环状化合物及其使用方法与流程

有机化合物处理,合成应用技术环状化合物及其使用方法1.对以电子方式提交的文本文件的描述2.与本技术一起以电子方式提交的文本文件的内容通过引用整体并入本文：序列表的计算机可读格式副本，文件名：17367-0076wo1.txt，记录日期：2020年12月24日，文件大小：约214千字节。技术领域：：3.本技术涉及三环和其它多环化合物，它们可用于治疗如癌症等增殖性病症，以及自身免疫性和炎性病症。背景技术：：：4.malt1(粘膜相关性淋巴组织淋巴瘤易位蛋白1)是一种细胞内蛋白，其通过nf-κb的上游信号传导参与淋巴细胞增殖，以控制淋巴细胞的活化、存活、增殖和分化。与carma或card支架蛋白(例如，card11(胱天蛋白酶募集结构域家族成员11，也被称为carma1)、card14(胱天蛋白酶募集结构域家族成员14，也被称为carma2)、card10(胱天蛋白酶募集结构域家族成员10，也被称为carma3)或card9(胱天蛋白酶募集结构域家族成员9))和bcl10(b细胞cll/淋巴瘤10)一起，malt1是在细胞表面抗原受体活化时形成的cbm复合物的三个亚基之一。参见jaworski等人，《细胞与分子生命科学(cellmollifescience)》2016,73,459-473，以及juilland和thome.《免疫学前沿(frontiersinimmunology)》2018,9,1927。已知malt1通过至少两种机制介导nf-κb信号传导：首先，malt1作为支架蛋白发挥作用，募集nf-κb信号传导蛋白，如traf6、tab(例如，tab1、tab2、tab3)、tak1和nemo-ikkα/β；其次，作为一种半胱氨酸蛋白酶，其切割和灭活nf-κb信号传导的负调节因子，如relb、a20或cyld。参见rosebeck等人,《科学(science)》,2011,331,468-472。5.malt1的蛋白酶活性已成为潜在的治疗靶点，特别是在nf-κb和相关途径被认为发挥重要作用的情况下。活化的b细胞样弥漫性大b细胞淋巴瘤(abc-dlbcl)是侵袭性淋巴瘤，其通常以nf-κb过度活化为特征，并且研究表明，malt1蛋白酶抑制可显著抑制高度侵袭性abc型dlbcl的生长并促进其细胞凋亡。参见ferchu等人,《实验医学杂志(jexpmed)》2009,206,2313-2320；另参见hailfingers等人,《美国国家科学院院刊(procnatlacadsciusa)》2009,106,19946-19951。malt1或融合蛋白api2-malt1的已知肽底物包含a20、cyld、bcl10、relb、regnase-1、roquin-1、nik和limala。参见rebeaud等人,《自然免疫学(natimmunol)》2008,9,272-281；另参见coornaert等人,《自然免疫学》20008,9,263-271；staal等人,《欧洲分子生物学学会杂志(emboj)》2011,30,1742-1752；hailfinger等人,《美国国家科学院院刊(pnas)》2011,108,14596-14601；jeltsch等人,《自然免疫学》2014,15,1079-1089；uehata等人,《细胞(cell)》2013,153,1036-1049；nie等人,《自然通讯(natcommun)》2015,6,5908；以及baens等人,《公共科学图书馆-综合(plosone)》2014,9,e103774。malt1底物的一种一般概况描述于以下文献中：kasperkiewicz等人《科学报告(scientificreports)》8.1(2018):1-10。6.此外，已在abc-dlbcl中鉴定出几种导致生成组成型活性malt1的染色体易位，并且关于malt1融合蛋白api2-malt1/igh-malt1导致独立于上游刺激的nf-κb活化的鉴定进一步突出了这种蛋白质在癌症和各种疾病中的重要性。参见farinha等人,《临床肿瘤学杂志(jclinicaloncology)》2005,23,6370-6378。进一步地，malt1已被证明与几种不同类型的癌症有关，例如血液恶性肿瘤(如套细胞淋巴瘤)、慢性淋巴细胞性白血病(cll)和实体瘤(如肺腺癌、乳腺癌、胰腺癌和胶质母细胞瘤)。参见jiang等人,《癌症研究(cancerresearch)》2011,71,2183-2192；另参见pan等人,《分子癌症研究(molcancerres)》2016,14,93-102，penas等人,《血液(blood)》2010,115,2214-2219以及《分子与细胞医学杂志jcellmolmed.》2020jul；24(13):7550-7562。malt1作为一种免疫调节蛋白，也参与先天性和适应性免疫，并且可能对多种炎性病症产生影响，例如，牛皮癣、多发性硬化症、类风湿性关节炎、干燥综合征、溃疡性结肠炎和由慢性炎症引起的不同类型的过敏性病症。参见afofina等人,《欧洲生化学会联合会杂志(febsjournal)》2015,doi:10.1111/febs.13325；另参见lowes等人,《免疫学年鉴(annreviewimmunology)》2014,32,227-255；jabara等人,《变态反应与临床免疫学杂志(jallergyclinimmunology)》2013,132,151-158；streubel等人,《临床癌症研究(clincancerresearch)》2004,10,476-480；以及liu等人,《肿瘤靶标(oncotarget)》2016,1-14。最近，研究结果还表明了malt1在控制调节性t细胞(treg)功能和体内平衡中的重要性。正在进行研究以确认malt1抑制剂单独或与免疫检查点机制联合治疗实体瘤患者的潜力。然而，目前尚无malt1抑制剂被批准用于治疗用途。技术实现要素：7.因此，本文提供了一种式(i)化合物：[0008][0009]或其药学上可接受的盐，其中x、y、z、n、r1、r2、r3、m、r4、r5、r6、ra、rb、rc、rd、re和rf如本文所定义。[0010]本文还提供了一种药物组合物，其包括式(i)化合物或其药学上可接受的盐以及至少一种药学上可接受的赋形剂。[0011]还提供了用于在有需要的受试者中治疗cbm复合物途径相关性癌症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0012]还提供了用于在有需要的受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括：[0013](a)将所述癌症鉴定为cbm复合物途径相关性癌症；以及[0014](b)向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0015]还提供了用于在有需要的受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括：[0016]将有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物施用于被鉴定为患有cbm复合物途径相关性癌症的受试者[0017]还提供了用于在受试者中治疗malt1相关性癌症的方法，所述方法包括向被鉴定或诊断为患有malt1相关性癌症的受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0018]还提供了用于在有需要的受试者中治疗癌症的方法，所述方法包括：[0019](a)确定所述癌症与malt1基因、malt1蛋白酶或二者中任一个的表达或活性或水平的失调有关；以及[0020](b)向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0021]还提供了用于在需要此类治疗的患有癌症的受试者中抑制转移的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0022]还提供了用于在有需要的受试者中治疗自身免疫性病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0023]还提供了用于在有需要的受试者中治疗cbm复合物途径相关性疾病或病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0024]还提供了用于在有需要的受试者中治疗疾病或病症的方法，所述方法包括：[0025](a)将所述癌症鉴定为cbm复合物途径相关性疾病或病症；以及[0026](b)向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0027]还提供了用于在有需要的受试者中治疗疾病或病症的方法，所述方法包括：[0028]将有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物施用于被鉴定为患有cbm复合物途径相关性疾病或病症的受试者。[0029]还提供了用于在受试者中治疗malt1相关性自身免疫性病症的方法，所述方法包括向被鉴定或诊断为患有malt1相关性自身免疫性病症的受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0030]还提供了用于在受试者中治疗malt1相关性自身免疫性病症的方法，所述方法包括向被鉴定或诊断为患有malt1相关性自身免疫性病症的受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0031]还提供了用于在有需要的受试者中治疗自身免疫性病症的方法，所述方法包括：[0032](a)确定所述自身免疫性病症与malt1基因、malt1蛋白酶或二者中任一个的表达或活性或水平的失调有关；以及[0033](b)向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0034]还提供了用于在受试者中治疗malt1相关性自身免疫性病症的方法，所述方法包括将有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物施用于被确定为患有malt1相关性自身免疫性病症的受试者。[0035]还提供了用于在有需要的受试者中治疗炎性病症的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0036]还提供了用于在受试者中治疗malt1相关性炎性病症的方法，所述方法包括向被鉴定或诊断为患有malt1相关性炎性病症的受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0037]还提供了用于在受试者中治疗malt1相关性炎性病症的方法，所述方法包括向被鉴定或诊断为患有malt1相关性炎性病症的受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0038]还提供了用于在有需要的受试者中治疗炎性病症的方法，所述方法包括：[0039](a)确定所述炎性病症与malt1基因、malt1蛋白酶或二者中任一个的表达或活性或水平的失调有关；以及[0040](b)向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物。[0041]还提供了用于在有需要的受试者中治疗malt1相关性炎性病症的方法，所述方法包括将有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或如本文所述的药物组合物施用于被确定为患有malt1相关性炎性病症的受试者。[0042]还提供了用于在哺乳动物细胞中抑制cbm复合物途径活性的方法，所述方法包括使所述哺乳动物细胞与式(i)化合物或其药学上可接受的盐接触。[0043]还提供了用于在哺乳动物细胞中抑制malt1蛋白酶活性的方法，所述方法包括使所述哺乳动物细胞与式(i)化合物或其药学上可接受的盐接触。[0044]还提供了式(i)化合物或其药学上可接受的盐用于治疗cbm复合物途径相关性疾病或病症的用途。[0045]还提供了式(i)化合物或其药学上可接受的盐，其用于制备用于治疗cbm复合物途径相关性疾病或病症的药物。[0046]还提供了治疗患有malt1相关性癌症的个体的方法，所述方法包含在施用其它抗癌药(例如，第一malt1抑制剂或另一种malt1抑制剂)之前、期间或之后，施用式(i)化合物或其药学上可接受的盐。[0047]本文还提供了一种用于制备式(i)化合物或其药学上可接受的盐的过程。[0048]本文还提供了一种通过如本文定义的制备化合物的过程获得的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。[0049]除非另有定义，否则本文所用的所有技术和科学术语都具有与本公开所属领域的普通技术人员通常所理解的含义相同的含义。本文中描述了用于本公开中的方法和材料；还可以使用本领域已知的其它合适的方法和材料。这些材料、方法、和实例仅是说明性的并且不旨在是限制性的。本文所提及的所有出版物、专利申请、专利、序列、数据库条目和其它参考文献均通过引用整体并入。在发生冲突的情况下，应以本说明书(包含定义)为准。[0050]本公开的其它特征以及优点通过以下详细描述以及权利要求将会变得显而易见。具体实施方式[0051]定义[0052]如本文所使用的，术语“化合物”旨在包含所描绘结构的所有立体异构体、几何异构体、互变异构体和同位素富集的变体。除非另外说明，否则本文按名称或结构确定为一种特定互变异构形式的化合物旨在包含其它互变异构形式。[0053]如本文所使用的，术语“互变异构体”是指其结构在原子排列上明显不同，但是以容易且快速的平衡存在的化合物，并且应理解，本文提供的化合物可描绘为不同的互变异构体，并且当化合物具有互变异构体形式时，所有互变异构体形式都意图在本公开的范围内，并且化合物的命名不排除任何互变异构体。以下是包含的互变异构形式的实例：[0054][0055]应当理解，本文提供的某些化合物可以含有一个或多个不对称中心，并且因此可以以异构体的混合物(如外消旋混合物)或对映异构体纯的形式进行制备和分离。[0056]术语“卤基”是指元素周期表第17族的卤素之一。具体地说，该术语是指氟、氯、溴和碘。优选地，该术语是指氟或氯。[0057]术语“c1-c6烷基”是指含有1个、2个、3个、4个、5个或6个碳原子的直链或支链烃链，例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲-丁基、叔丁基、正戊基和正己基。类似地，c1-c3烷基是含有1个、2个或3个碳原子的直链或支链烃链。[0058]术语“c1-c6卤代烷基”是指被至少一个在每次出现时独立选择的卤素原子(例如氟、氯、溴和碘)取代的烃链。卤素原子可以存在于烃链上的任何位置。类似地，c1-c3卤代烷基是含有被至少一个卤素原子取代的1个、2个或3个碳原子的直链或支链烃链。例如，c1-c3卤代烷基可以指氯甲基、氟甲基、三氟甲基、氯乙基(例如1-氯乙基和2-氯乙基)、三氯乙基(例如1,2,2-三氯乙基、2,2,2-三氯乙基)、氟乙基(例如1-氟甲基和2-氟乙基)、三氟乙基(例如1,2,2-三氟乙基和2,2,2-三氟乙基)、氯丙基、三氯丙基、氟丙基、三氟丙基。[0059]术语“c1-c6烷氧基”是指通过氧与分子连接的c1-c6烷基。这包含烷基部分可以是直链或支链的部分，如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、正戊氧基和正己氧基。[0060]术语“c1-c6卤代烷氧基”是指c1-c6烷基，其通过氧与分子连接并且其中烷基的至少一个氢原子被卤素替换。这包含烷基部分可以是直链或支链的部分，如氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基或三氟丙氧基。[0061]在化合价允许时，代表单键或双键。例如，[0062][0063]如本文所使用的，术语“氰基”是指-cn基团。[0064]如本文所使用的，术语“羟基”是指-oh基团。[0065]如本文所使用的，术语“氨基”是指-nh2基团。[0066]如本文所使用的，术语“芳基”是指6-10个全碳单环或双环基团，其中系统中的至少一个环是芳香族的。芳基的非限制性实例包含苯基、萘基、四氢萘基。在其中只有一个环是芳香族的双环系统中，非芳香族环可以是如本文所定义的环烷基。[0067]如本文所使用的，术语“杂芳基”是指5-10元单环或双环基团，其中系统中的至少一个环是芳香族的；其中系统中至少一个环中的一个或多个碳原子被独立地选自n、o和s的杂原子替换。杂芳基包含其中一个或多个基团被氧化的环，如吡啶酮部分。杂芳基的非限制性实例包含吡啶、嘧啶、吡咯、咪唑和吲哚。在其中只有一个环是芳香族的双环系统中，非芳香族环可以是如本文所定义的环烷基或杂环基。[0068]如本文所使用的，术语“环烷基”是指饱和或部分不饱和的3-10个单环或双环烃基；其中双环系统包含稠环系统、螺环系统(任选地被称为“螺环烷基”基团)和桥环系统。环烷基的非限制性实例包含环丙基、环己基、螺[2.3]己基和双环[1.1.1]戊基。[0069]术语“杂环基”是指饱和或部分不饱和的3-12元烃单环或双环系统，其不是芳香族的，在环内具有至少一个选自n、o和s的杂原子。双环杂环基包含稠环系统、螺环系统(任选地被称为“螺杂环基”基团)和桥环系统。杂环基环系统可以在一个或多个c、n或s环成员处包含氧基取代。杂环基可以表示为例如“5-10元杂环基”，其是含有5个、6个、7个、8个、9个或10个原子的环系统，其中至少一个原子是杂原子。例如，可以存在1个、2个或3个杂原子，任选地1个或2个。杂环基可以通过任何碳原子或通过如氮等杂原子与分子的其余部分键合。示例性杂环基包含但不限于哌啶基、哌嗪基、吗啉基、四氢吡喃基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、2-氮杂螺[3.3]庚烷基、吡咯烷-2-酮、环丁砜、异噻唑啉s,s-二氧化物和十氢萘基。[0070]如本文所使用的，术语“成对”是指与分子中的相同原子连接的取代基原子或基团。[0071]如本文所使用的，术语“邻位”是指与分子中的相邻原子连接的取代基原子或基团。取代基原子或基团之间的立体化学关系可以是顺式、反式、未定义或未解析的。[0072]如本文所使用的，术语“氧基”是指连接至碳原子的“＝o”基团。[0073]如本文所使用的，符号描绘了原子或部分与分子其余部分中的指定原子或基团的连接点。[0074]应当理解，式(i)化合物中包括原子x、y和z的环不包含多于两个相邻的氮原子。[0075]式(i)化合物包含其药学上可接受的盐。另外，式(i)化合物还包含此类化合物的其它盐，其不一定是药学上可接受的盐，并且可用作用于制备和/或纯化式(i)化合物和/或用于分离式(i)化合物的对映异构体的中间体。式(i)化合物的药学上可接受的盐的非限制性实例包含三氟乙酸盐和盐酸盐。[0076]将进一步理解，可以以溶剂化物的形式分离式(i)化合物或其盐，并且因此任何此类溶剂化物都包含在本公开的范围内。例如，式(i)化合物及其盐可以与药学上可接受的溶剂(如水、乙醇等)一起以未溶剂化形式和溶剂化形式存在。[0077]在一些实施例中，式(i)化合物包含实例1-211的化合物及其立体异构体和药学上可接受的盐。在一些实施例中，式(i)化合物包含实例1-211的化合物及其药学上可接受的盐。在一些实施例中，实例1-211的化合物呈游离碱形式。在一些实施例中，实例1-211的化合物呈药学上可接受的盐的形式。[0078]术语“药学上可接受的”表示该化合物或其盐或组合物在化学和/或毒理学上与构成调配物的其它成分和/或用所述调配物治疗的受试者相容。[0079]保护基团可以是保护潜在反应性官能团免受不期望的化学转化影响的临时取代基。所使用的特定保护基团的选择完全在本领域普通技术人员的技能范围内。许多考虑因素可以决定保护基团的选择，包含但不限于被保护的官能团、分子中存在的其它官能团、合成序列每个步骤的反应条件、分子中存在的其它保护基团、官能团对去除保护基团所需的条件的耐受性，以及本文提供的化合物热分解的反应条件。已经对保护基化学领域进行了回顾(greene,t.w.andwuts,p.g.m.《有机合成中的保护基(protectivegroupsinorganicsynthesis)》,第2版,编者：wiley:纽约,1991)。[0080]氮保护基团可以是保护胺部分免受不期望的化学转化影响的任何临时取代基。当此类保护基团与胺键合时形成的部分的实例包含但不限于烯丙胺、苄胺(例如，苄胺、对甲氧基苄胺、2,4-二甲氧基苄胺和三苯甲胺)、乙酰胺、三氯乙酰胺、三氟乙酰胺、戊-4-烯酰胺、邻苯二甲酰亚胺、氨基甲酸酯(例如，氨基甲酸甲酯、氨基甲酸叔丁酯、氨基甲酸苄酯、氨基甲酸烯丙酯、氨基甲酸2,2,2-三氯乙基酯和氨基甲酸9-芴基甲酯)、亚胺和磺酰胺(例如，苯磺酰胺、对甲苯磺酰胺和对硝基苯磺酰胺)。[0081]氧保护基团可以是保护羟基部分免受不期望的化学转化影响的任何临时取代基。当此类保护基团与羟基键合时形成的部分的实例包含但不限于酯(例如，乙酰基、叔丁基羰基和苯甲酰基)、苄基(例如，苄基、对甲氧基苄基和2,4-二甲氧基苄基和三苯甲基)、碳酸酯(例如，碳酸甲酯、碳酸烯丙酯、碳酸2,2,2-三氯乙酯和碳酸苄酯)缩酮、缩醛和醚。[0082]本文提供的化合物还可以在构成此类化合物的一个或多个原子上含有非天然比例的原子同位素。也就是说，原子(特别是当关于式(i)化合物提及时)包括该原子的所有同位素和同位素混合物，这些同位素或同位素混合物是天然存在的或合成产生的，具有天然丰度或呈同位素富集的形式。例如，当提及氢时，应理解为是指1h、2h、3h或其混合物；当提及碳时，应理解为是指11c、12c、13c、14c或其混合物；当提及氮时，应理解为是指13n、14n、15n或其混合物；当提及氧时，应理解为是指14o、15o、16o、17o、18o或其混合物；并且当提及氟时，应理解为是指18f、19f或其混合物；除非另有明确说明。例如，在氘烷基和氘烷氧基中，一个或多个氢原子被氘(2h)特异性地替换。由于一些上述同位素是放射性的，因此本文提供的化合物还包括具有一个或多个原子的一个或多个同位素及其混合物的化合物，包含放射性化合物，其中一个或多个非放射性原子已被其富放射性同位素之一替换。放射性标记的化合物可用作治疗剂，例如癌症治疗剂、研究试剂(例如，测定试剂)和诊断剂(例如，体内显像剂)。本文提供的化合物的所有同位素变化，不论是放射性的还是非放射性的，均旨在涵盖在本公开的范围内。[0083]出于说明性目的，本文提供了用于制备化合物的一般方法以及关键中间体。有关各个反应步骤的详细说明，请参见下文的“实例”部分。本领域技术人员将理解，可以使用其它合成路径来合成本发明的化合物。尽管在方案中描述了特定的起始材料和试剂，并在下文进行了讨论，但也可以轻松取代其它起始材料和试剂，以提供多种衍生物和/或反应条件。另外，根据本公开，可以使用本领域技术人员熟知的常规化学方法进一步修饰通过下述方法制备的许多化合物。[0084]所选化合物充当malt1抑制剂的能力可以通过本文所述的生物学测定法来证明。ic50值在表a中示出。[0085]式(i)化合物或其药学上可接受的盐可用于治疗可以用malt1抑制剂治疗的疾病和病症，如malt1相关性癌症，包含血液癌症和实体瘤、malt1相关性自身免疫性病症以及malt1相关性炎性病症。[0086]如本文所使用的，术语“治疗(treat或treatment)”是指治疗性或减缓性措施。有益或期望的临床结果包含但不限于完全或部分地缓解与疾病或病症或病状相关的症状、减轻疾病程度、稳定疾病状态(即，不恶化)、延迟或减慢疾病的进展、改善或减轻疾病状态(例如，一种或多种疾病症状)以及缓解(无论是部分还是全部)，无论是可检测的还是不可检测的。“治疗”还可以意味着与未接受治疗的情况下的预期生存期相比，生存期延长。[0087]如本文所使用的，术语“受试者”是指任何动物，包含哺乳动物，如人。在一些实施例中，受试者是人。在一些实施例中，受试者已经经历和/或表现出待治疗和/或预防的疾病或病症的至少一种症状。[0088]如本文所使用的，术语“儿科受试者”是指在诊断或治疗时未满21岁的受试者。术语“儿科”可以进一步分为不同的亚群，包含：新生儿(从出生到生命的第一个月)；婴儿(1个月到2岁)；儿童(2岁到12岁)；和青少年(12岁到21岁(至多但不包含22岁生日))。berhmanre、kliegmanr、arvinam、nelsonwe.《尼尔森儿科教科书(nelsontextbookofpediatrics)》,第15版,费城:w.b.桑德斯公司(w.b.saunderscompany),1996；rudolpham等人《鲁道夫儿科学(rudolph'spediatrics)》,第21版,纽约:麦格劳希尔出版公司(mcgraw-hill),2002；以及averymd,firstlr.《儿科医学(pediatricmedicine)》,第2版,巴尔的摩:威廉姆斯和威尔金斯出版社(williams&wilkins)；1994。在一些实施例中，儿科受试者的年龄为从出生到生命的前28天、从29天到两岁以下、从两岁到12岁以下或从12岁到21岁(至多但不包含二十二岁生日)。在一些实施例中，儿科受试者的年龄为从出生到生命的前28天、从29天到1岁以下、从一个月到四个月以下、从三个月到七个月以下、从六个月到1岁以下、从1岁到2岁以下、从2岁到3岁以下、从2岁到七岁以下、从3岁到5岁以下、从5岁到10岁以下、从6岁到13岁以下、从10岁到15岁以下或从15岁到22岁以下。[0089]在某些实施例中，式(i)化合物或其药学上可接受的盐可用于预防本文所定义的疾病和病症(例如，自身免疫性病症、炎性病症和癌症)。如本文所使用的，术语“预防”是指完全或部分地预防本文所述的疾病或病状的发作、复发或扩散或其症状。[0090]术语“监管机构”是指一个国家的机构，用于批准该国药剂的医疗用途。例如，监管机构的非限制性实例是美国食品和药物管理局(fda)。[0091]通过nf-κb途径的信号传导与许多癌症有关。参见例如，staudt,《冷泉港生物学展望(coldspringharborperspectivesinbiology)》2.6(2010):a000109，xia等人,《癌症免疫学研究(cancerimmunol.res.)》2.9(2014):823-830，xia等人,《肿瘤靶标与疗法(oncotargetsandtherapy)》11(2018):2063。nf-κb是一个转录因子家族，包含p50、p52、p65(rela)、relb和c-rel，其可作为各种同源和异源二聚体与kb增强子元件结合以诱导许多基因的转录。在某些细胞表面受体(例如，cd28、bcr、her1(也被称为egfr(表皮生长因子受体)和erbb1)或her2(也被称为her2/neu或erbb2))活化后，通过card或carma蛋白，可能是通过蛋白激酶c(例如，蛋白激酶cβ或蛋白激酶cθ)的磷酸化以及bcl10-malt1复合物的募集形成cbm复合物。参见例如，xia等人,《肿瘤靶标与疗法》11(2018):2063，shi和sun.《分子免疫学(molimmunol.)》68.2(2015):546-557，xia等人,《癌症免疫学研究》2.9(2014):823-830以及pan,《分子癌症研究》14.1(2016):93-102。[0092]如上文所述，cbm复合物可以作为支架蛋白在nf-κb途径的活化中发挥作用。形成后，cbm复合物可以活化ikk复合物(例如，ikkγ(也被称为nemo)、ikkα和ikkβ)，可能是通过malt1的泛素化(例如，k63连接的泛素化)，其导致ikkγ的募集、泛素化(例如，k63连接的泛素化)和降解，从而释放ikkα和ikkβ以使iκb磷酸化，从而导致iκb的泛素化(例如，k48连接的泛素化)和降解，从而将nf-κb转录因子(通常是nf-κb1亚型：p50-rela和p50-crel)释放到细胞核。该级联反应可能由泛素连接酶traf6(肿瘤坏死因子受体(tnfr)相关因子6)介导。cbm复合物还可能通过另外的蛋白质复合物来影响nf-κb信号传导，如tab1/2-tak和线性泛素链组装复合物(lubac)。参见例如，《冷泉港生物学展望》2.3(2010):a000158，xia等人,《肿瘤靶标与疗法》11(2018):2063，juilland,《免疫学前沿(front.immunol.)》9(2018):1927。malt1还可以活化jnk途径(也被称为jnk/ap-1途径)，尽管对该领域的研究工作较少。参见；例如，juilland,《免疫学前沿》9(2018):1927以及wang等人,《肿瘤形成(oncogenesis)》6.7(2017):e365-e365。[0093]此外，malt1具有半胱氨酸蛋白酶活性。野生型malt1底物的非限制性实例包含bcl10、a20、cyld、relb、regnase1、roquin-1和hoil1。此外，api2-malt1(也被称为ciap2；凋亡抑制剂2的氨基末端)融合蛋白也被证明可以切割nik和lima1α。malt1对bcl10的切割被认为会导致bcl10非依赖性nf-κb活化。通过切割a20(tnfα诱导蛋白3)，malt1可以减少nf-κb途径的负调节，因为a20是一种去泛素化酶，其已被建议减少malt1的泛素化，从而减少ikk复合物的募集和活化。cyld(cyld赖氨酸63去泛素酶)是一种去泛素化酶，并且通过切割该酶，据信malt1通过nf-κb途径和/或jnk途径增加信号传导。relb的切割通常会缓解nf-κb途径的负调节，因为relb与rela和c-rel形成转录无活性的复合物。通过切割hoil1(也被称为rbck1)，据信nf-κb的负调节得到缓解，因为hoil1被认为可以减少线性泛素化。malt1还可以自动加工，通过一种尚未完全了解的机制促进通过nf-κb途径的信号传导。通过切割nik(nf-κb诱导激酶)，api2-malt1蛋白酶生成nik的c端片段，该片段对蛋白酶体降解具有抗性，从而增加非经典nf-κb信号传导。通过切割lima1α(lim结构域和肌动蛋白结合蛋白1)，该蛋白的肿瘤抑制性质减轻，并且据信剩余的片段具有致癌性质并增强细胞增殖、集落形成和细胞粘附。regnase1(调节性rnase1，也被称为mcpip-1或zc3h12a)和roquin-1(也被称为rc3h1)的切割被认为会导致mrna的稳定，包含细胞因子、趋化因子和共刺激蛋白(如icos、ox40和tnf)的mrna的稳定。这种活性可能独立于nf-κb和jnk途径中的malt1活性。参见例如，afonina等人《欧洲生化学会联合会杂志(febsj.)》282.17(2015):3286-3297klein等人《自然通讯》6.1(2015):1-17，baens等人《公共科学图书馆-综合》9.8(2014):e103774以及juilland,《免疫学前沿》9(2018):1927。malt1还参与依鲁替尼反应细胞系和活检样品中的致癌bcr信号传导，由myd88、tlr9和bcr形成的多蛋白超复合物(以下称为my-t-bcr超复合物)协调。my-t-bcr超复合物与mtor共定位在内溶酶体上，在此处，其驱动促生存的nf-κb和mtor信号传导。参见phelan等人,《自然(nature.)》2018年8月；560(7718):387-391。[0094]因此，malt1的抑制可以为与nf-κb途径或jnk途径中的异常信号传导相关的许多类型的病症提供有益效果。例如，抑制malt1可以减少通过nf-κb或jnk途径的通量，所述通量由以下一项或多项引起：[0095](1)灭活的肿瘤抑制基因。可以被灭活的肿瘤抑制基因的非限制性实例包含brca1和p53(例如，p53h61l或i123t)。参见例如，sau等人,《细胞干细胞(cellstemcell)》19.1(2016):52-65，xia等人,《癌症免疫学研究》2.9(2014):823-830，johansson等人,《肿瘤靶标》7.38(2016):62627。[0096](2)失调的细胞表面受体。细胞表面受体的非限制性实例包含her1和her2。参见例如，xia等人,《癌症免疫学研究》2.9(2014):823-830以及pan,《分子癌症研究》14.1(2016):93-102。[0097](3)cbm复合物的一种或多种组分的失调。cbm复合物的组分的非限制性实例包含malt1、card11、card14、card10、card9和bcl10。[0098](4)一种或多种malt1蛋白酶底物的失调(例如，野生型malt1蛋白酶或失调的malt1蛋白酶)。malt1蛋白酶底物的非限制性实例包含bcl10、a20、cyld、relb、regnase1、roquin-1、hoil1、nik和lima1α。[0099](5)cbm复合物下游的nf-κb途径的一种或多种组分的失调。cbm复合物下游的nf-κb途径的组分的非限制性实例包含traf6、ikkα、ikkβ、ikkγ(也被称为nemo)、ikbα、p50、p52、p65(rela)、relb和c-rel。[0100](6)cbm复合物下游的jnk途径的一种或多种组分的失调。cbm复合物下游的jnk途径的组分的非限制性实例包含jnk1(丝裂原活化的蛋白激酶8)、jnk2(丝裂原活化的蛋白激酶9)、jnk3(丝裂原活化的蛋白激酶10)或ap-1转录因子(例如，c-fos、c-jun、atf或jdp家族中任一种的异二聚体)。[0101](7)malt1基因染色体易位引起的一种或多种融合蛋白的失调。非限制性实例包含ciap-malt1融合蛋白。[0102](8)my-t-bcr超复合物的一种或多种组分的失调。my-t-bcr超复合物的组分的非限制性实例包含myd88、tlr9和mtor。[0103]如本文相关的术语“cbm复合物途径”包含信号传导途径中的基因、转录物和蛋白质，所述信号传导途径包含cbm。例如，nf-κb途径的许多方面都是cbm复合物途径的一部分。cbm复合物途径可以包含，例如，细胞表面受体(例如，cd28、bcr、her1和her2)、细胞表面受体与cbm复合物(例如，蛋白激酶cβ或蛋白激酶cθ)之间的信号转导器、cbm复合物的组分(例如，malt1、card11、card14、card10、card9或bcl10)、malt1蛋白酶的底物(例如，bcl10、a20、cyld、relb、regnase1、roquin-1、hoil1、nik和lima1α)、cbm复合物下游的nf-κb途径的组分(例如，tak1、traf6、tab1、tab2、tab3、mkk7、ikkα、ikkβ、ikkγ、ikbα、p50、p65(rela)或c-rel)、cbm复合物下游的jnk途径的组分(例如，jnk1、jnk2、jnk3或ap-1转录因子)或my-t-bcr超复合物的组分(例如，myd88、tlr9或mtor)。[0104]如本文所使用的，术语“cbm复合物途径相关性疾病或病症”是指与cbm复合物途径中的基因、cbm复合物途径中的蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，如本文所述，cbm复合物途径中的基因、cbm复合物途径中的蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的疾病或病症。cbm复合物途径相关性疾病或病症的非限制性实例包含，例如，cbm相关原发性免疫缺陷疾病、自身免疫性病症、多发性硬化症、结肠炎、牛皮癣和癌症。参见例如，mcguire等人,《神经炎症杂志(j.neuroinflamm.)》11.1(2014):1-12，lu等人,《免疫学前沿》9(2018):2078，jaworski等人,《欧洲分子生物学学会杂志》33.23(2014):2765-2781。cbm复合物途径相关性疾病或病症的非限制性实例包含malt1相关性疾病或病症，如malt1相关性癌症、malt1相关性自身免疫性病症和malt1相关性炎性病症。[0105]如本文所使用的，术语“cbm复合物途径相关性自身免疫性病症”是指与cbm复合物途径基因、cbm复合物途径蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的cbm复合物途径基因、cbm复合物途径蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的自身免疫性病症。本文描述了cbm复合物途径相关性自身免疫性病症的非限制性实例。[0106]如本文所使用的，术语“cbm复合物途径相关性炎性病症”是指与cbm复合物途径基因、cbm复合物途径蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的cbm复合物途径基因、cbm复合物途径蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的炎性病症。本文描述了cbm复合物途径相关性炎性病症的非限制性实例。[0107]在一些实施例中，cbm复合物途径相关性疾病或病症是cbm复合物途径相关性癌症，如cbm复合物途径细胞表面受体相关性癌症(例如，cd28相关性癌症、bcr相关性癌症、her1相关性癌症或her2相关性癌症)，与细胞表面受体和cbm复合物之间的信号转导相关的癌症(例如，蛋白激酶cβ(pkcβ)相关性癌症或蛋白激酶cθ(pckθ)相关性癌症)、cbm复合物相关性癌症的组分(例如，malt1相关性癌症、card11相关性癌症、card14相关性癌症、card10相关性癌症、card9相关性癌症或bcl10相关性癌症)、malt1蛋白酶底物相关性癌症(例如，bcl10相关性癌症、a20相关性癌症、cyld相关性癌症、relb相关性癌症、regnase1相关性癌症、roquin-1相关性癌症、hoil1相关性癌症、nik相关性癌症或lima1α相关性癌症)、与cbm复合物下游的nf-κb途径的组分相关的癌症(例如，tak1相关性癌症、traf6相关性癌症、tab1相关性癌症、tab2相关性癌症、tab3相关性癌症、mkk7相关性癌症、ikkα相关性癌症、ikkβ相关性癌症、ikkγ相关性癌症、ikbα相关性癌症、p50相关性癌症、p65(rela)相关性癌症或c-rel相关性癌症)、与cbm复合物下游的jnk途径的组分相关的癌症(例如，jnk1相关性癌症、jnk2相关性癌症、jnk3相关性癌症或ap-1转录因子相关性癌症)、myd88相关性癌症或其组合。[0108]如本文所使用的，术语“cbm复合物途径相关性癌症”是指与cbm复合物途径中的基因、cbm复合物途径中的蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，如本文所述，cbm复合物途径中的基因、cbm复合物途径中的蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)(例如，在诊断后或对先前疗法产生抗性后)的癌症。本文描述了cbm复合物途径相关性癌症的非限制性实例。在一些实施例中，cbm复合物途径相关性癌症可以是cbm复合物途径细胞表面受体相关性癌症(例如，cd28相关性癌症、bcr相关性癌症、her1相关性癌症或her2相关性癌症)，与细胞表面受体和cbm复合物之间的信号转导相关的癌症(例如，蛋白激酶cβ(pkcβ)相关性癌症或蛋白激酶cθ(pckθ)相关性癌症)、cbm复合物相关性癌症的组分(例如，malt1相关性癌症、card11相关性癌症、card14相关性癌症、card10相关性癌症、card9相关性癌症或bcl10相关性癌症)、malt1蛋白酶底物相关性癌症(例如，bcl10相关性癌症、a20相关性癌症、cyld相关性癌症、relb相关性癌症、regnase1相关性癌症、roquin-1相关性癌症、hoil1相关性癌症、nik相关性癌症或lima1α相关性癌症)、与cbm复合物下游的nf-κb途径的组分相关的癌症(例如，tak1相关性癌症、traf6相关性癌症、tab1相关性癌症、tab2相关性癌症、tab3相关性癌症、mkk7相关性癌症、ikkα相关性癌症、ikkβ相关性癌症、ikkγ相关性癌症、ikbα相关性癌症、p50相关性癌症、p65(rela)相关性癌症或c-rel相关性癌症)、与cbm复合物下游的jnk途径的组分相关的癌症(例如，jnk1相关性癌症、jnk2相关性癌症、jnk3相关性癌症或ap-1转录因子相关性癌症)或其组合。[0109]在一些实施例中，失调可以是导致基因、蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平异常活化的失调。活化可以通过任何适当的机制进行，包含但不限于基因扩增、活化突变、活化易位、转录活化、表观遗传改变和/或癌基因的蛋白质产物的过表达。在一些实施例中，失调可以是导致基因、蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平异常失活的失调。失活可以通过任何适当的机制进行，包含但不限于基因缺失、失活突变、失活易位、转录沉默、表观遗传改变和基因的mrna和/或蛋白质产物的降解。通常，如本文所使用的，失调(无论是活化还是失活)是导致通过nf-κb或jnk信号传导途径的信号传导增加的失调。[0110]术语“野生型”描述在不患有与核酸或蛋白质(例如，malt1基因、malt1mrna或malt1蛋白)相关的疾病或病症(并且任选地也不具有患与核酸或蛋白质相关的疾病或病症的增加风险和/或未被怀疑患有与基因或蛋白质相关的疾病或病症)的受试者中发现，或在来自不患有与基因或蛋白质相关的疾病或病症(例如，malt1相关性癌症、自身免疫性病症或炎性病症)(并且任选地也不具有患与核酸或蛋白质相关的疾病或病症的增加风险和/或未被怀疑患有与核酸或蛋白质相关的疾病或病症)的受试者的细胞或组织中发现的核酸(例如，malt1基因或malt1mrna)或蛋白质(例如，malt1蛋白)。[0111]在一些实施例中，受试者已被鉴定或诊断为患有具有cbm复合物途径相关性基因(例如，malt1基因)、cbm复合物途径相关性蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调的癌症(cbm复合物途径相关性癌症)(例如，如使用监管机构批准(例如，fda批准)的测定法或试剂盒所确定的)。在一些实施例中，受试者患有对一种或多种先前疗法具有抗性的癌症。在一些实施例中，受试者患有针对cbm复合物途径相关性基因(例如，malt1基因)、cbm复合物途径相关性蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤(例如，如使用监管机构批准(例如，fda批准)的测定法或试剂盒所确定的)。所述受试者可以是具有针对cbm复合物途径相关性基因(例如，malt1基因)、cbm复合物途径相关性蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤的受试者(例如，使用监管机构批准(例如，fda批准)的测定法或试剂盒鉴定为阳性)。所述受试者可以是其肿瘤具有cbm复合物途径相关性基因(例如，malt1基因)、cbm复合物途径相关性蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者的表达或活性或水平的失调的受试者(例如，在使用监管机构批准(例如，fda批准)的测定法或试剂盒鉴定肿瘤的情况下)。在一些实施例中，受试者患有对一种或多种先前疗法具有抗性的肿瘤。在一些实施例中，受试者疑似患有cbm复合物途径相关性癌症。在一些实施例中，受试者患有疑似对一种或多种先前疗法具有抗性的肿瘤。在一些实施例中，受试者具有临床记录，所述临床记录表明所述受试者患有肿瘤，所述肿瘤具有cbm复合物途径相关性基因(例如，malt1基因)、cbm复合物途径相关性蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调(并且任选地，所述临床记录表明应该用本文提供的任何组合物治疗所述受试者)。在一些实施例中，受试者是儿科受试者。在一些实施例中，受试者具有临床记录，所述临床记录表明所述受试者患有对一种或多种先前疗法具有抗性的肿瘤。在一些实施例中，受试者已被鉴定或诊断为患有癌症，所述癌症基于组织学检查被确定为与cbm复合物途径相关性基因(例如，malt1基因)、cbm复合物途径相关性蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调相关联(cbm复合物途径相关性癌症)。[0112]在一些实施例中，受试者已被鉴定或诊断为患有具有cbm复合物途径相关性基因(例如，malt1基因)、cbm复合物途径相关性蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调的自身免疫性病症(cbm复合物途径相关性自身免疫性病症)(例如，如使用监管机构批准(例如，fda批准)的测定法或试剂盒所确定的)。在一些实施例中，受试者患有针对cbm复合物途径相关性基因(例如，malt1基因)、cbm复合物途径相关性蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤(例如，如使用监管机构批准(例如，fda批准)的测定法或试剂盒所确定的)。在一些实施例中，受试者疑似患有cbm复合物途径相关性自身免疫性病症。在一些实施例中，受试者具有临床记录，所述临床记录表明所述受试者患有肿瘤，所述肿瘤具有cbm复合物途径相关性基因(例如，malt1基因)、cbm复合物途径相关性蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调(并且任选地，所述临床记录表明应该用本文提供的任何组合物治疗所述受试者)。在一些实施例中，受试者是儿科受试者。在一些实施例中，受试者已被鉴定或诊断为患有自身免疫性病症，所述自身免疫性病症基于组织学检查被确定为与cbm复合物途径相关性基因(例如，malt1基因)、cbm复合物途径相关性蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调相关联(cbm复合物途径相关性自身免疫性病症)。[0113]在一些实施例中，受试者已被鉴定或诊断为患有具有cbm复合物途径相关性基因(例如，malt1基因)、cbm复合物途径相关性蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调的炎性病症(cbm复合物途径相关性炎性病症)(例如，如使用监管机构批准(例如，fda批准)的测定法或试剂盒所确定的)。在一些实施例中，受试者患有针对cbm复合物途径相关性基因(例如，malt1基因)、cbm复合物途径相关性蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调呈阳性的肿瘤(例如，如使用监管机构批准(例如，fda批准)的测定法或试剂盒所确定的)。在一些实施例中，受试者疑似患有cbm复合物途径相关性炎性病症。在一些实施例中，受试者具有临床记录，所述临床记录表明所述受试者患有肿瘤，所述肿瘤具有cbm复合物途径相关性基因(例如，malt1基因)、cbm复合物途径相关性蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调(并且任选地，所述临床记录表明应该用本文提供的任何组合物治疗所述受试者)。在一些实施例中，受试者是儿科受试者。在一些实施例中，受试者已被鉴定或诊断为患有炎性病症，所述炎性病症基于组织学检查被确定为与cbm复合物途径相关性基因(例如，malt1基因)、cbm复合物途径相关性蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调相关联(cbm复合物途径相关性炎性病症)。[0114]如本文所使用的，术语“cbm复合物途径细胞表面受体相关性癌症”是指与基因、蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调的癌症，所述失调与cbm复合物途径细胞表面受体相关。在一些实施例中，cbm复合物途径细胞表面受体相关性癌症选自由以下组成的组：cd28相关性癌症、bcr相关性癌症、her1相关性癌症、her2相关性癌症及其组合。[0115]如本文所使用的，术语“*相关性癌症”是指与*基因、*蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的癌症，其中“*”指本文所述的特定cbm复合物途径基因或蛋白质。在一些实施例中，*相关性癌症选自由以下组成的组：cd28相关性癌症、bcr相关性癌症、her1相关性癌症、her2相关性癌症、pkcβ相关性癌症、pkcθ相关性癌症、malt1相关性癌症、card11相关性癌症、card14相关性癌症、a20相关性癌症、cyld相关性癌症、relb相关性癌症、hoil1相关性癌症、nik相关性癌症、regnase1相关性癌症、lima1α相关性癌症、roquin-1相关性癌症、traf6相关性癌症、tak1相关性癌症、tab1相关性癌症、tab2相关性癌症、tab3相关性癌症、mkk7相关性癌症、ikkα相关性癌症、ikkβ相关性癌症、ikkγ相关性癌症、ikbα相关性癌症、p50相关性癌症、p65相关性癌症、c-rel相关性癌症、jnk1相关性癌症、jnk2相关性癌症、jnk3相关性癌症、myd88转录因子相关性癌症和ap-1转录因子相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是cd28相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是bcr相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是her1相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是her2相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是pkcβ相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是pkcθ相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是malt1相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是card11相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是card14相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是a20相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是cyld相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是relb相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是hoil1相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是nik相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是regnase1相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是lima1α相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是roquin-1相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是traf6相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是tak1相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是tab1相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是tab2相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是tab3相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是mkk7相关性癌症和ikkα相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是ikkβ相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是ikkγ相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是ikbα相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是p50相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是p65相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是c-rel相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是jnk1相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是jnk2相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是jnk3相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是ap-1转录因子相关性癌症。在一些实施例中，*相关性癌症是myd88转录因子相关性癌症。[0116]短语“*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的失调”(其中*是本文所述的特定cbm复合物途径基因或蛋白质)是指(例如，与对照非癌细胞相比)哺乳动物细胞中野生型*蛋白质的基因突变(例如，染色体易位，其导致包含*结构域和融合伴侣的融合蛋白的表达；*基因中的突变，其导致与野生型*蛋白质相比包含至少一个氨基酸缺失的*蛋白质的表达；*基因中的突变，其导致与野生型*蛋白质相比具有一个或多个点突变的*蛋白质的表达；*基因中的突变，其导致与野生型*蛋白质相比具有至少一个插入的氨基酸的*蛋白质的表达；基因重复，其导致细胞中*蛋白质水平升高；或调节序列(例如，启动子和/或增强子)中的突变，其导致细胞中*蛋白质水平升高)；*mrna的替代剪接形式，其导致与野生型*蛋白质相比在*蛋白质中具有至少一个氨基酸缺失的*蛋白质；或表达增加(例如，水平升高)，这是由于异常的细胞信号传导和/或失调的自分泌/旁分泌信号传导而导致的。作为另外的实例，增加的*基因拷贝数可导致*蛋白质的过表达。例如，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是基因或染色体易位的结果，所述基因或染色体易位导致融合蛋白的表达，所述融合蛋白含有*的第一部分和伴侣蛋白(即，并非*)的第二部分。在一些实例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是一个*基因与另一个非*基因的基因易位的结果。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平选自由以下组成的组：cd28、bcr、her1、her2、pkcβ、pkcθ、malt1、card11、card14、a20、cyld、relb、hoil1、nik、regnase1、lima1α、roquin-1、traf6、tak1、tab1、tab2、tab3、mkk7、ikkα、ikkβ、ikkγ、ikbα、p50、p65、c-rel、jnk1、jnk2、jnk3、myd88和ap-1转录因子。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是cd28。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是bcr。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是her1。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是her2。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是pkcβ。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是pkcθ。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是malt1。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是card11。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是card14。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是a20。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是cyld。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是relb。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是hoil1。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是nik。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是regnase1。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是lima1α。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是roquin-1。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是traf6。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是tak1。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是tab1。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是tab2。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是tab3。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是mkk7。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是ikkα。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是ikkβ。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是ikkγ。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是ikbα。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是p50。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是p65。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是c-rel。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是jnk1。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是jnk2。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是jnk3。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是myd88转录因子。在一些实施例中，*基因或*蛋白质是ap-1转录因子。[0117]在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是编码*蛋白质的*基因中的突变，所述*蛋白质是组成型活性的或与由不包含突变的*基因编码的蛋白质相比具有增加的活性。在一些实施例中，增加的*基因拷贝数可导致*蛋白质的过表达。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是cd28。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是bcr。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是her1。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是her2。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是pkcβ。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是pkcθ。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是card14。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是card9。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是card10。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是card11。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是malt1。[0118]作为另一个实例，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是编码*蛋白质的*基因中的突变，所述*蛋白质是组成型失活的或与由不包含突变的*基因编码的蛋白质相比具有降低的活性。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是a20。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是cyld。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平relb。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是hoil1。在一些实施例中，*基因、*蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平是nik。[0119]与本文所述的特定基因或蛋白质“相关联”的疾病或病症是指与特定基因、特定蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的特定基因、特定蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的疾病或病症。本文描述了此类疾病或病症的非限制性实例。同样，与本文所述的特定基因或蛋白质“相关联”的癌症是指与特定基因、特定蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的特定基因、特定蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的癌症。本文描述了此类癌症的非限制性实例。[0120]本文描述的蛋白质的示例性序列如下所示。[0121]人cd28的示例性序列如下所示：[0122]seqidno:1(uniparc登录号upi0000043f4d)[0123]mlrlllalnlfpsiqvtgnkilvkqspmlvaydnavnlsckysynlfsrefraslhkgldsavevcvvygnysqqlqvysktgfncdgklgnesvtfylqnlyvnqtdiyfckievmypppyldneksngtiihvkgkhlcpsplfpgpskpfwvlvvvggvlacysllvtvafiifwvrskrsrllhsdymnmtprrpgptrkhyqpyapprdfaayrs[0124]cd28基因或cd28蛋白失调的非限制性实例可参见例如rohr等人,《白血病(leukemia)》30.5(2016):1062-1070，yoo等人,《血液学(haematologica)》101.6(2016):757-763以及lee等人,《血液学》100.12(2015):e505。[0125]人bcr的示例性序列如下所示：[0126]seqidno:2(uniparc登录号upi000016a088)[0127]mvdpvgfaeawkaqfpdsepprmelrsvgdieqelerckasirrleqevnqerfrmiylqtllakekksydrqrwgfrraaqapdgaseprasasrpqpapadgadpppaeepearpdgegspgkarpgtarrpgaaasgerddrgppasvaalrsnferirkghgqpgadaekpfyvnvefhherglvkvndkevsdrisslgsqamqmerkksqhgagssvgdasrppyrgrssesscgvdgdyedaelnprflkdnlidanggsrppwppleyqpyqsiyvggmmegegkgpllrsqstseqekrltwprrsysprsfedcgggytpdcssnenltsseedfssgqssrvspspttyrmfrdksrspsqnsqqsfdssspptpqchkrhrhcpvvvseativgvrktgqiwpndgegafhgdadgsfgtppgygcaadraeeqrrhqdglpyiddspsssphlsskgrgsrdalvsgalestkaseldlekglemrkwvlsgilaseetylshlealllpmkplkaaattsqpvltsqqietiffkvpelyeihkefydglfprvqqwshqqrvgdlfqklasqlgvyrafvdnygvamemaekccqanaqfaeisenlrarsnkdakdpttknsletllykpvdrvtrstlvlhdllkhtpashpdhpllqdalrisqnflssineeitprrqsmtvkkgehrqllkdsfmvelvegarklrhvflftdlllctklkkqsggktqqydckwyipltdlsfqmvdeleavpniplvpdeeldalkikisqikndiqrekrankgskaterlkkklseqesllllmspsmafrvhsrngksytflissdyeraewrenireqqkkcfrsfsltsvelqmltnscvklqtvhsipltinkeddespglygflnvivhsatgfkqssnlyctlevdsfgyfvnkaktrvyrdtaepnwneefeielegsqtlrilcyekcynktkipkedgestdrlmgkgqvqldpqalqdrdwqrtviamngievklsvkfnsrefslkrmpsrkqtgvfgvkiavvtkrerskvpyivrqcveeierrgmeevgiyrvsgvatdiqalkaafdvnnkdvsvmmsemdvnaiagtlklyfrelpeplftdefypnfaegialsdpvakescmlnlllslpeanlltflflldhlkrvaekeavnkmslhnlatvfgptllrpsekesklpanpsqpitmtdswslevmsqvqvllyflqleaipapdskrqsilfstev[0128]bcr基因或bcr蛋白(例如，bcr-abl融合体)失调的非限制性实例可参见例如yang和fu,《肿瘤学/血液学关键评论(crit.rev.oncol./hematol.)》93.3(2015):277-292，weisberg等人《癌症自然评论(nat.rev.cancer)》7.5(2007):345-356和jabbour等人《癌症(cancer)》117.9(2011):1800-1811。[0129]人her1的示例性序列如下所示：[0130]seqidno:3(uniparc登录号upi000003e750)[0131]mrpsgtagaallallaalcpasraleekkvcqgtsnkltqlgtfedhflslqrmfnncevvlgnleityvqrnydlsflktiqevagyvlialntveriplenlqiirgnmyyensyalavlsnydanktglkelpmrnlqeilhgavrfsnnpalcnvesiqwrdivssdflsnmsmdfqnhlgscqkcdpscpngscwgageencqkltkiicaqqcsgrcrgkspsdcchnqcaagctgpresdclvcrkfrdeatckdtcpplmlynpttyqmdvnpegkysfgatcvkkcprnyvvtdhgscvracgadsyemeedgvrkckkcegpcrkvcngigigefkdslsinatnikhfknctsisgdlhilpvafrgdsfthtppldpqeldilktvkeitgflliqawpenrtdlhafenleiirgrtkqhgqfslavvslnitslglrslkeisdgdviisgnknlcyantinwkklfgtsgqktkiisnrgensckatgqvchalcspegcwgpeprdcvscrnvsrgrecvdkcnllegeprefvenseciqchpeclpqamnitctgrgpdnciqcahyidgphcvktcpagvmgenntlvwkyadaghvchlchpnctygctgpglegcptngpkipsiatgmvgalllllvvalgiglfmrrrhivrkrtlrrllqerelvepltpsgeapnqallrilketefkkikvlgsgafgtvykglwipegekvkipvaikelreatspkankeildeayvmasvdnphvcrllgicltstvqlitqlmpfgclldyvrehkdnigsqyllnwcvqiakgmnyledrrlvhrdlaarnvlvktpqhvkitdfglakllgaeekeyhaeggkvpikwmalesilhriythqsdvwsygvtvwelmtfgskpydgipaseissilekgerlpqppictidvymimvkcwmidadsrpkfreliiefskmardpqrylviqgdermhlpsptdsnfyralmdeedmddvvdadeylipqqgffsspstsrtpllsslsatsnnstvacidrnglqscpikedsflqryssdptgaltedsiddtflpvpeyinqsvpkrpagsvqnpvyhnqplnpapsrdphyqdphstavgnpeylntvqptcvnstfdspahwaqkgshqisldnpdyqqdffpkeakpngifkgstaenaeylrvapqssefiga[0132]her1基因或her1蛋白失调的非限制性实例可参见例如zhang等人,《肿瘤靶标》7.48(2016):78985，ellison等人,《临床病理学杂志(journalofclinicalpathology)》66.2(2013):79-89，midha等人,《美国癌症研究期刊(americanjournalofcancerresearch)》5.9(2015):2892以及yamamoto等人,《肺癌(lungcancer)》63.3(2009):315-321。[0133]人her2的示例性序列如下所示：[0134]seqidno:4(uniparc登录号upi000003f55f)[0135]melaalcrwglllallppgaastqvctgtdmklrlpaspethldmlrhlyqgcqvvqgnleltylptnaslsflqdiqevqgyvliahnqvrqvplqrlrivrgtqlfednyalavldngdplnnttpvtgaspgglrelqlrslteilkggvliqrnpqlcyqdtilwkdifhknnqlaltlidtnrsrachpcspmckgsrcwgessedcqsltrtvcaggcarckgplptdccheqcaagctgpkhsdclaclhfnhsgicelhcpalvtyntdtfesmpnpegrytfgascvtacpynylstdvgsctlvcplhnqevtaedgtqrcekcskpcarvcyglgmehlrevravtsaniqefagckkifgslaflpesfdgdpasntaplqpeqlqvfetleeitgylyisawpdslpdlsvfqnlqvirgrilhngaysltlqglgiswlglrslrelgsglalihhnthlcfvhtvpwdqlfrnphqallhtanrpedecvgeglachqlcarghcwgpgptqcvncsqflrgqecveecrvlqglpreyvnarhclpchpecqpqngsvtcfgpeadqcvacahykdppfcvarcpsgvkpdlsympiwkfpdeegacqpcpincthscvdlddkgcpaeqraspltsiisavvgillvvvlgvvfgilikrrqqkirkytmrrllqetelvepltpsgampnqaqmrilketelrkvkvlgsgafgtvykgiwipdgenvkipvaikvlrentspkankeildeayvmagvgspyvsrllgicltstvqlvtqlmpygclldhvrenrgrlgsqdllnwcmqiakgmsyledvrlvhrdlaarnvlvkspnhvkitdfglarlldideteyhadggkvpikwmalesilrrrfthqsdvwsygvtvwelmtfgakpydgipareipdllekgerlpqppictidvymimvkcwmidsecrprfrelvsefsrmardpqrfvviqnedlgpaspldstfyrslledddmgdlvdaeeylvpqqgffcpdpapgaggmvhhrhrssstrsgggdltlglepseeeaprsplapsegagsdvfdgdlgmgaakglqslpthdpsplqrysedptvplpsetdgyvapltcspqpeyvnqpdvrpqppspregplpaarpagatlerpktlspgkngvvkdvfafggavenpeyltpqggaapqphpppafspafdnlyywdqdppergappstfkgtptaenpeylgldvpv[0136]her2基因或her2蛋白失调的非限制性实例可参见例如petrelli、fausto等人,《乳腺癌研究和治疗(breastcancerresearchandtreatment)》166.2(2017):339-349，yan等人,《癌症与转移评论(cancerandmetastasisreviews)》34.1(2015):157-164，koshkin等人,《膀胱癌(bladdercancer)》5.1(2019):1-12以及connell等人,《欧洲肿瘤内科学会期刊(esmoopen)》2.5(2017)。[0137]如本文所使用的，术语“与细胞表面受体和cbm复合物之间的信号转导相关的癌症”是指与基因、蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调的癌症，所述失调与细胞表面受体和cbm复合物之间的信号转导相关。在一些实施例中，与细胞表面受体和cbm复合物之间的信号转导相关的癌症选自由pkcβ相关性癌症、pckθ相关性癌症及其组合组成的组。与本段中描述的特定基因或蛋白质“相关联”的癌症是指与特定基因、特定蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的特定基因、特定蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的癌症。本文描述了此类癌症的非限制性实例。[0138]人pkcβ的示例性序列如下所示：[0139]seqidno:5(uniparc登录号upi000012df67)[0140]madpaagpppsegeestvrfarkgalrqknvhevknhkftarffkqptfcshctdfiwgfgkqgfqcqvccfvvhkrchefvtfscpgadkgpasddprskhkfkihtyssptfcdhcgsllyglihqgmkcdtcmmnvhkrcvmnvpslcgtdhterrgriyiqahidrdvlivlvrdaknlvpmdpnglsdpyvklklipdpkseskqktktikcslnpewnetfrfqlkesdkdrrlsveiwdwdltsrndfmgslsfgiselqkasvdgwfkllsqeegeyfnvpvppegseaneelrqkferakisqgtkvpeekttntvskfdnngnrdrmkltdfnflmvlgkgsfgkvmlserkgtdelyavkilkkdvviqdddvectmvekrvlalpgkppfltqlhscfqtmdrlyfvmeyvnggdlmyhiqqvgrfkephavfyaaeiaiglfflqskgiiyrdlkldnvmldseghikiadfgmckeniwdgvttktfcgtpdyiapeiiayqpygksvdwwafgvllyemlagqapfegededelfqsimehnvaypksmskeavaickglmtkhpgkrlgcgpegerdikehaffryidweklerkeiqppykpkardkrdtsnfdkeftrqpveltptdklfimnldqnefagfsytnpefvinv[0141]人pkcθ的示例性序列如下所示：[0142]seqidno:6(uniparc登录号upi000012df74)[0143]mspflriglsnfdcgscqscqgeavnpycavlvkeyvesengqmyiqkkptmyppwdstfdahinkgrvmqiivkgknvdlisettvelyslaercrknngkteiwlelkpqgrmlmnaryflemsdtkdmnefetegffalhqrrgaikqakvhhvkcheftatffpqptfcsvchefvwglnkqgyqcrqcnaaihkkcidkviakctgsainsretmfhkerfkidmphrfkvynyksptfcehcgtllwglarqglkcdacgmnvhhrcqtkvanlcginqklmaealamiestqqarclrdteqifregpveiglpcsiknearppclptpgkrepqgiswespldevdkmchlpepelnkerpslqiklkiedfilhkmlgkgsfgkvflaefkktnqffaikalkkdvvlmdddvectmvekrvlslawehpflthmfctfqtkenlffvmeylnggdlmyhiqschkfdlsratfyaaeiilglqflhskgivyrdlkldnilldkdghikiadfgmckenmlgdaktntfcgtpdyiapeillgqkynhsvdwwsfgvllyemligqspfhgqdeeelfhsirmdnpfyprwlekeakdllvklfvrepekrlgvrgdirqhplfreinweelerkeidppfrpkvkspfdcsnfdkeflnekprlsfadralinsmdqnmfrnfsfmnpgmerlis[0144]如本文所使用的，术语“cbm复合物相关性癌症的组分”是指与基因、蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调的癌症，所述失调与cbm复合物的组分相关。在一些实施例中，cbm复合物相关性癌症的组分选自由以下组成的组：malt1相关性癌症、card11相关性癌症、card14相关性癌症、card10相关性癌症、card9相关性癌症、bcl10相关性癌症及其组合。在一些实施例中，cbm复合物相关性癌症选自由以下组成的组：malt1相关性癌症、card11相关性癌症、bcl10相关性癌症及其组合。与本段中描述的特定基因或蛋白质“相关联”的癌症是指与特定基因、特定蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的特定基因、特定蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的癌症。本文描述了此类癌症的非限制性实例。[0145]如本文所使用的，术语“malt1相关性自身免疫性病症”是指与malt1基因、malt1蛋白(在本文中也被称为malt1蛋白酶蛋白或malt1蛋白酶)或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的malt1基因、malt1蛋白酶、malt1蛋白酶结构域或三者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的自身免疫性病症。本文描述了malt1相关性自身免疫性病症的非限制性实例。[0146]如本文所使用的，术语“malt1相关性炎性病症”是指与malt1基因、malt1蛋白(在本文中也被称为malt1蛋白酶蛋白或malt1蛋白酶)或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的malt1基因、malt1蛋白酶、malt1蛋白酶结构域或三者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的炎性病症。本文描述了malt1相关性炎性病症的非限制性实例。[0147]如本文所使用的，术语“malt1相关性癌症”是指与malt1基因、malt1蛋白(在本文中也被称为malt1蛋白酶蛋白或malt1蛋白酶)或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的malt1基因、malt1蛋白、malt1蛋白酶结构域或三者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的癌症。本文描述malt1相关性癌症的非限制性实例。[0148]短语“malt1基因、malt1蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调”是指(例如，与对照非癌细胞相比)哺乳动物细胞中野生型malt1蛋白的基因突变(例如，染色体易位，其导致包含malt1蛋白酶结构域和融合伴侣的融合蛋白的表达；malt1基因中的突变，其导致与野生型malt1蛋白相比包含至少一个氨基酸缺失的malt1蛋白的表达；malt1基因中的突变，其导致与野生型malt1蛋白相比具有一个或多个点突变的malt1蛋白的表达；malt1基因中的突变，其导致与野生型malt1蛋白相比具有至少一个插入的氨基酸的malt1蛋白的表达；基因重复，其导致细胞中malt1蛋白水平升高；或调节序列(例如，启动子和/或增强子)中的突变，其导致细胞中malt1蛋白水平升高)；malt1mrna的替代剪接形式，其导致与野生型malt1蛋白相比在malt1蛋白中具有至少一个氨基酸缺失的malt1蛋白；或表达增加(例如，水平升高)，这是由于异常的细胞信号传导和/或失调的自分泌/旁分泌信号传导而导致的。作为另一个实例，malt1基因、malt1蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是编码malt1蛋白的malt1基因中的突变，所述malt1蛋白是组成型活性的或与由不包含突变的malt1基因编码的蛋白质相比具有增加的活性。作为另外的实例，增加的malt1基因拷贝数可导致malt1蛋白酶的过表达。例如，malt1基因、malt1蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是基因或染色体易位的结果，所述基因或染色体易位导致融合蛋白的表达，所述融合蛋白含有malt1的第一部分(该部分包含功能性蛋白酶结构域)和伴侣蛋白(即，并非malt1)的第二部分。在一些实例中，malt1基因、malt1蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是一个malt1基因与另一个非malt1基因的基因易位的结果。[0149]人malt1的示例性序列如下所示：[0150]seqidno:7(uniparc登录号upi000004d05e)[0151]msllgdplqalppsaaptgpllappagatlnrlrepllrrlselldqapegrgwrrlaelagsrgrlrlscldleqcslkvlepegspslcllklmgekgctvtelsdflqamehtevlqllsppgikitvnpeskavlagqfvklccratghpfvqyqwfkmnkeipngntselifnavhvkdagfyvcrvnnnftfefsqwsqldvcdipesfqrsvdgvsesklqicveptsqklmpgstlvlqcvavgspiphyqwfknelplthetkklymvpyvdlehqgtywchvyndrdsqdskkveiiigrtdeavectedelnnlghpdnkeqttdqplakdkvallignmnyrehpklkaplvdvyeltnllrqldfkvvslldlteyemrnavdeflllldkgvygllyyaghgyenfgnsfmvpvdapnpyrsenclcvqnilklmqeketglnvflldmcrkrndyddtipildalkvtanivfgyatcqgaeafeiqhsglangifmkflkdrlledkkitvlldevaedmgkchltkgkqaleirsslsekraltdpiqgteysaeslvrnlqwakahelpesmclkfdcgvqiqlgfaaefsnvmiiytsivykppeiimcdayvtdfpldldidpkdankgtpeetgsylvskdlpkhclytrlsslqklkehlvftvclsyqysgledtvedkqevnvgkpliakldmhrglgrktcfqtclmsngpyqssaatsggaghyhslqdpfhgvyhshpgnpsnvtpadschcsrtpdafissfahhaschfsrsnvpvettdeipfsfsdrlrisek[0152]malt1基因或malt1蛋白失调的非限制性实例显示在下表b1中。[0153]表b1.[0154][0155][0156]1美国专利us10,711,036[0157]2美国专利申请公开us20190160045a1[0158]3美国专利申请公开us20130096021a1[0159]4美国专利申请公开us20150320754a1[0160]如本文所使用的，术语“card11相关性自身免疫性病症”是指与card11基因、card11蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的card11基因、card11蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的自身免疫性病症。[0161]如本文所使用的，术语“card11相关性炎性病症”是指与card11基因、card11蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的card11基因、card11蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的炎性病症。[0162]如本文所使用的，术语“card11相关性癌症”是指与card11基因、card11蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的card11基因、card11蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的癌症。本文描述了card11相关性癌症的非限制性实例。[0163]短语“card11基因、card11蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调”是指(例如，与对照非癌细胞相比)哺乳动物细胞中野生型card11蛋白的基因突变(例如，染色体易位，其导致包含card11结构域和融合伴侣的融合蛋白的表达；card11基因中的突变，其导致与野生型card11蛋白相比包含至少一个氨基酸缺失的card11蛋白的表达；card11基因中的突变，其导致与野生型card11蛋白相比具有一个或多个点突变的card11蛋白的表达；card11基因中的突变，其导致与野生型card11蛋白相比具有至少一个插入的氨基酸的card11蛋白的表达；基因重复，其导致细胞中card11蛋白水平升高；或调节序列(例如，启动子和/或增强子)中的突变，其导致细胞中card11蛋白水平升高)；card11mrna的替代剪接形式，其导致与野生型card11蛋白相比在card11蛋白中具有至少一个氨基酸缺失的card11蛋白；或表达增加(例如，水平升高)，这是由于异常的细胞信号传导和/或失调的自分泌/旁分泌信号传导而导致的。作为另一个实例，card11基因、card11蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是编码card11蛋白的card11基因中的突变，所述card11蛋白是组成型活性的或与由不包含突变的card11基因编码的蛋白质相比具有增加的活性。作为另外的实例，增加的card11基因拷贝数可导致card11蛋白的过表达。例如，card11基因、card11蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是基因或染色体易位的结果，所述基因或染色体易位导致融合蛋白的表达，所述融合蛋白含有card11的第一部分和伴侣蛋白(即，并非card11)的第二部分。在一些实例中，card11基因、card11蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是一个card11基因与另一个非card11基因的基因易位的结果。[0164]人card11的示例性序列如下所示：[0165]seqidno:8(uniparc登录号upi00003fed38)[0166]mpgggpemddymetlkdeedalwenvecnrhmlsryinpakltpylrqckvideqdedevlnapmlpskinragrlldilhtkgqrgyvvfleslefyypelyklvtgkeptrrfstivveegheglthflmneviklqqqmkakdlqrcellarlrqledekkqmtltrvelltfqeryykmkeerdsyndelvkvkddnynlamryaqlseeknmavmrsrdlqleidqlkhrlnkmeeecklernqslklkndienrpkkeqvlelerenemlktknqelqsiiqagkrslpdsdkaildilehdrkealedrqelvnriynlqeearqaeelrdkyleekedlelkcstlgkdcemykhrmntvmlqleevererdqafhsrdeaqtqysqcliekdkyrkqireleekndemriemvrreacivnlesklrrlskdsnnldqslprnlpvtiisqdfgdasprtngqeaddsstseespedskyflpyhppqrrmnlkgiqlqrakspislkrtsdfqakgheeegtdaspsscgslpitnsftkmqpprsrssimsitaeppgndsivrrykedaphrstveedndsggfdaldldddsherysfgpssihssssshqsegldaydleqvnlmfrkfslerpfrpsvtsvghvrgpgpsvqhttlngdsltsqltllggnargsfvhsvkpgslaekaglreghqllllegcirgerqsvpldtctkeeahwtiqrcsgpvtlhykvnhegyrklvkdmedglitsgdsfyirlnlnissqldactmslkcddvvhvrdtmyqdrhewlcarvdpftdhdldmgtipsysraqqlllvklqrlmhrgsreevdgthhtlralrntlqpeealstsdprvsprlsrasflfgqllqfvsrsenkykrmnsnervriisgsplgslarssldatklltekqeeldpeselgknlslipyslvrafycerrrpvlftptvlaktlvqrllnsggamefticksdivtrdeflrrqktetiiysreknpnafeciapanieavaaknkhclleagigctrdliksniypivlfirvceknikrfrkllprpeteeeflrvcrlkekelealpclyatvepdmwgsveellrvvkdkigeeqrktiwvdedql[0167]card11基因或card11蛋白失调的非限制性实例显示在下表b2中。[0168]表b2.[0169][0170]1wu等人,《肿瘤标靶》7.25(2016):38180。[0171]2watt,etal.《美国病理学杂志(theamericanjournalofpathology)》185.9(2015):2354-2363。[0172]如本文所使用的，术语“card14相关性自身免疫性病症”是指与card14基因、card14蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的card14基因、card14蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的自身免疫性病症。[0173]如本文所使用的，术语“card14相关性炎性病症”是指与card14基因、card14蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的card14基因、card14蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的炎性病症。[0174]如本文所使用的，术语“card14相关性癌症”是指与card14基因、card14蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的card14基因、card14蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的癌症。[0175]人card14的示例性序列如下所示：[0176]seqidno:9(uniparc登录号upi000013d81b)[0177]mgelcrrdsaltaldeetlwemmeshrhrivrcicpsrltpylrqakvlcqldeeevlhsprltnsamraghlldllktrgkngaiafleslkfhnpdvytlvtglqpdvdfsnfsglmetsklteclagaigslqeelnqekgqkevllrrcqqlqehlglaetraeglhqleadhsrmkrevsahfhevlrlkdemlslslhysnalqekelaasrcrslqeelyllkqelqranmvsscelelqeqslrtasdqesgdeelnrlkeeneklrsltfslaekdileqsldeargsrqelverihslreravaaerqreqyweekeqtllqfqkskmacqlyrekvnalqaqvcelqkerdqaysardsaqreisqslvekdslrrqvfeltdqvcelrtqlrqlqaeppgvlkqeartrepcprekqrlvrmhaicprddsdcslvsstesqllsdlsatssrelvdsfrssspappsqqslykrvaedfgeepwsfsscleipegdpgalpgakagdphldyelldtadlpqlesslqpvspgrldvsesgvlmrrrparrilsqvtmlafqgdalleqisviggnltgifihrvtpgsaadqmalrpgtqivmvdyeaseplfkavledttleeavgllrrvdgfcclsvkvntdgykrllqdleakvatsgdsfyirvnlamegrakgelqvhcnevlhvtdtmfqgcgcwhahrvnsytmkdtaahgtipnysraqqqlialiqdmtqqctvtrkpssggpqklvrivsmdkakasplrlsfdrgqldpsrmegsstcfwaescltlvpytlvrphrparprpvllvpravgkilseklcllqgfkkclaeylsqeeyeawsqrgdiiqegevsggrcwvtrhaveslmeknthalldvqldsvctlhrmdifpivihvsvnekmakklkkglqrlgtseeqlleaarqeegdldrapclysslapdgwsdldgllscvrqaiadeqkkvvwteqspr[0178]如本文所使用的，术语“card10相关性自身免疫性病症”是指与card10基因、card10蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的card10基因、card10蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的自身免疫性病症。[0179]如本文所使用的，术语“card10相关性炎性病症”是指与card10基因、card10蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的card10基因、card10蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的炎性病症。[0180]如本文所使用的，术语“card10相关性癌症”是指与card10基因、card10蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的card10基因、card10蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的癌症。[0181]短语“card10基因、card10蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调”是指(例如，与对照非癌细胞相比)哺乳动物细胞中野生型card10蛋白的基因突变(例如，染色体易位，其导致包含card10结构域和融合伴侣的融合蛋白的表达；card10基因中的突变，其导致与野生型card10蛋白相比包含至少一个氨基酸缺失的card10蛋白的表达；card10基因中的突变，其导致与野生型card10蛋白相比具有一个或多个点突变的card10蛋白的表达；card10基因中的突变，其导致与野生型card10蛋白相比具有至少一个插入的氨基酸的card10蛋白的表达；基因重复，其导致细胞中card10蛋白水平升高；或调节序列(例如，启动子和/或增强子)中的突变，其导致细胞中card10蛋白水平升高)；card10mrna的替代剪接形式，其导致与野生型card10蛋白相比在card10蛋白中具有至少一个氨基酸缺失的card10蛋白；或表达增加(例如，水平升高)，这是由于异常的细胞信号传导和/或失调的自分泌/旁分泌信号传导而导致的。作为另一个实例，card10基因、card10蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是编码card10蛋白的card10基因中的突变，所述card10蛋白是组成型活性的或与由不包含突变的card10基因编码的蛋白质相比具有增加的活性。作为另外的实例，增加的card10基因拷贝数可导致card10蛋白的过表达。例如，card10基因、card10蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是基因或染色体易位的结果，所述基因或染色体易位导致融合蛋白的表达，所述融合蛋白含有card10的第一部分和伴侣蛋白(即，并非card10)的第二部分。在一些实例中，card10基因、card10蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是一个card10基因与另一个非card10基因的基因易位的结果。[0182]人card10的示例性序列如下所示：[0183]seqidno:10(uniparc登录号upi0000044645)[0184]mpgraeageaeeeagagsgseaeedalweriegvrhrlaralnpakltpylrqcrvideqdeeevlstyrfpcrvnrtgrlmdilrcrgkrgyeaflealefyypehftlltgqepaqrcsmildeegpegltqflmtevrrlrearksqlqreqqlqargrvleeeragleqrlrdqqqaqercqrlredweagslellrlkdenymiamrlaqlseeknsavlrsrdlqlavdqlklkvsrleeecallrrargpppgaeekekekekekepdnvdlvselraenqrltaslrelqeglqqeasrpgapgserilldilehdwreaqdsrqelcqklhavqgelqwaeelrdqylqemedlrlkhrtlqkdcdlykhrmatvlaqleeiekerdqaiqsrdriqlqysqsliekdqyrkqvrgleaerdellttltslegtkallevqlqraqggtclkacasshslcsnlsstwslsefpsplggpeatgeaavmggpephnseeatdsekeinrlsilpfppsagsilrrqreedpappkrsfssmsditgsvtlkpwspglssssssdsvwplgkpegllargcgldflnrslairvsgrsppggpepqdkgpdglsfygdrwsgavvrrvlsgpgsarmepreqrveaaglegacleaeaqqrtllwnqgstlpslmdskacqsfhealeawakgpgaepfyiranltlperadphalcvkaqeilrlvdsaykrrqewfctrvdpltlrdldrgtvpnyqraqqllevqekclpssrhrgprsnlkkraldqlrlvrpkpvgapagdspdqlllepcaeperslrpyslvrpllvsalrpvvllpeclaprlirnlldlpssrldfqvcpaeslsgeelcpssapgapkaqpatpglgsriraiqesvgkkhcllelgargvrelvqneiypivihvevteknvrevrgllgrpgwrdsellrqcrgseqvlwglpcswvqvpahewghaeelakvvrgrilqeqarlvwvecgssrgcpsssea[0185]如本文所使用的，术语“card9相关性自身免疫性病症”是指与card9基因、card9蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的card9基因、card9蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的自身免疫性病症。[0186]如本文所使用的，术语“card9相关性炎性病症”是指与card9基因、card9蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的card9基因、card9蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的炎性病症。[0187]如本文所使用的，术语“card9相关性癌症”是指与card9基因、card9蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的card9基因、card9蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的癌症。[0188]短语“card9基因、card9蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调”是指(例如，与对照非癌细胞相比)哺乳动物细胞中野生型card9蛋白的基因突变(例如，染色体易位，其导致包含card9结构域和融合伴侣的融合蛋白的表达；card9基因中的突变，其导致与野生型card9蛋白相比包含至少一个氨基酸缺失的card9蛋白的表达；card9基因中的突变，其导致与野生型card9蛋白相比具有一个或多个点突变的card9蛋白的表达；card9基因中的突变，其导致与野生型card9蛋白相比具有至少一个插入的氨基酸的card9蛋白的表达；基因重复，其导致细胞中card9蛋白水平升高；或调节序列(例如，启动子和/或增强子)中的突变，其导致细胞中card9蛋白水平升高)；card9mrna的替代剪接形式，其导致与野生型card9蛋白相比在card9蛋白中具有至少一个氨基酸缺失的card9蛋白；或表达增加(例如，水平升高)，这是由于异常的细胞信号传导和/或失调的自分泌/旁分泌信号传导而导致的。作为另一个实例，card9基因、card9蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是编码card9蛋白的card9基因中的突变，所述card9蛋白是组成型活性的或与由不包含突变的card9基因编码的蛋白质相比具有增加的活性。作为另外的实例，增加的card9基因拷贝数可导致card9蛋白的过表达。例如，card9基因、card9蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是基因或染色体易位的结果，所述基因或染色体易位导致融合蛋白的表达，所述融合蛋白含有card9的第一部分和伴侣蛋白(即，并非card9)的第二部分。在一些实例中，card9基因、card9蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是一个card9基因与另一个非card9基因的基因易位的结果。[0189]人card9的示例性序列如下所示：[0190]seqidno:11(uniparc登录号upi000013e4eb)[0191]msdyenddecwsvlegfrvtltsvidpsritpylrqckvlnpddeeqvlsdpnlvirkrkvgvlldilqrtghkgyvafleslelyypqlykkvtgkeparvfsmiidasgesgltqllmtevmklqkkvqdltallsskddfikelrvkdsllrkhqervqrlkeeceagsrelkrckeenydlamrlahqseekgaalmrnrdlqleidqlkhslmkaeddckverkhtlklrhameqrpsqellwelqqekallqarvqeleasvqegkldrsspyiqvleedwrqalrdhqeqantifslrkdlrqgearrlrcmeekemfelqclalrkdskmykdrieaillqmeevaierdqaiatreelhaqharglqekdalrkqvrelgekadelqlqvfqceaqllavegrlrrqqletlvlssdledgsprrsqelslpqdledtqlsdkgclagggspkqpfaalhqeqvlrnphdaglssgeppekerrrlkesfenyrrkralrkmqkgwrqgeedrenttgsdntdtegs[0192]如本文所使用的，术语“bcl10相关性自身免疫性病症”是指与bcl10基因、bcl10蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的bcl10基因、bcl10蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的自身免疫性病症。[0193]如本文所使用的，术语“bcl10相关性炎性病症”是指与bcl10基因、bcl10蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的bcl10基因、bcl10蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的炎性病症。[0194]如本文所使用的，术语“bcl10相关性癌症”是指与bcl10基因、bcl10蛋白或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的bcl10基因、bcl10蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的癌症。[0195]短语“bcl10基因、bcl10蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调”是指(例如，与对照非癌细胞相比)哺乳动物细胞中野生型bcl10蛋白的基因突变(例如，染色体易位，其导致包含bcl10结构域和融合伴侣的融合蛋白的表达；bcl10基因中的突变，其导致与野生型bcl10蛋白相比包含至少一个氨基酸缺失的bcl10蛋白的表达；bcl10基因中的突变，其导致与野生型bcl10蛋白相比具有一个或多个点突变的bcl10蛋白的表达；bcl10基因中的突变，其导致与野生型bcl10蛋白相比具有至少一个插入的氨基酸的bcl10蛋白的表达；基因重复，其导致细胞中bcl10蛋白水平升高；或调节序列(例如，启动子和/或增强子)中的突变，其导致细胞中bcl10蛋白水平升高)；bcl10mrna的替代剪接形式，其导致与野生型bcl10蛋白相比在bcl10蛋白中具有至少一个氨基酸缺失的bcl10蛋白；或表达增加(例如，水平升高)，这是由于异常的细胞信号传导和/或失调的自分泌/旁分泌信号传导而导致的。例如，bcl10基因、bcl10蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是基因或染色体易位的结果，所述基因或染色体易位导致融合蛋白的表达，所述融合蛋白含有bcl10的第一部分和伴侣蛋白(即，并非bcl10)的第二部分。在一些实例中，bcl10基因、bcl10蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以是一个bcl10基因与另一个非bcl10基因的基因易位的结果。[0196]人bcl10的示例性序列如下所示：[0197]seqidno:12(uniparc登录号upi000012682f)[0198]meptapslteedltevkkdalenlrvylcekiiaerhfdhlrakkilsredteeiscrtssrkragklldylqenpkgldtlvesirrektqnfliqkitdevlklrniklehlkglkcsscepfpdgatnnlsrsnsdesnfseklrastvmyhpegessttpffstnsslnlpvlevgrtentifssttlprpgdpgapplppdlqleeegtcanssemflplrsrtvsrqbcl10基因或bcl10蛋白失调的非限制性实例显示在下表b3中。[0199]表b3.[0200][0201][0202]1willis等人《细胞》96.1(1999):35-45。[0203]2zhang等人《自然遗传学(naturegenetics)》22.1(1999):63-68。[0204]如本文所使用的，术语“malt1蛋白酶底物相关性癌症”是指与基因、蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调的癌症，所述失调与malt1蛋白酶底物相关。在一些实施例中，malt1蛋白酶底物相关性癌症选自由以下组成的组：bcl10相关性癌症、a20相关性癌症、cyld相关性癌症、relb相关性癌症、regnase1相关性癌症、roquin-1相关性癌症、hoil1相关性癌症、nik相关性癌症、lima1α相关性癌症及其组合。在一些实施例中，malt1蛋白酶底物相关性癌症选自由以下组成的组：bcl10相关性癌症、a20相关性癌症、cyld相关性癌症及其组合。与本段中描述的特定基因或蛋白质“相关联”的癌症是指与特定基因、特定蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的特定基因、特定蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的癌症。本文描述了此类癌症的非限制性实例。[0205]人a20的示例性序列如下所示：[0206]seqidno:13(uniparc登录号upi000000d92d)[0207]maeqvlpqalylsnmrkavkirertpedifkptngiihhfktmhrytlemfrtcqfcpqfreiihkalidrniqatlesqkklnwcrevrklvalktngdgnclmhatsqymwgvqdtdlvlrkalfstlketdtrnfkfrwqleslksqefvetglcydtrnwndewdnlikmastdtpmarsglqynsleeihifvlcnilrrpiivisdkmlrslesgsnfaplkvggiylplhwpaqecyrypivlgydshhfvplvtlkdsgpeiravplvnrdrgrfedlkvhfltdpenemkekllkeylmvieipvqgwdhgtthlinaakldeanlpkeinlvddyfelvqheykkwqenseqgrreghaqnpmepsvpqlslmdvkcetpncpffmsvntqplchecserrqknqnklpklnskpgpeglpgmalgasrgeayeplawnpeestggphsapptapspflfsettamkcrspgcpftlnvqhngfcerchnarqlhashapdhtrhldpgkcqaclqdvtrtfngicstcfkrttaeassslstslppschqrsksdpsrlvrspsphschragndapagclsqaartpgdrtgtskcrkagcvyfgtpenkgfctlcfieyrenkhfaaasgkvsptasrfqntipclgrecgtlgstmfegycqkcfieaqnqrfheakrteeqlrssqrrdvprttqstsrpkcarascknilacrseelcmecqhpnqrmgpgahrgepapedppkqrcrapacdhfgnakcngycnecfqfkqmyg[0208]a20基因或a20蛋白失调的非限制性实例显示在下表b4中。[0209]表b4.[0210][0211]1johansson等人《肿瘤标靶》7.38(2016):62627。[0212]2novak等人《血液》113.20(2009):4918-4921。[0213]人cyld的示例性序列如下所示：[0214]seqidno:14(uniparc登录号upi0000073a15)[0215]mssglwsqekvtspyweerifylllqecsvtdkqtqkllkvpkgsigqyiqdrsvghsripsakgkknqiglkileqphavlfvdekdvveinekftelllaitnceerfslfknrnrlskglqidvgcpvkvqlrsgeekfpgvvrfrgpllaertvsgiffgvelleegrgqgftdgvyqgkqlfqcdedcgvfvaldkleliedddtalesdyagpgdtmqvelppleinsrvslkvgetiesgtvifcdvlpgkeslgyfvgvdmdnpignwdgrfdgvqlcsfacvestillhindiipalsesvtqerrppklafmsrgvgdkgssshnkpkatgstsdpgnrnrselfytlngssvdsqpqskskntwyidevaedpakslteistdfdrsspplqpppvnslttenrfhslpfsltkmpntngsighsplslsaqsvmeelntapvqespplamppgnshglevgslaevkenppfygvirwigqppglnevlagleledecagctdgtfrgtryftcalkkalfvklkscrpdsrfaslqpvsnqiercnslafggylsevveentppkmekegleimigkkkgiqghynscyldstlfclfafssvldtvllrpkekndveyysetqellrteivnplriygyvcatkimklrkilekveaasgftseekdpeeflnilfhhilrvepllkirsagqkvqdcyfyqifmeknekvgvptiqqllewsfinsnlkfaeapscliiqmprfgkdfklfkkifpslelnitdlledtprqcricgglamyecrecyddpdisagkikqfcktcntqvhlhpkrlnhkynpvslpkdlpdwdwrhgcipcqnmelfavlcietshyvafvkygkddsawlffdsmadrdggqngfnipqvtpcpevgeylkmsledlhsldsrriqgcarrllcdaymcmyqsptmslyk[0216]cyld基因或cyld蛋白失调的非限制性实例可参见例如massoumi,《未来肿瘤学(futureoncology)》7.2(2011):285-297，alameda,j.p.等人,《癌基因(oncogene)》29.50(2010):6522-6532，williams等人,《现代病理学(modernpathology)》(2020):1-13以及courtois和gilmore.《癌基因》25.51(2006):6831-6843。[0217]人relb的示例性序列如下所示：[0218]seqidno:15(uniparc登录号upi00000012b7)[0219]mlrsgpasgpsvptgrampsrrvarppaapelgalgspdlsslslavsrstdeleiideyikengfgldggqpgpgeglprlvsrgaaslstvtlgpvappatpppwgcplgrlvspapgpgpqphlviteqpkqrgmrfryecegrsagsilgessteasktlpaielrdcgglrevevtaclvwkdwphrvhphslvgkdctdgicrvrlrphvsprhsfnnlgiqcvrkkeieaaierkiqlgidpynagslknhqevdmnvvricfqasyrdqqgqmrrmdpvlsepvydkkstntselricrinkesgpctggeelyllcdkvqkedisvvfsraswegradfsqadvhrqiaivfktppyedleivepvtvnvflqrltdgvcseplpftylprdhdsygvdkkrkrgmpdvlgelnssdphgieskrrkkkpaildhflpnhgsgpflppsallpdpdffsgtvslpgleppggpdllddgfaydptaptlftmldllppapphasavvcsggagavvgetpgpepltldsyqapgpgdggtaslvgsnmfpnhyreaafgggllspgpeat[0220]人regnase1的示例性序列如下所示：[0221]seqidno:16(uniparc登录号upi000004d30e)[0222]msgpcgekpvleasptmslwefedshsrqgtprpgqelaaeeasalelqmkvdffrklgyssteihsvlqklgvqadtntvlgelvkhgtatererqtspdpcpqlplvprgggtpkapnlepplpeeekegsdlrpvvidgsnvamshgnkevfscrgillavnwflerghtditvfvpswrkeqprpdvpitdqhilrelekkkilvftpsrrvggkrvvcyddrfivklayesdgivvsndtyrdlqgerqewkrfieerllmysfvndkfmppddplgrhgpsldnflrkkpltlehrkqpcpygrkctygikcrffhperpscpqrsvadelranallspprapskdkngrrpspssqsssllteseqcsldgkklgaqaspgsrqegltqtyapsgrslapsggsgssfgptdwlpqtldslpyvsqdcldsgigslesqmselwgvrgggpgepgpprapytgyspygselpataafsafgramgaghfsvpadyppappafppreywsepyplppptsvlqeppvqspgagrspwgragslakeqasvytklcgvfpphlveavmgrfpqlldpqqlaaeilsyksqhpse人roquin-1的示例性序列如下所示：[0223]seqidno:17(uniparc登录号upi00001d7da8)[0224]mpvqapqwtdflscpictqtfdetirkpislgcghtvckmclnklhrkacpfdqttintdiellpvnsallqlvgaqvpeqqpitlcsgvedtkhyeeakkcveelalylkplssargvglnsttqsvlsrpmqrklvtlvhcqlveeegriramraarslgertvtelilqhqnpqqlssnlwaavrargcqflgpamqeealklvllaledgsalsrkvlvlfvvqrleprfpqasktsighvvqllyrascfkvtkrdedsslmqlkeefrtyealrrehdsqivqiameaglriapdqwssllygdqshkshmqsiidklqtpasfaqsvqeltialqrtgdpanlnrlrphlellanidpspdappptweqlenglvavrtvvhglvdyiqnhskkgadqqqppqhskyktymcrdmkqrggcprgasctfahsqeelekfrkmnkrlvprrplsaslgqlnevglpsaailpdegavdlpsrkppalpngivstgntvtqliprgtdpsydsslkpgkidhlsssapgsppdllesvpksisalpvnphsipprgpadlppmpvtkplqmvprgsqlypaqqtdvyyqdprgaappfepapyqqgmyytpppqcvsrfvrpppsapepappyldhyppylqervvnsqygtqpqqyppiypshydgrrvypapsytreeifrespipieippaavpsyvpesreryqqiesyypvaphptqirpsylreppysrlppppqphpsldelhrrrkeimaqleerkvispppfapsptlpptfhpeefldedlkvagkykgndysqyspwscdtigsyigtkdakpkdvvaagsvemmnveskgmrdqrldlqrraaetsdddlipfgdrptvsrfgaisrtsktiyqgagpmqamapqgaptksinisdyspygthggwgaspysphqnipsqghfsererismsevashgkplpsaereqlrlelqqlnhqisqqtqlrgleavsnrlvlqreantlagqsqpppppppkwpgmisseqlslelhqvereigkrtrelsmenqcsldmksklntskqaengqpepqnkvpaedltltfsdvpngsaltqenisllsnktsslnlsedpegggdnndsqrsgvtpssap[0225]人hoil1的示例性序列如下所示：[0226]seqidno:17(uniparc登录号upi000006f045)[0227]mdektkkaeemalsltravaggdeqvamkcaiwlaeqrvplsvqlkpevsptqdirlwvsvedaqmhtvtiwltvrpdmtvaslkdmvfldygfppvlqqwvigqrlardqetlhshgvrqngdsaylyllsarntslnpqelqrerqlrmledlgfkdltlqprgplepgppkpgvpqepgrgqpdavpepppvgwqcpgctfinkptrpgcemccrarpeayqvpasyqpdeeerarlageeealrqyqqrkqqqqegnylqhvqldqrslvlntepaecpvcysvlapgeavvlreclhtfcreclqgtirnsqeaevscpfidntyscsgkllereikalltpedyqrfldlgisiaenrsafsyhcktpdckgwcffeddvneftcpvcfhvncllckaiheqmnckeyqedlalraqndvaarqttemlkvmlqqgeamrcpqcqivvqkkdgcdwirctvchteicwvtkgprwgpggpgdtsggcrcrvngipchpscqnch[0228]人nik的示例性序列如下所示：[0229]seqidno:18(uniparc登录号upi0000074220)[0230]mavmemacpgapgsavgqqkelpkakektpplgkkqssvykleavekspvfcgkweilndvitkgtakegseagpaaisiiaqaecensqefsptfserifiagskqysqsesldqipnnvahategkmarvcwkgkrrskarkkrkkksskslahagvalakplprtpeqesctipvqedesplgapyvrntpqftkplkepglgqlcfkqlgeglrpalprselhklisplqclnhvwklhhpqdggplplpthpfpysrlphpfpfhplqpwkphplesflgklacvdsqkplpdphlsklacvdspkplpgphlepsclsrgahekfsveeylvhalqgsvssgqahsltslaktwaargsrsrepspktednegvllteklkpvdyeyreevhwathqlrlgrgsfgevhrmedkqtgfqcavkkvrlevfraeelmacagltsprivplygavregpwvnifmelleggslgqlvkeqgclpedralyylgqalegleylhsrrilhgdvkadnvllssdgshaalcdfghavclqpdglgkslltgdyipgtethmapevvlgrscdakvdvwssccmmlhmlngchpwtqffrgplclkiasepppvreippscapltaqaiqeglrkepihrvsaaelggkvnralqqvgglkspwrgeykeprhpppnqanyhqtlhaqprelsprapgprpaeettgrapklqpplppeppepnksppltlskeesgmweplplsslepaparnpssperkatvpeqelqqleielflnslsqpfsleeqeqilsclsidslslsddseknpskasqssrdtlssgvhswssqaearssswnmvlargrptdtpsyfngvkvqiqslngehlhirefhrvkvgdiatgissqipaaafslvtkdgqpvrydmevpdsgidlqctlapdgsfawswrvkhgqlenrp[0231]人lima1α的示例性序列如下所示：[0232]seqidno:19(uniparc登录号upi000002a906)[0233]menclgesrhevekseisentdasgkiekynvplnrlkmmfekgeptqtkilraqsrsasgrkisensyslddleigpgqlssstfdseknesrrnlelprlsetsikdrmakyqaavskqssstnytnelkasggeikihkmeqkenvppgpevcithqegekisanenslavrstpaeddsrdsqvksevqqpvhpkplspdsrasslsessppkamkkfqaparetcvecqktvypmerllanqqvfhiscfrcsycnnklslgtyaslhgriyckphfnqlfkskgnydegfghrphkdlwaskneneeilerpaqlanaretphspgvedapiakvgvlaasmeakassqqekedkpaetkklriawppptelgssgsaleegikmskpkwppedeiskpevpedvdldlkklrrssslkersrpftvaasfqstsvkspktvsppirkgwsmseqseesvggrvaerkqvenakaskkngnvgkttwqnkeskgetgkrskeghslemenenlvengadsdeddnsflkqqspqepkslnwssfvdntfaeefttqnqksqdvelwegevvkelsveeqikrnryydededee[0234]如本文所使用的，术语“与cbm复合物下游的nf-κb途径的组分相关的癌症”是指与基因、蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调的癌症，所述失调与cbm复合物下游的nf-κb途径的组分相关。