新型槲皮素氧化还原衍生物及作为BET抑制剂的用途的制作方法

有机化合物处理,合成应用技术新型槲皮素氧化还原衍生物及作为bet抑制剂的用途技术领域1.本发明涉及包含槲皮素衍生物或其药学上可接受的盐以及包含其作为有效成分的用于预防或治疗bet(溴结构域额外终端(bromodomain extra-terminal))蛋白相关疾病药物组合物。背景技术：2.组蛋白的翻译后修饰(post-translational modification；ptm)在真核细胞中与基因的表达及染色质的系统化的调节有关。特定赖氨酸残基中的组蛋白乙酰化为通过组蛋白乙酰化酶及组蛋白去乙酰化酶调节的翻译后修饰(ptm)。组蛋白乙酰化为称为溴结构域的保存的很好的蛋白质在组蛋白及其他蛋白质中直接与乙酰化赖氨酸结合动员蛋白复合物来控制基因的表达。在人类基因组中存在有超过60种含溴结构域蛋白。3.在含溴结构域蛋白中，bet家族包括brd2、brd3、brd4及brdt，除局限存在于睾丸的brdt以外，其他蛋白在多种组织中广泛表达。并且，据报告，bet蛋白家族与包括癌症、代谢疾病及炎症在内的多种疾病有关。4.例如，通过染色体易位诱发的brd4或brd3及睾丸核蛋白(nut)基因的肿瘤源性融合引起命名为nut中线癌的浸润性癌症(french et al.，j clin oncol，22(2004)，4135-9；french et al.，j clin pathol，63(2008)，492-6)。brd3/4溴结构域保存于它们的融合蛋白中，作为敲除(knockdown)或选择性bet溴结构域抑制剂的jq1在实验室内及动物肿瘤模型中都引起癌细胞的凋亡(filippakopoulos et al.，nature，468(2010)，1067-73)。jq1及其他选择性bet抑制剂与bet溴结构域结合来防止乙酰-赖氨酸结合，已知这是防止bet蛋白与染色质的相互作用，防止通过这种方式来调节转录。5.brd4通过核糖核酸干扰(rnai)筛选在急性髓系白血病(aml)中确认为靶标(zuber et al.，nature，478(2011)，524-8)。这样的发现在实验室内及活体内通过使用bet抑制剂jq1及i-bet151得到验证(dawson et al.，nature，478(2011)，529-33)。并且，已知bet抑制剂在急性白血病、多发性骨髓瘤及其他血液恶性肿瘤中具有广泛的抗癌活性。在多种肿瘤模型中，在bet抑制时观察到肿瘤源性转录因子myc的急性下调(delmore et al.，cell，146(2011)，904-17；mertz et al.，proc natl acad sci us a，108(2011)，16669-74)。最近的研究暗示bet抑制剂有能够在肺癌及脑癌等其他肿瘤中起作用的扩张可能性。6.据报告，化学结构及bet结合方式与jq1具有密切关联的另一种bet抑制剂i-bet762在小鼠模型中调节主要炎症基因的表达，在内毒素休克及细菌性败血症中保护人体(nicodeme et al.，nature，468(2010)，1119-23)。并且，这些结果在患有动脉粥样硬化、冠状动脉疾病、血脂异常、糖尿病及其他心血管疾病的患者中的临床试验中用来支持bet抑制剂rvx-208的临床评估(mcneill，curr opin investig drugs，3(2010)，357-64及www.clinicaltrials.gov)。7.查明rvx-208及i-bet762都上调在减少胆固醇的组织水平中起到重要作用的载脂蛋白a-i。并且，bet蛋白与多种病毒的增殖及转录调节相关，这可以看作bet抑制剂可以具有抗病毒活性(weidner-glunde，frontiers in bioscience 15(2010)，537-549)。8.虽然在临床及前临床中已知了几种溴结构域抑制剂，但仍迫切需要开发能够解决疾病的再发及对治疗剂的耐性问题且减少副作用的新型溴结构域抑制剂。9.另一方面，在许多生理学过程中都存在氧化还原反应，虽然氧分子为生命所必需，但会生成引起疾病的反应性分子。包括自由基在内的其他反应性化学物种也引起病理学状态。过去就知道与组织损伤相关的有氧代谢是由活性氧簇(ros)引起的。ros及近来已知的活性氮簇(rns)与激素一样作为细胞信号传递的信使，引起酶的化学变性等并引起氧化剂水平的变化。10.并且，在20种必需氨基酸中，半胱氨酸、蛋氨酸、酪氨酸及色氨酸尤其易于被氧化。因此，在人体内起到代谢作用的多种蛋白质物质引起金属键合(metal binding)、二硫键(disulfide bond)形成、甲基化(methylation)、乙酰化(acetylation)等多种变形。11.虽然对细胞的信号调节机制的研究至今仍聚焦于磷酸化，但本发明却是在对氧化及硝化应激引起疾病考虑根据“氧化还原状态(redox state)”的氧化(oxidation)、亚硝基化(s-nitrosylation)等氧化还原调节机制的氧化还原化学(redox chemistry)技术来完成的。即，本发明人基于bet抑制剂在识别组蛋白的赖氨酸残基时根据氧化还原状态使信号传递物质之间的结合程度不同的内容，考虑上述氧化还原状态来研究及开发新型溴结构域抑制剂。技术实现要素：12.技术问题13.本发明提供bet蛋白抑制活性优秀的新型槲皮素(quercetin)衍生物化合物。14.并且，本发明提供包含上述化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分的用于预防或治疗bet蛋白相关疾病的药物组合物。15.技术方案16.根据本发明的一方面，提供由下述化学式1表示的槲皮素衍生物化合物或其药学上可接受的盐。17.化学式1[0018][0019]在上述化学式1中，环x为或者取代或非取代的芳基，其中，a、b、c及d分别独立地为c、c(＝o)、n、o、s或无，y为c、c(＝o)、n、o或s，z为cr5或nr5，‑‑‑‑分别为无或ch2ch2ch2ch2ch3)、2-戊基(-ch(ch3)ch2ch2ch3)，3-戊基(-ch(ch2ch3)2)、2-甲基-2-丁基(-c(ch3)2ch2ch3)，3-甲基-2-丁基(-ch(ch3)ch(ch3)2)、3-甲基-1-丁基(-ch2ch2ch(ch3)2)、2-甲基-1-丁基(-ch2ch(ch3)ch2ch3)、1-己基(-ch2ch2ch2ch2ch2ch3)、2-己基(-ch(ch3)ch2ch2ch2ch3)、3-己基(-ch(ch2ch3)(ch2ch2ch3))、2-甲基-2-戊基(-c(ch3)2ch2ch2ch3)、3-甲基-2-戊基(-ch(ch3)ch(ch3)ch2ch3)、4-甲基-2-戊基(-ch(ch3)ch2ch(ch3)2)、3-甲基-3-戊基(-c(ch3)(ch2ch3)2)、2-甲基-3-戊基(-ch(ch2ch3)ch(ch3)2)、2,3-二甲基-2-丁基(-c(ch3)2ch(ch3)2)、3,3-二甲基-2-丁基(-ch(ch3)c(ch3)3)及辛基(-(ch2)7ch3)，但不限定于此。