医药医疗技术的改进;医疗器械制造及应用技术1.本发明涉及保健食品、中药制剂领域,尤其涉及中含沉香的有助于增强免疫力的中药组合物及其制备方法、制剂与应用。技术背景2.增强免疫力保健行业经过多年的发展,增长速度有了较大的提升,并表现出良好的增长趋势,增强免疫功能型保健品市场规模持续增长,具有巨大的市场潜力。目前增强免疫力保健品在产品的定位上,主要将一些微量元素、维生素等作为营养补充剂来调整机体免疫,对某种元素缺少或维生素缺少造成的免疫力低下具有显著的效果,起到疗效面较窄,效果欠佳。技术实现要素:3.本发明的目的在于:(1)提供一种增强免疫力的中药组合物;(2)提供所述的增强免疫力的中药组合物的制备方法;(3)提供所述的增强免疫力的中药组合物的制剂;(4)提供所述的增强免疫力的中药组合物的应用。4.目的(1)实现:本发明有助于增强免疫力的含沉香中药组合物,包括由以下重量份数的原料:黄精30-70份、枸杞子20-60份、巴戟天10-30份、西洋参10-30份、五味子5-20份,沉香3-15份,制备方法包括前处理、提取和后处理步骤制备得到。进一步的,所述中药组合物包括以下重量份的中药原料制备而成:黄精50份、枸杞子40份、巴戟天20份、西洋参20份、五味子10份、沉香6份。5.目的(2)实现:包括前处理、提取和后处理步骤,具体包括:6.a、前处理,将配方配比的原料黄精、枸杞子和巴戟天经干燥、粉碎过40-60目筛得到物料a备用,将配方配比的原料西洋参和五味子经干燥、粉碎过40-60目筛得到物料b备用,将乙醇浸出物含量为10%-20%的沉香经干燥、粉碎过8-12目筛得到沉香粉备用;7.b、提取:(1)将物料a中加入物料a重量6-8倍体积的饮用水,于95-100℃回流提取1-3次,每次30-90min,合并提取液,浓缩,干燥得到干膏a;(2)将物料b中加入物料b重量6-8倍的体积百分浓度30%-50%乙醇溶液,于60-80℃回流提取1-3次,每次60-120min,合并提取液,浓缩,干燥得到干膏b;(3)将沉香粉末加入重量15-25倍的体积百分浓度80%-100%乙醇溶液,浸泡40-80min,于60-80℃回流提取2-3次,每次60-80min,合并提取液,浓缩,干燥得到沉香乙醇浸出物;8.c、后处理:将干膏a、干膏b和沉香乙醇浸出物混合粉碎得到物料c,物料c加入适量辅料混合均匀得到目标有助于增强免疫的中药组合物。9.进一步的,b步骤中,所述干燥为低温真空干燥,干燥温度为60~80℃;10.c步骤中,所述粉碎过筛是粉碎过70-90目筛。11.目的(3)实现:本发明所述的有助于增强免疫力的含沉香中药组合物中加入药品或保健食品加工中可接受的辅料制备成颗粒剂、散剂、片剂、胶囊剂和丸剂。12.目的(4)实现:本发明所述的有助于增强免疫力的含沉香中药组合物在制备辅助提高人体免疫力药物或保健食品中的应用。13.本发明配方中的黄精为《中国药典》(2020版)中收录的百合科植物滇黄精polygonatum kingianum coll.et hemsl.、黄精polygonatum sibiricum red.或多花黄精polygonatum cytonema hua的干燥根茎。性甘,平。归脾、肺、肾经。具有补气养阴,健脾,润肺,益肾的功效,用于脾胃气虚,体倦乏力,胃阴不足,口干食少,肺虚燥咳,劳嗽咳血,精血不足,腰膝酸软,须发早白,内热消渴,为《既是食品又是药品的物品名单》收载药物。《名医别录》:“主补中益气,除风湿,安五脏,久服轻身延年”。现代研究表明给免疫低下的小鼠灌服黄精粗多糖100-400mg/kg,服用4天可明显增加脾脏质量,促进了iκb-α降解,增强了p38 mapk、nf-κb p65、inos和cox-2的表达,并呈良好的剂量依赖关系,同时提升了nf-κb的核转移过程,可以促进巨噬细胞吞噬,增加no、tnf-α和il-6的分泌,表现出较好的增强免疫力活性。14.本发明配方中的枸杞子为茄科植物宁夏枸杞(lycium barbarum l.)的成熟、干燥果实。