在一些实施例中，与cbm复合物下游的nf-κb途径的组分相关的癌症选自由以下组成的组：tak1相关性癌症、traf6相关性癌症、tab1相关性癌症、tab2相关性癌症、tab3相关性癌症、mkk7相关性癌症、ikkα相关性癌症、ikkβ相关性癌症、ikkγ相关性癌症、ikbα相关性癌症、p50相关性癌症、p65(rela)相关性癌症、c-rel相关性癌症及其组合。在一些实施例中，与cbm复合物下游的nf-κb途径的组分相关的癌症是ikkγ相关性癌症。与本段中描述的特定基因或蛋白质“相关联”的癌症是指与特定基因、特定蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的特定基因、特定蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的癌症。本文描述了此类癌症的非限制性实例。[0235]人tak1的示例性序列如下所示：[0236]seqidno:20(uniparc登录号upi000012ead6)[0237]mstasaasssssssagemieapsqvlnfeeidykeieveevvgrgafgvvckakwrakdvaikqieseserkafivelrqlsrvnhpnivklygaclnpvclvmeyaeggslynvlhgaeplpyytaahamswclqcsqgvaylhsmqpkalihrdlkppnlllvaggtvlkicdfgtacdiqthmtnnkgsaawmapevfegsnysekcdvfswgiilwevitrrkpfdeiggpafrimwavhngtrppliknlpkpieslmtrcwskdpsqrpsmeeivkimthlmryfpgadeplqypcqysdegqsnsatstgsfmdiastntsnksdtnmeqvpatndtikrleskllknqakqqsesgrlslgasrgssveslpptsegkrmsadmseieariaattayskpkrghrktasfgnildvpeivisgngqprrrsiqdltvtgtepgqvssrssspsvrmittsgptsekptrshpwtpddstdtngsdnsipmayltldhqlqplapcpnskesmavfeqhckmaqeymkvqteialllqrkqelvaeldqdekdqqntsrlvqehkklldenkslstyyqqckkqlevirsqqqkrqgts[0238]人traf6的示例性序列如下所示：[0239]seqidno:21(uniparc登录号upi000000d924)[0240]msllncenscgssqsesdccvamasscsavtkddsvggtastgnlsssfmeeiqgydvefdppleskyecpiclmalreavqtpcghrfckaciiksirdaghkcpvdneillenqlfpdnfakreilslmvkcpnegclhkmelrhledhqahcefalmdcpqcqrpfqkfhinihilkdcprrqvscdncaasmafedkeihdqncplanviceycntilireqmpnhydldcptapipctfstfgchekmqrnhlarhlqentqshmrmlaqavhslsvipdsgyisevrnfqetihqlegrlvrqdhqireltakmetqsmyvselkrtirtledkvaeieaqqcngiyiwkignfgmhlkcqeeekpvvihspgfytgkpgyklcmrlhlqlptaqrcanyislfvhtmqgeydshlpwpfqgtirltildqseapvrqnheeimdakpellafqrptiprnpkgfgyvtfmhlealrqrtfikddtllvrcevstrfdmgslrregfqprstdagv[0241]人tab1的示例性序列如下所示：[0242]seqidno:22(uniparc登录号upi0000136861)[0243]maaqrrsllqseqqpswtddlplchlsgvgsasnrsysadgkgteshppedswlkfrsenncflygvfngydgnrvtnfvaqrlsaelllgqlnaehaeadvrrvllqafdvversflesiddalaekaslqsqlpegvpqhqlppqyqkilerlktlereisggamavvavllnnklyvanvgtnrallckstvdglqvtqlnvdhttenedelfrlsqlgldagkikqvgiicgqestrrigdykvkygytdidllsaakskpiiaepeihgaqpldgvtgflvlmseglykaleaahgpgqanqeiaamidtefakqtsldavaqavvdrvkrihsdtfasggerarfcprhedmtllvrnfgyplgemsqptpspapaaggrvypvsvpyssaqstsktsvtlslvmpsqgqmvngahsastldeatptltnqsptltlqstnthtqssssssdgglfrsrpahslppgedgrvepyvdfaefyrlwsvdhgeqsvvtap[0244]人tab2的示例性序列如下所示：[0245]seqidno:23(uniparc登录号upi0000073c75)[0246]maqgshqidfqvlhdlrqkfpevpevvvsrcmlqnnnnldaccavlsqestrylygegdlnfsddsgisglrnhmtslnldlqsqniyhhgregsrmngsrtlthsisdgqlqggqsnselfqqepqtapaqvpqgfnvfgmssssgasnsaphlgfhlgskgtsslsqqtprfnpimvtlapniqtgrntptslhihgvpppvlnspqgnsiyirpyittpggttrqtqqhsgwvsqfnpmnpqqvyqpsqpgpwttcpasnplshtssqqpnqqghqtshvympisspttsqpptihssgssqssahsqyniqnistgprknqieikleppqrnnssklrssgprtsstsssvnsqtlnrnqptvyiaasppntdelmsrsqpkvyisanaatgdeqvmrnqptlfistnsgasaasrnmsgqvsmgpafihhhppksraignnsatsprvvvtqpntkytfkitvspnkppavspgvvsptfeltnllnhpdhyveteniqhltdptlahvdrisetrklsmgsddaaytqallvhqkarmerlqreleiqkkkldklksevnemennltrrrlkrsnsisqipsleemqqlrscnrqlqididcltkeidlfqargphfnpsaihnfydnigfvgpvppkpkdqrsiiktpktqdteddegaqwnctactflnhpalirceqcemprhf[0247]人tab3的示例性序列如下所示：[0248]seqidno:24(uniparc登录号upi0000071648)[0249]maqsspqldiqvlhdlrqrfpeipegvvsqcmlqnnnnleaccralsqesskylymeyhspddnrmnrnrllhinlgihspssyhpgdgaqlnggrtlvhsssdghidpqhaagkqliclvqephsapavvaatpnynpffmneqnrsaatppsqppqqpssmqtgmnpsamqgpsppppppsymhiprystnpitvtvsqnlpsgqtvpralqilpqipsnlygspgsiyirqtsqsssgrqtpqstpwqsspqgpvphysqrplpvyphqqnyqpsqyspkqqqipqsayhspppsqcpspfsspqhqvqpsqlghifmppspsttpphpyqqgppsyqkqgshsvaylpytasslskgsmkkieitvepsqrpgtainrspspisnqpsprnqhslytattppssspsrgissqpkppfsvnpvyitytqptgpsctpspsprvipnpttvfkitvgrattenllnlvdqeersaapepiqpisvipgsggekgshkyqrssssgsddyaytqalllhqrarmerlakqlklekeelerlksevngmehdlmqrrlrrvscttaiptpeemtrlrsmnrqlqinvdctlkevdllqsrgnfdpkamnnfydniepgpvvppkpskkdssdpctierkarrisvtskvqadihdtqaaaadehrtgstqsprtqprdedyegapwncdsctflnhpalnrceqcempryt[0250]人mkk7的示例性序列如下所示：[0251]seqidno:25(uniparc登录号upi000012f494)[0252]maassleqklsrleaklkqenrearrridlnldispqrprptlqlplandggsrspssesspqhptpparprhmlglpstlftprsmesieidqklqeimkqtgyltiggqryqaeindlenlgemgsgtcgqvwkmrfrktghviavkqmrrsgnkeenkrilmdldvvlkshdcpyivqcfgtfitntdvfiamelmgtcaeklkkrmqgpiperilgkmtvaivkalyylkekhgvihrdvkpsnilldergqiklcdfgisgrlvdskaktrsagcaaymaperidppdptkpdydiradvwslgislvelatgqfpykncktdfevltkvlqeeppllpghmgfsgdfqsfvkdcltkdhrkrpkynkllehsfikryetlevdvaswfkdvmaktesprtsgvlsqphlpffr[0253]人ikkα的示例性序列如下所示：[0254]seqidno:26(uniparc登录号upi000013d6c7)[0255]merppglrpgaggpwemrerlgtggfgnvclyqhreldlkiaikscrlelstknrerwcheiqimkklnhanvvkacdvpeelnilihdvpllameycsggdlrkllnkpenccglkesqilsllsdigsgirylhenkiihrdlkpenivlqdvggkiihkiidlgyakdvdqgslctsfvgtlqylapelfenkpytatvdywsfgtmvfeciagyrpflhhlqpftwhekikkkdpkcifaceemsgevrfsshlpqpnslcslvvepmenwlqlmlnwdpqqrggpvdltlkqprcfvlmdhilnlkivhilnmtsakiisfllppdeslhslqsrieretgintgsqellsetgisldprkpasqcvldgvrgcdsymvylfdksktvyegpfasrslsdcvnyivqdskiqlpiiqlrkvwaeavhyvsglkedysrlfqgqraamlsllrynanltkmkntlisasqqlkakleffhksiqldleryseqmtygissekmlkawkemeekaihyaevgvigyledqimslhaeimelqkspygrrqgdlmesleqraidlykqlkhrpsdhsysdstemvkiivhtvqsqdrvlkelfghlskllgckqkiidllpkvevalsnikeadntvmfmqgkrqkeiwhllkiactqssarslvgsslegavtpqtsawlpptsaehdhslscvvtpqdgetsaqmieenlnclghlstiiheaneeqgnsmmnldwswlte[0256]人ikkβ的示例性序列如下所示：[0257]seqidno:27(uniparc登录号upi0000033729)[0258]mswspslttqtcgawemkerlgtggfgnvirwhnqetgeqiaikqcrqelsprnrerwcleiqimrrlthpnvvaardvpegmqnlapndlpllameycqggdlrkylnqfenccglregailtllsdiasalrylhenriihrdlkpenivlqqgeqrlihkiidlgyakeldqgslctsfvgtlqylapelleqqkytvtvdywsfgtlafecitgfrpflpnwqpvqwhskvrqksevdivvsedlngtvkfssslpypnnlnsvlaerlekwlqlmlmwhprqrgtdptygpngcfkalddilnlklvhilnmvtgtihtypvtedeslqslkariqqdtgipeedqellqeaglalipdkpatqcisdgklneghtldmdlvflfdnskityetqisprpqpesvscilqepkrnlaffqlrkvwgqvwhsiqtlkedcnrlqqgqraammnllrnnsclskmknsmasmsqqlkakldffktsiqidlekyseqtefgitsdklllawremeqavelcgrenevkllvermmalqtdivdlqrspmgrkqggtlddleeqarelyrrlrekprdqrtegdsqemvrlllqaiqsfekkvrviytqlsktvvckqkalellpkveevvslmnedektvvrlqekrqkelwnllkiacskvrgpvsgspdsmnasrlsqpgqlmsqpstasnslpepakkseelvaeahnlctllenaiqdtvreqdqsftaldwswlqteeeehscleqas[0259]人ikkγ的示例性序列如下所示：[0260]seqidno:28(uniparc登录号upi0000000cc4)[0261]mnrhlwksqlcemvqpsggpaadqdvlgeesplgkpamlhlpseqgapetlqrcleenqelrdairqsnqilrerceellhfqasqreekeflmckfqearklverlglekldlkrqkeqalrevehlkrcqqqmaedkasvkaqvtsllgelqesqsrleaatkecqalegraraaseqarqleserealqqqhsvqvdqlrmqgqsveaalrmerqaaseekrklaqlqvayhqlfqeydnhikssvvgserkrgmqledlkqqlqqaeealvakqevidklkeeaeqhkivmetvpvlkaqadiykadfqaerqareklaekkellqeqleqlqreysklkascqesariedmrkrhvevsqaplppapaylssplalpsqrrsppeeppdfccpkcqyqapdmdtlqihvmecie[0262]ikkγ基因或ikkγ蛋白失调的非限制性实例可参见例如courtois和gilmore,《癌基因》25.51(2006):6831-6843。[0263]人ikbα的示例性序列如下所示：[0264]seqidno:29(uniparc登录号upi000004f0a9)[0265]mfqaaerpqewamegprdglkkerllddrhdsgldsmkdeeyeqmvkelqeirlepqevprgsepwkqqltedgdsflhlaiiheekaltmevirqvkgdlaflnfqnnlqqtplhlavitnqpeiaeallgagcdpelrdfrgntplhlaceqgclasvgvltqscttphlhsilkatnynghtclhlasihgylgivellvslgadvnaqepcngrtalhlavdlqnpdlvslllkcgadvnrvtyqgyspyqltwgrpstriqqqlgqltlenlqmlpesedeesydtesefteftedelpyddcvfggqrltl[0266]被加工成p50的人p105的示例性序列如下所示：[0267]seqidno:30(uniparc登录号upi000000d917)[0268]maeddpylgrpeqmfhldpslthtifnpevfqpqmalptdgpylqileqpkqrgfrfryvcegpshgglpgasseknkksypqvkicnyvgpakvivqlvtngknihlhahslvgkhcedgictvtagpkdmvvgfanlgilhvtkkkvfetlearmteacirgynpgllvhpdlaylqaegggdrqlgdrekelirqaalqqtkemdlsvvrlmftaflpdstgsftrrlepvvsdaiydskapnasnlkivrmdrtagcvtggeeiyllcdkvqkddiqirfyeeeenggvwegfgdfsptdvhrqfaivfktpkykdinitkpasvfvqlrrksdletsepkpflyypeikdkeevqrkrqklmpnfsdsfgggsgagaggggmfgsggggggtgstgpgysfphygfptyggitfhpgttksnagmkhgtmdteskkdpegcdksddkntvnlfgkvietteqdqepseatvgngevtltyatgtkeesagvqdnlflekamqlakrhanalfdyavtgdvkmllavqrhltavqdengdsvlhlaiihlhsqlvrdllevtsglisddiinmrndlyqtplhlavitkqedvvedllragadlslldrlgnsvlhlaakeghdkvlsillkhkkaallldhpngdglnaihlammsnslpcllllvaagadvnaqeqksgrtalhlavehdnislagclllegdahvdsttydgttplhiaagrgstrlaallkaagadplvenfeplydlddswenagedegvvpgttpldmatswqvfdilngkpyepeftsddllaqgdmkqlaedvklqlyklleipdpdknwatlaqklglgilnnafrlspapsktlmdnyevsggtvrelvealrqmgyteaieviqaasspvkttsqahslplspastrqqidelrdsdsvcdsgvetsfrklsftesltsgaslltlnkmphdygqegplegki[0269]人p65的示例性序列如下所示：[0270]seqidno:31(uniparc登录号upi000013ed68)[0271]mdelfplifpaepaqasgpyveiieqpkqrgmrfrykcegrsagsipgerstdttkthptikingytgpgtvrislvtkdpphrphphelvgkdcrdgfyeaelcpdrcihsfqnlgiqcvkkrdleqaisqriqtnnnpfqvpieeqrgdydlnavrlcfqvtvrdpsgrplrlppvlshpifdnrapntaelkicrvnrnsgsclggdeifllcdkvqkedievyftgpgweargsfsqadvhrqvaivfrtppyadpslqapvrvsmqlrrpsdrelsepmefqylpdtddrhrieekrkrtyetfksimkkspfsgptdprppprriavpsrssasvpkpapqpypftsslstinydefptmvfpsgqisqasalapappqvlpqapapapapamvsalaqapapvpvlapgppqavappapkptqagegtlseallqlqfddedlgallgnstdpavftdlasvdnsefqqllnqgipvaphttepmlmeypeaitrlvtgaqrppdpapaplgapglpngllsgdedfssiadmdfsallsqiss[0272]人c-rel的示例性序列如下所示：[0273]seqidno:32(uniparc登录号upi000013367b)[0274]masgaynpyieiieqprqrgmrfrykcegrsagsipgehstdnnrtypsiqimnyygkgkvritlvtkndpykphphdlvgkdcrdgyyeaefgqerrplffqnlgircvkkkevkeaiitrikaginpfnvpekqlndiedcdlnvvrlcfqvflpdehgnlttalppvvsnpiydnrapntaelricrvnkncgsvrggdeifllcdkvqkddievrfvlndweakgifsqadvhrqvaivfktppyckaitepvtvkmqlrrpsdqevsesmdfrylpdekdtygnkakkqkttllfqklcqdhvetgfrhvdqdglelltsgdpptlasqsagitvnfperprpgllgsigegryfkkepnlfshdavvremptgvssqaesyypspgpissglshhasmaplpssswssvahptprsgntnplssfstrtlpsnsqgippflripvgndlnasnaciynnaddivgmeassmpsadlygisdpnmlsncsvnmmttssdsmgetdnprllsmnlenpscnsvldprdlrqlhqmssssmsagansnttvfvsqsdafegsdfscadnsminesgpsnstnpnshgfvqdsqysgigsmqneqlsdsfpyeffqv[0275]如本文所使用的，术语“与cbm复合物下游的jnk途径的组分相关的癌症”是指与基因、蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调的癌症，所述失调与cbm复合物下游的jnk途径的组分相关。在一些实施例中，与cbm复合物下游的jnk途径的组分相关的癌症选自由以下组成的组：jnk1相关性癌症、jnk2相关性癌症、jnk3相关性癌症、myd88转录因子相关性癌症、ap-1转录因子相关性癌症及其组合。与本段中描述的特定基因或蛋白质“相关联”的癌症是指与特定基因、特定蛋白质或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平相关联或具有失调(例如，本文所述的特定基因、特定蛋白质或二者中任一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)的癌症。本文描述了此类癌症的非限制性实例。[0276]人jnk1的示例性序列如下所示：[0277]seqidno:33(uniparc登录号upi000012f17a)[0278]msrskrdnnfysveigdstftvlkryqnlkpigsgaqgivcaaydailernvaikklsrpfqnqthakrayrelvlmkcvnhkniigllnvftpqksleefqdvyivmelmdanlcqviqmeldhermsyllyqmlcgikhlhsagiihrdlkpsnivvksdctlkildfglartagtsfmmtpyvvtryyrapevilgmgykenvdlwsvgcimgemvchkilfpgrdyidqwnkvieqlgtpcpefmkklqptvrtyvenrpkyagysfeklfpdvlfpadsehnklkasqardllskmlvidaskrisvdealqhpyinvwydpseaeapppkipdkqlderehtieewkeliykevmdleertkngvirgqpsplgaavingsqhpsssssvndvssmstdptlasdtdssleaaagplgccr[0279]人jnk2的示例性序列如下所示：[0280]seqidno:34(uniparc登录号upi000006e3ad)[0281]msdskcdsqfysvqvadstftvlkryqqlkpigsgaqgivcaafdtvlginvavkklsrpfqnqthakrayrelvllkcvnhkniisllnvftpqktleefqdvylvmelmdanlcqvihmeldhermsyllyqmlcgikhlhsagiihrdlkpsnivvksdctlkildfglartactnfmmtpyvvtryyrapevilgmgykenvdiwsvgcimgelvkgcvifqgtdhidqwnkvieqlgtpsaefmkklqptvrnyvenrpkypgikfeelfpdwifpseserdkiktsqardllskmlvidpdkrisvdealrhpyitvwydpaeaeapppqiydaqleerehaieewkeliykevmdweerskngvvkdqpsdaavssnatpsqsssindissmsteqtlasdtdssldastgplegcr[0282]人jnk3的示例性序列如下所示：[0283]seqidno:35(uniparc登录号upi0000049042)[0284]mslhflyycseptldvkiafcqgfdkqvdvsyiakhynmskskvdnqfysvevgdstftvlkryqnlkpigsgaqgivcaaydavldrnvaikklsrpfqnqthakrayrelvlmkcvnhkniisllnvftpqktleefqdvylvmelmdanlcqviqmeldhermsyllyqmlcgikhlhsagiihrdlkpsnivvksdctlkildfglartagtsfmmtpyvvtryyrapevilgmgykenvdiwsvgcimgemvrhkilfpgrdyidqwnkvieqlgtpcpefmkklqptvrnyvenrpkyagltfpklfpdslfpadsehnklkasqardllskmlvidpakrisvddalqhpyinvwydpaeveapppqiydkqlderehtieewkeliykevmnseektkngvvkgqpspsgaavnsseslppsssvndissmstdqtlasdtdssleasagplgccr[0285]式(i)化合物[0286]本文提供了式(i)化合物，或其药学上可接受的盐：[0287][0288]其中：[0289]每个为单键或双键；[0290]x为n或c；[0291]y为n或c；[0292]z为n或cr5；[0293]其中，当x和y中的一个为n时，x和y中的另一个为c；[0294]n为1、2、或3；[0295]r1为氢、卤素、氰基、羟基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基、-nrarb或任选地被1-3个独立地选自羟基和c1-c3烷氧基的取代基取代的c1-c3烷基；[0296]r2为氢、氨基或卤素；[0297]r2a为氢、卤素或c1-c6烷基；[0298]每个r3独立地为卤素、羟基、氰基、c3-c6环烷基、-nrarb、任选地被c1-c3烷基取代的5-6元杂芳基；c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基或任选地被c1-c3烷氧基或氰基取代的c1-c3烷基；或两个r3连同它们所连接的碳原子一起形成氧基或c3-c8环烷基；[0299]m为0、1、2或3；[0300]r4为苯基、萘基、5-10元杂芳基、3-10元杂环基或c3-c8环烷基；其中每个r4基团任选地被1-3个独立地选自r6的取代基取代；[0301]r5为氢、卤素、氰基、羟基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基、-nrcrd或c1-c3烷基；并且[0302]每个r6独立地选自卤素；氰基；羟基；-co2h；-n＝(s＝o)(c1-c3烷基)2、-s(＝o)p(c1-c3烷基)、-nrerf；-(c＝o)nrerf；任选地被氨基、羟基或-(c＝o)nrerf取代的c1-c3烷氧基；c1-c3卤代烷基；c1-c3卤代烷氧基；任选地被1-3个独立选择的rx取代的5-6元杂芳基；任选地被1-2个独立地选自羟基、-nrerf、c1-c3烷氧基和c3-c6环烷基的取代基取代的c1-c3烷基；任选地被羟基取代的c3-c6环烷基；以及任选地被1-3个独立选择的c1-c3烷基取代的–(q)q-3-8元杂环基；[0303]p为1或2；[0304]q为–o–或–nh–；[0305]q为0或1；[0306]每个rx独立地选自卤素、氰基、羟基、氨基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基或任选地被1-3个独立地选自羟基、c1-c3烷氧基和–nrgrh的取代基取代的c1-c6烷基；并且[0307]ra、rb、rc、rd独立地为氢、c1-c3烷基，或ra和rb，或rc和rd，连同它们所连接的氮原子一起形成4-6元杂环基；并且[0308]re、rf、rg和rh独立地为氢、c1-c3烷基或c3-c6环烷基，或re和rf，或rg和rh，连同它们所连接的氮原子一起形成任选地被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的4-6元杂环基。[0309]在一些实施例中：[0310]每个为单键或双键；[0311]x为n或c；[0312]y为n或c；[0313]z为n或cr5；[0314]其中，当x和y中的一个为n时，x和y中的另一个为c；[0315]n为1、2、或3；[0316]r1为氢、卤素、氰基、羟基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基、-nrarb或任选地被1-3个独立地选自羟基和c1-c3烷氧基的取代基取代的c1-c3烷基；[0317]r2为氢或卤素；[0318]r2a为氢；[0319]每个r3独立地为卤素、羟基、c3-c6环烷基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基或任选地被c1-c3烷氧基取代的c1-c3烷基；或两个r3连同它们所连接的碳原子一起形成氧基或c3-c8环烷基；[0320]m为0、1、2或3；[0321]r4为苯基、5-6元杂芳基、3-10元杂环基或c3-c8环烷基；其中每个r4基团任选地被1-3个独立地选自r6的取代基取代；[0322]r5为氢、卤素、氰基、羟基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基、-nrcrd或c1-c3烷基；并且[0323]每个r6独立地选自卤素；氰基；-co2h；-nrerf；-(c＝o)nrerf；c1-c3烷氧基；c1-c3卤代烷基；c1-c3卤代烷氧基；任选地被c1-c3烷基取代的5-6元杂芳基，所述c1-c3烷基任选地被羟基、-nrerf或c1-c3烷氧基取代；以及3-8元杂环基；[0324]ra、rb、rc、rd独立地为氢、c1-c3烷基，或ra和rb，或rc和rd，连同它们所连接的氮原子一起形成4-6元杂环基；并且[0325]re和rf独立地为氢、c1-c3烷基，或re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成任选地被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的4-6元杂环基。[0326]在一些实施例中，部分由x和y形成的五元含氮环是杂芳环。[0327]在一些实施例中，x为c并且y为c。[0328]在一些实施例中，x为n并且y为c。[0329]在一些实施例中，x为c并且y为n。[0330]在一些实施例中，z为n。在一些实施例中，z为cr5。[0331]在一些实施例中，x为c；y为c；并且z为cr5。在一些实施例中，x为n；y为c；并且z为cr5。在一些实施例中，x为c；y为n；并且z为cr5。在一些实施例中，x为c；y为c；并且z为n。在一些实施例中，x为n；y为c；并且z为n。在一些实施例中，x为c；y为n；并且z为n。[0332]在一些实施例中，r1为氢。[0333]在一些实施例中，r1为卤素、氰基、羟基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷基、-nrarb或任选地被1-3个独立地选自羟基和c1-c3烷氧基的取代基取代的c1-c3烷基。[0334]在一些实施例中，r1为卤素或氰基。在一些实施例中，r1为氯或氰基。在一些实施例中，r1为卤素。例如，r1为氟。例如，r1为氯。在一些实施例中，r1为氰基。在一些实施例中，r1为羟基。[0335]在一些实施例中，r1为c1-c3烷基。在一些实施例中，r1为甲氧基或乙氧基。[0336]在一些实施例中，r1为c1-c3卤代烷氧基。在一些实施例中，r1为三氟甲氧基、二氟甲氧基或氟甲氧基。[0337]在一些实施例中，r1为c1-c3卤代烷基。在一些实施例中，r1为三氟甲基或2,2,2-三氟乙基。[0338]在一些实施例中，r1为-nrarb。在一些实施例中，ra和rb独立地为氢或c1-c3烷基。在某些实施例中，ra和rb中的一个为氢并且ra和rb中的另一个为c1-c3烷基。在一些实施例中，ra和rb中的一个为氢并且ra和rb中的另一个为甲基。在一些实施例中，ra和rb中的一个为氢并且ra和rb中的另一个为乙基。在某些实施例中，ra和rb均为氢。在某些实施例中，ra和rb均为c1-c3烷基。在一些实施例中，ra和rb均为甲基。在一些实施例中，ra和rb中的一个为甲基并且ra和rb中的另一个为乙基。在一些实施例中，ra和rb均为乙基。[0339]在一些实施例中，ra和rb连同它们所连接的氮原子一起形成4-6元杂环基。在某些实施例中，ra和rb连同它们所连接的氮原子一起形成4元杂环基。在一些实施例中，ra和rb连同它们所连接的氮原子一起形成5元杂环基。在一些实施例中，ra和rb连同它们所连接的氮原子一起形成6元杂环基。[0340]在一些实施例中，r1为任选地被1-3个独立地选自羟基和c1-c3烷氧基的取代基取代的c1-c3烷基。在某些实施例中，r1为任选地被1个选自羟基和c1-c3烷氧基的取代基取代的c1-c3烷基。在这些实施例中的某些实施例中，r1为任选地被1个选自羟基和c1-c3烷氧基的取代基取代的甲基。在某些实施例中，r1为任选地被1个选自羟基和c1-c3烷氧基的取代基取代的乙基。在某些实施例中，r1为任选地被羟基取代的c1-c3烷基。在某些实施例中，r1为任选地被c1-c3烷氧基(例如，甲氧基)取代的c1-c3烷基。在一些实施例中，r1为羟甲基或甲氧基乙基。[0341]在一些实施例中，r1为未经取代的c1-c3烷基(例如，甲基或乙基)。[0342]在一些实施例中，r2是氢。在一些实施例中，r2为卤素。例如，r2为氟。例如，r2为氯。在一些实施例中，r2为氨基。[0343]在一些实施例中，r2a为氢。在一些实施例中，r2a为卤素，例如，r2a为氟或氯。在一些实施例中，r2a为c1-c6烷基，如本文所述的那些。[0344]在一些实施例中，n为1、2或3。在一些实施例中，n为1或2。在一些实施例中，n为2或3。在一些实施例中，n为1或3。在一些实施例中，n为1。在一些实施例中，n为2。在一些实施例中，n为3。[0345]在一些实施例中，m为0、1、2或3。在一些实施例中，m为0、1或2。在一些实施例中，m为1、2或3。在一些实施例中，m为0、2或3。在一些实施例中，m为0、1或3。在一些实施例中，m为0或1。在一些实施例中，m为0或2。在一些实施例中，m为0或3。在一些实施例中，m为1或2。在一些实施例中，m为1或3。在一些实施例中，m为2或3。在一些实施例中，m为0。在一些实施例中，m为1。在一些实施例中，m为2。在一些实施例中，m为3。[0346]在一些实施例中，每个r3独立地为卤素、氰基、c3-c6环烷基、任选地被c1-c3烷氧独立地为c1-c3烷氧基。例如，r3为甲氧基或乙氧基。在一些实施例中，每个r3独立地为c1-c3卤代烷氧基。例如，r3为三氟甲氧基、二氟甲氧基或氟甲氧基。在一些实施例中，每个r3独立地为c1-c3卤代烷基。例如，每个r3为三氟甲基或2,2,2-三氟乙基。[0356]在一些实施例中，m为1，并且r3为任选地被c1-c3烷氧基或氰基取代的c1-c3烷基。在一些实施例中，m为2，并且每个r3独立地为任选地被c1-c3烷氧基或氰基取代的c1-c3烷基。在一些实施例中，m为1，并且r3为c1-c3烷基。在一些实施例中，m为2，并且每个r3独立地为c1-c3烷基。在一些实施例中，m为1，并且r3为被c1-c3烷氧基取代的c1-c3烷基。在一些实施例中，m为2，并且每个r3独立地为被c1-c3烷氧基取代的c1-c3烷基。在一些实施例中，m为1，并且r3为被氰基取代的c1-c3烷基。在一些实施例中，m为2，并且每个r3独立地为被氰基取代的c1-c3烷基。[0357]在一些实施例中，m为2，并且每个r3独立地为任选地被c1-c3烷氧基取代的c1-c3烷基，r3基团是成对c1-c3烷基，其各自任选地被c1-c3烷氧基取代。在一些实施例中，每个r3独立地为任选地被c1-c3烷氧基取代的c1-c3烷基。在一些实施例中，一个r3基团为甲基或甲氧基甲基。[0358]在一些实施例中，每个r3独立地为c1-c3烷氧基。在一些实施例中，每个r3独立地为c1-c3烷氧基，并且m为1或2。在一些实施例中，当m为2时，一个r3为c1-c3烷氧基并且另一个r3不是c1-c3烷氧基。在这些实施例中的某些实施例中，c1-c3烷氧基为甲氧基。[0359]在一些实施例中，每个r3独立地为c1-c3卤代烷氧基。在一些实施例中，每个r3独立地为c1-c3卤代烷氧基，并且m为1或2。在一些实施例中，当m为2时，一个r3为c1-c3卤代烷氧基并且另一个r3不是c1-c3卤代烷氧基。在这些实施例中的某些实施例中，c1-c3卤代烷氧基为三氟甲氧基。[0360]在一些实施例中，每个r3独立地为c1-c3卤代烷基。在一些实施例中，每个r3独立地为c1-c3卤代烷基，并且m为1或2。在一些实施例中，当m为2时，一个r3为c1-c3卤代烷基并且另一个r3不是c1-c3卤代烷基。在这些实施例中的某些实施例中，c1-c3卤代烷基为三氟甲基。[0361]在一些实施例中，m为2，并且r3基团是成对的。在一些实施例中，m为2，并且每个r3独立地为c1-c3卤代烷基。在一些实施例中，r3基团是成对的独立选择的c1-c3卤代烷基。在一些实施例中，m为2，一个r3为任选地被c1-c3烷氧基或氰基取代的c1-c3烷基并且另一个r3为c1-c3卤代烷基。在一些实施例中，m为2，一个r3为被c1-c3烷氧基或氰基取代的c1-c3烷基并且另一个r3为c1-c3卤代烷基。在一些实施例中，m为2，一个r3为c1-c3烷基并且另一个r3为c1-c3卤代烷基。在一些实施例中，r3基团是成对的c1-c3烷基(其任选地被c1-c3烷氧基或氰基取代)和c1-c3卤代烷基。在一些实施例中，r3基团是成对的c1-c3烷基(其被c1-c3烷氧基或氰基取代)和c1-c3卤代烷基。在一些实施例中，r3基团是成对的c1-c3烷基和c1-c3卤代烷基。在一些实施例中，m为2，一个r3为任选地被c1-c3烷氧基或氰基取代的c1-c3烷基并且另一个r3为c3-c6环烷基。在一些实施例中，m为2，一个r3为被c1-c3烷氧基取代的c1-c3烷基并且另一个r3为c3-c6环烷基。在一些实施例中，m为2，一个r3为被氰基取代的c1-c3烷基并且另一个r3为c3-c6环烷基。在一些实施例中，m为2，一个r3为c1-c3烷基并且另一个r3为c3-c6环烷基。在一些实施例中，r3基团是成对的c1-c3烷基(其任选地被c1-c3烷氧基或氰基取代)和c3-c6环烷基。在一些实施例中，r3基团是成对的c1-c3烷基(其被c1-c3烷氧基或氰基取代)和c3-c6环烷基。在一些实施例中，r3基团是成对的c1-c3烷基和c3-c6环烷基。在一些实施例中，m为2，一个r3为c1-c3卤代烷基并且另一个r3为c3-c6环烷基。在一些实施例中，r3基团是成对的c1-c3卤代烷基和c3-c6环烷基。[0362]在一些实施例中，m为1，并且r3为甲基、甲氧基甲基、三氟甲基或环丙基。在一些实施例中，m为2，并且每个r3为甲基。在一些实施例中，m为2，并且每个r3为三氟甲基。在一些实施例中，m为2，并且一个r3为甲基并且另一个r3为甲氧基。在一些实施例中，m为2，并且一个r3为环丙基并且另一个r3为甲氧基。[0363]在一些实施例中，m为1，并且每个r3为甲基。在一些实施例中，m为2，并且每个r3为甲基。在一些实施例中，m为2，每个r3为甲基，并且r3基团是成对的甲基。在一些实施例中，每个r3为甲基。在一些实施例中，m为1，并且r3为甲氧基甲基。在一些实施例中，m为2，并且一个r3为甲基。在一些实施例中，m为2，并且一个r3为甲氧基甲基。在一些实施例中，m为2，每个r3为甲基，并且r3基团是成对的甲基。在一些实施例中，m为2，并且r3基团是成对的甲基和甲氧基甲基。[0364]在一些实施例中，m为2，并且r3基团是成对的。在一些实施例中，m为2，并且每个r3为三氟甲基。在一些实施例中，r3基团是成对的三氟甲基。在一些实施例中，m为2，一个r3为任选地被c1-c3烷氧基或氰基取代的c1-c3烷基并且另一个r3为三氟甲基。在一些实施例中，m为2，一个r3为被c1-c3烷氧基取代的c1-c3烷基并且另一个r3为三氟甲基。在一些实施例中，m为2，一个r3为c1-c3烷基并且另一个r3为三氟甲基。在一些实施例中，m为2，一个r3为甲基并且另一个r3为三氟甲基。在一些实施例中，m为2，一个r3为甲氧基甲基并且另一个r3为三氟甲基。在一些实施例中，r3基团是成对的甲基和三氟甲基。在一些实施例中，r3基团是成对的甲氧基甲基和三氟甲基。在一些实施例中，m为2，一个r3为甲基并且另一个r3为环丙基。在一些实施例中，m为2，一个r3为甲氧基甲基并且另一个r3为环丙基。在一些实施例中，r3基团是成对的甲基和环丙基。在一些实施例中，r3基团是成对的甲氧基甲基和环丙基。在一些实施例中，m为2，一个r3为三氟甲基并且另一个r3为环丙基。在一些实施例中，r3基团是成对的三氟甲基和环丙基。[0365]在一些实施例中，m为2，并且两个r3连同它们所连接的碳原子一起形成氧基。在一些实施例中，m为2，并且两个r3一起形成c3-c8环烷基(例如，环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基或环辛基)。[0366]在一些实施例中，r4为苯基、萘基、5-10元杂芳基、3-10元杂环基或c3-c8环烷基；其中每个r4基团任选地被1-2个独立选择的r6取代。在一些实施例中，r4为苯基、5-6元杂芳基、3-10元杂环基或c3-c8环烷基；其中每个r4基团任选地被1-2个独立选择的r6取代。在一些实施例中，r4为苯基、萘基、5-10元杂芳基、3-10元杂环基或c3-c8环烷基；其中每个r4基团任选地被2-3个独立选择的r6取代。在一些实施例中，r4为苯基、萘基、5-10元杂芳基、3-10元杂环基或c3-c8环烷基；其中每个r4基团任选地被1或3个独立选择的r6取代。在一些实施例中，r4为苯基、萘基、5-10元杂芳基、3-10元杂环基或c3-c8环烷基；其中每个r4基团任选地被1个独立选择的r6取代。在一些实施例中，r4为苯基、萘基、5-10元杂芳基、3-10元杂环基或c3-c8环烷基；其中每个r4基团任选地被2个独立选择的r6取代。在一些实施例中，r4为苯基、萘基、5-10元杂芳基、3-10元杂环基或c3-c8环烷基；其中每个r4基团任选地被3个独立选择的r6取代。在一些实施例中，r4为苯基、5-6元杂芳基、3-10元杂环基或c3-c8环烷基；其中每个r4基团任选地被2-3个独立选择的r6取代。在一些实施例中，r4为苯基、5-6元杂芳基、3-10元杂环基或c3-c8环烷基；其中每个r4基团任选地被1或3个独立选择的r6取代。在一些实施例中，r4为苯基、5-6元杂芳基、3-10元杂环基或c3-c8环烷基；其中每个r4基团任选地被1个独立选择的r6取代。在一些实施例中，r4为苯基、5-6元杂芳基、3-10元杂环基或c3-c8环烷基；其中每个r4基团任选地被2个独立选择的r6取代。在一些实施例中，r4为苯基、5-6元杂芳基、3-10元杂环基或c3-c8环烷基；其中每个r4基团任选地被3个独立选择的r6取代。[0367]在一些实施例中，r4为苯基或5元杂芳基；其中每个r4基团任选地被1-3个独立地选自r6的取代基取代。在一些实施例中，r4为苯基或6元杂芳基；其中每个r4基团任选地被1-3个独立地选自r6的取代基取代。在一些实施例中，r4为萘基或9-10元杂芳基；其中每个r4基团任选地被1-3个独立地选自r6的取代基取代。[0368]在一些实施例中，r4为苯基、5元杂芳基或环戊基；其中每个r4基团任选地被1-3个独立地选自r6的取代基取代。在一些实施例中，r4为苯基、6元杂芳基、环戊基或环己基；其中每个r4基团任选地被1-3个独立地选自r6的取代基取代。[0369]在一些实施例中，r4为任选地被1-3个独立选择的r6取代的苯基。在某些实施例中，r4为任选地被1个r6取代的苯基。在某些实施例中，r4为任选地被2个独立选择的r6取代的苯基。在某些实施例中，r4为任选地被3个独立选择的r6取代的苯基。[0370]在一些实施例中，r4为未经取代的苯基。[0371]在一些实施例中，r4为被1-3个独立地选自r6的取代基的取代的苯基。在某些实施例中，r4为被r6取代的苯基。在某些实施例中，r4为被2个独立选择的r6取代的苯基。在一些实施例中，r4为被3个独立选择的r6取代的苯基。[0372]在一些实施例中，r4为任选地被1-3个独立选择的r6取代的萘基。在一些实施例中，r4为被1-3个独立选择的r6取代的萘基。[0373]在一些实施例中，r4为未经取代的萘基。[0374]在一些实施例中，r4为任选地被1-3个(例如，2个)独立地选自r6的取代基取代的5-6元杂芳基。在一些实施例中，r4为任选地被1-3个(例如，2个)独立选择的r6取代的6元杂芳基。在一些实施例中，r4为任选地被1-3个(例如，2个)独立选择的r6取代的9-10元杂芳基。在一些实施例中，r4为任选地被1-3个(例如，2个)独立选择的r6取代的9元杂芳基。在一些实施例中，r4为任选地被1-3个(例如，2个)独立选择的r6取代的10元杂芳基。[0375]在一些实施例中，r4为未经取代的5-6元杂芳基。在一些实施例中，r4为未经取代的9-10元杂芳基。[0376]在一些实施例中，r4为被1-3个独立地选自r6的取代基取代的5-6元杂芳基。在一些实施例中，r4为被1-3个独立地选自r6的取代基取代的9-10元杂芳基。[0377]在一些实施例中，5-6元杂芳基是3-吡啶基、4-吡啶基或4-哒嗪基。在一些实施例中，r45-6元杂芳基是3-吡啶基或4-吡啶基。在一些实施例中，r45-6元杂芳基是吡啶酮基。[0378]在一些实施例中，r4为任选地被1-3个独立地选自r6的取代基取代的3-10元杂环基。在一些实施例中，r4为任选地被1-3个独立地选自r6的取代基取代的6-10元杂环基。在一些实施例中，r4为被1-3个独立地选自r6的取代基取代的3-10元杂环基。在一些实施例中，r4为被1-3个独立地选自r6的取代基取代的6-10元杂环基。在一些实施例中，r4为被1-2个独立地选自r6的取代基取代的3-10元杂环基。在一些实施例中，r4为被1-2个独立地选自r6的取代基取代的6-10元杂环基。在一些实施例中，r4为3-10元杂环基。在一些实施例中，r4为6-10元杂环基。在一些实施例中，r4为任选地被1-2个独立选择的r6取代的吗啉基。在一些实施例中，r4为任选地被1-2个独立选择的r6取代的四氢吡喃基。在一些实施例中，r4为任选地被1-2个独立选择的r6取代的1-氧杂螺[4.5]癸烷。[0379]在一些实施例中，r4为任选地被1-3个独立选择的r6取代的c3-c8环烷基。在某些实施例中，r4为任选地被1个r6取代的c3-c8环烷基。在某些实施例中，r4为任选地被2个独立选择的r6取代的c3-c8环烷基。在某些实施例中，r4为任选地被3个独立选择的r6取代的c3-c8环烷基。[0380]在一些实施例中，r4为未经取代的c3-c8环烷基。[0381]在一些实施例中，r4为被1-3个独立选择的r6取代的c3-c8环烷基。在某些实施例中，r4为被1个r6取代的c3-c8环烷基。在某些实施例中，r4为被2个独立选择的r6取代的c3-c8环烷基。在某些实施例中，r4为被3个独立选择的r6取代的c3-c8环烷基。[0382]在一些实施例中，r6中的至少一个是卤素。在一些实施例中，r6中的至少一个是氟。在一些实施例中，r6中的至少一个是氯。在一些实施例中，r6中的一个是卤素。在一些实施例中，r6中的一个是氟。在一些实施例中，r6中的一个是氯。在一些实施例中，r6中的两个是卤素。在一些实施例中，r6中的两个是氟。在一些实施例中，r6中的两个是氯。在一些实施例中，r6中的三个是卤素。在一些实施例中，r6中的三个是氟。在一些实施例中，r6中的三个是氯。在一些实施例中，r6中的至少一个是氰基。在一些实施例中，r6中的至少一个是羟基。在一些实施例中，r6中的至少一个是-co2h。[0383]在一些实施例中，r6中的至少一个是-n＝(s＝o)(c1-c3烷基)2。在一些实施例中，r6中的至少一个是-n＝(s＝o)(甲基)2。[0384]在一些实施例中，r6中的至少一个是-s(＝o)p(c1-c3烷基)(例如，-s(＝o)p(甲基))。在一些实施例中，r6中的至少一个是-s(＝o)(c1-c3烷基)(例如，-s(＝o)(甲基))。在一些实施例中，r6中的至少一个是-s(＝o)2(c1-c3烷基)(例如，-s(＝o)2(甲基))。[0385]在一些实施例中，p为1。在一些实施例中，p为2。[0386]在一些实施例中，r6中的至少一个是-nrerf。在一些实施例中，r6中的至少一个是-(c＝o)nrerf。[0387]在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被氨基、羟基或-(c＝o)nrerf取代的c1-c3烷氧基。在一些实施例中，r6中的至少一个是未经取代的c1-c3烷氧基。在一些实施例中，r6中的至少一个是被氨基、羟基或-(c＝o)nrerf取代的c1-c3烷氧基。在一些实施例中，r6中的至少一个是被氨基取代的c1-c3烷氧基。在一些实施例中，r6中的至少一个是被羟基取代的c1-c3烷氧基。在一些实施例中，r6中的至少一个是被-(c＝o)nrerf取代的c1-c3烷氧基。[0388]在某些实施例中，r6中的至少一个是甲氧基或乙氧基。[0389]在一些实施例中，re和rf独立地为氢或c1-c3烷基。在某些实施例中，re和rf中的一个为氢并且re和rf中的另一个为c1-c3烷基。在一些实施例中，re和rf中的一个为氢并且re和rf中的另一个为甲基。在一些实施例中，re和rf中的一个为氢并且re和rf中的另一个为乙基。在某些实施例中，re和rf均为氢。在某些实施例中，re和rf均为c1-c3烷基。在一些实施例中，re和rf均为甲基。在一些实施例中，re和rf中的一个为甲基并且re和rf中的另一个为乙基。在一些实施例中，re和rf均为乙基。在一些实施例中，re和rf独立地为氢或c3-c6环烷基。在一些实施例中，re和rf独立地为氢或环丙基。在一些实施例中，re和rf中的一个为氢并且re和rf中的另一个为环丙基。[0390]在一些实施例中，re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成任选地被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的4-6元杂环基。在某些实施例中，re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成任选地被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的4元杂环基。在一些实施例中，re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成任选地被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的5元杂环基。在一些实施例中，re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成任选地被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的6元杂环基。在一些实施例中，re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的4-6元杂环基。在一些实施例中，re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成被c1-c3烷基取代的4-6元杂环基。在一些实施例中，re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成被c1-c3烷氧基取代的4-6元杂环基。在一些实施例中，re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成未经取代的4-6元杂环基。[0391]在一些实施例中，r6中的至少一个是c1-c3卤代烷基。在某些实施例中，r6中的至少一个是三氟甲基、二氟甲基或2,2,2-三氟乙基。在某些实施例中，r6中的至少一个是三氟甲基或2,2,2-三氟乙基。在一些实施例中，r6中的至少一个是二氟甲基。[0392]在一些实施例中，r6中的至少一个是c1-c3卤代烷氧基。在一些实施例中，r6中的至少一个是三氟甲氧基。在一些实施例中，r6中的至少一个是二氟甲氧基。[0393]在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被1-3个独立选择的rx取代的5-6元杂芳基。在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被1-2个独立选择的rx取代的5-6元杂芳基。在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被2-3个独立选择的rx取代的5-6元杂芳基。在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被1或3个独立选择的rx取代的5-6元杂芳基。在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被1个rx取代的5-6元杂芳基。在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被2个独立选择的rx取代的5-6元杂芳基。在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被3个独立选择的rx取代的5-6元杂芳基。在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被卤素、氰基、羟基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、氨基、c1-c3卤代烷基或c1-c3烷基取代的5-6元杂芳基，所述c1-c3烷基任选地被羟基或-nrerf取代。在一些实施例中，r6为任选地被c1-c3烷基取代的5-6元杂芳基，所述c1-c3烷基任选地被羟基或-nrerf取代。在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被卤素、c1-c3卤代烷基或c1-c3烷基取代的5-6元杂芳基，所述c1-c3烷基任选地被羟基或-nrerf取代。在一些实施例中，r6为被c1-c3烷基取代的5-6元杂芳基，所述c1-c3烷基被羟基或-nrerf取代。在一些实施例中，r6为被羟甲基、氨基甲基、羟乙基、氨基乙基、丙-2-醇或丙-2-胺取代的5-6元杂芳基。[0394]在某些实施例中，r6中的至少一个是任选地被1-3个(例如，1-2个、2-3个、1个、2个或3个)独立选择的rx取代的5元杂芳基。在某些实施例中，r6中的至少一个是任选地被卤素、氰基、羟基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3烷基、氨基或c1-c3卤代烷基取代的5元杂芳基。在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被卤素、氰基、羟基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、氨基、c1-c3卤代烷基或c1-c3烷基取代的6元杂芳基，所述c1-c3烷基任选地被羟基或-nrerf取代。在一些实施例中，r6为被羟甲基、氨基甲基、羟乙基、氨基乙基、丙-2-醇或丙-2-胺取代的5元杂芳基。在一些实施例中，r6为被羟甲基、氨基甲基、羟乙基、氨基乙基、丙-2-醇或丙-2-胺取代的6元杂芳基。[0395]在一些实施例中，r6中的至少一个是未经取代的5-6元杂芳基。在一些实施例中，r6中的至少一个是1,2,3-三唑-2-基。[0396]在一些实施例中，每个rx独立地选自氰基、羟基、c1-c3烷氧基或任选地被1-3个独立地选自羟基、c1-c3烷氧基和–nrgrh的取代基取代的c1-c6烷基。在一些实施例中，每个rx独立地选自羟基或任选地被1-3个独立地选自羟基、c1-c3烷氧基和–nrgrh的取代基取代的c1-c6烷基。在一些实施例中，每个rx独立地选自羟基或任选地被1-3个(例如，1-2个)独立地选自羟基、甲氧基和二甲基氨基的取代基取代的c1-c2烷基。在一些实施例中，每个rx独立地选自羟基或任选地被1-3个独立地选自羟基、c1-c3烷氧基和–nrgrh的取代基取代的c1-c4烷基。[0397]在一些实施例中，rg和rh独立地为氢或c1-c3烷基。在某些实施例中，rg和rh中的一个为氢并且rg和rh中的另一个为c1-c3烷基。在一些实施例中，rg和rh中的一个为氢并且rg和rh中的另一个为甲基。在一些实施例中，rg和rh中的一个为氢并且rg和rh中的另一个为乙基。在某些实施例中，rg和rh均为氢。在某些实施例中，rg和rh均为c1-c3烷基。在一些实施例中，rg和rh均为甲基。在一些实施例中，rg和rh中的一个为甲基并且rg和rh中的另一个为乙基。在一些实施例中，rg和rh均为乙基。在一些实施例中，rg和rh独立地为氢或c3-c6环烷基。在一些实施例中，rg和rh独立地为氢或环丙基。在一些实施例中，rg和rh中的一个为氢并且rg和rh中的另一个为环丙基。[0398]在一些实施例中，rg和rh连同它们所连接的氮原子一起形成任选地被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的4-6元杂环基。在某些实施例中，rg和rh连同它们所连接的氮原子一起形成任选地被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的4元杂环基。在一些实施例中，rg和rh连同它们所连接的氮原子一起形成任选地被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的5元杂环基。在一些实施例中，rg和rh连同它们所连接的氮原子一起形成任选地被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的6元杂环基。在一些实施例中，rg和rh连同它们所连接的氮原子一起形成被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的4-6元杂环基。在一些实施例中，rg和rh连同它们所连接的氮原子一起形成被c1-c3烷基取代的4-6元杂环基。在一些实施例中，rg和rh连同它们所连接的氮原子一起形成被c1-c3烷氧基取代的4-6元杂环基。在一些实施例中，rg和rh连同它们所连接的氮原子一起形成未经取代的4-6元杂环基。[0399]在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被1-2个独立地选自羟基、-nrerf、c1-c3烷氧基和c3-c6环烷基的取代基取代的c1-c3烷基。在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被羟基取代的c3-c6环烷基。[0400]在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被羟基、-nrerf或c1-c3烷氧基取代的c1-c3烷基。在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被羟基、-nrerf或c1-c3烷氧基取代的甲基。在一些实施例中，r6中的至少一个是羟甲基、2-氨基乙基或甲氧基乙基。在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被羟基、-nrerf或c1-c3烷氧基取代的乙基。[0401]在一些实施例中，re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成任选地被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的4-6元杂环基。在某些实施例中，re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成4元杂环基。在一些实施例中，re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成5元杂环基。在一些实施例中，re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成6元杂环基。在一些实施例中，re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的4-6元杂环基。在一些实施例中，re和rf连同它们所连接的氮原子一起形成未经取代的4-6元杂环基。[0402]在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被1-3个独立选择的c1-c3烷基取代的–(q)q-3-8元杂环基。在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被1-3个独立选择的c1-c3烷基取代的–o-3-8元杂环基。在一些实施例中，r6中的至少一个是任选地被1-3个独立选择的取代的c1-c3烷基取代的–nh-3-8元杂环基。在一些实施例中，r6为–(q)q-3-8元杂环基。在一些实施例中，r6为被1-3个独立选择的c1-c3烷基取代的–(q)q-3-8元杂环基。在一些实施例中，r6为被c1-c3烷基取代的–(q)q-3-8元杂环基。在一些实施例中，r6为被2个独立选择的c1-c3烷基取代的–(q)q-3-8元杂环基。在一些实施例中，r6为被3个独立选择的c1-c3烷基取代的–(q)q-3-8元杂环基。[0403]在一些实施例中，q为0。在一些实施例中，q为1。[0404]在一些实施例中，q为–o–。在一些实施例中，q为–nh–。[0405]在一些实施例中，r6中的至少一个是3-8元杂环基。在某些实施例中，r6中的至少一个是3元杂环基。在某些实施例中，r6中的至少一个是4元杂环基。在某些实施例中，r6中的至少一个是5元杂环基。在某些实施例中，r6中的至少一个是包括1个选自o、s和nh的杂原子环成员的5元杂环基。在某些实施例中，r6中的至少一个是四氢呋喃基(例如，2-四氢呋喃基)。在某些实施例中，r6中的至少一个是6元杂环基。在某些实施例中，r6中的至少一个是7元杂环基。在某些实施例中，r6中的至少一个是8元杂环基。[0406]在一些实施例中，r4为吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、吡咯基或咪唑基；其中的每一个被2个r6取代：一个r6为三唑基、咪唑基、噁唑基、吡唑基或吡咯烷基；并且另一个r6为甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、氯或氰基。在一些实施例中，r4为吡啶基、嘧啶基或吡嗪基；其中的每一个被2个r6取代：一个r6为三唑基、咪唑基、噁唑基、吡唑基或吡咯烷基；并且另一个r6为甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、氯或氰基。在一些实施例中，r4为被2个r6取代的吡啶基：一个r6为三唑基、咪唑基或噁唑基；并且另一个r6为甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、氯或氰基。在一些实施例中，r4为吡啶基或苯基；其中的每一个被2个r6取代：一个r6为三唑基或吡唑基，其各自任选地被羟甲基、甲基、羟基、羟乙基、氰基或甲氧基取代；并且另一个r6为甲氧基、三氟甲基、三氟甲氧基、二氟甲基、氯或氰基。[0407]在一些实施例中，r4为被1-3个独立选择的r6取代的3-吡啶基或4-吡啶基。[0408]在一些实施例中，r4为其中波浪线穿过连接至式(i)的–c(＝o)nh-部分的键。[0409]在一些实施例中，r4为其中波浪线穿过连接至式(i)的–c(＝o)nh-部分的键。[0410]在一些实施例中，r4为其中波浪线穿过连接至式(i)的–c(＝o)nh-部分的键。[0411]在一些实施例中，r4为其中波浪线穿过连接至式(i)的–c(＝o)nh-部分的键。[0412]在一些实施例中，r4为其中波浪线穿过连接至式(i)的–c(＝o)nh-部分的键。[0413]在一些实施例中，r4为其中波浪线穿过连接至式(i)的–c(＝o)nh-部分的键。[0414]在一些实施例中，当r4为时，r6选自由以下组成的组：氰基、卤素、c1-c3卤代烷基和c1-c3烷氧基。[0415]在一些实施例中，当r4为时，r6选自由以下组成的组：氰基、卤素、c1-c3卤代烷基和c1-c3烷氧基。[0416]在一些实施例中，当r4为时，r6选自由以下组成的组：氰基、氯、二氟甲基、三氟甲基和甲氧基。例如，当r4为时，r6为氯或三氟甲基(例如，氯)。[0417]在一些实施例中，r4为其中波浪线穿过连接至式(i)的–c(＝o)nh-部分的键。1,1-二氧化物、吡咯烷-2-对-1-基、噁唑-2-基、噁二唑-2-基、2-氨基-嘧啶-4-基、-(c＝o)4-甲基哌嗪-1-基、-(c＝o)n(ch3)2、-(c＝o)nhch3、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基、甲基、氰基。[0429]在一些实施例中，当r4为时，[0430]r6a选自由以下组成的组：氰基、氟、氯、甲基、乙基、甲氧基、三氟甲基；并且[0431]r6b选自由以下组成的组：1,2,3-三唑-2-基、4-甲基-1,2,3-三唑-2-基、4-甲基-1,2,3-三唑-1-基、4-氨基-1,2,3-三唑-2-基、5-氰基-1,2,3-三唑-1-基、1,2,3-三唑-1-基、3-甲基-1,2,4-三唑-1-基、5-甲基-1,2,4-三唑-1-基、5-氨基-1,2,4-三唑-1-基、1-甲基-5-氨基-1,2,4-三唑-3-基、1,2,4-三唑-4-对-2-基、四唑-5-基、2-甲基-四唑-5-基、1-甲基-四唑-5-基、咪唑-1-基、1-甲基-咪唑-3-基、1-甲基-5-氨基-咪唑-3-基、3-甲基咪唑-2-对-1-基、1-甲基-吡唑-3-基、1-甲基-吡唑-5-基、吡咯-1-基、噻唑-2-基、异噻唑啉-2-基-1,1-二氧化物、吡咯烷-2-对-1-基、噁唑-2-基、噁二唑-2-基、2-氨基-嘧啶-4-基、-(c＝o)4-甲基哌嗪-1-基、-(c＝o)n(ch3)2、-(c＝o)nhch3、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基、三氟甲基、甲基和氰基。[0432]在一些实施例中，当r4为时，[0433]r6a选自由以下组成的组：氰基、氟、氯、甲基、乙基、甲氧基、二氟甲基、三氟甲基；并且[0434]r6b选自由以下组成的组：1,2,3-三唑-2-基、4-甲基-1,2,3-三唑-2-基、4-羟甲基-1,2,3-三唑-2-基、4-(1,2-二羟乙基)-1,2,3-三唑-2-基、4-(1-羟乙基)-1,2,3-三唑-2-基、4-甲氧基甲基-1,2,3-三唑-2-基、4-甲基-1,2,3-三唑-1-基、4-甲氧基-1,2,3-三唑-2-基、4-氨基-1,2,3-三唑-2-基、4-二甲基氨基甲基-1,2,3-三唑-2-基、5-氰基-1,2,3-三唑-1-基、1,2,3-三唑-1-基、3-甲基-1,2,4-三唑-1-基、5-甲基-1,2,4-三唑-1-基、5-氨基-1,2,4-三唑-1-基、1-甲基-5-氨基-1,2,4-三唑-3-基、1,2,4-三唑-4-对-2-基、四唑-5-基、2-甲基-四唑-5-基、1-甲基-四唑-5-基、咪唑-1-基、吡唑-1-基、5-氰基-吡唑-1-基、1-甲基-咪唑-3-基、1-甲基-5-氨基-咪唑-3-基、3-甲基咪唑-2-对-1-基、1-甲基-吡唑-3-基、1-甲基-吡唑-5-基、吡咯-1-基、噻唑-2-基、异噻唑啉-2-基-1,1-二氧化物、吡咯烷-2-对-1-基、噁唑-2-基、噁二唑-2-基、2-氨基-嘧啶-4-基、2-四氢呋喃基、-(c＝o)4-甲基哌嗪-1-基、-(c＝o)n(ch3)2、-(c＝o)nhch3、-n＝(s＝o)(甲基)2、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基、甲基、氰基。[0435]在一些实施例中，当r4为时，[0436]r6a选自由以下组成的组：氰基、氯基和三氟甲基；并且[0437]r6b选自由以下组成的组：1,2,3-三唑-2-基、4-甲基-1,2,3-三唑-2-基、4-甲基-1,2,3-三唑-1-基、4-氨基-1,2,3-三唑-2-基、5-氰基-1,2,3-三唑-1-基、1,2,3-三唑-1-基、3-甲基-1,2,4-三唑-1-基、5-甲基-1,2,4-三唑-1-基、5-氨基-1,2,4-三唑-1-基、1-甲基-5-氨基-1,2,4-三唑-3-基和1,2,4-三唑-4-对-2-基。[0438]在一些实施例中，当r4为时，[0439]r6a为氯；并且[0440]r6b选自由以下组成的组：1,2,3-三唑-2-基、1,2,3-三唑-1-基和1,2,4-三唑-4-对-2-基。[0441]在一些实施例中，r4为其中波浪线穿过连接至式(i)的–c(＝o)nh-部分的键。[0442]在一些实施例中，r4为其中波浪线穿过连接至式(i)的–c(＝o)nh-部分的键。[0443]在一些实施例中，r4为其中波浪线穿过连接至式(i)的–c(＝o)nh-部分的键。[0444]在一些实施例中，当r4为时，[0445]r6a选自由以下组成的组：氰基、卤素、c1-c3烷基、c1-c3烷氧基和c1-c3卤代烷基；[0446]r6b选自由以下组成的组：任选地被氰基、c1-c3烷基或氨基取代的5-6元杂芳基；-(c＝o)nrerf；c1-c3烷氧基；c1-c3卤代烷基；c1-c3卤代烷氧基；氰基；以及c1-c3烷基；并且[0447]r6c选自由以下组成的组：氰基、卤素、c1-c3烷基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷基和任选地被1-3个独立选择的c1-c3烷基取代的–(q)q-3-8元杂环基。[0448]在一些实施例中，当r4为时，[0449]r6a选自由以下组成的组：氰基、氟、氯、甲基、乙基、甲氧基、三氟甲基；[0450]r6b选自由以下组成的组：1,2,3-三唑-2-基、4-甲基-1,2,3-三唑-2-基、4-甲基-1,2,3-三唑-1-基、4-氨基-1,2,3-三唑-2-基、5-氰基-1,2,3-三唑-1-基、1,2,3-三唑-1-基、3-甲基-1,2,4-三唑-1-基、5-甲基-1,2,4-三唑-1-基、5-氨基-1,2,4-三唑-1-基、1-甲基-5-氨基-1,2,4-三唑-3-基、1,2,4-三唑-4-对-2-基、四唑-5-基、2-甲基-四唑-5-基、1-甲基-四唑-5-基、咪唑-1-基、1-甲基-咪唑-3-基、1-甲基-5-氨基-咪唑-3-基、3-甲基咪唑-2-对-1-基、1-甲基-吡唑-3-基、1-甲基-吡唑-5-基、吡咯-1-基、噻唑-2-基、异噻唑啉-2-基-1,1-二氧化物、吡咯烷-2-对-1-基、噁唑-2-基、噁二唑-2-基、2-氨基-嘧啶-4-基、-(c＝o)4-甲基哌嗪-1-基、-(c＝o)n(ch3)2、-(c＝o)nhch3、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基、甲基、氰基；并且[0451]r6c选自由以下组成的组：氰基、氟、氯、甲基、乙基、甲氧基、甲基、三氟甲基和吡咯烷-3-基氧基。[0452]在一些实施例中，当r4为时，[0453]r6a选自由以下组成的组：氰基、氯基和三氟甲基；[0454]r6b选自由以下组成的组：甲氧基、1,2,3-三唑-2-基、4-甲基-1,2,3-三唑-2-基、4-甲基-1,2,3-三唑-1-基、4-氨基-1,2,3-三唑-2-基、5-氰基-1,2,3-三唑-1-基、1,2,3-三唑-1-基、3-甲基-1,2,4-三唑-1-基、5-甲基-1,2,4-三唑-1-基、5-氨基-1,2,4-三唑-1-基、1-甲基-5-氨基-1,2,4-三唑-3-基和1,2,4-三唑-4-对-2-基；并且[0455]r6c选自由以下组成的组：氰基、氯、甲基、三氟甲基和吡咯烷-3-基氧基。[0456]在一些实施例中，当r4为时，[0457]r6a为氯；[0458]r6b选自由以下组成的组：甲氧基、1,2,3-三唑-2-基、1,2,4-三唑-4-对-2-基；并且[0459]r6c选自由以下组成的组：氰基、氯、甲基、三氟甲基和吡咯烷-3-基氧基。[0460]在一些实施例中，当r4为时，[0461]r6a选自由以下组成的组：氰基、卤素、c1-c3烷基、c1-c3烷氧基和c1-c3卤代烷基；[0462]r6b选自由以下组成的组：任选地被氰基、c1-c3烷基或氨基取代的5-6元杂芳基；-(c＝o)nrerf；c1-c3烷氧基；c1-c3卤代烷基；c1-c3卤代烷氧基；氰基；以及c1-c3烷基；并且[0463]r6c选自由以下组成的组：氰基、卤素、c1-c3烷基、c1-c3烷氧基和c1-c3卤代烷基。[0464]在一些实施例中，当r4为时，[0465]r6a选自由以下组成的组：氰基、氟、氯、甲基、乙基、甲氧基、三氟甲基；[0466]r6b选自由以下组成的组：1,2,3-三唑-2-基、4-甲基-1,2,3-三唑-2-基、4-甲基-1,2,3-三唑-1-基、4-氨基-1,2,3-三唑-2-基、5-氰基-1,2,3-三唑-1-基、1,2,3-三唑-1-基、3-甲基-1,2,4-三唑-1-基、5-甲基-1,2,4-三唑-1-基、5-氨基-1,2,4-三唑-1-基、1-甲基-5-氨基-1,2,4-三唑-3-基、1,2,4-三唑-4-对-2-基、四唑-5-基、2-甲基-四唑-5-基、1-甲基-四唑-5-基、咪唑-1-基、1-甲基-咪唑-3-基、1-甲基-5-氨基-咪唑-3-基、3-甲基咪唑-2-对-1-基、1-甲基-吡唑-3-基、1-甲基-吡唑-5-基、吡咯-1-基、噻唑-2-基、异噻唑啉-2-基-1,1-二氧化物、吡咯烷-2-对-1-基、噁唑-2-基、噁二唑-2-基、2-氨基-嘧啶-4-基、-(c＝o)4-甲基哌嗪-1-基、-(c＝o)n(ch3)2、-(c＝o)nhch3、甲氧基、乙氧基、二氟甲氧基、甲基、氰基；并且[0467]r6c选自由以下组成的组：氰基、氟、氯、甲基、乙基、甲氧基、甲基和三氟甲基。[0468]在一些实施例中，当r4为时，[0469]r6a选自由以下组成的组：氰基、氯基和三氟甲基；[0470]r6b选自由以下组成的组：1,2,3-三唑-2-基、4-甲基-1,2,3-三唑-2-基、4-甲基-1,2,3-三唑-1-基、4-氨基-1,2,3-三唑-2-基、5-氰基-1,2,3-三唑-1-基、1,2,3-三唑-1-基、3-甲基-1,2,4-三唑-1-基、5-甲基-1,2,4-三唑-1-基、5-氨基-1,2,4-三唑-1-基、1-甲基-5-氨基-1,2,4-三唑-3-基和1,2,4-三唑-4-对-2-基；并且[0471]r6c选自由以下组成的组：氰基、氯基、甲基和三氟甲基。[0472]在一些实施例中，当r4为时，[0473]r6a为氯；[0474]r6b选自由以下组成的组：1,2,3-三唑-2-基和1,2,4-三唑-4-对-2-基；并且[0475]r6c选自由以下组成的组：氰基、氯基、甲基和三氟甲基。[0476]在一些实施例中，r4为其中波浪线穿过连接至式(i)的–c(＝o)nh-部分的键。[0477]在一些实施例中，当r4为时，[0478]r6a选自由以下组成的组：氰基、卤素、c1-c3烷基、c1-c3烷氧基和c1-c3卤代烷基；[0479]r6b选自由以下组成的组：c1-c3烷基和c1-c3卤代烷基。[0480]在一些实施例中，当r4为时，[0481]r6a选自由以下组成的组：氰基、氟、氯、甲基、乙基、甲氧基、三氟甲基；[0482]r6b选自由以下组成的组：甲基、乙基、二氟甲基和三氟甲基；[0483]在一些实施例中，当r4为时，[0484]r6a为氯；并且[0485]r6b选自由以下组成的组：三氟甲基和二氟甲基。[0486]在一些实施例中，r5是氢。[0487]在一些实施例中，r5是卤素。例如，r5为氟。例如，r5为氯。在一些实施例中，r5为氰基。在一些实施例中，r5为羟基。[0488]在一些实施例中，r5为c1-c3烷氧基。在一些实施例中，r5为甲氧基或乙氧基。[0489]在一些实施例中，r5为c1-c3卤代烷氧基。在一些实施例中，r5为三氟甲氧基、二氟甲氧基或氟甲氧基。[0490]在一些实施例中，r5为c1-c3卤代烷基。在一些实施例中，r5为三氟甲基或2,2,2-三氟乙基。[0491]在一些实施例中，r5为–nrcrd。在一些实施例中，rc和rd独立地为氢或c1-c3烷基。在某些实施例中，rc和rd中的一个为氢并且rc和rd中的另一个为c1-c3烷基。在一些实施例中，rc和rd中的一个为氢并且rc和rd中的另一个为甲基。在一些实施例中，rc和rd中的一个为氢并且rc和rd中的另一个为乙基。在某些实施例中，rc和rd均为氢。在某些实施例中，rc和rd均为c1-c3烷基。在一些实施例中，rc和rd均为甲基。在一些实施例中，rc和rd中的一个为甲基并且rc和rd中的另一个为乙基。在一些实施例中，rc和rd均为乙基。[0492]在一些实施例中，rc和rd连同它们所连接的氮原子一起形成4-6元杂环基。在一些实施例中，rc和rd连同它们所连接的氮原子一起形成4元杂环基。在一些实施例中，rc和rd连同它们所连接的氮原子一起形成5元杂环基。在一些实施例中，rc和rd连同它们所连接的氮原子一起形成6元杂环基。[0493]在一些实施例中，r5为c1-c3烷基。在一些实施例中，r5为甲基或乙基。[0494]在一些实施例中，[0495]x为n；[0496]y为c；[0497]z为n；[0498]r1为卤素；[0499]r2为氢；[0500]r2a为氢；[0501]m为2并且r3独立地为未经取代的c1-c3烷基或c1-c3卤代烷氧基；[0502]n为1；并且[0503]r4为任选地被1-2个独立地选自c1-c3卤代烷基的取代基取代的5-6元杂芳基和任选地被1-3个独立选择的rx取代的5-6元杂芳基。[0504]在一些实施例中，r1为氯或氟。[0505]在一些实施例中，r2是氢。[0506]在一些实施例中，r2a为氢。[0507]在一些实施例中，每个r3是成对的。在一些实施例中，一个r3为未经取代的c1-c3烷基并且另一个r3为c1-c3卤代烷氧基。在一些实施例中，一个r3为甲基并且另一个r3为三氟甲基。[0508]在一些实施例中，r4为未经取代的6元杂芳基。在一些实施例中，r4为未经取代的1,2,3-三唑基。[0509]在一些实施例中，式(i)化合物是式(ii)化合物：[0510][0511]其中：[0512]n为1或2；[0513]r1为氢、卤素、氰基、羟基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基、-nrarb或任选地被1-3个独立地选自羟基和c1-c3烷氧基的取代基取代的c1-c3烷基；[0514]r3a为卤素、羟基、氰基、c3-c6环烷基、-nrarb、任选地被c1-c3烷基取代的5-6元杂芳基；c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基或任选地被c1-c3烷氧基或氰基取代的c1-c3烷基；[0515]r3b为卤素、羟基、氰基、c3-c6环烷基、-nrarb、任选地被c1-c3烷基取代的5-6元杂芳基；c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基或任选地被c1-c3烷氧基或氰基取代的c1-c3烷基；[0516]或r3a和r3b连同它们所连接的碳原子一起形成氧基或c3-c8环烷基；[0517]每个r6独立地选自卤素；氰基；羟基；-co2h；-n＝(s＝o)(c1-c3烷基)2、-s(＝o)p(c1-c3烷基)、-nrerf；-(c＝o)nrerf；任选地被氨基、羟基或-(c＝o)nrerf取代的c1-c3烷氧基；c1-c3卤代烷基；c1-c3卤代烷氧基；任选地被1-3个独立选择的rx取代的5-6元杂芳基；任选地被1-2个独立地选自羟基、-nrerf、c1-c3烷氧基和c3-c6环烷基的取代基取代的c1-c3烷基；任选地被羟基取代的c3-c6环烷基；以及任选地被1-3个独立选择的c1-c3烷基取代的–(q)q-3-8元杂环基；[0518]p为1或2；[0519]q为–o–或–nh–；[0520]q为0或1；[0521]每个rx独立地选自卤素、氰基、羟基、氨基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基或任选地被1-3个独立地选自羟基、c1-c3烷氧基和–nrgrh的取代基取代的c1-c6烷基；并且[0522]ra和rb独立地为氢、c1-c3烷基，或ra和rb与它们所连接的氮原子一起形成4-6元杂环基；并且[0523]re、rf、rg和rh独立地为氢、c1-c3烷基或c3-c6环烷基，或re和rf，或rg和rh，连同它们所连接的氮原子一起形成任选地被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的4-6元杂环基。[0524]在式(ii)的一些实施例中：[0525]n为1；[0526]r1为氢、卤素或氰基；[0527]r3a和r3b中的一个为卤素、羟基、氰基、c3-c6环烷基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基或任选地被c1-c3烷氧基或氰基取代的c1-c3烷基；并且r3a和r3b中的另一个为c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基或任选地被c1-c3烷氧基或氰基取代的c1-c3烷基；[0528]每个r6独立地选自卤素；氰基；羟基；-co2h；-n＝(s＝o)(c1-c3烷基)2、-s(＝o)p(c1-c3烷基)、-nrerf；-(c＝o)nrerf；任选地被氨基、羟基或-(c＝o)nrerf取代的c1-c3烷氧基；c1-c3卤代烷基；c1-c3卤代烷氧基；任选地被1-3个独立选择的rx取代的5-6元杂芳基；任选地被1-2个独立地选自羟基、-nrerf、c1-c3烷氧基和c3-c6环烷基的取代基取代的c1-c3烷基；以及任选地被羟基取代的c3-c6环烷基；[0529]p为1或2；[0530]每个rx独立地选自卤素、氰基、羟基、氨基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基或任选地被1-3个独立地选自羟基、c1-c3烷氧基和–nrgrh的取代基取代的c1-c6烷基；并且[0531]re、rf、rg和rh独立地为氢、c1-c3烷基或c3-c6环烷基，或re和rf，或rg和rh，连同它们所连接的氮原子一起形成任选地被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的4-6元杂环基。[0532]在式(ii)的一些实施例中：[0533]n为2；[0534]r1为氢、卤素或氰基；[0535]r3a和r3b中的一个为卤素、羟基、氰基、c3-c6环烷基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基或任选地被c1-c3烷氧基或氰基取代的c1-c3烷基；并且r3a和r3b中的另一个为c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基或任选地被c1-c3烷氧基或氰基取代的c1-c3烷基；[0536]每个r6独立地选自卤素；氰基；羟基；-co2h；-n＝(s＝o)(c1-c3烷基)2、-s(＝o)p(c1-c3烷基)、-nrerf；-(c＝o)nrerf；任选地被氨基、羟基或-(c＝o)nrerf取代的c1-c3烷氧基；c1-c3卤代烷基；c1-c3卤代烷氧基；任选地被1-3个独立选择的rx取代的5-6元杂芳基；任选地被1-2个独立地选自羟基、-nrerf、c1-c3烷氧基和c3-c6环烷基的取代基取代的c1-c3烷基；以及任选地被羟基取代的c3-c6环烷基；[0537]p为1或2；[0538]每个rx独立地选自卤素、氰基、羟基、氨基、c1-c3烷氧基、c1-c3卤代烷氧基、c1-c3卤代烷基或任选地被1-3个独立地选自羟基、c1-c3烷氧基和–nrgrh的取代基取代的c1-c6烷基；并且[0539]re、rf、rg和rh独立地为氢、c1-c3烷基或c3-c6环烷基，或re和rf，或rg和rh，连同它们所连接的氮原子一起形成任选地被c1-c3烷基或c1-c3烷氧基取代的4-6元杂环基。[0540]在一些实施例中，所述化合物是选自表1的化合物或其药学上可接受的盐。除非另有说明，否则(1)以破折号和楔形键表示法示出的每个立体中心的立体化学构型和/或相邻的cip构型被假定为是相对的；并且(2)化合价被未使用破折号和楔形描绘的键填充的任何立体中心是该立体中心处立体化学构型的混合物。例如，化合物3和4是对映异构体，但尚不清楚哪个是(r)对映异构体，哪个是(s)对映异构体。在另一个实例中，化合物33和34是非对映异构体，其中与三氟甲基连接的立体中心的绝对构型是已知的，但四氢呋喃基中的立体中心是相对的(即，化合物33和34中的一个中的四氢呋喃基立体中心具有(r)构型，并且化合物33和34中的另一个中的四氢呋喃基立体中心具有(s)构型)。[0541]表1[0542][0543][0544][0545][0546][0547][0548][0549][0550][0551][0552][0553][0554][0555][0556][0557][0558][0559][0560][0561][0562][0563][0564][0565][0566][0567][0568][0569][0570][0571][0572][0573][0574][0575][0576][0577][0578][0579][0580][0581][0582][0583][0584][0585][0586][0587][0588][0589][0590][0591][0592][0593][0594][0595][0596][0597]制备过程[0598]本文提供了制备式(i)化合物(例如，本文所述的任何化合物)的过程，所述过程包括：[0599]使式(i-a)化合物[0600][0601]与r4-nh2反应；[0602]以形成式(i)化合物。[0603]在一些实施例中，使式(i-a)化合物与r4-nh2反应包括使式(i-a)化合物和r4-nh2中的一个与羰基等价物反应以形成中间体，然后使式(i-a)化合物和r4-nh2中的另一个与所述中间体反应。在这些实施例中的一些实施例中，使式(i-a)化合物与r4-nh2反应包括使r4-nh2与羰基等价物反应以形成中间体，然后使式(i-a)化合物与所述中间体反应。在任何前述实施例中，“羰基等价物”是指用羰基部分替换式(i-a)化合物和/或r4-nh2中的nh基团的试剂。羰基等价物的非限制性实例包含三光气和碳酸双(三氯甲基)酯。[0604]在一些实施例中，使式(i-a)化合物与r4-nh2反应包括使式(i-a)化合物和r4-nh2中的一个与选自三光气和碳酸双(三氯甲基)酯的羰基等价物反应以形成中间体，然后使式(i-a)化合物和r4-nh2中的另一个与所述中间体反应。在这些实施例中的一些实施例中，使式(i-a)化合物与r4-nh2反应包括使r4-nh2与选自三光气和碳酸双(三氯甲基)酯的羰基等价物反应以形成中间体，然后使式(i-a)化合物与所述中间体反应。在一些实施例中，羰基等价物是三光气。在一些实施例中，羰基等价物是碳酸双(三氯甲基)酯。[0605]本文提供了制备式(i)化合物(例如，本文所述的任何化合物)的过程，所述过程包括：[0606]使式(i-a)化合物[0607][0608]与r4-c(o)oh反应；[0609]以形成式(i)化合物。[0610]在一些实施例中，使式(i-a)化合物与r4-c(o)oh反应包括使r4-c(o)oh与二苯基磷酰叠氮化物反应(例如，以形成中间体(例如，r4-c(o)n3))，然后在存在式(i-a)化合物的情况下加热(以例如形成第二中间体(例如，r4-n＝c＝o))，以形成式(i)化合物[0611]在一些实施例中，式(i-a)化合物是式(i-a-n)化合物：[0612][0613]在一些实施例中，当式(i-a)化合物是式(i-a-n)化合物时，所述过程进一步包括使式(i-a-n-i)化合物[0614][0615]与式(i-a-n-ii)化合物反应[0616][0617]以形成式(i-a-n)化合物。[0618]在某些实施例中，在存在酸(如有机或无机酸)的情况下进行式(i-a-n-i)化合物与式(i-a-n-ii)化合物的反应。在一些实施例中，酸是盐酸或乙酸。[0619]在一些实施例中，式(i-a)化合物是式(i-a-m)化合物：[0620][0621]在一些实施例中，当式(i-a)化合物是式(i-a-m)化合物时，所述过程进一步包括使式(i-a-m-i)化合物反应[0622][0623]以形成式(i-a-m)化合物。[0624]在这些实施例中的一些实施例中，使式(i-a-m-i)化合物与铁盐、硅烷、过氧化物和酸反应以形成式(i-a-m)的化合物。在一些实施例中，铁盐是(z)-4-氧基戊-2-烯-2-醇铁。在一些实施例中，硅烷是苯基硅烷。在一些实施例中，过氧化物是2-叔丁基过氧-2-甲基-丙烷。在一些实施例中，酸是2,2,2-三氟乙酸。[0625]治疗方法[0626]一些实施例提供了在需要此类治疗的受试者中治疗自身免疫性病症(例如，malt1相关性自身免疫性病症)的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的式(i)化合物，或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施例中，所述自身免疫性病症是类风湿性关节炎、多发性硬化或系统性红斑狼疮(sle)。[0627]一些实施例提供了在需要此类治疗的受试者中治疗炎性病症(例如，malt1相关性炎性病症)的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的式(i)化合物，或其药学上可接受的盐或其药物组合物。在一些实施例中，所述炎性病症是慢性移植物抗宿主病(cgvhd)。[0628]一些实施例提供了在需要此类治疗的受试者中治疗癌症(例如，malt1相关性癌症)的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的式(i)化合物，或其药学上可接受的盐或其药物组合物。例如，本文提供了用于在需要此类治疗的受试者中治疗malt1相关性癌症的方法，所述方法包括a)在来自受试者的样品中检测malt1基因、malt1蛋白酶或二者中任一个的表达或活性或水平的失调；以及b)施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，malt1基因、malt1蛋白酶或二者中任一个的表达或活性或水平的失调包含一个或多个融合蛋白。[0629]在本文描述的任何方法或用途的一些实施例中，所述癌症(例如，malt1相关性癌症)是血液癌症。在本文描述的任何方法或用途的一些实施例中，所述癌症(例如，malt1相关性癌症)是实体瘤。在本文描述的任何方法或用途的一些实施例中，所述癌症(例如，malt1相关性癌症)是肺癌(例如，小细胞肺癌或非小细胞肺癌)、甲状腺癌(例如，乳头状甲状腺癌、甲状腺髓样癌(例如，散发性甲状腺髓样癌或遗传性甲状腺髓样癌)、分化型甲状腺癌、复发性甲状腺癌或难治性分化型甲状腺癌)、甲状腺腺瘤、内分泌腺肿瘤、肺腺癌、细支气管肺癌、2a或2b型多发性内分泌肿瘤(分别为men2a或men2b)、嗜铬细胞瘤、甲状旁腺增生、乳腺癌、乳腺癌、乳腺瘤、乳腺肿瘤、结直肠癌(例如，转移性结直肠癌)、乳头状肾细胞癌、胃肠粘膜神经节神经瘤病、炎性肌纤维母细胞瘤或子宫颈癌。在本文描述的任何方法或用途的一些实施例中，所述癌症(例如，malt1相关性癌症)选自由以下组成的组：急性淋巴细胞白血病(all)、急性髓细胞性白血病(aml)、青少年癌症、肾上腺皮质癌、肛门癌、阑尾癌、星形细胞瘤、非典型畸形瘤/横纹肌样瘤、基底细胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脑干神经胶质瘤、脑瘤、乳腺癌、支气管肿瘤、伯基特淋巴瘤(burkittlymphoma)、类癌瘤、未知的原发性癌、心脏肿瘤、子宫颈癌、儿童期癌症、脊索瘤、慢性淋巴细胞性白血病(cll)、慢性骨髓性白血病(cml)、慢性骨髓增生性肿瘤、按部位分布的肿瘤、肿瘤、结肠癌、结直肠癌、颅咽管瘤、皮肤t细胞淋巴瘤、皮肤血管肉瘤、胆管癌、原位导管癌、胚胎肿瘤、子宫内膜癌、室管膜瘤、食道癌、嗅神经母细胞瘤、尤文肉瘤(ewingsarcoma)、颅外生殖细胞肿瘤、性腺外生殖细胞肿瘤、肝外胆管癌、眼癌、输卵管癌、骨纤维组织细胞瘤、胆囊癌、胃癌、胃肠道类癌、胃肠道间质瘤(gist)、生殖细胞瘤、妊娠滋养细胞疾病、胶质瘤、毛细胞瘤、毛细胞白血病、头颈癌、胸腔肿瘤、头颈肿瘤、cns肿瘤、原发性cns肿瘤、心脏病、肝细胞癌、组织细胞增生、霍奇金淋巴瘤(hodgkin'slymphoma)、下咽癌、眼内黑色素瘤、胰岛细胞瘤、胰腺神经内分泌肿瘤、卡波济肉瘤(kaposisarcoma)、肾癌、朗格汉斯细胞组织细胞增多症(langerhanscellhistiocytosis)、喉癌、白血病、嘴唇和口腔癌、肝癌、肺癌、淋巴瘤、巨球蛋白血症、骨恶性纤维组织细胞瘤、骨癌、黑色素瘤、默克尔细胞癌(merkelcellcarcinoma)、间皮瘤、转移性鳞状颈癌、中线癌、口腔癌、多发性内分泌肿瘤综合征、多发性骨髓瘤、蕈样肉芽肿、骨髓增生异常综合征、骨髓增生异常/骨髓增生性肿瘤、按部位分布的肿瘤、肿瘤、骨髓性白血病、髓样白血病、多发性骨髓瘤、骨髓增生性肿瘤、鼻腔和鼻窦癌、鼻咽癌、成神经细胞瘤、非霍奇金淋巴瘤、非小细胞肺癌、肺肿瘤、肺癌、肺部肿瘤、呼吸道肿瘤、支气管癌、支气管肿瘤、口癌、口腔癌、唇癌、口咽癌、骨肉瘤、卵巢癌、胰腺癌、乳头状瘤病、副神经节瘤、鼻窦和鼻腔癌、甲状旁腺癌、阴茎癌、咽癌、嗜铬细胞瘤、垂体癌、浆细胞瘤、胸膜肺母细胞瘤、与妊娠有关的乳腺癌、原发性中枢神经系统淋巴瘤、原发性腹膜癌、前列腺癌、直肠癌、结肠癌、结肠肿瘤、肾细胞癌、横纹肌肉瘤、唾液腺癌、肉瘤、塞泽里综合征(sezarysyndrome)、皮肤癌、斯皮茨瘤(spitztumor)、小细胞肺癌、小肠癌、软组织肉瘤、鳞状细胞癌、鳞状颈癌、胃癌、t细胞淋巴瘤、睾丸癌、喉癌、胸腺瘤和胸腺癌、甲状腺癌、肾盂的移行细胞癌、未知的原发性癌、尿道癌、子宫癌、子宫肉瘤、阴道癌、外阴癌和维耳姆斯瘤(wilms'tumor)。[0630]在一些实施例中，所述癌症是血液癌症，如白血病或淋巴瘤。在一些实施例中，血液癌症(例如，作为malt1相关性癌症的血液癌症)选自由以下组成的组：白血病、淋巴瘤(非霍奇金淋巴瘤)、霍奇金病(也被称为霍奇金淋巴瘤)和骨髓瘤，例如，急性淋巴细胞白血病(all)、急性髓细胞性白血病(aml)、急性早幼粒细胞性白血病(apl)、慢性淋巴细胞性白血病(cll)、慢性粒细胞性白血病(cml)、慢性粒细胞性白血病(cmml)、慢性中性粒细胞性白血病(cnl)、急性未分化的白血病(aul)、间变性大细胞淋巴瘤(alcl)、淋巴细胞性白血病(pml)、青少年骨髓单核细胞白血病(jmml)、成人t细胞all、伴有三系骨髓增生异常的aml(aml/tmds)、混合谱系白血病(mll)、骨髓增生异常综合征(mds)、骨髓增生异常(mpd)和多发性骨髓瘤(mm)。血液癌症的另外的实例包含骨髓增生异常(mpd)，如真性红细胞增多症(pv)、原发性血小板减少症(et)和特发性原发性骨髓纤维化(imf/ipf/pmf)。在一些实施例中，血液癌症(例如，作为malt1相关性癌症的血液癌症)是aml或cmml。[0631]在一些实施例中，所述癌症是胶质母细胞瘤、慢性粒细胞白血病、粒细胞白血病或非霍奇金淋巴瘤。[0632]在一些实施例中，所述癌症(例如，malt1相关性癌症)是实体瘤。实体瘤(例如，作为malt1相关性癌症的实体瘤)的实例包含例如，肺癌(例如，肺腺癌、小细胞肺癌)、胰腺癌、胰腺导管癌、乳腺癌、结肠癌、结直肠癌、前列腺癌、肾细胞癌、成神经细胞瘤和黑色素瘤。参见例如，jiang等人,《癌症研究》2011,71,2183-2192；另见pan等人,《分子癌症研究》2016,14,93-102和penas等人,《血液》2010,115,2214-2219。[0633]在一些实施例中，受试者是人。[0634]式(i)化合物及其药学上可接受的盐也可用于治疗malt1相关性癌症。式(i)化合物及其药学上可接受的盐也可用于治疗malt1相关性自身免疫性病症。式(i)化合物及其药学上可接受的盐也可用于治疗malt1相关性炎性病症。[0635]因此，本文还提供了一种用于治疗被诊断为患有或鉴定为患有malt1相关性癌症(例如，本文公开的任何示例性malt1相关性癌症)的受试者的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的如本文所定义的式(i)或其药学上可接受的盐或其药物组合物。[0636]在本文提供的任一种方法的一些实施例中，式(i)化合物选自实例1-211。[0637]malt1蛋白酶、malt1因基或二者中任一个(例如，一个或多个)的表达或活性或水平的失调可有助于肿瘤发生。例如，与野生型malt1蛋白相比，融合蛋白可以具有增加的蛋白酶活性，由于异常的细胞信号传导和/或失调的自分泌/旁分泌信号传导，野生型malt1蛋白酶在哺乳动物细胞中的表达增加(例如，水平增加)(例如，与对照非癌细胞相比)，malt1mrna剪接变体也可能导致malt1失调。[0638]在一些方面，本文提供了一种用于在有需要的受试者中治疗癌症的方法，所述方法包含向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。本文还提供了一种用于在有需要的受试者中治疗cbm复合物途径相关性癌症(如本文公开的任何癌症)的方法，所述方法包含向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。还提供了一种用于在有需要的受试者中治疗癌症的方法，所述方法包含(a)将所述癌症鉴定为cbm复合物途径相关性癌症；以及(b)向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。[0639]将受试者中的癌症鉴定为cbm复合物途径相关性癌症可以通过任何适当的方法进行。在一些实施例中，将受试者中的癌症鉴定为cbm复合物途径相关性癌症的步骤包含执行测定法以在来自受试者的样品中检测cbm复合物途径相关性基因、cbm复合物途径相关性蛋白酶蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调。在一些实施例中，所述方法进一步包含从受试者获得样品(例如，活检样品)。所述测定法可以是任何适当的测定法。在一些实施例中，所述测定法选自测序(例如，焦磷酸测序或下一代测序)、免疫组织化学、酶联免疫吸附测定和荧光原位杂交(fish)。[0640]此外，本文提供了一种用于在有需要的受试者中治疗癌症的方法，所述方法包含将有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐施用于被鉴定为患有cbm复合物途径相关性癌症的受试者。[0641]本文还提供了一种在受试者中治疗malt1相关性癌症的方法，所述方法包含向被鉴定或诊断为患有malt1相关性癌症的受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。本文还提供了一种用于在有需要的受试者中治疗癌症的方法，所述方法包含：(a)确定所述癌症与malt1基因、malt1蛋白酶或二者中任一个的表达或活性或水平的失调有关；以及(b)向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。[0642]确定所述癌症与malt1基因、malt1蛋白酶或二者中任一个的表达或活性或水平的失调有关可以使用任何适当的方法进行。在一些实施例中，确定所述受试者中的癌症是malt1相关性癌症的步骤包含执行测定法以在来自受试者的样品中检测malt1基因、malt1蛋白酶蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调。在一些实施例中，所述方法进一步包含从受试者获得样品(例如，活检样品)。所述测定法可以是任何适当的测定法。在一些实施例中，所述测定法选自测序(例如，焦磷酸测序或下一代测序)、免疫组织化学、酶联免疫吸附测定和荧光原位杂交(fish)。[0643]如本文所述，cbm复合物途径相关性癌症可以是任何适当的cbm复合物途径相关性癌症(如本文所述的任何癌症)。在一些实施例中，cbm复合物途径相关性癌症选自由以下组成的组：cbm复合物途径细胞表面受体相关性癌症、与细胞表面受体和cbm复合物之间的信号转导相关的癌症、cbm复合物相关性癌症的组分、malt1蛋白酶底物相关性癌症、与cbm复合物下游的nf-κb途径的组分相关的癌症、与cbm复合物下游的jnk途径的组分相关的癌症及其组合。在一些实施例中，所述cbm复合物途径细胞表面受体相关性癌症选自由以下组成的组：cd28相关性癌症、bcr相关性癌症、her1相关性癌症、her2相关性癌症及其组合。在一些实施例中，与细胞表面受体和cbm复合物之间的信号转导相关的癌症是蛋白激酶cβ(pkcβ)相关性癌症、蛋白激酶cθ(pckθ)相关性癌症或其组合。在一些实施例中，所述cbm复合物相关性癌症的组分选自由以下组成的组：malt1相关性癌症、card11相关性癌症、card14相关性癌症、card10相关性癌症、card9相关性癌症、bcl10相关性癌症及其组合。在一些实施例中，cbm复合物相关性癌症的组分选自由以下组成的组：malt1相关性癌症、card11相关性癌症、bcl10相关性癌症及其组合。有关malt1、card11和bcl10中的示例性失调，参见例如表b1、b2和b3。在一些实施例中，所述malt1蛋白酶底物相关性癌症选自由以下组成的组：bcl10相关性癌症、a20相关性癌症、cyld相关性癌症、relb相关性癌症、regnase1相关性癌症、roquin-1相关性癌症、hoil1相关性癌症、nik相关性癌症、lima1α相关性癌症及其组合。在一些实施例中，所述malt1蛋白酶底物相关性癌症选自由以下组成的组：bcl10相关性癌症、a20相关性癌症、cyld相关性癌症及其组合。有关bcl10和a20中的示例性失调，参见例如表b3和b4。在一些实施方案中，与cbm复合物下游的nf-κb途径的组分相关的癌症选自由以下组成的组：tak1相关性癌症、traf6相关性癌症、tab1相关性癌症、tab2相关性癌症、tab3相关性癌症、mkk7相关性癌症、ikkα相关性癌症、ikkβ相关性癌症、ikkγ相关性癌症、ikbα相关性癌症、p50相关性癌症、p65(rela)相关性癌症、c-rel相关性癌症及其组合。在一些实施方案中，与cbm复合物下游的nf-κb途径的组分相关的癌症是ikkγ相关性癌症。在一些实施方案中，与cbm复合物下游的jnk途径的组分相关的癌症选自由以下组成的组：jnk1相关性癌症、jnk2相关性癌症、jnk3相关性癌症、myd88转录因子相关性癌症、ap-1转录因子相关性癌症及其组合。[0644]在一些实施例中，cbm复合物途径相关性癌症是malt1相关性癌症。malt1相关性癌症可以具有任何适当的失调，如本文所述的任何那些。在一些实施例中，malt1相关性癌症包括iap2-malt1融合。在一些实施例中，malt1相关性癌症包括igh-malt1融合。[0645]本文还提供了治疗cbm复合物途径相关性疾病或病症、自身免疫性病症和炎病性病症的方法。因此，本文提供了一种用于在有需要的受试者中治疗自身免疫性病症的方法，所述方法包含向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。本文还提供了一种在受试者中治疗malt1相关性自身免疫性病症的方法，所述方法包含向被鉴定或诊断为患有malt1相关性自身免疫性病症的受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。在一些情况下，本文提供了一种用于在有需要的受试者中治疗自身免疫性病症的方法，所述方法包含：(a)确定所述自身免疫性病症与malt1基因、malt1蛋白酶或二者中任一个的表达或活性或水平的失调有关；以及(b)向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。本文还提供了一种在受试者中治疗malt1相关性自身免疫性病症的方法，所述方法包含将有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐施用于被确定为患有malt1相关性自身免疫性病症的受试者。此外，本文提供了一种用于在有需要的受试者中治疗炎性病症的方法，所述方法包含向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。在一些情况下，本文提供了一种在受试者中治疗malt1相关性炎性病症的方法，所述方法包含向被鉴定或诊断为患有malt1相关性炎性病症的受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。本文还提供了一种用于在有需要的受试者中治疗炎性病症的方法，所述方法包含：(a)确定所述炎性病症与malt1基因、malt1蛋白酶或二者中任一个的表达或活性或水平的失调有关；以及(b)向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。本文还提供了一种在受试者中治疗malt1相关性炎性病症的方法，所述方法包含将有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐施用于被确定为患有malt1相关性炎性病症的受试者[0646]本文另外提供了一种用于在有需要的受试者中治疗cbm复合物途径相关性疾病或病症的方法，所述方法包含向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。还提供了一种用于在有需要的受试者中治疗疾病或病症的方法，所述方法包含：(a)将所述癌症鉴定为cbm复合物途径相关性疾病或病症；以及(b)向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。此外，本文提供了一种用于在有需要的受试者中治疗疾病或病症的方法，所述方法包含：将有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐施用于被鉴定为患有cbm复合物途径相关性疾病或病症的受试者。[0647]cbm复合物途径相关性疾病或病症可以是任何适当的cbm复合物途径相关性疾病或病症，如本文所述的任何疾病或病症。在一些实施例中，cbm复合物途径相关性疾病或病症是自身免疫性疾病。在一些实施例中，cbm复合物途径相关性疾病或病症是炎性病症。在一些实施例中，所述cbm复合物途径相关性癌症选自由以下组成的组：cbm复合物途径细胞表面受体相关性癌症、与细胞表面受体和cbm复合物之间的信号转导相关的疾病或病症、cbm复合物相关性癌症的组分、malt1蛋白酶底物相关性癌症、与cbm复合物下游的nf-κb途径的组分相关的疾病或病症、与cbm复合物下游的jnk途径的组分相关的疾病或病症及其组合。在一些实施例中，cbm复合物途径相关性疾病或病症是malt1相关性疾病或病症。[0648]在一些情况下，式(i)化合物或其药学上可接受的盐可用于抑制细胞过程，如抑制细胞增殖。因此，本文提供了一种用于抑制哺乳动物细胞增殖的方法，所述方法包含使所述哺乳动物细胞与式(i)化合物或其药学上可接受的盐接触。本文还提供了一种在哺乳动物细胞中抑制cbm复合物途径活性的方法，所述方法包含使所述哺乳动物细胞与式(i)化合物或其药学上可接受的盐接触。本文还提供了一种在哺乳动物细胞中抑制malt1蛋白酶活性的方法，所述方法包含使所述哺乳动物细胞与式(i)化合物或其药学上可接受的盐接触。在一些实施例中，接触发生在体内。在一些实施例中，接触发生在体外。哺乳动物细胞可以是任何适当的细胞。在一些实施例中，所述哺乳动物细胞是哺乳动物免疫细胞。在一些实施例中，所述哺乳动物细胞是哺乳动物癌细胞。在一些实施例中，所述哺乳动物癌细胞是哺乳动物cbm复合物途径相关性癌细胞。在一些实施例中，所述哺乳动物癌细胞是哺乳动物malt1相关性癌细胞。在一些实施例中，哺乳动物细胞具有malt1基因、malt1蛋白酶蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调。在一些实施例中，malt1基因、malt1蛋白酶蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调是iap2-malt1融合、igh-malt1融合或其组合。[0649]式(i)化合物或其药学上可接受的盐也可用于制备药物。因此，本文提供了一种式(i)化合物或其药学上可接受的盐在制备用于治疗cbm复合物途径相关性疾病或病症的药物中的用途。cbm复合物途径相关性疾病或病症可以是任何适当的cbm复合物途径相关性疾病或病症，如本文所述的疾病或病症。在一些实施例中，所述cbm复合物途径相关性疾病或病症选自由以下组成的组：cbm复合物途径细胞表面受体相关性癌症、与细胞表面受体和cbm复合物之间的信号转导相关的疾病或病症、cbm复合物相关性癌症的组分、malt1蛋白酶底物相关性癌症、与cbm复合物下游的nf-κb途径的组分相关的疾病或病症、与cbm复合物下游的jnk途径的组分相关的疾病或病症及其组合。在一些实施例中，cbm复合物途径相关性疾病或病症是cbm复合物途径相关性自身免疫性病症。在一些实施例中，cbm复合物途径相关性疾病或病症是cbm复合物途径相关性炎性病症。在一些实施例中，cbm复合物途径相关性疾病或病症是cbm复合物途径相关性癌症。在一些实施例中，cbm复合物途径相关性疾病或病症是malt1相关性疾病或病症。在一些实施例中，malt1相关性疾病或病症包括malt1基因、malt1蛋白酶蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调。在一些实施例中，malt1基因、malt1蛋白酶蛋白或二者中任一个的表达或活性或水平的失调是iap2-malt1融合、igh-malt1融合或其组合。[0650]在一些实施例中，本文提供的化合物表现出脑和/或中枢神经系统(cns)渗透性。此类化合物能够穿过血脑屏障并抑制脑和/或其它cns结构中的malt1蛋白酶。在一些实施例中，本文提供的化合物能够以有效量穿过血脑屏障。例如，对患有癌症(例如，malt1相关性癌症，如malt1相关性脑癌或cns癌症)的受试者的治疗可以包含向所述受试者施用(例如，口服施用)化合物。在一些此类实施例中，本文提供的化合物可用于治疗原发性脑肿瘤或转移性脑肿瘤。例如，所述化合物可用于治疗一种或多种神经胶质瘤，如胶质母细胞瘤(也被称为多形胶质母细胞瘤)、星形细胞瘤、少突胶质细胞瘤、室管膜瘤和混合性胶质瘤、脑膜瘤、髓母细胞瘤、颅内节细胞胶质瘤、神经鞘瘤(schwannomas和neurilemmomas)和颅咽管瘤(参见例如以下文献中列出的肿瘤：louis,d.n.等人《神经病理学报告(actaneuropathol)》131(6),803-820(june2016))。在一些实施例中，脑肿瘤是原发性脑肿瘤。在一些实施例中，先前已经用另一种抗癌剂，例如另一种蛋白酶抑制剂(例如，并非式(i)化合物的化合物)对受试者进行了治疗。在一些实施例中，脑肿瘤是转移性脑肿瘤。在一些实施例中，先前已经用另一种抗癌剂，例如另一种蛋白酶抑制剂(例如，并非式(i)化合物的化合物)对受试者进行了治疗。[0651]在本文描述的任何方法或用途的一些实施例中，用于使用来自受试者的样品确定受试者是否具有基因(例如，malt1基因)、或蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调的测定法可以包含例如下一代测序、免疫组织化学、荧光显微镜、fish分离分析、southern印迹、western印迹、facs分析、northern印迹和基于pcr的扩增(例如，rt-pcr和定量实时rt-pcr)。如本领域众所周知的，通常用例如至少一个经标记的核酸探针或至少一个经标记的抗体或其抗原结合片段来进行所述测定法。测定法可以利用本领域已知的其它检测方法来检测基因(例如，malt1基因)、蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调。在一些实施例中，样品是来自受试者的生物样品或活检样品(例如，石蜡包埋的活检样品)。在一些实施例中，受试者是疑似患有malt1相关性癌症的受试者、具有malt1相关性癌症的一种或多种症状的受试者和/或患malt1相关性癌症的风险增加的受试者)。[0652]在一些实施例中，可以使用液体活检(不同地被称为液体活检或液体相活检)来鉴定基因(例如，malt1基因)、malt1蛋白(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调。液体活检方法可用于检测总的肿瘤负荷和/或基因(例如，malt1蛋白)、malt1蛋白(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调。可以对(例如，通过简单的抽血)相对容易从受试者获得的生物样品进行液体活检，并且与用于检测肿瘤负荷和/或和/或基因(例如，malt1基因)、蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调的传统方法相比，所述液体活检侵入性较小。在一些实施例中，与传统方法相比，可以在更早的阶段使用液体活检来检测是否存在基因(例如，malt1基因)、蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调。在一些实施例中，用于液体活检的生物样品可以包含血液、血浆、尿液、脑脊髓液、唾液、痰、支气管肺泡灌洗液、胆汁、淋巴液、囊肿液、粪便、腹水及其组合。在一些实施例中，液体活检可用于检测循环性肿瘤细胞(ctc)。在一些实施例中，液体活检可用于检测无细胞dna。在一些实施例中，使用液体活检检测到的无细胞dna是循环性肿瘤dna(ctdna)，其源自肿瘤细胞。对ctdna的分析(例如，使用敏感的检测技术，如但不限于下一代测序(ngs)、传统pcr、数字pcr或微阵列分析)可用于鉴定基因(例如，malt1基因)、蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调。[0653]在一些实施例中，可以使用液体活检来检测源自单个基因的ctdna。在一些实施例中，可以使用液体活检来检测源自多个基因(例如，2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、15个、20个、25个、30个、35个、40个、45个、50个、55个、60个、65个、70个、75个、80个、85个、90个、95个、100个或更多个基因，或者在这些数目之间的任何数目的基因)的ctdna。在一些实施例中，可以使用多种市售测试面板(例如，被设计成检测基因(例如，malt1基因)、蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调的市售测试面板)中的任何一种测试面板来检测源自多个基因的ctdna。液体活检可用于检测基因(例如，malt1基因)、蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调，包含但不限于点突变或单核苷酸变体(snv)、拷贝数变体(cnv)、基因融合(例如，易位或重排)、插入、缺失或其任何组合。在一些实施例中，液体活检可用于检测种系突变。在一些实施例中，液体活检可用于检测体细胞突变。在一些实施例中，液体活检可用于检测原发性基因突变(例如，与疾病(例如，癌症)的初始发展相关的原发性突变或原发性融合)。在一些实施例中，在受试者中存在的癌细胞中(例如，在肿瘤中)也存在使用液体活检鉴定的基因(例如，malt1基因)、蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调。在一些实施例中，可以使用液体活检来检测本文所述的基因(例如，malt1基因)、蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调。在一些实施例中，通过液体活检鉴定的基因突变可用于将受试者鉴定为特定治疗的候选者。例如，在受试者中检测到基因(例如，malt1基因)、蛋白质(例如，malt1蛋白)或二者中任一个的表达或活性或水平的失调可以表明受试者将对包含施用式(i)化合物或其药学上可接受的盐的治疗有反应。[0654]可以在诊断过程、监测过程和/或治疗过程期间多次进行液体活检，以确定一个或多个临床相关参数，所述临床相关参数包含但不限于疾病的进展和/或治疗的功效。例如，在诊断过程、监测过程和/或治疗过程期间，可以在第一个时间点进行第一次液体活检，并且可以在第二个时间点进行第二次液体活检。在一些实施例中，第一个时间点可以是在诊断患有疾病的受试者之前的时间点(例如，当受试者健康时)，而第二个时间点可以是受试者患有疾病之后的时间点(例如，第二个时间点可用于诊断患有该疾病的受试者)。在一些实施例中，第一个时间点可以是在诊断患有疾病的受试者之前的时间点(例如，当受试者健康时)，之后对该受试者进行监视，而第二个时间点可以是在监视受试者之后的时间点。在一些实施例中，第一个时间点可以是在诊断患有疾病的受试者之后的时间点，之后对该受试者施用治疗，而第二个时间点可以是在施用治疗之后的时间点；在这种情况下，第二个时间点可用于评估治疗的功效(例如，如果在第一个时间点检测到的基因突变大量减少或无法检测到)。在一些实施例中，待施用给受试者的治疗可以包含式(i)化合物或其药学上可接受的盐。[0655]在一些实施例中，可以通过评估在不同时间点从受试者获得的cfdna(例如，在第一个时间点从受试者获得的cfdna和在第二个时间点从受试者获得的cfdna)中基因(例如，malt1基因)失调的等位基因频率来确定式(i)化合物或其药学上可接受的盐的功效，其中在第一个时间点和第二个时间点之间向受试者施用至少一个剂量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。这些方法的一些实施例可以进一步包含在第一个时间点和第二个时间点之间向受试者施用至少一个剂量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。例如，与在第一个时间点从受试者获得的cfdna中基因(例如，malt1基因)失调的等位基因频率(af)相比，在第二个时间点从受试者获得的cfdna中基因(例如，malt1基因)失调的等位基因频率(af)减少(例如，减少1％到约99％、减少1％到约95％、减少1％到约90％、减少1％到约85％、减少1％到约80％、减少1％到约75％、减少1％到减少约70％、减少1％到减少约65％、减少1％到减少约60％、减少1％到减少约55％、减少1％到减少约50％、减少1％到减少约45％、减少1％到减少约40％、减少1％到减少约35％、减少1％到减少约30％、减少1％到减少约25％、减少1％到减少约20％、减少1％到减少约15％、减少1％到减少约10％、减少1％到减少约5％、减少约5％到约99％、减少约10％到约99％、减少约15％到约99％、减少约20％到约99％、减少约25％到约99％、减少约30％到约99％、减少约35％到约99％、减少约40％到约99％、减少约45％到约99％、减少约50％到约99％、减少约55％到约99％、减少约60％到约99％、减少约65％到约99％、减少约70％到约99％、减少约75％到约95％、减少约80％到约99％、减少约90％到约99％、减少约95％到约99％、减少约5％到约10％、减少约5％到约25％、减少约10％到约30％、减少约20％到约40％、减少约25％到约50％、减少约35％到约55％、减少约40％到约60％、减少约50％到约75％、减少约60％到约80％或减少约65％到约85％)，这表明式(i)化合物或其药学上可接受的盐对受试者有效。在一些实施例中，减小af，使得水平低于仪器的检测极限。可替代地，与在第一个时间点从受试者获得的cfdna中基因(例如，malt1基因)失调的等位基因频率(af)相比，在第二个时间点从受试者获得的cfdna中基因(例如，malt1基因)失调的等位基因频率(af)增加，这表明式(i)化合物或其药学上可接受的盐对受试者无效。这些方法的一些实施例可以进一步包含向其中式(i)化合物或其药学上可接受的盐被确定为有效的受试者施用另外剂量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。这些方法的一些实施例可以进一步包含向其中式(i)化合物或其药学上可接受的盐被确定为无效的受试者施用不同的治疗(例如，不包含作为单一疗法施用式(i)化合物或其药学上可接受的盐的治疗)。[0656]在这些方法的一些实例中，第一个时间点和第二个时间点之间的时间差可以为约1天到约1年、约1天到约11个月、约1天到约10个月、约1天到约9个月、约1天到约8个月、约1天到约7个月、约1天到约6个月、约1天到约5个月、约1天到约4个月、约1天到约3个月、约1天到约10周、约1天到约2个月、约1天到约6周、约1天到约1个月、约1天到约25天、约1天到约20天、约1天到约15天、约1天到约10天、约1天到约5天、约2天到约1年、约5天到约1年、约10天到约1年、约15天到约1年、约20天到约1年、约25天到约1年、约1个月到约1年、约6周到约1年、约2个月到约1年、约3个月到约1年、约4个月到约1年、约5个月到约1年、约6个月到约1年、约7个月到约1年、约8个月到约1年、约9个月到约1年、约10个月到约1年、约11个月到约1年、约1天到约7天、约1天到约14天、约5天到约10天、约5天到约20天、约10天到约20天、约15天到约1个月、约15天到约2个月、约1周到约1个月、约2周到约1个月、约1个月到约3个月、约3个月到约6个月、约4个月到约6个月、约5个月到约8个月或约7个月到约9个月。在这些方法的一些实施例中，受试者可以事先被鉴定为患有具有失调的基因(例如，本文所述的失调的基因的任何实例)(例如，malt1基因)的癌症。在这些方法的一些实施例中，受试者可以事先被诊断患有本文所述的任何类型的癌症。在这些方法的一些实施例中，受试者可以具有一种或多种转移(例如，一种或多种脑转移)。[0657]在上述一些实施例中，cfdna包括ctdna，如malt1相关性ctdna。例如，cfdna是ctdna，如malt1相关性ctdna。在一些实施例中，确定cfdna的至少一部分是malt1相关性ctdna，例如，确定测序和/或定量的量的总cfdna具有malt1融合和/或malt1的过表达。[0658]在医学肿瘤学领域，通常的实践是使用不同形式的治疗的组合来治疗每个患有癌症的受试者。在医学肿瘤学中，除本文提供的组合物外，此类联合治疗或疗法的一种或多种其它组分还可以是例如外科手术、放射疗法和化学治疗剂，如其它蛋白酶抑制剂、激酶抑制剂、信号转导抑制剂和/或单克隆抗体。[0659]例如，外科手术可以是开放手术或微创手术。因此，式(i)化合物或其药学上可接受的盐也可用作癌症治疗的佐剂，即，其可以与一种或多种另外的疗法或治疗剂(例如，通过相同或不同的作用机理起作用的化学治疗剂)组合使用。在一些实施例中，可以在施用另外的治疗剂或另外的疗法之前施用式(i)化合物或其药学上可接受的盐。例如，可以在一段时间内向有需要的受试者施用一个或多个剂量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐，然后至少部分地切除肿瘤。在一些实施例中，在至少部分地切除肿瘤之前，用一个或多个剂量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐进行治疗可减少肿瘤的大小(例如，肿瘤负荷)。在一些实施例中，可以在一段时间内并在一轮或多轮放射疗法下向有需要的受试者施用一个或多个剂量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。在一些实施例中，在进行一轮或多轮放射疗法之前，用一个或多个剂量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐进行治疗可减少肿瘤的大小(例如，肿瘤负荷)。[0660]在一些实施例中，受试者患有难治的或对标准疗法(例如，施用化学治疗剂)，如第一malt1抑制剂、激酶抑制剂、免疫疗法、细胞或基因疗法或放射法(例如，放射性碘)不耐受的癌症。在一些实施例中，受试者患有难治的或对先前疗法(例如，施用化学治疗剂，如第一malt1抑制剂或另一种蛋白酶抑制剂、免疫疗法、细胞或基因疗法或放射法(例如，放射性碘)不耐受的癌症。