[0032]进而，在说明书、实施例及发明要求保护范围全文中使用的术语“烷基”包括所有非取代及取代的烷基，其中，后者是指包括三氟甲基及2,2,2-三氟乙基之类的卤素烷基等在内的在烃骨骼的一个以上的碳上具有取代氢的取代基的烷基残基。[0033]术语“cx-y”或“cx-cy”在与酰基、酰氧基、烷基、烯基、炔基或烷氧基等化学残疾一同使用时，看作包含链内含有x个至y个碳的基团。c0烷基在位于末端的情况下表示氢，在位于内部的情况下表示键合。例如，(c1-c6)烷基在链内含有1个至6个碳原子。[0034]“烷氧基”是指如上定义的上述烷基通过氧原子附着于母化合物的具有化学式-o-烷基的基团。例如，烷氧基的烷基残基可以具有1个至20个碳原子(即，c1-c20的烷氧基)、1个至12个碳原子(即，c1-c12的烷氧基)、1个至10个碳原子(即，c1-c10的烷氧基)或1个至6个碳原子(即，c1-c6的烷氧基)。适当的烷氧基的例可以有甲氧基(-o-ch3或-ome)、乙氧基(-och2ch3或-oet)及t-丁氧基(-oc(ch3)3或-o-tbu)，但不限定于此。[0035]“烯基”是指具有伯、仲、叔和/或季碳原子的包括直链型、支链型及环型基或它们的组合且具有一个以上的不饱和区域，即，碳-碳sp2双键的烃。例如，烯基可以具有2个至20个碳原子(即，c2-c20的烯基)、2个至12个碳原子(即，c2-c12的烯基)、2个至10个的碳原子(即，c2-c10的烯基)或2个至6个的碳原子(即，c2-c6的烯基)。适当的烯基的例可以有乙烯基(-ch＝ch2)、丙烯基(-ch2ch＝ch2)、环戊烯基(-c5h7)及5-己烯基(-ch2ch2ch2ch2ch＝ch2)，但不限定于此。[0036]“炔基”是指具有伯、仲、叔和/或季碳原子的包括直链型、支链型及环型基或它们的组合且具有一个以上的碳-碳sp三键的烃。例如，炔基可以具有2个至20个碳原子(即，c2-c20炔基)、2个至12个碳原子(即，c2-c12炔基)、2个至10个碳原子(即，c2-c10炔基)或2个至6个碳原子(即，c2-c6炔基)。适当的炔基的例可以有乙炔基(-c≡ch)及丙炔基(-ch2c≡ch)，但不限定于此。[0037]本技术中使用的术语“芳基”包括环的原子分别为碳、单环、双环或多环的取代或非取代的一价或二价芳香族烃基团。优选地，芳基环为6元至20元环、6元至14元环、6-至10元环，或者，更优选地，为6元环。芳基可以为2个以上的碳在2个相邻的环上具有2个以上的环的多环类，其中，这些环中的1个以上为芳香族，例如，其他环可以为环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/或杂环烷基。芳基可以为苯、萘、菲、蒽、茚、茚满、苯酚、苯胺。[0038]本技术中使用的术语“碳环烷基”、“环烷基烷基”或“(环烷基)烷基”是指被碳环基或环烷基取代的烷基。[0039]本技术中使用的术语“碳环”、“碳环基”或“环烷基”可以为单环、双环或多环，是指环的原子分别为碳的非芳香族饱和或不饱和、一价或二价环。环烷基可以在单环中具有3个至7个碳原子，在双环中可以具有7个至12个碳原子，在多环中可以具有约20个以下的碳原子。单环环烷基具有3个至7个环原子，更典型地，具有5个或6个环原子。双环环烷基可以具有7个至12个环原子，可以为融合环类、螺环类或桥环类。在例示性的环烷基中，原子可以按照双环[4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6]系统来排列。在特定实施方式中，环烷基包含3个至20个原子或3个至10个原子，或者，更优选地，包含3个至7个原子。环烷基的例可以为环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、环辛基等。若无其他明示，则环烷基可以被本技术记载的一个以上的取代基取代。[0040]本技术中使用的“杂环烷基”是指被杂环烷基取代的烷基。[0041]术语“杂环”、“杂环基”及“杂环烷基”是指环结构中包含1个以上的杂原子，优选地，包含1个至4个杂原子，更优选地，包含1个至2个杂原子的取代或非取代的一价或二价饱和或部分饱和非芳香族环结构，优选地，是指3元至10元环，更优选地，是指3元至7元环。并且，术语杂环”、“杂环基”及“杂环烷基”还包括2个以上的碳在2个相邻的环中具有共同的2个以上的环的多环类，其中，环中的一个以上为杂环，例如，其他环可以为环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/或杂环。双环及多环杂环基类可以为融合环、桥环或螺环类。取代的杂环包括被例如包括羰基在内的本技术记载的任意的取代基取代的杂环。杂环基包括例如哌啶、哌嗪、吡咯烷、吗啉、内酯、内酰胺等。追加例示性的杂环可以为二氢吡啶基、二氢吲哚基、四氢吡啶基(哌啶基)、四氢噻吩基、硫氧化四氢噻吩基、吲哚基、哌啶基、4-哌啶基、吡咯烷基、2-吡咯烷酮基、吡咯啉基、四氢呋喃基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、八氢异喹啉基、6h-1,2,噻二嗪基、2h,6h-1,5,2-二噻嗪基、吡喃基、色烯基、呫吨基、吩恶嗪基、2h-吡咯基、3h-吲哚基、4h-喹啉基、噻嗪基、萘啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、肉桂基、蝶啶基、4ah-咔唑基、咔唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、呋喃唑基、吩恶嗪基、异苯并二氢吡喃基、苯并二氢吡喃基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、哌嗪基、奎宁基、吗啉基及恶唑烷基(它们分别可以为取代或非取代的)，但不限定于此。