含有水溶性核蛋白的健康饮料的制作方法

食品,饮料机械,设备的制造及其制品加工制作,储藏技术1.本发明涉及一种含有水溶性核蛋白的健康饮料，具体而言，涉及一种具有对健康有益的作用机制、含有水溶性核蛋白作为有效成分的健康饮料。背景技术：2.作为含有水溶性核蛋白的健康饮料，已经存在着一些报告。3.例如，日本专利特开2004-016143号公报(专利文献1)公开了水溶性核蛋白的制造方法，日本专利特开2003-325149号公报(专利文献2)公开了含有水溶性核蛋白的健康饮料，国际公开第2006/070453号公报(专利文献3)公开了一种含有与以往的健康饮料相比进一步提高人类健康保持和/或增进效果的水溶性核蛋白的健康饮料，以及国际公开第2013/054525号公报(专利文献4)公开了以含有水溶性核蛋白、寡聚rna、锌、胶原蛋白、软骨素、透明质酸、维生素、以及谷胱甘肽为特征的健康饮料具有增加血中硫酸脱氢表雄酮(dhea-s)浓度、促进嗅觉受体基因的表达以及抑制tnfrsf10c基因或者tnfsf14基因的表达等的活性。4.另外，还报告有水溶性核蛋白(水解后的鲑鱼鱼白提取物)通过增加正常小鼠的海马胞苷水平来增强物体识别和位置记忆的情况(参照非专利文献1)。5.现有技术文献6.专利文献7.专利文献1:日本专利特开2004-016143号公报8.专利文献2:日本专利特开2003-325149号公报9.专利文献3:国际公开第2006/070453号公报10.专利文献4:国际公开第2013/054525号公报11.非专利文献12.非专利文献1:j med food，22(4)，2019，第408-415页。技术实现要素：13.发明要解决的问题14.本发明以提供具有对健康有益的作用机制的、含有水溶性核蛋白作为有效成分的健康饮料为课题。15.解决问题的技术手段16.本发明的发明人等为了解决上述课题而进行了深入研究，结果发现了一种含有水溶性核蛋白作为有效成分的健康饮料，其具有对健康有益的作用机制，例如，cd4/cd8细胞比值的上升、幼稚/记忆t细胞比值的上升、nk细胞数值的上升而使得免疫功能得以改善；8-ohdg浓度的降低而使得氧化应激降低；小颗粒ldl分级中的ldl粒径的增大、hdl-c浓度的上升而使得脂质代谢功能得以改善；血红蛋白浓度的上升以及血细胞比容的增加而使得贫血得以改善等，由此而完成了本发明。17.即，本发明涉及：18.[1]含有水溶性核蛋白作为有效成分的、包含用于使cd4/cd8细胞比值上升的组合物的健康饮料；[0019][2]含有水溶性核蛋白作为有效成分的、包含用于使幼稚/记忆t细胞比值上升的组合物的健康饮料；[0020][3]含有水溶性核蛋白作为有效成分的、包含用于使nk细胞数值上升的组合物的健康饮料；[0021][4]含有水溶性核蛋白作为有效成分的、包含用于使8-ohdg浓度降低的组合物的健康饮料；[0022][5]含有水溶性核蛋白作为有效成分的、包含用于使小颗粒ldl分级中的ldl粒径增大的组合物的健康饮料；[0023][6]含有水溶性核蛋白作为有效成分的、包含用于使hdl-c浓度上升的组合物的健康饮料；[0024][7]含有水溶性核蛋白作为有效成分的、包含用于使血红蛋白浓度上升的组合物的健康饮料；以及[0025][8]含有水溶性核蛋白作为有效成分的、包含用于使血细胞比容增加的组合物的健康饮料。[0026]发明效果[0027]通过本发明提供了一种健康饮料，该健康饮料能够实现cd4/cd8细胞比值的上升、幼稚/记忆t细胞比值的上升、nk细胞数值的上升、8-ohdg浓度的降低、小颗粒ldl分级中的ldl粒径的增大、hdl-c浓度的上升、血红蛋白浓度的上升以及血细胞比容的增加等的对健康有益的作用机制。具体实施方式[0028]更加详细地对本发明进行说明。[0029]本发明的健康饮料含有水溶性核蛋白作为有效成分。[0030]作为能够在本发明的健康饮料中使用的水溶性核蛋白，只要是从生物细胞提取核酸并通过酶处理进行低分子化而得到的水溶性核蛋白就没有特别限制，例如，能够列举出通过酶处理将鱼类的鱼白低分子化而做成水溶性的水溶性核蛋白。