在一些实施例中，受试者患有没有标准疗法的癌症(例如，局部晚期或转移性肿瘤)。在一些实施例中，受试者未使用过malt1蛋白酶抑制剂。例如，受试者未用选择性malt1蛋白酶抑制剂进行过治疗。在一些实施例中，受试者使用过malt1蛋白酶抑制剂。[0661]在本文描述的任何方法的一些实施例中，式(i)化合物或其药学上可接受的盐与有效量的至少一种另外的治疗剂组合施用，所述至少一种另外的治疗剂选自一种或多种另外的疗法或治疗剂(例如，化学疗法或免疫调节剂)。另外的疗法或治疗剂可以是任何适当的另外的疗法或治疗剂，如本文所述的任何另外的疗法或治疗剂。[0662]另外的治疗剂的非限制性实例包含：其它malt1靶向治疗剂(即第一或第二malt1蛋白酶抑制剂，例如，jnj-67856633或ctx-177)、其它蛋白酶抑制剂、激酶抑制剂(例如，受体酪氨酸激酶靶向治疗剂，如btk或egfr抑制剂)、信号转导途径抑制剂、检查点抑制剂、凋亡途径的调节剂(例如，维奈托克(venetoclax)或奥贝托克(obataclax))；细胞毒性化学疗法、血管生成靶向疗法、免疫靶向剂(包含抗体和基于细胞的免疫疗法，以及抗体-药物缀合物)和放射疗法。[0663]在一些实施例中，式(i)化合物或其药学上可接受的盐以及另外的治疗剂以单独剂量同时施用。在一些实施例中，式(i)化合物或其药学上可接受的盐以及另外的治疗剂以单独剂量按任何顺序依次施用。[0664]在一些实施例中，其它malt1靶向治疗剂是表现出malt1抑制活性的另一种蛋白酶抑制剂。在一些实施例中，其它malt1靶向治疗剂对malt1蛋白酶具有选择性。示例性malt1蛋白酶抑制剂可以针对malt1蛋白酶表现出小于约1000nm、小于约500nm、小于约200nm、小于约100nm、小于约50nm、小于约25nm、小于约10nm或小于约1nm的抑制活性(ic50)，如本文所述的测定法中所测量的。在一些实施例中，malt1蛋白酶抑制剂可以针对malt1蛋白酶表现出小于约25nm、小于约10nm、小于约5nm或小于约1nm的抑制活性(ic50)，如本文提供的测定法中所测量的。[0665]蛋白酶靶向治疗剂(例如，第一malt1抑制剂或第二malt1抑制剂)的非限制性实例包含jnj-67856633和ctx-177。[0666]多激酶抑制剂的非限制性实例包含阿来替尼(alectinib)(9-乙基-6,6-二甲基-8-[4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]-11-氧代-6,11-二氢-5h-苯并[b]咔唑-3-甲腈)；安姆伐替尼(amuvatinib)(mp470、hpk56)(n-(1,3-苯并二氧杂环戊烯-5-基甲基)-4-([1]苯并呋喃[3,2-d]嘧啶-4-基)哌嗪-1-硫代酰胺)；阿帕替尼(apatinib)(yn968d1)(甲磺酸n-[4-(1-氰基环戊基)苯基-2-(4‑‑吡啶甲基)氨基-3-烟酰胺酯)；卡博替尼(cabozantinib)(cometriqxl-184)(n-(4-((6,7-二甲氧基喹啉-4-基)氧基)苯基)-n'-(4-氟苯基)环丙烷-1,1-二甲酰胺)；多韦替尼(dovitinib)(tki258；gfki-258；chir-258)((3z)-4-氨基-5-氟-3-[5-(4-甲基哌嗪-1-基)-1,3-二氢苯并咪唑-2-亚基]喹啉-2-酮)；法米替尼(famitinib)(5-[2-(二乙氨基)乙基]-2-[(z)-(5-氟-2-氧代-1h-吲哚-3-亚基)甲基]-3-甲基-6,7-二氢-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-酮)；菲达替尼(fedratinib)(sar302503、tg101348)(n-(2-甲基-2-丙烷基)-3-{[5-甲基-2-({4-[2-(1-吡咯烷基)乙氧基]苯基}氨基)-4-嘧啶基]氨基}苯磺酰胺)；福瑞替尼(foretinib)(xl880、exel-2880、gsk1363089、gsk089)(n1'-[3-氟-4-[[6-甲氧基-7-(3-吗啉代丙氧基)-4-喹啉基]氧基]苯基]-n1-(4-氟苯基)环丙烷-1,1-二甲酰胺)；福他替尼(fostamantinib)(r788)(2h-吡啶并[3,2-b]-1,4-噁嗪-3(4h)-酮、6-[[5-氟-2-[(3,4,5-三甲氧基苯基)氨基]-4-嘧啶基]氨基]-2,2-二甲基-4-[(膦酰氧基)甲基]-、钠盐(1:2))；伊洛沙替尼(ilorasertib)(abt-348)(1-(4-(4-氨基-7-(1-(2-羟乙基)-1h-吡唑-4-基)噻吩基[3,2-c]吡啶-3-基)苯基)-3-(3-氟苯基)脲)；乐伐替尼(lenvatinib)(e7080，乐卫玛(lenvima)(4-[3-氯-4-(环丙基氨基羰基)氨基苯氧基]-7-甲氧基-6-喹啉甲酰胺)；莫特沙尼(motesanib)(amg706)(n-(3,3-二甲基-2,3-二氢-1h-吲哚-6-基)-2-[(吡啶-4-基甲基)氨基]吡啶-3-甲酰胺)；尼达尼布(nintedanib)(3-z-[1-(4-(n-((4-甲基哌嗪-1-基)-甲基羰基)-n-甲基-氨基)-苯胺基)-1-苯基-亚甲基]-6-甲氧基羰基-2-吲哚啉酮)；普纳替尼(ponatinib)(ap24534)(3-(2-咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基乙炔基)-4-甲基-n-[4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]-3-(三氟甲基)苯基]苯甲酰胺)；pp242(拓克尼布(torkinib))(2-[4-氨基-1-(1-甲基乙基)-1h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基]-1h-吲哚-5-醇)；奎扎替尼(quizartinib)(1-(5-(叔丁基)异噁唑-3-基)-3-(4-(7-(2-吗啉代乙氧基)苯并[d]咪唑并[2,1-b]噻唑-2-基)苯基)脲)；瑞戈非尼(regorafenib)(bay73-4506，stivarga)(4-[4-({[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]氨基甲酰基}氨基)-3-氟苯氧基]-n-甲基吡啶-2-甲酰胺水合物)；rxdx-105(cep-32496，阿戈拉非尼(agerafenib)(1-(3-((6,7-二甲氧基喹唑啉-4-基)氧基)苯基)-3-(5-(1,1,1-三氟-2-甲基丙-2-基)异噁唑-3-基)脲)；司马沙尼(semaxanib)(su5416)((3z)-3-[(3,5-二甲基-1h-吡咯-2-基)亚甲基]-1,3-二氢-2h-吲哚-2-酮)；司曲替尼(sitravatinib)(mgcd516、mg516)(n-(3-氟-4-{[2-(5-{[(2-甲氧基乙基)氨基]甲基}-2-吡啶基)噻吩并[3,2-b]吡啶-7-基]氧基}苯基)-n'-(4-氟苯基)-1,1-环丙二甲酰胺)；索拉非尼(sorafenib)(bay43-9006)(4-[4-[[[[4-氯-3-(三氟甲基)苯基]氨基]羰基]氨基]苯氧基]-n-甲基-2-吡啶甲酰胺)；凡德他尼(vandetanib)(n-(4-溴-2-氟苯基)-6-甲氧基-7-[(1-甲基哌啶-4-基)甲氧基]喹唑啉-4-胺)；瓦他拉尼(vatalanib)(ptk787、ptk/zk、zk222584)(n-(4-氯苯基)-4-(吡啶-4-基甲基)酞嗪-1-胺)；ad-57(n-[4-[4-氨基-1-(1-甲基乙基)-1h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基]苯基]-n'-[3-(三氟甲基)苯基]-脲)；ad-80(1-[4-(4-氨基-1-丙-2-基吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)苯基]-3-[2-氟-5-(三氟甲基)苯基]脲)；ad-81(1-(4-(4-氨基-1-异丙基-1h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-基)苯基)-3-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)脲)；alw-ii-41-27(n-(5-((4-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)氨基甲酰基)-2-甲基苯基)-5-(噻吩-2-基)烟酰胺)；bpr1k871(1-(3-氯苯基)-3-(5-(2-((7-(3-(二甲基氨基)丙氧基)喹唑啉-4-基)氨基)乙基)噻唑-2-基)脲)；clm3(1-苯乙基-n-(1-苯乙基)-1h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺)；ebi-907(n-(2-氯-3-(1-环丙基-8-甲氧基-3h-吡唑并[3,4-c]异喹啉-7-基)-4-氟苯基)-3-氟丙烷-1-磺酰胺)；nvp-ast-487(n-[4-[(4-乙基-1-哌嗪基)甲基]-3-(三氟甲基)苯基]-n'-[4-[[6-(甲基氨基)-4-嘧啶基]氧基]苯基]-脲)；nvp-bbt594(bbt594)(5-((6-乙酰氨基嘧啶-4-基)氧基)-n-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)二氢吲哚-1-甲酰胺)；pd173955(6-(2,6-二氯苯基)-8-甲基-2-(3-甲硫基苯胺基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮)；pp2(4-氨基-5-(4-氯苯基)-7-(二甲基乙基)吡唑并[3,4-d]嘧啶)；pz-1(n-(5-(叔丁基)异噁唑-3-基)-2-(4-(5-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-1h苯并[d]咪唑-1-基)苯基)乙酰胺)；rpi-1(1,3-二氢-5,6-二甲氧基-3-[(4-羟基苯基)亚甲基]-h-吲哚-2-酮；(3e)-3-[(4-羟基苯基)亚甲基]-5,6-二甲氧基-1h-吲哚-2-酮)；sgi-7079(3-[2-[[3-氟-4-(4-甲基-1-哌嗪基)苯基]氨基]-5-甲基-7h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基]-苯乙腈)；spp86(1-异丙基-3-(苯基乙炔基)-1h-吡唑并[3,4-d]嘧啶-4-胺)；su4984(4-[4-[(e)-(2-氧代-1h-吲哚-3-亚基)甲基]苯基]哌嗪-1-甲醛)；舒尼替尼(sunitinb)(su11248)(n-(2-二乙氨基乙基)-5-[(z)-(5-氟-2-氧代-1h-吲哚-3-亚基)甲基]-2,4-二甲基-1h-吡咯-3-甲酰胺)；tg101209(n-叔丁基-3-(5-甲基-2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基氨基)嘧啶-4-基氨基)苯磺酰胺)；醉茄素a(withaferina)((4β,5β,6β,22r)-4,27-二羟基-5,6:22,26-二环氧麦角甾-2,24-二烯-1,26-二酮)；xl-999((z)-5-((1-乙基哌啶-4-基)氨基)-3-((3-氟苯基)(5-甲基-1h-咪唑-2-基)亚甲基)二氢吲哚-2-酮)；bpr1j373(5-苯基噻唑-2-基胺-嘧啶衍生物)；cg-806(cg'806)；dcc-2157；gtx-186；hg-6-63-01((e)-3-(2-(4-氯-1h-吡咯并[2,3-b]吡啶-5-基)乙烯基)-n-(4-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)-4-甲基苯甲酰胺)；sw-01(盐酸环苯扎林)；xmd15-44(n-(4-((4-乙基哌嗪-1-基)甲基)-3-(三氟甲基)苯基)-4-甲基-3-(吡啶-3-基乙炔基)苯甲酰胺(从结构生成))；itri-305(d0n5tb、dib003599)；blu-667((1s,4r)-n-((s)-1-(6-(4-氟-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-1-甲氧基-4-(4-甲基-6-((5-甲基-1h-吡唑-3-基)氨基)嘧啶-2-基)环己烷-1-甲酰胺)；blu6864；ds-5010；gsk3179106；gsk3352589；nms-e668；tas0286/hm05；tpx0046；以及n-(3-(2-(二甲基氨基)乙氧基)-5-(三氟甲基)苯基)-2-(4-(4-乙氧基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2-氟苯基)乙酰胺。[0667]受体酪氨酸激酶(例如，trk)靶向治疗剂的非限制性实例包含阿法替尼(afatinib)、卡博替尼、西妥昔单抗(cetuximab)、克唑替尼(crizotinib)、达拉非尼(dabrafenib)、恩曲替尼(entrectinib)、厄洛替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、伊马替尼(imatinib)、拉帕替尼(lapatinib)、来他替尼(lestaurtinib)、尼洛替尼(nilotinib)、帕唑帕尼(pazopanib)、帕尼单抗(panitumumab)、帕妥珠单抗(pertuzumab)、舒尼替尼、曲妥珠单抗(trastuzumab)、l-((3s,4r)-4-(3-氟苯基)-l-(2-甲氧基乙基)吡咯烷-3-基)-3-(4-甲基-3-(2-甲基嘧啶-5-基)-l-苯基-lh-吡唑-5-基)脲、ag879、ar-772、ar-786、ar-256、ar-618、az-23、az623、ds-6051、gnf-5837、gtx-186、gw441756、loxo-101、mgcd516、plx7486、rxdx101、vm-902a、tpx-0005、tsr-011、gnf-4256、n-[3-[[2,3-二氢-2-氧代-3-(1h-吡咯-2-基亚甲基)-1h-吲哚-6-基]氨基]-4-甲基苯基]-n′‑[2-氟-5-(三氟甲基)苯基]-脲、az623、az64、(s)-5-chloro-n2-(1-(5-氟吡啶-2-基)乙基)-n4-(5-异丙氧基-1h-吡唑-3-基)嘧啶-2,4-二胺、azd7451、cep-751、ct327、舒尼替尼、gnf-8625以及(r)-1-(6-(6-(2-(3-氟苯基)吡咯烷-1-基)咪唑并[1,2-b]哒嗪-3-基)-[2,4'-联吡啶]-2'-基)哌啶-4-醇。[0668]在一些实施例中，另外的治疗剂是braf抑制剂。braf抑制剂的非限制性实例包含：达拉非尼、威罗非尼(vemurafenib)(也被称为rg7204或plx4032)、对甲苯磺酸索拉非尼(sorafenibtosylate)、plx-4720、gdc-0879、bms-908662(百时美施贵宝公司(bristol-meyerssquibb))、lgx818(诺华公司(novartis))、plx3603(豪夫迈罗氏公司(hofmann-laroche))、raf265(诺华公司)、ro5185426(豪夫迈罗氏公司)和gsk2118436(葛兰素史克公司(glaxosmithkline))。braf抑制剂的另外的实例是本领域已知的。[0669]在一些实施例中，另外的治疗剂是表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(egfr)。例如，egfr抑制剂可以包含奥希替尼(osimertinib)(merelectinib，tagrisso)、厄洛替尼(tarceva)、吉非替尼(iressa)、西妥昔单抗(erbitux)、耐昔妥珠单抗(necitumumab)(portrazza)、来那替尼(neratinib)(nerlynx)、拉帕替尼(tykerb)、帕尼单抗(vectibix)和凡德他尼(caprelsa)。[0670]在一些实施例中，另外的治疗剂是ras-raf-mek-erk途径抑制剂(例如，比美替尼(binimetinib)、司美替尼(selumetinib)、康奈非尼(encorafenib)、索拉非尼、曲美替尼(trametinib)和威罗非尼)、pi3k-akt-mtor-s6k途径抑制剂(例如，依维莫司(everolimus)、雷帕霉素(rapamycin)、哌立福新(perifosine)、替西罗莫司(temsirolimus))和其它激酶抑制剂，如巴瑞替尼(baricitinib)、布加替尼(brigatinib)、卡马替尼(capmatinib)、达鲁色替(danusertib)、依鲁替尼(ibrutinib)、密西尼(milciclib)、槲皮素(quercetin)、瑞戈非尼、鲁索替尼(ruxolitinib)、司马沙尼、ap32788、blu285、blu554、incb39110、incb40093、incb50465、incb52793、incb54828、mgcd265、nms-088、nms-1286937、pf477736((r)-氨基-n-n-[5,6-二氢-2-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-6-氧代-1h吡咯并[4,3,2-ef][2,3]苯并二氮杂-8-基]-环己烷乙酰胺)、plx3397、plx7486、plx8394、plx9486、prn1008、prn1371、rxdx103、rxdx106、rxdx108和tg101209(n-叔丁基-3-(5-甲基-2-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯基氨基)嘧啶-4-基氨基)苯磺酰胺)。[0671]在一些实施例中，另外的治疗剂是btk抑制剂。btk抑制剂的非限制性实例包含依鲁替尼、阿卡替尼(acalabrutinib)和泽布替尼(zanubrutinib)。[0672]在一些实施例中，另外的治疗剂是bcl-2抑制剂。bcl-2抑制剂的非限制性实例包含维奈托克、纳维托克(navitoclax)、奥利默森(oblimersen)、奥贝托克和at-101。[0673]在一些实施例中，另外的治疗剂是pi3k抑制剂。pi3k抑制剂的非限制性实例包含艾德拉尼(idelalisib)、库潘尼西(copanlisib)、杜韦利西布(duvelisib)、阿培利司(alpelisib)、塔西利司(taselisib)、布帕尼西(buparlisib)、厄布利塞(umbralisib)和库潘尼西。[0674]在一些实施例中，另外的治疗剂是mtor抑制剂。mtor抑制剂的非限制性实例包含依维莫司、替西罗莫司和瑞达莫司(ridaforolimus)。[0675]在一些实施例中，另外的治疗剂是hdac抑制剂。hdac抑制剂的非限制性实例包含伏立诺他(vorinostat)、罗米地辛(romidepsin)、贝立司他(belinostat)、西达本胺(chidamide)、帕比司他(panobinostat)、cxd101和艾贝司他(abexinostat)。[0676]在一些实施例中，另外的治疗剂是检查点抑制剂。检查点抑制剂的非限制性实例包含伊匹木单抗(ipilimumab)、曲美木单抗(tremelimumab)、纳武单抗(nivolumab)、匹地利珠单抗(pidilizumab)、mpdl3208a、medi4736、msb0010718c、bms-936559、bms-956559、bms-935559(mdx-1105)、amp-224和派姆单抗(pembrolizumab)。[0677]在一些实施例中，另外的治疗剂是细胞毒性化学疗法。在一些实施例中，细胞毒性化学疗法包含三氧化二砷(arsenictrioxide)、博来霉素(bleomycin)、苯达莫司汀(bendamustine)、卡巴他赛(cabazitaxel)、卡培他滨(capecitabine)、卡铂(carboplatin)、顺铂(cisplatin)、环磷酰胺(cyclophosphamide)、阿糖胞苷(cytarabine)、达卡巴嗪(dacarbazine)、柔红霉素(daunorubicin)、多西他赛(docetaxel)、多柔比星(doxorubicin)、依托泊苷(etoposide)、氟尿嘧啶(fluorouracil)、吉西他滨、伊立替康(irinotecan)、洛莫司丁(lomustine)、甲氨蝶呤(methotrexate)、丝裂霉素c(mitomycinc)、奥沙利铂(oxaliplatin)、紫杉醇(paclitaxel)、培美曲塞(pemetrexed)、替莫唑胺(temozolomide)和长春新碱(vincristine)。[0678]在一些实施例中，另外的治疗剂是血管生成靶向治疗剂。靶向血管生成的疗法的非限制性实例包含来那度胺(lenalidomide)、恩扎妥林(enzastaurine)、阿柏西普(aflibercept)和贝伐单抗(bevacizumab)。[0679]在一些实施例中，另外的疗法或治疗剂可以包含组氨酰-trna合成酶(hrs)多肽或编码hrs多肽的可表达核苷酸。[0680]术语“免疫疗法”是指调节免疫系统的药剂。在一些实施例中，免疫疗法可以增加免疫系统调节剂的表达和/或活性。在一些实施例中，免疫疗法可以降低免疫系统调节剂的表达和/或活性。在一些实施例中，免疫疗法可以募集和/或增强免疫细胞的活性。[0681]在一些实施例中，免疫疗法是细胞免疫疗法(例如，过继t细胞疗法、树突状细胞疗法、自然杀伤细胞疗法)。在一些实施例中，细胞免疫疗法是sipuleucel-t(apc8015；provengetm；plosker(2011)《药物》71(1):101-108)。在一些实施例中，细胞免疫疗法包含表达嵌合抗原受体(car)的细胞。在一些实施例中，细胞免疫疗法是car-t细胞疗法。在一些实施例中，car-t细胞疗法是替沙仑赛(tisagenlecleucel)(kymria)。在一些实施例中，car-t细胞疗法是阿基仑赛(axicabtageneciloleucel)(yescarta)。在一些实施例中，car-t细胞疗法是布瑞基奥仑赛(brexucabtageneautoleucel)(tecartus)。在一些实施例中，car-t细胞疗法是瑞基奥仑赛(relmacabtageneautoleucel)。在一些实施例中，car-t细胞疗法是allo-501。[0682]在一些实施例中，免疫疗法是抗体疗法(例如，单克隆抗体、缀合抗体或双特异性抗体)。在一些实施例中，抗体疗法是贝伐单抗(mvastitm，)、曲妥珠单抗阿维单抗(avelumab)利妥昔单抗(rituximab)(mabtheratm，)、含有人透明质酸酶的利妥昔单抗(rituxanhycelatm)、依决洛单抗(edrecolomab)(panorex)、达雷妥尤单抗(daratumuab)奥拉单抗(olaratumab)(lartruvotm)、奥法木单抗(ofatumumab)阿仑单抗(alemtuzumab)西妥昔单抗奥戈伏单抗(oregovomab)、派姆单抗地努妥昔单抗(dinutiximab)阿托珠单抗(obinutuzumab)曲美木单抗(cp-675,206)、雷莫芦单抗(ramucirumab)乌利妥昔单抗(ublituximab)(tg-1101)、帕尼单抗依洛珠单抗(elotuzumab)(emplicititm)、阿维单抗(avelumab)耐昔妥珠单抗(portrazzatm)、西妥珠单抗(cirmtuzumab)(uc-961)、伊布单抗(ibritumomab)伊沙妥昔单抗)(isatuximab)(sar650984)、尼妥珠单抗(nimotuzumab)、非苏木单抗(fresolimumab)(gc1008)、利瑞鲁单抗(lirilumab)(inn)、莫格利珠单抗(mogamulizumab)非克拉珠单抗(ficlatuzumab)(av-299)、地舒单抗(denosumab)仑兹鲁单抗(lenzilumab)、阿维单抗、斯巴达珠单抗(spartalizumab)、派姆单抗、乌托鲁单抗(utomilumab)、乌利妥昔单抗、博纳吐单抗(blinatumomab)、盖尼塔单抗(ganitumab)、乌瑞芦单抗(urelumab)、匹地利珠单抗、阿麦妥单抗(amatuximab)、莫舒尼妥珠单抗(mosunetuzumab)(btct4465a)、cd20-tcb、ro7082859、xmab13676、格菲妥单抗(glofitamab)、cd20-tdb、奥尼妥单抗(odronextamab)(regn1979)、igm-2323、btct4465a、amg-562或tti-621。[0683]在一些实施例中，免疫疗法是抗体-药物缀合物。在一些实施例中，抗体-药物缀合物是吉妥珠单抗奥佐米星(gemtuzumabozogamicin)(mylotargtm)、奥英妥珠单抗奥佐米星(inotuzumabozogamicin)维汀-本妥昔单抗(brentuximabvedotin)恩美曲妥珠单抗(ado-trastuzumabemtansine)(tdm-1；)、索星-米妥昔单抗(mirvetuximabsoravtansine)(imgn853)、雷星-阿奈妥单抗(anetumabravtansine)、维汀-泊洛妥珠单抗(polatuzumabvedotine)、替朗妥昔单抗(loncastuximabtesirine)(adct-402)、替卡利尤单抗(camidanlumabtesirine)(adct-301)或恩星-那妥昔单抗(naratuximabemtansine)(debio1562)。[0684]在一些实施例中，免疫疗法包含博纳吐单抗(amg103；)或米哚妥林(midostaurin)(rydapt)。[0685]在一些实施例中，免疫疗法包含毒素。在一些实施例中，免疫疗法是地尼白介素(denileukindiftitox)[0686]在一些实施例中，免疫疗法是细胞因子疗法。在一些实施例中，细胞因子疗法是白介素2(il-2)疗法、干扰素α(ifnα)疗法、粒细胞集落刺激因子(g-csf)疗法、白介素12(il-12)疗法、白介素疗法15(il-15)疗法、白介素7(il-7)疗法或促红细胞生成素α(epo)疗法。在一些实施例中，il-2疗法是阿地白介素(aldesleukin)在一些实施例中，ifnα疗法是在一些实施例中，g-csf疗法是非格司亭(filgrastim)[0687]在一些实施例中，免疫疗法是免疫检查点抑制剂。在一些实施例中，免疫疗法包含一种或多种免疫检查点抑制剂。在一些实施例中，免疫检查点抑制剂是ctla-4抑制剂、pd-1抑制剂或pd-l1抑制剂。在一些实施例中，ctla-4抑制剂是伊匹木单抗或曲美木单抗(cp-675,206)。在一些实施例中，pd-1抑制剂是派姆单抗或纳武单抗在一些实施例中，pd-l1抑制剂是阿妥珠单抗(atezolizumab)阿维单抗或德瓦鲁单抗(durvalumab)(imfinzitm)。[0688]在一些实施例中，免疫疗法是基于mrna的免疫疗法。在一些实施例中，基于mrna的免疫疗法是cv9104(参见例如，rausch等人(2014)《人类疫苗和免疫疗法(humanvaccinimmunother)》10(11):3146-52；和kubler等人(2015)《癌症免疫治疗杂志(j.immunothercancer)》3:26)。[0689]在一些实施例中，免疫疗法是卡介苗芽孢杆菌(bcg)疗法。[0690]在一些实施例中，免疫疗法是溶瘤病毒疗法。在一些实施例中，溶瘤病毒疗法是拉他莫基(talimogenealherparepvec)(t-vec；)。[0691]在一些实施例中，免疫疗法是癌症疫苗。在一些实施例中，癌症疫苗是人乳头瘤病毒(hpv)疫苗。在一些实施例中，hpv疫苗是或在一些实施例中，癌症疫苗是乙型肝炎病毒(hbv)疫苗。在一些实施例中，hbv疫苗是recombivax或gi-13020在一些实施例中，癌症疫苗是或在一些实施例中，癌症疫苗是gvax、adxs11-001、alvac-cea、cimavax-egf、lapuleucel-t(apc8024；neuvengetm)、grnvac1、grnvac2、grn-1201、hepcortespenlisimut-l(hepko-v5)、scib1、bmtctn1401、prcavbir、panvac、dpx-survivac或viagenpumatucel-l(hs-110)。[0692]在一些实施例中，免疫疗法是肽疫苗。在一些实施例中，肽疫苗是nelipepimut-s(e75)(neuvaxtm)、ima901或survaxm(svn53-67)。在一些实施例中，癌症疫苗是免疫原性的个人新抗原疫苗(参见例如，ott等人(2017)《自然》547:217-221；sahin等(2017)《自然》547:222-226)。在一些实施例中，癌症疫苗是rgsh4k或neo-pv-01。在一些实施例中，癌症疫苗是基于dna的疫苗。在一些实施例中，基于dna的疫苗是乳球蛋白-adna疫苗(参见例如，kim等人(2016)《肿瘤免疫学(oncoimmunology)》5(2):e1069940)。[0693]在一些实施例中，免疫靶向剂选自阿地白介素、干扰素α-2b、伊匹木单抗、兰洛利珠单抗(lambrolizumab)、纳武单抗、泼尼松(prednisone)和sipuleucel-t。[0694]在一些实施例中，另外的疗法是放射疗法。放射疗法的非限制性实例包含放射性碘疗法、外束放射和镭223疗法。[0695]在一些实施例中，另外的治疗剂是gsk-3368715、pf-06821497、塞拉色替(ceralasertib)；azd6738、bi-894999、mak-683、azd-6738、taminadenant、tak-981、mik-665或丹伐特生(danvatirsen)。[0696]另外的激酶抑制剂包含在以下专利中描述的那些：例如，美国专利第7,514,446号；第7,863,289号；第8,026,247号；第8,501,756号；第8,552,002号；第8,815,901号；第8,912,204号；第9,260,437号；第9,273,051号；美国公开号us2015/0018336；国际公开号wo2007/002325；wo2007/002433；wo2008/080001；wo2008/079906；wo2008/079903；wo2008/079909；wo2008/080015；wo2009/007748；wo2009/012283；wo2009/143018；wo2009/143024；wo2009/014637；2009/152083；wo2010/111527；wo2012/109075；wo2014/194127；wo2015/112806；wo2007/110344；wo2009/071480；wo2009/118411；wo2010/031816；wo2010/145998；wo2011/092120；wo2012/101032；wo2012/139930；wo2012/143248；wo2012/152763；wo2013/014039；wo2013/102059；wo2013/050448；wo2013/050446；wo2014/019908；wo2014/072220；wo2014/184069；wo2016/075224；wo2016/081450；wo2016/022569；wo2016/011141；wo2016/011144；wo2016/011147；wo2015/191667；wo2012/101029；wo2012/113774；wo2015/191666；wo2015/161277；wo2015/161274；wo2015/108992；wo2015/061572；wo2015/058129；wo2015/057873；wo2015/017528；wo/2015/017533；wo2014/160521；和wo2014/011900，所述专利中的每个专利在此通过引用整体并入本文。[0697]在一些实施例中，受试者先前被施用一种或多种针对淋巴瘤的标准护理疗法。在一些实施例中，先前施用的标准护理疗法是维汀-泊洛妥珠单抗、塞利尼索(selinexor)、阿基仑赛(yescarta)、替沙仑赛(kymria)、苯达莫司汀与利妥昔单抗和维汀-泊洛妥珠单抗的组合、坦昔妥单抗(tafasitamab)与来那度胺的组合或利妥昔单抗与人透明质酸酶(rituxanhycela)的组合。[0698]在一些实施例中，受试者同时接受针对淋巴瘤的标准护理疗法。在一些实施例中，标准护理疗法是维汀-泊洛妥珠单抗、塞利尼索、阿基仑赛(yescarta)、替沙仑赛(kymria)、苯达莫司汀与利妥昔单抗和维汀-泊洛妥珠单抗的组合、坦昔妥单抗与来那度胺的组合或利妥昔单抗与人透明质酸酶(rituxanhycela)的组合。[0699]尽管在不同类型的癌症之间肿瘤发生的遗传基础可能有所不同，但对于所有实体瘤类型而言，转移所需的细胞和分子机制似乎是相似的。在转移性级联过程中，癌细胞失去生长抑制反应，发生粘附性改变，并产生可降解细胞外基质成分的酶。这导致肿瘤细胞与原始肿瘤分离，通过新形成的脉管系统渗透到循环系统中，肿瘤细胞在可能形成菌落的有利的远端位点处发生迁移和外渗。[0700]因此，本文还提供了一种用于在有需要的受试者中抑制、预防、帮助预防或减轻癌症的转移症状的方法，所述方法包括向所述受试者施用有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物。此类方法可用于治疗本文所述的一种或多种癌症。参见例如，美国公开号2013/0029925；国际公开号wo2014/083567；和美国专利第8,568,998号。另见例如，hezamk等人,《神经科学评论(revneurosci)》2018年1月26日；29:93-98；gaol等人,《胰腺(pancreas)》2015年1月；44:134-143；dingk等人,《生物化学杂志(jbiolchem)》2014年6月6日；289:16057-71；以及amitm等人,《癌基因》2017jun8；36:3232-3239。在一些实施例中，所述癌症是malt1相关性癌症。在一些实施例中，如本文所述，式(i)化合物或其药学上可接受的盐与另外的疗法或另一种治疗剂组合使用。例如，第一或第二malt1蛋白酶抑制剂。[0701]术语“转移”是本领域已知的术语，并且是指在受试者中远离原发性肿瘤的位点处形成另外的肿瘤(例如，实体瘤)，其中另外的肿瘤包含与原发性肿瘤相同或相似的癌细胞。[0702]还提供了在患malt1相关性癌症的受试者中降低发生转移或另外的转移的风险的方法，所述方法包含：选择、鉴定或诊断患有malt1相关性癌症的受试者，以及将有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐施用于被选择、鉴定或诊断为患有malt1相关性癌症的受试者。还提供了在患有malt1相关性癌症的受试者中降低发生转移或另外的转移的风险的方法，所述方法包含将有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐施用于患有malt1相关性癌症的受试者。可以将患有malt1相关性癌症的受试者中发生转移或另外的转移的风险的降低与治疗前受试者中发生转移或另外的转移的风险进行比较，或者与尚未接受任何治疗或接受不同治疗的患有相似或相同的malt1相关性癌症的受试者或受试者群体进行比较。[0703]短语“发生转移的风险”意指患有原发性肿瘤的受试者在设定的时间段内在远离受试者中的原发性肿瘤的位点处出现另外的肿瘤(例如，实体瘤)的风险，其中所述另外的肿瘤包含与原发性肿瘤相同或相似的癌细胞。本文描述了用于在患有癌症的受试者中降低发生转移的风险的方法。[0704]短语“发生另外的转移的风险”意指患有原发性肿瘤并在远离原发性肿瘤的位点处患有一种或多种另外的肿瘤(其中所述一种或多种另外的肿瘤包含与原发性肿瘤相同或相似的癌细胞)的受试者将出现远离原发性肿瘤的一种或多种另外的肿瘤的风险，其中所述另外的肿瘤包含与原发性肿瘤相同或相似的癌细胞。本文描述了降低发生另外的转移的风险的方法。[0705]本文所述的一些实施例提供了治疗如类风湿性关节炎、多发性硬化症和sle等自身免疫性病症(例如，malt1相关性自身免疫性病症)的方法，所述方法包括将有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐施用于有需要的受试者。[0706]本文所述的一些实施例提供了治疗如慢性移植物抗宿主病等炎性病症(例如，malt1相关性自身免疫性病症)的方法，所述方法包括将有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐施用于有需要的受试者。[0707]还提供了一种用于在哺乳动物细胞中抑制malt1蛋白酶活性的方法，所述方法包括使所述哺乳动物细胞与式(i)化合物接触。在一些实施例中，所述接触是体外的。在一些实施例中，所述接触是体内的。在一些实施例中，所述接触是体内的，其中所述方法包括将有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐施用于哺乳动物细胞具有malt1蛋白酶活性的受试者。在一些实施例中，所述哺乳动物细胞是哺乳动物免疫细胞。在一些实施例中，所述哺乳动物细胞是哺乳动物癌细胞。在一些实施例中，所述哺乳动物癌细胞是本文所述的任何癌症。在一些实施例中，所述哺乳动物癌细胞是malt1相关性哺乳动物癌细胞。[0708]还提供了一种用于在哺乳动物细胞中抑制malt1蛋白酶活性的方法，所述方法包括使所述哺乳动物细胞与式(i)化合物接触。在一些实施例中，所述接触是体外的。在一些实施例中，所述接触是体内的。在一些实施例中，所述接触是体内的，其中所述方法包括将有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐施用于哺乳动物细胞具有malt1蛋白酶活性的哺乳动物。在一些实施例中，所述哺乳动物细胞是哺乳动物免疫细胞。在一些实施例中，所述哺乳动物细胞是哺乳动物癌细胞。在一些实施例中，所述哺乳动物癌细胞是本文所述的任何癌症。在一些实施例中，所述哺乳动物癌细胞是malt1相关性哺乳动物癌细胞。在一些实施例中，所述哺乳动物细胞是胃肠道哺乳动物细胞。[0709]如本文所使用的，术语“接触”是指使体外系统或体内系统中的指示部分在一起。例如，使malt1蛋白酶与本文提供的化合物“接触”包含向具有malt1蛋白酶的受试者(如人)施用本文提供的化合物，以及例如将本文提供的化合物引入到含有哺乳动物细胞或纯化制剂的样品中，所述制剂含有malt1蛋白酶。[0710]本文还提供了一种在体外或体内抑制哺乳动物细胞增殖的方法，所述方法包括使细胞与有效量的如本文所定义的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或其药物组合物接触。[0711]如本文所定义的，“malt1蛋白酶抑制剂”包含表现出malt1抑制活性的任何化合物。在一些实施例中，malt1蛋白酶抑制剂对malt1蛋白酶具有选择性。示例性malt1蛋白酶抑制剂可以针对malt1蛋白酶表现出小于约1000nm、小于约500nm、小于约200nm、小于约100nm、小于约50nm、小于约25nm、小于约10nm或小于约1nm的抑制活性(ic50)，如本文所述的测定法中所测量的。在一些实施例中，malt1蛋白酶抑制剂可以针对malt1蛋白酶表现出小于约25nm、小于约10nm、小于约5nm或小于约1nm的抑制活性(ic50)，如本文提供的测定法中所测量的。[0712]如本文所使用的，“第一malt1蛋白酶抑制剂”或“第一malt1抑制剂”是如本文所定义的malt1蛋白酶抑制剂，但其不包含如本文所定义的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。如本文所使用的，“第二malt1蛋白酶抑制剂”或“第二malt1抑制剂”是如本文所定义的malt1蛋白酶抑制剂，但其不包含如本文所定义的式(i)化合物或其药学上可接受的盐。当本文提供的方法中同时存在第一和第二malt1抑制剂时，第一和第二malt1蛋白酶抑制剂是不同的。[0713]本文中描述了示例性的第一和第二malt1蛋白酶抑制剂。在一些实施例中，第一或第二malt1蛋白酶抑制剂可以是例如jnj-67856633或ctx-177。[0714]短语“有效量”是指当施用于需要此类治疗的受试者时足以(i)治疗malt1相关性疾病或病症(如malt1相关性癌症)；(ii)减轻、改善或消除特定疾病、病状或病症的一种或多种症状；或(iii)延迟本文所述特定疾病、病状或病症的一种或多种症状的发作的化合物的量。对应于该量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐的量将根据如具体化合物、疾病状况及其严重程度、需要治疗的受试者的身份(例如，体重)等因素而变化，但仍然可以由本领域技术人员常规确定。[0715]当用作药物时，式(i)化合物(包含其药学上可接受的盐)可以以药物组合物的形式施用。这些组合物可以按制药领域中熟知的方式制备，并且可以通过多种途径施用，取决于希望局部治疗还是全身性治疗并且取决于有待治疗的部位。施用可以是局部的(包含经皮、表皮、眼部和至粘膜，包含鼻内、阴道和直肠递送)、肺部的(例如，通过吸入或吹入粉末或气溶胶，包含通过喷雾器；气管内或鼻内)、经口的或肠胃外的。口服施用可以包含被配制用于每天一次或每天两次(bid)施用的剂型。肠胃外施用包含静脉内、动脉内、皮下、腹膜内肌内或注射或输注；或颅内(例如，鞘内或脑室内)施用。肠胃外施用可以呈单次团注剂量的形式，或者可以例如通过连续的灌注泵进行。用于局部施用的药物组合物和调配物可以包含透皮贴剂、软膏、洗剂、乳膏、凝胶剂、滴剂、栓剂、喷雾剂、液体以及粉末。常规的药物载体、水性、粉末或油性基质、增稠剂等可能是必要的或希望的。[0716]本文还提供了药物组合物，所述药物组合物含有作为活性成分的式(i)化合物或其药学上可接受的盐，以及一种或多种药学上可接受的赋形剂。例如，使用式(i)化合物或其药学上可接受的盐制备的药物组合物。在一些实施例中，所述组合物适合用于局部施用。在制备本文提供的组合物时，通常将活性成分与赋形剂混合、用赋形剂稀释或封装在此类载体之内，所述载体呈例如胶囊、药袋(sachet)、纸或其它容器的形式。当该赋形剂作为一种稀释剂时，它可以是一种固体、半固体或液体材料，该材料可以作为活性成分的媒剂、载体或介质而起作用。因此，组合物可以呈片剂、丸剂、粉剂、锭剂、药袋、扁囊剂、酏剂、悬浮液、乳液、溶液、糖浆剂、气溶胶(作为固体或在液体介质中)、含有例如至多10重量％的活性化合物的软膏、软明胶胶囊和硬明胶胶囊、栓剂、无菌可注射溶液以及无菌包装粉剂的形式。在一些实施例中，所述组合物被配制用于口服施用。在一些实施例中，所述组合物是固体口服调配物。在一些实施例中，所述组合物被配制成片剂或胶囊。[0717]本文进一步提供了含有式(i)化合物或其药学上可接受的盐以及药学上可接受的载体的药物组合物。可以通过根据常规药物混合技术将式(i)化合物或其药学上可接受的盐与药物载体充分混合来制备含有式(i)化合物或其药学上可接受的盐作为活性成分的药物组合物。取决于期望的施用途径(例如，口服、肠胃外)，载体可以采取各种形式。在一些实施例中，所述组合物是固体口服组合物。[0718]合适的药学上可接受的载体是本领域众所周知的。这些药学上可接受的载体中的一些载体的描述可以在《药物赋形剂手册(thehandbookofpharmaceuticalexcipients)》中找到，该手册由美国药学会和英国药学会出版。[0719]配制药物组合物的方法已经在许多出版物中有所描述，如《药物剂型：片剂，第二版，修订和扩展(pharmaceuticaldosageforms:tablets,secondedition,revisedandexpanded)》,第1-3卷,lieberman等人编辑；《药物剂型：肠胃外药物(pharmaceuticaldosageforms:parenteralmedications)》,第1-2卷,avis等人编辑；以及《药物剂型：分散系统(pharmaceuticaldosageforms:dispersesystems)》,第1-2卷,lieberman等人编辑；由马塞尔德克尔公司(marceldekker,inc)出版。[0720]在制备呈口服剂型的组合物时，可以使用任何常规药物介质。因此对于液体口服制剂如(悬浮液、酏剂和溶液)，合适的载体和添加剂包含水、乙二醇、油、醇、调味剂、防腐剂、稳定剂、着色剂等；对于固体口服制剂(如粉末、胶囊和片剂)，合适的载体和添加剂包含淀粉、糖、稀释剂、成粒剂、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。合适的粘合剂包含但不限于淀粉、明胶、天然糖(如葡萄糖或β-乳糖)、玉米甜味剂、天然和合成的树胶(如阿拉伯胶、黄蓍胶或油酸钠)、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包含但不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。固体口服制剂也可以用如糖等物质进行包衣或肠溶衣，从而调节吸收的主要位点。对于肠胃外施用，载体通常将由无菌水组成，并且可以加入其它成分以增加溶解性或保存性。也可以利用水性载体和适当的添加剂来制备可注射的混悬液或溶液。本文的药物组合物在每个剂量单位(例如，片剂、胶囊、粉末、注射剂、一茶匙等)中将含有递送本文所述的有效剂量所必需的一定量的活性成分。[0721]可以将包括式(i)化合物或其药学上可接受的盐的组合物配制成单位剂型，每个剂量含有约5到约1,000mg(1g)的活性成分，更通常为约100mg到约500mg的活性成分。术语“单位剂型”是指适合作为人类受试者和其它受试者的单位剂量的物理上离散的单位，每个单位含有预定量的活性物质(即，式(i)化合物或其药学上可接受的盐)，经计算所述预定量的活性物质与合适的药物赋形剂一起产生期望的治疗效果。[0722]在一些实施例中，本文提供的组合物含有约5mg到约50mg的活性成分。本领域普通技术人员将理解，这体现了含有约5mg到约10mg、约10mg到约15mg、约15mg到约20mg、约20mg到约25mg、约25mg到约30mg、约30mg到约35mg、约35mg到约40mg、约40mg到约45mg或约45mg到约50mg活性成分的化合物或组合物。[0723]在一些实施例中，本文提供的组合物含有约50mg到约500mg的活性成分。本领域普通技术人员将理解，这体现了含有约50mg到约100mg、约100mg到约150mg、约150mg到约200mg、约200mg到约250mg、约250mg到约300mg、约350mg到约400mg或约450mg到约500mg活性成分的化合物或组合物。在一些实施例中，本文提供的组合物含有约10mg、约20mg、约80mg或约160mg的活性成分。[0724]在一些实施例中，本文提供的组合物含有约500mg到约1,000mg的活性成分。本领域普通技术人员将理解，这体现了含有约500mg到约550mg、约550mg到约600mg、约600mg到约650mg、约650mg到约700mg、约700mg到约750mg、约750mg到约800mg、约800mg到约850mg、约850mg到约900mg、约900mg到约950mg或约950mg到约1,000mg活性成分的化合物或组合物。[0725]式(i)化合物或其药学上可接受的盐的日剂量可以在每成人每天1.0到10,000mg或更高的宽范围内或其中的任何范围内变化。对于口服施用，优选地以片剂形式提供组合物，所述片剂含有0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100、150、160、200、250和500毫克的活性成分，用于对待治疗受试者的剂量进行对症调整。通常以每天约0.1mg/kg到约1000mg/kg体重(或其中的任何范围)的剂量水平提供有效量的药物。优选地，所述范围为每天约0.5到约500mg/kg体重，或其中的任何范围。更优选地，所述范围为每天约1.0到约250mg/kg体重，或其中的任何范围。更优选地，所述范围为每天约0.1到约100mg/kg体重，或其中的任何范围。在一个实例中，所述范围可以为每天约0.1到约50.0mg/kg体重，或其中的任何量或范围。在另一个实例中，所述范围可以为每天约0.1到约15.0mg/kg体重，或其中的任何范围。在又一个实例中，所述范围可以为每天约0.5到约7.5mg/kg体重，或其中的任何范围。可以按照每天1-4次的方案或以单个日剂量施用含有式(i)化合物或其药学上可接受的盐的药物组合物。[0726]活性化合物可以在宽的剂量范围内有效，并且通常以药学有效量施用。本领域技术人员可以容易地确定待施用的最佳剂量。因此，应该理解，实际施用的化合物的量通常将由医生确定，并且将根据相关情况而变化，包含施用方式、实际施用的化合物、制剂的强度、待治疗的病状以及疾病状况的进展。另外，与正在治疗的特定受试者相关的因素，包含患者反应、年龄、体重、饮食、施用时间和受试者症状的严重程度，将导致需要调整剂量。[0727]在一些实施例中，可以以约1mg/kg到约100mg/kg范围内的量施用本文提供的化合物。在一些实施例中，可以以约1mg/kg到约20mg/kg、约5mg/kg到约50mg/kg、约10mg/kg到约40mg/kg、约15mg/kg到约45mg/kg、约20mg/kg到约60mg/kg或约40mg/kg到约70mg/kg的量施用本文提供的化合物。例如，约5mg/kg、约10mg/kg、约15mg/kg、约20mg/kg、约25mg/kg、约30mg/kg、约35mg/kg、约40mg/kg、约45mg/kg、约50mg/kg、约55mg/kg、约60mg/kg、约65mg/kg、约70mg/kg、约75mg/kg、约80mg/kg、约85mg/kg、约90mg/kg、约95mg/kg或约100mg/kg。[0728]本领域技术人员将认识到，使用合适的、已知的和普遍接受的细胞和/或动物模型的体内和体外试验均预示了测试化合物治疗或预防给定病症的能力。[0729]本领域的技术人员将进一步认识到，可以根据临床和医学领域中已知的方法完成在健康受试者和/或患有给定病症的受试者中的人类临床试验，包含首次人类试验、剂量范围试验和功效试验。[0730]本文提供了可用于例如治疗malt1相关性疾病或病症(如癌症)的药物试剂盒，所述药物试剂盒包含一个或多个容器，所述一个或多个容器含有包括有效量的本文提供的化合物的药物组合物。如将对本领域的技术人员显而易见的是，如果需要，此类试剂盒可以进一步包含各种常规药物试剂盒组分中的一个或多个，如例如具有一种或多种药学上可接受的载体的容器、另外的容器等。试剂盒中还可以包含指示待施用的组分的量的说明书(作为插入物或作为标签)、施用指南和/或用于混合组分的指南。[0731]实例[0732]材料与方法[0733]本文提供的化合物(包含其盐)可以使用已知的有机合成技术制备并且可以根据多种可能的合成途径中的任一种途径合成。[0734]用于制备本文提供的化合物的反应可以在合适的溶剂中进行，所述合适的溶剂可以由有机合成领域中的技术人员容易地选择。合适的溶剂可以在进行反应的温度(例如，范围可以为从溶剂的冻结温度到溶剂的沸腾温度的温度)下与起始材料(反应物)、中间体或产物基本上无反应性。给定的反应可以在一种溶剂或多于一种溶剂的混合物中进行。取决于特定的反应步骤，特定反应步骤的合适溶剂可以由技术人员选择。[0735]本文提供的化合物的制备可以涉及各种化学基团的保护和脱保护。保护和脱保护的需要以及适当的保护基团的选择可以由本领域技术人员容易地确定。保护基团的化学可以在例如以下文献中找到：《保护基团化学(protectinggroupchemistry)》,第1版,牛津大学出版社(oxforduniversitypress),2000；《玛奇高等有机化学：反应、机理和结构(march'sadvancedorganicchemistry:reactions,mechanisms,andstructure)》,第5版,威利国际科学出版公司(wiley-interscience),2001；以及peturssion,s.等人,“碳水化合物化学中的保护基团(protectinggroupsincarbohydratechemistry)”,《化学教育杂志(j.chem.educ.)》,74(11),1297(1997)。[0736]对水分或空气敏感的反应在氮气或氩气下使用无水溶剂和试剂进行。通过通常用sanpont预涂tlc板、硅胶gf-254、层厚0.25mm进行的分析薄层色谱(tlc)或液相色谱-质谱(lc-ms)确定反应进程。[0737]通常，所使用的分析型lc-ms系统由shimadzulcms-2020组成，带正离子检测模式的电喷雾电离，配备有20adxr泵、sil-20acxr自动进样器、cto-20ac柱温箱、m20apda检测器和lcms2020ms检测器。色谱柱通常是haloac1830*5.0mm，2.7μm。流动相a是含有0.05％tfa的水，并且流动相b是含有0.05％tfa的乙腈。梯度是在2.0分钟内从5％流动相b到100％，保持0.7分钟，然后在0.05分钟内恢复到5％流动相b，并保持0.25分钟。柱温箱(cto-20ac)在40.0℃的温度下运行。流速为1.5毫升/分钟，并且注射体积为1μl。pda(spd-m20a)检测范围为190-400nm。ms检测器，其配置有电喷雾电离作为可电离源；采集模式：扫描；雾化气体流量：1.5升/分钟；干燥气体流量：15升/分钟；检测器电压：调谐电压±0.2kv；dl温度：250℃；加热块温度：250℃；扫描范围：90.00-900.00m/z。elsd(alltech3300)检测器参数：漂移管温度：60±5℃；n2流速：1.8±0.2升/分钟。流动相梯度针对单个化合物进行了优化。[0738]gc-ms系统通常使用带有fid和ms检测器的shimadzugcms-qp2010ultra进行。采集模式的ms检测器：开始时间：2.00分钟；结束时间：9.00分钟；acq模式：扫描；事件时间：0.30秒；扫描速度：2000；开始m/z：50.00；结束m/z：550.00；离子源温度：200.00℃；接口温度：250.00℃；溶剂切割时间：2.00分钟。[0739]制备型hplc纯化法通常使用配备有2489uv检测器的watersauto纯化系统(2545-2767)进行。色谱柱为watersc18，19x150mm，5μm。流动相由乙腈(5-95％)在含有0.1％fa的水中的混合物组成。流速保持在25毫升/分钟，注射体积为1200μl，并且uv检测器使用254nm和220nm两个通道。流动相梯度针对单个化合物进行了优化。[0740]在以下之一上进行手性分析色谱法：chiralpakas、ad、chiralcelod、ojchiralpakia、ib、ic、id、ie、if、ig、ih柱(大赛璐化学工业株式会社(daicelchemicalindustries,ltd.))；(r,r)-whelk-o1、(s,s)-whelk-o1色谱柱(瑞吉斯技术公司(registechnologies,inc.))；chiralcellulose-sb、sc、sa色谱柱(ymcco.,ltd.)，在不同色谱柱尺寸(50x4.6mm、100x4.6mm、150x4.6mm、250x4.6mm、50x3.0mm、100x3.0mm)下，其中己烷中的乙醇(％et/hex)或己烷中的异丙醇(％ipa/hex)的标注百分比作为等度溶剂系统。[0741]使用微波照射进行的反应通常使用由biotage制造的initiator进行。在旋转蒸发仪上减压浓缩溶液。快速柱色谱法通常使用biotage快速色谱法设备(dyaxcorp.)在硅胶(40-60μm，孔径)上在所述尺寸的预装盒中进行。除非另有说明，否则1hnmr光谱在dmso-d6溶液中以400mhz光谱仪获得。化学位移以百万分率(ppm)为单位报告。在dmso-d6溶液中使用四甲基硅烷(tms)作为内参，并且在cd3od溶液中使用残留的ch3oh峰或tms作为内参。耦合常数(j)以赫兹(hz)为单位报告。手性分析色谱法在chiralpakas、chiralpakad、chiralcelod、chiralcelia或chiralceloj色谱柱(250x4.6mm)(大赛璐化学工业株式会社)之一上进行，其中己烷中的乙醇(％et/hex)或庚烷中的异丙醇(％ipa/hep)的标注百分比作为等度溶剂系统。在以下之一上进行手性制备色谱法：chiralpakas、ad、chiralcelod、oj、chiralpakia、ib、ic、id、ie、if、ig、ih柱(大赛璐化学工业株式会社)；(r,r)-whelk-o1、(s,s)-whelk-o1色谱柱(瑞吉斯技术公司(registechnologies,inc.))；chiralcellulose-sb、sc、sa色谱柱(ymcco.,ltd.)，在不同色谱柱尺寸(250x20mm、250x30mm、250x50mm)下，其中在手性分析色谱上鉴定出期望的等度溶剂系统。[0742]本文使用的缩写包含：-c(o)ch3(ac)；乙酸(acoh)；-oc(o)ch3(oac)；水溶液(aq)；cbz(苄氧羰基)；n,n-二异丙基乙胺(diea)；n；n-二甲基甲酰胺(dmf)；1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺(edci)；乙酸乙酯(etoac)；二乙醚(乙醚或et2o)；石油醚(pe)；克(g)；小时(h或hr)；2-丙醇(ipa)；质谱(ms或ms)；微升(μl)；毫克(mg)；毫升(ml)；毫摩尔(mmol)；分钟(min)；甲基叔丁基醚(mtbe)；六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基磷酯(pybop)；保留时间(rt)；室温(rt或rt)；饱和氯化钠水溶液(盐水)；三氟乙酸(tfa)；四氢呋喃(thf)；快速色谱法(fc)；液相色谱法(lc)；液相色谱-质谱法(lcms或lc-ms)；超临界流体色谱法(sfc)；叔丁氧羰基(boc或boc)；二乙氨基三氟化硫(dast)；二氯甲烷(dcm)；二甲基乙酰胺(dma或dmac)；二甲亚砜(dmso)；甲苯(tol)；1,3-双(二苯基膦基)丙烷(dppp)；乙酸(hoac)；3-氯过氧苯甲酸(m-cpba)；甲基(me)；甲醇(meoh)；氯氧化二氧铬；吡啶-1-鎓(pcc)；n-溴代琥珀酰胺(nbs)；薄层色谱法(tlc)。[0743]以下是用于制备以下实例中使用的化合物的代表性程序，或者其可以替代以下实例中使用的可能无法商购的化合物。[0744]方法a1[0745][0746]步骤1：3-氯-5-硝基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶[0747][0748]将2,3-二氯-5-硝基吡啶(22.8g，118.2mmol，1.0当量)、ch3cn(250ml)、2h-1,2,3-三唑(9.0g，130.0mmol，1.1当量)和k2co3(21.2g，153.6mmol，1.3当量)放入500ml烧瓶中。将所得混合物在40℃下搅拌15小时。使混合物冷却至25℃。将混合物倒入300mletoac中。将有机层用h2o(2x300ml)和盐水(300ml)洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩。向残留物中加入ch2cl2(50ml)。将所得混合物过滤。将滤饼用ch2cl2(2x10ml)洗涤并干燥，以得到呈灰白色固体的3-氯-5-硝基-2-(1,2,3-三唑-2-基)吡啶(6.8g，26％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.39(d,j＝2.4hz,1h),8.14(d,j＝2.4hz,1h),8.33(s,2h)。lc-ms:m/z226[m+h]+。[0749]步骤2：5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺[0750][0751]将3-氯-5-硝基-2-(1,2,3-三唑-2-基)吡啶(6.6g，29.3mmol，1.0当量)和etoh(200ml)放入1.0l烧瓶中。在0℃下加入hcl(50ml)。然后在0℃下分份加入二水合sncl2(33.0g，146.3mmol，5.0当量)。将所得混合物在25℃下搅拌15小时。将混合物在减压下浓缩，并将残留物溶解在水(300ml)中。用3nnaoh将混合物碱化至ph9。用etoac(2x400ml)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(500ml)洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩，以得到呈灰白色固体的5-氯-6-(1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(5.4g，94％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.05(s,2h),7.83(d,j＝2.5hz,1h),7.21(d,j＝2.5hz,1h),6.19(s,2h)。lc-ms:m/z196[m+h]+。[0752]方法b1[0753][0754]实例1：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8,8-二甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[0755]步骤1：3,3-二甲基丁烷-1,2,4-三醇[0756][0757]将泛酸内酯(26.0g，199.8mmol，1.0当量)和meoh(800ml)放入2.0l三颈烧瓶中。在0℃下分份加入nabh4(18.9g，499.5mmol，2.5当量)。将所得混合物在25℃下搅拌4小时。用1nhcl将混合物酸化至ph7。将所得混合物在减压下浓缩。加入meoh(200ml)，并滤出固体。将滤液在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用ch2cl2/meoh(10:1)洗脱，以得到呈黄色油状物的3,3-二甲基丁烷-1,2,4-三醇(21.0g，78％产率)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:4.36(s,3h),3.70-3.30(m,5h),0.87-0.83(m,6h)。[0758]步骤2：二甲磺酸3-羟基-2,2-二甲基丁烷-1,4-二基酯[0759][0760]将3,3-二甲基丁烷-1,2,4-三醇(21.0g，156.5mmol，1.0当量)和吡啶(150ml)放入500ml三颈烧瓶中。在0℃下逐滴加入甲磺酰氯(35.9g，312.9mmol，2.0当量)。将所得混合物在25℃下搅拌18小时。物将混合物倒入dcm(200ml)中。用2nhcl将混合物酸化至ph2。用ch2cl2(3x300ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水na2so4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用ch2cl2/meoh(25:1)洗脱，以得到呈红色油状物的甲磺酸2-羟基-4-(甲磺酰氧基)-3,3-二甲基丁基酯(17.4g，38％产率)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:4.35-4.31(m,1h),4.19-4.11(m,2h),3.88(d,j＝9.4hz,1h),3.81-3.78(m,1h),3.05(s,3h),3.02(s,3h),1.02(s,3h),0.94(s,3h)。lc-ms:m/z291(m+h)+。[0761]步骤3：1-苄基-4,4-二甲基吡咯烷-3-醇[0762][0763]将甲磺酸2-羟基-4-(甲磺酰氧基)-3,3-二甲基丁基酯(15.0g，51.6mmol，1.0当量)、etoh(70ml)和苄胺(16.6g，154.9mmol，3.0当量)放入150ml压力罐反应器中。将所得混合物在120℃下搅拌18小时。使混合物冷却至25℃并在真空下浓缩。加入et2o(500ml)，并滤出固体。将滤液在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用ch2cl2/meoh(30:1)洗脱，以得到呈红色油状物的1-苄基-4,4-二甲基吡咯烷-3-醇(5.5g，52％产率)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.32-7.22(m,5h),3.75-3.73(m,1h),3.62(s,2h),2.95-2.91(m,1h),2.59-2.52(m,2h),2.31-2.24(m,2h),1.06(s,6h)。lc-ms:m/z206(m+h)+。[0764]步骤4：4,4-二甲基吡咯烷-3-醇盐酸盐[0765][0766]将1-苄基-4,4-二甲基吡咯烷-3-醇(5.6g，27.4mmol，1.0当量)、etoh(140ml)、1nhcl(30ml)和pd/c(500mg)放入500ml烧瓶中。将所得混合物在氢气气氛下在25℃下搅拌18小时。将所得混合物过滤。将滤液在减压下浓缩，以得到呈淡黄色固体的4,4-二甲基吡咯烷-3-醇盐酸盐(4.0g，96％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:3.79-3.77(m,1h),3.47-3.35(m,1h),3.00-2.86(m,3h),1.00(s,3h),0.97(s,3h)。lc-ms:m/z116(m+h)+。[0767]步骤5：4-羟基-3,3-二甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[0768][0769]将4,4-二甲基吡咯烷-3-醇盐酸盐(4.0g，26.3mmol，1.0当量)、thf(100ml)、(boc)2o(8.6g，39.5mmol，1.5当量)和tea(13.4g，131.9mmol，5.0当量)放入500ml烧瓶中。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用ch2cl2/meoh(20:1)洗脱，以得到呈黄色油状物的4-羟基-3,3-二甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5.5g，96％产率)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:3.94-3.79(m,1h),3.74-3.64(m,1h),3.34-3.06(m,3h),1.46(s,9h),1.07(s,3h),1.02(s,3h)。lc-ms:m/z216(m+h)+。[0770]步骤6：3,3-二甲基-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[0771][0772]将4-羟基-3,3-二甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5.0g，23.2mmol，1.0当量)、acn(60ml)、n-甲基吗啉n-氧化物(3.5g，30.2mmol，1.3当量)和tpap(408mg，1.2mmol，0.05当量)放入250ml烧瓶中。将所得混合物在25℃下搅拌1.5小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用pe/etoac(8:1)洗脱，以得到呈无色油状物的3,3-二甲基-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.4g，68％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:3.80(s,2h),3.45(s,2h),1.43(s,9h),1.06(s,6h)。lc-ms:m/z214(m+h)+。基)-8,8-二甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(22.2mg，6％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.50(s,1h),9.28(s,1h),8.78(d,j＝2.0hz,1h),8.54(d,j＝2.4hz,1h)，8.18(s,2h),6.94(s,1h),4.19(s,2h),1.69(s,6h)。lc-ms:m/z444(m+h)+。[0782]方法c1[0783][0784]实例2：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[0785]步骤1：(e)-(((3,3,3-三氟丙-1-烯-1-基)氧基)甲基)苯[0786][0787]向150ml压力罐反应器中加入苯基甲醇(37.3g，344.8mmol)、h2o(6.2g，344.8mmol)和氢氧化钾(19.4g，344.8mmol)。在-20℃下加入(e)-1-氯-3,3,3-三氟-丙-1-烯(22.5g，172.4mmol)。将混合物在22℃下搅拌1小时，然后在70℃下再搅拌12.0小时。将混合物冷却至25℃。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用etoac/己烷(1/25)洗脱，以得到呈无色液体的(e)-(((3,3,3-三氟丙-1-烯-1-基)氧基)甲基)苯(11.5g，29％产率)。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:7.49-7.35(m,5h),7.22-7.13(m,1h),5.19-5.04(m,1h),4.86(s,2h)。[0788]步骤2：1-苄基-3-(苄氧基)-4-(三氟甲基)吡咯烷[0789][0790]将(e)-(((3,3,3-三氟丙-1-烯-1-基)氧基)甲基)苯(8.9g，44.1mmol)和n-(甲氧基甲基)-1-苯基-n-(三甲基甲硅烷基甲基)甲胺(15.7g，66.2mmol)放入250ml三颈烧瓶中，然后在0℃下逐滴加入2,2,2-三氟乙酸(503mg，4.4mmol)。将混合物在25℃下搅拌5小时并倒入150ml的nahco3(aq)中。用3x150ml的etoac萃取所得溶液。将有机层合并，干燥，并在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用etoac/己烷(1/20)洗脱，以得到呈无色液体的1-苄基-3-苄氧基-4-(三氟甲基)吡咯烷(5.0g，30％产率)。lc-ms:m/z336(m+h)+。[0791]步骤3：3-羟基-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯5-胺(316mg，2.7mmol)、甲苯(10ml)和acoh(1ml)放入100ml烧瓶中。将混合物在95℃下搅拌15小时。将反应混合物冷却至25℃，并在真空下浓缩。然后加入20ml的nahco3(aq)。用3x20ml的etoac萃取所得溶液。将有机层合并，干燥，并在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用etoac/己烷(1/20)洗脱，以得到呈黄色油状物的2-氯-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(200mg，18％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.83-8.79(m,1h),7.06(s,1h),4.37-4.20(m,2h),4.07-3.99(m,1h),1.47(s,9h)。lc-ms:m/z363(m+h)+。[0803]步骤7：2-氯-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[0804][0805]将2-氯-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(170mg，0.5mmol)、dcm(8ml)和tfa(2ml)放入100ml烧瓶中。将混合物在25℃下搅拌1小时并在真空下浓缩。然后加入30ml的nahco3(aq)。用3x40ml的dcm萃取所得溶液。将有机层合并，干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过用meoh/dcm(1/35)展开的薄层色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-氯-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(75mg，55％产率)。lc-ms:m/z263(m+h)+。[0806]步骤8：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[0807][0808]将5-氯-6-(三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；67mg，0.3mmol)、thf(8ml)、碳酸双(三氯甲基)酯(51mg，0.2mmol)和n,n-二乙基乙胺(43mg，0.4mmol)放入40ml小瓶中。将混合物在25℃下搅拌0.5小时。将固体滤出。然后将2-氯-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(75mg，0.29mmol)和n,n-二乙基乙胺(115mg，1.2mmol)加入滤液中。将混合物在25℃下搅拌15.0小时并在真空下浓缩。将残留物施加到硅胶柱上并用meoh/dcm(1/35)洗脱，以得到101mg粗物质。然后使用制备型hplc对粗物质进行纯化。将收集的级分冻干，以得到呈淡黄色固体的2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(53.8mg，38％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.72(s,1h),9.33(s,1h),8.77(d,j＝2.4hz,1h),8.52(d,j＝2.4hz,1h),8.18(s,2h),7.08(s,1h),5.49-5.26(m,1h),4.77-4.72(m,1h),4.62-4.58(m,1h)。lc-ms:m/z484(m+h)+。[0809]方法d1[0810][0811]实例3和4：由含有(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-环丙基-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-环丙基-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[0812]步骤1：3-环丙基-4-羟基吡咯烷-1-甲酸苄酯[0813][0814]在-30℃下，向6-氧杂-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸苄酯(1.2g，5.4mmol)于thf(20ml)中的搅拌溶液中逐滴加入环丙基溴化镁(0.5m，32.4ml)。将所得混合物在-15℃下搅拌1小时。将溶液用nh4cl(150ml)淬灭并用etoac(3x50ml)萃取。将合并的有机层在减压下浓缩。将残留物通过硅胶柱色谱法纯化(用0-100％etoac/己烷洗脱)，以得到呈淡黄色油状物的3-环丙基-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸苄酯(1.0g，70％产率)。1hnmr(300mhz,cdcl3):7.29-7.58(m,5h),5.06(s,2h),4.25-4.29(m,1h),3.52-3.80(m,1h),3.35-3.48(m,2h),1.43-1.51(m,1h),0.11-0.66(m,5h)。lc-ms:m/z262[m+h]+。[0815]步骤2：3-环丙基-4-氧代-吡咯烷-1-甲酸苄酯[0816][0817]向3-环丙基-4-羟基-吡咯烷-1-甲酸苄酯(0.95g，3.64mmol)于dcm(100ml)中的搅拌混合物中加入氯铬酸吡啶鎓(pcc)(165.3mg，766.7μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将固体滤出，并用dcm(3x50ml)洗涤。在减压下浓缩滤液。将残留物通过硅胶柱色谱法8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸苄酯(0.2g，24％产率)。1hnmr(300mhz,cdcl3):9.22(s,1h),7.32-7.53(m,5h),6.67(s,1h),5.18(s,2h),3.58-3.73(m,1h),1.07-1.35(m,4h),0.22-0.64(m,4h)。lc-ms:m/z383[m+h]+。[0827]步骤6：2-氯-8-环丙基-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[0828][0829]将2-氯-8-环丙基-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸苄酯(0.1g，261.2μmol)于hbr/acoh(1ml，13.6μmol)中的溶液在25℃下搅拌3小时。将混合物在真空中浓缩以得到粗产物。将残留物用etoac(30ml)稀释，用饱和碳酸氢钠(3x20ml)、盐水(2x20ml)和水(20ml)洗涤。将有机层经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残留物通过硅胶柱色谱法纯化(用0-100％etoac/己烷洗脱)，以得到呈棕色油状物的2-氯-8-环丙基-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[0830](0.02g，31％产率)。1hnmr(300mhz,cdcl3):8.37(s,1h),6.65(s,1h),3.38-3.41(m,1h),1.68-1.55(m,4h),0.44-0.84(m,4h)。lc-ms:m/z249[m+h]+。[0831]步骤7：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-环丙基-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[0832][0833]在0℃下，向5-氯-6-(三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；40.0mg，204.5μmol)和碳酸双(三氯甲基)酯(42.5mg，143.2μmol)于thf(1ml)中的搅拌混合物中逐滴加入tea(62.1mg，613.5μmol，85.5μl)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时并过滤。将滤液加入到2-氯-8-环丙基-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(25.4mg，102.2μmol)于thf(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(12.5mg，102.2μmol)，并在25℃下搅拌16小时。将残留物用etoac(300ml)稀释，用盐水(2x10ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并在减压下浓缩。将残留物首先通过硅胶柱色谱法纯化(用0-100％etoac/己烷洗脱)，然后通过制备型hplc纯化，以得到呈外消旋混合物的2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-环丙基-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(3.7mg，8％产率)。lc-ms:m/z470[m+h]+。[0834]步骤8：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-环丙基-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-环丙基-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺。[0835][0836]将2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-环丙基-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(50.0mg，106.1μmol)的外消旋混合物通过chiral-hplc纯化(色谱柱：chiralartcellulose-sb，2*25cm，5um；流动相a：hex:dcm＝3:1(10mmnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；等度20％b；254/220nm；rt1:12.586；rt2:15.434；注射体积：0.6ml；运行次数：5)。将第一个洗脱异构体浓缩、冻干并通过制备型hplc再纯化，以得到实例3(14.1mg，37％)。将第二个洗脱异构体浓缩、冻干并通过制备型hplc再纯化，以得到实例4(12.8mg，34％)。[0837]实例3：1hnmr(300mhz,cdcl3):9.38(s,1h),8.61(s,1h),8.41(s,1h),8.00(s,2h),6.75(s,2h),3.77-3.84(m,2h),1.81-1.82(m,4h),0.73-0.76(m,1h),0.69-0.71(m,2h),0.58-0.61(m,1h)。lc-ms:m/z470[m+h]+。[0838]实例4：1hnmr(300mhz,cdcl3):9.34(s,1h),8.64(s,1h),8.42(s,1h),8.00(s,2h),6.70(s,2h),3.78-3.84(m,2h),1.81-1.82(m,4h),0.86-0.91(m,1h),0.74-0.78(m,2h),0.72-0.73(m,1h)。lc-ms:m/z470[m+h]+。[0839]方法e1[0840][0841]实例5和6：由含有(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9-甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺和(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9-甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[0842]步骤1：4-甲基-3-氧代哌啶-1,4-二甲酸1-(叔丁基)酯4-乙酯[0843][0844]在氮气下在室温下，向3-氧代哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-乙酯(20g，73mmol，1当量)和k2co3(20.4g，146mmol，2当量)于丙酮(100ml)中的搅拌溶液中加入mei(20.9g，146mmol，2当量)。将所得混合物在氮气下在50℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。将所得混合物过滤，并将滤饼用etoac(3x50ml)洗涤。在减压下浓缩滤液。向残留物中加入水(300ml)，并将所得混合物用etoac(3x200ml)萃取。将合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩，以得到呈黄色液体的4-甲基-3-氧代哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-乙酯(20g，91％)。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:4.08-4.18(m,2h),3.46-3.63(s,2h),2.54-2.62(m,2h),1.71(s,1h),1.61(s,1h),1.47(s,9h),1.36(s,3h),1.19-1.34(m,3h)。lc-ms:m/z286[m+h]+。[0845]步骤2：4-甲基哌啶-3-酮[0846][0847]将4-甲基-3-氧代哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-乙酯(6g，21mmol，1当量)于hcl(60ml)中的溶液在100℃下搅拌16小时。使混合物冷却至室温。将所得混合物在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的4-甲基哌啶-3-酮盐酸盐(6g，粗品)。lc-ms:m/z114[m+h]+。[0848]步骤3：4-甲基-3-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯[0849][0850]在室温下，向4-甲基哌啶-3-酮盐酸盐(6g，40mmol，1当量)和tea(12.2g，120mmol，3当量)于thf(100ml)中的搅拌溶液中分份加入boc2o(26.3g，120mmol，3当量)。将所得混合物在室温下搅拌16小时。通过加入水(200ml)来淬灭反应。用etoac(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，并经无水na2so4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残留物通过硅胶柱色谱法纯化(用ch2cl2/pe(10:1)洗脱)，以得到呈黄色液体的4-甲基-3-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.7g，55％)。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:4.07-4.11(m,2h),3.33-3.48(m,2h),2.42-2.47(m,1h),1.60-1.74(m,2h),1.51-1.65(m,1h),1.36(s,3h),1.15(d,j＝6.9hz,6h)。lc-ms:m/z214[m+h]+。[0851]步骤4：(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯[0852][0853]将4-甲基-3-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，9.4mmol，1.0当量)于dmf-dma(10ml)中的溶液在100℃下搅拌4小时。使混合物冷却至25℃。将所得混合物在减压下浓缩，以得到呈黄色油状物的(2e)-2-[(二甲基氨基)亚甲基]-4-甲基-3-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2g，79％)。lc-ms:m/z269[m+h]+。[0854]步骤5：2-氯-9-甲基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶[0855][0856]在25℃下，向(2e)-2-[(二甲基氨基)亚甲基]-4-甲基-3-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(2.0g，7.4mmol，1.0当量)于etoh(20ml)中的搅拌溶液中加入5-氯-1h-吡唑-3-胺(0.9g，7.4mmol，1.0当量)和hcl，于1,4-二噁烷(10ml)中。将所得混合物在80℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。将所得混合物在减压下浓缩。加入饱和nahco3溶液(100ml)，并用etoac(3x100ml)萃取混合物。将合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤，并在减压下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用pe/etoac(1:1)洗脱，以得到呈黄色油状物的2-氯-9-甲基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶(260mg，15％)。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:8.18(s,1h),6.64(s,1h),6.02(s,1h),3.37-3.47(m,1h),3.10-3.27(m,1h),1.73-2.03(m,2h),1.35(d,j＝6.9hz,3h)。lc-ms:m/z223[m+h]+。[0857]步骤6：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9-甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺[0858][0859]在0℃下，向5-氯-6-(1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；242.4mg，1.2mmol，1.2当量)和tea(125.4mg，1.2mmol，1.2当量)于thf(20ml)中的搅拌溶液中加入三光气(122.6mg，0.4mmol，0.4当量)。将所得混合物在25℃下搅拌30分钟。将固体滤出，并向滤液中加入2-氯-9-甲基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶(230mg，1.0mmol，1.0当量)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物倒入到水(50ml)中并用etoac(3x50ml)萃取。将合并的有机层经无水na2so4干燥，过滤，并在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化。将收集的级分冻干，以得到呈外消旋混合物的16mg2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9-甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺(3％产率)。lc-ms:m/z444[m+h]+。[0860]步骤7：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9-甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺和(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9-甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺[0861][0862]对100mg2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9-甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺进行chiral-hplc纯化(色谱柱：chiralartcellulose-sb，2*25cm，5um；流动相a：hex:dcm＝3:1(10mmnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；等度20％b；254/220nm；rt1:12.586；rt2:15.434；注射体积：0.6ml；运行次数：5)，以得到第一个洗脱异构体实例5(46mg，10％产率)和第二个洗脱异构体实例6(45mg，9％产率)。[0863]实例5：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.99(s,1h),8.82(s,1h),8.64(d,j＝2.1hz,1h),8.39(d,j＝2.1hz,1h),8.17(s,2h),6.90(s,1h),3.98-4.05(m,1h),3.82-3.85(m,1h),3.55-3.61(m,1h),2.20-2.25(m,1h),1.91-1.94(m,1h),1.47(d,j＝6.9hz,3h)。lc-ms:m/z444[m+h]+。[0864]实例6：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.99(s,1h),8.82(s,1h),8.64(d,j＝2.1hz,1h),8.39(d,j＝2.1hz,1h),8.17(s,2h),6.90(s,1h),3.98-4.05(m,1h),3.82-3.85(m,1h),3.55-3.61(m,1h),2.20-2.25(m,1h),1.91-1.94(m,1h),1.47(d,j＝6.9hz,3h)。lc-ms:444[m+h]+。[0865]方法f1[0866][0867]实例7：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺[0868]步骤1：(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4,4-二甲基-3-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯[0869][0870]将4,4-二甲基-3-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.0g，22.0mmol)于1,1-二甲氧基-n,n-二甲基-甲胺(20ml)中的溶液在氮气气氛下在100℃下搅拌3小时。使混合物冷却至25℃。将所得混合物在真空下浓缩，以得到呈棕色油状物的产物(2e)-2-(二甲基氨基亚甲基-4,4-二甲基-3-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁酯(5.0g，80％产率)。将粗产物在不进一步纯化的情况下直接用于下一步骤。lc-ms:m/z283[m+h]+。[0871]步骤2：2-氯-9,9-二甲基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶[0872][0873]将5-氯-1h-吡唑-3-胺(83.2mg，708.3μmol)和(2e)-2-(二甲基氨基亚甲基)-4,4-二甲基-3-氧代-哌啶-1-甲酸叔丁酯(200mg，708.3μmol)于acoh(4ml)中的溶液在氮气气氛下在80℃下搅拌3小时。使混合物冷却至25℃并在真空下浓缩。加入tfa(0.5ml)和dcm(2.5ml)。将所得混合物在25℃下再搅拌1小时。将所得混合物在真空下浓缩并通过硅胶柱色谱法纯化(用0-50％乙酸乙酯/己烷洗脱)，以得到呈淡黄色油状物的2-氯-9,9-二甲基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶(80mg，48％产率)。lc-ms:m/z237[m+h]+。[0874]步骤3：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺[0875][0876]在25℃下，向5-氯-6-(三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；69mg，354.9μmol)于thf(6ml)中的搅拌溶液中分份加入碳酸双(三氯甲基)酯(52mg，177.4μmol)和n,n-二乙基乙胺(38mg，384.4μmol，53.6μl)。将所得混合物在25℃下搅拌30分钟。将固体滤出。向滤液中分份加入2-氯-9,9-二甲基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶(70mg，295.7μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌过夜。加入水(50ml)，并用3x50ml的dcm萃取混合物。将有机层合并，用盐水洗涤，干燥，并在真空下浓缩。通过制备型hplc纯化粗产物(70mg)，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺(25mg，18％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.97(s,1h),8.73(s,1h),8.63(d,j＝2.4hz,1h),8.40(d,j＝2.4hz,1h),8.17(s,2h),6.90(s,1h),3.88-3.90(m,2h),2.08(s,1h),1.98-2.00(m,2h),1.65(s,6h)。lc-ms:m/z458[m+h]+。[0877]实例8：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺[0878][0879]根据方法f1在步骤2中使用的5-甲基-1h-吡唑-3-胺制备标题化合物(46mg，22％产率)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:8.60(d,j＝2.4hz,1h),8.54(s,1h),8.44(d,j＝2.4hz,1h),8.03(s,2h),6.46(d,j＝0.6hz,1h),3.94-3.97(m,2h),2.51(s,3h),2.07(dt,j＝8.4,2.8hz,2h),1.77(s,6h)。lc-ms:m/z438[m+h]+。[0880]方法g1[0881][0882]实例9：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a][1,5]萘啶-6(7h)-甲酰胺[0883]步骤1：2-(5-溴吡啶-2-基)乙腈[0884][0885]在2000-ml圆底烧瓶中，在n2气氛下，在0℃下，向双(三甲基甲硅烷基)氮胺钾(1m，852.3ml)溶液中逐滴加入乙腈(17.5g，426.2mmol，22.3ml)。将反应混合物在0℃下搅拌30分钟。逐滴加入5-溴-2-氟-吡啶(15g，85.2mmol，8.8ml)于thf(10ml)中的溶液，并将混合物再搅拌2小时。将反应混合物用h2o/饱和nh4cl(1000ml)淬灭，并用etoac(2x1500ml)萃取。将合并的有机提取物用盐水(1000ml)洗涤，经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过快速柱色谱法纯化(用0-50％etoac/己烷洗脱)，以得到呈无色油状物的2-(5-溴吡啶-2-基)乙腈(6g，30.4mmol)。lc-ms:m/z197[m+h]+。[0886]步骤2：6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-2-胺[0887][0888]在n2下在0℃下，向(1e)-n-(2,4,6-三甲基苯基)磺酰氧基亚氨酰乙酸乙酯(13.0g，45.7mmol)于1,4-二噁烷(26ml)中的搅拌溶液中逐滴加入高氯酸(8.7g，60.9mmol，70％纯度)。将所得混合物在氮气下在0℃下搅拌30分钟。在0℃下在3分钟内逐滴加入水(60ml)。过滤固体并将滤饼溶解在dcm(240ml)中，并将所得溶液经无水硫酸钠干燥，以得到澄清溶液。然后将该溶液在n2下在0℃下经30分钟逐滴加入到2-(5-溴-2-吡啶基)乙腈(6g，30.4mmol)于dcm(240ml)中的搅拌溶液中。将所得混合物在氮气下在25℃下搅拌60分钟。将其在真空下浓缩并用meoh(160ml)稀释。在0℃下，向混合物中分份加入碳酸三钾(12.6g，91.4mmol，5.5ml)并将所得混合物在25℃下再搅拌2小时。所得溶液用250ml水稀释，并用etoac(3x250ml)萃取。将有机层合并，用盐水洗涤，干燥，并在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用etoac/pe(1/1)洗脱，以得到呈棕色固体的6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(2.8g，43％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ8.58(dt,j＝1.8,0.8hz,1h),7.24(dd,j＝9.2,0.8hz,1h),7.10(dd,j＝9.2,1.8hz,1h),5.69(d,j＝0.8hz,1h),5.40(s,2h)。lc-ms:m/z212[m+h]+。[0889]步骤3：6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-2-醇[0890][0891]将6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-2-胺(2.8g，13.20mmol)于h2so4(20ml，50％)中的溶液在氮气下在100℃下搅拌2小时。使混合物冷却至室温。将所得混合物在真空下浓缩。加入水(50ml)，并用dcm(3x50ml)萃取混合物。将有机层合并，用盐水洗涤，干燥，并在真空下浓缩，以得到呈棕色固体的6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-2-醇(2.5g，89％产率)。将粗产物在不进行进一步纯化的情况下直接用于下一步骤。lc-ms:213[m+h]+。[0892]步骤4：2-(苄氧基)-6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶[0893][0894]在室温下，向6-溴吡唑并[1,5-a]吡啶-2-醇(2.5g，11.7mmol)、碳酸钾(4.9g，35.2mmol)和碘化钠(1.8g，11.7mmol)于dmf(15ml)中的搅拌混合物中分份加入溴甲苯(2.0g，11.7mmol，1.4ml)。将所得混合物在90℃下搅拌16小时。使混合物冷却至室温，用150ml碳酸钠(水溶液)稀释并用etoac(3x150ml)萃取。将有机层合并，用盐水洗涤，干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过硅胶柱色谱法纯化(用dcm/meoh(10:1)洗脱)，以得到呈棕色固体的2-苄氧基-6-溴-吡唑并[1,5-a]吡啶(2.5g，70％产率)。lc-ms:m/z303[m+h]+。[0895]步骤5：n-(2-(苄氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-1,1-二苯基甲亚胺[0896][0897]向二苯基甲亚胺(1.8g，9.9mmol，1.7ml)和2-苄氧基-6-溴-吡唑并[1,5-a]吡啶(2.5g，8.2mmol)于甲苯(20ml)中的溶液中加入2-甲基丙烷-2-醇钠(1.6g，16.5mmol)、pd2(dba)3(755.2mg，824.7μmol)和苄基-[1-[2-[苄基(苯基)膦基]-1-萘基]-2-萘基]-苯基-膦(1.1g，1.6mmol)。在氮气下在120℃下搅拌4小时后，将所得混合物在减压下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用etoac/pe(1/5)洗脱，以得到呈棕色固体的n-(2-苄氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-1,1-二苯基-甲亚胺(2.4g，72％产率)。lc-ms:m/z404[m+h]+。[0898]步骤6：2-(苄氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-胺[0899][0900]将n-(2-苄氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-1,1-二苯基-甲亚胺(2.4g，6.0mmol)、hcl(2m，6.0ml)、thf(10ml)和meoh(10ml)的混合物在氮气下在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过硅胶柱色谱法纯化(dcm/meoh＝10:1)，以得到呈棕色油状物的2-苄氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-胺(1.1g，78％产率)。lc-ms:m/z240[m+h]+。[0901]步骤7：n-(2-(苄氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-4-甲基苯磺酰胺[0902][0903]将2-苄氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-胺(1.1g，4.8mmol)和4-甲基苯磺酰氯(999mg，5.2mmol)于吡啶(15ml)中的溶液在氮气下在室温下搅拌过夜。将所得混合物在真空下浓缩。向残留物中加入水(150ml)，并通过加入0.5mhcl将ph调整到7。用etoac(3x140ml)萃取混合物。将有机层合并，用盐水洗涤，干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过硅胶柱色谱法使用pe/ea(1:1)作为洗脱液进行纯化，以得到呈灰白色固体的n-(2-苄氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-4-甲基-苯磺酰胺(1.6g，85％产率)。lc-ms:m/z394[m+h]+。[0904]步骤8：n-(2-(苄氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-4-甲基-n-(3-甲基丁-3-烯-1-基)苯磺酰胺[0905][0906]在氮气下在0℃下，向3-甲基丁-3-烯-1-醇(385mg，4.5mmol)、三苯基膦(2.1g，8.1mmol)和n-(2-苄氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-4-甲基-苯磺酰胺(1.6g，4.0mmol)于thf(50ml)中的搅拌溶液中逐滴加入n-异丙氧基羰基亚氨基氨基甲酸异丙酯(2m，4.1ml)。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过硅胶柱色谱法使用pe/etoac(5:1)作为洗脱液进行纯化，以得到呈白色固体的n-(2-苄氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)-4-甲基-n-(3-甲基丁-3-烯基)苯磺酰胺(1.5g，80％产率)。lc-ms:m/z462[m+h]+。[0907]步骤9：2-(苄氧基)-9,9-二甲基-6-甲苯磺酰基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a][1,5]萘啶[0908][0909]在氮气下在室温下，向2-苄氧基-n-(3-甲基丁-3-烯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-胺(300mg，976.0μmol)和(z)-4-氧基戊-2-烯-2-醇铁(172mg，488.0μmol)于etoh(2ml)中的搅拌混合物中分份加入苯基硅烷(22mg，203.3μmol)、2-叔丁基过氧-2-甲基-丙烷(35mg，244.0μmol)和2,2,2-三氟乙酸(222mg，2.0mmol)，并将混合物在氮气下在60℃下搅拌过夜。将混合物在真空下浓缩，并将残留物通过硅胶柱色谱法使用pe/etoac(5:1)作为洗脱剂进行纯化，以得到呈淡黄色固体的2-(苄氧基)-9,9-二甲基-6-甲苯磺酰基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a][1,5]萘啶(150mg，33％产率)。lc-ms:m/z462[m+h]+。[0910]步骤10：9,9-二甲基-6-甲苯磺酰基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a][1,5]萘啶-2-醇[0911][0912]在氮气下在100ml圆底烧瓶中，向2-苄氧基-9,9-二甲基-6-甲苯磺酰基-7,8-四氢吡唑并[1,5-a][1,5]萘啶(300mg，649.9μmol)于meoh(20ml)中的溶液中加入pd/c(10％，38.5mg)。将混合物在氢气气氛下使用氢气球在室温下搅拌16小时，通过硅藻土垫过滤，并在减压下浓缩。将残留物干燥，以得到呈灰白色固体的9,9-二甲基-6-甲苯磺酰基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a][1,5]萘啶-2-醇(150mg，62％产率)。lc-ms:m/z372[m+h]+。[0913]步骤11：2-氯-9,9-二甲基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a][1,5]萘啶[0914][0915]在室温下，向4ml小瓶中加入9,9-二甲基-6-(对甲苯磺酰基)-7,8-二氢吡唑并[1,5-a][1,5]萘啶-2-醇(100mg，269.2μmol)和pocl3(0.8ml)。将所得混合物在氮气下在145℃下搅拌6小时。将反应混合物倒在50g碎冰上。用chcl3(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水洗涤，并经无水na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残留物通过硅胶柱色谱法使用ch2cl2/meoh(10:1)作为洗脱剂进行纯化，以得到呈棕色固体的2-氯-9,9-二甲基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a][1,5]萘啶(15mg，24％产率)。lc-ms:m/z236[m+h]+。[0916]步骤12：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a][1,5]萘啶-6(7h)-甲酰胺[0917][0918]在室温下，向5-氯-6-(三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；15.9mg，81.5μmol)于thf(3ml)中的搅拌溶液中分份加入碳酸双(三氯甲基)酯(12mg，40.7μmol)和n,n-二乙基乙胺(10mg，101.8μmol，14.2μl)。将所得混合物在室温下搅拌30分钟。将固体滤出。向滤液中分份加入2-氯-9,9-二甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a][1,5]萘啶(16mg，67.9μmol)，并将混合物在室温下搅拌过夜。加入水(20ml)，并用dcm(3x20ml)萃取所得混合物。将有机层合并，用盐水洗涤，干燥，并在真空下浓缩。通过制备型hplc纯化粗产物(20mg)，以得到呈白色固体的2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a][1,5]萘啶-6(7h)-甲酰胺(7.8mg，22％产率)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ8.55(d,j＝2.0hz,1h),8.39(d,j＝2.4hz,1h),8.00(s,2h),7.42(d,j＝9.6hz,1h),7.34(d,j＝9.6hz,1h),6.52(s,1h),3.88-3.91(m,2h),2.02-2.05(m,2h),1.70(d,j＝9.6,1h)。lc-ms:m/z457[m+h]+。[0919]方法h1[0920][0921]实例10：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺[0922]步骤1：4-(三氟甲基)哌啶-3-醇盐酸盐[0923][0924]向500ml压力罐反应器中加入meoh(300ml)中的4-(三氟甲基)吡啶-3-醇(9g，55.2mmol)。加入pto2(1.4g)和hcl(9ml)，并将反应混合物在氢气(30atm)下在50℃下搅拌48小时。将反应混合物冷却至室温，过滤并在真空下浓缩，以得到4-(三氟甲基)哌啶-3-醇盐酸盐(11g，粗品)。lc-ms:m/z170[m+h]+。[0925]步骤2：3-羟基-4-(三氟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯[0926][0927]向4-(三氟甲基)哌啶-3-醇盐酸盐(11g，53.5mmol)于dcm(200ml)中的溶液加入et3n(22g，214mmol，29.8ml)和boc2o(23.3g，107mmol，24.6ml)。将反应混合物在室温下搅拌16小时。真空去除溶剂，并将残留物施加到硅胶柱上并用etoac/pe(1:2)洗脱，以得到3-羟基-4-(三氟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(14g，41.6mmol，78％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:5.03(s,1h),3.88-4.01(m,4h),2.74-2.86(m,2h),1.74-1.87(m,2h),1.40(s,9h)。lc-ms:m/z270[m+h]+。[0928]步骤3：3-氧代-4-(三氟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯[0929][0930]向3-羟基-4-(三氟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(7g，26.0mmol)于dcm(200ml)中的溶液中加入pcc(56g，260.0mmol，79.1μl)和硅胶(10g)。将反应混合物在40℃下搅拌48小时。将固体滤出，并将滤液在真空下浓缩。将粗产物施加到硅胶柱上并用etoac/pe(1:3)洗脱，以得到3-氧代-4-(三氟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(800mg，2.4mmol，9％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6):δ4.07-4.19(m,3h),3.15-3.26(m,2h),2.04-2.11(m,2h),1.40(s,9h)。lc-ms:m/z268.0[m+h]+。[0931]步骤4：2-((二甲基氨基)亚甲基)-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[0932][0933]向3-氧代-4-(三氟甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.9mmol)于甲苯(15ml)中的溶液中加入dmf-dma(1.1g，9.4mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌1小时，并使其冷却至室温。将反应混合物浓缩，以得到2-((二甲基氨基)亚甲基)-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(500mg，粗品)。lc-ms:m/z323[m+h]+。[0934]步骤5：2-甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酸叔丁酯[0935][0936]向2-((二甲基氨基)亚甲基)-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(100mg，310.2μmol)于甲苯(5ml)中的溶液中加入3-甲基-1h-吡唑-5-胺(54mg，558.4μmol)和acoh(0.5ml)。将反应混合物在90℃下搅拌2小时。使混合物冷却至室温。将反应混合物在减压下浓缩。向残留物中加入水(50ml)，并用碳酸氢钠(饱和水溶液)将ph调整到6-7。用etoac(50mlx3)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物施加到硅胶柱上并用etoac/pe(1:3)洗脱，以得到2-甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酸叔丁酯(60mg，54％产率)。1hnmr(300mhz,cdcl3)δ:8.81(s,1h),6.52(s,1h),4.80-4.88(m,1h),3.74-3.86(m,2h),2.53(s,3h),2.00-2.13(m,2h),1.28(s,9h)。lc-ms:m/z357[m+h]+。[0937]步骤6：2-甲基-9-(三氟甲基)-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶[0938][0939]向2-甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酸叔丁酯(40mg，111.1μmol)于ch2cl2(2ml)中的溶液中加入tfa(0.5ml)。将反应在室温下搅拌1小时。去除溶剂后，向残留物中加入nahco3(30ml)并用ch2cl2(3x30ml)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸钠干燥并在真空中浓缩。将残留物通过快速色谱法etoac/pe(1:1)纯化，以得到呈黄色固体的2-甲基-9-(三氟甲基)-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶(8mg，28％产率)。lc-ms:m/z257.0[m+h]+。[0940]步骤7：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺[0941][0942]在室温下，向5-氯-6-(三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；7mg，37.5μmol)于thf(1ml)中的溶液中加入碳酸双(三氯甲基)酯(6mg，21.9μmol)和n,n-二乙基乙胺(9mg，93.7μmol，13.1μl)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟。将固体滤出。向滤液中加入2-甲基-9-(三氟甲基)-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶(8mg，31.2μmol)，并将反应将混合物在室温下搅拌16小时。加入水(50ml)，并用3x50ml的etoac萃取混合物。将有机层合并，干燥，并在真空下浓缩。通过hplc纯化残留物，以得到呈外消旋混合物的n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺(2.4mg，16％产率)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:8.76(s,1h),8.62-8.61(m,1h),8.44-8.45(m,1h),8.01(s,2h),6.56(s,1h),4.86-4.89(m,1h),4.06-4.12(m,1h),3.82-3.89(m,1h),2.65-2.73(m,1h),2.51(s,3h),2.42-2.49(m,1h)。lc-ms:m/z478[m+h]+。[0943]方法i1[0944][0945]实例11和12：由含有(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-羟基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺和(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-羟基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[0946]步骤1：1,5-二溴-3,3-二甲基戊烷-2,4-二酮[0947][0948]在10℃下，在1小时内将溴(12.5g，78.0mmol)于acoh(30ml)中的溶液加入到3,3-二甲基戊烷-2,4-二酮(5.0g，39.0mmol)于acoh(150ml)中的溶液中。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。加入acok(11.5g，117.0mmol)，然后加入150ml水，并用200ml叔丁基甲基醚萃取混合物。将合并的有机相用水(3x200ml)、饱和na2s2o3水溶液(2x200ml)和盐水(2x200ml)洗涤。将所得溶液经无水na2so4干燥，并在减压下去除所有挥发物，以得到呈棕色油状物的1,5-二溴-3,3-二甲基戊烷-2,4-二酮(7g，63％产率)。1hnmr(300mhz,cdcl3-d)δ4.14(s,4h),1.56(s,6h)。[0949]步骤2：1-苄基-4,4-二甲基哌啶-3,5-二酮[0950][0951]在-30℃下，向1,5-二溴-3,3-二甲基戊烷-2,4-二酮(1.0g，3.5mmol)和k2co3(966mg，7.0mmol)于acn(50ml)中的混合物中逐滴加入苯甲胺(300mg，2.8mmol，于2mlacn中)。将反应混合物在-30℃下搅拌30分钟，然后在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩。将残留物用水(100ml)猝灭并用etoac(3x100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2x200ml)洗涤，经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。粗产物通过反相hplc纯化。将收集的级分合并，并在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的1-苄基-4,4-二甲基哌啶-3,5-二酮(340mg，42％产率)。1hnmr(300mhz,cdcl3-d)δ7.29-7.40(m,5h),3.67(s,2h),3.35(s,4h),1.47(s,6h)；lc-ms:m/z232[m+h]+。[0952]步骤3：1-苄基-4,4-二甲基哌啶-3,5-二醇[0953][0954]分几份向1-苄基-4,4-二甲基哌啶-3,5-二酮(2.5g，10.8mmol)于meoh(50ml)中的溶液中加入nabh4(613mg，16.2mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物溶解在etoac(200ml)中。将混合物用水(3x150ml)洗涤，经无水na2so4干燥并浓缩，以得到呈黄色固体的1-苄基-4,4-二甲基哌啶-3,5-二醇(2.3g，90％产率)。lc-ms:m/z236[m+h]+。[0955]步骤4：1-苄基-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4,4-二甲基哌啶-3-醇[0956][0957]在0℃下，向1-苄基-4,4-二甲基哌啶-3,5-二醇(2.1g，8.9mmol)和2,6-二甲基吡啶(2.4g，22.3mmol)于dcm(100ml)中的混合物中逐滴加入三氟甲磺酸[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]酯(2.6g，9.8mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物浓缩。将残留物通过反相hplc纯化。将收集的级分合并，并在真空下浓缩，以得到呈淡黄色固体的1-苄基-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4,4-二甲基哌啶-3-醇(710mg，23％产率)。1hnmr(400mhz,cdcl3-d)δ7.32-7.39(m,5h),3.93-4.01(m,2h),7.75-3.78(m,1h),3.47-3.49(m,1h),2.89-2.98(m,2h),2.70-2.73(m,1h),2.29-2.35(m,1h),1.08(s,3h),0.85(s,9h),0.82(s,3h),0.05(s,3h),0.02(s,3h)。lc-ms:m/z350[m+h]+。[0958]步骤5：5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4,4-二甲基哌啶-3-醇[0959][0960]在25℃下，向1-苄基-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4,4-二甲基哌啶-3-醇(710mg，2.0mmol)于etoac(50ml)中的混合物中加入pd/c(10％，700mg)。将烧瓶抽空并用氮气冲洗三次，然后用氢气冲洗。将混合物在氢气(气球)气氛下在室温下搅拌15小时。滤出固体并将滤液浓缩，以得到呈黄色固体的5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4,4-二甲基哌啶-3-醇(600mg，粗品)。1hnmr(400mhz,cdcl3-d)δ3.55-3.59(m,1h),3.45-3.48(m,1h),2.94-2.99(m,1h),2.81-2.86(s,1h),2.54-2.71(m,2h),0.94(s,3h),0.93(s,3h),0.89(s,9h),0.06(s,3h),0.03(s,3h)；lc-ms:m/z260[m+h]+。[0961]步骤6：3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-羟基-4,4-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯[0962][0963]在25℃下，向5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4,4-二甲基哌啶-3-醇(600mg，2.3mmol)于thf(100ml)中的混合物中加入tea(1.2g，11.7mmol)和叔丁氧基羰基碳酸叔丁酯(763mg，3.5mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物浓缩。