[0042]“杂芳基”是指环内含有一个以上的杂原子的单环、双环或多环的取代或非取代的一价或二价芳香族基团。芳香族环中可以含有的杂原子的非限制例可以为氧、硫及氮。在多环杂芳基环类中，环类在2个以上的碳原子在2个相邻的环中具有2个以上的环，其中，环中的一个以上为杂芳香族，例如，其他环可以为环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/或杂环基。杂芳基包括例如苯并呋喃、苯并噻吩、吡咯、呋喃、噻吩、咪唑、吲哚、异吲哚、异恶唑、异噻唑、恶唑、噻唑、喹啉、异喹啉、吡唑、吡啶、吡嗪、哒嗪及嘧啶等(它们分别可以为取代或非取代的)。[0043]术语“杂环”、“杂环基”及“杂环烷基”是指环结构中包含1个以上的杂原子，优选地，包含1个至4个杂原子，更优选地，包含1个至2个杂原子的取代或非取代的一价或二价饱和或部分饱和非芳香族环结构，优选地，是指3元至10元环，更优选地，是指3元至7元环。并且，术语杂环”、“杂环基”及“杂环烷基”还包括2个以上的碳在2个相邻的环中具有共同的2个以上的环的多环类，其中，环中的一个以上为杂环，例如，其他环可以为环烷基、环烯基、环炔基、芳基、杂芳基和/或杂环。双环及多环杂环基类可以为融合环、桥环或螺环类。取代的杂环包括被例如包括羰基在内的本技术记载的任意的取代基取代的杂环。杂环基包括例如哌啶、哌嗪、吡咯烷、吗啉、内酯、内酰胺等。追加例示性的杂环可以为二氢吡啶基、二氢吲哚基、四氢吡啶基(哌啶基)、四氢噻吩基、硫氧化四氢噻吩基、吲哚基、哌啶基、4-哌啶基、吡咯烷基、2-吡咯烷酮基、吡咯啉基、四氢呋喃基、四氢喹啉基、四氢异喹啉基、十氢喹啉基、八氢异喹啉基、6h-1,2,噻二嗪基、2h,6h-1,5,2-二噻嗪基、吡喃基、色烯基、呫吨基、吩恶嗪基、2h-吡咯基、3h-吲哚基、4h-喹啉基、噻嗪基、萘啶基、喹喔啉基、喹唑啉基、肉桂基、蝶啶基、4ah-咔唑基、咔唑基、β-咔啉基、菲啶基、吖啶基、菲咯啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、呋喃唑基、吩恶嗪基、异苯并二氢吡喃基、苯并二氢吡喃基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、吡唑啉基、哌嗪基、奎宁基、吗啉基及恶唑烷基(它们分别可以为取代或非取代的)，但不限定于此。[0044]本技术书的术语“卤代”及“卤素”是指卤素，包括氯、氟、溴、碘。[0045]“氨基”表示-nh2基团。[0046]“氰基”表示-cn基团。[0047]“硝基”表示-no2基团。[0048]“羧基”表示-c(o)oh基团。[0049]“醛基”表示-cho基团。[0050]“烷氧羰基”表示-c(o)o(烷基)或-c(o)o(环烷基)基团，其中，上述烷基与环烷基与上述定义相同。[0051]“酰卤”表示包含-c(o)-卤素基团的化合物。[0052]本发明涉及由下述化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐。[0053]化学式1[0054][0055]在上述化学式1中，环x为或者取代或非取代的芳基，其中，a、b、c及d分别独立地为c、c(＝o)、n、o、s或无，y为c、c(＝o)、n、o或s，z为cr5或nr5，‑‑‑‑分别为无或单键，r1、r2及r5分别独立地为h、卤素、氰基、烷基、烯基、炔基、-c(＝o)ra、-c(＝o)n(ra)(rb)、-c(＝o)ora、-n(ra)(rb)、-n(ra)c(＝o)rb、-n(ra)s(＝o)rb、-n(ra)s(＝o)2rb、-no2、-ora、-oc(＝o)ra、-sra、-s(＝o)ra、-s(＝o)n(ra)(rb)、-s(＝o)2ra、-s(＝o)2n(ra)(rb)、环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基，r3可以为选自由h、烷基及-ora组成的组中的相同或互不相同的一种以上，r4可以为选自由h、烷基、烯基及炔基组成的组中的相同或互不相同的一种以上，ra及rb分别独立地为h、卤素、氰基、烷基、环烷基或杂环烷基。[0056]在一实施方式中，在上述化学式1的化合物中，上述环x可以为r3可以为选自由h、c1-c6烷基及-ora组成的组中的相同或互不相同的一种以上，ra可以为h、c1-c6烷基、环烷基或包含选自n、o或s中的杂原子的三元至十元杂环烷基，r6及r7可以分别独立地为h或c1-c6烷基。[0057]在一实施方式中，在上述化学式1的化合物中，y可以为n或o，z可以为cr5或nr5，r1、r2及r5可以分别独立地为h、c1-c6烷基、oh、或-o-c1-c6烷基。[0058]在一实施方式中，在上述化学式1的化合物中，上述环x可以为在一实施方式中，在上述化学式1的化合物中，上述环x可以为r8可以为h或c1-c6烷基，r9、r10或r11可以分别独立地为h、c1-c6烷基或-ora，其中，ra可以为h、c1-c6烷基或包含o的杂原子三元至十元杂环烷基。[0059]本发明的优选例如下，但不限定于此。[0060][0061][0062][0063][0064]本发明的化合物可以形成药学上可接受的盐。上述药学上可接受的盐只要是形成含有药学上可接受的阴离子的无毒性酸加成盐的酸就不受特别限制。例如，可以为通过盐酸、硫酸、硝酸、磷酸、氢溴酸、氢碘酸等无机酸、酒石酸、甲酸、柠檬酸、乙酸、三氯乙酸、三氟乙酸、葡萄糖酸、苯甲酸、乳酸、富马酸、马来酸等有机酸以及甲磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、萘磺酸等磺酸形成的酸加成盐。[0065]另一方面，本发明提供包含由上述化学式1表示的化合物或其药学上可接受的盐作为有效成分的用于预防或治疗bet蛋白相关疾病的药物组合物。[0066]本发明的药物组合物通过其包含的由化学式1表示的化合物抑制bet蛋白来在对预防或治疗与之相关的多种疾病有用。上述bet蛋白相关疾病可以为癌症、自身免疫或炎症性疾病、代谢疾病或病毒性疾病。[0067]在在本发明的一实例中，上述癌症可以为选自由血癌、多发性骨髓瘤、急性髓细胞性白血病、恶性淋巴瘤、再生障碍性贫血、胸腺癌、卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、结直肠癌、肝癌、胃癌、胰腺癌、结肠癌、腹膜转移癌、皮肤癌、膀胱癌、前列腺癌、甲状腺癌、肺癌、骨肉瘤、纤维瘤及脑肿瘤组成的组中的一种以上，但不限定于此。