药食同源的历史悠久,早在《神农本草经》中就被列为上品,称其为“久服轻身不老、耐寒暑”;有延衰抗老的功效,又名“却老子”。枸杞子中含有多种氨基酸,并含有甜菜碱、玉蜀黍黄素、酸浆果红素等特殊营养成分,使其具有非常好的保健功效,《中国药典》(2020版)记载,枸杞子具有“滋补肝肾,益精明目,用于虚劳精亏,腰膝酸软,眩晕耳鸣,阳痿遗精,内热消渴,血虚萎黄,目晕不明”,为中国卫生部2002年规定的《药食同源目录》种类。现代研究表明枸杞子多糖给予正常小鼠腹腔注射40mg/(kg.天)×7天能增强经cona处理的巨噬细胞抑制肿瘤靶细胞增殖的活性;给予lbp 20mg/(kg.天)腹腔注射7天,可明显提高老年小鼠脾pfc值到正常成年水平,均表明了枸杞子具有较好的免疫调节能力。15.本发明配方中的巴戟天为茜草科植物巴戟天morirtda officinalis how的干燥根。《本草经疏》记载巴戟天“补助元阳,而兼散邪,况真元得补,邪安所留”,《本草新编》记载巴戟天具有“温而不热,健脾开胃,既益元阳,复填阴水”,《中国药典》(2020版)记载巴戟天功能主治“补肾阳,强筋骨,祛风湿,用于阳痿遗精,宫冷不孕,月经不调,少腹冷痛,风湿痹痛,筋骨痿软”,为《可用于保健食品物品名录》种类。现代药理学研究发现巴戟天水煎剂能改善红细胞免疫功能,同时可增强老年小鼠脾淋巴细胞增殖能力及il-2活性,调节并改善机体免疫功能;可以增强小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能并且能促进小鼠体外淋巴细胞的增殖,可以增强在环磷酰胺诱导的免疫功能低下小鼠的免疫功能,以上研究均说明巴戟天多糖有较强的免疫调节作用。16.本发明配方中的西洋参为五加科植物西洋参panax quinquefolium l.的干燥根,别名花旗参、洋参、西洋人参、american ginseng。早在康熙33年《补图本草备要》和乾隆30年《本草纲要拾遗》中就有记载,西洋参味甘、微苦、性凉,具有益肺阴,清虚火,生津止渴的作用,《中国药典》(2015版)中记载西洋参功能主治“补气养阴,清热生津。用于气虚阴亏,虚热烦倦,咳喘痰血,内热消渴,口燥咽干”,为《可用于保健食品物品名录》种类。现代研究表明西洋参中的人参皂苷含量与人参相似,对中老年人脏器功能衰弱、免疫功能低下、适应环境耐力减退,具有一定保障作用,综合体现了西洋参对机体免疫力的调高调节作用。17.本发明配方中的五味子为木兰科植物五味子schisandra chinensis(turcz.)baill.的干燥成熟果实,唐代《新修本草》载“五味皮肉甘酸,核中辛苦,都有咸味”,故有五味子之名。《日华子本草》记载五味子明目,暖水脏,治风,下气,消食,霍乱转筋,痃癖奔豚冷气,消水肿,反胃,心腹气胀,止渴,除烦热,解酒毒,壮筋骨,《中国药典》(2015版)中记载五味子功能主治“收敛固涩,益气生津,补肾宁心。用于久嗽虚喘,梦遗滑精,遗尿尿频,久泻不止,自汗盗汗,津伤口渴,内热消渴,心悸失眠”,为中国卫生部2002年规定的《可用于保健食品物品名录》种类。现代医学研究表明传统浸提和超声波辅助提取的五味子多糖都具有不同程度的促进小鼠脾淋巴细胞体外增殖的作用,其中以传统浸提的scp-0的作用最强,其次为超声波辅助提取的scp-3,五味子多糖scp-0可逆转环磷酰胺对小鼠非特异性和特异性免疫功能的抑制作用,对免疫低下动物模型的免疫功能有良好的调节作用。18.本发明配方中的沉香为瑞香科植物白木香aquilaria sinensis(lour.)gilg含有树脂的木材。《本草新编》记载“沉香,温肾而又通心,用黄连、肉桂以交心肾者,不若用沉香更为省事,一药而两用之也。但用之以交心肾,须用之一钱为妙,不必水磨,切片为末,调入于心肾补药中同服可也”,《中国药典》(2015版)中记载沉香功能主治“行气止痛,温中止呕,纳气平喘。用于胸腹胀闷疼痛,胃寒呕吐呃逆,肾虚气逆喘急”。现代研究表明沉香色酮hhx-5抑制免疫系统疾病,通过抑制stat3和nfkb通路抑制自主和固有免疫,抑制肥大细胞组胺释放减少小鼠损伤行为发生,具有一定的细胞免疫调节功能。