将残留物施加到硅胶柱上并用etoac/pe(1:2)洗脱，以得到呈白色固体的3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-羟基-4,4-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(640mg，88％产率，两步)。1hnmr(300mhz,cdcl3-d)δ3.59-3.70(m,4h),3.38-3.45(m,1h),3.00-3.06(m,1h),1.48(s,9h),1.03(s,3h),0.96(s,3h),0.92(s,9h),0.12(s,3h),0.09(s,3h)；lc-ms:m/z360[m+h]+。[0964]步骤7：3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4,4-二甲基-5-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯[0965][0966]在25℃下，向3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-5-羟基-4,4-二甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(650mg，1.8mmol)和tpap(32mg，90.4μmol)于acn(10ml)中的混合物中加入4-甲基-4-氧化-吗啉-4-鎓(275mg，2.4mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在减压下浓缩。将残留物施加到硅胶柱上并用etoac/pe(1:4)洗脱，以得到呈白色固体的3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4,4-二甲基-5-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(420mg，65％产率)。1hnmr(400mhz,cdcl3-d)δ4.16-4.25(m,1h),3.73-3.91(m,3h),3.50-3.53(m,1h),1.46(s,9h),1.26(s,3h),1.25(s,3h),0.86(s,9h),0.10(s,3h),0.06(s,3h)。lc-ms:m/z358[m+h]+。[0967]步骤8：(e)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4,4-二甲基-3-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯[0968][0969]将3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-4,4-二甲基-5-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(420mg，1.2mmol)于dmf-dma(10ml)中的混合物在100℃下搅拌1小时。冷却至25℃后，浓缩混合物，以得到呈黄色油状物的(e)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4,4-二甲基-3-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，粗品)。粗产物无需进一步纯化而用于下一步骤。lc-ms:m/z413[m+h]+。[0970]步骤9：8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氯-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酸叔丁酯[0971][0972]在25℃下，向(e)-5-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4,4-二甲基-3-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(500mg，1.2mmol)和5-氯-1h-吡唑-3-胺(142mg，1.2mmol)于甲苯(10ml)中的混合物中加入acoh(1ml)。将反应混合物在100℃下搅拌15小时。冷却至25℃后，将混合物在真空下浓缩。将残留物溶解在etoac(200ml)中。将混合物用饱和nahco3水溶液(3x150ml)洗涤，经无水na2so4干燥并浓缩。将残留物施加到硅胶柱上并用etoac/pe(1:4)洗脱，以得到呈白色固体的8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氯-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酸叔丁酯(230mg，42％产率，经两步)。1hnmr(300mhz,cdcl3-d)δ8.80(s,1h),6.59(s,1h),3.80-3.92(m,1h),2.66-2.76(m,2h),1.70(s,3h),1.65(s,3h),1.57(s,9h),0.96(s,9h),0.22(s,3h),0.19(s,3h)；lc-ms:m/z467[m+h]+。[0973]步骤10：8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氯-9,9-二甲基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶[0974][0975]在25℃下，向8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氯-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酸叔丁酯(200mg，428μmol)于etoac(15ml)中的混合物中加入hcl(4m，于etoac中，5ml)。将反应混合物搅拌15小时。将混合物浓缩。将残留物溶解在乙酸乙酯(50ml)中，用碳酸钠(50ml，饱和水溶液)和盐水(50ml)洗涤。将所得溶液经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。这导致呈黄色固体的8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氯-9,9-二甲基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶(120mg，76％产率)。1hnmr(300mhz,cdcl3-d)δ8.19(s,1h),6.65(s,1h),6.02(s,1h),3.76-3.82(m,1h),3.14-3.19(m,1h),3.04-3.09(m,1h),1.52(s,3h),1.49(s,3h),0.90(s,9h),0.13(s,3h),0.06(s,3h)；lc-ms:m/z367[m+h]+。[0976]步骤11：8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺[0977][0978]在25℃下，向5-氯-6-(三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；64mg，327.0μmol)于thf(1ml)中的混合物中加入三光气(48mg，163.5μmol)和tea(41mg，408.7μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将所得滤液加入到8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氯-9,9-二甲基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶(100mg，272.5μmol)于thf(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(276mg，2.7mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(66mg，545.0μmol)。将反应混合物在40℃下搅拌1小时。将混合物溶解在etoac(50ml)中，用盐水(2x50ml)洗涤，经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型tlc用etoac/pe(1:4)纯化，以得到呈淡黄色固体的8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺(65mg，40％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.45(s,1h),8.74(s,1h),8.61(d,j＝2.4hz,1h),8.39(d,j＝2.4hz,1h),8.16(s,2h),6.92(s,1h),4.17-4.23(m,1h),3.96-4.07(m,1h),3.64-3.76(m,1h),1.68(s,3h),1.52(s,3h),0.74(s,9h),0.16(s,3h),0.06(s,3h)；lc-ms:m/z588[m+h]+。[0979]步骤12：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-羟基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺[0980][0981]在25℃下，向8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺(55mg，93.5μmol)于thf(2ml)中的溶液中加入tbaf(1m，2ml)。将所得混合物在室温下搅拌4小时。将反应混合物在减压下浓缩。将残留物用水(50ml)稀释并用etoac(3x50ml)萃取。将合并的有机层用饱和氯化铵水溶液(3x50ml)洗涤，经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型tlc用etoac纯化，以得到30mg粗产物(90％纯度)。对残留物进行制备型hplc纯化并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-羟基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺(19.3mg，45％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.95(s,1h),8.69(s,1h),8.63(d,j＝2.4hz,1h),8.37(d,j＝2.4hz,1h),8.15(s,2h),6.88(s,1h),5.62-5.63(m,1h),4.03-4.09(m,1h),3.72-3.77(m,2h),1.64(s,3h),1.57(s,3h)；lc-ms:m/z474[m+h]+。[0982]步骤13：分离对映异构体以获得(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-羟基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-羟基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺。[0983][0984]对2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-羟基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺(16mg，33.7μmol)进行手性hplc纯化(色谱柱：chiralpakif，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：14毫升/分钟；等度45％b；220/254nm；rt1:11.82；rt2:14.305；注射体积：3.8ml；运行次数：1)。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈淡黄色固体的实例11(6.4mg，40％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例12(7.4mg，46％产率)。[0985]实例11：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.97(s,1h),8.69(s,1h),8.63(d,j＝2.4hz,1h),8.38(d,j＝2.4hz,1h),8.16(s,2h),6.89(s,1h),5.64-5.65(m,1h),4.04-4.11(m,1h),3.72-3.76(m,2h),1.64(s,3h),1.57(s,3h)；lc-ms:m/z474[m+h]+。[0986]实例12：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.97(s,1h),8.69(s,1h),8.63(d,j＝2.4hz,1h),8.38(d,j＝2.4hz,1h),8.16(s,2h),6.89(s,1h),5.64-5.65(m,1h),4.04-4.10(m,1h),3.72-3.76(m,2h),1.64(s,3h),1.57(s,3h)；lc-ms:m/z474[m+h]+。[0987]方法j1[0988][0989]实例13和14：由含有(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺和(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[0990]步骤1：2-氯-8-羟基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酸叔丁酯[0991][0992]在25℃下，向8-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-氯-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酸叔丁酯(250mg，536.5μmol)于thf(5ml)中的混合物中加入tbaf(1m，于thf中，5ml)，并将混合物在此温度下搅拌2小时。将混合物在减压下浓缩，并将残留物通过制备型tlc用etoac/pe(1:1)纯化，以得到呈淡黄色固体的2-氯-8-羟基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酸叔丁酯(120mg，63％产率)。lc-ms:m/z353[m+h]+。[0993]步骤2：2-氯-8-甲氧基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酸叔丁酯[0994][0995]在0℃下，向2-氯-8-羟基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酸叔丁酯(120mg，340.9μmol)于dmf(8ml)中的混合物中加入nah(60％，于矿物油中，16mg，409.1μmol)。将混合物在0℃下搅拌0.5小时。逐滴加入mei(58mg，409.1μmol)，并将所得混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物倒入到冰/水(50ml)中，并用etoac(3x50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型tlc用etoac/pe(1:2)纯化，以得到呈白色固体的2-氯-8-甲氧基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酸叔丁酯(60mg，48％产率)。1hnmr(400mhz,cdcl3-d)δ8.68(s,1h),6.56(s,1h),4.26-4.30(m,1h),3.44-3.48(m,4h),3.17-3.19(m,1h),1.72(s,3h),1.62(s,3h),1.53(s,9h)；lc-ms:m/z367[m+h]+。[0996]步骤3：2-氯-8-甲氧基-9,9-二甲基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶[0997][0998]向2-氯-8-甲氧基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酸叔丁酯(50mg，136.3μmol)于dcm(4ml)中的混合物中加入tfa(1ml)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在减压下浓缩，并将残留物通过制备型tlc用etoac/pe(1:1)纯化，以得到呈白色固体的2-氯-8-甲氧基-9,9-二甲基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶(35mg，96％产率)。1hnmr(300mhz,cdcl3-d)δ:8.16(s,1h),6.54(s,1h),3.54(s,3h),3.39-3.40(m,2h),3.29-3.32(m,1h),1.73(s,3h),1.69(s,3h)。lc-ms:m/z267[m+h]+。[0999]步骤4：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺[1000][1001]在25℃下，向5-氯-6-(三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；26mg，133.3μmol)于thf(4ml)中的混合物中加入三光气(20mg，67.5μmol)、tea(17mg，168.7μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将所得滤液加入到2-氯-8-甲氧基-9,9-二甲基-6,7,8,9-四氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶(30mg，112.5μmol)于thf(4ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(114mg，1.1mmol)和dmap(27mg，224.9μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌1小时。将混合物倒入到水(20ml)中，并用etoac(3x20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺(9.3mg，17％产率)。lc-ms:m/z488[m+h]+。[1002]步骤5：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺和(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺。[1003][1004]对2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基-9,9-二甲基-8,9-二氢吡唑并[1,5-a]吡啶并[2,3-e]嘧啶-6(7h)-甲酰胺(7mg，14μmol)进行手性hplc纯化(色谱柱：chiralpakia，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：16毫升/分钟；等度50％b；220/254nm；rt1:9.279；rt2:13.158；注射体积：1ml；运行次数：1)。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈黄色固体的实例13(2mg，28％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈黄色固体的实例14(2.8mg，40％产率)。[1005]实例13：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.53(s,1h),8.43(d,j＝2.0hz,1h),8.39(d,j＝2.4hz,1h),7.93(s,2h),7.09(s,1h),6.66(s,1h),4.67-4.71(m,1h),3.43-3.47(m,4h),3.32(d,j＝4.0hz,1h),1.84(s,3h),1.65(s,3h)；lc-ms:m/z488[m+h]+。[1006]实例14：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:8.53(s,1h),8.43(d,j＝2.4hz,1h),8.39(d,j＝2.4hz,1h),7.93(s,2h),7.11(s,1h),6.66(s,1h),4.67-4.71(m,1h),3.43-3.47(m,4h),3.32(d,j＝4.0hz,1h),1.84(s,3h),1.65(s,3h)；lc-ms:m/z488[m+h]+。[1007]方法k1[1008][1009]实例15和16：(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1010]步骤1：n-苄基-n-丙酰基甘氨酸乙酯[1011][1012]将2-(苄基氨基)乙酸乙酯(13.5g，69.9mmol)、chcl3(130ml)、n,n-二乙基乙胺(14.2g，139.7mmol)放入250ml三颈烧瓶中。在0℃下逐滴加入20mlchcl3中的丙酰氯(7.1g，76.9mmol)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物倒入200ml的h2o中。用dcm(3x200ml)萃取所得溶液。将有机层合并，干燥，并在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用etoac/pe(1:2)洗脱，以得到呈淡黄色油状物的n-苄基-n-丙酰基甘氨酸乙酯(15.7g，81％产率)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.16-7.37(m,5h),4.61-4.64(m,2h),4.08-4.17(m,2h),3.90-4.03(m,2h),2.28-2.47(m,2h),1.14-1.25(m,6h)。lc-ms:m/z250[m+h]+。[1013]步骤2：1-苄基-3-甲基吡咯烷-2,4-二酮[1014][1015]将nah(963mg，24.1mmol)和thf(100ml)放入250ml三颈烧瓶中。在75℃下逐滴加入thf(50ml)中的n-苄基-n-丙酰基甘氨酸乙酯(5.0g，20.1mmol)。将混合物在75℃下搅拌12小时。将反应冷却至20℃，然后加入水(20ml)。将混合物在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用meoh/dcm(1:30)洗脱，以得到呈灰白色固体的1-苄基-3-甲基吡咯烷-2,4-二酮(2.2g，49％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:10.62(s,1h),7.14-7.34(m,5h),4.44(s,2h),3.62(d,j＝1.6hz,2h),1.57(s,3h)。lc-ms:m/z204[m+h]+。[1016]步骤3：1-苄基-3-甲基-3-(三氟甲基)吡咯烷-2,4-二酮[1017][1018]将1-苄基-3-甲基吡咯烷-2,4-二酮(500mg，2.5mmol)和dmf(10ml)放入100ml三颈烧瓶中。在0℃下分份加入nah(94mg，2.5mmol)。将混合物在25℃下搅拌0.5小时。在-55℃下加入三氟甲磺酸酯；5-(三氟甲基)二苯并噻吩-5-鎓(989mg，2.5mmol)。将混合物在-55℃下搅拌1小时。将反应混合物逐渐温热至25℃，并搅拌1小时。将混合物倒入到冰/水的混合物(40ml)中。用etoac(3x40ml)萃取所得混合物。将有机层合并，经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用etoac/pe(1:4)洗脱，以得到呈淡黄色油状物的1-苄基-3-甲基-3-(三氟甲基)吡咯烷-2,4-二酮(670mg，90％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:7.28-7.42(m,5h),4.84(d,j＝15.03hz,1h),4.45(d,j＝15.06hz,1h),4.05(s,2h),1.48(s,3h)。lc-ms:m/z272[m+h]+。[1019]步骤4：1-苄基-4-甲基-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇[1020][1021]将1-苄基-3-甲基-3-(三氟甲基)吡咯烷-2,4-二酮(620mg，2.3mmol)和thf(20ml)放入100ml圆瓶烧瓶中。在0℃下加入lialh4(582mg，15.3mmol)。将反应混合物温热至80℃，并在这个温度下搅拌15小时。将反应混合物冷却至0℃。在搅拌的同时，加入582mgh2o和582mgnaoh水溶液(10％)，然后加入582mgh2o。将混合物在25℃下搅拌10分钟并滤出沉淀。将滤液在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用meoh/dcm(1:50)洗脱，以得到呈无色油状物的1-苄基-4-甲基-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇(530mg，80％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.20-7.32(m,5h),5.30(d,j＝5.88hz,1h),3.92-3.97(m,1h),3.50-3.61(m,2h),3.00-3.04(m,1h),2.65(d,j＝9.48hz,1h),2.50(s,1h),2.24-2.28(m,1h),1.21(s,3h)。lc-ms:m/z260[m+h]+。[1022]步骤5：4-甲基-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇盐酸盐[1023][1024]将1-苄基-4-甲基-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇(430mg，1.7mmol)、etoh(15ml)、hcl(1.0m，1.7ml)和pd/c(100mg，10％)放入100ml圆瓶烧瓶中。将烧瓶抽空并用氮气冲洗三次，然后用氢气冲洗。将混合物在氢气(气球)气氛下在25℃下搅拌18小时。在搅拌下加入hcl(1.0m，1.7ml)。将混合物在25℃下搅拌15分钟。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。这导致呈黄色固体的4-甲基-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇盐酸盐(300mg，79％产率)。lc-ms:m/z170[m+h]+。[1025]步骤6：4-羟基-3-甲基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1026][1027]将4-甲基-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇盐酸盐(300mg，1.5mmol)、thf(15.0ml)、(boc)2o(477mg，2.2mmol)和n,n-二乙基乙胺(738mg，7.3mmol)放入100ml圆瓶烧瓶中。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用etoac/pe(1:4)洗脱，以得到呈白色固体的4-羟基-3-甲基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(370mg，85％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:5.60-5.62(m,1h),4.04-4.12(m,1h),3.54-3.61(m,2h),3.14-3.21(m,2h),1.40(s,9h),1.18(s,3h)。lc-ms:m/z270[m+h]+。[1028]步骤7：3-甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1029][1030]将4-羟基-3-甲基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(300mg，1.1mmol)、dcm(15ml)、pcc(1.2g，5.6mmol)和硅胶(600mg)放入100ml圆瓶烧瓶中。将混合物在40℃下搅拌12小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用etoac/pe(1:10)洗脱，以得到呈白色固体的3-甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(200mg，60％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:3.92-4.00(m,3h),3.56-3.62(m,1h),1.41(s,9h),1.33(s,3h)。lc-ms:m/z268[m+h]+。[1031]步骤8：(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1032][1033]将3-甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(160mg，598.7umol)和dmf-dma(1:1，6.0ml)放入100ml圆瓶烧瓶中。将混合物在35℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩，以得到呈淡黄色油状物的(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(193mg，粗品)。lc-ms:m/z323[m+h]+。[1034]步骤9：2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[1035][1036]将(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(193mg，598.8umol)、3-氯-1h-吡唑-5-胺(70mg，598.8umol)、甲苯(10ml)和hoac(1.0ml)放入100ml圆瓶烧瓶中。将混合物在95℃下搅拌15小时。将反应冷却至25℃，并在真空下浓缩。加入20ml的nahco3(水溶液，饱和)。用etoac(3x20ml)萃取所得溶液。将有机层合并，干燥，并在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱上并用etoac/pe(13:87)洗脱，以得到呈黄色油状物的2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(90mg，36％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.14(s,1h),7.04(s,1h),3.95-4.03(m,2h),1.52(s,9h),1.47(s,3h)。lc-ms:m/z377[m+h]+。[1037]步骤10：2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[1038][1039]将2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(80mg，212.3umol)、dcm(6ml)和tfa(2ml)放入40ml小瓶中。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。加入20ml的nahco3(水溶液，饱和)。用dcm(3x20ml)萃取所得混合物。将有机层合并，干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型tlc纯化，用meoh/dcm(1:35)洗脱。这导致呈黄色油状物的2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(32mg，49％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.37(s,1h),6.82(s,1h),5.95-5.99(br,1h),3.87-3.92(m,1h),3.54-3.59(m,1h),1.79(s,3h)。lc-ms:m/z277[m+h]+。[1040]步骤11：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1041][1042]在0℃下，向5-氯-6-(三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；19mg，95.4umol)和碳酸双(三氯甲基)酯(14mg，47.7umol)于thf(5ml)中的搅拌混合物中逐滴加入tea(12mg，119.3umol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将所得滤液加入到2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(22mg，79.5umol)于thf(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(81mg，795.2umol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(19mg，159.1umol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型tlc纯化，用meoh/dcm(3.5:120)洗脱。通过制备型hplc纯化粗产物(45mg)。将含有产物的级分冻干，以得到呈白色固体的2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(25.1mg，61％产率)。lc-ms:m/z498[m+h]+。[1043]步骤12：分离对映异构体以获得(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺。[1044][1045]对25mg2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺进行手性hplc纯化(色谱柱：chiralpakie，2x25cm，5um；流动相a：hex(8mmol/lnh3.meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；等度25％b；220/254nm；rt1:8.945；rt2:10.506；注射体积：0.5ml；运行次数：6)。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到实例15(7.8mg，31％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例16(6.1mg，24％产率)。[1046]实例15：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.72(s,1h),9.36(s,1h),8.75(d,j＝2.4hz,1h),8.51(d,j＝2.4hz,1h),8.18(s,2h),7.09(s,1h),4.86(d,j＝11.6hz,1h),4.31(d,j＝11.6hz,1h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z498[m+h]+。[1047]实例16：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.72(s,1h),9.36(s,1h),8.76(d,j＝2.4hz,1h),8.51(d,j＝2.4hz,1h),8.18(s,2h),7.09(s,1h),4.86(d,j＝11.6hz,1h),4.31(d,j＝11.2hz,1h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z498[m+h]+。[1048]方法l1[1049][1050]实例17：n-[5-氯-6-(三唑-2-基)-3-吡啶基]-11-氰基-3-甲基-3-(三氟甲基)-1,5,8,12-四氮杂三环[7.3.0.02,6]十二碳-2(6),7,9,11-四烯-5-甲酰胺[1051]步骤1：2-溴-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[1052][1053]在25℃下，向(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(方法k1步骤8；500mg，1.6mmol)于甲苯(10ml)中的混合物中加入acoh(1ml)和3-溴-1h-吡唑-5-胺(304mg，1.9mmol)。将反应混合物在95℃下搅拌1小时。冷却至25℃后，将混合物在真空下浓缩。将残留物溶解在etoac(100ml)中。将混合物用饱和nahco3水溶液(50mlx3)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩。将残留物施加到硅胶柱上并用etoac/pe(1:4)洗脱，以得到呈黄色油状物的2-溴-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(188mg，29％产率)。lc-ms:m/z421[m+h]+。[1054]步骤2：8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-2-甲腈[1055][1056]在n2下，向2-溴-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(150mg，356.1μmol)于dmf(3ml)中的混合物中加入zn(cn)2(84mg，712.0μmol)和pd(dppf)cl2(43.62mg，53.4μmol)。将反应混合物在微波反应器中在180℃下加热30分钟。冷却至25℃后，将混合物倒入到水(50ml)中，并用etoac(3x50ml)萃取。将合并的有机层经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型tlc用etoac纯化，以得到呈黄色固体的8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-2-甲腈(50mg，38％产率)。lc-ms:m/z268[m+h]+。[1057]步骤3：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氰基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1058][1059]在25℃下，向5-氯-6-(三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；45mg，224.5μmol)于thf(3ml)中的混合物中加入三光气(34mg，112.0μmol)和tea(29mg，280.5μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-2-甲腈(50mg，187.1μmol)于thf(3ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(190mg，1.9mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(46mg，374.5μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌1小时。将混合物倒入到水(40ml)中，并用etoac(3x40ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将含有产物的级分冻干，以得到呈白色固体的n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氰基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(3.5mg，4％产率)。[1060]实例17：1hnmr(400mhz,cdcl3-d)δ9.61(s,1h),8.56(d,j＝2.4hz,1h),8.46(d,j＝2.0hz,1h),7.98(s,2h),7.00(d,j＝2.8hz,1h),4.68(d,j＝10.8hz,1h),4.14(d,j＝10.8hz,1h),2.11(s,3h)。lc-ms:m/z489[m+h]+。[1061]方法m1[1062][1063]实例18：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-甲氧基吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1064]步骤1：(s)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶和(r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[1065][1066]将2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(方法k1步骤10；2.2g)的外消旋混合物通过制备型sfc纯化(色谱柱：chiralartamylose-cneo，3x25cm，5um；流动相a：co2，流动相b：meoh(0.1％2mnh3-meoh)；流速：100毫升/分钟；等度20％b；220nm；rt1:2.78；rt2:3.43；注射体积：1ml；运行次数：30)。将第一个洗脱异构体(rt2.78分钟)浓缩并冻干，以得到呈黄色固体的方法m1异构体1(800mg，36％产率)。lc-ms:m/z277[m+h]+。ee％＝99.3％。将第二个洗脱异构体(rt3.43分钟)浓缩并冻干，以得到呈黄色固体的方法m1异构体2。lc-ms:m/z277[m+h]+。ee％＝98.3％。然后对两种异构体分别进行方法k1步骤11，以分别转化为实例15和实例16。实例16与malt1酶共结晶。该复合物的x射线晶体学确定实例16的立体化学为“r”。实例16衍生自方法m1异构体2。[1067]步骤2：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-甲氧基吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(实例18)[1068][1069]在0℃下，向5-氯-6-甲氧基-吡啶-3-胺(14mg，86.8μmol)和碳酸双(三氯甲基)酯(13mg，43.4μmol)于thf(4ml)中的搅拌溶液中加入tea(11mg，108.4μmol，15.1μl)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(20mg，72.3μmol)于thf(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(73mg，722.9μmol，100.8μl)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(18mg，144.6μmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物通过制(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1090]步骤1：3-甲基-5-硝基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶[1091][1092]向2-氯-3-甲基-5-硝基吡啶(2g，11.6mmol)于acn(30ml)中的搅拌溶液中加入2h-1,2,3-三唑(880mg，12.7mmol)和cs2co3(2.1g，15.1mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌15小时。lcms显示反应完成。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物用水(50ml)稀释并用etoac(2x50ml)萃取。将合并的有机层在真空下浓缩。将残留物施加在硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:10)洗脱，以得到呈白色固体的3-甲基-5-硝基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶(300mg，12％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.25-9.27(m,1h),8.85-8.86(m,1h),8.28(s,2h),2.52-2.53(m,3h)。lc-ms:m/z206[m+h]+。[1093]步骤2：5-甲基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺[1094][1095]向3-甲基-5-硝基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶(50mg，243.7μmol)于meoh(5ml)中的搅拌溶液中加入pd/c(25mg，10％)。将反应在氢气气氛下在25℃下搅拌1小时。lcms显示反应完全。将反应混合物过滤。将滤液在真空下浓缩。这导致呈无色油状物的5-甲基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(40mg，89％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.00-8.03(s,2h),7.70(d,j＝2.7hz,1h),6.95(d,j＝2.7hz,1h),5.76(s,2h),1.95(s,3h)。lc-ms:m/z176[m+h]+。[1096]步骤3：(r)-2-氯-8-甲基-n-(5-甲基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1097][1098]向5-甲基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(25mg，140.9μmol)于thf(5ml)中的搅拌溶液中加入三光气(19mg，65.1μmol)和tea(16mg，162.7μmol)。将所得混合物在28℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(30mg，108.4μmol)于thf(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(26mg，216.9μmol)和tea(110mg，1.1mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将溶剂在真空下浓缩。将残留物通过制备型tlc用meoh/dcm(1:30)纯化，以得到42mg粗产物。将粗产物通过制备型hplc纯化，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-8-甲基-n-(5-甲基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(25.3mg，48％产率)。实例21的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1099]实例21：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.47(s,1h),9.36(s,1h),8.61(s,1h),8.18(s,1h),8.12(s,2h),7.07(s,1h),4.86(d,j＝11.2hz,1h),4.29(d,j＝11.2hz,1h),2.21(s,3h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z478[m+h]+[1100]实例22：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-氰基-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1101][1102]根据方法o1步骤3，通过使用1-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-甲腈和方法m1异构体2制备标题化合物。实例22的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1103]实例22：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.68(s,1h),9.35(s,1h),9.12(s,1h),8.72(d,j＝2.4hz,1h),8.47(d,j＝2.1hz,1h),8.40(s,1h),7.08(s,1h),4.84(d,j＝11.7hz,1h),4.29(d,j＝11.7hz,1h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z522[m+h]+。[1104]实例23：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1105][1106]根据方法o1步骤3，通过使用5-氯-6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-胺和方法m1异构体2制备标题化合物。实例23的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1107]实例23：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.32(s,1h),9.01(s,1h),8.19(d,j＝2.1hz,1h),7.88(d,j＝2.1hz,1h),7.04(s,1h),4.74(d,j＝11.4hz,1h),4.21(d,j＝11.4hz,1h),3.50-3.62(m,4h),1.96(s,3h),1.81-1.91(m,4h)。lc-ms:m/z500[m+h]+[1108]方法p1[1109][1110]实例24：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(羟甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1111]步骤1：(r)-2-(3-氯-5-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯[1112][1113]在0℃下，向2-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(55mg，216.9μmol)和三光气(80mg，271.1μmol)于thf(5ml)中的搅拌溶液中加入tea(27mg，271.1μmol，38ul)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(50mg，180.7μmol)于thf(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(183mg，1.8mmol，251.9μl)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(44mg，361.5μmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将所得混合物通过制备型tlc用meoh/dcm(1/10)纯化，以得到呈白色固体的(r)-2-(3-氯-5-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(70mg，35％产率)。lc-ms:m/z556[m+h]+。[1114]步骤2：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(羟甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1115][1116]在0℃下，向(r)-2-(3-氯-5-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(35mg，31.4μmol)于thf(1ml)中的搅拌溶液中加入lialh4(1.4mg，37.7μmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将所得混合物用饱和氯化铵水溶液(1ml)淬灭，并用etoac(3x5ml)萃取混合物。将合并的有机层经无水na2so4干燥，并且在减压下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(羟甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(1.4mg，8％产率)。实例24的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1117]实例24：1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:9.43(s,1h),8.59(s,1h),8.45(s,1h),7.95(s,1h),6.79(s,1h),6.70(s,1h),4.95(s,2h),4.62(d,j＝10.1hz,1h),4.10(d,j＝10.0hz,1h),2.11(s,3h)。lc-ms:m/z528[m+h]+。[1118]实例25：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(1-甲基-1h-吡唑-3-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1119][1120]根据方法o1步骤3，通过使用5-氯-6-(1-甲基-1h-吡唑-3-基)吡啶-3-胺和方法m1异构体2制备标题化合物。实例25的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1121]实例25：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.44(s,1h),9.35(s,1h),8.74(d,j＝2.1hz,1h),8.25(d,j＝2.1hz,1h),7.77(d,j＝2.4hz,1h),7.07(s,1h),6.73(d,j＝2.4hz,1h),4.83(d,j＝11.7hz,1h),4.30(d,j＝11.7hz,1h),3.92(s,3h),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z511[m+h]+。[1122]实例26：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1123][1124]根据方法o1步骤3，通过使用5-氯-6-(1h-吡唑-1-基)吡啶-3-胺和方法m异构体2制备标题化合物。实例26的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1125]实例26：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.58(s,1h),9.35(s,1h),8.68(d,j＝2.4hz,1h),8.42(d,j＝2.4hz,1h),8.22(d,j＝2.1hz,1h),7.78(d,j＝2.1hz,1h),7.07(s,1h),6.53-6.55(m,1h),4.84(d,j＝11.7hz,1h),4.29(d,j＝11.7hz,1h),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z497[m+h]+。[1126]实例27：(r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-n-(2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1127][1128]根据方法o1步骤3，通过使用2-(三氟甲基)吡啶-4-胺和方法m1异构体2制备标题化合物。实例27的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1129]实例27：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.74(s,1h),9.34(s,1h),8.63(d,j＝4.2hz,1h),8.11(d,j＝1.5hz,1h),7.88(d,j＝4.2hz,1h),7.08(s,1h),4.87(d,j＝11.6hz,1h),4.29(d,j＝11.5hz,1h),1.97(s,3h)。lc-ms:m/z465[m+h]+。[1130]方法q1[1131][1132]实例28：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(1-甲基-1h-咪唑-4-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1133]步骤1：5-氯-6-(1-甲基-1h-咪唑-4-基)吡啶-3-胺[1134][1135]在氮气下，向6-溴-5-氯-吡啶-3-胺(200mg，964.1μmol)于dmf(5ml)中的搅拌溶液中加入1-甲基-4-(三丁基甲锡烷基)-1h-咪唑(429mg，1.16mmol)和pd(pph3)4(111mg，96.3μmol)。将反应混合物在120℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(10ml)淬灭。用etoac(3x5ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，以得到呈淡黄色固体的5-氯-6-(1-甲基咪唑-4-基)吡啶-3-胺(70mg，31％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.12(s,1h),8.19(d,j＝1.2hz,1h),8.04(d,j＝2.4hz,1h),7.14(d,j＝2.4hz,1h),3.89(s,3h),2.74(s,2h)。lc-ms:m/z209[m+h]+。[1136]步骤2：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(1-甲基-1h-咪唑-4-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1137][1138]根据方法m1步骤2，通过使用5-氯-6-(1-甲基咪唑-4-基)吡啶-3-胺和方法m1异构体2制备标题化合物。实例28的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1139]实例28：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.40(s,1h),8.63(s,1h),8.21(d,j＝2.4hz,1h),7.71(s,1h),7.68(s,1h),7.05(s,1h),4.79(d,j＝11.7hz,1h),4.24(d,j＝11.7hz,1h),3.73(s,3h),1.97(s,3h)。lc-ms:m/z511[m+h]+。[1140]方法r1[1141][1142]实例29：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-((二甲基氨基)甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1143]步骤1：2-(5-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯[1144][1145]向2-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(500mg，2.0mmol)于dcm(10ml)中的溶液中加入tea(598mg，5.91mmol)、n,n-二甲基吡啶-4-胺(24mg，197.1μmol)和二碳酸二叔丁酯(516mg，2.4mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(10ml)淬灭，并用dcm(3x10ml)萃取水相。将合并的有机层经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的粗品2-(5-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(600mg，51％产率)，其直接用于下一步骤。lc-ms:m/z354[m+h]+。[1146]步骤2：(5-氯-6-(4-(羟甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯[1147][1148]向2-(5-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(540mg，1.5mmol)于thf(10ml)中的搅拌溶液中加入lialh4(69mg，1.8mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将所得混合物用水(10ml)淬灭，并用etoac(3x20ml)萃取水相。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩。将残留物施加到硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:4)洗脱，以得到呈白色固体的(5-氯-6-(4-(羟甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(130mg，25％产率)。lc-ms:m/z326[m+h]+。[1149]步骤3：(2-(5-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)甲磺酸甲酯[1150][1151]向(5-氯-6-(4-(羟甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(120mg，357.3μmol)于dcm(1ml)中的搅拌溶液中缓慢加入甲磺酰氯(61mg，536.0μmol)和tea(108mg，1.1mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将所得混合物用水(2ml)稀释，并用dcm(3x3ml)萃取混合物。将合并的有机层经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，以得到粗品(2-(5-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)甲磺酸甲酯(100mg，66％产率)，其直接用于下一步骤。lc-ms:m/z404[m+h]+。[1152]步骤4：(5-氯-6-(4-((二甲基氨基)甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯[1153][1154]向(2-(5-((叔丁氧羰基)氨基)-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)甲磺酸甲酯(90mg，211.7μmol)于thf(5ml)中的搅拌溶液中加入n-甲基甲胺(11mg，254.1μmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物用水(5ml)稀释，并用etoac(3x5ml)萃取水相。将合并的有机层用盐水洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩，以得到呈白色固体的(5-氯-6-(4-((二甲基氨基)甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，粗品)。lc-ms:m/z353[m+h]+。[1155]步骤5：5-氯-6-(4-((二甲基氨基)甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺[1156][1157]向(5-氯-6-(4-((二甲基氨基)甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，260.8μmol)于dcm(10ml)中的搅拌溶液中缓慢加入2,2,2-三氟乙酸(297mg，2.6mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物的ph用饱和碳酸氢钠水溶液调整到7，并用dcm(3x10ml)萃取。将合并的有机层经无水na2so4干燥，并且在减压下浓缩。将残留物通过制备型tlc用meoh/dcm(1:10)纯化，以得到呈白色固体的5-氯-6-(4-((二甲基氨基)甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(50mg，74％产率)。lc-ms:m/z253[m+h]+。[1158]步骤6：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-((二甲基氨基)甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1159][1160]根据方法o1步骤3，通过使用5-氯-6-(1-甲基咪唑-4-基)吡啶-3-胺和方法m1异构体2制备标题化合物。实例29的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1161]实例29：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.77(s,1h),9.29(s,1h),8.72(d,j＝2.4hz,1h),8.48(d,j＝2.4hz,1h),8.22(s,1h),7.03(s,1h),4.80(d,j＝11.7hz,1h),4.48(s,2h),4.23(d,j＝11.4hz,1h),2.75(s,6h),1.92(s,3h)。lc-ms:m/z555[m+h]+。[1162]方法s1[1163][1164]实例30：(r)-2-氯-8-甲基-n-(5-甲基-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1165][1166]步骤1：3-甲基-5-硝基-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶[1167]向2-氯-3-甲基-5-硝基吡啶(2g，11.6mmol)于acn(30ml)中的搅拌溶液中加入2h-1,2,3-三唑(880mg，12.8mmol)和cs2co3(2.1g，15.1mmol)。将反应物在40℃下搅拌15小时。lcms显示反应完成。在真空下去除溶剂。将残留物用水(50ml)稀释并用etoac(2x50ml)萃取。将合并的有机层在真空下浓缩。将粗产物通过制备型hplc纯化，以得到呈白色固体的3-甲基-5-硝基-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶(300mg，12％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.24(d,j＝2.4hz,1h),8.87(d,j＝2.4hz,1h),7.78(d,j＝1.2hz,1h),8.03(d,j＝1.2hz,1h),2.58(s,3h)。lc-ms:m/z206[m+h]+。[1168]步骤2：5-甲基-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-胺[1169][1170]向3-甲基-5-硝基-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶(100mg，487.4μmol)于meoh(10ml)中的搅拌溶液中加入pd/c(20mg，10％)。将烧瓶抽空并用氮气冲洗三次，然后用氢气冲洗。将反应在氢气气氛下在25℃下搅拌1小时。lcms显示反应完全。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。这导致呈白色固体的5-甲基-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-胺(62mg，65％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.36(d,j＝1.2hz,1h),7.85(d,j＝0.8hz,1h),7.70(d,j＝2.4hz,1h),6.96(d,j＝2.4hz,1h),5.73(s,2h),2.06(s,3h)。lc-ms:m/z176[m+h]+。[1171]步骤3：(r)-2-氯-8-甲基-n-(5-甲基-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1172][1173]根据方法o1步骤3，通过使用5-甲基-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-胺和方法m1异构体2制备标题化合物。实例30的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1174]实例30：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.48(s,1h),9.36(s,1h),8.60-8.64(m,2h),8.20(d,j＝2.0hz,1h),7.97(d,j＝0.8hz,1h),7.08(s,1h),4.86(d,j＝11.6hz,1h),4.30(d,j＝11.5hz,1h),2.33(s,3h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z478[m+h]+。[1175]方法t1[1176][1177]实例31和32：由含有(s)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体。[1178]步骤1：2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[1179][1180]在n2下，向(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(方法k1步骤8；500mg，1.5mmol)于甲苯(10ml)和acoh(1ml)中的溶液中加入3-甲基-1h-吡唑-5-胺(1.2g，1.5mmol)。将所得混合物在95℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(100ml)猝灭并用etoac(3x100ml)萃取。将合并的有机层经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物施加到硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:3)洗脱，以得到呈黄色油状物的2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(300mg，53％产率)。lc-ms:m/z357[m+h]+。[1181]步骤2：2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[1182][1183]向2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(300mg，841.8μmol)于dcm(8ml)中的溶液中加入tfa(2ml)。将所得混合物在室温下搅拌2小时并在真空下浓缩。向残留物中加入水(50ml)，并用etoac(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物施加到硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:3)洗脱，以得到呈黄色固体的2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(180mg，76％产率)。lc-ms:m/z257[m+h]+。[1184]步骤3：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1185][1186]在25℃下，向5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；80mg，351.2μmol)于thf(8ml)中的溶液中加入三光气(62mg，210.7μmol)和tea(46mg，456μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将所得滤液加入到2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(90mg，351.2μmol)于thf(1ml)中的溶液中。将反应在室温下搅拌4小时。将反应混合物用水(50ml)猝灭并用etoac(3x50ml)萃取。将合并的有机层经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过硅胶柱色谱法进行纯化，用etoac/pe(1:1)洗脱，以得到呈白色固体的n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(30mg，19％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.66(s,1h),9.24(s,1h),8.75(d,j＝2.4hz,1h),8.51(d,j＝2.4hz,1h),8.17(s,2h),6.69(s,1h),4.83(d,j＝11.4hz,1h),4.29(d,j＝11.4hz,1h),2.46-2.51(m,3h),2.01(s,3h)；lc-ms:m/z478[m+h]+。[1187]步骤4：分离对映异构体以获得(s)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺。[1188][1189]对30mgn-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺进行手性hplc纯化(色谱柱：chiralpakia，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；等度10％b；220/254nm；rt1:15.722；rt2:21.47；注射体积：1.2ml；运行次数：4)。将第一个洗脱异构体(rt15.72分钟)浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例31(7.1mg，25％产率)。将第二个洗脱异构体(rt21.47分钟)浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例32(9.2mg，32％产率)。[1190]实例31：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.66(s,1h),9.24(s,1h),8.75(d,j＝2.4hz,1h),8.51(d,j＝2.4hz,1h),8.17(s,2h),6.69(s,1h),4.84(d,j＝11.4hz,1h),4.29(d,j＝11.4hz,1h),2.46-2.51(m,3h),2.01(s,3h)。lc-ms:m/z478[m+h]+。[1191]实例32：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.66(s,1h),9.24(s,1h),8.75(d,j＝2.4hz,1h),8.51(d,j＝2.4hz,1h),8.17(s,2h),6.69(s,1h),4.83(d,j＝11.4hz,1h),4.30(d,j＝11.4hz,1h),2.46-2.51(m,3h),2.01(s,3h)。lc-ms:m/z478[m+h]+。[1192]方法u1[1193][1194]实例33和34：由含有(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((r)-四氢呋喃-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((s)-四氢呋喃-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的混合物获得的单一立体异构体。[1195]步骤1：(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(四氢呋喃-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1196][1197]在0℃下，向方法m1异构体2(40mg，144.6μmol)和三光气(26mg，86.7μmol)于thf(3ml)中的搅拌溶液中加入tea(22mg，216.9μmol，30ul)。将混合物在28℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到5-氯-6-四氢呋喃-2-基-吡啶-3-胺(29mg，144.6μmol)于thf(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(146mg，1.4mmol，201.5μl)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(35mg，289.2μmol)。将混合物在28℃下搅拌2小时。真空去除溶剂，并将残留物通过制备型tlc用meoh/dcm(10:1)纯化，以得到呈黄色固体的(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(四氢呋喃-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(18mg，25％产率)。lc-ms:m/z501[m+h]+。[1198]步骤2：分离立体异构体以获得(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((r)-四氢呋喃-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((s)-四氢呋喃-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺。[1199][1200]对15mg(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(四氢呋喃-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺进行手性hplc纯化(色谱柱：chiralartcellulose-sb，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在20分钟内，30b到30b；220/254nm；rt1:10.1；rt2:16.62；注射体积：2ml；运行次数：1)。将第一个洗脱异构体(rt10.1分钟)浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例33(3.9mg，52％产率)。将第二个洗脱异构体(rt16.62分钟)浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例34(1.5mg，20％产率)。实例33和实例34的对应的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1201]实例33：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.42(s,1h),9.34(s,1h),8.67(d,j＝2.1hz,1h),8.17(d,j＝2.1hz,1h),7.07(s,1h),5.24(t,j＝6.9hz,1h),4.82(d,j＝11.4hz,1h),4.26(d,j＝12.0hz,1h),3.80-3.94(m,2h),1.98-2.23(m,4h),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z501[m+h]+。[1202]实例34：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.42(s,1h),9.34(s,1h),8.67(d,j＝2.1hz,1h),8.18(d,j＝2.1hz,1h),7.07(s,1h),5.24(t,j＝6.9hz,1h),4.82(d,j＝11.4hz,1h),4.26(d,j＝11.4hz,1h),3.78-3.96(m,2h),1.95-2.28(m,4h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z501[m+h]+。[1203]方法v1[1204][1205]实例35：(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1206]步骤1：5-溴-2-氯-3-(二氟甲基)吡啶[1207][1208]在0℃下，向5-溴-2-氯烟醛(2.5g，11.3mmol)于dcm(50ml)中的搅拌溶液中逐滴加入dast(3.6g，22.6mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物的ph用饱和nahco3水溶液调整到8。用dcm(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩，以得到呈淡黄色油状物的5-溴-2-氯-3-(二氟甲基)吡啶(1.5g，55％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.55-8.59(m,1h),8.09-8.14(m,1h),6.87(t,j＝54.0hz,1h)。lc-ms:m/z242[m+h]+。[1209]步骤2：5-溴-3-(二氟甲基)-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶和5-溴-3-(二氟甲基)-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶[1210][1211]向5-溴-2-氯-3-(二氟甲基)吡啶(1.5g，6.2mmol)于dmf(20ml)中的搅拌溶液中加入k2co3(1.7g，12.8mmol)和2h-1,2,3-三唑(512mg，7.4mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌4小时。将混合物倒入到水(30ml)中，并用etoac(3x100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3x100ml)洗涤，经无水na2so4干燥。过滤后，将滤液在减压下浓缩。将残留物施加到硅胶柱上并用etoac/pe(1:3)洗脱，以得到呈黄色固体的5-溴-3-(二氟甲基)-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶和5-溴-3-(二氟甲基)-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶的混合物(1.6g，94％产率)。lc-ms:m/z275[m+h]+。[1212]步骤3：(5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯和(5-(二氟甲基)-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯[1213][1214]向5-溴-3-(二氟甲基)-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶和5-溴-3-(二氟甲基)-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶的混合物(1.6g，5.8mmol)于二噁烷(160ml)中的搅拌溶液中加入氨基甲酸叔丁酯(1.02g，8.7mmol)、xantphos(1.01g，1.7mmol)、pd2(dba)3(668mg，1.2mmol)和cs2co3(5.7g，17.4mmol)。将反应混合物在90℃下在n2下搅拌2小时。使混合物冷却至室温。将所得混合物过滤。将滤饼用etoac(3x100ml)洗涤。在减压下浓缩滤液。将残留物施加到硅胶柱上并用etoac/pe(1:4)洗脱，以得到呈黄色固体的(5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(700mg，38.7％产率)和(5-(二氟甲基)-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(600mg，33％产率)。[1215](5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯：1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:8.69(d,j＝2.4hz,1h),8.50(d,j＝2.4hz,1h),8.04(s,2h),7.45(t,j＝54.8hz,1h),1.55(s,9h)。lc-ms:m/z312[m+h]+[1216](5-(二氟甲基)-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:8.72(d,j＝2.4hz,1h),8.59(d,j＝1.2hz,1h),8.50(d,j＝2.4hz,1h),7.91(d,j＝1.2hz,1h),7.60(t,j＝54.8hz,1h),1.56(s,9h)。lc-ms:m/z312[m+h]+。[1217]步骤4：5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺[1218][1219]向(5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，643μmol)于dcm(20ml)中的搅拌溶液中加入tfa(2.9g，25.7mmol)。将混合物在25下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物施加到硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:1)洗脱，以得到呈黄色固体的5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(110mg，81％产率)。1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ:8.00(d,j＝2.7hz,1h),7.96(s,2h),7.08(t,j＝55.2hz,1h)。lc-ms:m/z212[m+h]+。[1220]步骤5：(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1221][1222]在0℃下，向方法m1异构体2(13mg，43μmol)于thf(4ml)中的搅拌溶液中加入三光气(13mg，43μmol)和tea(11mg，108μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(18mg，86μmol)于thf(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(73mg，722μmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(18mg，144μmol)。将混合物在60℃下搅拌12小时。将混合物倒入到水(40ml)中，并用etoac(3x40ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(15.8mg，42％产率)。实例35的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1223]实例35：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.70(s,1h),9.38(s,1h),8.97(d,j＝2.4hz,1h),8.60(d,j＝2.4hz,1h),8.23(s,2h),7.36(t,j＝54.3hz,1h),7.08(s,1h),4.88(d,j＝11.4hz,1h),4.32(d,j＝11.4hz,1h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z514[m+h]+。[1224]方法w1[1225][1226]实例36：(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1227]步骤1：5-(二氟甲基)-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-胺[1228][1229]向(5-(二氟甲基)-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(方法v1步骤2；200mg，642μmol)于dcm(20ml)中的搅拌溶液中加入tfa(2.9g，25.7mmol)。将混合物在室温下搅拌2小时。将所得混合物在减压下浓缩。将残留物施加到硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:1)洗脱，以得到呈黄色固体的5-(二氟甲基)-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-胺(110mg，81％产率)。1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ:8.41(d,j＝1.2hz,1h),8.00-8.04(m,1h),7.87(d,j＝1.2hz,1h),7.46(d,j＝3.0hz,1h),7.08(t,j＝54.9hz,1h)。lc-ms:m/z212[m+h]+。[1230]步骤2：(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1231][1232]根据方法v1步骤5，通过使用5-(二氟甲基)-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-胺和方法m1异构体2制备标题化合物。实例36的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1233]实例36：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.70(s,1h),9.38(s,1h),8.99(d,j＝2.4hz,1h),8.80(d,j＝1.2hz,1h),8.62(d,j＝2.4hz,1h),8.04(d,j＝2.4hz,1h),7.43(t,j＝54.0hz,1h),7.09(s,1h),4.88(d,j＝11.4hz,1h),4.32(d,j＝11.4hz,1h),2.00(s,3h)。lc-ms:m/z514[m+h]+。[1234]实例37：(r)-2-氯-n-(4,4-二氟环己基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1235]步骤1：(r)-2-氯-n-(4,4-二氟环己基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1236][1237]根据方法m1步骤2，通过使用4,4-二氟环己-1-胺盐酸盐和方法m1异构体2制备标题化合物。实例37中的非对映异构体对的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1238]实例37：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.30(s,1h),7.00(s,1h),6.91(d,j＝7.5hz,1h),4.58(d,j＝11.7hz,1h)。4.00(d,j＝11.7hz,1h),3.73-3.80(m,1h),1.85-2.04(m,9h),1.56-1.67(m,2h)。lc-ms:m/z438[m+h]+。[1239]方法x17,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1256][1257]对80mgn-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺进行手性hplc纯化(chiralpakia，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；等度20％b；220/254nm；rt1:8.496；rt2:10.912；注射体积：0.5ml；运行次数：7)。将第一个洗脱异构体(rt8.50分钟)浓缩并冻干，以得到呈灰白色固体的实例38(13.6mg，16％产率)。将第二个洗脱异构体(rt10.91分钟)浓缩并冻干，以得到呈灰白色固体的实例39(14.9mg，18％产率)。[1258]实例38：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.41(s,1h),8.58(s,1h),8.46(s,1h),7.96(s,2h),6.82(s,1h),6.36(d,j＝5.2hz,1h),4.61(d,j＝10.0hz,1h),4.08(d,j＝10.0hz,1h),2.06(s,3h)。lc-ms:m/z482[m+h]+。[1259]实例39：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.41(s,1h),8.58(s,1h),8.43(s,1h),7.96(s,2h),6.88(s,1h),6.36(d,j＝4.8hz,1h),4.61(d,j＝10.0hz,1h),4.08(d,j＝9.6hz,1h),2.06(s,3h)。lc-ms:m/z482[m+h]+。[1260]方法y1[1261][1262]实例40：(r)-n-(6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1263]步骤1：5-硝基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶和5-硝基-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)-3-(三氟甲基)吡啶[1264][1265]向2-氯-5-硝基-3-(三氟甲基)吡啶(2g，8.8mmol)于mecn(40ml)中的搅拌溶液中加入2h-三唑(670mg，9.7mmol)和k2co3(2.4g，51.8mmol)。将所得混合物在40℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。过滤反应混合物，并用etoac(3x50ml)洗涤收集的固体。将合并的有机层在减压下浓缩。将残留物施加在硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:3)洗脱，以得到呈白色固体的5-硝基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶(1.2g，52％产率)和呈白色固体的5-硝基-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)-3-(三氟甲基)吡啶(0.4g，17％产率)。[1266]5-硝基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.70(d,j＝4hz,1h),9.17(d,j＝4hz,1h),8.87(s,2h)。lc-ms:m/z260[m+h]+。[1267]5-硝基-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)-3-(三氟甲基)吡啶1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.71(d,j＝3.6hz,1h),9.22(d,j＝3.2hz,1h),8.86(d,j＝1.6hz,1h),8.10(d,j＝1.6hz,1h)。lc-ms:m/z260[m+h]+。[1268]步骤2：6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-胺[1269][1270]在25℃下，向5-硝基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-3-(三氟甲基)吡啶(1.2g，4.4mmol)的溶液中加入pd/c(10％，236mg)。将烧瓶抽空并用氮气冲洗三次，然后用氢气冲洗。将混合物在氢气气氛下在室温下搅拌1小时。将固体滤出。在减压下浓缩滤液。将残留物施加在硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:1)洗脱，以得到呈黄色油状物的6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-胺(800mg，78％产率)。lc-ms:m/z230[m+h]+。[1271]步骤3：(r)-n-(6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1272][1273]在25℃下，向6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-胺(32mg，135.6μmol)于thf(5ml)中的混合物中加入三光气(16mg，54.2μmol)和tea(12mg，135.6μmol)。将所得混合物在28℃下搅拌1小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(25mg，90.4μmol)于thf(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(92mg，2.7mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(23mg，180.8μmol)。将反应混合物在40℃下搅拌1小时。将残留物用水(50ml)稀释并用etoac(3x50ml)萃取。将合并的有机层用饱和氯化铵水溶液(3x50ml)洗涤，经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-n-(6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(18.1mg，54％产率)。实例40的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1274]实例40：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.86(s,1h),9.37(s,1h),9.08(d,j＝2hz,1h),8.72(d,j＝2.4hz,1h),8.20(s,2h),7.09(s,1h),4.86-4.89(m,1h),4.31-4.34(m,1h),2.00(s,3h)。lc-ms:m/z532[m+h]+。[1275]实例41：(r)-2-氯-n-(5-氰基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1276][1277]根据方法o1步骤3，通过使用5-氨基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)烟腈和方法m1异构体2制备标题化合物。实例41的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1278]实例41：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.82(s,1h),9.39(s,1h),8.96(s,1h),8.72(s,1h),8.29(s,2h),7.07(s,1h),4.83(d,j＝11.6hz,1h),4.29(d,j＝11.6hz,1h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z489[m+h]+。[1279]实例42：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-氰基吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1280][1281]在25℃下，向5-氨基-3-氯-吡啶-2-甲腈(20mg，130μmol)于thf(4ml)中的搅拌混合物中加入三光气(19mg，65μmol)和tea(16mg，162μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(30mg，108μmol)于thf(4ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(110mg，1.1mmol)和dmap(26mg，217μmol)。将反应混合物在60℃下搅拌2小时。向混合物中加入etoac(20ml)。将混合物用盐水(2x20ml)洗涤，经无水na2so4干燥并在减压下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-氰基吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(9.1mg，18％产率)。实例42的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1282]实例42：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.93(s,1h),9.33(s,1h),8.85(s,1h),8.45(s,1h),7.09(s,1h),4.85(d,j＝2.4hz,1h),4.35(d,j＝2.4hz,1h),1.97(s,3h)；lc-ms:m/z456[m+h]+。[1283]方法z1[1284][1285]实例43：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(羟甲基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1286]步骤1：5-溴-2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-3-氯吡啶[1287][1288]在氮气气氛下在0℃下，向(5-溴-3-氯吡啶-2-基)甲醇(500mg，2.25mmol)和tea(682.28mg，6.74mmol)于dmf(5ml)中的搅拌溶液中加入叔丁基氯二甲基硅烷(240.62mg，2.92mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。lcms显示反应完成。将溶液倒入盐水(10ml)中，并用etoac(3x10ml)萃取水层。将合并的有机层经无水na2so4干燥，并且在减压下浓缩。将残留物施加到硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:2)洗脱，以得到呈无色油状物的5-溴-2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-3-氯吡啶(580mg，77％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.53(d,j＝2.0hz,1h),7.82(d,j＝2.0hz,1h),4.85(d,j＝6.4hz,2h),0.91(s,9h),0.11(s,6h)。lcms(es,m/z):336[m+h]+。[1289]步骤2：n-(6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-5-氯吡啶-3-基)-1,1-二苯基甲亚胺[1290][1291]在氮气气氛下，向5-溴-2-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-3-氯吡啶(200mg，593.95umol)和二苯基甲亚胺(107.64mg，593.95umol)于二噁烷(5ml)中的搅拌溶液中加入xantphos(103.10mg，178.19μmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯-氯仿加合物(122.96mg，118.79μmol)和cs2co3(580.56mg，1.78mmol)。将所得混合物在110℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，然后倒入盐水(10ml)中。将水层分离并进一步用etoac(3x10ml)萃取。将合并的有机层经无水na2so4干燥，在减压下浓缩。将残留物施加到硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:3)洗脱，以得到n-(6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-5-氯吡啶-3-基)-1,1-二苯基甲亚胺(160mg，62％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:7.73-7.86(m,3h),7.53-7.59(m,1h),7.41-7.49(m,2h),7.28-7.36(m,3h),7.10-7.23(m,3h),0.87(s,9h),0.03(s,6h)。lcms(es,m/z):437[m+h]+。[1292]步骤3：6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-5-氯吡啶-3-胺[1293][1294]向n-(6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-5-氯吡啶-3-基)-1,1-二苯基甲亚胺(120mg，274.57μmol)的搅拌溶液中加入盐酸羟胺(38.16mg，549.14μmol)、acona(93.41mg，686.42μmol)和meoh(3ml)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。然后将溶液倒入冰水(10ml)中，分离残留物并用etoac(3x10ml)进一步萃取。将合并的有机层经无水na2so4干燥，在减压下浓缩。将残留物施加到硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:4)洗脱，以得到6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-5-氯吡啶-3-胺(60mg，80％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.03(s,1h),7.04(s,1h),4.81(s,2h),0.91(s,9h),0.11(s,6h)。lcms(es,m/z):273[m+h]+。[1295]步骤4：(r)-n-(6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1296][1297]向6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-5-氯吡啶-3-胺(29.59mg，108.44μmol)于thf(4ml)中的搅拌混合物中加入三光气(12.87mg，43.38μmol)和tea(10.97mg，108.44μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。向滤液中加入方法m1异构体2(20mg，72.29umol)、tea(73.16mg，722.95μmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(17.66mg，144.59μmol)的溶液。将所得混合物在40℃下搅拌12小时。将所得混合物在减压下浓缩。将残留物通过制备型tlc用meoh/dcm(1:30)纯化，以得到呈白色固体的(r)-n-(6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(20mg，40％产率)。lcms(es,m/z):575[m+h]+[1298]步骤5：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(羟甲基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1299][1300]向(r)-n-(6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)甲基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(18mg，31.28μmol)于thf(10ml)中的搅拌溶液中加入tbaf(1ml，3.45mmol，1m，于thf中)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(羟甲基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(6.2mg，43％产率)。实例43的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1301]实例43:1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.48(b,1h),9.34(s,1h),8.67(d,j＝2.0hz,1h),8.17(d,j＝2.0hz,1h),7.07(s,1h),5.15-5.30(m,1h),4.75-4.85(m,1h),4.60(d,j＝5.2hz,2h),4.30-4.23(m,1h),1.97(s,3h)。lcms(es,m/z):461[m+h]+。[1302]方法a2[1303][1304]实例44：(r)-n-(6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1305]步骤1：6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-胺[1306][1307]在25℃下，向5-硝基-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)-3-(三氟甲基)吡啶(方法y1步骤1)(0.46g，1.78mmol)的溶液中加入pd/c(10％，95mg)。将烧瓶抽空并用氮气冲洗三次，然后用氢气冲洗。将混合物在氢气气氛下在室温下搅拌1小时。过滤固体。在减压下浓缩滤液。将残留物施加到硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:1)洗脱，以得到呈黄色油状物的6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-胺(300mg，73％产率)。lc-ms:m/z230[m+h]+。[1308]步骤2：(r)-n-(6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1309][1310]在25℃下，向6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-胺(37mg，126.6μmol)于thf(6ml)中的混合物中加入三光气(19mg，65.1μmol)和tea(17mg，163.1μmol)。将所得混合物在28℃下搅拌1小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(30mg，108.7μmol)于thf(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(110mg，1.09mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(27mg，218.4μmol)。将反应混合物在40℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(50ml)稀释并用etoac(3x50ml)萃取。将合并的有机层用饱和的氯化铵水溶液(3x50ml)洗涤。将所得溶液经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-n-(6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(9.6mg，16％产率)。实例44的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1311]实例44：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.87(s,1h),9.38(s,1h),9.09(s,1h),8.67-8.73(m,2h),8.00(s,1h),7.10(s,1h),4.86-4.89(m,1h),4.31-4.34(m,1h),2.00(s,3h)。lc-ms:m/z532[m+h]+。[1312]方法b2[1313][1314]实例45：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(甲氧基甲基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1315]步骤1：(5-溴-3-氯吡啶-2-基)甲醇[1316][1317]在0℃下，向5-溴-3-氯吡啶甲酸甲酯(2.0g，8.0mmol)于meoh(30ml)中的搅拌溶液中加入nabh4(1.2g，32.0mmol)。将混合物在0℃下搅拌2小时。通在0℃下加入饱和nh4cl水溶液(20ml)来淬灭反应。用etoac(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(80ml)洗涤，并经无水na2so4干燥。过滤后，将滤液在真空下浓缩，以得到呈白色固体的(5-溴-3-氯吡啶-2-基)甲醇(1.8g，81％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:8.55(d,j＝2.1hz,1h),7.86(d,j＝2.1hz,1h),4.75(s,2h),3.97(s,1h)。lc-ms:m/z222[m+h]+。[1318]步骤2：5-溴-3-氯-2-(甲氧基甲基)吡啶[1319][1320]在氮气气氛下在0℃下，向(5-溴-3-氯吡啶-2-基)甲醇(1.0g，4.5mmol)于thf(50ml)中的搅拌溶液中分份加入nah(60％，于矿物油中，216mg，5.4mmol)。将混合物在0℃下搅拌30分钟。将mei(955mg，6.7mmol)加入混合物中。将混合物在25℃下搅拌1小时。通过在0℃下加入水/冰(70ml)来淬灭反应。用etoac(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并在真空下浓缩。这导致5-溴-3-氯-2-(甲氧基甲基)吡啶(700mg，66％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.58(d,j＝2.0hz,1h),7.86(d,j＝2.0hz,1h),4.64(s,2h),3.49(s,3h)。lc-ms:m/z236[m+h]+。[1321]步骤3：n-(5-氯-6-(甲氧基甲基)吡啶-3-基)-1,1-二苯基甲亚胺[1322][1323]在n2下，向5-溴-3-氯-2-(甲氧基甲基)吡啶(300mg，1.3mmol)和二苯基甲亚胺(275mg，1.5mmol)于二噁烷(4ml)中的搅拌溶液中加入xantphos(220mg，380μmol)、pd2(dba)3(145mg，253μmol)和cs2co3(1.2g，3.8mmol)。将混合物在110℃下搅拌2小时。使混合物冷却至室温。将所得混合物用etoac(20ml)稀释并过滤。将滤饼用etoac(3x20ml)洗涤。将滤液在真空下浓缩。将残留物施加到硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:1)洗脱，以得到呈黄色固体的n-(5-氯-6-(甲氧基甲基)吡啶-3-基)-1,1-二苯基甲亚胺(600mg，70％产率)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:7.91(d,j＝2.4hz,1h),7.74(d,j＝2.4hz,1h),7.38-7.53(m,7h),7.27-7.36(m,3h),4.58(s,2h),3.43(s,3h)。lc-ms:m/z337[m+h]+。[1324]步骤4：5-氯-6-(甲氧基甲基)吡啶-3-胺[1325][1326]将n-[5-氯-6-(甲氧基甲基)-3-吡啶基]-1,1-二苯基-甲亚胺(600mg，1.9mmol)溶解在hcl(4ml，12n，于h2o中)中。将混合物在25℃下搅拌1小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物施加到硅胶柱色谱上并用meoh/dcm(1:10)洗脱，以得到呈白色固体的5-氯-6-(甲氧基甲基)吡啶-3-胺(110mg，35％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:7.99(d,j＝2.4hz,1h),7.00(d,j＝2.4hz,1h),4.58(s,2h),3.64-3.98(m,2h),3.47(s,3h)。lc-ms:m/z173[m+h]+。[1327]步骤5：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(甲氧基甲基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1328][1329]在0℃下，向5-氯-6-(甲氧基甲基)吡啶-3-胺(15mg，86μmol)和三光气(13mg，43μmol)于thf(4ml)中的搅拌溶液中加入tea(11mg，107μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(20mg，72μmol)于thf(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(73mg，722μmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(18mg，144μmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将混合物倒入到水(40ml)中，并用etoac(3x40ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(甲氧基甲基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(12.8mg，37％产率)。实例45的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1330]实例45：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.43(s,1h),9.34(s,1h),8.68(d,j＝2.1hz,1h),8.21(d,j＝2.1hz,1h),7.07(s,1h),4.82(d,j＝11.4hz,1h),4.54(s,2h),4.27(d,j＝11.4hz,1h),3.03-3.32(m,3h),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z475[m+h]+。[1331]方法c2[1332][1333]实例46和实例47：由含有(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((r)-四氢-2h-吡喃-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((s)-四氢-2h-吡喃-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的混合物获得的单一立体异构体。[1334]步骤1：5-氯-6-(3,4-二氢-2h-吡喃-6-基)吡啶-3-胺[1335][1336]向6-溴-5-氯吡啶-3-胺(1g，4.8mmol)于二噁烷(16ml)和h2o(4ml)中的溶液中加入2-(3,4-二氢-2h-吡喃-6-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷(1.2g，5.8mmol)、k3po4(3.1g，14.5mmol)和xphos-pd-2g(427mg，482.2μmol)。将所得混合物在90℃下搅拌3小时。使混合物冷却至室温并在真空下浓缩。将残留物用水(100ml)稀释，并用nahco3(饱和，水溶液)调整至ph7-8。用etoac(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物施加到硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:3)洗脱，以得到呈黄色固体的5-氯-6-(3,4-二氢-2h-吡喃-6-基)吡啶-3-胺(380mg，37％产率)。lc-ms:m/z211[m+h]+。[1337]步骤2：5-氯-6-(四氢-2h-吡喃-2-基)吡啶-3-胺[1338][1339]在h2(5atm)下，向5-氯-6-(3,4-二氢-2h-吡喃-6-基)吡啶-3-胺(385mg，1.8mmol)于etoh(5ml)中的溶液中加入rhcl(pph3)3(485mg，541.5μmol)。将所得混合物在30℃下搅拌24小时。向反应混合物中加入水(100ml)。用etoac(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物施加到硅胶柱色谱上并用etoac/pe(1:3)洗脱，以得到呈黄色固体的5-氯-6-(四氢-2h-吡喃-2-基)吡啶-3-胺(150mg，39％产率)。lc-ms:m/z213[m+h]+。[1340]步骤3：(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(四氢-2h-吡喃-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1341][1342]在25℃下，向5-氯-6-(四氢-2h-吡喃-2-基)吡啶-3-胺(30mg，141.1μmol)于thf(2ml)中的混合物中加入三光气(25mg，84.6μmol)和tea(21mg，211.5μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(39mg，141.1μmol)于thf(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(142mg，1.41mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(34mg，282.0μmol)。将反应混合物在40℃下搅拌1小时。向反应混合物中加入etoac(50ml)，并将有机层用盐水(2x50ml)洗涤，经无水na2so4干燥并浓缩。