[0068]在本发明的一实例中，上述自身免疫性疾病或炎症性疾病可以为选自由类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮、多发性硬化、1型糖尿病、甲状腺机能亢进、重症肌无力、克罗恩病、强直性脊柱炎、银屑病、自身免疫性恶性贫血、干燥综合征、过敏、过敏性鼻炎、关节炎、哮喘、慢性阻塞性肺病、退行性关节疾病、皮炎、器官排斥、湿疹、肝炎、炎症性肠病、败血症、脓毒症综合征、感染性休克及非酒精性脂肪肝炎组成的组中的一种以上，但不限定于此。[0069]在本发明的一实例中，上述代谢疾病可以为选自由高甘油三酯血症、肥胖症、高脂血症、高胰岛素血症、高血糖、动脉硬化、高血压、2型糖尿病及胰岛素抵抗性疾病组成的组中的一种以上，但不限定于此。[0070]在本发明的一实例中，上述病毒性疾病可以为选自由脊髓灰质炎、急性出血性结膜炎、病毒性脑膜炎、手足口病、肝炎、肌炎、心肌炎、胰腺炎、流行性肌痛、脑炎、感冒、疱疹性口炎、口蹄疫、哮喘、细支气管炎、支气管炎、慢性阻塞性肺病、肺炎、鼻窦炎、中耳炎、单纯疱疹、带状疱疹、口腔炎及水痘组成的组中的一种以上，但不限定于此。[0071]根据本发明的再一实例，提供包含上述药物组合物的药物制剂。[0072]本发明的药物制剂可以为片剂、丸剂、散剂、胶囊剂、糖浆或乳液等多种口服给药形态，或者注射剂等肌肉内、静脉内或皮下给药的胃肠外给药形态。[0073]并且，除有效成分外，上述药物制剂还可以添加通常的无毒性的药学上可接收的添加剂，具体例如添加选自由载体、添加剂及赋形剂组成的组中的一种以上来以通常的方法配制。[0074]以下，通过下述实施例及试验例详细说明本发明。但下述实施例及试验例仅用于例示本发明，本发明的内容不限定于下述实施例及试验例。[0075]实施例[0076]通过核磁共振(nmr)及质谱分析法(ms)确认化合物的结构。使用bruker avance-400或bruker avance 300仪器检测核磁共振。用检测的溶剂为氘取代-二甲基亚砜(dmso-d6)、氘取代-三氯甲烷(cdcl3)及氘取代-甲醇(cd3od)，内标为四甲基硅烷(tms)。[0077]高效液相色谱法(hplc)通过快速色谱法或色谱柱层析来进行。[0078]在硅胶板上进行薄层色谱法(tlc)。在薄层色谱法中使用1000目的硅胶。并且，薄层色谱法中使用的硅胶板的尺寸为20μm-25μm，用于纯化生成物的硅胶板的尺寸为40μm至45μm。[0079]为了可视化，在水中使用紫外线、碘、高锰酸钾。[0080]本发明公知的起始物质可以通过本发明所属技术领域的通常的合成方法来制备，或者可以从alfa aesar公司、aldrich公司等购入。[0081]实施例1：合成化合物1(bbc0109)[0082]反应式[0083][0084]步骤1.制备3-(1h-苯二咪唑-5-基)-1-(2-羟基-4,6-二甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮[0085][0086]将1-(2-羟基-4,6-二甲氧基)苯乙烯酮(500mg，2.55mmol，1eq)溶于n,n-二甲基甲酰胺(dmf)(15ml)后，在0℃的温度下加入氢氧化钠(254.84mg，6.37mmol，60％纯度(purity)，2.5eq)与1h-苯并咪唑-5-甲醛(409.69mg，2.80mmol，1.1eq)，在25℃的温度下搅拌混合物12小时。反应结束后使用蒸馏水和乙酸乙酯萃取。使用无水硫酸钠干燥有机层，浓缩后通过色谱柱层析纯化来获得中间体3(300mg，924.98umol，收率(yield)36.30％)。[0087]lcms：rt＝0.821min，m/z：325.2(m+h)+[0088]步骤2.合成2-(1h-苯并咪唑-5-基)-3-羟基-5,7-二甲氧基-4h-苯并吡喃-4-酮[0089][0090]将3-(1h-苯并咪唑-5-基)-1-(2-羟基-4,6-二甲氧基苯基)丙-2-烯-1-酮(270mg，832.49umol，1eq)溶于甲醇(60mg)/水(30ml)后，在0℃的温度下加入氢氧化钠(170.09mg，4.25mmol，5.11eq)及过氧化氢(288.00mg，2.54mmol，244.07ul，30％纯度，3.05eq)，在25℃的温度下搅拌混合物12小时。反应结束后，使用蒸馏水稀释来将ph调节为5后，使用乙酸乙酯萃取。使用无水硫酸钠干燥有机层，浓缩后获得中间体4(120mg)。[0091]lcms：rt＝0.650min，m/z：339.0(m+h)+[0092]步骤3.制备2-(1h-苯并咪唑-5-基)-3,5,7-三羟基-4h-苯并吡喃-4-酮(bbc0109)[0093][0094]将2-(1h-苯并咪唑-5-基)-3-羟基-5,7-二甲氧基-4h-苯并吡喃-4-酮(50mg，147.79umol，1当量)溶于二氯乙烷(3ml)后，向其中加入三溴化硼(370.25mg，1.48mmol，142.40ul，10eq)后，在60℃的温度下搅拌12小时。反应结束后加入甲醇浓缩后，通过制备型高效液相色谱法(prep-hplc)纯化来获得化合物1(3.23mg，9.67umol，收率3.27％，92.9％纯度)。[0095]1h nmr(400mhz，methanol-d4)δppm 8.60(1h，s)，8.33(1h，s)，8.15-8.22(1h，m)，7.77(1h，d，j＝8.4hz)，6.49(1h，d，j＝2.0hz)，6.24(1h，d，j＝2.0hz)[0096]lcms：rt＝2.049min，m/z：311.0(m+h)+[0097]实施例2：合成化合物2(bbc0110)[0098]反应式[0099][0100]通过上述反应式从2-氧代-1,3-二氢苯并咪唑-5-羧酸1(196.0mg，1.1mmol，2.0eq)获得5-(3,5,7-三羟基-4-氧代-苯并吡喃-2-基)-1,3-二氢苯并咪唑-2-酮(5-(3,5,7-trihydroxy-4-oxo-chromen-2-yl)-1,3-dihydrobenzimidazol-2-one)(bbc0110)(2.64mg，7.3umol，收率3.6％，90.5％纯度)。