[0031]在此，水溶性是指能够以0.1质量％(质量百分比为0.1％)以上的浓度溶解于水的性质。[0032]作为上述鱼类的鱼白能够列举出鲑鱼、鳟鱼、鲱鱼等的鱼白，优选鲑鱼的鱼白。[0033]作为鱼类的鱼白的酶处理，例如能够列举出用蛋白酶对将鱼类的鱼白粉碎而得的悬浊液进行处理，然后用核酸酶进行处理的方法。[0034]通常，当从鱼白提取dna时，分子量为1000000以上，通过酶处理使其低分子化，作为优选的水溶性核蛋白，能够列举出优选含有质量百分比为20％以上、更优选含有质量百分比为30％以上的分子量为250～100000、优选分子量为500～13200或者250～6600的核苷/核苷酸/寡核苷酸/多核苷酸。[0035]更优选的是，含有质量百分比为2％以上的分子量为500～13200的核苷/核苷酸/寡核苷酸/多核苷酸，含有质量百分比为18％以上的分子量为250～6600的核苷/核苷酸/寡核苷酸/多核苷酸。[0036]本发明的健康饮料每720ml中，水溶性核蛋白的含量例如以含dna的鲑鱼鱼白提取物的质量计，为3～20g、优选为3～15g、更优选为4～10g、进一步优选为4～7g。[0037]本发明的健康饮料还能够含有rna来作为水溶性核蛋白以外的成分。[0038]作为上述rna，只要是对核糖核酸(rna)进行低分子化处理而得到的低分子rna就没有特别的限制，具体而言，能够适宜地列举出的是，将从啤酒酵母、圆酵母、乳酵母和面包酵母等的周知的酵母中提取、纯化的rna低分子化，从而得到含有20～50％的分子量为1000～33000的片段、且含有比分子量为1000～33000的片段的量更多量的、例如30～50％的分子量为1000以下的片段的rna。[0039]作为上述rna的制法、获得方法，能够列举出将从上述酵母中分离、提取、纯化的rna通过酶分解处理或者水解处理而低分子化的方法、化学合成或酶合成的方法、买入市售品的方法等的公知的方法，具体而言，能够优选地例示出通过使用具备热稳定性的核酸酶使rna的3',5'-磷酸二酯键水解来进行处理的方法来进行制备的方法(例如，参照日本专利特开2007-23024)。[0040]作为能够添加到本发明的健康饮料中的具体的rna，能够列举出含rna食用酵母等。[0041]在本发明的健康饮料含有rna的情况下，健康饮料每720ml中，rna的添加量例如以含rna的食用酵母提取物的质量计，为500～2000mg、优选为600～1500mg。[0042]本发明的健康饮料还能够含有胶原蛋白来作为水溶性核蛋白以外的成分。[0043]上述胶原蛋白包含具有以“‑甘氨酸-氨基酸-氨基酸‑”的肽片段为单位的重复结构的、在皮肤组织、软骨组织、骨组织、血管组织、器官和肌腱等组织中构成细胞外基质的纤维蛋白及其水解物(胶原蛋白肽)，以及它们的衍生物，作为胶原蛋白衍生物，能够列举出胶原蛋白及其水解物的去端肽胶原、酰基化物、琥珀酰化物等。一般的胶原蛋白的分子量为数万～30万左右，通常为不溶性，因此一般使用水溶性的胶原蛋白水解物(胶原蛋白肽)。[0044]作为胶原蛋白的水解物的制法、获得方法，例如，能够使用在进行猪或牛等的动物的真皮的清洗、骨头的破碎之后，进行碱处理、中和、脱脂、矿物质去除等，与含有胶原蛋白的组织相应的必要的前处理而获得提取物之后，通过酶等分解提取物，过滤后杀菌，喷雾干燥后进行粉末化的方法等公知的方法，除此之外，也能够另外使用市售产品。[0045]作为能够添加到本发明的健康饮料中的具体的胶原蛋白，猪胶原蛋白肽、鱼胶原蛋白肽(含有明胶)以及含胶原蛋白矿物复合体等。[0046]上述胶原蛋白能够单独使用，也可以使用两种以上的混合物。[0047]在本发明的健康饮料含有胶原蛋白的情况下，健康饮料每720ml中，胶原蛋白的添加量为30～150g、优选为50～100g、更优选为60～80g。[0048]本发明的健康饮料还能够含有软骨素来作为水溶性核蛋白以外的成分。