将残留物通过制备型tlc用meoh/dcm(1:10)纯化，以得到呈淡黄色固体的(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(四氢-2h-吡喃-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(20mg，28％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.33(s,2h),8.66(d,j＝2.4hz,1h),8.10(d,j＝2.4hz,1h),6.99(s,1h),4.81(d,j＝11.6hz,1h),4.68-4.71(m,1h),4.26(d,j＝11.6hz,1h),3.94(s,1h),3.37(s,1h),1.97(s,5h),1.48-1.59(m,4h)；lc-ms:m/z515[m+h]+。[1343]步骤4：分离立体异构体以获得(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((r)-四氢-2h-吡喃-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((s)-四氢-2h-吡喃-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺。[1344][1345]对20mg(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(四氢-2h-吡喃-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺进行手性hplc纯化(色谱柱：chiralartcellulose-sc，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；等度50％b；220/254nm；rt1:5.952；rt2:7.605；注射体积：1ml；运行次数：4)。将第一个洗脱异构体(rt5.95分钟)浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例46(8.0mg，29％产率)。将第二个洗脱异构体(rt7.61分钟)浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例47(8.5mg，32％产率)。实例46和实例47的对应的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1346]实例46：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.33(s,2h),8.67(d,j＝2.4hz,1h),8.10(d,j＝2.4hz,1h),6.99(s,1h),4.76(d,j＝11.6hz,1h),4.63(dd,j＝11.6hz,1.6hz,1h),4.18(d,j＝11.6hz,1h),3.94(d,j＝11.6hz,1h),3.45(m,1h),1.97(s,5h),1.48-1.59(m,4h)；lc-ms:m/z515[m+h]+。[1347]实例47：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.33(s,2h),8.66(d,j＝2.4hz,1h),8.19(d,j＝2.4hz,1h),7.07(s,1h),4.81(d,j＝11.6hz,1h),(4.70(dd,j＝11.6hz,1.6hz,1h),4.25(d,j＝11.6hz,1h),3.94(d,j＝11.6hz,1h),3.45(m,1h),1.97(s,5h),1.48-1.59(m,4h)；lc-ms:m/z515[m+h]+。[1348]方法d2[1349][1350]实例48：(r)-n-(6-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1h-吡唑-1-基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1351]步骤1：1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-醇[1352][1353]将2,3-二氯-5-硝基-吡啶(1.5g，7.77mmol)、1h-吡唑-4-醇(653mg，7.8mmol)和k2co3(3.2g，23.3mmol)于dmf(30ml)中的溶液在25℃下搅拌15小时。将所得混合物倒入冰/水(200ml)中，用etoac(3x200ml)萃取。将合并的有机层用水(3x200ml)、盐水(500ml)洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并在减压下浓缩。将残留物通过硅胶柱色谱法进行纯化，用etoac/pe(3:7)洗脱，以得到呈黄色固体的1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-醇(1.5g，80％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.45(s,1h),9.22(d,j＝4.0hz,1h),8.87(d,j＝4.0hz,1h),7.94(d,j＝4.0hz,1h),7.66(s,1h)。lc-ms(es,m/z):241[m+h]+。[1354]步骤2：1-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-醇[1355][1356]向1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-醇(700mg，2.9mmol)于etoh(30ml)和h2o(30ml)中的搅拌溶液中加入铁(682mg，12.2mmol)和氯化铵(654mg，12.2mmol)。将所得混合物在95℃下搅拌1小时。将混合物冷却至室温。将反应混合物冷却并过滤，并将滤液在真空下浓缩。将残留物用制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的1-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-醇(410mg，67％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.70(s,1h),7.65(d,j＝4.0hz,1h),7.42(s,1h),7.27(s,1h),7.14(d,j＝4.0hz,1h),5.88(s,2h)。lc-ms(es,m/z):211[m+h]+[1357]步骤3：6-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1h-吡唑-1-基)-5-氯吡啶-3-胺[1358][1359]在氮气气氛下在0℃下，向1-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-醇(150mg，712.2μmol)和咪唑(73mg，1.1mmol)于dmf(5ml)中的搅拌溶液中逐滴加入tbscl(129mg，854.6μmol)。将所得混合物搅拌2小时。lcms显示反应完成。将溶液倒入冰水(10ml)中，并用etoac(3x10ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水na2so4干燥，并且在减压下浓缩。将残留物通过硅胶柱色谱纯化，用etoac/pe(1:4)洗脱，以得到呈黄色油状物的6-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1h-吡唑-1-基)-5-氯吡啶-3-胺(200mg，83％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:7.87(d,j＝2.8hz,1h),7.52(d,j＝0.8hz,1h),7.41(d,j＝0.8hz,1h),7.14(d,j＝2.8hz,1h),0.98(s,9h),0.19(s,6h)。lc-ms(es,m/z):325[m+h]+。[1360]步骤4：(r)-n-(6-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1h-吡唑-1-基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1361][1362]向6-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1h-吡唑-1-基)-5-氯吡啶-3-胺(28mg，86.8μmol)于thf(4ml)中的搅拌混合物中加入三光气(13mg，43.4μmol)和tea(11mg，108.4μmol)。将混合物在23℃下搅拌1小时。将所得混合物过滤，并将滤液加入到方法m1异构体2(20mg，72.3μmol)、n,n-二甲基吡啶-4-胺(18mg，144.6μmol)和tea(73mg，723.0μmol，101μl)于thf(4ml)中的溶液中。将反应混合物在40℃下搅拌12小时。将反应混合物浓缩。将残留物通过制备型tlc用meoh/dcm(1:30)纯化，以得到呈白色固体的(r)-n-(6-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1h-吡唑-1-基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(31mg，69％产率)。lcms(es,m/z):627[m+h]+。[1363]步骤5：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-羟基-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1364][1365]在25℃下，向(r)-n-(6-(4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-1h-吡唑-1-基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(30mg，47.8μmol)于thf(3ml)中的搅拌混合物中逐滴加入tbaf(0.3ml，1.0mmol，1m，于thf中)。将混合物在相同温度下搅拌1小时，lcms显示反应完成。在减压下浓缩混合物，并将残留物通过制备型hplc纯化。将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-羟基-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(12.1mg，48％产率)。实例48的对应的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1366]实例48：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.52(s,1h),9.35(s,1h),8.96(s,1h),8.61(d,j＝2.0hz,1h),8.34(d,j＝2.0hz,1h),7.68(s,1h),7.41(s,1h),7.07(s,1h),4.81(d,j＝11.2hz,1h),4.26(d,j＝11.2hz,1h),1.98(s,3h)。lcms(es,m/z):513[m+h]+。[1367]方法e27,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1379][1380]将5-氯-6-(二氟甲氧基)吡啶-3-胺(20mg，0.1mmol)加入到碳酸双(三氯甲基)酯(15mg，0.05mmol)和n,n-二乙基乙胺(17mg，0.2mmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。将混合物在23℃下搅拌1小时。将所得混合物过滤，并将滤液加入到方法m1异构体2(23mg，0.1mmol)、n,n-二乙基乙胺(86mg，0.8mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(21mg，0.2mmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。将所得混合物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(11mg，26％产率)。实例49的对应的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1381]实例49：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.31(s,1h),9.03(s,1h),8.09(d,j＝2.8hz,1h),8.03(d,j＝2.4hz,1h),7.95(t,j＝59.6hz,1h),7.06(s,1h),4.70(d,j＝11.6hz,1h),4.19(d,j＝11.2hz,1h),1.97(s,3h)。lc-ms:m/z497[m+h]+。[1382]方法f2[1383][1384]实例50：(r)-2-氯-n-(5-氯-1-(二氟甲基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1385]步骤1：5-氨基-3-氯-1-(二氟甲基)吡啶-2(1h)-酮[1386][1387]向3-氯-1-(二氟甲基)-5-硝基吡啶-2(1h)-酮(方法e2步骤1；70mg，0.3mmol)于乙醇(1.5ml)和水(0.5ml)中的溶液中加入氯化铵(33mg，0.6mmol)和铁(104mg，1.9mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却并过滤，并将滤液在真空下浓缩。用etoac(3x10ml)萃取残留物，并将合并的有机层经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物施加到硅胶柱上并用etoac/pe(1:3)洗脱，以得到呈无色油状物的5-氨基-3-氯-1-(二氟甲基)吡啶-2(1h)-酮(20mg，26％产率)。lc-ms:m/z195[m+h]+。[1388]步骤2：(r)-2-氯-n-(5-氯-1-(二氟甲基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1389][1390]将方法m1异构体2(17mg，0.06mmol)加入到三光气(11mg，0.03mmol)和tea(12mg，0.12mmol)于thf(1ml)中的溶液中。将混合物在23℃下搅拌1小时。将所得混合物过滤，并将滤液加入到5-氨基-3-氯-1-(二氟甲基)吡啶-2(1h)-酮(16mg，0.1mmol)、tea(62mg，0.6mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(15mg，0.mmol)于thf(1ml)中的溶液中。将反应混合物在40℃下搅拌2小时。将所得混合物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈淡黄色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-1-(二氟甲基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(6.4mg，21％产率)。实例50的对应的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1391]实例50：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.39(s,1h),9.33(s,1h),8.37(d,j＝2.4hz,1h),8.32(d,j＝2.4hz,1h),7.71(t,j＝72.4hz,1h),7.07(s,1h),4.78(d,j＝11.6hz,1h),4.25(d,j＝11.6hz,1h),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z497[m+h]+。[1392]方法g2[1393][1394]实例51：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1395]步骤1：3-氯-n-甲基-5-硝基吡啶-2-胺[1396][1397]将2,3-二氯-5-硝基吡啶(500mg，2.6mmol)于menh2(2m，于thf中，10ml)中的溶液在90℃下搅拌2小时。将混合物过滤。将滤液浓缩，以得到呈黄色固体的3-氯-n-甲基-5-硝基吡啶-2-胺(470mg，97％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:9.02(s,1h),8.28(s,1h),5.79(s,1h),3.17(s,3h)；lc-ms:m/z188[m+h]+。[1398]步骤2：3-氯-n2-甲基吡啶-2,5-二胺[1399][1400]向3-氯-n-甲基-5-硝基-吡啶-2-胺(470mg，2.5mmol)于etoh/h2o(4:1，10ml)中的搅拌溶液中加入铁(279mg，5.0mmol)和nh4cl(670mg，12.5mmol)。将所得混合物在90℃下搅拌1小时。过滤混合物，并将滤液用水(50ml)稀释并用etoac(3x50ml)萃取。将合并的有机层经无水na2so4干燥并在真空下浓缩，以得到呈红色油状物的3-氯-n2-甲基吡啶-2,5-二胺(160mg，40％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:7.69(s,1h),7.06(s,1h),4.61(s,1h),3.01(s,3h)。lc-ms:m/z158[m+h]+。[1401]步骤3：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1402][1403]在25℃下，向方法m1异构体2(20mg，74μmol)于thf(2ml)中的搅拌混合物中加入三光气(13mg，44μmol)和tea(11mg，111μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将所得滤液加入到3-氯-n2-甲基吡啶-2,5-二胺(35mg，222μmol)于thf(2ml)中的混合物中。加入tea(75mg，740μmol)和dmap(18mg，148μmol)，并将反应混合物在40℃下搅拌2小时。向混合物中加入etoac(50ml)，并将所得有机层用盐水(2x50ml)洗涤，干燥并浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(甲基氨基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(6.6mg，19.37％产率)。实例51的对应的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1404]实例51：1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ:9.34(s,1h),8.07(s,1h),7.80(s,1h),6.78(s,1h),4.7(d,j＝2.4hz,1h),4.16(d,j＝2.4hz,1h),2.98(s,3h),2.05(s,3h)；lc-ms:m/z460[m+h]+。[1405]方法h2[1406][1407]实例52：(r)-2-氯-n-(5-氯-2-甲氧基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1408]步骤1：2-溴-5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺[1409][1410]在0℃下，向5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；500mg，2.6mmol)于dmf(10ml)中的搅拌溶液中缓慢加入dmf(10ml)中的nbs(682mg，3.8mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将所得混合物用水(20ml)稀释，并用etoac(3x20ml)萃取混合物。将合并的有机层经无水na2so4干燥，并浓缩。将残留物施加到硅胶柱上并用etoac/pe(1:2)洗脱，以得到呈黄色固体的2-溴-5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(560mg，72％产率)。lc-ms:m/z274[m+h]+。[1411]步骤2：5-氯-2-甲氧基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺[1412][1413]向2-溴-5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(500mg，1.8mmol)于二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中缓慢加入meoh(0.5ml)中的甲醇钠(394mg，7.3mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌2小时。将混合物在减压下浓缩，并将残留物施加到硅胶柱上并用etoac/pe(1:2)洗脱，以得到呈黄色固体的5-氯-2-甲氧基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(350mg，71％产率)。lc-ms:m/z226[m+h]+。[1414]步骤3：(r)-2-氯-n-(5-氯-2-甲氧基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1415][1416]根据方法o1步骤3，通过使用5-氯-2-甲氧基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺和方法m1异构体2制备标题化合物。实例52的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1417]实例52：1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:9.45(s,1h),8.84(s,1h),7.95(s,2h),7.10(s,1h),6.80(s,1h),4.56(d,j＝10.2hz,1h),4.15(s,3h),4.08(d,j＝10.2hz,1h),2.12(s,3h)。lc-ms:m/z528[m+h]+。[1418]方法i2[1419][1420]实例53和54：由含有(r)-2-氯-n-((s)-3,3-二氟环己基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-((r)-3,3-二氟环己基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体。[1421]步骤1：(8r)-2-氯-n-(3,3-二氟环己基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1422][1423]在0℃下，向方法m1异构体2(20mg，72.3μmol)和碳酸双(三氯甲基)酯(13mg，43.4μmol)于thf(4ml)中的搅拌溶液中加入n,n-二乙基乙胺(11mg，108.4μmol，15.1μl)。将混合物在28℃下搅拌0.5小时。将所得混合物加入到3,3-二氟环己胺盐酸盐(15mg，86.7μmol)于thf(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入n,n-二乙基乙胺(73mg，722.9μmol，100.7μl)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(18mg，144.6μmol)。将混合物在28℃下搅拌2小时。将所得混合物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到20mg(8r)-2-氯-n-(3,3-二氟环己基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺。lc-ms:m/z438[m+h]+。[1424]步骤2：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-n-((s)-3,3-二氟环己基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-((r)-3,3-二氟环己基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1425][1426]对20mg(8r)-2-氯-n-(3,3-二氟环己基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺进行手性hplc纯化(chiralpakif，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；等度5％b，27分钟内；220/254nm；rt1:18.869；rt2:23.747；注射体积：0.5ml；运行次数：9)。将第一个洗脱异构体(rt18.87分钟)浓缩并冻干，以得到实例53(11.8mg，37％产率)。将第二个洗脱异构体(rt23.75分钟)浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例54(5.9mg，18％产率)。[1427]实例53：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.30(s,1h),7.07(d,j＝7.5hz,1h),7.01(s,1h),4.54(d,j＝11.4hz,1h),4.01(d,j＝11.4hz,1h),3.76-3.79(m,1h),2.21-2.31(m,1h),2.00-2.08(m,1h),1.93(s,3h),1.76-1.88(m,4h),1.37-1.46(m,2h)。lc-ms:m/z438[m+h]+。[1428]实例54：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.30(s,1h),7.09(br,1h),7.01(s,1h),4.55(d,j＝10.5hz,1h),4.01(d,j＝1.05hz,1h),3.75-3.79(m,1h),2.20-2.30(m,1h),1.60-2.16(m,8h),1.24-1.48(m,2h)。lc-ms:m/z438[m+h]+。[1429]方法j2[1430][1431]实例55和56：由含有(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((s)-1,2-二羟乙基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((r)-1,2-二羟乙基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的混合物获得的单一对映异构体[1432]步骤1：3-氯-5-硝基-2-乙烯基吡啶[1433][1434]在氮气气氛下，向2-溴-3-氯-5-硝基吡啶(6.0g，25.2mmol)于二噁烷(20ml)和水(2ml)中的溶液中加入csf(11.5g，75.6mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧硼烷(5.8g，37.8mmol)和pd(pph3)2cl2(1.8g，2.5mmol)。将所得混合物在85℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(200ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的3-氯-5-硝基-2-乙烯基吡啶(3.3g，51％产率)。lc-ms:m/z185[m+h]+。[1435]步骤2：1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)乙烷-1,2-二醇[1436][1437]向3-氯-5-硝基-2-乙烯基吡啶(3.3g，17.8mmol)于t-buoh(40ml)和水(10ml)中的溶液中加入k2o4os·2h2o(2.3g，6.2mmol)和4-甲基吗啉4-氧化物(4.2g，35.6mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法直接纯化，以得到呈黄色固体的1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)乙烷-1,2-二醇(400mg，10％产率)。lc-ms:m/z219[m+h]+。[1438]步骤3：3-氯-5-硝基-2-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)吡啶[1439][1440]在0℃下，向1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)乙烷-1,2-二醇(400mg，1.8mmol)于二氯甲烷(3ml)中的溶液中加入tbsotf(1.4g，5.4mmol)和diea(820mg，6.3mol)。将反应混合物在0℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用水(50ml)稀释。然后用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用饱和nahco3水溶液(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用67％石油醚和33％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的3-氯-5-硝基-2-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)吡啶(200mg，24％产率)。lc-ms:m/z447[m+h]+。[1441]步骤4：5-氯-6-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)吡啶-3-胺[1442][1443]向3-氯-5-硝基-2-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)吡啶(200mg，447.0μmol)于乙醇(9ml)和水(3ml)中的溶液中加入fe(123mg，2.2mmol)、nh4cl(95mg，1.7mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌1小时。通过加入水(50ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用67％石油醚和33％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的5-氯-6-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)吡啶-3-胺(120mg，64％产率)。lc-ms:m/z417[m+h]+。[1444]步骤5：(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1445][1446]在25℃下，向3-氯-5-硝基-2-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)吡啶(50mg，120.0μmol)于四氢呋喃(3ml)中的混合物中加入三光气(48mg，72.2μmol)和tea(41mg，180.1μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(33mg，120.0μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(121mg，1.2mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(42mg，240.0μmol)。将反应混合物在40℃下搅拌1小时。将残留物用水(50ml)稀释。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用20％石油醚和80％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈灰白色固体的(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(50mg，53％产率)。lc-ms:m/z719[m+h]+。[1447]步骤6：(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(1,2-二羟乙基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1448][1449]在25℃下，向(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(50mg，69.6μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中加入tbaf(2ml，2mmol，1m，于四氢呋喃中)。将所得混合物在25℃下搅拌4小时。将反应混合物在减压下浓缩。将残留物用水(50ml)稀释。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用饱和nh4cl水溶液(3x50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型tlc用乙酸乙酯纯化，以得到30mg粗产物(90％纯度)。对粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(1,2-二羟乙基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(20mg，54％产率)。lc-ms:m/z491[m+h]+。[1450]步骤7：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((s)-1,2-二羟乙基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((r)-1,2-二羟乙基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺。[1451][1452]对20mg(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(1,2-二羟乙基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺进行手性hplc纯化(色谱柱：chiralpakif，2x25cm，5um；流动相a：mtbe(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在21分钟内，10b到10b；220/254nm；rt1:12.1；rt2:14.928；注射体积：1.5ml；运行次数：2)。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例55(5.0mg，19％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例56(4.5mg，18％产率)。实例55和56的对映异构体可以使用步骤5中方法m1异构体1类似地制备。[1453]实例55：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.41(s,1h),9.34(s,1h),8.69(d,j＝2.1hz,1h),8.15(d,j＝2.1hz,1h),7.08(s,1h),5.17-5.19(m,1h),4.93-4.99(m,1h),4.81(d,j＝11.4hz,1h),4.67-4.71(m,1h),4.27(d,j＝11.4hz,1h),3.63-3.73(m,2h),1.98(s,3h)；lc-ms:m/z491[m+h]+。[1454]实例56：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.39(s,1h),9.34(s,1h),8.69(d,j＝2.1hz,1h),8.15(d,j＝2.1hz,1h),7.07(s,1h),5.16-5.18(m,1h),4.93-4.99(m,1h),4.82(d,j＝11.7hz,1h),4.67-4.71(m,1h),4.27(d,j＝11.7hz,1h),3.63-3.73(m,2h),1.98(s,3h)；lc-ms:m/z491[m+h]+[1455]方法k2[1456][1457]实例57：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(羟甲基)-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1458]步骤1：1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-甲酸乙酯[1459][1460]在25℃下，向1h-吡唑-4-甲酸乙酯(1.0g，7.1mmol)和2,3-二氯-5-硝基吡啶(1.4g，7.1mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(20ml)中的搅拌混合物中加入k2co3(2.9g，21.4mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用乙酸乙酯(150ml)稀释。将所得溶液用水(2x100ml)和盐水(2x100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-甲酸乙酯(1.4g，64％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:9.26(d,j＝2.4hz,1h),8.86(s,1h),8.76(d,j＝2.1hz,1h),8.24(s,1h),4.35-4.42(m,2h),1.41(t,j＝7.2hz,3h)。lc-ms:m/z297[m+h]+。[1461]步骤2：1-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-甲酸乙酯[1462][1463]在25℃下，向1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-甲酸乙酯(500mg，1.7mmol)于乙醇(15ml)和水(5ml)中的搅拌混合物中加入fe(282mg，5.1mmol)和nh4cl(459mg，8.4mmol)。将混合物在80℃下搅拌1小时。冷却至25℃后，将反应混合物用水(50ml)稀释。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的1-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-甲酸乙酯(410mg，91％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.35(s,1h),8.11(s,1h),7.86(d,j＝2.4hz,1h),7.14(d,j＝2.8hz,1h),4.29-4.35(m,2h),3.86(brs,2h),1.25(t,j＝6.8hz,3h)。lc-ms:m/z267[m+h]+。[1464]步骤3：(r)-1-(3-氯-5-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-甲酸乙酯[1465][1466]向方法m1异构体2(50mg，180.7μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入三光气(32mg，108.4μmol)和tea(27mg，271.1μmol)。将反应混合物在25℃下搅拌30分钟，然后过滤。将滤液加入到1-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-甲酸乙酯(96.40mg，361.47μmol)于四氢呋喃(5ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(44mg，361.5μmol)和tea(183mg，1.8mmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物使用25％石油醚和75％乙酸乙酯通过制备型tlc进行纯化，以得到呈淡黄色固体的(r)-1-(3-氯-5-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-甲酸乙酯(45mg，43％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.63(br,1h),9.34(s,1h),8.77(s,1h),8.69(d,j＝2.1hz,1h),8.43(d,j＝2.4hz,1h),8.14(s,1h),7.06(s,1h),4.83(d,j＝8.4hz,1h),4.18-4.29(m,3h),1.97(s,3h),1.30-1.28(m,3h)。lc-ms:m/z569[m+h]+。[1467]步骤4：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(羟甲基)-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1468][1469]在0℃下，向(r)-1-(3-氯-5-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-甲酸乙酯(50mg，87.8μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌混合物中逐滴加入dibal-h(0.45ml，9.0mmol，2m，于四氢呋喃中)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物倒入冰/水(30ml)中。用乙酸乙酯(3x20ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。对粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(羟甲基)-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(5.3mg，11％产率)。实例57的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1470]实例57：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.37(s,1h),8.60-8.62(m,1h),8.38-8.43(m,2h),8.06(s,1h),7.71(s,1h),7.07(s,1h),4.96-5.02(m,1h),4.79(d,j＝11.6hz,1h),4.45(s,2h),4.26(d,j＝11.6hz,1h),1.97(s,3h)。lc-ms:m/z527[m+h]+。[1471]方法l2[1472][1473]实例58：(r)-n-(2-((s)-2-氨基丙氧基)-6-甲基吡啶-4-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1474]步骤1：(s)-(1-((6-甲基-4-硝基吡啶-2-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯[1475][1476]向2-氯-6-甲基-4-硝基吡啶(5g，29.0mmol)于二噁烷(50ml)中的搅拌混合物中加入(s)-(1-羟基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(10.2g，58.0mmol)、pd(oac)2(1.3g，5.8mmol)、[1,1'-联苯]-2-基二叔丁基膦(2.2g，7.2mmol)和cs2co3(18.9g，57.8mmol)。将反应混合物在氮气下在25℃下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用85％石油醚和15％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(s)-(1-((6-甲基-4-硝基吡啶-2-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(4.6g，50％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:7.58(d,j＝1.8hz,1h),7.25(d,j＝1.8hz,1h),6.86(d,j＝8.3hz,1h),4.10-4.23(m,2h),3.81-3.91(m,1h),2.52(d,j＝0.6hz,3h),1.36(s,9h),1.11(d,j＝6.8hz,3h)。lc-ms:m/z312[m+h]+[1477]步骤2：(s)-(1-((4-氨基-6-甲基吡啶-2-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯[1478][1479]向(s)-(1-((6-甲基-4-硝基吡啶-2-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1g，3.2mmol)于甲醇(200ml)中的搅拌溶液中加入pd/c(171mg，10％)。将反应混合物在一个氢气气氛下在25℃下搅拌1小时。将反应混合物过滤，并将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(s)-(1-((4-氨基-6-甲基吡啶-2-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(700mg，75％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:6.88(d,j＝9hz,1h),6.01(d,j＝3hz,1h),5.81(s,2h),5.62(d,j＝3hz,1h),3.91-3.95(m,2h),3.67-3.82(m,1h),2.14(s,3h),1.38(s,9h),1.06(d,j＝6hz,3h)。lc-ms:m/z282[m+h]+。[1480]步骤3：((s)-1-((4-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-6-甲基吡啶-2-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯[1481][1482]向(s)-(1-((4-氨基-6-甲基吡啶-2-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(62mg，216.9μmol)于四氢呋喃(8ml)中的搅拌溶液中加入三光气(26mg，86.8μmol)和tea(22mg，21.8μmol)。将所得混合物在28℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(40mg，145.4μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(36mg，290.9μmol)和tea(147mg，1.5mmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将混合物用水(20ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x40ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，并经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的((s)-1-((4-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-6-甲基吡啶-2-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50mg，47％产率)。lc-ms:m/z584[m+h]+[1483]步骤4：(r)-n-(2-((s)-2-氨基丙氧基)-6-甲基吡啶-4-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1484][1485]向((s)-1-((4-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-6-甲基吡啶-2-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(40mg，68.6μmol)于二氯甲烷(4.8ml)中的搅拌溶液中加入tfa(1.2ml)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。向残留物中加入饱和nahco3水溶液(40ml)。用乙酸乙酯(3x40ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，并经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-n-(2-((s)-2-氨基丙氧基)-6-甲基吡啶-4-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(12.5mg，37％产率)。实例58的差向异构体((s)-n-(2-((s)-2-氨基丙氧基)-6-甲基吡啶-4-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺)可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1486]实例58：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.32(s,1h),7.06(s,1h),7.01(d,j＝0.8hz,1h),6.94(d,j＝1.2hz,1h),4.82-4.85(m,1h),4.21-4.24(m,1h),3.94-3.96(m,2h),3.10-3.12(m,1h),2.33(s,3h),1.96(s,3h),1.04(d,j＝6.4hz,3h)。lc-ms:m/z484[m+h]+。[1487]方法m2[1488][1489]实例59：(r)-11-氯-3-甲基-3-(三氟甲基)-n-[6-(三氟甲基)哒嗪-4-基]-1,5,8,12-四氮杂三环[7.3.0.02,6]十二碳-2(6),7,9,11-四烯-5-甲酰胺[1490]步骤1：6-碘哒嗪-4-甲酸甲酯[1491][1492]向6-氯哒嗪-4-甲酸甲酯(3.0g，17.4mmol)于氢碘酸(30ml，57％)中的搅拌溶液中加入nai(3.4g，23.0mmol)。将反应物在40℃下搅拌16小时。将混合物冷却至室温。将ph用饱和nahco3水溶液调整到7。用乙酸乙酯(3x150ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用饱和nh4cl水溶液(150ml)、盐水(150ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈黄色固体的6-碘哒嗪-4-甲酸甲酯(2.5g，54％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:9.61(d,j＝1.8hz,1h),8.39(d,j＝1.8hz,1h),4.04(s,3h)。lc-ms:m/z265[m+h]+。[1493]步骤2：6-(三氟甲基)哒嗪-4-甲酸甲酯466[m+h]+。[1503]实例60：(r)-2-氯-n-(2-(二氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1504][1505]根据方法m1步骤2，通过使用2-(二氟甲基)吡啶-4-胺和方法m1异构体2制备标题化合物。实例60的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1506]实例60：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.41(s,1h),8.59(d,j＝5.6hz,1h),7.69-7.72(m,2h),6.80-6.49(m,3h),4.57(d,j＝10.4hz,1h),4.06(d,j＝10.4hz,1h),2.08(s,3h)。lc-ms:m/z447[m+h]+。[1507]方法n2[1508][1509]实例61：(r)-2-氯-n-(2-氰基-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1510]步骤1：4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶甲腈[1511][1512]向2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-4-胺(250mg，1.3mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(2ml)中的搅拌溶液中加入zn(cn)2(149mg，1.3mmol)和pd(pph3)4(73mg，63.6μmol)。将反应混合物在氮气下在150℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(10ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用20％石油醚和80％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶甲腈(170mg，71％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.21(br,2h),7.14(d,j＝2.0hz,1h),7.09(d,j＝2.0hz,1h)。lc-ms:m/z188[m+h]+。[1513]步骤2：(r)-2-氯-n-(2-氰基-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1514][1515]向方法m1异构体2(20mg，72.3μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入三光气(13mg，43.4μmol)和tea(11mg，108.4μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶甲腈(27mg，144.6μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(18mg，144.6μmol)和tea(73mg，723.0μmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(2-氰基-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(5.2mg，14％产率)。实例61的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1516]实例61：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:10.12(s,1h),9.34(s,1h),8.39(d,j＝1.8hz,1h),8.31(d,j＝1.8hz,1h),7.11(s,1h),4.86(d,j＝11.7hz,1h),4.30(d,j＝11.7hz,1h),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z490[m+h]+。[1517]方法o2[1518][1519]实例62：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-(二氟甲基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1520]步骤1：4,4-二氟-3-氧代丁腈[1521][1522]向2,2-二氟乙酸甲酯(5.0g，45.4mmol)于四氢呋喃(50ml)中的搅拌溶液中加入t-buok(10.2g，90.9mmol)和乙腈(1.8g，45.4mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。通过加入水(500ml)来淬灭反应混合物。用二乙醚(3x300ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。这导致呈无色油状物的4,4-二氟-3-氧代丁腈(2.5g，45％产率)。lc-ms:m/z120[m+h]+。[1523]步骤2：5-(二氟甲基)-1h-吡唑-3-胺[1524][1525]向4,4-二氟-3-氧代丁腈(2.5g，21.0mmol)于乙醇(20ml)中的搅拌溶液中加入一水合肼(21g，42.0mmol)。将反应混合物在氮气下在90℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。通过加入水(200ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-(二氟甲基)-1h-吡唑-3-胺(700mg，25％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:11.9(s,1h),6.62(t,j＝56.0hz,1h),6.78(s,1h),4.90(s,2h)。lc-ms:m/z134[m+h]+。[1526]步骤3：2-(二氟甲基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[1527][1528]将(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(方法k1步骤8；484mg，1.5mmol)、5-(二氟甲基)-1h-吡唑-3-胺(200mg，1.5mmol)、甲苯(10ml)和乙酸(1ml)放入100ml圆底烧瓶中。将混合物在95℃下搅拌15小时。将反应冷却至25℃，并在真空下浓缩。加入饱和nahco3水溶液(20ml)。用乙酸乙酯(3x30ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-(二氟甲基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(120mg，16％产率)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:8.35(s,1h),6.91(t,j＝56.0hz,1h),6.88(s,1h),4.03(d,j＝8.0hz,1h),3.62(d,j＝11.4hz,1h),1.90(s,9h),1.44(s,3h)。lc-ms:m/z393[m+h]+。[1529]步骤4：2-(二氟甲基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[1530][1531]将叔丁基2-(二氟甲基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(120mg，306.2μmol)、二氯甲烷(6ml)和tfa(2ml)放入30ml小瓶中。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。加入饱和nahco3水溶液(20ml)。用二氯甲烷(3x20ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的2-(二氟甲基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(80mg，89％产率)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:8.35(s,1h),6.91(t,j＝56.0hz,1h),6.88(s,1h),4.03(d,j＝8.0hz,1h),3.62(d,j＝11.4hz,1h),1.44(s,3h)。lc-ms:m/z293[m+h]+。[1532]步骤5：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-(二氟甲基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1533][1534]在25下，向5-氯-6-(三唑-2-基)吡啶-3-胺(19mg，95.4μmol)和三光气(14mg，47.7μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌混合物中逐滴加入tea(12mg，119.3μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将所得滤液加入到2-(二氟甲基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(18mg，79.5μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(19mg，159.1μmol)和tea(81mg，795.2μmol)。将混合物在40℃下搅拌16小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用91％二氯甲烷和9％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到粗产物(35mg)。对粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-(二氟甲基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(6.0mg，19％产率)。[1535]实例62：1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:9.47(s,1h),8.72(d,j＝2.4hz,1h),8.66(d,j＝2.4hz,1h),8.02(s,2h),7.02(s,1h),6.98(t,j＝54.8hz,1h),4.87(d,j＝11.6hz,1h),4.27(d,j＝11.2hz,1h),2.03(s,3h)。lc-ms:m/z514[m+h]+。[1536]方法p2ms:m/z371[m+h]+[1545]步骤3：(s)-3-((3-羟基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1546][1547]将(s)-3-((3-(苄氧基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(18.0g，48.6mmol)、四氢呋喃(140ml)、甲醇(140ml)和pd/c(1.8g，10％)放入500ml圆底烧瓶中。将烧瓶抽空并用氮气冲洗，然后用氢气冲洗。将混合物在氢气气氛下在25℃下搅拌16小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。这导致呈灰白色固体的粗品(s)-3-((3-羟基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(10.0g，72％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.42(s,1h),7.56(dd,j＝4.9,1.6hz,1h),7.08(dd,j＝7.7,1.6hz,1h),6.79(dd,j＝7.6,4.9hz,1h),5.40-5.45(m,1h),3.57-3.60(m,1h),3.30-3.46(m,3h),2.01-2.15(m,2h),1.37(d,j＝8.2hz,9h)。lc-ms:m/z281[m+h]+[1548]步骤4：(s)-3-((4,6-二氯-3-羟基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1549][1550]在0℃下，向(s)-3-((3-羟基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(6.0g，19.1mmol)于水(10ml)和四氢呋喃(18ml)中的搅拌混合物中加入k2co3(13.2g，95.3mmol)和1-氯吡咯烷-2,5-二酮(12.7g，95.3mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(50ml)稀释。用hcl(2n)将ph调整到6-7。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈白色固体的(s)-3-((4,6-二氯-3-羟基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.0g，粗品)。lc-ms:m/z349[m+h]+[1551]步骤5：(s)-3-((4,6-二氯-3-甲氧基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1552][1553]在0℃下，向(s)-3-((4,6-二氯-3-羟基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.0g，5.7mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(40ml)中的搅拌溶液中分份加入nah(0.4g，11.5mmol，60％，于矿物油中)。将mei(1.6g，11.5mmol)加入混合物中。将反应混合物温热至25℃，并搅拌12小时。将混合物倒入冰/水(80ml)中。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(s)-3-((4,6-二氯-3-甲氧基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g，38％产率)。lc-ms:m/z363[m+h]+。[1554]步骤6：(s)-3-((4-氯-6-((二苯基亚甲基)氨基)-3-甲氧基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1555][1556]在氮气气氛下将(s)-3-((4,6-二氯-3-甲氧基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.4g，1.1mmol)、二苯基甲亚胺(0.2g，1.1mmol)和二噁烷(20ml)加入40ml小瓶中，并向其中加入xantphos(0.2g，330.4μmol)、pd2(dba)3(0.2g，220.2μmol)和cs2co3(1.1g，3.3mmol)。将所得混合物在110℃下搅拌2小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(s)-3-((4-氯-6-((二苯基亚甲基)氨基)-3-甲氧基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.4g，78.8％产率)。lc-ms:m/z508[m+h]+[1557]步骤7：(s)-3-((6-氨基-4-氯-3-甲氧基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1558][1559]将(s)-3-((4-氯-6-((二苯基亚甲基)氨基)-3-甲氧基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.4g，826.8μmol)、盐酸羟胺(0.1g，1.7mmol)、乙酸钠(0.3g，2.1mmol)和甲醇(20ml)放入100ml圆底烧瓶中。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(s)-3-((6-氨基-4-氯-3-甲氧基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(0.3g，88％产率)。lc-ms:m/z344[m+h]+。[1560]步骤8：(s)-3-((4-氯-6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-3-甲氧基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1561][1562]在0℃下，向方法m1异构体2(10mg，36.2μmol)于四氢呋喃(4ml)中的搅拌溶液中加入三光气(6mg，21.7μmol)和tea(6mg，54.2μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到(s)-3-((6-氨基-4-氯-3-甲氧基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(15mg，43.4μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(9mg，72.3μmol)和tea(37mg，361.5μmol)。将混合物在60℃下搅拌12小时。将混合物倒入水(10ml)中，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％二氯甲烷和40％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈黄色油状物的(s)-3-((4-氯-6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-3-甲氧基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(20mg，42％产率)。lc-ms:m/z646[m+h]+。[1563]步骤9：(r)-2-氯-n-(4-氯-5-甲氧基-6-(((s)-吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1564][1565]向(s)-3-((4-氯-6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-3-甲氧基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(20mg，30.9μmol)于二氯甲烷(9ml)中的搅拌溶液中加入tfa(1.9g，1.3ml)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将所得混合物在减压下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(4-氯-5-甲氧基-6-(((s)-吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(6mg，14.15％产率)。实例63的差向异构体((s)-2-氯-n-(4-氯-5-甲氧基-6-(((s)-吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺)可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1566]实例63：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.29(s,1h),8.27(s,1h),7.52(s,1h),7.04(s,1h),5.51(s,1h),4.93(d,j＝11.6hz,1h),4.22(d,j＝11.6hz,1h),3.75(s,3h),2.92-3.07(m,4h),2.06-2.17(m,2h),1.93(s,3h)。lc-ms:m/z546[m+h]+[1567]实例64：(r)-2-氯-n-(1-(二氟甲基)-1h-吡唑-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1568][1569]根据方法m1步骤2，通过使用1-(二氟甲基)-1h-吡唑-4-胺和方法m1异构体2制备标题化合物。实例64的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1570]实例64：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.46(s,1h),9.36(s,1h),8.28(s,1h),7.85(s,1h),7.79(t,j＝58.8hz,1h),7.05(s,1h),4.70(d,j＝11.4hz,1h),4.20(d,j＝11.4hz,1h),1.97(s,3h)。lc-ms:m/z436[m+h]+[1571]方法q2[1572][1573]实例65：(r)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1574]步骤1：2-(二氟甲基)-4-甲基噁唑-5(2h)-酮[1575][1576]在0℃下在10分钟内将2,2-二氟乙酸酐(62.5g，359.2mmol)缓慢加入到l-丙氨酸(12.5g，140.4mmol)中。再搅拌0.5小时后，将澄清混合物在90℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物用二氯甲烷(200ml)稀释，并用饱和nahco3水溶液将ph调整到7-8。用二氯甲烷(2x500ml)萃取所得溶液。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈黑色油状物的2-(二氟甲基)-4-甲基噁唑-5(2h)-酮(7.1g，粗品)。将产物在不进行进一步纯化的情况下直接用于下一步骤。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:5.80-6.09(m,2h),2.35(d,j＝2.3hz,3h)。lc-ms:m/z150[m+h]+。[1577]步骤2：2-亚甲基丙二酸二乙酯[1578][1579]在火焰干燥的500ml圆底烧瓶中装入干燥的四氢呋喃(150ml)、二异丙胺(10.1g，99.9mmol)、tfa(12.5g，109.9mmol)、丙二酸二乙酯(16.0g，99.9mmol)和多聚甲醛(6.0g，199.8mmol)。加入冷凝器并将悬浮液在70℃下搅拌2小时。在70℃下再加入第二批多聚甲醛(6.0g，199.8mmol)，持续另外6小时。将反应在真空下浓缩。将粗混合物溶解在二乙醚(80ml)中。将固体滤出。将滤液用1n盐酸水溶液(2x80ml)洗涤。将水层合并，并用乙醚(80ml)萃取。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈黄色液体的2-亚甲基丙二酸二乙酯(19g，粗品)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:6.52(s,2h),4.14-4.30(m,4h),1.18-1.34(m,6h)。lc-ms:m/z173[m+h]+。[1580]步骤3：2-((2-(二氟甲基)-4-甲基-5-氧代-2,5-二氢噁唑-2-基)甲基)丙二酸二乙酯219[m+h]+。[1589]步骤6：3-氯-6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸乙酯[1590][1591]在0℃下，向6-(二氟甲基)-3-羟基哒嗪-4-甲酸乙酯(1.6g，7.3mmol)于二噁烷(20ml)中的搅拌溶液中加入磷酰三氯(11.3g，73.3mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌15小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物用乙酸乙酯(100ml)稀释，并用饱和nahco3水溶液将ph调整到7-8。用乙酸乙酯(2x200ml)萃取所得溶液。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用84％石油醚和16％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色液体的3-氯-6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸乙酯(1.4g，82％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.42(s,1h),7.20-7.56(m,1h),4.42(q,j＝7.1hz,2h),1.36(t,j＝7.1hz,3h)。lc-ms:m/z237[m+h]+。[1592]步骤7：6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸乙酯[1593][1594]在23℃下，向3-氯-6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸乙酯(600mg，2.5mmol)于乙酸乙酯(10ml)中的搅拌溶液中加入tea(0.6ml)和pd/c(120mg，10％)。将反应混合物在氢气气氛(气球压力)下在23℃下搅拌0.5小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色液体的6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸乙酯(230mg，44％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.75(d,j＝1.9hz,1h),8.29(d,j＝2.0hz,1h),7.23-7.59(m,1h),4.43(q,j＝7.1hz,2h),1.38(t,j＝7.1hz,3h)。lc-ms:m/z203[m+h]+。[1595]步骤8：6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸[1596][1597]在0℃下，向6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸乙酯(230mg，1.1mmol)于四氢呋喃(6ml)和水(1.5ml)的混合物中的搅拌溶液中加入氢氧化锂(81.7mg，3.4mmol)。将反应混合物逐渐温热至23℃，并搅拌1小时。将混合物在减压下浓缩，然后用水(30ml)稀释。将ph用hcl(1n)调整到2-3，并用乙酸乙酯(3x35ml)萃取。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将获得的固体用正戊烷(20ml)洗涤，以得到呈灰白色固体的6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(160mg，74％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.68(d,j＝1.9hz,1h),8.21(d,j＝1.9hz,1h),7.23-7.50(m,1h)。lc-ms:m/z175[m+h]+。[1598]步骤9：(r)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺。[1599][1600]向6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(60mg，344.8μmol)于二噁烷(8ml)中的搅拌溶液中加入方法m1异构体2(95.2mg，344.8μmol)、tea(174.1mg，1.7mmol)和dppa(106.3mg，413.8μmol)。将混合物在100℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到110mg粗产物。将得到的粗品通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(31.8mg，20.6％产率)。实例65的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1601]实例65：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.93(s,1h),9.51(d,j＝2.5hz,1h),9.35(s,1h),8.21(d,j＝2.5hz,1h),7.07-7.40(m,2h),4.88(d,j＝11.6hz,1h),4.31(d,j＝11.6hz,1h),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z448[m+h]+。[1602]方法r2[1603][1604]实例66：(r)-2-氯-n-(5-甲氧基-2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1605]步骤1：5-溴-2-(三氟甲基)吡啶-4-胺[1606][1607]在0℃下，向2-(三氟甲基)吡啶-4-胺(3.0g，18.5mmol)于二氯甲烷(50ml)中的溶液中逐滴加入溴(3.0g，18.5mmol)于二氯甲烷(50ml)中的溶液。将所得混合物在25℃下搅拌24小时。有机溶液用饱和nh4cl水溶液(100ml)、水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈黄色固体的5-溴-2-(三氟甲基)吡啶-4-胺(4.0g，81％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.40(s,1h),7.10(s,1h),6.88(s,2h)。lc-ms:m/z241[m+h]+。[1608]步骤2：5-甲氧基-2-(三氟甲基)吡啶-4-胺[1609][1610]在氮气气氛下，向5-溴-2-(三氟甲基)吡啶-4-胺(200mg，829.8μmol)于甲醇(5ml)中的混合物中加入溴化铜(i)(71.4mg，497.9μmol)、cs2co3(541mg，1.7mmol)和1,10-菲咯啉(45mg，248.9μmol)。将所得混合物在100℃下搅拌16小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈粉色固体的5-甲氧基-2-(三氟甲基)吡啶-4-胺(60mg，37％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.99(s,1h),6.96(s,1h),6.20(s,2h),3.90(s,3h)。lc-ms:m/z193[m+h]+。[1611]步骤3：(r)-2-氯-n-(5-甲氧基-2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1612][1613]向方法m1异构体2(20mg，72.3μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入三光气(13mg，43.4μmol)和tea(11mg，108.4μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到5-甲氧基-2-(三氟甲基)吡啶-4-胺(25mg，130.1μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(18mg，144.6μmol)和tea(73mg，723.0μmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-甲氧基-2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(20.4mg，57％产率)。实例66的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1614]实例66：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.31(s,1h),8.86(s,1h),8.52(s,1h),8.40(s,1h),7.07(s,1h),4.96(d,j＝11.2hz,1h),4.32(d,j＝11.6hz,1h),4.09(s,3h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z495[m+h]+。[1615]方法s2[1616][1617]实例67：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(1-羟基环丙基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1618]步骤1：1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)乙-1-酮[1619][1620]在0℃下，向5-溴-3-氯-吡啶-2-甲腈(15.0g，68.9mmol)于四氢呋喃(150ml)中的搅拌溶液中逐滴加入甲基溴化镁(34.8ml，308.4mmol，1m，于四氢呋喃中)。将混合物在0℃下搅拌1小时。通在0℃下加入饱和nh4cl水溶液(200ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)乙-1-酮(6g，37％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.59(d,j＝2.0hz,1h),7.97(d,j＝2.0hz,1h),2.66(s,3h)。lc-ms:m/z234[m+h]+。[1621]步骤2：5-溴-2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙烯基)-3-氯吡啶[1622][1623]向1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)乙-1-酮(2.0g，8.4mmol)于二氯甲烷(100ml)中的搅拌溶液中加入tea(2.5g，25.3mmol)和二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸叔丁酯(2.9g，10.9mmol)。将混合物在25℃下搅拌6小时。将所得混合物用水(100ml)稀释。用二氯甲烷(3x200ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的5-溴-2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙烯基)-3-氯吡啶(2.5g，84％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ8.52(d,j＝2.1hz,1h),7.87(d,j＝2.1hz,1h),4.82(d,j＝1.8hz,1h),4.77(d,j＝1.8hz,1h),0.92(s,9h),0.17(s,6h)。lc-ms:m/z348[m+h]+。[1624]步骤3：5-溴-2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丙基)-3-氯吡啶[1625][1626]在1小时内向5-溴-2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙烯基)-3-氯吡啶(1.0g，2.8mmol)和二乙基锌(8.5ml，8.6mmol，1m，于己烷中)于二乙醚(16ml)中的搅拌溶液中逐滴加入二碘甲烷(2.4g，8.9mmol)于二乙醚(16ml，在0℃下)中的溶液。将混合物在40℃下搅拌2小时。通过加入甲醇(50ml)来淬灭反应。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的5-溴-2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丙基)-3-氯吡啶(280mg，27％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.47(d,j＝2.0hz,1h),7.89(d,j＝2.0hz,1h),1.11-1.14(m,4h),0.78(s,9h),0.10(s,6h)。lc-ms:m/z362[m+h]+。[1627]步骤4：n-(6-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丙基)-5-氯吡啶-3-基)-1,1-二苯基甲亚胺[1628][1629]在氮气气氛下，向5-溴-2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丙基)-3-氯吡啶(300mg，826.9μmol)和二苯基甲亚胺(80mg，992.3μmol)于二噁烷(4ml)中的搅拌溶液加入xantphos(143mg，248.0μmol)、pd2(dba)3(95mg，165.4μmol)和cs2co3(808mg，2.4mmol)。将所得混合物在110℃下搅拌2小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的n-(6-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丙基)-5-氯吡啶-3-基)-1,1-二苯基甲亚胺(170mg，44％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ7.72-7.83(m,4h),7.38-7.54(m,5h),7.06-7.14(m,3h),1.01-1.07(m,4h),0.77(s,9h),0.21(s,6h)。lc-ms:m/z463[m+h]+。[1630]步骤5：6-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丙基)-5-氯吡啶-3-胺[1631][1632]将n-(6-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丙基)-5-氯吡啶-3-基)-1,1-二苯基甲亚胺(200mg，431.8μmol)、盐酸羟胺(60mg，863.4μmol)、乙酸钠(141mg，1.7mmol)和甲醇(10ml)放入50ml圆底烧瓶中。将混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的6-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丙基)-5-氯吡啶-3-胺(70mg，54％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.92(s,1h),7.04(s,1h),3.87(s,2h),1.03-1.11(m,4h),0.78(s,9h),0.10(s,6h)。lc-ms:m/z299[m+h]+。[1633]步骤6：(r)-n-(6-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丙基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺e]嘧啶-6-甲酰胺(1.9mg，23％产率)。实例67的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1639]实例67：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.37(s,1h),9.33(s,1h),8.58(d,j＝2.0hz,1h),8.15(d,j＝2.0hz,1h),7.06(s,1h),5.95(s,1h),4.81(d,j＝11.6hz,1h),4.25(d,j＝11.6hz,1h),1.97(s,3h),0.96-1.02(m,4h)。lc-ms:m/z487[m+h]+[1640]方法t2[1641][1642]实例68和69：由含有(r)-2-氯-n-(2-((s)-1-羟乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(2-((r)-1-羟乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[1643]步骤1：2-(1-乙氧基乙烯基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-胺[1644][1645]在氮气气氛下，向2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-4-胺(1g，5.1mmol)于二噁烷(10ml)中的混合物中加入三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(2.2g，6.1mmol)、csf(1.7g，11.2mmol)和pd(pph3)2cl2(178mg，254.4μmol)。将所得混合物在100℃下搅拌7小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的2-(1-乙氧基乙烯基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-胺(0.8g，68％产率)。lc-ms:m/z233[m+h]+。[1646]步骤2：1-(4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙-1-酮[1647][1648]在0℃下，向2-(1-乙氧基乙烯基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-胺(700mg，3.0mmol)于四氢呋喃(15ml)中的溶液中加入hcl(aq)(7.5ml,1m)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将ph用饱和nahco3水溶液调整到7。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机溶液用盐水(150ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈黄色固体的1-(4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙-1-酮(600mg，92％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:7.37(d,j＝2.4hz,1h),7.02(d,j＝2.4hz,1h),4.60(s,2h),2.70(s,3h)。lc-ms:m/z205[m+h]+。[1649]步骤3：1-(4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙-1-醇[1650][1651]在0℃下，向1-(4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙-1-酮(600mg，2.9mmol)于甲醇(10ml)中的溶液中加入四氢硼酸钠(133mg，3.5mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩。加入水(10ml)，并用乙酸乙酯(3x20ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的1-(4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙-1-醇(450mg，74％产率)。1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ:6.87(d,j＝2.1hz,1h),6.80(d,j＝2.1hz,1h),4.71(q,j＝6.6hz,1h),1.40(d,j＝6.6hz,3h)。lc-ms:m/z207[m+h]+。[1652]步骤4：2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-胺[1653][1654]向1-(4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)乙-1-醇(450mg，2.2mmol)于四氢呋喃(10ml)中的溶液中加入咪唑(446mg，6.5mmol)和叔丁基氯二甲基硅烷(395mg，2.6mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌18小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈灰白色固体的2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-胺(500mg，71％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:6.80(d,j＝2.0hz,1h),6.75(d,j＝2.4hz,1h),6.58(s,2h),4.71(q,j＝6.4hz,1h),1.31(d,j＝6.4hz,3h),0.89(s,9h),0.06(s,3h),0.02(s,3h)。lc-ms:m/z321[m+h]+。[1655]步骤5：(8r)-n-(2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1656][1657]向2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-胺(139mg，433.8μmol)于四氢呋喃(10ml)中的搅拌溶液中加入三光气(64mg，216.9μmol)和tea(55mg，542.2μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌2小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(100mg，361.5μmol)于四氢呋喃(5ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(88mg，722.9μmol)和tea(366mg，3.6mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(8r)-n-(2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(145mg，64％产率)。lc-ms:m/z623[m+h]+。[1658]步骤6：(8r)-2-氯-n-(2-(1-羟乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1659][1660]向(8r)-n-(2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(140mg，222.4μmol)于四氢呋喃(2.0ml)中的混合物中加入tfa(2.0ml)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(8r)-2-氯-n-(2-(1-羟乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(80mg，71％产率)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:9.37(s,1h),8.04-7.99(m,2h),6.78-6.77(m,1h),4.90-4.82(m,2h),4.21(d,j＝11.6hz,1h),2.03(s,3h),1.48(d,j＝6.8hz,3h)。lc-ms:m/z509[m+h]+。[1661]步骤7：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-n-(2-((s)-1-羟乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(2-((r)-1-羟乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1662][1663]对80mg(8r)-2-氯-n-(2-(1-羟乙基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺进行手性hplc纯化(色谱柱：chiralcelod-h，2*25mm，5um；流动相a：hex(0.3％ipa)‑‑hplc，流动相b：ipa‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在29分钟内，10b到10b；220/254nm；rt1:18.215；rt2:22.902；注射体积：0.3ml；运行次数：15)。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例68(14.4mg，18％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例69(13.5mg，17％产率)。实例68和69的对映异构体可以使用步骤5中方法m1异构体1类似地制备。[1664]实例68：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.73(s,1h),9.36(s,1h),8.05(d,j＝1.6hz,1h),8.01(d,j＝1.6hz,1h),7.08(s,1h),5.65(d,j＝4.0hz,1h),4.90(d,j＝11.6hz,1h),4.74-4.76(m,1h),4.28(d,j＝11.6hz,1h),1.96(s,3h),1.37(d,j＝6.4hz,3h)。lc-ms:m/z509[m+h]+。[1665]实例69：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.74(s,1h),9.36(s,1h),8.04(d,j＝2.0hz,1h),8.01(d,j＝2.0hz,1h),7.08(s,1h),5.65(d,j＝4.2hz,1h),4.89(d,j＝11.6hz,1h),,4.72-4.76(m,1h),4.28(d,j＝11.6hz,1h),1.97(s,3h),1.37(d,j＝6.8hz,3h)。lc-ms:m/z509[m+h]+。[1666]方法u2[1667][1668]实例70和71：由含有(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-((s)-1,2-二羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]吡啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-((r)-1,2-二羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]吡啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[1669]步骤1：2-(4-溴-2h-1,2,3-三唑-2-基)-3-氯-5-硝基吡啶[1670][1671]向2,3-二氯-5-硝基吡啶(5g，25.9mmol)于乙腈(100ml)中的搅拌溶液中加入4-溴-2h-1,2,3-三唑(4.2g，28.5mmol)和k2co3(7.2g，51.8mmol)。将所得混合物在40℃下搅拌16小时。将反应混合物过滤，并用乙酸乙酯(3x50ml)洗涤。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用83％石油醚和17％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-(4-溴-2h-1,2,3-三唑-2-基)-3-氯-5-硝基吡啶(3.6g，62％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.39(d,j＝3hz,1h),9.16(d,j＝3hz,1h),8.55(s,1h)；lc-ms:m/z304[m+h]+[1672]步骤2：3-氯-5-硝基-2-(4-乙烯基-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶[1673][1674]在氮气气氛下，向2-(4-溴-2h-1,2,3-三唑-2-基)-3-氯-5-硝基吡啶(3.0g，9.9mmol)于二噁烷(60ml)和水(6ml)中的溶液中加入csf(4.5g，29.7mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧硼烷(2.3g，14.9mmol)、pd(pph3)2cl2(0.7g，1.0mmol)。将所得混合物在85℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(200ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用83％石油醚和17％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的3-氯-5-硝基-2-(4-乙烯基-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶(690mg，28％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.39(d,j＝4hz,1h),9.11(d,j＝4hz,1h),8.56(s,1h),6.83-7.39(m,1h),6.13-6.18(m,1h),5.63-5.74(m,1h)；lc-ms:m/z252[m+h]+。[1675]步骤3：1-(2-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙烷-1,2-二醇[1676][1677]向3-氯-5-硝基-2-(4-乙烯基-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶(690mg，2.7mmol)于叔丁醇(12ml)和水(3ml)中的溶液中加入k2o4os.2h2o(354mg，1mmol)和4-甲基吗啉4-氧化物(632mg，5.4mmol)。将反应溶液在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％甲醇和20％二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈灰白色固体的1-(2-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙烷-1,2-二醇(500mg，61％)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.38(d,j＝3hz,1h),9.11(d,j＝3hz,1h),8.2(s,1h),5.71-5.73(m,1h),4.80-4.95(m,2h),3.61-3.69(m,2h)；lc-ms:m/z286[m+h]+。[1678]步骤4：3-氯-5-硝基-2-(4-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶[1679][1680]在0℃下，向1-(2-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙烷-1,2-二醇(500mg，1.8mmol)于二氯甲烷(34ml)中的溶液中加入二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸叔丁酯(2.1g，8.1mmol)和diea(1.6g，12.3mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用水(50ml)稀释，然后用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。将合并的有机层用饱和nahco3水溶液(50ml)洗涤。将所得溶液经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残留物通过使用83％石油醚和17％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的3-氯-5-硝基-2-(4-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶(700mg，79％产率)。lc-ms:m/z513[m+h]+。[1681]步骤5：5-氯-6-(4-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺[1682][1683]向3-氯-5-硝基-2-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)吡啶(200mg，390.0umol)于乙醇(9ml)和水(3ml)中的溶液中加入fe(108mg，2.0mmol)和nh4cl(83mg，1.6mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌1小时。通过加入水(50ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-氯-6-(4-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(120mg，64％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ7.91(s,1h),7.82(d,j＝3hz,1h),7.19(d,j＝3hz,1h),6.17(s,1h),4.95-4.98(m,1h),3.77-3.79(m,2h),0.85(s,18h),0.08(s,12h)；lc-ms:m/z483[m+h]+。[1684]步骤6：(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]吡啶-6-甲酰胺[1685][1686]在25℃下，向5-氯-6-(4-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(53mg，109.7μmol)于四氢呋喃(4ml)中的混合物中加入三光气(13mg，43.5μmol)和tea(11mg，180.7μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(20mg，72.5μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(121mg，725μmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(18mg，144.9μmol)。将反应混合物在40℃下搅拌1小时。将残留物用水(50ml)稀释，然后用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈灰白色固体的(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]吡啶-6-甲酰胺(40mg，70％产率)。lc-ms:m/z786[m+h]+。[1687]步骤7：(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(1,2-二羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]吡啶-6-甲酰胺[1688][1689]在25℃下，向(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(2,2,3,3,8,8,9,9-八甲基-4,7-二氧杂-3,8-二硅十六烷-5-基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]吡啶-6-甲酰胺(40mg，51.0μmol)于四氢呋喃(5ml)中的溶液中加入tbaf(0.5ml，510μmol，1m，于四氢呋喃中)。将所得混合物在25℃下搅拌4小时。将反应混合物在减压下浓缩。将残留物用水(50ml)稀释。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用饱和nh4cl水溶液(3x50ml)洗涤。将所得溶液经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残留物通过制备型tlc用乙酸乙酯纯化，以得到30mg粗产物(90％纯度)。对粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(1,2-二羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]吡啶-6-甲酰胺(20mg，71％产率)。lc-ms:m/z558[m+h]+[1690]步骤8：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-((s)-1,2-二羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]吡啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-((r)-1,2-二羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]吡啶-6-甲酰胺。[1691][1692]对20mg(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(1,2-二羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]吡啶-6-甲酰胺进行手性hplc纯化(色谱柱：chiralartcellulose-sb，2*25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在30分钟内，30b到30b；220/254nm；rt1:20.983；rt2:25.151；注射体积：0.7ml；运行次数：4)。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例70(4.3mg，10％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例71(5mg，10％产率)。实例70和71的对映异构体可以使用步骤6中方法m1异构体1类似地制备。[1693]实例70：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.66(s,1h),9.36(s,1h),8.73(d,j＝2.4hz,1h),8.49(d,j＝2.4hz,1h),8.02(s,1h),7.07(s,1h),5.59(d,j＝5.2hz,1h),4.83-4.89(m,2h),4.77-4.78(m,1h),4.30(d,j＝12hz,1h),3.61-3.67(m,2h),1.98(s,3h)；lc-ms:m/z558[m+h]+。[1694]实例71：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.66(s,1h),9.36(s,1h),8.73(d,j＝2.4hz,1h),8.49(d,j＝2.4hz,1h),8.02(s,1h),7.07(s,1h),5.59(d,j＝5.2hz,1h),4.83-4.89(m,2h),4.77-4.78(m,1h),4.30(d,j＝12hz,1h),3.63-3.67(m,2h),1.98(s,3h)；lc-ms:m/z558[m+h]+。[1695]方法v2[1696][1697]实例72：(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(环丙基(羟基)甲基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1698]步骤1：(5-溴-3-氯吡啶-2-基)(环丙基)甲酮[1699][1700]在0℃下，向5-溴-3-氯吡啶甲腈(2.0g，9.2mmol)于四氢呋喃(20ml)中的搅拌溶液中逐滴加入环丙基溴化镁(2.5g，18.4mmol)。将混合物在0℃下搅拌1小时。通在0℃下加入饱和nh4cl水溶液(40ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(5-溴-3-氯吡啶-2-基)(环丙基)甲酮(1.7g，68％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.63(d,j＝2.0hz,1h),7.98(d,j＝2.0hz,1h),2.88-2.97(m,1h),1.22-1.34(m,2h),1.06-1.19(m,2h)。lc-ms:m/z260,262[m+h]+。[1701]步骤2：(5-氯-6-(环丙烷羰基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯[1702][1703]在氮气气氛下，向(5-溴-3-氯吡啶-2-基)(环丙基)甲酮(1.4g，5.3mmol)和氨基甲酸叔丁酯(944mg，8.0mmol)于二噁烷(30ml)中的搅拌溶液中加入xantphos(932mg，1.6mmol)、pd2(dba)3(618mg，1.1mmol)和cs2co3(5.2g，16.1mmol)。将所得混合物在90℃下搅拌2小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(5-氯-6-(环丙烷羰基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(1g，62％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.40(d,j＝2.4hz,1h),8.21(d,j＝2.4hz,1h),3.00-3.10(m,1h),1.52(s,9h),1.22-1.27(m,2h),1.02-1.09(m,2h)。lc-ms:m/z297[m+h]+。[1704]步骤3：(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(环丙基)甲酮[1705][1706]向(5-氯-6-(环丙烷羰基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，1.3mmol)于二氯甲烷(20ml)中的搅拌溶液中加入tfa(4ml)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将所得混合物在真空下浓缩。向残留物中加入饱和nahco3水溶液(40ml)。用乙酸乙酯(3x40ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(环丙基)甲酮(170mg，64％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ8.02(d,j＝2.4hz,1h),7.00(d,j＝2.4hz,1h),3.53-4.26(m,2h),3.04-3.26(m,1h),1.16-1.26(m,2h),0.96-1.06(m,2h)。lc-ms:m/z197[m+h]+。[1707]步骤4：(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(环丙基)甲醇[1708][1709]在氮气气氛下在0℃下，向(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(环丙基)甲酮(210mg，1.1mmol)于甲醇(4ml)中的搅拌溶液中加入四氢硼酸钠(48mg，1.3mmol)。将混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用水/冰(10ml)淬灭。将所得混合物在减压下浓缩。用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(环丙基)甲醇(140mg，65％产率)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.91(d,j＝2.4hz,1h),7.05(d,j＝2.4hz,1h),4.38(d,j＝8.0hz,1h),1.30-1.44(m,1h),0.94-1.09(m,1h),0.27-0.64(m,3h)。lc-ms:m/z199[m+h]+。[1710]步骤5：6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)(环丙基)甲基)-5-氯吡啶-3-胺[1711][1712]在0℃下，向(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(环丙基)甲醇(130mg，654.4μmol)于n,n-二甲基甲酰胺(5ml)中的溶液中加入二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸叔丁酯(542mg，3.6mmol)和咪唑(300mg，4.4mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用水(50ml)稀释。然后用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用饱和nahco3水溶液(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)(环丙基)甲基)-5-氯吡啶-3-胺(40mg，19％产率)。lc-ms:m/z313[m+h]+[1713]步骤6：(8r)-n-(6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)(环丙基)甲基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1714][1715]在0℃下，向方法m1异构体2(28mg，101.2μmol)于四氢呋喃(4ml)中的搅拌溶液中加入三光气(18mg，60.7μmol)和tea(11mg，107.7μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)(环丙基)甲基)-5-氯吡啶-3-胺(38mg，121.1μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(24mg，202.3μmol)和tea(102mg，1.0mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将混合物倒入水(10ml)中，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的(8r)-n-(6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)(环丙基)甲基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(20mg，32％产率)。lc-ms:m/z615[m+h]+。[1716]步骤7：(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(环丙基(羟基)甲基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1717][1718]在25℃下，向(8r)-n-(6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)(环丙基)甲基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(15mg，24.3μmol)于四氢呋喃(4ml)中的搅拌溶液中加入tbaf(244μl，244μmol，1m，于四氢呋喃中)。将所得混合物在25℃下搅拌48小时。将所得混合物在减压下浓缩。将残留物通过使用乙酸乙酯(100％)作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到10mg粗产物。