[0101]lcms：rt＝2.270min，m/z：327.0(m+h)+[0102]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 10.71-10.88(1h，m)7.78-7.87(2h，m)7.08(1h，d，j＝8.4hz)6.39(1h，d，j＝1.6hz)6.15(1h，d，j＝2.0hz)。[0103]实施例3：合成化合物3(bbc0111)[0104]反应式1[0105][0106]反应式2[0107][0108]反应式3[0109][0110]通过上述反应式1-反应式3中的任一种反应式制备bbc0111的化合物。[0111]实施例4：合成化合物4(bbc0113)[0112]反应式[0113][0114]从2-氨基-5-溴-苯酚1(1.0g，5.32mmol，1.0eq)获得6-(3,5,7-三羟基-4-氧代-苯并吡喃-2-基)-3h-1,3-苯并恶唑-2-酮(bbc0113)(4.6mg，12.8umol，收率18.2％，91％纯度)。[0115]lcms：rt＝2.447min，m/z：328.0(m+h)+[0116]1h nmr(400mhz，meod)δppm 8.11(2h，s)，7.22(1h，br d，j＝8.0hz)，6.44(1h，s)，6.20(1h，s)[0117]实施例5：合成化合物5(bbc0114)[0118]反应式[0119][0120]从1h-吲哚-5-羧酸1(92.2mg，572.0umol，2.0eq)获得3,5,7-三羟基-2-(1h-吲哚-5-基)苯并吡喃-4-酮(bbc0114)(2.38mg，7.16umol，收率4.6％，93％纯度)。[0121]lcms：rt＝2.666min，m/z：310.0(m+h)+[0122]1h nmr(400mhz，meod)δppm 8.50(1h，d，j＝1.2hz)7.99(1h，dd，j＝8.8，1.6hz)7.50(1h，d，j＝8.8hz)7.32(1h，d，j＝3.2hz)6.58(1h，dd，j＝3.2，0.8hz)6.45(1h，d，j＝2.0hz)6.20(1h，d，j＝2.0hz)[0123]实施例6：合成化合物6(bbc0115)[0124]反应式[0125][0126]从1h-吲哚-6-羧酸1(106.4mg，660.1umol，2.0eq)获得3,5,7-三羟基-2-(1h-吲哚-6-基)苯并吡喃-4-酮(bbc0115)(4.73mg，13.8umol，收率8.0％，90.4％纯度)。[0127]lcms：rt＝2.711min，m/z：310.0(m+h)+[0128]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 12.52(1h，s)11.45(1h，brs)10.81(1h，s)9.48(1h，s)8.39(1h，s)7.82(1h，dd，j＝8.4，1.6hz)7.69(1h，d，j＝8.4hz)7.54(1h，t，j＝2.8hz)6.45-6.54(2h，m)6.21(1h，d，j＝2.0hz)[0129]实施例7：合成化合物7(bbc0116)[0130]反应式1[0131][0132]反应式2[0133][0134]反应式3[0135][0136]反应式4[0137][0138]通过上述反应式1至反应式4中的任一种方法制备化合物7(bbc0116)。[0139]实施例8：合成化合物8(bbc0309)[0140]反应式[0141][0142]从苯并吡喃-6-羧酸1(55mg，308.67umol，2eq)获得2-苯并吡喃-6-基-3,5,7-三羟基-苯并吡喃-4-酮(10.85mg，32.55umol，收率13.87％，97.893％纯度)。[0143]lcms：rt＝2.857min，m/z：327.0(m+h)+[0144]1h nmr(400mhz，dmso)：δ(ppm)12.44(1h，s)，7.95-7.84(2h，m)，6.88(1h，d，j＝8.40hz)，6.43(1h，d，j＝2.00hz)，6.18(1h，d，j＝2.00hz)，4.32-4.12(2h，m)，2.82(2h，t，j＝6.00hz)，2.04-1.83(2h，m)[0145]实施例9：合成化合物9(bbc0310)[0146]反应式[0147][0148]从苯并呋喃-5-羧酸(143mg，881.94umol，2eq)和2-苄氧基-1-(2,4-二苄氧基-6-羟基苯基)乙酮(200mg，440.0umol，1eq)获得2-(苯并呋喃-5-基)-3,5,7-三羟基-苯并吡喃-4-酮(bbc0310)(19.45mg，61.51umol，收率14.88％，98.112％纯度)。[0149]lcms：rt＝2.834min，m/z：311.0(m+h)+[0150]1h nmr(400mhz，二甲基亚砜(dmso)):δ(ppm)8.52(1h，s)，8.16(1h，d，j＝8.8hz)，8.10(1h，d，j＝2.40hz)，7.77(1h，d，j＝8.80hz)，7.12(1h，d，j＝1.2hz)，6.48(1h，d，j＝2.0hz)，6.20(1h，d，j＝2.00hz)。[0151]实施例10：合成化合物10(bbc0311)[0152]反应式[0153][0154]从2-苄氧基-1-(2,4-二苄氧基-6-羟基-苯基)乙酮(200mg，440.03umol，1eq)和2,3-二羟基苯并呋喃-5-羧酸(148.00mg，901.57umol，2.05eq)获得2-(2,3-二羟基苯并呋喃-5-基)-3,5,7-三羟基-苯并吡喃-4-酮(bbc0311)(41.24mg，126.61umol，收率36.88％，95.867％纯度)。[0155]lcms：rt＝2.436min，m/z：313.0(m+h)+[0156]1h nmr(400mhz，meod)：δ(ppm)8.09(1h，s)，8.01(1h，dd，j＝8.8，1.6hz)，6.85(1h，d，j＝8.8hz)，6.40(1h，d，j＝2.0hz)，6.18(1h，d，j＝2.4hz)，4.63(2h，t，j＝8.8hz)，3.27(2h，s)。[0157]实施例11：合成化合物11(bbc0312)[0158]反应式[0159][0160]从苯并呋喃-6-羧酸(300.0mg，1.85mmol，1.0eq)获得2-(2,3-二羟基苯并呋喃-6-基)-3,5,7-三羟基-苯并吡喃-4-酮(bbc0312)(29.12mg，88.7umol，收率36.9％，95.1％纯度)。