[0049]作为上述软骨素，能够列举出软骨素类，该软骨素类为糖胺聚糖(粘多糖)的一种，即以在d-葡萄糖醛酸(glca)与n-乙酰-d-半乳糖胺(galnac)的二糖重复的糖链中结合有硫酸的结构为基本结构的软骨素及其衍生物和这些的盐，在软骨素中能够包括软骨素-4-硫酸(软骨素硫酸a)、皮肤素硫酸(软骨素硫酸b)、软骨素-6-硫酸(软骨素硫酸c)、软骨素硫酸d、软骨素-4，6-硫酸(软骨素硫酸e)等，在软骨素衍生物中能够包括软骨素与葡萄糖、半乳糖、麦芽糖、乳糖等还原糖的缩合物、芳基酯、磷酸酯、硫酸酯等衍生物等、在软骨素及其衍生物的盐中能够包括钠盐、钾盐等碱金属盐、盐酸盐、硫酸盐、铵盐等无机盐、乳酸盐、醋酸盐、三乙醇铵盐等有机盐等。[0050]作为软骨素类的制法、获得方法，能够列举出从鲨鱼软骨和鱼翅提取物等含有软骨素的天然物中分离、提取的方法、化学合成或酶合成的方法、买入市售品的方法等公知的方法，作为市售品能够优选地示例“鲨鱼软骨提取物(70)”(株式会社中原制)等的含软骨素的粘多糖蛋白复合体。[0051]在本发明的健康饮料含有软骨素的情况下，健康饮料每720ml中，软骨素的添加量为50～250mg、优选为100～200mg、更优选为120～200mg。[0052]本发明的健康饮料还能够含有透明质酸来作为水溶性核蛋白以外的成分。[0053]作为上述透明质酸，能够列举出透明质酸类、对这些透明质酸类使用透明质酸酶等的酶处理或者加热加压处理而得的低分子透明质酸或者透明质酸分解物，该透明质酸类为蛋白聚糖的一种，即以β-d-葡糖醛酸的1位与β-d-n-乙酰-葡糖胺的3位结合的二糖单元连接的结构为基本结构的透明质酸及其衍生物和这些的盐，在上述透明质酸衍生物中能够包括乙酰化的透明质酸(参照日本专利特开平8-53501号公报)、硫酸化的透明质酸(参照日本专利特开平10-195107号公报)、被乳酸等的生物体内有机酸取代的透明质酸(参照日本专利特开平6-16702号公报)、交联的透明质酸(参照日本专利特开平7-97401号公报)等，在透明质酸及其衍生物的盐中能够包括钠盐、钾盐、锂盐、镁盐、钙盐等金属盐类、赖氨酸盐、精氨酸盐、组氨酸盐等碱性氨基酸盐、铵盐、三乙醇胺盐、二异丙醇胺盐。[0054]作为透明质酸类的制法、获得方法能够列举出从鸡冠、哺乳类的脐带、鱼类、乳酸菌或链球菌属等的代谢物中分离、提取的方法、化学合成或酶合成的方法、购入市售品的方法等的公知的方法。[0055]作为能够添加到本发明的健康饮料中的具体的透明质酸，能列举出鸡冠提取物等。[0056]在本发明的健康饮料含有透明质酸的情况下，健康饮料每720ml中，透明质酸的添加量例如以含透明质酸的鸡冠提取物的质量计，为10～150mg、优选为30～100mg、更优选为40～80mg。[0057]本发明的健康饮料还能够含有锌来作为水溶性核蛋白以外的成分。[0058]作为上述锌，只要是能够以可用于食品的形态添加的话则没有特别的限制，能够以葡萄糖酸锌、硫酸锌，食用锌酵母等形式进行给药，但是优选添加能够进一步提高向体内的吸收率的含食用锌酵母，比较理想的是使用锌的质量百分比含量为2％、优选3％、更优选4％以上的酵母。作为市售品，能够列举出含锌酵母(戈路公司(grow company,inc.)制)、矿物酵母-zn(东方酵母工业株式会社(oyc oriental yeast co.,ltd)制)，含锌酵母(思宾格公司(bio springer)制)等食用酵母(含锌)，其中，能够优选地列举出含锌酵母(戈路公司(grow company,inc.)制)。[0059]在本发明的健康饮料含有锌的情况下，健康饮料每720ml中，锌的添加量例如以含锌食用酵母的质量计，为100～1500mg、优选为150～1500mg、更优选为200～800mg。[0060]本发明的健康饮料还含有维生素类来作为水溶性核蛋白以外的成分。