提取物，以及在生 理上可接受的介质中包含这种獐牙菜提取物的化妆品组合物。16.最后，本发明的主题还在于如上所述的獐牙菜提取物用于预防和/ 或减少皮肤老化，而且还用于水合皮肤和/或改进皮肤的屏障功能的非治 疗性美容用途。17.发明详述18.獐牙菜19.獐牙菜，也称为獐牙菜(swertia chirayta)、獐牙菜(swertia chirayita) 或獐牙菜(chiretta)，是属于龙胆科和獐牙菜属的草本植物。它存在于 喜马拉雅高原，特别是在印度、尼泊尔和不丹。它是直立的一年生/两年 生草本植物，60-150cm高，具有从其基部到其中部呈圆柱形的茎，并且 在其上部呈四边形。其茎为橙棕色，或甚至紫蓝色，具有黄色芯。它的 叶子为披针状，对生，无柄，尖形，长约4-10cm。它具有许多花，它们 是四聚的并且是紫光着色的黄绿色。20.根据本发明的獐牙菜提取物获自整株植物，也就是说获自植物的包 括花、叶、茎和根的部分。21.用于制备獐牙菜提取物的方法22.根据本发明的用于制备獐牙菜提取物的方法包括在40-80℃，优选 50-70℃的温度下并且在20-60mpa，优选25-35mpa的压力下用超临界 co2提取獐牙菜的醇提取物的步骤。23.申请人事实上已经证明，通过利用超临界co2对獐牙菜的醇提取物 进行第二次提取，可以获得具有显著抗老化和屏障功能刺激性质的提取 物。24.用超临界co2提取在40-80℃，优选50-70℃，例如60℃的温度下 并且在20-60mpa，优选25-35mpa，例如30mpa的压力下进行。25.在本发明的上下文中，应当注意的是，“a”‑“b”的值范围，例如上文 40-80℃的温度，包括a-b的所有值，包括端点。因此，根据本发明用 超临界co2提取的步骤可以在40-80℃的任何温度值下进行，但也可以 在40或80℃下进行。这适用于本发明上下文中公开的所有值范围。26.根据一个优选实施方案，co2流速为至少150g/min，优选200g/min。27.用超临界co2提取优选在醇溶剂存在下进行。醇溶剂可以是包含2-4 个碳原子的粉末进行用超临界co2提取的步骤。40.因此，根据一个具体实施方案，根据本发明的用于制备獐牙菜提取 物的方法包括以下步骤：41.a)用至少一种醇溶剂，优选乙醇提取獐牙菜，优选以粉末形式；42.b)过滤a)中获得的混合物以除去植物残余物；43.b')任选地，使步骤b)结束时获得的混合物脱色；44.c)向由此获得的混合物中添加多糖，优选纤维素，以获得在醇溶剂 中的多糖/干提取物混合物；45.d)除去醇溶剂，优选通过蒸发；46.e)研磨步骤d)结束时获得的干提取物/多糖混合物以获得粉末；和47.f)在40-80℃，优选50-70℃的温度下并且在20-60mpa，优选 25-35mpa的压力下用超临界co2提取步骤e)结束时获得的粉末。48.用超临界co2提取的步骤结束时获得的獐牙菜提取物是根据本发明 的提取物。49.该提取物也可被处理并最终用于美容目的，使得其可被整合到化妆 品组合物中。该处理通过本领域技术人员已知的常规方法进行，例如通 过稀释、与化妆品载体组合、蒸发溶剂或过滤的步骤。50.在本文中，包含在用于用超临界co2提取的溶剂中的提取物(即用 超临界co2提取的步骤结束时获得的液相)可经历过滤步骤，例如过滤 至1μm。51.然后，可以将提取物稀释在油中，例如植物油或酯化油，例如辛酸/ 癸酸甘油三酯或优选棕榈酸2-乙基己酯，例如以1％。52.醇溶剂可以在油中稀释之前或之后除去，例如通过蒸发，优选通过 在真空下蒸发。53.然后，可以将稀释在油中的提取物再次过滤，例如过滤至1μm，以 除去不溶性物质并且因此获得最终提取物。54.