[0161]lcms：rt＝2.762min，m/z：313.1(m+h)+[0162]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 12.36(1h，s)10.85(1h，br s)9.61(1h，br s)7.67(1h，dd，j＝8.0，1.2hz)7.53(1h，d，j＝1.2hz)7.39(1h，d，j＝8.0hz)6.46(1h，d，j＝2.0hz)6.20(1h，d，j＝2.0hz)4.58(2h，t，j＝8.8hz)3.24(2h，t，j＝8.8hz)。[0163]实施例12：合成化合物12(bbc0313)[0164]反应式[0165][0166]从2-(3,4-二羟基苯基)-3,5,7-三羟基-苯并吡喃-4-酮(15.0g，49.6mmol，1.0eq)获得2-(苯并呋喃-6-基)-3,5,7-三羟基-苯并吡喃-4-酮(bbc0313)(13mg，40.7umol，收率26.3％，97.1％纯度)。[0167]lcms：rt＝2.836min，m/z：97.1(m+h)+[0168]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 12.39(1h，s)8.43(1h，s)8.16(1h，d，j＝2.0hz)8.11(1h，dd，j＝8.4，1.6hz)7.82(1h，d，j＝8.4hz)7.07(1h，dd，j＝2.0，0.8hz)6.52(1h，d，j＝2.0hz)6.22(1h，d，j＝2.0hz)。[0169]实施例13：合成化合物13(bbc0406)[0170]反应式[0171][0172]从2,3-二氢苯并呋喃-5-甲醛1(500mg，3.37mmol，1eq)获得5,7-二甲氧基-2-(7-甲基-2,3-二氢苯并呋喃-5-基)-3h-喹唑啉-4-酮(bbc0406)(13mg，38.11umol，收率4.15％，99.2％纯度)。[0173]lcms：rt＝2.200min，m/z：339.1(m+h)+[0174]1h nmr(400mhz，chloroform-d)δppm 8.98(1h，br s)，7.71(1h，s)，7.60(1h，s)，6.80(1h，d，j＝2.4hz)6.44(1h，d，j＝2.4hz)，4.68(2h，t，j＝8.8hz)，3.98(3h，s)，3.92(3h，s)，3.30(2h，t，j＝8.8hz)，2.28(3h，s)。[0175]实施例14：合成化合物14(bbc0407)[0176]反应式[0177][0178]从2,3-二羟基苯并呋喃-5-甲醛(1g，6.75mmol，1eq)获得5,7-二甲氧基-2-(7-甲基苯并呋喃-5-基)-3h-喹唑啉-4-酮(bbc0407)(6.77mg，19.14umol，收率43.17％，95.070％纯度)。[0179]lcms：rt＝2.264min，m/z：337.1(m+h)+[0180]1h nmr(400mhz，meod)：δ(ppm)8.15(1h，s)，7.91(1h，d，j＝2.0hz)，7.85(1h，s)，7.00(1h，d，j＝2.0hz)，6.86(1h，d，j＝2.0hz)，6.61(1h，d，j＝2.0hz)，3.96(6h，m)，2.64(3h，s)。[0181]实施例15：合成化合物15(bbc0301)[0182]反应式[0183][0184]从3,4-二羟基苯甲醛(1.0g，7.24mmol，1.0eq)获得3,5,7-三羟基-2-[3-羟基-4-(恶丁环-3-基氧基)苯基]苯并吡喃-4-酮(bbc0301)(5.57mg，15.3umol，收率19％，98.3％纯度)。[0185]lcms：rt＝2.465min，m/z：359.0(m+h)+[0186]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 12.43(1h，s)10.82(1h，s)9.47-9.54(2h，m)7.72(1h，d，j＝2.4hz)7.58(1h，dd，j＝8.8，2.4hz)6.74(1h，d，j＝8.8hz)6.42(1h，d，j＝2.0hz)6.20(1h，d，j＝2.0hz)5.32(1h，t，j＝5.6hz)4.94(2h，t，j＝6.8hz)4.61(2h，dd，j＝7.6，5.2hz)。[0187]实施例16：合成化合物16(bbc0302)[0188]反应式[0189][0190]从4-羟基苯甲醛1(65mg，532.26umol，1.21eq)获得3,5,7-三羟基-2-[4-(恶丁环-3-基氧基)苯基]苯并吡喃-4-酮(1.69mg，4.49umol，收率46.95％，91％纯度)。[0191]lcms：rt＝2.792min，m/z：343.1(m+h)+[0192]1h nmr(400mhz，cd3od)δ8.19(2h，d，j＝8.8hz)，6.91(2h，d，j＝8.8hz)，6.41(1h，d，j＝2.0hz)，6.19(1h，d，j＝2.0hz)，5.41-5.35(1h，m)，5.08-5.04(2h，m)，6.74-4.69(2h，m)。[0193]实施例17：合成化合物17(bbc0303)[0194]反应式[0195][0196]从3,4-二羟基苯甲醛(200.0mg，1.45mmol，1.0eq)获得3,5,7-三羟基-2-[4-羟基-3-(恶丁环-3-基氧基)苯基]苯并吡喃-4-酮(bbc0303)(5.11mg，13.41umol，收率9.6％，94％纯度)。[0197]lcms：rt＝2.471min，m/z：359.0(m+h)+[0198]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 10.79(1h，s)9.93(1h，s)9.46(1h，s)7.70(1h，dd，j＝8.4，2.0hz)7.45(1h，d，j＝2.0hz)6.99(1h，d，j＝8.4hz)6.48(1h，d，j＝2.0hz)6.19(1h，d，j＝2.0hz)5.29(1h，t，j＝5.6hz)4.91(2h，t，j＝6.8hz)4.66(2h，dd，j＝7.6，5.6hz)。