19.本发明的有益效果:20.(1)本发明全方配伍,方中黄精补气养阴、健脾、润肺、补肾益精之功效,为君,枸杞子滋补肝肾、益精明目,枸杞子、西洋参补气养阴、清热生津,两药合用为臣,有助于黄精的保健功效,巴戟天配五味子收敛固涩、补肾宁心为佐,沉香温肾通心,行气纳气为使,总方补肾纳气,滋补肝肾,补气滋阴,无“十八反”、“十九禁”配伍出现,配伍合理,全方增效,显著提高增强免疫力效果,而且效果持久。21.(2)采用本发明制备的方法,将方中黄精、枸杞子和巴戟天制备混合水提物,提高了黄精、枸杞子和巴戟天中粗多糖、糖苷、苷元等活性物质的溶出;将方中西洋参和五味子制备混合乙醇提取物,增加了人参皂苷、五味子甲素、五味子醇甲等药效成分的溶出;方中沉香量较少,将方中沉香制备沉香乙醇提取物,单独提取,可以大幅提高沉香活性成分的提取率;分类提取可使得组分各类药物水溶性和醇溶性成分的充分溶出,提高了药效物质的提取转移率,促进药物组分充分发挥协同作用,提高增强免疫力效果,更好应用于制备提高人体免疫力药物或保健食品中。22.(3)采用本发明配方及制备方法,各组分协同增效,显著提高增强免疫力效果,可有效减少中药原料用量。附图说明23.图1为本发明工艺流程示意图。具体实施方式24.下面结合实施例和附图对本发明作进一步的说明,但不以任何方式对本发明加以限制,基于本发明教导所作的任何变换或替换,均属于本发明的保护范围。25.本发明所述的有助于增强免疫力的中药组合物包括原料重量份的黄精30-70份、枸杞子20-60份、巴戟天10-30份、西洋参10-30份、五味子5-20份,沉香3-15份,经前处理、提取、后处理步骤制备得到,具体包括:26.a、前处理,将配方配比的原料黄精、枸杞子和巴戟天经干燥、粉碎过50目筛得到物料a备用,将配方配比的原料西洋参和五味子经干燥、粉碎过50目筛得到物料b备用,将乙醇浸出物含量为10%-20%的沉香经干燥、粉碎过10目筛得到沉香粉备用;27.b、提取:(1)将物料a中加入物料a重量6-8倍体积的饮用水,于95-100℃回流提取1-3次,每次30-90min,合并提取液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,60℃减压真空干燥得到干膏a;(2)将物料b中加入物料b重量6-8倍的体积百分浓度30%-50%v/v乙醇溶液,于60-80℃回流提取1-3次,每次60-120min,合并提取液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得到干膏b;(3)将沉香粉末加入重量15-25倍的体积百分浓度80%-100%v/v乙醇溶液,浸泡40-80min,于60-80℃回流提取2-3次,每次60-80min,合并提取液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得到沉香乙醇浸出物;28.c、后处理:将干膏a、干膏b和沉香乙醇浸出物混合粉碎,过80目筛,得到物料c,制得目标中药组合物。29.本发明所述的有助于增强免疫力的中药组合物的制剂为所述的有助于增强免疫力的含沉香中药组合物中加入食品加工中可接受的辅料制备成散剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂和丸剂。即在上述物料c中加入适量辅料混合均匀制成目标制剂。每100g制剂中使用中药组合物20-30g。30.本发明所述的有助于增强免疫力的含沉香中药组合物的应用为所述的有助于增强免疫力的含沉香中药组合物在制备提高人体免疫力药物或保健食品中的应用。31.下面以具体实施案例对本发明做进一步说明:32.实施例133.