根据该实施方案，上文的方法可因此还包括下列步骤g)至i)：55.g)用超临界co2过滤用于提取的溶剂中所含的提取物，并任选地除 去醇溶剂，优选通过蒸发；56.h)在油，优选棕榈酸2-乙基己酯中稀释步骤g)结束时获得的提取 物，并任选地除去残留的醇溶剂，优选通过蒸发；57.i)过滤步骤h)结束时获得的稀释的提取物。58.根据该实施方案，根据本发明的用于制备獐牙菜提取物的方法因此 可包括以下步骤：59.a)将预先干燥并研磨至细度小于2cm的獐牙菜的所有部分通过在 乙醇中在60℃下浸渍以10/1的溶剂/植物比提取两次，持续2h；60.b)随后将由此获得的提取物以100μm筛分，然后过滤至1μm以除 去植物残余物；61.b')用相对于干提取物30％的活性炭将提取物脱色，随后再次以1μm 过滤以除去残留碳；62.c)将纤维素添加到提取物中，以获得在乙醇中的纤维素(40％)/ 干提取物(60％)混合物；63.d)随后蒸发掉乙醇以仅获得纤维素/干提取物混合物；64.e)随后将纤维素/干提取物混合物研磨至小于1cm的细度以获得粉 末；65.f)随后在60℃、500巴(50mpa)和200g/min的流速下用超临界 co2(95％)/乙醇(5％)混合物提取所得粉末，直至超临界co2(95％) /乙醇(5％)混合物相对于醇提取物的重量比为75；66.g)将获得的乙醇提取物以1μm过滤；67.h)将步骤g)结束时获得的提取物在棕榈酸2-乙基己酯中稀释至1％ 并且将乙醇蒸发掉；68.i)随后将提取物以1μm过滤以除去不溶性物质并获得最终提取物 (本文称为“提取物c1”)。69.根据另一个实施方案，在超临界co2提取步骤结束时获得的含有多 糖(如纤维素)和一部分獐牙菜提取物的残余粉末(即在用超临界co2提取的步骤结束时获得的固相)可以悬浮于醇溶剂，优选乙醇中。醇溶 剂如上所定义，并且相对于用于醇提取步骤和/或用超临界co2提取的步 骤的醇溶剂，可以是相同的或另一种醇溶剂。70.随后可以将含有悬浮于醇溶剂中的残余粉末的混合物过滤，例如过 滤至1μm，以除去纤维素。71.随后可以将提取物在二醇(如辛乙二醇、戊二醇或优选丙二醇)中 稀释至例如1％。72.醇溶剂可以在二醇中稀释之前或之后除去，例如通过蒸发，优选通 过在真空下蒸发。73.然后，可以将在二醇中稀释的提取物再次过滤，例如过滤至1μm， 以除去不溶性物质并因此获得最终提取物。74.根据该可选实施方案，包括以上步骤a)-f)的方法可因此还包括以 下步骤g1)-j1)：75.g1)将步骤f)结束时获得的残余粉末溶于醇溶剂，优选乙醇中；76.h1)过滤步骤g1)结束时获得的混合物并任选地除去醇溶剂，优选 通过蒸发；77.i1)在二醇，优选丙二醇中稀释步骤h1)结束时获得的提取物，并 任选地除去残留的醇溶剂，优选通过蒸发；78.j1)过滤步骤i1)结束时获得的稀释的提取物。79.根据该可选实施方案，根据本发明的用于制备獐牙菜提取物的方法 因此可以包括以下步骤：80.a)将预先干燥并研磨至细度小于2cm的獐牙菜的所有部分通过在 乙醇中在60℃下浸渍以10/1的溶剂/植物比提取两次，持续2h；81.b)所得提取物随后以100μm筛分，然后过滤至1μm以除去植物残 余物；82.b')用相对于干提取物30％的活性炭将提取物脱色，随后再次以1μm 过滤以除去残余碳；83.c)将纤维素加入到提取物中，以获得在乙醇中的纤维素(40％)/ 干提取物(60％)混合物；84.d)随后蒸发掉乙醇以仅获得纤维素/干提取物混合物；85.e)然后，将纤维素/干提取物混合物研磨至小于1cm的细度以获得 粉末；86.f)随后在60℃、500巴(50mpa)和200g/min的流速下用超临界 co2(95％)/乙醇(5％)混合物提取所得粉末，直至超临界co2(95％) /乙醇(5％)混合物相对于醇提取物的重量比为75；87.g1)然后，回收步骤f)结束时存在的残余粉末并在45℃搅拌下放 回到乙醇溶液中；88.h1)然后，将混合物以1μm过滤以除去纤维素；89.i1)然后，将提取物在丙二醇中稀释至1％并在真空下蒸发掉乙醇；90.j1)随后以1μm过滤提取物以除去不溶性物质并获得最终提取物(本 文称为“提取物c2”)。