[0199]实施例18：合成化合物18(bbc0305)[0200]反应式[0201][0202]从3-溴-4-羟基-5-甲氧基-苯甲醛1(2.0g，8.66mmol，1.7ml，1.0eq)获得3,5,7-三羟基-2-[3-羟基-5-甲基-4-(恶丁环-3-基氧基)苯基]苯并吡喃-4-酮(bbc0305)(6mg，15.79umol，98％纯度)。[0203]lcms：rt＝2.607min，m/z：373.1(m+h)+[0204]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 12.31-12.49(1h，m)9.65-9.90(1h，m)7.59(1h，d，j＝2.0hz)7.45(1h，d，j＝1.6hz)6.39(1h，d，j＝2.0hz)6.18(1h，d，j＝2.0hz)5.14(1h，t，j＝5.6hz)4.73-4.81(2h，m)4.64-4.71(2h，m)2.24(3h，s)。[0205]实施例19：合成化合物19(bbc0306)[0206]反应式[0207][0208]从4-羟基-3,5-二甲基-苯甲醛1(1g，6.66mmol，1eq)获得2-[3,5-二甲基-4-(恶丁环-3-基氧基)苯基]-3,5,7-三羟基-苯并吡喃-4-酮(bbc0306)(23.28mg，61.68umol，收率15.81％，98.128％纯度)[0209]lcms：rt＝2.876min，m/z：371.0(m+h)+[0210]1h nmr(400mhz，dmso)：δ(ppm)7.85(2h，s)，6.44(1h，d，j＝2.00hz)，6.18(1h，d，j＝2.00hz)，4.94(1h，q，j＝6.20hz)，4.83(2h，t，j＝6.40hz)，4.80-4.76(2h，m)，2.23(6h，s)。[0211]实施例20：合成化合物20(bbc0307)[0212]反应式[0213][0214]从3-溴-4-羟基-5-甲氧基-苯甲醛1(2.0g，8.66mmol，1.7ml，1.0eq)获得3,5,7-三甲氧基-2-[4-羟基-3-甲基-5-(恶丁环-3-基氧基)苯基]苯并吡喃-4-酮(bbc0307)(5.99mg，15.0umol，收率6.9％，93.5％纯度)。[0215]lcms：rt＝2.654min，m/z：373.1(m+h)+[0216]1h nmr(400mhz，dmso-d6)δppm 12.44(1h，br d，j＝1.6hz)7.62(1h，s)7.31(1h，s)6.47(1h，d，j＝2.0hz)6.17(1h，d，j＝2.0hz)5.30(1h，br t，j＝5.6hz)4.91(2h，t，j＝6.8hz)4.65-4.72(2h，m)2.22(3h，s)。[0217]实施例21：合成化合物21(bbc0104)[0218]反应式[0219][0220]从1-(2,6-二羟基苯基)乙酮1(1.0g，6.57mmol，1.0eq)获得2-(3,4-二羟基苯基)-3,5-二羟基-苯并吡喃-4-酮(bbc0104)(19mg，64.89umol，收率52.48％，97.75％纯度)。[0221]lcms：rt＝0.735min，m/z：287(m+h)+[0222]1h nmr(400mhz，二甲基亚砜(dmso)-d6)δppm 12.41(1h，s)，9.60(2h，br s)，9.35(1h，br s)，7.74(1h，d，j＝2.0hz)，7.58-7.65(2h，m)，7.12(1h，d，j＝8.0hz)，6.91(1h，d，j＝8.0hz)，6.76(1h，d，j＝8.0hz)。[0223]实施例22：合成化合物22(bbc0105)[0224][0225]从1-(2,4-二羟基苯基)乙酮1(1.0g，6.57mmol，847.5ul，1.0eq)获得2-(3,4-二羟基苯基)-3,7-二羟基-苯并吡喃-4-酮(bbc0105)(12.0mg，39.95umol，收率40.4％，95.3％纯度)。[0226]lcms：rt＝3.420min，m/z：287.0(m+h)+[0227]1h nmr(400mhz，methanol-d4)δppm 7.99(1h，d，j＝9.2hz)7.77(1h，d，j＝2.0hz)7.67(1h，dd，j＝8.4，2.00hz)6.88-6.95(3h，m)。[0228]比较例[0229]从药明康德(上海)公司(wuxi apptec(shanghai)co.ltd)购入比较例1至比较例3的化合物来与本发明的新型槲皮素化合物比较bet抑制效果。[0230][0231]试验例[0232]为了评估本发明新型化合物抑制bet蛋白家族之一的brd2(bd1、bd2、bd1+bd2)、brd3(bd1、bd2、bd1+bd2)、brd4(bd1、bd2、bd1+bd2)的溴结构域与四乙酰化的组蛋白h4肽之间的相互作用的抑制能力，进行了下述实验。[0233]试验例1：对brd2蛋白的结合抑制效果[0234]通过下述实验评估本发明的化合物及比较例化合物对bet蛋白中的brd2蛋白的结合抑制效果。[0235]在白色optiplate-384微孔板(珀金埃尔默公司(perkinelmer))中，在二甲基亚砜(dmso)(100μm起始浓度)中以10mm的分析缓冲液的起始浓度开始将化合物以1∶5的比例传代稀释。在分析缓冲液(50mm的4-羟乙基哌嗪乙磺酸(hepes)，ph7.4；25mm的nacl；0.05％的吐温(tween)20；0.1％的牛血清白蛋白(bsa)；10mm的二硫苏糖醇(dtt))中制备由100nm的gst-brd2(bd1、bd2、bd1+bd2)与100nm的生物素化的乙酰化组蛋白h4(lys5、8、12、16)肽形成的混合物。向上述稀释液加入6μl的混合物后，分别加入10μg/ml浓度的分析缓冲液中的从珀金埃尔默公司购入6μl的预混合的alphalisa谷胱甘肽受体珠(alphalisa glutathione acceptor beads)及alphascreen链霉亲和素供体珠(alphascreen streptavidin donor beads)，在室温下，在暗处以300rpm的条件振荡培养各样品。然后，使用珀金埃尔默公司的alphascreen说明书通过珀金埃尔默公司的envision高通量多功能酶标仪(perkinelmer envision hts multilabel reader)测量信号。