称量黄精30g、枸杞子20g、巴戟天10g、西洋参10g、五味子5g,沉香3g,将黄精、枸杞子和巴戟天粉碎过50目筛,加入6倍重量的饮用水,于95-100℃回流提取3次,每次60min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得干膏a;将西洋参和五味子加入7倍重量的40%v/v乙醇溶液,于60-80℃回流提取3次,每次60min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得干膏b;将沉香粉末加入20倍重量的95%v/v乙醇溶液,于温度60-70℃回流提取2次,每次浸泡40min,回流60min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得沉香乙醇浸出物;将干膏a、干膏b和沉香乙醇浸出物粉碎混匀得到目标中药组合物。34.实施例235.称量黄精70g、枸杞子60g、巴戟天30g、西洋参30g、五味子20g,沉香15g,将黄精、枸杞子和巴戟天粉碎过50目筛,加入8倍重量的饮用水,于95-100℃回流提取3次,每次70min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得干膏a;将西洋参和五味子加入8倍重量50%v/v乙醇溶液,于60-80℃回流提取3次,每次70min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得干膏b;将沉香粉末加入20倍重量的95%v/v乙醇溶液,于温度60-70℃回流提取3次,每次浸泡60min,回流60min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得沉香乙醇浸出物;将干膏a、干膏b和沉香乙醇浸出物粉碎混匀得到目标中药组合物。36.实施例337.称量黄精50g、枸杞子40g、巴戟天20g、西洋参20g、五味子10g,沉香6g,将黄精、枸杞子和巴戟天粉碎过50目筛,加入5倍重量的饮用水,于95-100℃回流提取2次,每次30min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得干膏a;将西洋参和五味子加入8倍重量60%v/v乙醇溶液,于60-80℃回流提取3次,每次50min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得干膏b;将沉香粉末加入25倍重量的95%v/v乙醇溶液,于温度60-70℃回流提取2次,每次浸泡60min,回流60min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得沉香乙醇浸出物;将干膏a、干膏b和沉香乙醇浸出物粉碎混匀得到目标中药组合物。38.实施例439.称量黄精60g、枸杞子50g、巴戟天20g、西洋参20g、五味子20g,沉香15g,将黄精、枸杞子和巴戟天粉碎过50目筛,加入8倍重量的饮用水,于95-100℃回流提取3次,每次90min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得干膏a;将西洋参和五味子加入8倍重量50%v/v乙醇溶液,于60-80℃回流提取3次,每次2h,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得干膏b;将沉香粉末加入25倍重量的90%v/v乙醇溶液,于温度60-70℃回流提取3次,每次浸泡80min,回流80min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得沉香乙醇浸出物;将干膏a、干膏b和沉香乙醇浸出物粉碎混匀得到目标中药组合物。40.实施例541.称量黄精40g、枸杞子40g、巴戟天15g、西洋参15g、五味子10g,沉香12g,将黄精、枸杞子和巴戟天粉碎过50目筛,加入8倍重量的饮用水,于95-100℃回流提取3次,每次45min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得干膏a;将西洋参和五味子加入6倍重量50%v/v乙醇溶液,于60-80℃回流提取2次,每次90min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得干膏b;将沉香粉末加入15倍重量的85%v/v乙醇溶液,于温度60-70℃回流提取2次,每次浸泡70min,回流40min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得沉香乙醇浸出物;将干膏a、干膏b和沉香乙醇浸出物粉碎混匀得到目标中药组合物。