91.獐牙菜提取物92.作为本技术主题的本发明还覆盖通过上述方法获得的獐牙菜提取 物。93.化妆品组合物94.本发明的主题还在于化妆品组合物，其在生理上可接受的介质中包 含至少一种根据本发明的方法获得的獐牙菜提取物。95.除了上述提取物之外，根据本发明使用的组合物通常包含生理上可 接受的并且优选化妆品上可接受的介质，即适合用于与人皮肤接触而没 有任何毒性，不相容性，不稳定性或过敏反应的风险，并且特别是不引 起不适感(发红、绷紧、刺痛)的介质。96.有利地，所述化妆品或皮肤病学组合物可以是粉末、乳液、微乳液、 纳米乳液、悬浮液、溶液、洗液、霜剂、水性或水-醇凝胶、泡沫、浆液、 用于气溶胶的溶液或分散体或脂质囊泡的分散体的形式。97.在乳液的情况下，它可以是油包水或水包油乳液。98.根据本发明的化妆品或皮肤病学组合物还可以包含根据各种成分和 施用形式选择的溶剂。99.作为实例，可提及水(优选软化水或花露水)或醇(如乙醇)。100.除了根据本发明的提取物之外，所述化妆品组合物还可以包含至少 一种本领域常用的添加剂，例如至少一种选自以下的化合物：润肤剂或 湿润剂、胶凝剂和/或增稠剂、表面活性剂、油、活性剂、染料、防腐剂、 抗氧化剂、有机或无机粉末、防晒剂和香料：[0101]-一种或多种湿润剂，例如多元醇(甘油、双甘油、丙二醇、辛乙 二醇、戊二醇、己二醇)、糖、糖胺聚糖(例如透明质酸)及其盐和酯； 和聚季铵盐(如lipidure pmb)。[0102]所述湿润剂以组合物总重量的约0.1-30％，优选0.005-10％的含量存 在于组合物中。[0103]-一种或多种润肤剂，其可以选自例如酯如霍霍巴酯、脂肪醇的脂 肪酸酯(肉豆蔻酸辛基十二烷酯、三乙基己酸甘油酯、碳酸二辛酯、异 硬脂酸异硬脂酯、辛酸/癸酸甘油三酯)、牛油如乳木果(乳木果油黄油 提取物、乳木果油乙酯、以商品名lipex sheasoft、lipex shea-u、lipexshea、lipex shealight、lipex shea tris销售)或辣木牛油(辣木油/氢化 辣木油酯)、蜡(acacia decurrens花蜡&helianthus annuus种子蜂蜡(种 子蜡)，c10-18甘油三酯)、植物油、植物角鲨烷、烷烃(十一烷、十 三烷)。[0104]所述润肤剂以组合物总重量的约0.1-30％，优选0.5-10％的含量存在 于组合物中。[0105]-一种或多种水相胶凝剂和/或水相增稠剂，例如选自基于纤维素的 衍生物、植物来源的树胶(瓜尔胶、刺槐豆胶、藻酸盐、角叉菜胶、果 胶)、或微生物来源的树胶(黄原胶)、粘土(锂皂石)、丙烯酰基甲 基丙磺酸(amps)和/或丙烯酰胺和/或丙烯酸和/或丙烯酸盐或酯的亲 水性或两亲性交联或非交联均聚物和共聚物(以名称aristoflex avc、 aristoflex avs、aristoflex hmb、simulgel ns、simulgel eg、simulgel 600、 simulgel 800、pemulen、carbopol、sepiplus 400、seppimax zen、sepipluss、cosmedia sp销售)。[0106]所述胶凝剂和/或增稠剂将以组合物总重量的约0.1％-10％的含量存 在于组合物中。