[0061]作为上述维生素类，只要是能够实现上述本发明的效果的维生素类或者其衍生物、或者它们的盐则没有特别的限制，例如，能够列举出维生素c(抗坏血酸)、维生素b1(硫胺素)、维生素b2(核黄素)、维生素b6(吡哆醇)、维生素b12(钴胺素)、叶酸(维生素b9)、烟酸(维生素b3)、泛酸钙等，作为维生素c的衍生物或者它们的盐，能够例示出抗坏血酸钙、抗坏血酸钠，作为维生素b1的衍生物或者它们的盐，能够例示出盐酸硫胺素、硝酸硫胺素、硝酸双硫胺、硫酸硫胺二乙基酯、盐酸氟磺草胺、辛硫胺、苯磷硫胺等，作为维生素b2的衍生物或者它们的盐，能够例示出核黄素丁酸盐、核黄素磷酸钠，作为维生素b6的衍生物或者它们的盐，能够例示出盐酸吡哆醇、吡哆醛(磷酸吡哆醛)、吡哆胺，作为维生素b12或者其衍生物或者它们的盐，能够例示出氰钴胺、羟钴胺、醋酸羟钴胺、盐酸羟钴胺、甲钴胺、腺苷钴胺。上述维生素优选含有5种以上、更优选6种以上、进一步优选7种以上。具体的维生素类的优选组合包括维生素c、维生素b1、维生素b2、维生素b6、维生素b12、叶酸、烟酸、泛酸钙的全部。[0062]在本发明的健康饮料含有上述8种维生素的情况下，健康饮料每720ml中，维生素c的添加量为1500～7000mg、优选为2000～7000mg、更优选为3000～6000mg；健康饮料每720ml中，维生素b1的添加量为5～50mg、优选为10～40mg、更优选为10～30mg；健康饮料每720ml中，维生素b2的添加量为5～50mg、优选为10～50mg、更优选为14～40mg；健康饮料每720ml中，维生素b6的添加量为5～50mg、优选为10～50mg、更优选为15～45mg；健康饮料每720ml中，维生素b12的添加量为10～70mg、优选为20～70mg、进一步优选为25～65mg；健康饮料每720ml中，叶酸的添加量为1～8mg、优选为1～7mg、更优选为2.5～6.5mg；健康饮料每720ml中，烟酸的添加量为50～500mg、优选为100～400mg、更优选为120～350mg；健康饮料每720ml中，泛酸钙的添加量为30～300mg、优选为50～250mg、更优选为50～200mg。[0063]本发明的健康饮料还能够含有在上述记载的成分以外的其他成分来作为水溶性核蛋白以外的成分。[0064]作为上述的其他成分，能够列举出果糖葡萄糖浆、精制白砂糖、含稀有糖的糖浆、赤藓糖醇以及三氯蔗糖等甜味剂、菠萝汁等果汁、苯甲酸钠等防腐剂、焦糖色素等着色剂、乳化剂(例如，来源于大豆)、香精、酸味剂等，在本发明的健康饮料含有这些其他成分的情况下，能够适量地添加各成分。[0065]本发明的健康饮料具有cd4/cd8细胞比值的上升、幼稚/记忆t细胞比值的上升、nk细胞数值的上升、8-ohdg浓度的降低、小颗粒ldl分级中的ldl粒径的增大、hdl-c浓度的上升、血红蛋白浓度的上升以及血细胞比容的增加等的对健康有益的作用机制。[0066]在上述的作用机制之中，认为cd4/cd8细胞比值的上升、幼稚/记忆t细胞比值的上升、以及nk细胞数值的上升都有助于免疫力的提高。[0067]8-ohdg是反映生物体中的dna的氧化导致的损伤的程度的指标，因此能够认为8-ohdg浓度的降低使氧化导致的基因损伤的程度降低。[0068]另外，小颗粒ldl分级中的ldl粒径的增大由于以下的理由而被认为有助于健康。[0069]已有报告表明，小颗粒ldl与通常的大型ldl相比的话，与ldl受体的亲和性差，因此在肝脏中难以代谢，在血中长时间滞留，易与血管内皮的多糖相结合，由于是小颗粒因此容易进入血管壁，对抗氧化应激的抗氧化物质少，容易氧化变性，也被称为低密度胆固醇，为动脉硬化风险的主要原因。[0070]因此，能够认为小颗粒ldl分级中的ldl粒径的增大会减轻动脉硬化的发生风险，另外，已有报告称ldl的小颗粒化主要在中性脂肪(tg)为高值的情况下发生，因此，这也表明了小颗粒ldl的粒径的增大可能使脂质代谢活化。[0071]hdl-c负责多余胆固醇的排出，也称为高密度胆固醇，因此能够认为hdl-c浓度的上升使动脉硬化的发生风险降低。[0072]血红蛋白以及血细胞比容是贫血等的指标，因此血红蛋白浓度的上升以及血细胞比容的增加可能有助于改善贫血。