42.实施例643.称量黄精50g、枸杞子40g、巴戟天20g、西洋参20g、五味子10g,沉香6g,将黄精、枸杞子和巴戟天粉碎过50目筛,加入7倍重量的饮用水,于95-100℃回流提取2次,每次60min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得干膏a;将西洋参和五味子加入7倍重量的40%v/v乙醇溶液,于60-80℃回流提取2次,每次60min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得干膏b;将沉香粉末加入20倍重量的90%v/v乙醇溶液,于温度60-70℃回流提取3次,每次浸泡50min,回流60min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得沉香乙醇浸出物;将干膏a、干膏b和沉香乙醇浸出物粉碎混匀得到目标中药组合物。44.如图1所示,将上述制备得到的中药组合物,加入辅料糊精和适量50%v/v乙醇,依次制软材、制湿粒、干燥、整粒、分装,制得颗粒剂,所述颗粒剂与中药组合物的质量比为100:25。45.实施例746.以实施例6制备得到的中药组合物进行以下药效试验:47.实验动物:spf级雄性balb/c小鼠,体重20±2g,雌雄各半,由北京华阜生物科技股份有限公司提供。48.实验设备、试剂:电子天平、游标卡尺(精密度0.02mm)、绵羊红细胞(srbc)、微量注射器(50μl)等。49.样品:实施例6制备得到的增强免疫力的颗粒剂,分别取7.5g、15g、22.5g加纯水至150ml,充分混匀后作为低、中、高剂量组灌胃液。50.实验方法:取小鼠随机分成2组:即低剂量、中剂量、高剂量样品组和对照组,每组各12只。样品组灌胃量均为20ml/kg·bw,对照组给予等容积生理盐水,每天一次,在连续灌胃第26天,每只小鼠腹腔注射2%srbc 0.2ml免疫,继续灌胃4天后,测量左后足趾厚度,测量3次取平均值;然后在测量部位皮下注射20%srbc,每只20μl,注射后24小时测量左后足趾厚度,测量3次取平均值。结果见表1:51.表1实施例6制备得到的增强免疫力颗粒剂对小鼠迟发型变态反应的影响52.剂量(g/kg·bw)动物数(只)足趾肿胀度(mm)对照组120.53±0.20低剂量组120.69±0.20中剂量组120.83±0.23**高剂量组120.78±0.24*53.注:**表示与对照组相比,p《0.01;*表示与对照组相比,p《0.05。54.实验结果表明:中、高剂量样品组与对照组足趾肿胀度存在显著性差异,表明实施例6制备得到的增强免疫力的颗粒剂能增强小鼠免疫反应,提高其免疫力。55.实施例856.以实施例6制备得到的增强免疫力的中药组合物进行以下药效试验:57.实验动物:spf级雄性balb/c小鼠,体重20±2g,雌雄各半,由北京华阜生物科技股份有限公司提供。58.实验设备、试剂:二氧化碳培养箱、恒温水浴、离心机、手术器械、玻片架、200目筛网、srbc、补体(豚鼠血清)、hank's液、rpmi1640培养液、sa缓冲液、琼脂糖。59.样品:实施例6制备得到的增强免疫力的颗粒剂,分别取7.5g、15g、22.5g加纯水至150ml,充分混匀后作为低、中、高剂量组灌胃液。60.实验方法:取小鼠随机分成2组:即低剂量、中剂量、高剂量样品组和对照组,每组各12只。