[0107]-一种或多种表面活性剂，例如卵磷脂、聚甘油衍生物、糖衍生物 (以名称montanov 68、montanov 202、montanov 82、montanov l、easynov 销售的糖苷或木糖苷的衍生物)、磷酸酯(以名称sensanov wr销售的 c20-22烷基磷酸酯)。[0108]相对于组合物的总重量，所述表面活性剂将以约0.1-8重量％，优选 0.5-3重量％的含量存在。[0109]-一种或多种具有生物活性并通过生物位点对皮肤有效的天然的 生物技术或合成来源的活性剂，例如选自维生素(如维生素c)及其衍 生物(抗坏血酸葡糖苷、3-o-乙基抗坏血酸、抗坏血酸四异棕榈酸酯)， 维生素a及其衍生物、维生素e及其衍生物、维生素b3或烟酰胺、泛 醇、微量元素、尿囊素、腺苷、肽(棕榈酰四肽-7、棕榈酰三肽-1、棕 榈酰五肽-4、乙酰基二肽-1十六烷基酯、乙酰基四肽-5，以名称np rigin、matrixyl 3000、idealift、eyeseryl销售)、植物提取物(光果甘草提取物、 积雪草叶提取物、黑麦种子提取物)、酵母提取物、α-羟基酸(如乙醇 酸)或乳酸、氨甲环酸及其衍生物(如十六烷基氨甲环酯)等。[0110]所述活性剂将以组合物总重量的约0.1-10％的含量存在于组合物 中。[0111]通常用于化妆品中的其它添加剂也可以存在于根据本发明的组合物 中，特别是本领域公知的防腐剂、抗氧化剂或香料。[0112]本领域技术人员能够从所有这些任选的添加剂中选择将添加到组合 物中的那些的性质和含量，使得所述组合物保持其所有性能。[0113]根据本发明的獐牙菜提取物的非治疗性美容用途[0114]本发明的主题还在于根据本发明的獐牙菜提取物用于预防和/或减 少皮肤老化的非治疗性美容用途。[0115]在该实施方案中，将所述提取物或组合物施用于有害变性但非病理 性的皮肤。[0116]本发明的主题还在于根据本发明的獐牙菜提取物作为水合剂和/或 舒缓剂，用于水合皮肤和/或改进皮肤的屏障功能的非治疗性美容用途。[0117]此外，本发明的主题是根据本发明的獐牙菜提取物作为抑制基质金 属蛋白酶(mmp)活性的试剂的非治疗性美容用途。[0118]最后，本发明的主题还在于根据本发明的獐牙菜提取物作为刺激编 码细胞外基质的组成成分的基因表达，特别是刺激编码层粘连蛋白和蛋 白聚糖的基因表达的试剂的非治疗性美容用途。[0119]现在将通过以下非限制性实施例说明本发明。[0120]附图简要说明[0121]图1是表示处理48小时后在正常人表皮角化细胞中由0.25％的獐牙 菜提取物c1调节的生物途径的图。[0122]图2是表示处理48小时后在正常人表皮角化细胞中由0.25％的獐牙 菜提取物c2调节的生物途径的图。具体实施方式[0123]实施例1：獐牙菜提取物的制备和表征[0124]》通过以下制备方法获得提取物1(提取物“c1”或“pfac1”)：[0125]a)将预先干燥并研磨至细度小于2cm的獐牙菜的所有部分通过在 乙醇中在60℃下浸渍以10/1的溶剂/植物比提取两次，持续2h；[0126]b)所得提取物随后以100μm筛分，然后过滤至1μm以除去植物残 余物；[0127]b')用相对于干提取物30％的活性炭使提取物脱色，随后再次以1μm 过滤以除去残余碳；[0128]c)将纤维素添加到提取物中，以获得在乙醇中的纤维素(40％)/ 干提取物(60％)混合物；[0129]d)随后蒸发掉乙醇以仅获得纤维素/干提取物混合物；[0130]e)随后将纤维素/干提取物混合物研磨至小于1cm的细度以获得粉 末；[0131]f)随后在60℃下在500巴(50mpa)下以200g/min的流速用超临 界co2(95％)/乙醇(5％)混合物提取获得的粉末，直到不再能够提取 粉末；[0132]g)将得到的乙醇提取物以1μm过滤；[0133]h)将提取物在棕榈酸2-乙基己酯中稀释至1％，然后在4℃下放置 过夜，并蒸发掉乙醇；[0134]i)随后以1μm过滤提取物以除去不溶物质并获得最终提取物。