将粗产物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(环丙基(羟基)甲基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(2.8mg，22％产率)。实例72的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1719]实例72：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.38(s,1h),9.33(s,1h),8.69(t,j＝2.0hz,1h),8.14(t,j＝2.0hz,1h),7.06(s,1h),5.16(d,j＝6.4hz,1h),4.77-4.85(m,1h),4.20-4.35(m,2h),1.98(s,3h),1.31-1.44(m,1h),0.19-0.53(m,4h)。lc-ms:m/z501[m+h]+[1720]方法w2[1721][1722]实例73：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((s)-2-羟基丙氧基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1723]步骤1：(s)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙酸甲酯[1724][1725]在0℃下，向(s)-2-羟基丙酸甲酯(2.0g，19.2mmol)和咪唑(3.9g，57.6mmol)于四氢呋喃(50ml)中的搅拌溶液中加入叔丁基氯二甲基硅烷(3.5g，23.0mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(2x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈无色油状物的(s)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙酸甲酯(4.0g，95％产率)，其在不进行进一步纯化的情况下用于下一步骤。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:4.34(q,j＝6.8hz,1h),3.72(s,3h),1.39(d,j＝6.8hz,3h),0.91(s,9h),0.11(s,3h),0.09(s,3h)。[1726]步骤2：(s)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙-1-醇[1727][1728]在0℃下，向(s)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙酸甲酯(2.0g，9.2mmol)于四氢呋喃(20ml)中的搅拌溶液中加入四氢硼酸锂(399mg，18.3mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(10ml)淬灭。用二氯甲烷(2x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(s)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙-1-醇(1.3g，44％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:4.61(t,j＝5.6hz,1h),3.70-3.75(m,1h),3.28-3.35(m,1h),3.14-3.23(m,1h),1.09(d,j＝6.4hz,3h),0.90(s,9h),0.05(s,6h)。[1729]步骤3：(s)-2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-3-氯-5-硝基吡啶[1730][1731]在0℃下，向(s)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙-1-醇(1.5g，7.9mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(20ml)中的搅拌溶液中加入nah(473mg，11.8mmol，60％，于矿物油中)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。然后加入2,3-二氯-5-硝基吡啶(1.5g，7.9mmol)，并将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(20ml)淬灭。用乙酸乙酯(2x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用95％石油醚和5％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(s)-2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-3-氯-5-硝基吡啶(600mg，16％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.93-8.96(m,1h),8.47-8.44(m,1h),4.44(dd,j＝10.8,7.2hz,1h),4.31(dd,j＝10.8,4.4hz,1h),4.21-4.25(m,1h),1.26(d,j＝6.4hz,3h),0.87(s,9h),0.06(s,3h),0.01(s,3h)。lc-ms:m/z347[m+h]+。[1732]步骤4：(s)-6-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-5-氯吡啶-3-胺[1733][1734]向(s)-2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-3-氯-5-硝基吡啶(580mg，1.6mmol)和nh4cl(179mg，3.3mmol)于乙醇(3ml)和水(3ml)中的搅拌混合物中加入fe(467mg，8.4mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌2小时。将所得混合物过滤，并用乙酸乙酯(2x50ml)萃取滤液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分浓缩，以得到呈黄色油状物的(s)-6-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-5-氯吡啶-3-胺(140mg，19％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.41(d,j＝2.6hz,1h),7.13(d,j＝2.8hz,1h),5.00(s,2h),3.96-4.16(m,3h),1.14(d,j＝6.4hz,3h),0.84(s,9h),0.05(s,3h),0.02(s,3h)。lc-ms:m/z317[m+h]+。[1735]步骤5：(r)-n-(6-((s)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1736][1737]向(s)-6-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-5-氯吡啶-3-胺(110mg，347μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入三光气(41mg，139μmol)和tea(35mg，347μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(64mg，231μmol)于四氢呋喃(5ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(57mg，463μmol)和tea(234mg，2.3mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。通过加入甲醇(2ml)来淬灭反应混合物，并将混合物在真空下浓缩。将残留物用水(10ml)稀释。用乙酸乙酯(2x20ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(r)-n-(6-((s)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(80mg，45％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.39(s,1h),7.95-8.04(m,2h),6.75(s,1h),6.33(s,1h),4.54(d,j＝10.0hz,1h),4.11-4.36(m,3h),4.02(d,j＝10.4hz,1h),2.07(s,3h),1.25(d,j＝6.0hz,3h),0.89(s,9h),0.10(s,3h),0.08(s,3h)。lc-ms:m/z619[m+h]+。[1738]步骤6：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((s)-2-羟基丙氧基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1739][1740]向(r)-n-(6-((s)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(70mg，113μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入tfa(0.5ml)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((s)-2-羟基丙氧基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(23.1mg，40％产率)。实例73的差向异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1741]实例73：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.38(s,1h),8.04(d,j＝2.4hz,1h),7.99(d,j＝2.4hz,1h),6.75(s,1h),6.38(s,1h),4.53(d,j＝10.4hz,1h),4.38-4.42(m,1h),4.21-4.27(m,2h),4.02(d,j＝10.4hz,1h),2.07(s,3h),1.30(d,j＝6.0hz,3h)。lc-ms:m/z505[m+h]+。[1742]方法x2[1743][1744]实例74：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((r)-2-羟基丙氧基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1745]步骤1：(r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙酸甲酯[1746][1747]在0℃下，向(r)-2-羟基丙酸甲酯(5.0g，48.0mmol)和咪唑(9.8g，143.9mmol)于四氢呋喃(100ml)中的搅拌溶液中加入叔丁基氯二甲基硅烷(8.6g，57.1mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(2x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈无色油状物的(r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙酸甲酯(7.6g，65％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:4.33(q,j＝6.8hz,1h),3.72(s,3h),1.40(d,j＝6.8hz,3h),0.90(s,9h),0.10(s,3h),0.07(s,3h)。[1748]步骤2：(r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙-1-醇[1749][1750]在0℃下，向(r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙酸甲酯(5.0g，22.9mmol)于四氢呋喃(30ml)中的搅拌溶液中加入四氢硼酸锂(1.0g，45.9mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(20ml)淬灭。用二氯甲烷(3x20ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙-1-醇(2.5g，57％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:4.60-4.57(m,1h),3.75-3.79(m,1h),3.31-3.35(m,1h),3.15-3.21(m,1h),1.09(d,j＝6.0hz,3h),0.90(s,9h),0.08(s,6h)。[1751]步骤3：(r)-2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-3-氯-5-硝基吡啶[1752][1753]在0℃下，向(r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙-1-醇(1.0g，5.2mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中的搅拌溶液中加入nah(231mg，5.9mmol，60％，于矿物油中)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。然后加入2,3-二氯-5-硝基吡啶(1.2g，6.3mmol)并将反应混合物在25℃下搅拌18小时。将反应混合物用水(20ml)淬灭。用乙酸乙酯(2x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用96％石油醚和4％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(r)-2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-3-氯-5-硝基吡啶(0.8g，35％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.03(d,j＝2.8hz,1h),8.73(d,j＝2.4hz,1h),4.36-4.39(m,2h),4.20-4.25(m,1h),1.18(d,j＝6.4hz,3h),0.81(s,9h),0.06(s,3h),0.02(s,3h)。lc-ms:m/z347[m+h]+。[1754]步骤4：(r)-6-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-5-氯吡啶-3-胺[1755][1756]向(r)-2-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-3-氯-5-硝基吡啶(400mg，911.0μmol)和nh4cl(97mg，1.8mmol)于乙醇(15ml)和水(5ml)中的搅拌混合物中加入fe(305mg，5.5mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌5小时。将所得混合物过滤，并用乙酸乙酯(2x50ml)萃取滤液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分浓缩，以得到呈黄色油状物的(r)-6-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-5-氯吡啶-3-胺(110mg，30％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:7.58(d,j＝2.4hz,1h),7.16(d,j＝2.4hz,1h),4.17-4.24(m,2h),4.07-4.06(m,1h),1.23(d,j＝5.6hz,3h),0.88(s,9h),0.09(s,3h),0.07(s,3h)。lc-ms:m/z317[m+h]+。[1757]步骤5：(r)-n-(6-((r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1758][1759]向(r)-6-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-5-氯吡啶-3-胺(60mg，189.3μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入三光气(42mg，141.5μmol)和tea(47mg，464.5μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(50mg，180.7μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(44mg，360.2μmol)和tea(183mg，1.8mmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。通过加入甲醇(2ml)来淬灭反应混合物，并将混合物在真空下浓缩。将残留物用水(10ml)稀释。用乙酸乙酯(2x20ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈灰白色固体的(r)-n-(6-((r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(33mg，28％产率)。lc-ms:m/z619[m+h]+。[1760]步骤6：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((r)-2-羟基丙氧基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1761][1762]向(r)-n-(6-((r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)丙氧基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(32mg，51.6μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌溶液中加入tfa(0.5ml)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((s)-2-羟基丙氧基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(8.5mg，32％产率)。实例74的差向异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1763]实例74：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.38(s,1h),8.06(d,j＝2.0hz,1h),8.00(d,j＝2.0hz,1h),6.75(s,1h),6.42(s,1h),4.54(d,j＝10.0hz,1h),4.38-4.44(m,1h),4.22-4.29(m,2h),4.02(d,j＝10.0hz,1h),2.07(s,3h),1.30(d,j＝6.0hz,3h)。lc-ms:m/z505[m+h]+。[1764]方法y2[1765][1766]实例75：(r)-2-氯-8-甲基-n-(2-(((s)-吡咯烷-3-基)氧基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺2,2,2-三氟乙酸酯[1767]步骤1：(s)-3-((4-碘-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1768][1769]在0℃下，向(s)-3-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g，5.3mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(16ml)中的搅拌溶液中分批加入nah(256mg，6.4mmol，60％，于矿物油中)。将混合物在0℃下搅拌20分钟。将2-氯-4-碘-6-(三氟甲基)吡啶(1.6g，5.3mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(18ml)中的溶液加入到混合物中。将反应混合物在60℃下搅拌6小时。将混合物冷却至25℃，并通过加入水(100ml)进行淬灭。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(s)-3-((4-碘-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(533mg，22％产率)。lc-ms:m/z459[m+h]+。[1770]步骤2：(s)-3-((4-((二苯基亚甲基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1771][1772]在氮气气氛下，向(s)-3-((4-碘-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(433mg，944.9μmol)和二苯基甲亚胺(171mg，944.9μmol)于二噁烷(17ml)中的搅拌溶液中加入pd2(dba)3(197mg，190.3μmol)、cs2co3(921mg，2.8mmol)和xantphos(164mg，283.5μmol)。将混合物在110℃下搅拌2小时。然后将溶液冷却至25℃并过滤。将滤饼用乙酸乙酯(10ml)洗涤。将滤液倒入水(50ml)中，并用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(s)-3-((4-((二苯基亚甲基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(360mg，74％产率)。lc-ms:m/z512[m+h]+。[1773]步骤3：(s)-3-((4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1774][1775]向(s)-3-((4-((二苯基亚甲基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(180mg，351.9μmol)于甲醇(10ml)中的搅拌溶液中加入盐酸羟胺(49mg，703.8μmol)和乙酸钠(72mg，879.7μmol)。将混合物在25℃下搅拌8小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用85％石油醚和15％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈黄色固体的(s)-3-((4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(90mg，74％产率)。lc-ms:m/z348[m+h]+。[1776]步骤4：(s)-3-((4-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1777][1778]向(s)-3-((4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(90mg，259.3μmol)于四氢呋喃(36ml)中的溶液加入三光气(46mg，155.6μmol)和tea(39mg，389.0μmol)。将混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(50mg，181.4μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入tea(261mg，2.6mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(64mg，519.2μmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将混合物倒入水(10ml)中，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈灰白色固体的(s)-3-((4-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(90mg)。lc-ms:m/z650[m+h]+。[1779]步骤5：2,2,2-三氟乙酸(r)-2-氯-8-甲基-n-(2-(((s)-吡咯烷-3-基)氧基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺酯[1780][1781]向(s)-3-((4-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(80mg，123.1μmol)于二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入tfa(1ml)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的实例75(21mg，25％产率)。实例75的差向异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1782]实例75：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.74(s,1h),9.32(s,1h),7.67(d,j＝1.6hz,1h),7.50(d,j＝1.6hz,1h),7.08(s,1h),5.57-5.60(m,1h),4.83-4.86(m,1h),4.26-4.28(m,1h),3.40-3.50(m,4h),2.27-2.33(m,1h),2.16-2.18(m,1h),1.97(s,3h)。lc-ms:m/z550[m+h]+。[1783]方法z2[1784][1785]实例76和77：由含有(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-((s)-1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-((r)-1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[1786]步骤1：2-(5-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸[1787][1788]向2-(5-{双[(叔丁氧基)羰基]氨基}-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(1.8g，3.9mmol；方法b3，步骤3)于甲醇(10ml)和四氢呋喃(20ml)中的搅拌溶液中加入水(10ml)中的lioh(190mg，7.9mmol)。将反应在25℃下搅拌1小时。将反应用水(50ml)稀释。用hcl(4m)将ph调整到4-5。用乙酸乙酯(2x100ml)萃取混合物。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈白色固体的2-(5-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸(1.5g，94％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:13.02(s,1h),10.26(s,1h),8.59(d,j＝2.3hz,1h),8.55(s,1h),8.35(d,j＝2.3hz,1h),1.52(s,9h)。lc-ms:m/z340[m+h]+。[1789]步骤2：(5-氯-6-(4-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯[1790][1791]向2-(5-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸(400mg，1.2mmol)于乙腈中的搅拌溶液中加入n,o-二甲基羟胺；盐酸盐(229mg，2.3mmol)、六氟磷酸n-(氯(二甲基氨基)亚甲基)-n-甲基甲胺酯(991mg，3.5mmol)和1-甲基-1h-咪唑(676mg，8.2mmol)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(5-氯-6-(4-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，59％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:10.25(s,1h),8.57(d,j＝2.3hz,1h),8.44(s,1h),8.33(d,j＝2.3hz,1h),3.74(s,3h),2.67(s,3h),1.50(s,9h)。lc-ms:m/z383[m+h]+。[1792]步骤3：(6-(4-乙酰基-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-氯吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯[1793][1794]在氮气气氛下在0℃下，向(5-氯-6-(4-(甲氧基(甲基)氨基甲酰基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(280mg，731.1μmol)于四氢呋喃(20ml)中的搅拌溶液中逐滴加入甲基溴化镁(0.5ml，1.5mmol，3m，于二乙醚中)。将反应在0℃下搅拌1小时。将反应用饱和nh4cl水溶液(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得混合物。将有机层合并，用盐水洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(6-(4-乙酰基-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-氯吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(170mg，61％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:10.27(s,1h),8.48-8.67(m,2h),8.34(d,j＝2.3hz,1h),2.59(s,3h),1.50(s,9h)。lc-ms:m/z338[m+h]+。[1795]步骤4：(5-氯-6-(4-(1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯[1796][1797]在0℃下，向(6-(4-乙酰基-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-氯吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(140mg，414.5μmol)于甲醇(4ml)中的搅拌溶液中加入nabh4(19mg，497.4μmol)。将反应在0℃下搅拌1小时。在真空下去除溶剂。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的(5-氯-6-(4-(1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(140mg，94％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:10.16(s,1h),8.53(d,j＝2.3hz,1h),8.28(d,j＝2.3hz,1h),7.98(s,1h),5.50(d,j＝5.1hz,1h),4.88-4.94(m,1h),1.49(s,9h),1.43(d,j＝6.5hz,3h)。lc-ms:m/z340[m+h]+。[1798]步骤5：1-(2-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙-1-醇[1799][1800]向(5-氯-6-(4-(1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，220.2μmol)于乙酸乙酯(2ml)中的搅拌溶液中加入hcl(2.2ml，4m，于乙酸乙酯中)。将反应在25℃下搅拌2小时。在真空下去除溶剂。将残留物用乙酸乙酯(50ml)稀释，并通过饱和nahco3水溶液(50ml)进行淬灭。将该含水层用乙酸乙酯(2x50ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈无色油状物的1-(2-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙-1-醇(38mg，54％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:7.87(s,1h),7.79(d,j＝2.5hz,1h),7.17(d,j＝2.5hz,1h),6.14(s,2h),5.43(s,1h),4.89(s,1h),1.42(d,j＝6.5hz,3h)。lc-ms:m/z240[m+h]+。[1801]步骤6：6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-氯吡啶-3-胺[1802][1803]在0℃下，向1-(2-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙-1-醇(50mg，208.6μmol)于二氯甲烷(7ml)中的搅拌溶液中加入三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(72mg，271.2μmol)和2,6-二甲基吡啶(63mg，625.9μmol)。将反应在25℃下搅拌1小时。在真空下去除溶剂。将残留物通过使用50％石油醚和50％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-氯吡啶-3-胺(40mg，51％产率)。lc-ms:m/z354[m+h]+。[1804]步骤7：(8r)-n-(6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1805][1806]向方法m1异构体2(31mg，113.0μmol)于四氢呋喃(3ml)中的搅拌溶液中加入tea(17mg，169.5μmol)和三光气(20mg，67.8μmol)。将混合物在25℃下搅拌30分钟，然后过滤。将滤液加入到6-(((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)(环丙基)甲基)-5-氯吡啶-3-胺(40mg，113.0μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(28mg，226.0μmol)和tea(114mg，1.1mmol)。将反应在40℃下搅拌1小时。在真空下去除溶剂。将残留物通过使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的(8r)-n-(6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(40mg，52％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:9.43(d,j＝0.9hz,1h),8.49-8.63(m,1h),8.42(d,j＝2.2hz,1h),7.90(s,1h),6.88(s,1h),6.79(d,j＝0.9hz,1h),5.21(q,j＝6.4hz,1h),4.62(d,j＝10.3hz,1h),4.08(d,j＝10.3hz,1h),2.09(s,3h),1.59(dd,j＝6.4,0.9hz,3h),0.94(d,j＝0.9hz,9h),0.07-0.15(m,6h)。lc-ms:m/z656[m+h]+。[1807]步骤8：(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1808][1809]在25℃下，向(8r)-n-(6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(30mg，45.7μmol)于二氯甲烷(12ml)中的搅拌溶液中加入tfa(6ml)。将反应在25℃下搅拌5小时。在真空下去除溶剂。将残留物通过使用使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到24mg粗产物。将粗产物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈淡黄色固体的(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(9.6mg，37％产率)。lc-ms:m/z542[m+h]+。[1810]步骤9：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-((s)-1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-((r)-1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1811][1812]对(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(9mg，16.6μmol)进行手性hplc纯化，色谱柱：chiralartcellulose-sb，2x25cm，5um；流动相a：mtbe(0.5％2mnh3-甲醇)‑‑hplc，流动相b：ipa‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在35分钟内，10b到10b；220/254nm；rt1:25.605；rt2:28.879；注射体积：0.5ml；运行次数：5。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例76(3.0mg，33％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例77(3.0mg，33％产率)。实例76和实例77的对应的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。实例76和77的对映异构体可以使用步骤7中方法m1异构体1类似地制备。[1813]实例76：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.67(s,1h),9.34(s,1h),8.72(t,j＝2.2hz,1h),8.48(d,j＝2.4hz,1h),8.01(s,1h),7.06(s,1h),5.51(d,j＝5.1hz,1h),4.90-5.04(m,1h),4.84(d,j＝11.5hz,1h),4.29(d,j＝11.5hz,1h),1.97(s,3h),1.45(d,j＝6.5hz,3h)。lc-ms:m/z542[m+h]+[1814]实例77：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.67(s,1h),9.34(s,1h),8.72(d,j＝2.2hz,1h),8.48(d,j＝2.3hz,1h),8.01(s,1h),7.06(s,1h),5.51(d,j＝5.1hz,1h),4.88-4.98(m,1h),4.84(d,j＝11.5hz,1h),4.29(d,j＝11.5hz,1h),1.97(s,3h),1.45(d,j＝6.5hz,3h)。lc-ms:m/z542[m+h]+[1815]方法a3[1816][1817]实例78：(r)-2-氯-n-(2-(2-羟基丙-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1818]步骤1：4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶甲酸乙酯[1819][1820]向2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-4-胺(2.0g，10.2mmol)于乙醇(30ml)中的混合物中加入pdcl2(dppf)(744mg，1.0mmol)和tea(3.1g，30.5mmol)。将所得混合物在一氧化碳气氛下在120℃下搅拌16小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物用水(20ml)稀释。用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色固体的4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶甲酸乙酯(1.2g，48％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:7.41(d,j＝2.1hz,1h),7.07(d,j＝2.1hz,1h),6.96(s,2h),4.33(q,j＝7.2hz,2h),1.32(t,j＝7.2hz,3h)。lc-ms:m/z235[m+h]+。[1821]步骤2：(r)-4-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酸乙酯[1822][1823]向4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶甲酸乙酯(44mg,180.7μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入三光气(32mg，108.4μmol)和tea(27mg，271.1μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(50mg，180.7μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(44mg，361.5μmol)和tea(183mg，1.8mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-4-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酸乙酯(30mg，30％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.96(s,1h),9.34(s,1h),8.51(d,j＝2.0hz,1h),8.36(d,j＝2.0hz,1h),7.07(s,1h),4.87(d,j＝11.6hz,1h),4.40(q,j＝7.2hz,2h),4.29(d,j＝11.6hz,1h),1.97(s,3h),1.35(t,j＝7.2hz,3h)。lc-ms:m/z537[m+h]+。[1824]步骤3：(r)-2-氯-n-(2-(2-羟基丙-2-基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1825][1826]在0℃下，向(r)-4-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酸乙酯(20mg，36.5μmol)于thf(2ml)中溶液中加入甲基溴化镁(0.03ml，90μmol，3m，于二乙醚中)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(3ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x5ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的(r)-4-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-6-(三氟甲基)吡啶甲酸乙酯(1.5mg，6％产率)。实例78的对应的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1827]实例78：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.75(s,1h),9.36(s,1h),8.15(d,j＝1.8hz,1h),8.05(d,j＝1.8hz,1h),7.09(s,1h),5.46(s,1h),4.91(d,j＝11.7hz,1h),4.29(d,j＝11.7hz,1h),1.97(s,3h),1.46(s,6h)。lc-ms:m/z523[m+h]+。[1828]方法b3[1829][1830]实例79：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(甲氧基甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1831]步骤1：2-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯[1832][1833]将2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(6.5g，51.5mmol)、乙腈(150ml)、2,3-二氯-5-硝基吡啶(9.0g，46.9mmol)和k2co3(8.4g，60.9mmol)放入500ml烧瓶中。将反应混合物在40℃下搅拌15小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分浓缩，以得到呈白色固体的2-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(4.9g，33.8％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:9.36(d,j＝2.3hz,1h),8.83(d,j＝2.3hz,1h),8.44(s,1h),4.05(s,3h)。lc-ms:m/z284[m+h]+。[1834]步骤2：2-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯[1835][1836]将2-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(1.3g，4.6mmol)、四氢呋喃(20ml)、水(10ml)、nh4cl(1.2g，22.9mmol)和fe(1.3g，22.9mmol)放入250ml烧瓶中。将混合物在75℃下搅拌1小时。将反应冷却至25℃。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将所得混合物用水(100ml)稀释。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(844mg，72.8％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.30(s,1h),7.90(d,j＝2.6hz,1h),7.16(d,j＝2.5hz,1h),3.98(s,3h)。lc-ms:m/z254[m+h]+。[1837]步骤3：2-[5-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氯-2-吡啶基]三唑-4-甲酸甲酯[1838][1839]将2-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(844mg，3.3mmol)、二氯甲烷(20ml)、tea(673.4mg，6.7mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(40.7mg，332.8μmol)放入100ml烧瓶中。将反应冷却至0℃。然后加入二碳酸二叔丁酯(1.5g，6.7mmol)。将反应加温至室温并搅拌15小时。将所得混合物用水(100ml)稀释。用二氯甲烷(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用65％石油醚和35％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-[5-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氯-2-吡啶基]三唑-4-甲酸甲酯(912mg，60.4％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.36(s,1h),8.35(d,j＝2.2hz,1h),7.83(d,j＝2.3hz,1h),4.00(s,3h),1.45(s,18h)。lc-ms:m/z454[m+h]+。[1840]步骤4：(5-氯-6-(4-(羟甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯[1841][1842]将2-[5-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-3-氯-2-吡啶基]三唑-4-甲酸甲酯(600mg，1.3mmol)和四氢呋喃(20ml)放入100ml烧瓶中。在0℃分几份加入lialh4(75.3mg，1.9mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用四氢呋喃(30ml)稀释。将混合物冷却至-30℃并通过加入水(75.3mg)、氢氧化钠水溶液(75.3mg，10％)和水(75.3mg)进行淬灭。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(5-氯-6-(4-(羟甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(350mg，75.1％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:10.18(s,1h),8.53(d,j＝2.3hz,1h),8.28(d,j＝2.3hz,1h),8.00(s,1h),5.44(t,j＝5.8hz,1h),4.61(d,j＝5.8hz,2h),1.49(s,9h)。lc-ms:m/z326[m+h]+。[1843]步骤5：(2-(5-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)甲磺酸甲酯[1844][1845]将(5-氯-6-(4-(羟甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(260mg，798.2μmol)和二氯甲烷(10ml)放入100ml烧瓶中。将反应冷却至0℃并加入甲磺酰氯(137.1mg，1.20mmol)和tea(242.3mg，2.4mmol)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物真空浓缩，以得到呈白色油状物的(2-(5-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)甲磺酸甲酯(320mg，粗品)。将产物在不进行进一步纯化的情况下直接用于下一步骤。lc-ms:m/z404[m+h]+。[1846]步骤6：(5-氯-6-(4-(甲氧基甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯[1847][1848]将(2-(5-((叔丁氧基羰基)氨基)-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)甲基(322mg，797μmol)、甲醇(15ml)和tea(322.7mg，3.2mmol)放入100ml烧瓶中。将混合物在60℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的(5-氯-6-(4-(甲氧基甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(85mg，31.3％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:10.17(d,j＝7.7hz,1h),8.55(d,j＝2.3hz,1h),8.30(d,j＝2.4hz,1h),8.09(s,1h),4.57(s,2h),3.32(s,3h),1.50(s,9h)。lc-ms:m/z340[m+h]+。[1849]步骤7：5-氯-6-(4-(甲氧基甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺[1850][1851]将(5-氯-6-(4-(甲氧基甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(85mg，250.2μmol)、二氯甲烷(4ml)和tfa(1ml)放入100ml烧瓶中。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将所得溶液在真空下浓缩。将残留物用乙酸乙酯(50ml)稀释。将ph用饱和nahco3水溶液调整到7-8。用乙酸乙酯(2x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用98％二氯甲烷和2％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的5-氯-6-(4-(甲氧基甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(25mg，41.2％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.00(s,1h),7.81(d,j＝2.5hz,1h),7.20(d,j＝2.5hz,1h),6.17(s,2h),4.55(s,2h),3.31(s,3h)。lc-ms:m/z240[m+h]+。[1852]步骤8：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(甲氧基甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1853][1854]向方法m1异构体2(16.5mg，59.6μmol)于四氢呋喃(3ml)中的搅拌溶液中加入三光气(10.6mg，35.8μmol)和tea(9.1mg，89.4μmol)。将所得混合物在28℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到5-氯-6-(4-(甲氧基甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(10mg，41.7μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(60.3mg，596.1μmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(728.2ug，5.9μmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将溶剂在真空下浓缩。将残留物通过使用使用96％二氯甲烷和4％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到30mg粗产物。将得到的粗产物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(甲氧基甲基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(3mg，15.0％产率)。实例79的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1855]实例79：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.70(s,1h),9.35(s,1h),8.72(s,1h),8.49(d,j＝2.3hz,1h),8.12(s,1h),7.06(s,1h),4.84(d,j＝11.5hz,1h),4.58(s,2h),4.28(d,j＝11.5hz,1h),3.32(s,3h),1.97(s,3h)。lc-ms:m/z542[m+h]+。[1856]方法c3[1857][1858]实例80：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-(1-羟乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1859]步骤1：(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1860][1861]将3-甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g，3.7mmol；方法k1，步骤7)、dmf-dma(10ml)放入100ml烧瓶中。将反应在35℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.3g，粗品)。将产物在不进行进一步纯化的情况下直接用于下一步骤。lc-ms:m/z323[m+h]+。[1862]步骤2：2-溴-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[1863][1864]将(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.1g，3.4mmol)、甲苯(15ml)、3-溴-1h-吡唑-5-胺(527.2mg，3.3mmol)和乙酸(1.5ml)放入100ml烧瓶中。将混合物在95℃下搅拌15小时。将所得溶液在真空下浓缩。将残留物用乙酸乙酯(100ml)稀释。将ph用饱和nahco3水溶液调整到7-8。用乙酸乙酯(2x100ml)萃取所得溶液。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的2-溴-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(408mg，28.6％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.82-9.13(m,1h),7.09(s,1h),4.32-4.35(m,1h),3.99-4.03(m,1h),1.90(s,3h),1.52(s,9h)。lc-ms:m/z421[m+h]+。[1865]步骤3：2-乙酰基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[1866][1867]在氮气气氛下将2-溴-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(364mg，864.2μmol)、甲苯(10ml)、三丁基(1-乙氧基乙烯基)锡烷(343.3mg，950.6μmol)、pd(pph3)4(99.9mg，86.4μmol)放入100ml烧瓶中。将混合物在130℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩。将所得残留物溶解在四氢呋喃(5ml)中，并加入hcl(5ml，2m，于h2o中)。将混合物在25℃下搅拌1小时，然后在真空下浓缩。将残留物用乙酸乙酯(100ml)稀释。将ph用饱和nahco3水溶液调整到7-8。用乙酸乙酯(2x100ml)萃取所得溶液。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用87％石油醚和13％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-乙酰基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(240mg，72.1％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.91-9.21(m,1h),7.29(s,1h),4.37(d,j＝12.4hz,1h),4.07(d,j＝12.4hz,1h),2.61(s,3h),1.97(s,3h),1.53(s,9h)。lc-ms:m/z385[m+h]+。[1868]步骤4：2-(1-羟乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[1869][1870]将2-乙酰基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(197mg，512.6μmol)、甲醇(10ml)放入100ml烧瓶中。在0℃下加入nabh4(23.3mg，615.1μmol)。将混合物在0℃下搅拌0.5小时。通过加入冰水(5ml)来淬灭反应。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的2-(1-羟乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(197mg，98.4％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.74-9.06(m,1h),6.74(d,j＝1.4hz,1h),5.41(t,j＝5.0hz,1h),4.83-4.93(m,1h),4.32(d,j＝12.0hz,1h),4.01(q,j＝7.1hz,1h),1.92(s,3h),1.52(s,9h),1.41-1.44(m,3h)。lc-ms:m/z387[m+h]+。[1871]步骤5：1-(8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-2-基)乙-1-醇[1872][1873]将2-(1-羟乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(50mg，129.4μmol)、二氯甲烷(4ml)和tfa(1ml)放入50ml烧瓶中。将混合物在25℃下搅拌3.0小时，然后在真空下浓缩。将残留物用乙酸乙酯(50ml)稀释。将ph用饱和nahco3水溶液调整到7-8。用乙酸乙酯(2x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用96％二氯甲烷和4％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的1-(8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-2-基)乙-1-醇(23mg，62.1％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.26(s,1h),6.60(s,1h),5.76(t,j＝3.0hz,1h),5.23-5.27(m,1h),4.82-4.90(m,1h),3.88(dd,j＝11.4,2.4hz,1h),3.55(dd,j＝11.4,4.1hz,1h),1.83(s,3h),1.44(dd,j＝6.5,1.5hz,3h)。lc-ms:m/z287[m+h]+。[1874]步骤6：2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[1875][1876]将1-(8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-2-基)乙-1-醇(112mg，391.3μmol)、二氯甲烷(7ml)、tea(118.8mg，1.2mmol)和二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸叔丁酯(134.5mg，508.6μmol)放入50ml烧瓶中。将混合物在25℃下搅拌2小时，然后在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(108mg，68.7％产率)。lc-ms:m/z401[m+h]+。[1877]步骤7：2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1878][1879]向5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(26.4mg，134.8μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入三光气(20.0mg，67.4μmol)和tea(17.1mg，168.5μmol)。将所得混合物在28℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(45mg，112.4μmol)于四氢呋喃(1.5ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(113.7mg，1.1mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(27.45mg，224.71μmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将溶剂在真空下浓缩。将残留物通过使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈黄色固体的2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(40mg，57.1％产率)。lc-ms:m/z622[m+h]+。[1880]步骤8：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-(1-羟乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1881][1882]将2-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(40mg，64.3μmol)、二氯甲烷(1.2ml)和tfa(0.4ml)放入100ml烧瓶中。将反应混合物在25℃下搅拌2小时，然后在真空下浓缩。将残留物用乙酸乙酯(30ml)稀释。将ph用饱和nahco3水溶液调整到7-8。用乙酸乙酯(2x30ml)萃取所得溶液。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到28mg粗品。将得到的粗品通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-(1-羟乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(8.9mg，26.9％产率)。[1883]实例80：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.27(s,1h),8.78(s,1h),8.54(s,1h),8.18(s,2h),6.79(s,1h),5.42-5.44(m,1h),4.84-4.94(m,2h),4.31(d,j＝10.8hz,1h),2.02(s,3h),1.48(d,j＝6.0hz,3h)。lc-ms:m/z508[m+h]+。[1884]方法d3[1885][1886]实例81：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-甲氧基-2-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1887]步骤1：3-氯-2,6-二氟-5-硝基吡啶[1888][1889]向3-氯-2,6-二氟吡啶(4.9g，32.7mmol)于发烟硝酸(40ml)中的溶液中逐滴加入硫酸(30ml)。将所得混合物在60℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至25℃，并倒入碎冰(200g)中。用正己烷(200ml)萃取溶液。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈灰白色固体的3-氯-2,6-二氟-5-硝基吡啶(5.0g，74％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ8.75(s,1h)；lc-ms:m/z195[m+h]+。[1890]步骤2：3-((5-氯-6-氟-3-硝基吡啶-2-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯[1891][1892]在0℃下，向3-羟基氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.2g，12.7mmol)于四氢呋喃(40ml)中的溶液中分几份加入nah(728mg，19.0mmol，60％，于矿物油中)。将混合物在0℃下搅拌15分钟。加入3-氯-2,6-二氟-5-硝基吡啶(3.1g，15.8mmol)并将混合物温热至25℃并搅拌2小时。将反应混合物倒入碎冰(200g)中。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用65％石油醚和35％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈灰白色固体的3-((5-氯-6-氟-3-硝基吡啶-2-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(3.0g，54％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ8.58(s,1h),5.40-5.46(m,1h),4.34-4.48(m,2h),4.04-4.15(m,2h),1.48(s,9h)。lc-ms:m/z348[m+h]+。[1893]步骤3：3-((5-氯-6-甲氧基-3-硝基吡啶-2-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯[1894][1895]在25℃下，向3-((5-氯-6-氟-3-硝基吡啶-2-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(3.0g，8.6mmol)于甲醇(200ml)中的溶液中逐滴加入甲醇(9ml)中的甲醇钠(483mg，8.6mmol)。将所得混合物在氮气气氛下在25℃下搅拌30分钟。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的3-((5-氯-6-甲氧基-3-硝基吡啶-2-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(2.0g，64％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ8.48(s,1h),5.48-5.35(m,1h),4.39-4.45(m,2h),4.22-4.08(m,2h),4.08(s,3h),1.48(s,9h)。lc-ms:m/z360[m+h]+。[1896]步骤4：2-(氮杂环丁烷-3-基氧基)-5-氯-6-甲氧基-3-硝基吡啶[1897][1898]在25℃下，向3-((5-氯-6-甲氧基-3-硝基吡啶-2-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g，2.7mmol)于二氯甲烷(25ml)中的搅拌溶液中加入tfa(5ml)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后在减压下浓缩。将残留物通过使用93％二氯甲烷和7％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈棕色固体的2-(氮杂环丁烷-3-基氧基)-5-氯-6-甲氧基-3-硝基吡啶(700mg，66％产率)。lc-ms:m/z260[m+h]+。[1899]步骤5：3-氯-2-甲氧基-6-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)-5-硝基吡啶[1900][1901]在25℃下，向2-(氮杂环丁烷-3-基氧基)-5-氯-6-甲氧基-3-硝基吡啶(700mg，2.7mmol)于二氯甲烷(25ml)中的搅拌溶液中加入甲醛(323mg，3.2mmol，30％，于水中)和三乙酰氧基硼氢化钠(857mg，4.1mmol)。将所得混合物在氮气气氛下在25℃下搅拌2小时。通过加入水(100ml)来淬灭反应，并用二氯甲烷(3x100ml)萃取水层。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈灰白色固体的3-氯-2-甲氧基-6-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)-5-硝基吡啶(500mg，68％产率)。lc-ms:m/z274[m+h]+。[1902]步骤6：5-氯-6-甲氧基-2-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-3-胺[1903][1904]向3-氯-2-甲氧基-6-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)-5-硝基吡啶(500mg，1.8mmol)和nh4cl(293mg，5.4mmol)于乙醇(40ml)和水(12ml)中的溶液中加入fe(510mg，9.1mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌2小时。将混合物通过硅藻土垫过滤，并且将所述垫用乙酸乙酯(50ml)洗涤。将滤液在真空下浓缩。将残留物用水(80ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x80ml)萃取。将合并的有机萃取物用盐水(300ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈棕色固体的5-氯-6-甲氧基-2-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-3-胺(180mg，37％产率)。lc-ms:m/z244[m+h]+[1905]步骤7：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-甲氧基-2-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺。[1906][1907]根据方法m1步骤2，通过使用5-氯-6-甲氧基-2-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-3-胺和方法m1异构体2制备标题化合物。实例81的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1908]实例81：1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ9.30(s,1h),8.01(s,1h),6.79(s,1h),5.30-5.38(m,1h),4.73(d,j＝11.2hz,1h),4.16-4.22(m,3h),3.99(s,3h),3.69(dd,j＝10.8,5.2hz,2h),2.67(s,3h),2.05(s,3h)。lc-ms:m/z546[m+h]+。[1909]方法e3[1910][1911]实例82：(r)-2-氯-n-(5-甲氧基-4-甲基-6-(((s)-吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸甲酰胺酯[1912]步骤1：(s)-3-((6-氨基-3-甲氧基-4-甲基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1913][1914]在氮气气氛下在25℃下，向(s)-3-((6-氨基-4-氯-3-甲氧基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(100mg，290.8μmol；方法p2，步骤7)于二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中分份加入2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼烷(219mg，1.8mmol)、k2co3(80mg，581.7μmol)和pd-peppsi-iheptcl3-氯吡啶(28mg，29.1μmol)。将混合物在80℃下搅拌16小时。冷却至25℃后，将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈黄色油状物的(s)-3-((6-氨基-3-甲氧基-4-甲基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(50mg，16％产率)。1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ6.24(s,1h),5.50-5.52(m,1h),3.69(s,3h),350-3.56(m,4h),2.17-2.21(m,5h),1.47(s,9h)。lc-ms:m/z324[m+h]+。[1915]步骤2：(s)-3-((6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺)-3-甲氧基-4-甲基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[1916][1917]在25℃下，向(s)-3-((6-氨基-3-甲氧基-4-甲基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(40mg，123.7μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌混合物中加入三光气(22mg，74.2μmol)和tea(18.7mg，185.5μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(34mg，123.7μmol)于四氢呋喃(5ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(30mg，247.4μmol)和tea(125mg，1.2mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的(s)-3-((6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺)-3-甲氧基-4-甲基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(30mg，38％产率)。lc-ms:m/z626[m+h]+[1918]步骤3：(r)-2-氯-n-(5-甲氧基-4-甲基-6-(((s)-吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸甲酰胺酯[1919][1920]在25℃下，向(s)-3-((6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺)-3-甲氧基-4-甲基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(30mg，47.9μmol)于二氯甲烷(10ml)中的溶液中逐滴加入tfa(1ml)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将粗产物(30mg)通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的实例82(8.6mg，29％产率)。实例82的差向异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1921]实例82：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.31(s,1h),9.20-9.22(m,1h),7.29(s,1h),7.06(d,j＝1.2hz,1h),5.56-5.58(m,1h),4.87-4.93(m,1h),4.21-4.25(m,1h),3.72(s,3h),3.25-3.32(m,4h),2.22(s,3h),2.05-2.17(m,2h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z526[m+h]+。[1922]方法f3[1923][1924]实例83：(r)-2-氯-n-(2-((二甲基(氧代)-λ6-亚硫基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1925]步骤1：(2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯[1926][1927]向2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-4-胺(10g，50.9mmol)于四氢呋喃(250ml)中的搅拌溶液中加入二碳酸二叔丁酯(16.7g，76.3mmol)、tea(12.9g，127.2mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(0.6g，5.1mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用83％石油醚和17％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(5.2g，33％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:7.65(s,2h),1.53(s,9h)；lc-ms:m/z297[m+h]+[1928]步骤2：(2-((二甲基(氧代)-λ6-亚硫基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯[1929][1930]在氮气气氛下，向(2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(600mg，2.0mmol)于二噁烷(12ml)中的搅拌溶液中加入亚氨基二甲基-λ6-砜(226mg，2.4mmol)pd2(dba)3(186mg，0.2mmol)、xantphos(235mg，0.4mmol)、cs2co3(989mg，0.4mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌3小时。使混合物冷却至室温并在减压下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行进行纯化，以得到呈黄色固体的(2-((二甲基(氧代)-λ6-亚硫基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(600mg，82％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:9.96(s,1h),7.45(d,j＝3hz,1h),6.88(d,j＝3hz,1h),3.38(s,6h),1.49(s,9h)；lc-ms:m/z354[m+h]+。[1931]步骤3：((4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)亚氨基)二甲基-λ6-砜[1932][1933]向(2-((二甲基(氧代)-λ6-亚硫基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(100mg，282.5μmol)于二氯甲烷(9.6ml)中的搅拌溶液中加入tfa(2.4ml)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。向残留物中加入饱和nahco3溶液(40ml)，并用乙酸乙酯(3x40ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的((4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)亚氨基)二甲基-λ6-砜(60mg，83％产率)。lc-ms:m/z254[m+h]+。[1934]步骤4：(r)-2-氯-n-(2-((二甲基(氧代)-λ6-亚硫基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1935][1936]向((4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)亚氨基)二甲基-λ6-砜(42mg，166μmol)于四氢呋喃(4ml)中的搅拌溶液中加入三光气(20mg，65.2μmol)和tea(17mg，163μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(30mg，109μmol)于thf(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(111mg，1.1mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(27mg，218μmol)。将混合物在40℃下搅拌12小时。将混合物倒入水(40ml)中，并用乙酸乙酯(3x40ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水na2so4干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(2-((二甲基(氧代)-λ6-亚硫基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(26mg，42％产率)。实例83的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1937]实例83：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.35(s,1h),9.31(s,1h),7.50(d,j＝1.6hz,1h),7.20(d,j＝1.6hz,1h),7.06(s,1h),4.84(d,j＝12hz,1h),4.25(d,j＝12hz,1h),3.41(s,6h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z556[m+h]+。[1938]方法g3[1939][1940]实例84：(r)-2-氯-8-甲基-n-(2-((s)-4-甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1941]步骤1：(s)-(2-(4-甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯[1942][1943]在氮气气氛下，向(2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(200mg，675.6μmol；方法f3，步骤1)、(s)-4-甲基噁唑烷-2-酮(69mg，675.6μmol)于二噁烷(10ml)中的溶液中加入cs2co3(439mg，1.3mmol)、brettphospdg3(13mg，135.1μmol)。将所得混合物在90℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x60ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(s)-(2-(4-甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(120mg，50％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:10.34(s,1h),8.45(d,j＝3hz,1h),7.69(d,j＝3hz,1h),4.79-4.84(m,1h),4.51-4.57(m,1h),4.02-4.09(m,1h),1.50(s,9h),1.37(d,j＝6hz,3h)；lc-ms:m/z362[m+h]+。[1944]步骤2：(s)-3-(4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-4-甲基噁唑烷-2-酮[1945][1946]在25℃下，向(s)-(2-(4-甲基-2-氧代噁唑啉-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(120mg，332.1μmol)于二氯甲烷(10ml)中的搅拌溶液中分份加入tfa(2ml)。将所得混合物在25℃下搅拌3小时。将所得混合物在减压下浓缩。将残留物通过使用93％二氯甲烷和7％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(s)-3-(4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-4-甲基噁唑烷-2-酮(80mg，60％产率)。lc-ms:m/z262[m+h]+。[1947]步骤3：(r)-2-氯-8-甲基-n-(2-((s)-4-甲基-2-氧代噁唑烷-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1948][1949]根据方法m1步骤2，通过使用(s)-3-(4-氨基-6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-4-甲基噁唑烷-2-酮和方法m1异构体2制备标题化合物。实例84的差向异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1950]实例84：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.89(s,1h),9.36(s,1h),8.54(s,1h),8.01(s,1h),7.08(s,1h),4.90-4.79(m,2h),4.56-4.59(m,1h),4.31(d,j＝11.6hz,1h),4.11-4.14(m,1h),1.97(s,3h),1.40(d,j＝6.0hz,3h)。lc-ms:m/z564[m+h]+。[1951]方法h3[1952][1953]实例85：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((二甲基(氧代)-λ6-亚硫基)氨基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺。[1954]步骤1：((3-氯-5-硝基吡啶-2-基)亚氨基)二甲基-λ6-砜[1955][1956]在氮气气氛下，向甲基2,3-二氯-5-硝基吡啶(1.0g，5.2mmol)和亚氨基二甲基-λ6-砜(579.2mg，6.2mmol)于二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中加入pd2(dba)3(474.6mg，518.1μmol)、xantphos(599.0mg，1.1mmol)和cs2co3(2.5g，7.7mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌2小时。将混合物冷却至25℃。通过加入水(50ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的((3-氯-5-硝基吡啶-2-基)亚氨基)二甲基-λ6-砜(700mg，48％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.96(d,j＝2.4hz,1h),8.38(d,j＝2.4hz,1h),3.47(s,6h)。lc-ms:m/z250[m+h]+。[1957]步骤2：((5-氨基-3-氯吡啶-2-基)亚氨基)二甲基-λ6-砜[1958][1959]向((3-氯-5-硝基吡啶-2-基)亚氨基)二甲基-λ6-砜(300mg，1.2mmol)于乙醇(9ml)和水(3ml)中的溶液中加入fe(335mg，6.0mmol)和nh4cl(194mg，3.6mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌3小时。通过加入水(50ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的((5-氨基-3-氯吡啶-2-基)亚氨基)二甲基-λ6-砜(200mg，74％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.65(d,j＝2.4hz,1h),7.07(d,j＝2.4hz,1h),3.36(s,6h)。lc-ms:m/z220[m+h]+。[1960]步骤3：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-((二甲基(氧代)-λ6-亚硫基)氨基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(5-氰基-6-(5-氰基-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1967]步骤1：3-氯-2-肼基-5-硝基吡啶[1968][1969]在25℃下，向2,3-二氯-5-硝基吡啶(15.0g，77.7mmol)于乙醇(200ml)中的搅拌混合物中加入水合肼(48.6g，777.2mmol，80％)。将所得混合物在80℃下搅拌2小时。通过过滤收集沉淀的产物，然后从乙醇(200ml)中重结晶，以得到呈淡黄色固体的3-氯-2-肼基-5-硝基吡啶(12.0g，81％产率)。lc-ms:m/z189[m+h]+。[1970]步骤2：5-氨基-1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-甲酸乙酯[1971][1972]将3-氯-2-肼基-5-硝基吡啶(12.0g，63.6mmol)和(e)-2-氰基-3-乙氧基丙烯酸乙酯(10.7g，63.6mmol)于乙醇(80ml)中的溶液在80℃下搅拌1小时。将混合物冷却至25℃并在真空下浓缩。将残留物通过使用20％石油醚和80％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的5-氨基-1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-甲酸乙酯(14g，70％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)9.31(d,j＝2.4hz,1h),9.05(d,j＝2.4hz,1h),7.78(s,1h),6.78(br,2h),4.21(d,j＝7.2hz,2h),1.26(d,j＝7.2hz,3h)。lc-ms:m/z312[m+h]+。[1973]步骤3：1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-1h-吡唑-5-胺[1974][1975]将5-氨基-1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-1h-吡唑-4-甲酸乙酯(3.1g，9.9mmol)于浓盐酸(80ml)中的溶液在90℃下搅拌3小时。将混合物冷却至25℃。将ph用饱和nahco3水溶液调整到8。用乙酸乙酯(3x55ml)萃取混合物。将合并的有机层用盐水(60ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈红色固体的1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-1h-吡唑-5-胺(1.1g，46％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.25(d,j＝3.2hz,1h),8.96(d,j＝3.6hz,1h)7.43(d,j＝2.4hz,1h)5.91(br,2h),5.46(d,j＝2.4hz,1h)。lc-ms:m/z240[m+h]+。[1976]步骤4：2-(5-溴-1h-吡唑-1-基)-3-氯-5-硝基吡啶[1977][1978]在氮气气氛下在0℃下，向加入1-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-1h-吡唑-5-胺(640mg，2.6mmol)和亚硝酸异戊酯(312mg，2.6mmol)于乙腈(10ml)中的搅拌混合物中加入溴化铜(ii)(596mg，2.6mmol)和溴化铜(i)(383mg，2.6mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时。将所得混合物倒入水(30ml)中，并用乙酸乙酯(3x35ml)萃取。将合并的有机层用盐水(60ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残留物通过使用30％石油醚和70％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-(5-溴-1h-吡唑-1-基)-3-氯-5-硝基吡啶(360mg，44％产率)。lc-ms:m/z303[m+h]+。[1979]步骤5：6-(5-溴-1h-吡唑-1-基)-5-氯吡啶-3-胺[1980][1981]向2-(5-溴-1h-吡唑-1-基)-3-氯-5-硝基吡啶(1.2g，3.9mmol)于乙醇(24ml)和水(8ml)中的搅拌溶液中加入fe(656mg，11.7mmol)和nh4cl(1.0g，19.6mmol)。将混合物在80℃下搅拌1小时。使混合物冷却至25℃。将混合物用水(50ml)稀释。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用30％石油醚和70％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的6-(5-溴-1h-吡唑-1-基)-5-氯吡啶-3-胺(820mg，72％产率)。lc-ms:m/z273[m+h]+[1982]步骤6：n-[6-(5-溴-1h-吡唑-1-基)-5-氯吡啶-3-基]-n-[(叔丁氧基)羰基]氨基甲酸叔丁酯[1983][1984]在0℃下，向6-(5-溴吡唑-1-基)-5-氯-吡啶-3-胺(820mg，3.0mmol)、tea(910mg，8.9mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(73mg，599.6μmol)于二氯甲烷(20ml)中的搅拌溶液中加入叔丁氧基羰基碳酸叔丁酯(2.6g，11.9mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌15小时。将所得溶液在真空下浓缩。将残留物通过使用40％石油醚和60％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的n-[6-(5-溴-1h-吡唑-1-基)-5-氯吡啶-3-基]-n-[(叔丁氧基)羰基]氨基甲酸叔丁酯(980mg，68％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.35(d,j＝2.4hz,1h),7.77(dd,j＝8.4,2.4hz,2h),6.52(d,j＝2.0hz,1h),1.46(s,18h)。lc-ms:m/z473[m+h]+。[1985]步骤7：1-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-1h-吡唑-5-甲腈和5-氨基-2-(5-氰基-1h-吡唑-1-基)烟腈的混合物[1986][1987]在氮气气氛下，向n-[6-(5-溴吡唑-1-基)-5-氯-3-吡啶基]-n-叔丁氧基羰基-氨基甲酸叔丁酯(800mg，1.7mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(12ml)中的搅拌溶液中加入zn(cn)2(396mg，3.4mmol)和pd(dppf)cl2(276mg，337.7μmol)。将反应混合物在微波反应器中在180℃下加热2小时。通过加入水(100ml)来淬灭混合物。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的1-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-1h-吡唑-5-甲腈和5-氨基-2-(5-氰基-1h-吡唑-1-基)烟腈的混合物(170mg，24％产率)。lc-ms:m/z220和211[m+h]+。[1988]步骤8：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(5-氰基-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氰基-6-(5-氰基-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1989][1990]向2-(5-氨基-3-氯-2-吡啶基)吡唑-3-甲腈和5-氨基-2-(5-氰基吡唑-1-基)吡啶-3-甲腈的混合物(170mg，819.6μmol)于四氢呋喃(2ml)中的混合物中加入tea(62mg，614.7μmol)和三光气(73mg，245.9μmol)。将混合物在25℃下搅拌30分钟，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(91mg，327.8μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(415mg，4.1mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(100mg，819.6μmol)。将反应混合物在40℃下搅拌15小时。在真空下去除溶剂。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到60mg粗产物。对粗产物进行制备型hplc纯化。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氰基-6-(5-氰基-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(实例87；5.6mg，0.5％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(5-氰基-1h-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(实例86；22.0mg，2.1％产率)。实例86和实例87的对应的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[1991]实例86：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.75(br,1h),9.36(s,1h),8.75(s,1h),8.53(d,j＝2.1hz,1h),8.10(d,j＝2.1hz,1h),7.52(d,j＝2.1hz,1h),7.07(s,1h),4.85(d,j＝11.7hz,1h),4.30(d,j＝11.4hz,1h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z522[m+h]+。[1992]实例87：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.76(br,1h),9.36(s,1h),8.94(d,j＝2.4hz,1h),8.70(d,j＝2.4hz,1h),8.18(d,j＝1.8hz,1h),7.61(d,j＝2.1hz,1h),7.08(s,1h),4.83(d,j＝11.1hz,1h),4.30(d,j＝11.4hz,1h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z513[m+h]+。[1993]方法j3[1994][1995]实例88和89：由含有(r)-n-(2-(二氟甲基)吡啶-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(s)-n-(2-(二氟甲基)吡啶-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[1996]步骤1：n-(2-(二氟甲基)吡啶-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[1997][1998]在0℃下，向2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(方法x1，步骤3)(40mg，154μmol)于thf(1ml)中的搅拌溶液中加入三光气(30mg，102μmol)和tea(26mg，256μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到2-(二氟甲基)吡啶-4-胺(25mg，171μmol)于thf(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(173mg，1.7mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(31mg，256μmol)。将混合物在50℃下搅拌16小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的n-(2-(二氟甲基)吡啶-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(20mg，30％产率)。lc-ms:m/z431[m+h]+。[1999]步骤2：分离对映异构体以获得(r)-n-(2-(二氟甲基)吡啶-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(s)-n-(2-(二氟甲基)吡啶-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2000][2001]对含有20mgn-(2-(二氟甲基)吡啶-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的样品进行手性hplc(色谱柱：lux5ucellulose-4,2.12*25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在21分钟内，10b到10b；220/254nm；rt1:12.058；rt2:17.004；注射体积：1.5ml；运行次数：4)。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈灰白色固体的实例88(9.8mg，13％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈灰白色固体的实例89(6.5mg，9％产率)。[2002]实例88：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ9.38(s,1h),8.53(d,j＝6.0hz,1h),8.10(s,1h),8.03(s,1h),6.76(t,j＝54.8hz,1h),6.36(d,j＝5.2hz,1h),4.77(d,j＝10.8hz,1h),4.18(d,j＝10.8hz,1h),2.05(s,3h)。lc-ms:m/z431[m+h]+。[2003]实例89：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ9.39(s,1h),8.56(d,j＝5.6hz,1h),7.83(s,1h),7.79(d,j＝5.6hz,1h),6.67(t,j＝55.2hz,1h),6.35(d,j＝5.2hz,1h),4.63(d,j＝10.4hz,1h),4.09(d,j＝10.4hz,1h),2.05(s,3h)。lc-ms:m/z431[m+h]+。[2004]方法k3[2005][2006]实例90：(s)-n-(5-氰基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2007]步骤1：分离对映异构体以获得(s)-2-氰基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶和(r)-2-氰基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3e]嘧啶[2008][2009]对2-氰基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(方法x1，步骤3；500mg)的外消旋混合物进行手性hplc纯化(色谱柱：chiralpakig，3*25cm，5um；流动相a：co2，流动相b：meoh(0.1％2mnh3-meoh)；流速：100毫升/分钟；梯度：20％b；220nm；rt1:2.13；rt2:3.52；注射体积：4.8ml；运行次数：5)。将第一个洗脱异构体(rt2.13分钟)浓缩并冻干，以得到呈黄色固体的方法k3异构体1(150mg，30％产率)。将第二个洗脱异构体(rt3.52分钟)浓缩并冻干，以得到呈黄色固体的方法k3异构体2(100mg，20％产率)。然后将两种异构体分别进行方法x1步骤4，以分别转化为实例38和实例39。实例39衍生自方法k3异构体2。[2010]步骤2：(s)-n-(5-氰基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2011][2012]向方法k3异构体1(30mg，115.3μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌溶液中加入三光气(20mg，69.2μmol)和tea(17mg，173.0μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到5-氨基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)烟腈(43mg，230.6μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(21mg，173.0μmol)和tea(117mg，1.2mmol)。将混合物在60℃下搅拌16小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(s)-n-(5-氰基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(3.6mg，6％产率)。[2013]实例90：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.79(s,1h),9.36(s,1h),8.96(s,1h),8.72(d,j＝2.4hz,1h),8.29(s,2h),6.69(d,j＝4.8hz,1h),4.83(d,j＝11.6hz,1h),4.28(d,j＝11.6hz,1h),1.97(s,3h)。lc-ms:m/z473[m+h]+。[2014]实例91：(r)-n-(5-氰基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2015][2016]根据方法k3步骤2，通过使用5-氨基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)烟腈和方法k3异构体2制备标题化合物。[2017]实例91：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.76(s,1h),9.35(s,1h),8.98(d,j＝2.4hz,1h),8.72(d,j＝2.8hz,1h),8.30(s,2h),6.70(d,j＝4.8hz,1h),4.84(d,j＝11.6hz,1h),4.30(d,j＝11.6hz,1h),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z473[m+h]+。[2018]方法l3[2019][2020]实例92：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2021]步骤1：5-羟基-1-(4-甲氧基苄基)-1h-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯[2022][2023]在25℃下，向1-(叠氮甲基)-4-甲氧基苯(4.0g，24.5mmol)于二甲亚砜(30ml)中的搅拌混合物中加入k2co3(13.5g，98.1mmol)和丙二酸二乙酯(5.5g，34.3mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至0℃，并通过加入hcl(70ml，5m)进行淬灭。将混合物在25℃下搅拌2小时。通过过滤收集固体，以得到呈灰白色固体的5-羟基-1-(4-甲氧基苄基)-1h-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯(4.7g，69％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ7.94(s,1h),7.24-7.34(m,2h),6.86-6.91(m,2h),4.44-4.51(m,2h),4.30(q,j＝7.2hz,2h),3.82(s,3h),1.32(t,j＝7.2hz,3h)。lc-ms:m/z278[m+h]+。[2024]步骤2：5-甲氧基-1-(4-甲氧基苄基)-1h-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯[2025][2026]向5-羟基-1-(4-甲氧基苄基)-1h-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯(6.0g，21.6mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(120ml)中的搅拌混合物中加入rh2(aco)4(68mg，246.7μmol)和(三甲基甲硅烷基)重氮甲烷溶液(741mg，6.5mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物冷却至0℃，并通过加入甲醇(10ml)、冰醋酸(1ml)和水(100ml)进行淬灭。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取混合物。将合并的有机萃取物用盐水(3x200ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，过滤并浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的5-甲氧基-1-(4-甲氧基苄基)-1h-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯(3.4g，54％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ7.24-7.29(m,2h),6.86-6.91(m,2h),5.31(s,2h),4.42(q,j＝7.2hz,2h),4.12(s,3h),3.81(s,3h),1.43(t,j＝7.2hz,3h)。lc-ms:m/z292[m+h]+。[2027]步骤3：5-甲氧基-1h-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯[2028][2029]向5-甲氧基-1-(4-甲氧基苄基)-1h-1,2,3-三唑-4-甲酸乙酯(3.0g，10.3mmol)于乙腈(70ml)和水(7ml)中的溶液中加入can(5.6g，10.3mmol)。将所得溶液在25℃下搅拌3小时。将反应混合物在减压下浓缩。将残留物溶解在水(100ml)中，并用乙酸乙酯(2x100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(200ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-甲氧基-1h-三唑-4-甲酸乙酯(1.3g，74％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ12.69(br,1h),4.49(q,j＝7.2hz,2h),4.12(s,3h),1.43(t,j＝7.2hz,3h)。lc-ms:m/z172[m+h]+。[2030]步骤4：5-甲氧基-1h-1,2,3-三唑-4-甲酸[2031][2032]向5-甲氧基-1h-三唑-4-甲酸乙酯(560mg，3.3mmol)于乙醇(10ml)中的搅拌溶液中加入h2o(3ml)中的naoh(785mg，19.2mmol)。将所得溶液在50℃下搅拌2小时。用hcl(6m)将ph调整到3。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取混合物。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并浓缩，以得到呈无色油状物的5-甲氧基-1h-1,2,3-三唑-4-甲酸(460mg，98％产率)。1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ4.02(s,3h)。lc-ms:m/z144[m+h]+。[2033]步骤5：3-氯-2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-硝基吡啶和3-氯-2-(4-甲氧基-1h-1,2,3-三唑-2-基)-5-硝基吡啶[2034][2035]将5-甲氧基-1h-1,2,3-三唑-4-甲酸(400mg，2.8mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(8ml)中的混合物在130℃下搅拌4小时。将k2co3(2.4g，17.4mmol)和2,3-二氯-5-硝基-吡啶(600mg，3.1mmol)加入溶液中。将混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭，用乙酸乙酯(3x100ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的3-氯-2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-硝基吡啶(100mg，14％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ9.31(d,j＝2.4hz,1h),8.75(d,j＝2.4hz,1h),7.58(s,1h),4.14(s,3h)。lc-ms:m/z256[m+h]+和呈白色固体的3-氯-2-(4-甲氧基-1h-1,2,3-三唑-2-基)-5-硝基吡啶(60mg，8％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ9.29(d,j＝2.4hz,1h),8.81(d,j＝2.4hz,1h),7.84(s,1h),4.11(s,3h)。lc-ms:m/z256[m+h]+。[2036]步骤6：5-氯-6-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺[2037][2038]向3-氯-2-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-硝基吡啶(100mg，391.2μmol)于乙醇(2ml)和水(0.5ml)中的溶液中加入fe(65mg，1.3mmol)和nh4cl(104mg，2.3mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌3小时。将混合物过滤。将滤液在真空下浓缩，用水(10ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取。将合并的有机层用盐水(2x20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用40％石油醚和60％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-氯-6-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(60mg，68％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ7.93(d,j＝2.7hz,1h),7.37(s,1h),7.19(d,j＝2.7hz,1h),4.06(s,3h)。lc-ms:m/z226[m+h]+。[2039]步骤7：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-甲氧基-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2040][2041]根据方法a2步骤2，通过使用5-氯-6-(4-甲氧基三唑-2-基)吡啶-3-胺和方法m1异构体2制备标题化合物。实例92的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2042]实例92：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.68(s,1h),9.37(s,1h),8.72(d,j＝2.4hz,1h),8.48(d,j＝2.4hz,1h),7.79(s,1h),7.09(s,1h),4.86(d,j＝11.4hz,1h),4.31(d,j＝11.4hz,1h),3.97(s,3h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z528[m+h]+。[2043]方法m3[2044][2045]实例93：(r)-2-氯-n-(1-(二氟甲基)-5-乙氧基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2046]步骤1：5-溴-2-氯-3-乙氧基吡啶[2047][2048]向5-溴-2-氯吡啶-3-醇(1.7g，8.2mmol)和cs2co3(4.0g，12.2mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(20ml)中的搅拌混合物中逐滴加入溴乙烷(1.1g，9.8mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(20ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-溴-2-氯-3-乙氧基吡啶(1.7g，86％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ8.04(d,j＝2.0hz,1h),7.30(d,j＝2.0hz,1h),4.11(q,j＝7.2hz,2h),1.51(t,j＝7.2hz,3h)。lc-ms:m/z236[m+h]+。[2049]步骤2：5-溴-1-(二氟甲基)-3-乙氧基吡啶-2(1h)-酮[2050][2051]向5-溴-2-氯-3-乙氧基吡啶(1.0g，4.1mmol)于乙腈(10ml)中的搅拌溶液中加入nahco3(418mg，5.0mmol)和2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸(2.2g，12.4mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌16小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的5-溴-1-(二氟甲基)-3-乙氧基吡啶-2(1h)-酮(690mg，61％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ7.69(t,j＝60.0hz,1h),7.21(d,j＝2.4hz,1h),6.61(d,j＝2.4hz,1h),4.02(q,j＝6.9hz,2h),1.49(t,j＝7.2hz,3h)。