样品组灌胃量均为20ml/kg·bw,对照组给予等容积生理盐水,每天一次,在连续灌胃第30天,每只小鼠腹腔注射2%srbc 0.2ml免疫,继续灌胃4天后,颈椎脱臼处死,取出脾脏,放在盛有hank's液的小平皿内,轻轻磨碎脾脏,制成细胞悬液,经200目筛网过滤,或用4层纱布将脾磨碎,离心(1000r/min)10min,用hank's液洗2遍,最后将细胞悬浮在5ml rpmi1640培养液中,计数细胞,并将细胞浓度调整为5x106个/ml。也可将细胞悬浮在8ml hank's液。61.将表层培养基(1g琼脂糖加双蒸水至100ml)加热溶解后,放45~50℃水浴保温,与等量ph7.2~7.4、2倍浓度的hank's液混合,分装小试管,每管0.5ml,再向管内加50μl 10%srbc(v/v,用sa缓冲液配制),20μl脾细胞悬液(5×106个/ml)或25μl脾细胞悬液,迅速混匀,倾倒于已刷琼脂糖薄层的玻片上,做平行片,待琼脂凝固后,将玻片水平扣放在片架上,放入二氧化碳培养箱中孵育1~1.5h,然后用sa缓冲液稀释的补体(1:8)加入到玻片架凹槽内,继续温育1~1.5h后,计数溶血空斑数。结果见表2:62.表2实施例6制备得到的增强免疫力颗粒剂对小鼠抗体生成细胞的影响63.剂量(g/kg·bw)动物数(只)抗体生成细胞数/106(脾细胞)对照组12419.58±76.17低剂量组12473.75±97.24中剂量组12508.33±87.97*高剂量组12527.92±89.81*64.注:*表示与对照组相比,p《0.05。65.实验结果表明:中、高剂量样品组与对照组小鼠抗体生成细胞数存在显著性差异,表明实施例6制备得到的增强免疫力的颗粒剂有助于增强小鼠免疫力,提高其抗体生成细胞数量。66.实施例9-对比试验研究67.(1)中药提取物制备68.分别取黄精、枸杞子、巴戟天,分别粉碎过50目筛,加入5倍重量的纯化水,于95-100℃回流提取2次,每次30min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,分别制得黄精水提物、枸杞子水提物、巴戟天水提物;69.分别取西洋参和五味子,分别加入8倍重量60%v/v乙醇溶液,于60-80℃回流提取3次,每次50min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得干膏,分别制得西洋参乙醇提取物和五味子乙醇提取物;70.将沉香粉末加入25倍重量的95%v/v乙醇溶液,于温度60-70℃回流提取2次,每次浸泡60min,回流60min,合并滤液,在0.060mpa、60℃条件下浓缩,得沉香乙醇浸出物,即得沉香乙醇提取物。71.(2)制剂制备:参照实施例6颗粒剂制备方法,将黄精水提物、枸杞子水提物、巴戟天水提物、西洋参乙醇提取物、五味子乙醇提取物、沉香乙醇提取物分别制备成颗粒剂,得到黄精颗粒剂、枸杞子颗粒剂、巴戟天颗粒剂、西洋参颗粒剂、五味子颗粒剂、沉香颗粒剂。72.(3)药效试验研究:参照实施例8进行药效试验研究,将黄精颗粒剂、枸杞子颗粒剂、巴戟天颗粒剂、西洋参颗粒剂、五味子颗粒剂、沉香颗粒剂进行药效试验研究,依次为试验组1-6,各组分别取22.5g(高剂量)相应颗粒剂加纯水至150ml,充分混匀,依次得到试验样品1-6。实验结果表明:与实施例6中药组合物高剂量组相比,试验组1-6小鼠抗体生成细胞数存在显著性差异,而且试验组1-6小鼠抗体生成细胞数均低于实施例6中药组合物低剂量组(7.5g)。73.综上,本发明配方中各组分协同增效,显著提高增强免疫力效果,有效降低药剂用量。74.以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所做的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
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一种有助于增强免疫力的含沉香中药组合物及其制备方法、制剂与应用
作者:admin
2022-08-31 10:52:04
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