[0135]分析后，测定到提取物1包含0.053重量％的呫吨酮，包括0.015％ 的norswertianin、0.006％的swertianin、0.002％的bellidin和0.03％的羟 基呫吨酮衍生物。提取物1还包含0.03重量％的齐墩果酸/熊果酸(三萜 类)。该提取物不包含任何可检测的swertiamarin。[0136]该提取物是富含非极性分子的油性提取物。因此，它可以有利地被 整合到油性/非水性组合物中。[0137]》通过以下制备方法获得提取物2(提取物“c2”或“pfac2”)：[0138]a)将预先干燥并研磨至细度小于2cm的獐牙菜的所有部分通过在 乙醇中在60℃下浸渍以10/1的溶剂/植物比提取两次，持续2h；[0139]b)所得提取物随后以100μm筛分，然后过滤至1μm以除去植物残 余物；[0140]b')用相对于干提取物30％的活性炭使提取物脱色，随后再次以1μm 过滤以除去残余碳；[0141]c)将纤维素添加到提取物中，以获得在乙醇中的纤维素(40％)/ 干提取物(60％)混合物；[0142]d)随后蒸发掉乙醇以仅获得纤维素/干提取物混合物；[0143]e)随后将纤维素/干提取物混合物研磨至小于1cm的细度以获得粉 末；[0144]f)随后在60℃下在500巴(50mpa)下以200g/min的流速用超临 界co2(95％)/乙醇(5％)提取获得的粉末，直到不再能够提取粉末；[0145]g1)然后，回收步骤f)结束时存在的残余物并在45℃搅拌下放回 到乙醇溶液中；[0146]h1)将混合物以1μm过滤以除去纤维素；[0147]i1)然后，将干提取物在丙二醇中稀释至1％并蒸发掉乙醇；[0148]j1)随后以1μm过滤提取物以除去可溶性物质并获得最终提取物。[0149]分析后，测定到提取物2包含0.134重量％的呫吨酮，包括0.052％ 的芒果苷、0.006％的norswertianin、0.039％的 3-o-demethylswertipunicoside、0.001％的bellidin、0.019％的二呫吨酮和 0.002％的羟基呫吨酮衍生物。提取物2还包含0.035％的swertiamarin、 0.282重量％的糖/多元醇、0.038重量％的齐墩果酸/熊果酸(三萜类)、 0.024重量％的矿物质和小于0.001％的苦杏仁苷。[0150]该提取物是富含极性分子的水-醇提取物。因此，它可以有利地被整 合到水性组合物中。[0151]》对比乙醇提取物(提取物“etoh”)通过以下制备方法获得：[0152]a)将预先干燥并研磨至细度小于2cm的獐牙菜的所有部分通过在 乙醇中在60℃下浸渍以10/1的溶剂/植物比提取两次，持续2h；[0153]b)所得提取物随后以100μm筛分，然后过滤至1μm以除去植物残 余物；[0154]b')用相对于干提取物30％的活性炭使提取物脱色，随后再次以1μm 过滤以除去残余碳；[0155]i1)然后，将提取物在丙二醇中稀释以获得丙二醇(90％)/干提取 物(10％)的混合物，并蒸发掉乙醇。[0156]分析后，测定对比提取物乙醇包含0.156重量％的呫吨酮和0.043重 量％的三萜。[0157]实施例2：獐牙菜提取物c1和c2的活性[0158]方案：[0159]将来自三个不同供体(27至34岁)的正常人表皮角化细胞接种到6 孔板中并在kgm-2培养基(由lonza公司供应)中在37℃、5％co2下培养72小时。