lc-ms:m/z268[m+h]+。[2052]步骤3：1-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-3-乙氧基吡啶-2(1h)-酮[2053][2054]在氮气气氛下，向5-溴-1-(二氟甲基)-3-乙氧基吡啶-2(1h)-酮(500mg，1.8mmol)于二噁烷(20ml)中的混合物中加入二苯基甲亚胺(662mg，3.7mmol)、pd2(dba)3(568mg，548μmol)、xantphos(317mg，548μmol)和cs2co3(1.8g，5.5mmol)。将所得混合物在110℃下搅拌16小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈红色固体的1-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-3-乙氧基吡啶-2(1h)-酮(330mg，49％产率)。lc-ms:m/z369[m+h]+。[2055]步骤4：5-氨基-1-(二氟甲基)-3-乙氧基吡啶-2(1h)-酮[2056][2057]向1-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-3-乙氧基吡啶-2(1h)-酮(330mg，895.8μmol)于四氢呋喃(10ml)中的溶液中加入盐酸盐(5ml，1m)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用水(5ml)稀释。将ph用饱和nahco3水溶液调整到7-8。用乙酸乙酯(3x5ml)萃取所得溶液。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈红色固体的5-氨基-1-(二氟甲基)-3-乙氧基吡啶-2(1h)-酮(180mg，81％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ7.74(t,j＝60.0hz,1h),6.54(d,j＝2.4hz,1h),6.32(d,j＝2.4hz,1h),4.00(q,j＝7.2hz,2h),1.48(t,j＝7.2hz,3h)。lc-ms:m/z205[m+h]+。[2058]步骤6：(r)-2-氯-n-(1-(二氟甲基)-5-乙氧基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2059][2060]向方法m1异构体2(56mg，204.1μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入三光气(30mg，102.0μmol)和tea(31mg，306.1μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到5-氨基-1-(二氟甲基)-3-乙氧基吡啶-2(1h)-酮(50mg，244.9μmol)于四氢呋喃(5ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(50mg，408.1μmol)和tea(206mg，2.0mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈黄色固体的(r)-2-氯-n-(1-(二氟甲基)-5-乙氧基-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(5.0mg，5％产率)。实例93的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2061]实例93：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.30(s,1h),8.84(s,1h),7.94(t,j＝60.0hz,1h),7.68(d,j＝2.4hz,1h),7.05(d,j＝2.4hz,1h),7.03(s,1h),4.70(d,j＝11.4hz,1h),4.18(d,j＝11.7hz,1h),3.99(q,j＝6.9hz,2h),1.95(s,3h),1.36(t,j＝6.9hz,3h)。lc-ms:m/z507[m+h]+。[2062]方法n3[2063][2064]实例94：(r)-2-氯-8-甲基-n-(1-(甲基磺酰基)-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2065]步骤1：1-(甲基磺酰基)-4-硝基-1h-吡唑甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2076][2077]根据方法l3步骤6和7，通过使用3-氯-2-(4-甲氧基-1h-1,2,3-三唑-2-基)-5-硝基吡啶和方法m1异构体2制备标题化合物。实例95的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2078]实例95：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.72(s,1h),9.36(s,1h),8.76(d,j＝2.4hz,1h),8.51(d,j＝2.4hz,1h),8.20(s,1h),7.09(s,1h),4.86(d,j＝11.7hz,1h),4.31(d,j＝11.7hz,1h),3.93(s,3h),2.00(s,3h)。lc-ms:m/z528[m+h]+。[2079]方法o3[2080][2081]实例96：(r)-2-氯-n-(5-氟-2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2082]步骤1：5-氟-2-(三氟甲基)吡啶-4-胺[2083][2084]向2-(三氟甲基)吡啶-4-胺(3g，18.5mmol)于乙腈(50ml)中的搅拌溶液中加入1-(氯甲基)-4-氟-1,4-二氮杂双环[2.2.2]辛烷-1,4-四氟硼酸二铵(14g，40.7mmol)。将混合物在25℃下搅拌48小时。在真空下去除溶剂。向残留物中加入乙酸乙酯(50ml)和饱和nahco3水溶液(50ml)。分离各层，并用乙酸乙酯(2x50ml)萃取水层。将合并的有机层在真空下浓缩。将残留物通过使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的5-氟-2-(三氟甲基)吡啶-4-胺(310mg，8％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:8.26(d,j＝2.7hz,1h),7.06(d,j＝6.8hz,1h),4.66(s,2h)。lc-ms:m/z181[m+h]+。[2085]步骤2：(r)-2-氯-n-(5-氟-2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,(甲氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(甲氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2092]步骤1：((苄氧基)甲基)三苯基氯化鏻[2093][2094]向((氯甲氧基)甲基)苯(50g，319.3mmol)于甲苯(100ml)中的搅拌溶液中缓慢加入三苯基膦(92.1g，351.2mmol)。将所得混合物在110℃搅拌20小时。过滤混合物，并用50ml石油醚洗涤固体，以得到呈白色固体的((苄氧基)甲基)三苯基氯化鏻(90g，66％产率)。lc-ms:m/z383[m-cl]+。[2095]步骤2：(z)-3-(苄氧基)-2-(三氟甲基)丙烯酸乙酯和(e)-3-(苄氧基)-2-(三氟甲基)丙烯酸乙酯[2096][2097]在0℃下，向((苄氧基)甲基)三苯基氯化鏻(20.0g，47.7mmol)于四氢呋喃(200ml)中的混合物中分批加入nah(1.9g，47.7mmol，60％，于矿物油中)。将所得混合物在0℃下搅拌0.5小时。然后，逐滴加入3,3,3-三氟-2-氧代丙酸乙酯(6.50g，38.2mmol)于thf(50ml)中的溶液。将所得混合物在50℃下搅拌15小时。将反应混合物用水(50ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x200ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色油状物的(z)-3-(苄氧基)-2-(三氟甲基)丙烯酸乙酯和(e)-3-(苄氧基)-2-(三氟甲基)丙烯酸乙酯的混合物(2.5g，10％产率)。lc-ms:m/z275[m+h]+。[2098]步骤3：1-苄基-4-(苄氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-甲酸乙酯[2099][2100]在0℃下，向(z)-3-(苄氧基)-2-(三氟甲基)丙烯酸乙酯和(e)-3-(苄氧基)-2-(三氟甲基)丙烯酸乙酯(3.6g，13.1mmol)于n-(甲氧基甲基)-1-苯基-n-(三甲基甲硅烷基甲基)甲胺(4.7g，19.7mmol)中的搅拌混合物中逐滴加入tfa(150mg，1.3mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x100ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色油状物的1-苄基-4-(苄氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-甲酸乙酯(3.6g，68％产率)。lc-ms:m/z408[m+h]+。[2101]步骤4：(1-苄基-4-(苄氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)甲醇[2102][2103]在0℃下，向1-苄基-4-(苄氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-甲酸乙酯(2.8g，6.8mmol)于四氢呋喃(20ml)中的搅拌溶液中加入lialh4(313mg，8.2mmol)。将反应混合物在25℃搅拌3小时。将反应混合物用水(10ml)淬灭，并滤出固体。用乙酸乙酯(3x20ml)萃取滤液。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(1-苄基-4-(苄氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)甲醇(1.9g，75％产率)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ7.22-7.33(m,10h),4.62(d,j＝12.0hz,1h),4.53(d,j＝11.6hz,1h),4.11(t,j＝6.8hz,1h),3.77(d,j＝12.0hz,1h),3.54-3.63(m,3h),3.04-3.08(m,1h),2.64-2.73(m,2h),2.45-2.49(m,1h)。lc-ms:m/z366[m+h]+。[2104]步骤5：1-苄基-4-(苄氧基)-3-(甲氧基甲基)-3-(三氟甲基)吡咯烷[2105][2106]在0℃下，向(1-苄基-4-(苄氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-3-基)甲醇(1.9g，5.4mmol)于四氢呋喃(20ml)中的溶液中分批加入nah(260mg，6.5mmol，60％，于矿物油中)。将反应混合物在0℃下搅拌0.5小时。然后在0℃下逐滴加入碘甲烷(1.2g，8.1mmol)并将反应混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(20ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物1-苄基-4-(苄氧基)-3-(甲氧基甲基)-3-(三氟甲基)吡咯烷(1.7g，83％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ7.23-7.36(m,10h),4.68(d,j＝12.4hz,1h),4.54(d,j＝12.4hz,1h),4.08-4.14(m,1h),3.67(d,j＝12.8hz,1h),3.57(d,j＝10.0hz,1h),3.52(d,j＝12.8hz,1h),3.35-3.38(m,4h),3.12-3.16(m,1h),2.71(d,j＝10.0hz,1h),2.64(d,j＝10.0hz,1h),2.46-2.51(m,1h)。lc-ms:m/z380[m+h]+。[2107]步骤6：4-(甲氧基甲基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇盐酸盐[2108][2109]向1-苄基-4-苄氧基-3-(甲氧基甲基)-3-(三氟甲基)吡咯烷(1.8g，4.7mmol)和hcl(4.7ml，1m(meoh))于甲醇(50ml)中的溶液中加入pd/c(1.8g，10％)。将所得混合物在氢气气氛下在25℃下搅拌48小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩，以得到呈黄色固体的4-(甲氧基甲基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇盐酸盐(1.1g，99％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.57(s,2h),6.15(d,j＝5.2hz,1h),4.37-4.43(m,1h),3.51(s,2h),3.40-3.48(m,2h),3.31-3.34(m,1h),3.30(s,3h),3.05(dd,j＝5.2,12.0hz,1h)。lc-ms:m/z200[m+h-hcl]+。[2110]步骤7：4-羟基-3-(甲氧基甲基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2111][2112]向4-(甲氧基甲基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇盐酸盐(1.1g，4.7mmol)和二碳酸二叔丁酯(1.5g，7.0mmol)于四氢呋喃(20ml)中的溶液中加入三乙胺(2.4g，23.3mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(20ml)淬灭。用乙酸乙酯(2x20ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的4-羟基-3-(甲氧基甲基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.2g，86％产率)。lc-ms:m/z300[m+h]+。[2113]步骤8：3-(甲氧基甲基)-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2114][2115]向4-羟基-3-(甲氧基甲基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.1g，3.7mmol)和硅胶(360mg)于二氯甲烷(10ml)中的混合物中加入pcc(360mg，1.7mmol)。将所得混合物在40℃下搅拌15小时。将反应混合物用水(30ml)淬灭并且用二氯甲烷(3x30ml)萃取。将合并的有机层用盐水(60ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的3-(甲氧基甲基)-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(515mg，31％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ3.79-4.14(m,5h),3.57(d,j＝8.8hz,1h),3.34(s,3h),1.49(s,9h)。lc-ms:m/z242[m+h-c4h8]+。[2116]步骤9：(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-(甲氧基甲基)-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2117][2118]将3-(甲氧基甲基)-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(515mg，1.7mmol)于dmf-dma(10ml)中的溶液在35℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-(甲氧基甲基)-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(610mg，粗品)。lc-ms:m/z353[m+h]+。[2119]步骤10：2-氯-8-(甲氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[2120][2121]向(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-(甲氧基甲基)-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(610mg，1.7mmol)于甲苯(20ml)和乙酸(2ml)中的搅拌溶液中加入3-氯-1h-吡唑-5-胺(203mg，1.7mmol)。将所得混合物在95℃搅拌15小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(10ml)稀释。用乙酸乙酯(3x30ml)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-氯-8-(甲氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(45mg，6％产率)。lc-ms:m/z407[m+h]+。[2122]步骤11：2-氯-8-(甲氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[2123][2124]向2-氯-8-(甲氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(45mg，110.6μmol)于二氯甲烷(4ml)中的搅拌溶液中加入tfa(1ml)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(5ml)稀释。用二氯甲烷(3x20ml)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-氯-8-(甲氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(32mg，90％产率)。lc-ms:m/z307[m+h]+。[2125]步骤12：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(甲氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2126][2127]向5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(27mg，88.0μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入三光气(18mg，60.7μmol)和tea(20mg，197.6μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到2-氯-8-(甲氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(34mg，176.1μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(50mg，409.3μmol)和tea(200mg，1.9mmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(甲氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(20mg，34％产率)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ9.38(s,1h),8.71(d,j＝2.4hz,1h),8.55(d,j＝2.4hz,1h),8.02(s,2h),6.80(s,1h),4.76(d,j＝11.6hz,1h),4.64(d,j＝9.2hz,1h),4.59(d,j＝11.6hz,1h),4.07(d,j＝9.2hz,1h),3.38(s,3h)。lc-ms:m/z528[m+h]+。[2128]步骤13：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(甲氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(甲氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2129][2130]对含有2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(甲氧基甲基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(20mg)的样品进行手性hplc：色谱柱：chiralpakic，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh-hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在13分钟内，30b到30b；220/254nm；rt1:9.734；rt2:10.518；注射体积：0.3ml；运行次数：10。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈灰白色固体的实例97(3.8mg，19％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈灰白色固体的实例98(3.8mg，19％产率)。[2131]实例97：1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ9.38(s,1h),8.71(d,j＝2.4hz,1h),8.55(d,j＝2.4hz,1h),8.02(s,2h),6.80(s,1h),4.76(d,j＝11.2hz,1h),4.64(d,j＝9.2hz,1h),4.59(d,j＝11.6hz,1h),4.07(d,j＝9.2hz,1h),3.38(s,3h)。lc-ms:m/z528[m+h]+。[2132]实例98：1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ9.38(s,1h),8.71(d,j＝2.4hz,1h),8.55(d,j＝2.4hz,1h),8.02(s,2h),6.80(s,1h),4.76(d,j＝11.2hz,1h),4.64(d,j＝9.2hz,1h),4.59(d,j＝11.6hz,1h),4.07(d,j＝9.2hz,1h),3.38(s,3h)。lc-ms:m/z528[m+h]+。[2133]方法q3[2134][2135]实例99：(r)-2-氯-8-甲基-n-(2-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2136]步骤1：(r)-2-氯-n-(2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2137][2138]向2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-4-胺(200mg，1.0mmol)于四氢呋喃(10ml)中的搅拌溶液中加入三光气(181mg，610.5μmol)和tea(154mg，1.5mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(225mg，814.0μmol)的溶液中。然后向该溶液中加入tea(1.0g，10.2mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(248mg，2.0mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(r)-2-氯-n-(2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(350mg，69％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.93(s,1h),9.31(s,1h),7.99-8.05(m,2h),7.08(s,1h),4.82-4.85(m,1h),4.25-4.28(m,1h),1.95(s,3h)。lc-ms:m/z499[m+h]+。[2139]步骤2：(r)-2-氯-8-甲基-n-(2-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2140][2141]在氮气气氛下在25℃下，向(r)-2-氯-n-(2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(350mg，721.1μmol)和t-buona(208mg，2.1mmol)于二噁烷(40ml)中的搅拌混合物中加入氧杂环丁烷-3-胺(53mg，721.1μmol)和brettphospdg3(130.7mg，144.2μmol)。将反应混合物在60℃下搅拌15小时。将反应混合物冷却至25℃，并浓缩。将残留物通过使用40％石油醚和60％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到粗产物。对粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈黄色固体的(r)-2-氯-8-甲基-n-(2-(氧杂环丁烷-3-基氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(11.8mg，3％产率)。实例99的对映异构体可以使用方法q3步骤1中的方法m1异构体1类似地制备。[2142]实例99：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ9.31-9.32(m,2h),7.80(d,j＝5.7hz,1h),7.19(s,1h),7.12(s,1h),7.04(s,1h),4.75-4.88(m,4h),4.42-4.45(m,2h),4.21-4.24(m,1h),1.94(s,3h)。lc-ms:m/z536[m+h]+。[2143]实例100：(r)-2-氯-n-(3-氟-2-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2144][2145]根据方法m2步骤4，通过使用(3-氟-2-(三氟甲基)异烟酸和方法m1异构体2制备标题化合物。实例100的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2146]实例100：1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:9.34(s,1h),8.42(d,j＝5.6hz,1h),8.32-8.35(m,1h),6.83(s,1h),4.89-4.98(m,1h),4.29(d,j＝11.6hz,1h),2.05(s,3h)。lc-ms:m/z483[m+h]+。[2147]方法r3[2148][2149]实例101：(r)-2-氯-n-(6-(二甲基氨基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2150]步骤1：6-(二甲基氨基)哒嗪-4-甲酸甲酯[2151][2152]向6-氯哒嗪-4-甲酸甲酯(5.0g,28.0mmol)于四氢呋喃(100ml)中的溶液中加入二甲胺氯化氢盐(2.84g，34.8mmol)和tea(5.9g，57.9mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌18小时。将反应混合物在真空下浓缩。将所得混合物用水(100ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色固体的6-(二甲基氨基)哒嗪-4-甲酸甲酯(800mg，15％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.81(s,1h),7.34(s,1h),3.91(s,3h),3.16(s,6h)。lc-ms:m/z182[m+h]+。[2153]步骤2：6-(二甲基氨基)哒嗪-4-甲酸[2154][2155]向6-(二甲基氨基)哒嗪-4-甲酸甲酯(300mg，1.6mmol)于四氢呋喃(2.5ml)和水(2.5ml)中的混合物中加入lioh(79mg，3.3mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。用盐酸(1m)将ph调整到3。用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈淡黄色固体的6-(二甲基氨基)哒嗪-4-甲酸(400mg)。lc-ms:m/z168[m+h]+。[2156]步骤3：(r)-2-氯-n-(6-(二甲基氨基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2157][2158]向6-(二甲基氨基)哒嗪-4-甲酸(100mg，598.2μmol)于二噁烷(2ml)中的溶液中加入dppa(197mg，717.8μmol)、三乙胺(302mg，3.0mmol)和方法m1异构体2(164mg，598.2μmol)。将混合物在100℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(6-(二甲基氨基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(17mg，6％产率)。实例101的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2159]实例101：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.34(s,2h),8.75(d,j＝1.5hz,1h),7.27(d,j＝1.8hz,1h),7.08(s,1h),4.86(d,j＝11.7hz,1h),4.29(d,j＝11.4hz,1h),3.09(s,6h),1.97(s,3h)。lc-ms:m/z441[m+h]+。[2160]方法s3[2161][2162]实例102：(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)异噁唑-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2163]步骤1：4,4-二氟-3-氧代丁腈[2164][2165]向2,2-二氟乙酸甲酯(10.0g，90.8mmol)于四氢呋喃(50ml)中的搅拌溶液中加入t-buok(20.2g，181.9mmol)和乙腈(3.6g，90.8mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。通过加入水(500ml)来淬灭反应混合物。用二乙醚(3x300ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。这导致呈无色油状物的4,4-二氟-3-氧代丁腈(5.0g，45％产率)。lc-ms:m/z120[m+h]+。[2166]步骤2：5-(二氟甲基)异噁唑-3-胺[2167][2168]向nahco3(7.0g，83.9mmol)于水(30ml)中的搅拌溶液中加入盐酸羟胺(8.7g，125.9mmol)。将混合物在25℃下搅拌1小时。向反应溶液中加入4,4-二氟-3-氧代丁腈(10.0g，83.9mmol)。将反应混合物在氮气下在100℃下搅拌2小时。使混合物冷却至25℃。通过加入水(200ml)来淬灭反应混合物。将所得溶液用乙酸乙酯(3x200ml)萃取，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的5-(二氟甲基)异噁唑-3-胺(250mg，2％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:6.57(t,j＝56.0hz,1h),5.33(s,1h),4.63(br,2h)。lc-ms:m/z135[m+h]+。[2169]步骤3：(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)异噁唑-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2170][2171]在0℃下，向方法m1异构体2(50mg，204.2μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入三光气(36mg，102.1μmol)和tea(22mg，205.4μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到5-(二氟甲基)异噁唑-3-胺(54mg，408.2μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(48mg，404.6μmol)和tea(204mg，2.0mmol)。将混合物在45℃下搅拌16小时。将混合物倒入水(20ml)中，并用乙酸乙酯(3x20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)异噁唑-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(20mg，11％产率)。实例102的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2172]实例102：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:11.33(s,1h),9.32(s,1h),7.19(t,j＝53.2hz,1h),7.06(s,1h),6.40(s,1h),4.81(d,j＝11.6hz,1h),4.22(d,j＝11.6hz,1h),1.94(s,3h)。lc-ms:m/z437[m+h]+。[2173]方法t3[2174][2175]实例103：(r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)异噁唑-5-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2176]步骤1：(r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)异噁唑-5-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2177]向3-(二氟甲基)异噁唑-5-甲酸(100mg，613μmol)于二噁烷(2ml)中的溶液中加入dppa(179mg，736μmol)、tea(310mg，3.1mmol)和方法m1异构体2(170mg，613μmol)。将混合物在100℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)异噁唑-5-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(17.5mg，6.5％产率)。实例103的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2178]实例103：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:11.34(s,1h),9.33(s,1h),7.19(t,j＝53.2hz,1h),7.07(s,1h),6.40(s,1h),4.82(d,j＝11.6hz,1h),4.23(d,j＝12.0hz,1h),1.95(s,3h)。lc-ms:m/z437[m+h]+。[2179]方法u3[2180][2181]实例104和105：由含有(r)-n-(5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(s)-n-(5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2182]步骤1：n-(5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2183][2184]向2-氰基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(方法x1步骤3；111mg，426.2μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入三光气(84mg，284.1μmol)和tea(72mg，710.3μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法v1步骤4；100mg，473.6μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(87mg，710.3μmol)和tea(479mg，4.7mmol)。将混合物在50℃下搅拌16小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的n-(5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(100mg，47％产率)。lc-ms:m/z498[m+h]+。[2185]步骤2：分离对映异构体以获得(r)-n-(5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(s)-n-(5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2186][2187]对100mgn-(5-(二氟甲基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺进行手性hplc：色谱柱：lux5ucellulose-4,2.12*25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在21分钟内，10b到10b；220/254nm；rt1:12.058；rt2:17.004；注射体积：1.5ml；运行次数：4。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例105(26.9mg，11％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例104(21.8mg，9％产率)。实例104和105是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[2188]实例104：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.41(s,1h),8.76(s,1h),8.61(s,1h),7.96(s,2h),7.55(t,j＝54.8hz,1h),6.90(s,1h),6.35(d,j＝5.2hz,1h),4.63(d,j＝10.4hz,1h),4.09(d,j＝10.4hz,1h),2.05(s,3h)。lc-ms:m/z498[m+h]+。[2189]实例105：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.42(s,1h),8.77(s,1h),8.61(s,1h),7.96(s,2h),7.56(t,j＝54.8hz,1h),6.78(s,1h),6.36(d,j＝5.2hz,1h),4.62(d,j＝10.4hz,1h),4.09(d,j＝10.4hz,1h),2.06(s,3h)。lc-ms:m/z498[m+h]+。[2190]方法v3[2191][2192]实例106：(r)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)嘧啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2193]步骤1：6-(二氟甲基)嘧啶-4-胺[2194][2195]向4-氯-6-(二氟甲基)嘧啶(200mg，1.2mmol)于乙腈(2ml)中的搅拌溶液中加入氢氧化铵(1ml)。将所得混合物在25℃下搅拌24小时。将反应混合物在真空下浓缩。将所得混合物用水(10ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈淡黄色固体的6-(二氟甲基)嘧啶-4-胺(160mg，90％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.42(s,1h),7.28(s,2h),6.71(t,j＝54.8hz,1h),6.64(s,1h)。lc-ms:m/z146[m+h]+。[2196]步骤2：(r)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)嘧啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2197][2198]在0℃下，向6-(二氟甲基)嘧啶-4-胺(63mg，434μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入三光气(86mg，289μmol)和tea(58mg，578μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(80mg，289μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(293mg，2.9mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(71mg，578μmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈淡黄色固体的(r)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)嘧啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(15.3mg，12％产率)。实例106的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2199]实例106：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:10.71(s,1h),9.32(s,1h),9.01(s,1h),8.16(s,1h),7.07(s,1h),6.98(t,j＝54.6hz,1h),5.01(d,j＝11.7hz,1h),4.28(d,j＝11.7hz,1h),1.94(s,3h)。lc-ms:m/z448[m+h]+。[2200]方法w3[2201][2202]实例107：(r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)-1h-吡唑-5-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2203]步骤1：4,4-二氟-3-氧代丁腈[2204][2205]向2,2-二氟乙酸甲酯(5.0g，45.4mmol)于四氢呋喃(50ml)中的搅拌溶液中加入t-buok(10.2g，90.9mmol)和乙腈(1.8g，45.4mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(200ml)淬灭。用二乙醚(3x300ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将合并的有机层在真空下浓缩，以得到呈无色油状物的4,4-二氟-3-氧代丁腈(2.5g，45％产率)。lc-ms:m/z120[m+h]+。[2206]步骤2：5-(二氟甲基)-1h-吡唑-3-胺[2207][2208]向4,4-二氟-3-氧代丁腈(2.5g，21.0mmol)于乙醇(20ml)中的搅拌溶液中加入水合肼(21g，42.0mmol)。将反应混合物在氮气下在90℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。将反应混合物用水(200ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-(二氟甲基)-1h-吡唑-3-胺(700mg，25％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:11.9(br,1h),6.55(t,d＝56.0hz,1h),5.78(s,1h),4.90(br,2h)。lc-ms:m/z134[m+h]+。[2209]步骤3：(r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)-1h-吡唑-5-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2210][2211]在25℃下，向5-(二氟甲基)-1h-吡唑-3-胺(40mg，225.6μmol)于四氢呋喃(8ml)中的搅拌溶液中加入三光气(54mg，180.5μmol)和tea(22mg，217.4μmol)。将所得混合物在28℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(40mg，144.9μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(146mg，1.4mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(36mg，289.9μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌1小时。使混合物冷却至25℃。将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到粗产物，对所述粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)-1h-吡唑-5-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(23.2mg，36.8％产率)。实例107的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2212]实例107：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:13.06(br,1h),9.81(br,1h),9.33(s,1h),7.05(s,1h),6.68(t,d＝56hz,1h),6.30(s,1h),4.77(d,j＝8.8hz,1h),4.20(d,j＝11.6hz,1h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z436[m+h]+。[2213]方法x3[2214][2215]实例108：(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(2-(二甲基氨基)-2-氧代乙氧基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2216]步骤1：5-溴-3-(二氟甲基)-2-氟吡啶[2217][2218]在-20℃下，向5-溴-2-氟烟醛(9.5g，46.6mmol)于二氯甲烷(200ml)中的搅拌溶液中加入dast(15.0g，93.1mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将反应溶液通过饱和nahco3水溶液(500ml)淬灭。用二氯甲烷(3x500ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的5-溴-3-(二氟甲基)-2-氟吡啶(8.5g，73％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.42(s,1h),8.16(s,1h),6.83(t,j＝54.4hz,1h)。lc-ms:m/z226[m+h]+。[2219]步骤2：2-((5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)氧基)-n,n-二甲基乙酰胺[2220][2221]在0℃下，向2-羟基-n,n-二甲基乙酰胺(2.1g，20.1mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(100ml)中的搅拌溶液中分批加入nah(2.2g，92.9mmol，60％，于矿物油中)。将反应混合物在0℃下搅拌15分钟，并逐滴加入5-溴-3-(二氟甲基)-2-氟吡啶(3.5g，15.5mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中的溶液。将混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物通过水(500ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x500ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(3x1000ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-((5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)氧基)-n,n-二甲基乙酰胺(4.5g，85％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.40(s,1h),8.14(s,1h),7.04(t,j＝54.4hz,1h),5.15(s,2h),2.96(s,3h),2.79(s,3h)。lc-ms:m/z309[m+h]+。[2222]步骤3：2-((3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)氧基)-n,n-二甲基乙酰胺[2223][2224]在氮气气氛下，向2-((5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)氧基)-n,n-二甲基乙酰胺(200mg，647.0μmol)于二噁烷(6ml)中的搅拌溶液中加入二苯基甲亚胺(234mg，1.3mmol)cs2co3(632mg，1.9mmol)、xantphos(112mg，194.1μmol)和pd2(dba)3(178mg，194.1μmol)。将反应混合物在氮气气氛下在110℃下搅拌1小时。将混合物冷却至25℃。在真空下去除溶剂。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈棕色油状物的2-((3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)氧基)-n,n-二甲基乙酰胺(200mg，68％产率)。lc-ms:m/z410[m+h]+。[2225]步骤4：2-((5-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)氧基)-n,n-二甲基乙酰胺[2226][2227]向2-((3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)氧基)-n,n-二甲基乙酰胺(180mg，439.6μmol)于甲醇(5ml)中的搅拌溶液加入盐酸羟胺(64mg，923.2μmol)和乙酸钠(90mg，1.1mmol)。将反应在25℃下搅拌1小时。在真空下去除溶剂。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的2-((5-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)氧基)-n,n-二甲基乙酰胺(80mg，67％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:7.56(s,1h),7.22(s,1h),6.98(t,j＝55.2hz,1h),5.04(s,2h),4.96(br,2h),2.94(s,3h),2.78(s,3h)。lc-ms:m/z246[m+h]+。[2228]步骤5：(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(2-(二甲基氨基)-2-氧代乙氧基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2229][2230]向2-((5-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)氧基)-n,n-二甲基乙酰胺(51mg，207.9μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入三光气(37mg，124.8μmol)和tea(32mg，311.9μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(40mg，145.6μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(50mg，415.9μmol)和tea(210mg，2.1mmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(2-(二甲基氨基)-2-氧代乙氧基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(40mg，35％产率)。实例108的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2231]实例108：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.34(s,1h),9.21(br,1h),8.39(s,1h),8.17(s,1h),7.12(t,j＝54.9hz,1h),7.05(s,1h),5.16(s,2h),4.78(d,j＝11.4hz,1h),4.25(d,j＝11.4hz,1h),3.00(s,3h),2.83(s,3h),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z548[m+h]+。[2232]方法y3[2233][2234]实例109：(r)-n-(5-((r)-2-氨基丙氧基)-1-(二氟甲基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2235]步骤1：(r)-(1-((5-溴-2-氯吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯[2236][2237]在0℃下，向5-溴-2-氯吡啶-3-醇(10g，47.9mmol)、(r)-(1-羟基丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(16.8g，95.9mmol)和三苯基膦(18.9g，71.9mmol)于四氢呋喃(100ml)中的搅拌溶液中逐滴加入dead(12.5g，71.9mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌15小时。将反应混合物在真空下浓缩。将所得混合物用水(200ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x200ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(r)-(1-((5-溴-2-氯吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(15g，85％产率)。lc-ms:m/z365[m+h]+。[2238]步骤2：(r)-(1-((5-溴-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯[2239][2240]在0℃下，向(r)-(1-((5-溴-2-氯吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(8.0g，21.9mmol)于乙腈(100ml)中的混合物中分批加入nah(1.5g，37.2mmol，60％，于矿物油中)。将所得混合物在0℃下搅拌0.5小时。然后逐滴加入2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸(6.6g，37.2mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(r)-(1-((5-溴-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.1g，10％产率)。lc-ms:m/z397[m+h]+。[2241]步骤3：(r)-(1-((1-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯[2242][2243]在氮气气氛下，向(r)-(1-((5-溴-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(2.1g，5.3mmol)于二噁烷(20ml)中的混合物中加入二苯基甲亚胺(1.1g，5.8mmol)、pd2(dba)3(1.6g，1.6mmol)、xantphos(917mg，1.6mmol)和cs2co3(5.2g，15.8mmol)。将所得混合物在110℃下搅拌2.5小时。将反应混合物冷却至25℃，并滤出固体。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(r)-(1-((1-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(840mg，32％产率)。lc-ms:m/z498[m+h]+。[2244]步骤4：(r)-(1-((5-氨基-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯[2245][2246]向(r)-(1-((1-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，627μmol)于甲醇(5ml)中的搅拌溶液中加入盐酸羟胺(87mg，1.3mmol)和乙酸钠(213mg，1.6mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物用水(20ml)稀释。用乙酸乙酯(3x20ml)萃取所得溶液。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(r)-(1-((5-氨基-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(120mg，33％产率)。lc-ms:m/z334[m+h]+。[2247]步骤5：((r)-1-((5-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯[2248][2249]在0℃下，向方法m1异构体2(49mg，179μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌溶液中加入三光气(32mg，106μmol)和tea(36mg，356μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到(r)-(1-((5-氨基-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(50mg，98μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(36mg，299μmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(150mg，1.5mmol)。将混合物在25℃下搅拌15小时。将反应混合物用水(20ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x20ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的((r)-1-((5-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(32mg，50％产率)。lc-ms:m/z636[m+h]+。[2250]步骤6：(r)-n-(5-((r)-2-氨基丙氧基)-1-(二氟甲基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2251][2252]向((r)-1-((5-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)丙-2-基)氨基甲酸叔丁酯(32mg，50μmol)于二氯甲烷(3ml)中的搅拌溶液中加入tfa(1ml)。将所得混合物在25℃搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈黄色固体的(r)-n-(5-((r)-2-氨基丙氧基)-1-(二氟甲基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(10.2mg，60％产率)。实例109的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2253]实例109：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.32(s,1h),8.85(br,1h),7.95(t,j＝59.8hz,1h),7.71(d,j＝2.4hz,1h),7.11(d,j＝2.4hz,1h),7.04(s,1h),4.71(d,j＝11.2hz,1h),4.20(d,j＝11.6hz,1h),3.62-3.72(m,2h),3.15-3.21(m,3h),1.97(s,3h),1.07(d,j＝6.4hz,3h)。lc-ms:m/z536[m+h]+。[2254]方法z3[2255][2256]实例110：(r)-2-氯-n-(1-(二氟甲基)-5-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺。[2257]步骤1：3-((5-溴-2-氯吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯[2258][2259]向5-溴-2-氯吡啶-3-醇(5.0g，24.0mmol)和3-碘代氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(6.8g，24.0mmol)于dmf(50ml)中的搅拌溶液中加入cs2co3(15.6g，48.0mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌3小时。将反应冷却至25℃。将反应混合物用水(150ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x250ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的3-((5-溴-2-氯吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(8.0g，90％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.11(d,j＝2.0hz,1h),6.98(d,j＝2.0hz,1h),4.90-4.92(m,1h),4.35-4.39(m,2h),4.09-4.11(m,2h),1.46(s,9h)。lc-ms:m/z363[m+h]+。[2260]步骤2：3-((5-溴-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯[2261][2262]向3-((5-溴-2-氯吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(3.0g，8.2mmol)于乙腈(30ml)中的溶液中加入2,2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸(4.4g，24.7mmol)和nahco3(1.5g，8.6mmol)。将所得混合物在50℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至25℃。通过加入水(150ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x150ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的3-((5-溴-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g，54％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.10(d,j＝2.0hz,1h),7.03(d,j＝2.0hz,1h),5.06-5.08(m,1h),4.36(s,1h),4.09(d,j＝8.2hz,2h),3.98(t,j＝7.8hz,2h),1.46(s,9h)。lc-ms:m/z395[m+h]+。[2263]步骤3：3-((1-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯[2264][2265]在氮气气氛下，向3-((5-溴-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(600mg，1.5mmol)和二苯基甲亚胺(550mg，3.3mmol)于二噁烷(10ml)中的搅拌溶液加入xantphos(175mg，302.8mmol)、pd2(dba)3(157mg，302.8μmol)和cs2co3(975mg，3.0mmol)。将所得混合物在110℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至25℃。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的3-((1-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(400mg，37％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.10-8.90(m,11h),7.71(t,j＝60.3hz,1h),5.06-5.08(m,1h),4.36(s,1h),4.09(d,j＝8.2hz,2h),3.98(t,j＝7.8hz,2h),1.46(s,9h)。lc-ms:m/z496[m+h]+。[2266]步骤4：3-((5-氨基-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯[2267][2268]将3-((1-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯放入(400mg，807.8μmol)、盐酸羟胺(112mg，1.6mmol)、乙酸钠(283mg，3.4mmol)和甲醇(10ml)放入50ml圆底烧瓶中。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的3-((5-氨基-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(150mg，30％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:7.71(t,j＝60.3hz,1h),6.58(d,j＝2.4hz,1h),6.10(d,j＝2.4hz,1h),4.22-4.34(m,2h),4.80-4.82(m,1h),4.09-4.17(m,2h),1.44(s,9h)。lc-ms:m/z332[m+h]+。[2269]步骤5：(r)-3-((5-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯[2270][2271]在0℃下，向方法m1异构体2(100mg，362.3μmol)于四氢呋喃(4ml)中的搅拌溶液中加入三光气(64mg，217.4μmol)和tea(55mg，543.4μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到3-((5-氨基-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(120mg，362.3μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(53mg，434.8μmol)和tea(363mg，3.6mmol)。将所得混合物在40℃下搅拌2小时。将混合物倒入水(30ml)中，并用乙酸乙酯(3x30ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的(r)-3-((5-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(80mg，30％产率)。lc-ms:m/z634[m+h]+。[2272]步骤6：(r)-n-(5-(氮杂环丁烷-3-基氧基)-1-(三氟甲基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2273][2274]向(r)-3-((5-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(80mg，126.3μmol)于二氯甲烷(10ml)中的搅拌溶液中加入tfa(2ml)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。向残留物中加入饱和nahco3溶液(40ml)。用乙酸乙酯(3x40ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，并经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用30％石油醚和70％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(r)-n-(5-(氮杂环丁烷-3-基氧基)-1-(三氟甲基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(50mg，76％产率)。lc-ms:m/z534[m+h]+。[2275]步骤6：(r)-2-氯-n-(1-(二氟甲基)-5-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2276][2277]向(r)-n-(5-(氮杂环丁烷-3-基氧基)-1-(三氟甲基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(50mg，93.8μmol)于二氯甲烷(5ml)中的搅拌溶液中加入甲醛(0.1ml，469μmol，40％，于水中)和三乙酰氧基硼氢化钠(29mg，140.7μmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(1-(二氟甲基)-5-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)-6-氧代-1,6-二氢吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(9mg，28％产率)。实例110的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2278]实例110：1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ:9.32(s,1h),7.86(t,j＝60.0hz,1h),7.66(s,1h),7.12(s,1h),6.78(s,1h),5.03-5.05(m,1h),4.67(d,j＝10.8hz,1h),4.43-4.53(m,2h),4.10-4.15(m,3h),2.90(s,3h),2.03(s,3h)。lc-ms:m/z548[m+h]+。[2279]方法a4[2280][2281]实例111：(r)-2-氯-n-(2-(二氟甲基)-6-(((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2282]步骤1：4-氯-6-氟吡啶甲酸甲酯[2283][2284]在氮气氛下，向4-氯吡啶甲酸甲酯(40g，233.9mmol)于乙腈(1200ml)中的搅拌溶液中加入agf2(101.7g，701.7mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。过滤反应混合物，并用乙酸乙酯(3x200ml)洗涤收集的固体。将所得溶液在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的4-氯-6-氟吡啶甲酸甲酯(11.8g，26％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.01-8.08(m,1h),7.20-7.28(m,1h),4.03(s,3h)。lc-ms:m/z190[m+h]+。[2285]步骤2：4-氯-6-氟吡啶甲醛[2286][2287]在氮气下在-60℃下，向4-氯-6-氟吡啶甲酸甲酯(8.0g，42.3mmol)于二氯甲烷(200ml)中的溶液中加入氢化二异丁基铝(80ml，80mmol，1m，于二氯甲烷中)。将所得混合物在-60℃下搅拌2小时。将反应混合物用饱和酒石酸钾钠四水合物水溶液(200ml)淬灭。过滤固体并用二氯甲烷(3x100ml)洗涤。用二氯甲烷(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的4-氯-6-氟吡啶甲醛(4.9g，72％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.92(s,1h),7.84-7.85(m,1h),7.22-7.23(m,1h)。lc-ms:m/z160[m+h]+。[2288]步骤3：4-氯-2-(二氟甲基)-6-氟吡啶[2289][2290]在-30℃下，向4-氯-6-氟吡啶甲醛(4.9g，30.8mmol)于二氯甲烷(163ml)中的搅拌溶液中加入dast(14.9g，92.4mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(200ml)淬灭。用二氯甲烷(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层通过饱和nahco3水溶液(200ml)洗涤，并经无水硫酸钠干燥。将所得溶液在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的4-氯-2-(二氟甲基)-6-氟吡啶(4g，71％产率)，其无需进一步纯化即可使用。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:7.59(d,j＝28hz,1h),7.09-7.11(m,1h),6.52(t,j＝56hz,1h)。[2291]步骤4：(s)-4-氯-2-(二氟甲基)-6-((1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶[2292][2293]向4-氯-2-(二氟甲基)-6-氟吡啶(3.0g，16.3mmol)于四氢呋喃(90ml)中的搅拌溶液中加入(s)-1-甲基吡咯烷-3-醇(1.5g，14.9mmol)和t-buok(3.3g，29.8mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用10％甲醇和90％二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(s)-4-氯-2-(二氟甲基)-6-((1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶(1.5g，71％产率)。lc-ms:m/z263[m+h]+。[2294]步骤5：(s)-(2-(二氟甲基)-6-((1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯[2295][2296]在氮气气氛下，向(s)-4-氯-2-(二氟甲基)-6-((1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶(500mg，1.9mmol)于二噁烷(15ml)中的搅拌溶液中加入氨基甲酸叔丁酯(664mg，5.7mmol)、pd2(dba)3chcl3(198mg，0.2mmol)、xantphos(232mg，0.4mmol)和cs2co3(1.3g，3.8mmol)。将所得混合物在85℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。将混合物在减压下浓缩。将残留物通过使用10％甲醇和90％二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(s)-(2-(二氟甲基)-6-((1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(270mg，41％产率)。lc-ms:m/z344[m+h]+。[2297]步骤6：(s)-2-(二氟甲基)-6-((1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-4-胺[2298][2299]向(s)-(2-(二氟甲基)-6-((1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(270mg，787μmol)于二氯甲烷(10ml)中的溶液中加入tfa(2ml)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将ph用饱和nahco3水溶液调整到8。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用10％甲醇和90％二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(s)-2-(二氟甲基)-6-((1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-4-胺(170mg，81％产率)。lc-ms:m/z244[m+h]+。[2300]步骤7：(r)-2-氯-n-(2-(二氟甲基)-6-(((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2301][2302]在0℃下，向(s)-2-(二氟甲基)-6-((1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-4-胺(62mg，255.1μmol)于四氢呋喃(10ml)中的搅拌溶液中加入三光气(23mg，77.7μmol)和tea(20mg，190μmol)。将所得混合物在28℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(35mg，127μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(110mg，1.1mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(27mg，217.4μmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用10％甲醇和90％二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到粗产物。将粗产物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(2-(二氟甲基)-6-(((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(15.8mg，33％产率)。实例111的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2303]实例111：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.52(br,1h),9.32(s,1h),7.48(d,j＝1.2hz,1h),7.23(s,1h),7.07(s,1h),6.81(t,j＝54hz,1h),5.33(s,1h),4.84-4.87(m,1h),4.25-4.28(m,1h),2.78-2.82(m,1h),2.60-2.68(m,2h),2.29-2.40(m,5h),2.27(s,3h),1.90-1.96(m,1h)。lc-ms:m/z546[m+h]+。[2304]方法b4[2305][2306]实例112：(r)-2-氯-8-甲基-n-(3-(甲基氨基)-6-(三氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2307]步骤1：n-甲基-6-(三氟甲基)哒嗪-3-胺[2308][2309]将3-氯-6-(三氟甲基)哒嗪(5.0g，27.4mmol)于甲胺(50ml，100mmol，2m，于thf中)中的溶液在50℃下搅拌16小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的n-甲基-6-(三氟甲基)哒嗪-3-胺(2.5g，51％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:7.64(d,j＝9.6hz,1h),7.57(br,1h),6.93(d,j＝9.6hz,1h),2.93(d,j＝4.8hz,3h)。lc-ms:m/z178[m+h]+。[2310]步骤2：4-溴-n-甲基-6-(三氟甲基)哒嗪-3-胺[2311][2312]向n-甲基-6-(三氟甲基)哒嗪-3-胺(2.7g，15.2mmol)于乙腈(50ml)中的搅拌溶液中逐滴加入溴(4.9g，30.5mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用饱和nahco3水溶液(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的4-溴-n-甲基-6-(三氟甲基)哒嗪-3-胺(1.4g，32％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.24(s,1h),7.45(br,1h),3.02(d,j＝4.8hz,3h).lc-ms:m/z256[m+h]+。[2313]步骤3：n-甲基-6-(三氟甲基)哒嗪-3,4-二胺[2314][2315]将4-溴-n-甲基-6-(三氟甲基)哒嗪-3-胺(500mg，1.9mmol)于氨(15ml)中的混合物在130℃下搅拌16小时。用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的n-甲基-6-(三氟甲基)哒嗪-3,4-二胺(300mg，80％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ6.65(s,1h),6.49(d,j＝4.8hz,1h),6.26(s,2h),2.95(d,j＝4.8hz,3h)。lc-ms:m/z193[m+h]+。[2316]步骤4：(r)-2-氯-8-甲基-n-(3-(甲基氨基)-6-(三氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2317][2318]向方法m1异构体2(100mg，361μmol)于四氢呋喃(3ml)中的搅拌溶液中加入三光气(32mg，108μmol)和tea(55mg，542μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到n-甲基-6-(三氟甲基)哒嗪-3,4-二胺(104mg，542μmol)于四氢呋喃(3ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(88mg，723μmol)和tea(366mg，3.6mmol)。将混合物在40℃下搅拌16小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈黄色固体的(r)-2-氯-8-甲基-n-(3-(甲基氨基)-6-(三氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(2mg，1％产率)。实例112的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2319]实例112：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.38(s,1h),8.77(br,1h),7.96(s,1h),7.25(s,1h),7.03(s,1h),4.84(d,j＝12.0hz,1h),4.25(d,j＝12.0hz,1h),3.06(d,j＝4.8hz,3h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z495[m+h]+。[2320]方法c4[2321][2322]实例113：(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(2-氧代噁唑烷-3-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2323]步骤1：3-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)噁唑烷-2-酮[2324][2325]在0℃下，向噁唑烷-2-酮(539mg，6.2mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(5ml)中的搅拌溶液中分批加入nah(283mg，7.1mmol，60％，于矿物油中)。将反应混合物在0℃下搅拌0.5小时。然后将5-溴-3-(二氟甲基)-2-氟-吡啶(方法x3步骤1；2.0g，8.8mmol)加入到混合物中。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的3-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)噁唑烷-2-酮(800mg，31％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:8.55-8.56(m,1h),8.15-8.16(m,1h),7.15(t,j＝55.8hz,1h),4.54-4.65(m,2h),4.26-4.31(m,2h)。lc-ms:m/z293[m+h]+。[2326]步骤2：3-(3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)噁唑烷-2-酮[2327][2328]向3-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)噁唑烷-2-酮(400mg，1.4mmol)于1,4-二噁7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(6mg，7％产率)。实例113的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2335]实例113：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.50(br,1h),9.36(s,1h),8.82-8.83(m,1h),8.37-8.38(m,1h),7.17(t,j＝54.3hz,1h),7.07(s,1h),4.84(d,j＝11.4hz,1h),4.52-4.57(m,2h),4.29(d,j＝11.4hz,1h),4.14-4.19(m,2h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z532[m+h]+。[2336]方法d4[2337][2338]实例114和115：由含有(s)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2339]步骤1：n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2340][2341]向6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(方法q2步骤8；40mg，229.8μmol)于二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中加入dppa(75.9mg，275.7μmol)、tea(69.7mg，689.2μmol)和2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(方法x1步骤3；59.8mg，229.8μmol)。将反应混合物在100℃下搅拌2小时。将混合物冷却至25℃。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到80mg粗产物。将粗产物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(16mg，16.1％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.91(br,1h),9.48(s,1h),9.34(s,1h),8.21(d,j＝2.8hz,1h),7.23(t,j＝54.2hz,1h),6.70(d,j＝4.8hz,1h),4.85(d,j＝11.6hz,1h),4.30(d,j＝11.6hz,1h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z432[m+h]+。[2342]步骤2：分离对映异构体以获得(s)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2343][2344]对n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(16mg，37.1μmol)进行手性hplc(色谱柱：chiralartcellulose-sb，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在19分钟内，15b到15b；220/254nm；rt1:13.572；rt2:16.226；注射体积：0.8ml；运行次数：6)。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例114(5.9mg，36％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例115(5.1mg，32％产率)。实例114和115是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[2345]实例114：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.91(br,1h),9.50(d,j＝2.4hz,1h),9.33(s,1h),8.21(d,j＝2.8hz,1h),7.24(t,j＝56.0hz,1h),6.71(d,j＝5.2hz,1h),4.86(d,j＝11.2hz,1h),4.30(d,j＝11.2hz,1h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z432[m+h]+。[2346]实例115：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.91(br,1h),9.50(d,j＝2.4hz,1h),9.33(s,1h),8.21(d,j＝2.8hz,1h),7.24(t,j＝54.4hz,1h),6.71(d,j＝4.8hz,1h),4.86(d,j＝11.2hz,1h),4.30(d,j＝11.2hz,1h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z432[m+h]+。[2347]方法e4[2348][2349]实例116和117：(r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)-4-((s)-甲基亚磺酰基)苯基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)-4-((r)-甲基亚磺酰基)苯基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2350]步骤1：2-(二氟甲基)-1-氟-4-硝基苯[2351][2352]在0℃下，向2-氟-5-硝基苯甲醛(10.0g，59.1mmol)于二氯甲烷(100ml)中的搅拌溶液中逐滴加入dast(19.0g，118.2mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将ph用饱和nahco3水溶液调整到7-8。用二氯甲烷(3x200ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-(二氟甲基)-1-氟-4-硝基苯(10.0g，88％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.51-8.56(m,1h),8.40-8.44(m,1h),7.36(t,j＝9.2hz,1h),6.93(t,j＝54.4hz,1h)。[2353]步骤2：(2-(二氟甲基)-4-硝基苯基)(甲基)硫烷[2354][2355]在氮气氛下在0℃下，向2-(二氟甲基)-1-氟-4-硝基苯(4.0g，20.9mmol)于四氢呋喃(100ml)中的搅拌溶液中加入甲硫醇钠(1.4g，20.9mmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。通过过滤收集固体。将滤饼用乙酸乙酯(2x100ml)洗涤。将粗产物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(2-(二氟甲基)-4-硝基苯基)(甲基)硫烷(3.2g，69％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.44(d,j＝2.8hz,1h),8.27(dd,j＝2.8,8.8hz,1h),7.41(d,j＝8.8hz,1h),6.89(t,j＝54.4hz,1h),2.62(s,3h)。[2356]步骤3：2-(二氟甲基)-1-(甲基亚磺酰基)-4-硝基苯[2357][2358]在0℃下，向(2-(二氟甲基)-4-硝基苯基)(甲基)硫烷(1.0g，4.5mmol)于二氯甲烷(100ml)中的搅拌溶液中加入3-氯苯并过氧酸(787mg，4.5mmol)。将混合物在0℃下搅拌0.5小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-(二氟甲基)-1-(甲基亚磺酰基)-4-硝基苯(850mg，79％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.55-8.59(m,1h),8.51-8.52(m,1h),8.42(d,j＝8.4hz,1h),6.99(t,j＝54.8hz,1h),2.83(s,3h)。lc-ms:m/z236[m+h]+。[2359]步骤4：3-(二氟甲基)-4-(甲基亚磺酰基)苯胺[2360][2361]向2-(二氟甲基)-1-(甲基亚磺酰基)-4-硝基苯(850mg，3.6mmol)于乙醇(15ml)和水(5ml)中的搅拌溶液中加入fe(605mg，10.8mmol)和nh4cl(966mg，18.0mmol)。将混合物在80℃下搅拌2小时。冷却至25℃后，滤出固体。将滤液用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的3-(二氟甲基)-4-(甲基亚磺酰基)苯胺(540mg，72％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:7.83-7.90(m,1h),6.74-7.09(m,3h),4.16(br,2h),2.71(s,3h).lc-ms:m/z206[m+h]+。[2362]步骤5：(8r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2363][2364]在0℃下，向3-(二氟甲基)-4-(甲基亚磺酰基)苯胺(100mg，487.8μmol)于四氢呋喃(40ml)中的搅拌溶液中加入三光气(86mg，292.7μmol)和tea(73mg，722.7μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(134mg，487.8μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(119mg，975.6μmol)和tea(493mg，4.8mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将溶剂在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(8r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(140mg，56％产率)。[2365]步骤6：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)-4-((s)-甲基亚磺酰基)苯基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)-4-((r)-甲基亚磺酰基)苯基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2366][2367]对(8r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)-4-(甲基亚磺酰基)苯基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(140mg，275.5μmol)进行手性hplc：色谱柱：chiralartcellulose-sb，2x25cm，5um；流动相a：mtbe(0.5％2mnh3-甲醇)‑‑hplc，流动相b：ipa‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在35分钟内，10b到10b；220/254nm；rt1:25.605；rt2:28.879；注射体积：0.5ml；运行次数：5。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例116(45.2mg，32％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例117(42.5mg，30％产率)。实例116和实例117的对应的立体异构体可以使用步骤5中方法m1异构体1类似地制备。实施例116和117是非对映异构体，其中与三氟甲基连接的立体中心是绝对的并且亚砜立体中心是相对的(即，实例116和117中的一个中的亚砜立体中心是(s)，实例116和117中的另一个中的亚砜立体中心是(r))。[2368]实例116：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.47(s,1h),9.34(s,1h),7.99-8.06(m,3h),7.37(t,j＝54.8hz,1h),7.06(s,1h),4.86(d,j＝11.6hz,1h),4.27(d,j＝11.6hz,1h),2.73(s,3h),1.97(s,3h)。lc-ms:m/z508[m+h]+。[2369]实例117：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.47(s,1h),9.34(s,1h),7.98-8.10(m,3h),7.37(t,j＝54.8hz,1h),7.06(s,1h),4.87(d,j＝11.6hz,1h),4.27(d,j＝11.6hz,1h),2.73(s,3h),1.97(s,3h)。lc-ms:m/z508[m+h]+。[2370]方法f4[2371][2372]实例118：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(5,5-二甲基-4,5-二氢噁唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2373]步骤1：5-溴-3-氯-n-(2-羟基-2-甲基丙基)吡啶酰胺[2374][2375]向5-溴-3-氯吡啶甲酸(10.0g，42.6mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(200ml)中的搅拌溶液中加入1-氨基-2-甲基丙-2-醇(3.8g，42.6mmol)、hatu(26.2g，63.8mmol)和diea(16.5g，127.7mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用10％甲醇和90％二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的5-溴-3-氯-n-(2-羟基-2-甲基丙基)吡啶酰胺(1.0g，72％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.52(d,j＝4hz,1h),8.00(d,j＝4hz,1h),3.46(d,j＝4hz,2h),1.29(s,6h)。lc-ms:m/z307[m+h]+。[2376]步骤2：2-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)-5,5-二甲基-4,5-二氢噁唑[2377][2378]向5-溴-3-氯-n-(2-羟基-2-甲基丙基)吡啶酰胺(5.0g，16.3mmol)于二氯甲烷(80ml)中的搅拌溶液中加入甲磺酸(7.8g，81.5mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。将反应混合物用饱和nahco3溶液(200ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)-5,5-二甲基-4,5-二氢噁唑(2.0g，42％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.68(d,j＝2hz,1h),8.01(d,j＝2hz,1h),3.91(s,2h),1.57(s,6h)。lc-ms:m/z289[m+h]+。[2379]步骤3：(5-氯-6-(5,5-二甲基-4,5-二氢噁唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯[2380][2381]在氮气气氛下，向2-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)-5,5-二甲基-4,5-二氢噁唑(1g，3.5mmol)于二噁烷(30ml)中的搅拌溶液中加入氨基甲酸叔丁酯(1.6g，14mmol)、pd2(dba)3chcl3(0.4g，0.3mmol)、xantphos(0.4g，0.6mmol)和cs2co3(2.3g，7mmol)。将所得混合物在85℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。将所得溶液在真空下浓缩。将残留物通过使用10％甲醇和90％二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(5-氯-6-(5,5-二甲基-4,5-二氢噁唑-2-基)吡啶-3-基)氨基甲酸叔丁酯(1g，72％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.32-8.33(m,2h),3.87(s,2h),1.53(s,6h),1.52(s,9h)。lc-ms:m/z326[m+h]+。[2382]步骤4：5-氯-6-(5,5-二甲基-4,5-二氢噁唑-2-基)吡啶-3-胺[2383][2384]向5-氯-6-(5,5-二甲基-4,5-二氢噁唑-2-基)吡啶-3-胺(500mg，1.5mmol)于二氯甲烷(20ml)中的溶液中加入tfa(4ml)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将ph用饱和nahco3水溶液调整到8。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用20％甲醇和80％二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的5-氯-6-(5,5-二甲基-4,5-二氢噁唑-2-基)吡啶-3-胺(300mg，86％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:7.88(s,1h),6.99(s,1h),6.09(br,2h),3.66(s,2h),1.39(s,6h)；lc-ms:m/z226[m+h]+。[2385]步骤5：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(5,5-二甲基-4,5-二氢噁唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2386][2387]在0℃下，向方法m1异构体2(30mg，108.6μmol)于四氢呋喃(6ml)中的搅拌溶液中加入三光气(20mg，65.2μmol)和tea(17mg，163μmol)。将所得混合物在28℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到5-氯-6-(5,5-二甲基-4,5-二氢噁唑-2-基)吡啶-3-胺(39mg，173μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(110mg，1.1mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(27mg，217.4μmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用10％甲醇和90％二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到粗产物。将粗产物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(5,5-二甲基-4,5-二氢噁唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(4mg，6％产率)。实例118的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2388]实例118：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.58(s,1h),9.35(s,1h),8.73(d,j＝8hz,1h),8.28(d,j＝32hz,1h),7.07(s,1h),4.84(d,j＝12hz,1h),4.28(d,j＝12hz,1h),3.72(s,2h),1.97(s,3h),1.60(s,6h)。lc-ms:m/z528[m+h]+。[2389]方法g4[2390][2391]实例119和120：由含有(s)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺和(r)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2392]步骤1：n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺[2393][2394]向2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪(方法e5步骤8；35mg，0.137mmol)中加入6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(方法q2步骤8；23.78mg，0.137mmol)和1,4-二噁烷(超干)(3ml)。向所得溶液中加入三乙胺(0.094ml，0.673mmol)和二苯基磷酰叠氮化物(0.036ml，0.164mmol)。将混合物加热至100℃并搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩。将残留物(140mg)溶解在dmso中并通过色谱法进行纯化，以获得n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺(41mg)。lc-ms:m/z428[m+h]+。[2395]步骤10：分离对映异构体以获得(s)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺和(r)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺[2396][2397]对n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺(41mg)进行手性sfc(色谱柱：phenomenexcellulose-2，4.6x100mm，5μm；流动相a：co2，流动相b：iproh20mm氨‑‑hplc；流速：2.5毫升/分钟；梯度：在5分钟内，5b到50％b；210-320nm；rt1:3.434；rt2:3.822)。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干以得到实例119(15.4mg，26％产率)，并将第二个洗脱异构体浓缩并冻干以得到实例120(15.3mg，26.2％产率)。实例119和120是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[2398]实例119：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:9.31(d,j＝2.6hz,1h),9.29(s,1h),8.39(d,j＝2.5hz,1h),7.79(s,2h),6.88(t,j＝54.6hz,1h),4.66(d,j＝10.5hz,1h),4.08(d,j＝10.5hz,1h),2.51(s,3h),),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z428[m+h]+。[2399]实例120：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:9.32(d,j＝2.6hz,1h),9.29(s,1h),8.36(d,j＝2.5hz,1h),7.79(s,1h),7.41(s,1h),6.89(t,j＝54.5hz,1h),4.62(d,j＝10.5hz,1h),4.06(d,j＝10.5hz,1h),2.52(s,3h),),2.00(s,3h)。lc-ms:m/z428[m+h]+。[2400]方法h4[2401][2402]实例121：(r)-2-氯-8-甲基-n-(2-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2403]步骤1：(2-氟-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯[2404][2405]在氮气气氛下，向2-氟-4-碘-6-(三氟甲基)吡啶(500mg，1.7mmol)和氨基甲酸叔丁酯(302mg，2.6mmol)于二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中加入xantphos(198mg，342μmol)、pd2(dba)3(117mg，171μmol)和cs2co3(1.1g，3.4mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌3小时。将反应冷却至25℃。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(2-氟-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，70％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:7.55-7.59(m,1h),6.90(s,1h),1.56(s,9h)。lc-ms:m/z281[m+h]+。[2406]步骤2：2-氟-6-(三氟甲基)吡啶-4-胺[2407][2408]向(2-氟-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(400mg，1.4mmol)于二氯甲烷(12ml)中的搅拌溶液中加入tfa(3ml)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。向残留物中加入饱和nahco3水溶液(40ml)。用二氯甲烷(3x40ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，并经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用40％石油醚和60％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-氟-6-(三氟甲基)吡啶-4-胺(200mg，70％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:6.79(s,1h),6.22(d,j＝1.8hz,1h),4.64(br,2h)。lc-ms:m/z181[m+h]+。[2409]步骤3：(r)-2-氯-n-(2-氟-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2410][2411]在0℃下，向方法m1异构体2(50mg，181.2μmol)于四氢呋喃(4ml)中的搅拌溶液中加入三光气(32mg，108.6μmol)和tea(27mg，271.8μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到2-氟-6-(三氟甲基)吡啶-4-胺(32mg，181.2μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(20mg，181.2μmol)和tea(182mg，1.8mmol)。将所得混合物在45℃下搅拌16小时。将反应冷却至25℃。将混合物倒入水(20ml)中，并用乙酸乙酯(3x20ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(2-氟-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(30mg，34％产率)。1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ:7.61(s,1h),7.53(s,1h),6.91(d,j＝1.8hz,1h),6.79(s,1h),4.61(d,j＝12hz,1h),4.21(d,j＝12hz,1h),2.07(s,3h)。lc-ms:m/z483[m+h]+。[2412]步骤4：(r)-2-氯-8-甲基-n-(2-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2413][2414]向(r)-2-氯-n-(2-氟-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(30mg，62.3μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入1-甲基氮杂环丁烷-3-醇(12mg，133.3μmol)和叔丁醇钾(15mg，133.3μmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-8-甲基-n-(2-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(3mg，9％产率)。实例121的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2415]实例121：1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ9.35(s,1h),7.66(s,1h),7.35(s,1h),6.79(s,1h),5.21-5.23(m,1h),4.81(d,j＝12hz,1h),4.20(d,j＝12hz,1h),3.83-3.85(m,2h),3.13-3.24(m,2h),2.42(s,3h),2.02(s,3h)。lc-ms:m/z550[m+h]+。[2416]方法i4[2417][2418]步骤122：(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(二甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2419]步骤1：3-溴呋喃[3,4-b]吡啶-5,7-二酮[2420][2421]将5-溴吡啶-2,3-二甲酸(5.0g，20.3mmol)于乙酸酐(20ml)中的溶液在120℃下搅拌16小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物与石油醚(100ml)一起研磨，并过滤固体，以得到呈棕色固体的3-溴呋喃[3,4-b]吡啶-5,7-二酮(4.5g，87％产率)。lc-ms:m/z228[m+h]+。[2422]步骤2：5-溴-2-(异丙氧基羰基)烟酸[2423][2424]将3-溴呋喃[3,4-b]吡啶-5,7-二酮(4.4g，19.3mmol)于异丙醇(100ml)中的混合物在90℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至25℃。将反应混合物在真空下浓缩，以得到呈棕色固体的5-溴-2-(异丙氧基羰基)烟酸(4.4g，79％产率)。lc-ms:m/z288[m+h]+。[2425]步骤3：5-溴-3-(羟甲基)吡啶甲酸异丙酯[2426][2427]将5-溴-2-(异丙氧基羰基)烟酸(5.0g，17.4mmol)于亚硫酰氯(3.1g，26.0mmol)中的溶液在40℃下搅拌3小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物溶解在四氢呋喃(100ml)中，并在0℃下分批加入硼氢化钠(985mg，26.0mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-溴-3-(羟甲基)吡啶甲酸异丙酯(2.5g，38％产率)。lc-ms:m/z274[m+h]+。[2428]步骤4：5-溴-3-甲酰基吡啶甲酸异丙酯[2429][2430]向5-溴-3-(羟甲基)吡啶甲酸异丙酯(2.5g，9.1mmol)于二氯甲烷(20ml)中的搅拌溶液中加入戴斯-马丁(dess-martin)高碘烷(4.6g，10.9mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-溴-3-甲酰基吡啶甲酸异丙酯(1.1g，44％产率)。lc-ms:m/z272[m+h]+。[2431]步骤5：5-溴-3-(二氟甲基)吡啶甲酸异丙酯[2432][2433]在0℃下，向5-溴-3-甲酰基吡啶甲酸异丙酯(1.1g，4.0mmol)于二氯甲烷(20ml)中的搅拌溶液中逐滴加入dast(1.9g，12.1mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(30ml)淬灭。用二氯甲烷(3x30ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(60ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的5-溴-3-(二氟甲基)吡啶甲酸异丙酯(500mg，42％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.87(d,j＝2.4,1h),8.28(d,j＝2.4,1h),7.45(t,j＝55.2hz,1h),5.31-5.38(m,1h),1.44(d,j＝6.4hz,6h)。lc-ms:m/z294[m+h]+。[2434]步骤6：5-溴-3-(二氟甲基)吡啶甲酸[2435][2436]向5-溴-3-(二氟甲基)吡啶甲酸异丙酯(500mg，1.7mmol)于四氢呋喃(5ml)和水(5ml)中的搅拌混合物中加入naoh(748mg，18.7mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。用hcl(1m)将ph调整到3。用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机溶液经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈白色固体的5-溴-3-(二氟甲基)吡啶甲酸(400mg，86％产率)。lc-ms:m/z252[m+h]+。[2437]步骤7：5-溴-3-(二氟甲基)-n,n-二甲基吡啶酰胺[2438][2439]向5-溴-3-(二氟甲基)吡啶甲酸(300mg，1.2mmol)于n,n-二甲基乙酰胺(10ml)中的搅拌溶液中加入二甲胺盐酸盐(194mg，2.4mmol)、edci(297mg，1.5mmol)、hobt(209mg，1.5mmol)和diea(461mg，3.6mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(30ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x30ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的5-溴-3-(二氟甲基)-n,n-二甲基吡啶酰胺(200mg，60％产率)。lc-ms:m/z279[m+h]+。[2440]步骤8：3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-n,n-二甲基吡啶酰胺[2441][2442]在氮气气氛下，向5-溴-3-(二氟甲基)-n,n-二甲基吡啶酰胺(200mg，717μmol)于二噁烷(10ml)中的混合物中加入二苯基甲亚胺(260mg，1.4mmol)、pd2(dba)3(223mg，215μmol)、xantphos(124mg，215μmol)和cs2co3(700mg，2.1mmol)。将所得混合物在110℃下搅拌16小时。将反应混合物在真空下浓缩。