各培养板中含有不包含生物素化的乙酰化组蛋白h4肽及gst-brd2(bd1、bd2、bd1+bd2)而已分析缓冲液替代的阴性对照组。[0236]在将软件graphpad prism用于计算的情况下，将输入阴性对照组的值作为低的基准值。并且，移液阳性对照组(具有蛋白质/肽混合物的探针分子i-bet762)。使用graphpad prism 3.03软件(或更高版本)确定ic50值，结果如下述表1、图1及图2所示。[0237]表1[0238] 化合物brd2(bd1)brd2(bd2)brd2(bd1+bd2)比较例1rvx-20832005164329360比较例2bbc020665151》50000》20000比较例3bbc020429758534473431实施例1bbc01098626-9702实施例2bbc01109060‑‑实施例4bbc0113122485115-实施例5bbc01144136‑‑实施例6bbc01155238‑‑实施例8bbc03097035‑‑实施例9bbc031010080‑‑实施例10bbc031158503792-实施例11bbc03123686‑‑实施例12bbc03134627499-实施例15bbc030116946‑‑实施例16bbc03022399‑‑实施例17bbc03038348‑‑实施例18bbc03056547‑‑实施例19bbc03062706‑‑实施例20bbc030718481‑‑实施例21bbc01048518‑‑实施例22bbc01058885‑‑[0239]如上述表1所示，确认到与比较例1的化合物相比，本发明的实施例化合物对brd2蛋白的抑制活性都很优秀。尤其可知，与比较例1的化合物相比，实施例1的化合物的brd2(bd1)及brd2(bd1+bd2)的ic50值约为30％的水平。尤其可知，与比较例1的化合物相比，实施例11及实施例19的化合物的brd2(bd1)的ic50值小于10％。因此，本发明的化合物具有比现有的bet抑制剂(rvx-208)更为优秀的brd2蛋白抑制效果。[0240]试验例2：对brd3蛋白的结合抑制效果[0241]以与上述试验例1相同的方法进行确认本发明的化合物及比较例化合物对brd3(bd1、bd2、bd1+bd2)蛋白的结合抑制效果的实验。结果如下述表2所示。[0242]表2[0243] 化合物brd3(bd1)brd3(bd2)brd3(bd1+bd2)比较例1rvx-208233982033》100000比较例2bbc0206》50000》150000》50000比较例3bbc020445280-》100000实施例1bbc0109‑‑20776实施例2bbc0110‑‑20097实施例4bbc011317075‑‑实施例5bbc01147983-51347实施例6bbc01157180-86037实施例8bbc03091461‑‑实施例9bbc03103261‑‑实施例10bbc03117200‑‑实施例11bbc03122640‑‑实施例12bbc03131897‑‑实施例13bbc040611136‑‑实施例15bbc0301‑‑29362实施例17bbc03033181-95569实施例18bbc03053002‑‑实施例19bbc030614121344-实施例20bbc03079291‑‑[0244]如上述表2所示，确认到与比较例1的化合物相比，本发明的实施例化合物对brd3蛋白的抑制活性都很优秀。尤其可知，与比较例1的化合物相比，实施例1的化合物的brd3(bd1+bd2)的ic50值显著低。尤其可知，与比较例1的化合物相比，实施例12及实施例19的化合物的brd3(bd1)的ic50值小于10％。因此，本发明的化合物具有比现有的bet抑制剂(rvx-208)更为优秀的brd3蛋白抑制效果。[0245]试验例3：对brd4蛋白的结合抑制效果[0246]以与上述试验例1相同的方法进行确认本发明的化合物及比较例化合物对brd4(bd1、bd2、bd1+bd2)蛋白的结合抑制效果的实验。结果如下述表3、图3及图4所示。[0247]表3[0248] 化合物brd4(bd1)brd4(bd1+bd2)比较例1rvx-2082365697219比较例2bbc0206》50000》20000比较例3bbc02043513897174实施例1bbc0109-15579实施例2bbc01101551938634实施例15bbc0301-30270实施例20bbc0307-87294[0249]如上述表3所示，确认到与比较例1的化合物相比，本发明的实施例化合物对brd4蛋白的抑制活性都很优秀。尤其可知，与比较例1的化合物相比，实施例1的化合物的brd4(bd1+bd2)的ic50值显著低。因此，本发明的化合物具有比现有的bet抑制剂(rvx-208)更为优秀的brd4蛋白抑制效果。[0250]综上所述，本发明的化合物对brd2(bd1、bd2、bd1+bd2)、brd3(bd1、bd2、bd1+bd2)、brd4(bd1、bd2、bd1+bd2)蛋白都具有优秀的抑制效果，可以有效用于治疗及预防bet相关疾病。









图片声明：本站部分配图来自人工智能系统AI生成,觅知网授权图片,PxHere摄影无版权图库。本站只作为美观性配图使用,无任何非法侵犯第三方意图,一切解释权归图片著作权方,本站不承担任何责任。如有恶意碰瓷者,必当奉陪到底严惩不贷!




内容声明：本文中引用的各种信息及资料（包括但不限于文字、数据、图表及超链接等）均来源于该信息及资料的相关主体（包括但不限于公司、媒体、协会等机构）的官方网站或公开发表的信息。部分内容参考包括:(百度百科,百度知道,头条百科,中国民法典,刑法,牛津词典,新华词典,汉语词典,国家院校,科普平台)等数据,内容仅供参考使用,不准确地方联系删除处理！本站为非盈利性质站点,发布内容不收取任何费用也不接任何广告!




免责声明：我们致力于保护作者版权，注重分享，被刊用文章因无法核实真实出处，未能及时与作者取得联系，或有版权异议的，请联系管理员，我们会立即处理，本文部分文字与图片资源来自于网络，部分文章是来自自研大数据AI进行生成,内容摘自(百度百科,百度知道,头条百科,中国民法典,刑法,牛津词典,新华词典,汉语词典,国家院校,科普平台)等数据,内容仅供学习参考,不准确地方联系删除处理!的,若有来源标注错误或侵犯了您的合法权益，请立即通知我们，情况属实，我们会第一时间予以删除，并同时向您表示歉意,谢谢!