随后将细胞与0.5％或0.25％的獐牙菜提取物c1或c2 一起孵育或不孵育(对照)48小时。每种条件一式两份进行。使用rneasy96板提取试剂盒(由qiagen公司提供)根据供应商的建议提取总rna。 通过multiskan g0(由thermofischer提供)评价rna的量和质量。合 成互补dna并在基因芯片人转录组阵列2.0芯片上进行转 录组。用ingenuity pathway analysis软件(qiagen)进行基因的生物 信息学分析，所述基因的表达受至少2倍的调控。该软件在智能知识数 据库中收集分子间相互作用、生物网络和规范途径的信息。[0160]结果：[0161]獐牙菜提取物c1和c2在表皮角化细胞上表现出不同的基因调控 谱。[0162]处理48小时后，两种獐牙菜提取物中的每一种均调节表皮角化细胞 中的基因表达(183-636个基因)。在0.25％的浓度下，与0.5％的浓度 相比，提取物调节多2-2.5倍的基因。venn图显示两种提取物共同调节 少数基因，其中浓度为0.5％时只有35个共同基因，并且浓度为0.25％ 时为158个共同基因(数据未给出)。[0163]使用软件，对这两种提取物调节的生物网络的分析揭示了不 同的映射。这些结果表明獐牙菜提取物c1和c2通过不同的生物学机制 起作用。獐牙菜提取物c1优先通过抑制生物途径起作用，而獐牙菜提 取物c2优先激活角化细胞中的生物途径。[0164]獐牙菜提取物c1抑制表皮角化细胞介导的炎症和细胞外基质降 解的过程。[0165]对由獐牙菜提取物c1调节的生物途径和基因的分析表明，与未处 理的对照相比，该提取物能够降低白细胞介素il-8介导的炎症反应(图 1，星号)，并抑制表皮角化细胞中负责胞外基质降解的金属蛋白酶mmp1 (fc＝-146)、mmp3(fc＝-22)、mmp9(fc＝-4)和mmp10(fc＝-21)的 表达。这些性质意味着獐牙菜提取物c1具有皮肤抗炎和抗衰老作用。[0166]獐牙菜提取物c2刺激角化细胞的脂质代谢并促进细胞外基质成 分的合成。[0167]对由獐牙菜提取物c2调节的生物途径和基因的分析揭示该提取物 能够刺激表皮角化细胞的脂质代谢中涉及的生物途径(lxr/rxr和 ppar途径，图2)。同样，獐牙菜提取物1411pfa c2能够刺激许多编 码细胞外基质成分(层粘连蛋白和蛋白聚糖)或成纤维细胞活化因子(见 下表1)的基因的表达。[0168][0169]表1：处理48小时后，正常人表皮角化细胞中0.25％的獐牙菜提取 物c2刺激其表达的基因[0170]因此，该提取物由于其刺激细胞外基质组分合成的活性而具有抗衰 老性质，而且还具有皮肤脂质屏障增强性质以维持和改进皮肤的水合。[0171]根据本发明的獐牙菜提取物具有皮肤抗衰老活性，其分别由互补 活性介导，通过抑制mmp或通过合成基质成分介导。对比提取物 etoh不具有这些特定的性质。[0172]实施例2：化妆品组合物[0173]以下组合物可以由本领域技术人员常规制备。以下所示的量表示为 重量百分比。根据inci名称鉴定成分。[0174]a-油/水凝胶乳液[0178][0179]c-洗剂[0180]inci名称(％w/w)甘油1-15丙二醇1-5丁二醇1-5戊二醇0.1-5辛乙二醇0.01-2聚季铵盐－510.1-2晚玉香多糖0.1-2透明质酸钠0.01-0.5根据本发明的獐牙菜提取物c20.001-10水qs 100[0181]d-油 [0182][0183]这些组合物可以每天，在早晨和/或晚上施用于皮肤。









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