[0073]实施例[0074]试验例1[0075]将表1所示的成分溶解在水中调制成720ml的健康饮料，进行在以下记载的评价。[0076]【表1】[0077]表1：健康饮料中包含的成分[0078][0079][0080]＜对象＞[0081]二十几岁至六十几岁的、不需要给药治疗的健康男女。[0082]试验对象人数：18名(男性12名，女性6名)[0083]＜试验方法＞[0084]根据试验食品的摄入标准，使试验对象一日摄入60ml的表1所示的健康饮料。原则上，指示进行早晚两次摄入。在遗忘的情况下或进行指示的时间段不能够摄入的情况下，使试验对象一天摄入60ml。在摄入前、摄入4周后以及摄入8周后，进行采血(1次采血量21ml)、采尿(1次采尿量10ml)、问诊、身体测量(身高、体重、bmi)以及血压测量(使用自动测量设备)。[0085]＜评价项目以及评价方法＞[0086]·t细胞数值、t细胞增殖系数值、cd4/cd8细胞比值、幼稚t细胞数值、幼稚/记忆t细胞比值、b细胞数值、nk细胞数值、cd8+cd28+t细胞数值[0087]从血液中求出各测定值，基于数据库进行数值化表示。[0088]·8-ohdg[0089]测定尿中的8-ohdg量。[0090]·小颗粒ldl的粒径[0091]通过电泳法对ldl进行细分级，确认到粒径25.5nm以下的小颗粒ldl。[0092]·hdl-c[0093]通过生化测试而确定。[0094]·血红蛋白(hg)、血细胞比容(ht)[0095]通过血液学检查而确定。[0096]＜评价结果＞[0097]在摄入表1所示的健康饮料前、摄入4周后以及摄入8周后的t细胞数值、t细胞增殖系数值、cd4/cd8细胞比值、幼稚t细胞数值、幼稚/记忆t细胞比值、b细胞数值、nk细胞数值、cd8+cd28+t细胞数值如表2所示。[0098]【表2】[0099]表2[0100][0101]p＜0.1、配对t检验、平均值±sd[0102]通过摄入表1所示的健康饮料，在cd4/cd8细胞比值、幼稚/记忆t细胞比值以及nk细胞数值中，显示出改善倾向(显著性水平10％(p＜0.1))。[0103]将摄入表1所示的健康饮料前、摄入4周后以及摄入8周后的尿中的8-ohdg浓度(ng/mg·c)显示在表3中。[0104]【表3】[0105]表3[0106][0107]p＜0.1、配对t检验、平均值±sd[0108]表示出了通过摄入表1所示的健康饮料，尿中8-ohdg浓度的降低倾向(显著性水平10％(p＜0.1))。[0109]将摄入表1所示的健康饮料前、摄入4周后以及摄入8周后的小颗粒ldl分级中的ldl粒径(nm)显示在表4中。[0110]【表4】[0111]表4[0112][0113]*：p＜0.05、威尔科克森符号秩和检验、平均值±sd[0114]通过摄入表1所示的健康饮料，小颗粒ldl分级中的ldl粒径(nm)显著地(p＜0.05)增大。[0115]将摄入表1所示的健康饮料前、摄入4周后以及摄入8周后的hdl-c浓度(mg/dl)显示在表5中。[0116]【表5】[0117]表5[0118]评价项目单位摄入前摄入4周后摄入8周后hdl-cmg/dl59.60±12.1060.27±12.4863.40±12.40**[0119]**：p＜0.01、配对t检验、平均值±sd[0120]通过摄入表1所示的健康饮料，hdl-c浓度(mg/dl)显著地(p＜0.01)上升。[0121]将摄入表1所示的健康饮料前、摄入4周后以及摄入8周后的血红蛋白(hg)的浓度(g/dl)以及血细胞比容(ht)的值(％)显示在表6中。[0122]【表6】[0123]表6[0124][0125]p＜0.1、*：p＜0.05、配对t检验、平均值±sd[0126]通过摄入表1所示的健康饮料，在血红蛋白(hg)的浓度(g/dl)中显示了上升倾向(显著性水平10％(p＜0.1))，另外，血细胞比容(ht)的值(％)显著地(p＜0.05)增加。









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