将所得混合物用水(10ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-n,n-二甲基吡啶酰胺(200mg，74％产率)。lc-ms:m/z380[m+h]+。[2443]步骤9：5-氨基-3-(二氟甲基)-n,n-二甲基吡啶酰胺[2444][2445]向3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-n,n-二甲基吡啶酰胺(200mg，527μmol)于乙酸乙酯(5ml)中的溶液中加入hcl(1ml，1m)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将ph用饱和nahco3水溶液调整到7-8。用乙酸乙酯(3x5ml)萃取所得溶液。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的5-氨基-3-(二氟甲基)-n,n-二甲基吡啶酰胺(90mg，78％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:8.10(d,j＝2.7hz,1h),7.28(d,j＝2.7hz,1h),7.06(t,j＝55.8hz,1h),3.14(s,3h),2.99(s,3h)。lc-ms:m/z216[m+h]+。[2446]步骤10：(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(二甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2447][2448]向5-氨基-3-(二氟甲基)-n,n-二甲基吡啶酰胺(50mg，232μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌溶液中加入三光气(41mg，139μmol)和tea(35mg，348μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(77mg，279μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(57mg，465μmol)和tea(235mg，2.3mmol)。将混合物在40℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(二甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(18mg，15％产率)。实例122的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2449]实例122：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.54(s,1h),9.33(s,1h),8.91(d,j＝2.1hz,1h),8.36(d,j＝2.1hz,1h),7.10(t,j＝54.9hz,1h),7.05(s,1h),4.83(d,j＝11.7hz,1h),4.27(d,j＝11.7hz,1h),3.01(s,3h),2.83(s,3h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z518[m+h]+。[2450]方法j4[2451][2452]实例123：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(二甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2453]步骤1：5-溴-3-氯吡啶甲酸[2454][2455]向5-溴-3-氯吡啶甲酸甲酯(5g，20.0mmol)于甲醇(40ml)和水(20ml)中的搅拌溶液中加入氢氧化钠(1.6g，39.9mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。用hcl(1m)将ph调整到3。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机溶液经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的5-溴-3-氯吡啶甲酸(3.7g，77％产率)。lc-ms:m/z236[m+h]+。[2456]步骤2：5-溴-3-氯-n,n-二甲基吡啶酰胺[2457][2458]向5-溴-3-氯吡啶甲酸(3.7g，15.5mmol)于n,n-二甲基乙酰胺(40ml)中的搅拌溶液中加入二甲胺盐酸盐(1.3g，15.6mmol)、edci(3.9g，20.3mmol)、hobt(2.7g，20.3mmol)和diea(6.0g，46.7mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(200ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-溴-3-氯-n,n-二甲基吡啶酰胺(3.4g，70％产率)。lc-ms:m/z263[m+h]+。[2459]步骤3：3-氯-5-((二苯基亚甲基)氨基)-n,n-二甲基吡啶酰胺[2460][2461]在氮气气氛下，向5-溴-3-氯-n,n-二甲基吡啶酰胺(2.0g，7.6mmol)于二噁烷(30ml)中的混合物中加入二苯基甲亚胺(1.4g，7.5mmol)、pd2(dba)3(780mg，753.5μmol)、xantphos(440mg，760μmol)和cs2co3(7.4g，22.8mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至25℃，并在真空下浓缩。将所得混合物用水(50ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的3-氯-5-((二苯基亚甲基)氨基)-n,n-二甲基吡啶酰胺(1.7g，61％产率)。lc-ms:m/z364[m+h]+。[2462]步骤4：5-氨基-3-氯-n,n-二甲基吡啶酰胺[2463][2464]向3-氯-5-((二苯基亚甲基)氨基)-n,n-二甲基吡啶酰胺(700mg，1.9mmol)于四氢呋喃(10ml)中的溶液中加入hcl(4ml，1m)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时。将ph用饱和nahco3水溶液调整到7-8。用乙酸乙酯(3x20ml)萃取所得溶液。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-氨基-3-氯-n,n-二甲基吡啶酰胺(252mg，65％产率)。lc-ms:m/z200[m+h]+。[2465]步骤5：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(二甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2466][2467]向方法m1异构体2(100mg，361μmol)于四氢呋喃(4ml)中的搅拌溶液中加入三光气(64mg，217μmol)和tea(55mg，542μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到5-氨基-3-氯-n,n-二甲基吡啶酰胺(108mg，542μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(88mg，723μmol)和tea(366mg，3.6mmol)。将混合物在40℃下搅拌6小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(二甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(13.7mg，7％产率)。实例123的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2468]实例123：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.52(s,1h),9.34(s,1h),8.72(s,1h),8.27(s,1h),7.07(s,1h),4.83(d,j＝11.6hz,1h),4.27(d,j＝11.6hz,1h),3.02(s,3h),2.78(s,3h),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z502[m+h]+。[2469]方法k4[2470][2471]实例124：(s)-2-氟-8-甲基-n-(5-甲基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2472]步骤1：(s)-2-氟-8-甲基-n-(5-甲基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2473][2474]向(s)-2-氰基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(方法k3异构体1；30mg，115.3μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌溶液中加入三光气(20mg，69.1μmol)和tea(17mg，172.9μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到5-甲基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法o1步骤2；35mg，172.9μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(21mg，173.0μmol)和tea(117mg，1.2mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈黄色固体的(s)-2-氟-8-甲基-n-(5-甲基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(16.6mg，31％产率)。[2475]实例124：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.41(s,1h),8.35(s,1h),8.27(s,1h),7.89(s,2h),6.94(s,1h),6.34(d,j＝5.2hz,1h),4.61(d,j＝10.4hz,1h),4.06(d,j＝10.4hz,1h),2.50(s,3h),2.04(s,3h)。lc-ms:m/z462[m+h]+。[2476]方法l4[2477][2478]实例125：(r)-2-氟-8-甲基-n-(5-甲基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2479]步骤1：(r)-2-氟-8-甲基-n-(5-甲基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2480][2481]向(r)-2-氰基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(方法k3异构体2；30mg，115.3μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌溶液中加入三光气(20mg，69.1μmol)和tea(17mg，172.9μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到5-甲基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法o1步骤2；62mg，230.6μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(21mg，173.0μmol)和tea(117mg，1.2mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氟-8-甲基-n-(5-甲基-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(10.9mg，21％产率)。[2482]实例125：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.41(s,1h),8.33(s,1h),8.26(s,1h),7.90(s,2h),6.71(s,1h),6.34(d,j＝5.2hz,1h),4.59(d,j＝10.4hz,1h),4.06(d,j＝10.4hz,1h),2.50(s,3h),2.05(s,3h)。lc-ms:m/z462[m+h]+。[2483]方法m4[2484][2485]实例126和127：由含有(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(4-((s)-1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(4-((r)-1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2486]步骤1：2-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯和1-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-1h-1,2,3-三唑-5-甲酸甲酯的混合物[2487][2488]向2h-三唑-4-甲酸甲酯(8.0g，62.9mmol)于乙腈(130ml)中的溶液中加入k2co3(26.1g，188.8mmol)和5-溴-3-(二氟甲基)-2-氟-吡啶(方法x3，步骤1；15.6g，69.2mmol)。将所得混合物在60℃下搅拌16小时。冷却至25℃后，将反应混合物用水(100ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用30％石油醚和70％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯和1-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-1h-1,2,3-三唑-5-甲酸甲酯的混合物(7.5g，35％产率)。lc-ms:m/z333[m+h]+。[2489]步骤2：2-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸和1-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-1h-1,2,3-三唑-5-甲酸的混合物[2490][2491]向2-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯和1-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-1h-1,2,3-三唑-5-甲酸甲酯(2.0g，6.0mmol)于四氢呋喃(40ml)中的混合物中加入水(8ml)中的naoh(480mg，12.0mmol)。将所得溶液在25℃下搅拌2小时。用hcl(1m)将ph调整到3-4。浓缩混合物以去除四氢呋喃。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩，以得到呈白色固体的2-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸和1-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-1h-1,2,3-三唑-5-甲酸的混合物(1.2g，62％产率)。lc-ms:m/z319[m+h]+。[2492]步骤3：2-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-n-甲氧基-n-甲基-2h-1,2,3-三唑-4-甲酰胺和1-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-n-甲氧基-n-甲基-1h-1,2,3-三唑-5-甲酰胺的混合物[2493][2494]向2-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸和1-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-1h-1,2,3-三唑-5-甲酸(1.5g，4.7mmol)和n,o-二甲基羟胺；盐酸盐(700mg，7mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中的混合物加入hatu(2.7g，7.1mmol)和tea(1.4g，14.1mmol)。将所得溶液在25℃下搅拌5小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-n-甲氧基-n-甲基-2h-1,2,3-三唑-4-甲酰胺和1-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-n-甲氧基-n-甲基-1h-1,2,3-三唑-5-甲酰胺的混合物(1.3g，76％产率)。lc-ms:m/z362[m+h]+。[2495]步骤4：1-(2-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙-1-酮[2496][2497]在氮气下在-20℃下，向2-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-n-甲氧基-n-甲基-2h-1,2,3-三唑-4-甲酰胺和1-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-n-甲氧基-n-甲基-1h-1,2,3-三唑-5-甲酰胺(7.0g，19.3mmol)于四氢呋喃(140ml)中的混合物中逐滴加入甲基溴化镁(58ml，58.0mmol，1m，于thf中)。将所得溶液在-20℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(200ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的1-(2-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙-1-酮(1.8g，29％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:8.84(d,j＝2.1hz,1h)8.43(d,j＝2.1hz,1h),8.37(s,1h),7.67(t,j＝54.3hz,1h),2.76(s,3h)。lc-ms:m/z317[m+h]+。[2498]步骤5：1-(2-(3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙-1-酮[2499][2500]向1-(2-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙-1-酮(1.8g，5.7mmol)和二苯基甲亚胺(1.1g，6.2mmol)于二噁烷(5ml)中的搅拌溶液中加入xantphos(246mg，425.5μmol)、pd2(dba)3(259mg，283.8μmol)和cs2co3(4.6g，14.1mmol)。将所得混合物在90℃下搅拌3小时。冷却至25℃后，将反应混合物用水(30ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x30ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的1-(2-(3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙-1-酮(850mg，35％产率)。lc-ms:m/z418[m+h]+。[2501]步骤6：1-(2-(5-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙-1-酮[2502][2503]将1-(2-(3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙-1-酮(890mg，2.1mmol)于tfa(20ml)中的溶液在25℃下搅拌2小时。将溶液在真空下浓缩。将ph用饱和nahco3水溶液调整到7。用乙酸乙酯(3x20ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的1-(2-(5-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙-1-酮(320mg，59％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:8.77(s,1h),8.06(d,j＝2.4hz,1h),7.49(d,j＝2.4hz,1h),7.45(t,j＝54.6hz,1h),2.78(s,3h)。lc-ms:m/z254[m+h]+。[2504]步骤7：1-(2-(5-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙-1-醇[2505][2506]在0℃下，向1-[2-[5-氨基-3-(二氟甲基)-2-吡啶基]三唑-4-基]乙酮(150mg，592.4μmol)于甲醇(10ml)中的搅拌混合物中加入nabh4(27mg，710.8μmol)。将反应混合物在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用40％石油醚和60％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈无色油状物的1-(2-(5-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙-1-醇(120mg，79％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:8.13(d,j＝3.0hz,1h),7.86(s,1h),7.46(d,j＝2.7hz,1h),7.33(t,j＝54.9hz,1h),5.21(q,j＝6.6hz,1h),1.67(d,j＝6.6hz,3h)。lc-ms:m/z256[m+h]+。[2507]步骤8：6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-胺[2508][2509]在25℃下，向1-(2-(5-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-基)乙-1-醇(120mg，470.2μmol)于二氯甲烷(10ml)中的搅拌混合物中加入tea(142.7mg，1.4mmol)和二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸叔丁酯(248.5mg，940.3μmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈淡黄色固体的6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-胺(160mg，92％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:8.11(d,j＝3.0hz,1h),7.81(s,1h),7.43(d,j＝3.0hz,1h),7.32(t,j＝54.9hz,1h),5.17(q,j＝6.6hz,1h),1.55(d,j＝6.6hz,3h),0.92(s,9h),0.11(s,3h),0.05(s,3h)。lc-ms:m/z370[m+h]+。[2510]步骤9：(8r)-n-(6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2511][2512]在25℃下，向6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-胺(150mg，405.9μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌混合物中加入三光气(72.mg，243.5μmol)和tea(62mg，608.9μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(67mg，243.5μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入tea(411mg，4.1mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(99.20mg，811.94μmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的(8r)-n-(6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(110mg，40％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.66(br,1h),9.35(s,1h),8.93(d,j＝2.4hz,1h),8.56(d,j＝2.4hz,1h),8.06(s,1h),7.36(t,j＝54.4hz,1h),7.06(s,1h),5.16(q,j＝6.4hz,1h),4.85(d,j＝11.2hz,1h),4.30(d,j＝11.2hz,1h),1.97(s,3h),1.50(d,j＝6.4hz,3h),0.87(s,9h),0.10(s,3h),0.04(s,3h)。lc-ms:m/z672[m+h]+。[2513]步骤10：(8r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(4-(1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2514][2515]在25℃下，向(8r)-n-(6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(110mg，163.6μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌混合物中加入tbaf(1m，于四氢呋喃中，1ml)。将反应混合物在25℃下搅拌0.5小时。将反应混合物浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到70mg粗产物。对粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的(8r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(4-(1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(38mg，41％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.67(br,1h),9.38(s,1h),8.96(s,1h),8.58(s,1h),8.09(s,1h),7.42(t,j＝54.6hz,1h),7.08(s,1h),5.56(d,j＝5.1hz,1h),4.93-5.03(m,1h),4.88(d,j＝11.4hz,1h),4.32(d,j＝11.4hz,1h),2.00(s,3h),1.49(d,j＝6.6hz,3h)。lc-ms:m/z558[m+h]+。[2516]步骤11：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(4-((r)-1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(4-((s)-1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2517][2518]对(8r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(4-(1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(35mg，62.7μmol)进行手性hplc纯化，色谱柱：chiralartcellulose-sb,3x25cm,5um；流动相a：hex:dcm＝3:1(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：40毫升/分钟；梯度：在37分钟内，7b到7b；220/254nm；rt1:31.2；rt2:34.3；注射体积：0.4ml；运行次数：7。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例126(9.0mg，26％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干成呈白色固体的实例127(6.9mg，20％产率)。实例126和127的对应的立体异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。实施例126和127是非对映异构体，其中与三氟甲基连接的立体中心是绝对的并且甲醇立体中心是相对的(即，实例126和127中的一个中的甲醇立体中心是(s)，实例126和127中的另一个中的甲醇立体中心是(r))。[2519]实例126：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.67(s,1h),9.37(s,1h),8.94(d,j＝2.4hz,1h),8.57(d,j＝2.4hz,1h),8.08(s,1h),7.41(t,j＝54.4hz,1h),7.08(s,1h),5.55(d,j＝4.8hz,1h),4.93-5.00(m,1h),4.86(d,j＝11.6hz,1h),4.31(d,j＝11.6hz,1h),1.99(s,3h),1.47(d,j＝6.4hz,3h)。lc-ms:m/z558[m+h]+。[2520]实例127：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.65(s,1h),9.36(s,1h),8.93(d,j＝2.4hz,1h),8.56(d,j＝2.4hz,1h),8.07(s,1h),7.39(t,j＝54.4hz,1h),7.06(s,1h),5.54(d,j＝5.2hz,1h),4.89-5.00(m,1h),4.85(d,j＝11.2hz,1h),4.30(d,j＝11.2hz,1h),1.97(s,3h),1.47(d,j＝6.4hz,3h)。lc-ms:m/z558[m+h]+。[2521]方法n4[2522][2523]实例128和129：由含有(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2524]步骤1：3-甲基-4-氧代吡咯烷-1,3-二甲酸1-(叔丁基)酯3-乙酯[2525][2526]向4-氧代吡咯烷-1,3-二甲酸1-(叔丁基)酯3-乙酯(400g，1.6mol)于丙酮(2000ml)中的搅拌溶液中加入k2co3(430g，3.2mol)和碘甲烷(442g，3.2mol)。将所得混合物在50℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的3-甲基-4-氧代吡咯烷-1,3-二甲酸1-(叔丁基)酯3-乙酯(320g，75.9％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:4.11-4.14(m,1h),3.95-4.06(m,2h),3.84-3.91(m,1h),3.62-3.67(m,1h),3.25-3.34(d,j＝3.6hz,1h),1.33(s,9h),1.24(s,3h),1.08-1.11(m,3h)。lc-ms:m/z272[m+h]+。[2527]步骤2：4-羟基-3-甲基吡咯烷-1,3-二甲酸1-(叔丁基)酯3-乙酯[2528][2529]在0℃下，向3-甲基-4-氧代吡咯烷-1,3-二甲酸1-(叔丁基)酯3-乙酯(210g，774.0mmol)于乙醇(1000ml)中的搅拌溶液中分份加入nabh4(30g，774.0mmol)。将反应在氮气下在0℃下搅拌1小时。将混合物倒入水(1000ml)中并在真空下浓缩。用乙酸乙酯(3x1000ml)萃取混合物。将合并的有机层用盐水(500ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的4-羟基-3-甲基吡咯烷-1,3-二甲酸1-(叔丁基)酯3-乙酯(98.7g，46.7％产率)。lc-ms:m/z274[m+h]+。[2530]步骤3：4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-甲基吡咯烷-1,3-二甲酸1-(叔丁基)酯3-乙酯[2531][2532]在25℃下，向4-羟基-3-甲基吡咯烷-1,3-二甲酸1-(叔丁基)酯3-乙酯(98.7g，361.1mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(500ml)中的搅拌溶液中加入叔丁基氯二甲基硅烷(108.8g，722.2mmol)和咪唑(98.3g，1.5mol)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物倒入水(1000ml)中，并用乙酸乙酯(3x1000ml)萃取。将合并的有机层用盐水(1000ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用20％石油醚和80％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到粗产物。将粗产物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-甲基吡咯烷-1,3-二甲酸1-(叔丁基)酯3-乙酯(25.8g，16.4％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:4.47-4.50(m,1h),4.07-4.17(m,2h),3.69-3.74(m,1h),3.46-3.58(m,1h),3.10-3.33(m,2h),1.43(s,9h),1.23(s,6h),0.85(s,9h),0.07(s,6h)。lc-ms:m/z388[m+h]+。[2533]步骤4：4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(羟甲基)-3-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2534][2535]在0℃下，向4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-甲基吡咯烷-1,3-二甲酸1-(叔丁基)酯3-乙酯(25.8g，66.6mmol)于四氢呋喃(200ml)中的搅拌溶液中加入lialh4(2.6g，66.6mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌0.5小时。向混合物中加入水(2.6g)和10％naoh水溶液(2.6g)。将所得混合物过滤并在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(羟甲基)-3-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(21.2g，92.2％产率)。lc-ms:m/z346[m+h]+。[2536]步骤5：4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-甲酰基-3-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2537][2538]在25℃下，向4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(羟甲基)-3-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(21.2g，61.3mmol)于二氯甲烷(500ml)中的搅拌混合物中加入戴斯-马丁高碘烷(52.1g，122.7mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1.5小时。将反应混合物用水(800ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x800ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(600ml)洗涤，并经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-甲酰基-3-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(11.1g，48.4％产率)。lc-ms:m/z344[m+h]+。[2539]步骤6：4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(二氟甲基)-3-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2540][2541]在0℃下，向4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-甲酰基-3-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(11.1g，32.3mmol)于二氯甲烷(200ml)中的搅拌混合物中加入dast(15.6g，96.9mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物温热至25℃，并搅拌16小时。将反应混合物用水(500ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x500ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(二氟甲基)-3-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5.5g，46.6％产率)。lc-ms:m/z366[m+h]+。[2542]步骤7：3-(二氟甲基)-4-羟基-3-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2543][2544]在25℃下，向4-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-3-(二氟甲基)-3-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5.5g，15.0mmol)于四氢呋喃(100ml)中的搅拌混合物中加入tbaf(62ml，1m，于四氢呋喃中)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(200ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的3-(二氟甲基)-4-羟基-3-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.1g，28.3％产率)。lc-ms:m/z252[m+h]+。[2545]步骤8：3-(二氟甲基)-3-甲基-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2546][2547]在25℃下，向3-(二氟甲基)-4-羟基-3-甲基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.1g，4.2mmol)于二氯甲烷(100ml)中的搅拌混合物中加入pcc(4.6g，21.3mmol)和sio2(4.6g)。将反应混合物在50℃下搅拌16小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的3-(二氟甲基)-3-甲基-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(500mg，47.1％产率)。lc-ms:m/z250[m+h]+。[2548]步骤9：(z)-4-(二氟甲基)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2549][2550]将3-(二氟甲基)-3-甲基-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(500mg，2.0mmol)于dmf-dma(25ml)中的混合物在35℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩，以得到呈棕色固体的(z)-4-(二氟甲基)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(700mg，粗品)。lc-ms:m/z305[m+h]+。[2551]步骤10：2-氯-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[2552][2553]向(z)-4-(二氟甲基)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(700mg，2.3mmol)于甲苯(20ml)中的搅拌溶液中加入乙酸(2ml)和3-氯-1h-吡唑-5-胺(324.4mg，2.7mmol)。将反应混合物在95℃下搅拌16小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-氯-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(220mg，26.1％产率)。lc-ms:m/z359[m+h]+。[2554]步骤11.2-氯-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[2555][2556]在25℃下，向2-氯-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(220mg，613.2umol)于二氯甲烷(15ml)中的溶液中加入三氟乙酸(3ml)。将反应在25℃下搅拌1小时。将残留物通过饱和nahco3水溶液(40ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层在真空下浓缩。将残留物通过使用30％石油醚和70％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈棕色固体的2-氯-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(120mg，72.6％产率)。lc-ms:m/z259[m+h]+。[2557]步骤12：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2558][2559]向5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；137mg，698.6μmol)于四氢呋喃(3ml)中的搅拌溶液中加入三光气(83mg，279.4μmol)和tea(142mg，1.4mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到2-氯-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(120mg，465.7μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。通过加入水(50ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用10％甲醇和90％二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到粗产物。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(57mg，117.5umol)。lc-ms:m/z480[m+h]+。[2560]步骤13：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2561][2562]对2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(57mg，117.5μmol)进行手性hplc：色谱柱：chiralpakia，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在12分钟内，20b到20b；254/220nm；rt1:7.818；rt2:9.92；注射体积：0.8ml；运行次数：5。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干以得到呈灰白色固体的实例129(10mg，4.4％产率)，并将第二个洗脱异构体浓缩并冻干以得到呈灰白色固体的实例128(10mg，4.4％产率)。实例128和129是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[2563]实例128：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.64(br,1h),9.31(s,1h),8.77(d,j＝2.4hz,1h),8.53(d,j＝2.4hz,1h),8.17(s,2h),7.03(s,1h),6.80(t,j＝55.6hz,1h),4.70(d,j＝10.8hz,1h),4.20(d,j＝10.8hz,1h),1.80(s,3h)。lc-ms:m/z480[m+h]+。[2564]实例129：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.64(br,1h),9.31(s,1h),8.77(d,j＝2.4hz,1h),8.53(d,j＝2.4hz,1h),8.17(s,2h),7.03(s,1h),6.79(t,j＝55.2hz,1h),4.70(d,j＝10.8hz,1h),4.20(d,j＝10.8hz,1h),1.80(s,3h)。lc-ms:m/z480[m+h]+。[2565]方法o4[2566][2567]实例130：(r)-2-氯-n-(2-(二氟甲基)-6-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2568]步骤1：4-氯-6-氟吡啶甲醛[2569][2570]在-78℃下，向4-氯-6-氟吡啶甲酸甲酯(4.0g，21.1mmol)于二氯甲烷(50ml)中的搅拌溶液中加入氢化二异丁基铝(21ml，21.1mmol，1m，于二氯甲烷中)。将所得混合物在-78℃下搅拌3小时。将反应混合物在-78℃下用饱和酒石酸钾钠水溶液(100ml)淬灭。使混合物温热至25℃并过滤。将滤液用二氯甲烷(3x100ml)洗涤。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用85％石油醚和15％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的4-氯-6-氟吡啶甲醛(1.5g，45％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.91(s,1h),7.84-7.86(m,1h),7.22-7.26(m,1h)。lc-ms:m/z160[m+h]+。[2571]步骤2：4-氯-2-(二氟甲基)-6-氟吡啶[2572][2573]在-30℃下，向4-氯-6-氟吡啶甲醛(1.5g，9.4mmol)于二氯甲烷(20ml)中的搅拌溶液中加入dast(3g，18.8mmol)。将所得混合物在0℃下搅拌3小时。通过加入水(150ml)来淬灭反应混合物。用二氯甲烷(3x150ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈无色油状物的4-氯-2-(二氟甲基)-6-氟吡啶(1.0g，54％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:7.55(s,1h),7.10-7.12(m,1h),6.52(t,j＝56hz,1h)。lc-ms:m/z182[m+h]+。[2574]步骤3：(2-(二氟甲基)-6-氟吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯[2575][2576]在氮气气氛下，向4-氯-2-(二氟甲基)-6-氟吡啶(1.0g，5.5mmol)和氨基甲酸叔丁酯(1.3g，11.1mmol)于二噁烷(20ml)中的搅拌溶液中加入xantphos(637mg，1.1mmol)、pd2(dba)3(570mg，550.8μmol)和cs2co3(3.6g，11.1mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌3小时。将反应混合物冷却至25℃。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(2-(二氟甲基)-6-氟吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(800mg，55％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:7.75(br,1h),7.55(s,1h),7.10-7.12(m,1h),6.45(t,j＝56hz,1h),1.51(s,9h)。lc-ms:m/z263[m+h]+。[2577]步骤4：2-(二氟甲基)-6-氟吡啶-4-胺[2578][2579]向(2-(二氟甲基)-6-氟吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(800mg，3.1mmol)于二氯甲烷(12ml)中的搅拌溶液中加入tfa(3ml)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。向残留物中加入饱和nahco3水溶液(40ml)。用二氯甲烷(3x40ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，并经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用40％石油醚和60％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-(二氟甲基)-6-氟吡啶-4-胺(400mg，79％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.90(br,2h),6.73(s,1h),6.45(t,j＝56hz,1h),6.14-6.16(m,1h)。lc-ms:m/z163[m+h]+。[2580]步骤5：(r)-2-氯-n-(2-(二氟甲基)-6-氟吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2581][2582]在0℃下，向方法m1异构体2(100mg，362.3μmol)于四氢呋喃(4ml)中的搅拌溶液中加入三光气(64mg，217.4μmol)和tea(49mg，489.4μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到3-((5-氨基-1-(二氟甲基)-2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)氧基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(118mg，724.6μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(88mg，724.6μmol)和tea(364mg，3.6mmol)。将所得混合物在45℃下搅拌16小时。将反应冷却至25℃。将混合物倒入水(30ml)中，并用乙酸乙酯(3x30ml)萃取。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(2-(二氟甲基)-6-氟吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(80mg，47％产率)。1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ:9.39(s,1h),7.43-7.52(m,1h),6.79(s,1h),6.52(t,j＝56hz,1h),5.35(s,1h),4.43-4.45(m,2h),2.03(s,3h)。lc-ms:m/z465[m+h]+。[2583]步骤6：(r)-2-氯-n-(2-(二氟甲基)-6-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2584][2585]向(r)-2-氯-n-(2-(二氟甲基)-6-氟吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(30mg，172.0μmol)于四氢呋喃(6ml)中的搅拌溶液中加入1-甲基氮杂环丁烷-3-醇(30mg，344.0μmol)和叔丁醇钾(38mg，344.0μmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(2-(二氟甲基)-6-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(2mg，2％产率)。实例130的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2586]实例130：1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ:9.35(s,1h),7.52(d,j＝1.2hz,1h),7.43(s,1h),6.79(s,1h),6.53(t,j＝56hz,1h),5.38-5.42(m,1h),4.78(d,j＝11.4hz,1h),4.43-4.45(m,2h),4.17(d,j＝11.6hz,1h),4.03-4.05(m,2h),2.86(s,3h),2.03(s,3h)。lc-ms:m/z532[m+h]+。[2587]方法p4[2588][2589]实例131：(r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-n-(3-(三氟甲基)-1h-吡唑-5-基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2590]步骤1：3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑-5-胺[2591][2592]在0℃下，向5-(三氟甲基)-1h-吡唑-3-胺(1.0g，6.6mmol)和diea(1.7g，13.2mmol)于二氯甲烷(20ml)中的搅拌混合物中加入(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基硅烷(1.1g，6.6mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用88％石油醚和12％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑-5-胺(870mg，37％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:6.05(s,1h),5.23(s,2h),5.12(s,2h),3.49-3.54(m,2h),0.76-0.83(m,2h),0.03(s,9h)。lc-ms:m/z282[m+h]+。[2593]步骤2：(r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-n-(3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑-5-基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2594][2595]向3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑-5-胺(203mg，722.9μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入三光气(64mg，217μmol)和tea(55mg，542.2μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(100mg，361.5μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(66mg，542.2μmol)和tea(366mg，3.6mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈黄色固体的(r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-n-(3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑-5-基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(200mg，89％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:10.22(s,1h),9.31(s,1h),7.08(s,1h),7.05(s,1h),5.48(s,2h),4.86(d,j＝12.0hz,1h),4.19(d,j＝12.0hz,1h),3.59(t,j＝8.0hz,2h),1.94(s,3h),0.85(t,j＝8.0hz,2h),0.03(s,9h)。lc-ms:m/z584[m+h]+。[2596]步骤3：(r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-n-(3-(三氟甲基)-1h-吡唑-5-基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2597][2598]向(r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-n-(3-(三氟甲基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑-5-基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(100mg，171.2μmol)于二噁烷(1ml)中的搅拌混合物中加入hcl(10ml，40.0mmol，4m，于二噁烷中)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到白色固体的(r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-n-(3-(三氟甲基)-1h-吡唑-5-基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(16.6mg，20％产率)。实例131的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2599]实例131：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.43(s,1h),7.40(s,1h),6.80(s,1h),6.36(s,1h),4.54(d,j＝10.4hz,1h),4.02(d,j＝10.4hz,1h),2.07(s,3h)。lc-ms:m/z454[m+h]+。[2600]方法q4[2601][2602]实例132：(r)-2-氯-8-甲基-n-(5-(甲基氨基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2603]步骤1：3-溴-5-硝基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶[2604][2605]向3-溴-2-氯-5-硝基吡啶(10.0g，42.4mmol)于乙腈(200ml)中的搅拌溶液中加入2h-1,2,3-三唑(3.2g，46.6mmol)和k2co3(11.7g，84.7mmol)。将所得混合物在40℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。过滤反应混合物，并将收集的固体用乙酸乙酯(3×200ml)洗涤。将合并的有机层在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的3-溴-5-硝基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶(2.5g，22％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.42(d,j＝2.4hz,1h),9.22(d,j＝2.4hz,1h),8.31(s,2h)。lc-ms:m/z270[m+h]+。[2606]步骤2：5-溴-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺[2607][2608]向3-溴-5-硝基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶(1.0g，3.7mmol)于乙醇(45ml)和水(15ml)中的溶液中加入fe(1.0g，18.6mmol)和nh4cl(0.8g，14.8mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌1小时。使混合物冷却至25℃。过滤反应混合物，并用乙酸乙酯(3x50ml)洗涤固体。将合并的有机层在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的5-溴-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(0.8g，89％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.01(br,2h)7.82(d,j＝4hz,1h),7.34(d,j＝4hz,1h),6.14(s,2h)；lc-ms:m/z240[m+h]+[2609]步骤3：n3-甲基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3,5-二胺[2610][2611]向5-溴-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(500mg，3.3mmol)于甲胺(4ml，40％，于水中)中的搅拌溶液中加入铜(8mg，0.1mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌4小时。使混合物冷却至25℃。将反应混合物用水(20ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用10％甲醇和90％二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的n3-甲基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3,5-二胺(280mg，71％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.98(s,2h),7.11(d,j＝4hz,1h),6.32(s,j＝4hz,1h),5.57-5.59(m,1h),5.49(br,2h),2.67(d,j＝4hz,3h)。lc-ms:m/z191[m+h]+。[2612]步骤3：(r)-2-氯-8-甲基-n-(5-(甲基氨基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2613][2614]在25℃下，向n3-甲基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3,5-二胺(42mg，217μmol)于四氢呋喃(8ml)中的搅拌溶液中加入三光气(26mg，87μmol)和tea(22mg，217.4μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(40mg，144.9μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(146mg，1.4mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(2mg，14.5μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(20ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到粗产物。对粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-8-甲基-n-(5-(甲基氨基)-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(38.6mg，53％产率)。实例132的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2615]实例132：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.36(s,1h),9.24(s,1h),8.12(s,2h),8.05(d,j＝2hz,1h),7.53(d,j＝2hz,1h),7.06(s,1h),6.24-6.27(m,1h),4.87(d,j＝12hz,1h),4.29(d,j＝12hz,1h),2.81(d,j＝4hz,3h),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z493[m+h]+。[2616]方法r4405[m+h]+。[2625]步骤3：(s)-3-((6-(苄基氨基)-4-(苄氧基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2626][2627]在氮气气氛下，向(3s)-3-[(4-苄氧基-6-氯-2-吡啶基)氧基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.0g，4.9mmol)于二噁烷(160ml)中的混合物中加入苄胺(582mg，5.4mmol)、pd2(dba)3(1.5g，1.5mmol)、xantphos(857mg，1.5mmol)和t-buok(1.7g，14.8mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至25℃，并在真空下浓缩。将所得混合物用水(100ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x100ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(s)-3-((6-(苄基氨基)-4-(苄氧基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.0g，28％产率)。lc-ms:m/z476[m+h]+。[2628]步骤4：(s)-3-((6-(苄基氨基)-4-羟基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2629][2630]向(3s)-3-[[6-(苄基氨基)-4-苄氧基-2-吡啶基]氧基]吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(3.5g，3.8mmol)于乙醇(30ml)中的搅拌溶液中加入pd/c(924mg，10％)。将反应混合物在氢气下在25℃下搅拌1小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(s)-3-((6-(苄基氨基)-4-羟基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(450mg，31％产率)。lc-ms:m/z386[m+h]+。[2631]步骤5：(s)-3-((6-(苄基氨基)-4-(二氟甲氧基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2632][2633]在0℃下，向(s)-3-((6-(苄基氨基)-4-羟基吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(450mg，1.2mmol)于dmf(5ml)中的搅拌溶液中分批加入nah(93mg，2.3mmol，60％，于矿物油中)。将反应混合物在0℃下搅拌10分钟。然后在0℃下加入2-溴-2,2-二氟乙酸乙酯(355mg，1.7mmol)，并将反应混合物在25℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(20ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x30ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的(s)-3-((6-(苄基氨基)-4-(二氟甲氧基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(68mg，13％产率)。lc-ms:m/z436[m+h]+。[2634]步骤6：(s)-3-((6-氨基-4-(二氟甲氧基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2635][2636]向(s)-3-((6-(苄基氨基)-4-(二氟甲氧基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(68mg，148.4μmol)于乙醇(5ml)中的搅拌溶液中加入pd/c(50mg，10％)。将反应混合物在氢气下在30℃下搅拌16小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的(s)-3-((6-氨基-4-(二氟甲氧基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(30mg，44％产率)。lc-ms:m/z346[m+h]+。[2637]步骤7：(s)-3-((6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-4-(二氟甲氧基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2638][2639]向方法m1异构体2(22mg，79.5μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌溶液中加入三光气(14mg，47.4μmol)和tea(16mg，158.1μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到(s)-3-((6-氨基-4-(二氟甲氧基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(30mg，87.5μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(21mg，172.9μmol)和tea(26mg，256.9μmol)。将混合物在60℃下搅拌15小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用水(10ml)稀释。用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将有机层合并，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(s)-3-((6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-4-(二氟甲氧基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(55mg，45％产率)。lc-ms:m/z648[m+h]+。[2640]步骤8：(r)-2-氯-n-(4-(二氟甲氧基)-6-(((s)-吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2641][2642]向(s)-3-((6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-4-(二氟甲氧基)吡啶-2-基)氧基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(53mg，34.4μmol)于二氯甲烷(3ml)中的搅拌溶液中加入tfa(1ml)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的(r)-2-氯-n-(4-(二氟甲氧基)-6-(((s)-吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(11mg，58％产率)。实例133的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2643]实例133：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.30(s,1h),7.43(t,j＝73.2hz,1h),7.29(s,1h),7.06(s,1h),6.28(s,1h),5.43(s,1h),4.97(d,j＝11.6hz,1h),4.25(d,j＝12hz,1h),3.20-3.28(m,2h),2.83-3.02(m,3h),2.07-2.11(m,1h),1.94(s,3h),1.80-1.89(m,1h)。lc-ms:m/z548[m+h]+。[2644]方法s4[2645][2646]实例134：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺[2647]步骤1：1-苄基-4,4-二甲基-5-氧代-4,5-二氢-1h-吡咯-2,3-二甲酸二乙酯[2648][2649]在氮气气氛下在0℃下，向苯甲胺(16.5g，154.3mmol)于叔丁基甲基醚(300ml)中的搅拌溶液中逐滴加入丁-2-炔二酸二乙酯(26.2g，154.3mmol)和2-溴-2-甲基丙酸乙酯(60.2g，308.5mmol)。然后在氮气气氛下在25℃下将cu(otf)2(5.6g，15.4mmol)、2,2'-联吡啶(2.4g，15.4mmol)和koac(15.1g，154.3mmol)加入到溶液中。将反应混合物在100℃下搅拌48小时。将混合物冷却至25℃。在真空下去除溶剂。将残留物用二氯甲烷(500ml)稀释。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色油状物的1-苄基-4,4-二甲基-5-氧代-4,5-二氢-1h-吡咯-2,3-二甲酸二乙酯(50g，80％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:7.28-7.35(m,3h),7.15-7.18(m,2h),4.78(s,2h),4.08-4.24(m,4h),1.47(s,6h),1.27(t,j＝7.2hz,3h),1.11(t,j＝7.2hz,3h)。lc-ms:m/z346[m+h]+。[2650]步骤2：1-苄基-4,4-二甲基-5-氧代-4,5-二氢-1h-吡咯-2,3-二甲酸[2651][2652]在25℃下，向1-苄基-4,4-二甲基-5-氧代-4,5-二氢-1h-吡咯-2,3-二甲酸二乙酯(36.0g，104.2mmol)于甲醇(240ml)和水(110ml)中的搅拌溶液在加入naoh(12.5g，312.7mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用水(500ml)稀释。用hcl(4m)将ph调整到1-2。用乙酸乙酯(2x500ml)萃取混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩，以得到呈白色固体的1-苄基-4,4-二甲基-5-氧代-4,5-二氢-1h-吡咯-2,3-二甲酸(24.5g，77％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.20-7.40(m,3h),7.12-7.14(m,2h),4.70(s,2h),1.28(s,6h)。lc-ms:m/z290[m+h]+。[2653]步骤3：1-苄基-3,3-二甲基-5,6-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2,4,7(3h)-三酮[2654][2655]向1-苄基-4,4-二甲基-5-氧代-4,5-二氢-1h-吡咯-2,3-二甲酸(5.0g，17.3mmol)于乙酸乙酯(300ml)中的搅拌溶液中加入肼单盐酸盐(2.4g，34.6mmol)、1-丙基膦酸环酐(22.0g，69.1mmol，50％，于乙酸乙酯中)和diea(11.2g，86.4mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌72小时。通过加入水(500ml)来淬灭混合物。用乙酸乙酯(3x500ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。这导致呈白色固体的1-苄基-3,3-二甲基-5,6-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2,4,7(3h)-三酮(4.5g，粗品)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.20-7.40(m,5h),5.23(s,2h),1.52(s,6h)。lc-ms:m/z286[m+h]+。[2656]步骤4：1-苄基-4,7-二氯-3,3-二甲基-1,3-二氢-2h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2-酮[2657][2658]将1-苄基-3,3-二甲基-5,6-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2,4,7(3h)-三酮(11g，38.56mmol)于三氯氧磷(59.1g，385.6mmol)中的溶液在90℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用乙酸乙酯(500ml)稀释。将有机层用饱和nahco3水溶液(500ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用85％石油醚和15％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的1-苄基-4,7-二氯-3,3-二甲基-1,3-二氢-2h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2-酮(8g，58％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.01-7.48(m,5h),5.21(s,2h),1.50(s,6h)。lc-ms:m/z322[m+h]+。[2659]步骤5：1-苄基-4-氯-7-肼基-3,3-二甲基-1,3-二氢-2h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2-酮[2660][2661]向1-苄基-4,7-二氯-3,3-二甲基-1,3-二氢-2h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2-酮(2.6g，8.1mmol)于乙醇(20ml)中的搅拌溶液中加入水合肼(6.1g，121.1mmol，80％)。将反应混合物在90℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色固体的1-苄基-4-氯-7-肼基-3,3-二甲基-1,3-二氢-2h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2-酮(1.5g，53％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.41(br,1h),7.07-7.34(m,5h),5.22(s,2h),4.39(br,2h),1.43(s,6h)。lc-ms:m/z318[m+h]+。[2662]步骤6：1-苄基-4-氯-3,3-二甲基-1,3-二氢-2h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2-酮[2663][2664]向1-苄基-4-氯-7-肼基-3,3-二甲基-1,3-二氢-2h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2-酮(800mg，2.5mmol)于甲醇(10ml)和水(10ml)中的搅拌溶液中加入cuso4(2.0g，12.6mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用乙酸乙酯(50ml)稀释。将有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈棕色油状物的1-苄基-4-氯-3,3-二甲基-1,3-二氢-2h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2-酮(500mg，62％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.24(s,1h),7.02-7.59(m,5h),5.00(s,2h),1.47(s,6h)。lc-ms:m/z288[m+h]+。[2665]步骤7：4-氨基-1-苄基-3,3-二甲基-1,3-二氢-2h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2-酮[2666][2667]向1-苄基-4-氯-3,3-二甲基-1,3-二氢-2h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2-酮(1g，3.48mmol)于乙醇(0.5ml)中的搅拌溶液中加入氢氧化铵(30ml)。将反应混合物在150℃下搅拌72小时。使混合物冷却至25℃。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色固体的4-氨基-1-苄基-3,3-二甲基-1,3-二氢-2h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2-酮(500mg，48％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.47(d,j＝1.6hz,1h),7.23-7.39(m,5h),6.37(s,2h),4.89(s,2h),1.39(s,6h)。lc-ms:m/z269[m+h]+。[2668]步骤8：1-苄基-3,3-二甲基-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-4-胺[2669][2670]向4-氨基-1-苄基-3,3-二甲基-1,3-二氢-2h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-2-酮(100mg，372.7μmol)于四氢呋喃(3ml)中的搅拌溶液中加入硼烷(3ml，3mmol，1m，于四氢呋喃中)。将反应混合物在25℃下搅拌24小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈无色油状物的1-苄基-3,3-二甲基-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-4-胺(28mg，26％产率)。lc-ms:m/z255[m+h]+。[2671]步骤9：7-苄基-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪[2672][2673]在氮气气氛下在0℃下，向1-苄基-3,3-二甲基-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-4-胺(50mg，196.6μmol)于二氯甲烷(4ml)中的搅拌溶液中加入溴丙酮(269mg，2.0mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈棕色油状物的7-苄基-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪(14mg，22％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:7.90(s,1h),7.56(q,j＝0.9hz,1h),7.29-7.45(m,5h),4.37(s,2h),3.25(s,2h),2.49(d,j＝0.9hz,3h),1.60(s,6h)。lc-ms:m/z293[m+h]+。[2674]步骤10：2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪[2675][2676]向7-苄基-2,9,9-三甲基-8,9-d-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪(30mg，102.6μmol)于甲醇(5ml)中的搅拌溶液中加入pd/c(100mg)和hcl(240μl，1m)。将反应混合物在氢气气氛下在25℃下搅拌3小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈棕色油状物的2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪(15mg，65％产率)。lc-ms:m/z203[m+h]+。[2677]步骤11：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺[2678][2679]向5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；10mg，51.9μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中加入三光气(13mg，44.5μmol)和tea(11mg，111.2μmol)。将混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪(15mg，74.2μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入tea(75mg，741.6μmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(18mg，148.3μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到15mg粗产物。将得到的粗产物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺(6.4mg，20％产率)。[2680]实例134：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.47(s,1h),9.16(s,1h),8.79(d,j＝2.3hz,1h),8.55(d,j＝2.4hz,1h),8.18(s,2h),7.99(d,j＝0.9hz,1h),4.13(s,2h),2.39(d,j＝0.9hz,3h),1.63(s,6h)。lc-ms:m/z424[m+h]+。[2681]方法t4[2682][2683]实例135和136：由含有(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2684]步骤1：3-(苄氧基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2685][2686]在0℃下，将钠(9.3g，404.9mmol)分份加入到苯基甲醇(146.0g，1.4mol)中。将反应在60℃下搅拌40分钟。然后向反应中加入6-氧杂-3-氮杂双环[3.1.0]己烷-3-甲酸叔丁酯(50.0g，270.0mmol)。将所得混合物在60℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。通过加入水(500ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x500ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的3-(苄氧基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(40g，40％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:7.26-7.39(m,5h),5.22(d,j＝3hz,1h),4.55(d,j＝3hz,2h),4.14(s,1h),3.82(s,1h),3.37-3.45(m,2h),3.16-3.20(m,2h),1.40(s,9h)；lc-ms:m/z294[m+h]+。[2687]步骤2：3-(苄氧基)-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2688][2689]向3-(苄氧基)-4-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(40.0g，136.5mmol)于二氯甲烷(800ml)中的溶液中加入戴斯-马丁高碘烷(86.8g，240.8mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将固体滤出。向滤液中加入二氯甲烷(400ml)，用饱和nahso3水溶液(400ml)和饱和nahco3水溶液(400ml)洗涤。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的3-(苄氧基)-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(30g，75％产率)。lc-ms:m/z292[m+h]+。[2690]步骤3：4-(苄氧基)-3-羟基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2691][2692]向3-(苄氧基)-4-氧代吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(30g，102.7mmol)于四氢呋喃(800ml)中的溶液中加入(三氟甲基)三甲基硅烷(72.9g，513.5mmol)。在0℃下，向该溶液中加入四丁基氟化铵(205ml，205mmol，1m，于thf中)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。通过加入水(500ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x500ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用饱和nh4cl水溶液(3x500ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的4-(苄氧基)-3-羟基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(20g，54％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:7.27-7.37(m,5h),6.45(s,1h),4.55-4.65(m,2h),4.18-4.23(m,1h),3.67-3.73(m,1h),3.47-3.51(m,1h),3.36(d,j＝12hz,1h),3.19-3.22(m,1h),1.39(s,9h)；lc-ms:m/z362[m+h]+。[2693]步骤4：4-(苄氧基)-3-甲氧基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2694][2695]在0℃下，向4-(苄氧基)-3-羟基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(20.0g，55.4mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(320ml)中的溶液中加入nah(4.4g，110.8mmol，60％，于矿物油中)。将反应混合物在0℃下搅拌0.5小时。然后在0℃下，向混合物中加入碘甲烷(23.6g，166.2mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3小时。通过加入水(500ml)来淬灭反应混合物。所得溶液用乙酸乙酯(500ml)萃取并用盐水洗涤(3x500ml)。将有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的4-(苄氧基)-3-甲氧基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(15.6g，75％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:6.48-6.56(m,5h),4.03(s,2h),3.77-3.89(m,2h),3.53-3.58(m,1h),2.86-3.01(m,2h),2.74(s,3h),0.66(s,9h)；lc-ms:m/z376[m+h]+。[2696]步骤5：4-羟基-3-甲氧基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2697][2698]向4-(苄氧基)-3-甲氧基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(15.6g，41.6mmol)于甲醇(300ml)中的溶液中加入pd(oh)2/c(7.8g，50％)。将烧瓶抽空并用氮气冲洗三次，然后用氢气冲洗。将混合物在氢气气球气氛下在25℃下搅拌16小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的4-羟基-3-甲氧基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(8.0g，67％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:5.55(s,1h),4.36(d,j＝8hz,1h),3.68-3.73(m,1h),3.52-3.58(m,1h),3.42(s,3h),3.36-3.39(m,1h),3.06-3.12(m,1h),1.38(s,9h)；lc-ms:m/z286[m+h]+。[2699]步骤6：3-甲氧基-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2700][2701]向4-羟基-3-甲氧基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5g，17.5mmol)于二氯甲烷(200ml)中的溶液中加入pcc(37.6g，175mmol)和sio2(37.6g)。将所得混合物在45℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。将固体滤出。将所得溶液在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到成白色固体的3-甲氧基-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.5g，50％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:4.02-4.06(m,4h),3.39(s,3h),1.42(s,9h)；lc-ms:m/z284[m+h]+。[2702]步骤7：(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲氧基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2703][2704]将3-甲氧基-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.5g，5.2mmol)于dmf-dma(30ml)中的溶液在35℃下搅拌3小时。使混合物冷却至25℃。将所得溶液在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲氧基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.6g，粗品)，其直接用于下一步骤。lc-ms:m/z339[m+h]+。[2705]步骤8：2-氯-8-甲氧基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[2706][2707]向(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲氧基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.6g，4.7mmol)于甲苯(30ml)中的溶液中加入3-氯-1h-吡唑-5-胺(550mg，4.7mmol)和乙酸(3ml)。将所得混合物在95℃下搅拌16小时。使混合物冷却至25℃。将所得溶液在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-氯-8-甲氧基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(265mg，14％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.16(s,1h),7.15(s,1h),4.20-4.41(m,2h),3.26(s,3h),1.57(s,9h)；lc-ms:m/z393[m+h]+。[2708]步骤9：2-氯-8-甲氧基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[2709][2710]向2-氯-8-甲氧基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(265mg，676.0μmol)于二氯甲烷(20ml)中的溶液中加入tfa(5ml)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将ph用饱和nahco3水溶液调整到7-8。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-氯-8-甲氧基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(100mg，50％产率)。lc-ms:m/z293[m+h]+。[2711]步骤10：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2712][2713]向5-氯-6-(三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；100mg，512.8umol)于四氢呋喃(20ml)中的搅拌溶液中加入三光气(61mg，205.4umol)和tea(104mg，1.0mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将所得滤液加入到2-氯-8-甲氧基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(100mg，342.4umol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。将混合物在25℃下搅拌1小时。通过加入水(50ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用10％甲醇和90％二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到粗产物，将所述粗产物通过制备型hplc进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(70mg，40％产率)。lc-ms:m/z514[m+h]+。[2714]步骤11：分离对映异构体以获得(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2715][2716]对70mg2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲氧基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺进行手性hplc纯化(色谱柱：chiralartcellulose-sc，2x25cm，5um；流动相a：hex:dcm＝3:1(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在14分钟内，50b到50b；220/254nm；rt1:7.66；rt2:11.725；注射体积：3ml；运行次数：3；将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈灰白色固体的实例135(24.5mg，13％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈灰白色固体的实例136(26mg，14％产率)。实例135和136是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[2717]实例135：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.82(s,1h),9.55(s,1h),8.82(d,j＝2.4hz,1h),8.58(d,j＝2.4hz,1h),8.24(s,2h),7.23(s,1h),4.74-4.82(m,2h),3.37(s,3h)；lc-ms:m/z514[m+h]+。[2718]实例136：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.75(s,1h),9.49(s,1h),8.76(d,j＝2.4hz,1h),8.52(d,j＝2.4hz,1h),8.18(s,2h),7.16(s,1h),4.72-4.73(m,2h),3.31(s,3h)；lc-ms:m/z514[m+h]+。[2719]方法u4[2720][2721]实例136和137：由含有(s)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2722]步骤1：2-氯-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[2723][2724]在氮气气氛下在-20℃下，向2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(方法k1步骤9；300mg，797.4μmol)于甲醇(6ml)和二氯甲烷(6ml)中的搅拌溶液中加入n,n-二甲基甲酰胺(2ml)中的1-氯甲基-4-氟-1,4-重氮双环[2.2.2]辛烷双(四氟硼酸酯)(562mg，1.6mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的2-氯-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(110mg，35％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.21(s,1h),4.01-4.37(m,2h),1.52(s,9h),1.23(s,3h)。lc-ms:m/z395[m+h]+。[2725]步骤2：2-氯-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[2726][2727]向2-氯-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(110mg，279.2μmol)于二氯甲烷(8ml)中的搅拌溶液中加入tfa(2ml)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(40ml)稀释。用二氯甲烷(3x30ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-氯-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(50mg，61％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.39(s,1h),6.12(br,1h),3.85-3.95(m,1h),3.52-3.62(m,1h),1.77(s,3h)。lc-ms:m/z295[m+h]+。[2728]步骤3：2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2729][2730]在25℃下，向2-氯-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(50mg，170.0μmol)和6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(方法q2步骤8；30mg，170.0μmol)于二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中加入dppa(56mg，204.0μmol)和tea(86mg，850μmol)。将所得混合物在100℃下搅拌16小时。将反应冷却至25℃。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到40mg粗产物，对所述粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈黄色固体的2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(18mg，18％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.94(br,1h),9.48(d,j＝2.4hz,1h),9.36(s,1h),8.19(d,j＝2.4hz,1h),7.24(t,j＝54.2hz,1h),4.86(d,j＝11.6hz,1h),4.30(d,j＝11.6hz,1h),1.95(s,3h)。lc-ms:m/z466[m+h]+。[2731]步骤4：分离对映异构体以获得(s)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2732][2733]对2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(16mg，34.5μmol)进行手性hplc：色谱柱：chiralpakie-3，4.6x50mm3um；流动相a：hex(0.1％dea):乙醇＝80:20，流动相b：ipa-hplc；流速：1毫升/分钟；梯度：在10分钟内，0b到40b；220/254nm；rt1:2.77；rt2:3.06；运行次数：5。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例137(6mg，75％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例138(4mg，44％产率)。实例137和138是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[2734]实例137：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.94(br,1h),9.49(d,j＝2.4hz,1h),9.36(s,1h),8.20(d,j＝2.4hz,1h),7.24(t,j＝54.2hz,1h),4.86(d,j＝11.6hz,1h),4.30(d,j＝11.6hz,1h),1.95(s,3h)。lc-ms:m/z466[m+h]+。[2735]实例138：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.94(br,1h),9.49(d,j＝2.4hz,1h),9.36(s,1h),8.20(d,j＝2.4hz,1h),7.24(t,j＝54.2hz,1h),4.86(d,j＝11.6hz,1h),4.30(d,j＝11.6hz,1h),1.95(s,3h)。lc-ms:m/z466[m+h]+。[2736]方法v4[2737][2738]实例139和140：由含有(s)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2739]步骤1：2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[2740][2741]在-20℃下，向2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(方法x1步骤2；500mg，1.4mmol)于二氯甲烷(15ml)和甲醇(15ml)中的搅拌溶液中加入n,n-二甲基甲酰胺(5ml)中的1-氯甲基-4-氟-1,4-重氮双环[2.2.2]辛烷双(四氟硼酸酯)(983mg，2.8mmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈灰白色固体的2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(110mg，20％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.05(s,1h),4.48(d,j＝12.4hz,1h),3.80(d,j＝12.4hz,1h),1.93(s,3h),1.59基)-2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2749][2750]对n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(40mg，80μmol)进行手性hplc纯化：柱：chiralartcellulose-sc，2x25cm，5um；流动相a：hex:dcm＝3:1(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在11钟内，15b到15b；254/220nm；rt1:8.430；rt2:9.412；注射体积：0.6ml；运行次数：6；将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例140(7.1mg，17％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例139(5.9mg，14％产率)。实例139和140是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[2751]实例139：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.72(s,1h),9.37(s,1h),8.74(s,1h),8.50(s,1h),8.17(s,2h),4.86(d,j＝11.4hz,1h),4.30(d,j＝11.4hz,1h),1.95(s,3h)lc-ms:m/z500[m+h]+。[2752]实例140：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.72(s,1h),9.37(s,1h),8.75(d,j＝2.4hz,1h),8.50(d,j＝2.4hz,1h),8.17(s,2h),4.86(d,j＝11.4hz,1h),4.30(d,j＝11.4hz,1h),1.95(s,3h)lc-ms:m/z500[m+h]+。[2753]方法w4[2754][2755]实例141和142：由含有(s)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2756]步骤1：n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2757][2758]向2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(方法v4步骤2；64mg，230.2μmol)和6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(方法q2步骤8；40mg，229.9μmol)于二噁烷(5ml)中的搅拌溶液中加入dppa(75mg，276.2μmol)和tea(116mg，1.1mmol)。将混合物在100℃下搅拌2小时。冷却至25℃后，将混合物在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈淡黄色固体的n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(62.3mg，60％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.93(s,1h),9.50(d,j＝2.4hz,1h),9.35(s,1h),8.21(d,j＝2.8hz,1h),7.24(t,j＝55.4hz,1h),4.87(d,j＝11.6hz,1h),4.30(d,j＝11.6hz,1h),1.94(s,3h)。lc-ms:m/z450[m+h]+。[2759]步骤2：分离对映异构体以获得(s)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2760][2761]对n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2,3-二氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(60mg，133μmol)进行手性hplc纯化：柱：chiralartcellulose-sb，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在16分钟内，20b到20b；220/254nm；rt1:6.342；rt2:11.264；注射体积：4ml；运行次数：3；将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例141(9.4mg，15％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例142(7.6mg，12％产率)。实例141和142是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[2762]实例141：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.93(s,1h),9.50(d,j＝2.4hz,1h),9.36(s,1h),8.21(d,j＝2.7hz,1h),7.24(t,j＝54.3hz,1h),4.87(d,j＝11.7hz,1h),4.30(d,j＝11.7hz,1h),1.93(s,3h)。lc-ms:m/z450[m+h]+。[2763]实例142：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.93(s,1h),9.50(d,j＝2.1hz,1h),9.36(s,1h),8.21(d,j＝2.4hz,1h),7.24(t,j＝54.3hz,1h),4.87(d,j＝8.7hz,1h),4.31(d,j＝8.7hz,1h),1.94(s,3h)。lc-ms:m/z450[m+h]+。[2764]方法x4[2765][2766]实例143：(r)-2-氯-n-(3-氰基-6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2767]步骤1：3-氯-6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸[2768][2769]在0℃下，向3-氯-6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸乙酯(800mg，3.4mmol)于四氢呋喃(8ml)和水(2ml)中的搅拌溶液中加入氢氧化锂(242.9mg，10.1mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在减压下浓缩。然后将所得溶液用水(30ml)稀释。用hcl(1m)将ph调整到3。用乙酸乙酯(3x30ml)萃取所得溶液。将合并的有机萃取物经无水硫酸钠干燥，并在减压下浓缩。将获得的固体用正戊烷(20ml)洗涤，以得到呈灰白色固体的3-氯-6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(590mg，83％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.32(s,1h),7.35(t,j＝53.6hz,1h)。lc-ms:m/z209[m+h]+。[2770]步骤2：(3-氯-6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)氨基甲酸叔丁酯[2771][2772]向3-氯-6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(200mg，959.0μmol)于2-甲基丙-2-醇(10ml)中的搅拌溶液中加入dppa(527.8mg，1.9mmol)和diea(247.9mg，1.9mmol)。将所得混合物在氮气气氛下在90℃下搅拌15小时。使混合物冷却至25℃并在真空下浓缩。将残留物用水(50ml)稀释并用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(3-氯-6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)氨基甲酸叔丁酯(170mg，63.4％产率)。lc-ms:m/z280[m+h]+。[2773]步骤3：4-氨基-6-(二氟甲基)哒嗪-3-甲腈[2774][2775]在氮气气氛下，向(3-氯-6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)氨基甲酸叔丁酯(120mg，429.1μmol)于n,n-二甲基乙酰胺(6ml)中的搅拌溶液中加入氰化锌(50.4mg，429.1μmol)、锌(2.8mg，42.9μmol)和pd(dppf)cl2(31.4mg，42.9μmol)。将所得混合物在氮气气氛下在120℃下搅拌2.5小时。使混合物冷却至25℃。将反应混合物用水(50ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(3x50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的4-氨基-6-(二氟甲基)哒嗪-3-甲腈(54mg，70％产率)。lc-ms:m/z171[m+h]+。[2776]步骤4：(r)-2-氯-n-(3-氰基-6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2777][2778]向4-氨基-6-(二氟甲基)哒嗪-3-甲腈(25mg，146.9μmol)于四氢呋喃(8ml)中的搅拌溶液中加入三光气(34.9mg，117.6μmol)和tea(22.3mg，220.4μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(40.7mg，146.9μmol)于四氢呋喃(1.5ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(148.7mg，1.8mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(35.9mg，293.9μmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将溶剂在真空下浓缩。将残留物通过使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc纯化法进行纯化，以得到30mg粗产物，将所述粗产物通过制备型hplc进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈淡黄色固体的(r)-2-氯-n-(3-氰基-6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(2mg，2.80％产率)。实例143的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2779]实例143：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:10.27(br,1h),9.32(s,1h),8.33(s,1h),7.38(t,j＝54.0hz,1h),7.10(s,1h),4.87(d,j＝10.8hz,1h),4.32(d,j＝10.8hz,1h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z473[m+h]+。[2780]方法y4[2781][2782]实例144和145：由含有(r)-2-氯-8-环丙基-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(s)-2-氯-8-环丙基-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2783]步骤1：n-苄基-n-(2-环丙基乙酰基)甘氨酸乙酯[2784][2785]向苄基甘氨酸乙酯(15.0g，77.6mmol)于乙腈(150ml)中的搅拌混合物中加入2-环丙基乙酸(9.3g，93.2mmol)、1-甲基咪唑(19.1g，232.9mmol)和六氟磷酸n,n,n,n-四甲基氯甲脒酯(65.5g，232.9mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的n-苄基-n-(2-环丙基乙酰基)甘氨酸乙酯(19.6g，91％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.23-7.38(m,5h),4.62(s,1h),4.51(s,1h),4.10(s,1h),4.04-4.08(m,2h),4.00(s,1h),2.31(d,j＝6.4hz,1h),2.24(d,j＝6.8hz,1h),1.13-1.19(m,3h),0.90-1.04(m,1h),0.40-0.47(m,2h),0.03-0.11(m,2h)。lc-ms:m/z276[m+h]+。[2786]步骤2：1-苄基-3-环丙基吡咯烷-2,4-二酮[2787][2788]在0℃下，向四氢呋喃(100ml)的搅拌溶液中分批加入nah(4.0g，98.4mmol，60％，于矿物油中)。将反应混合物在75℃下搅拌，并逐滴加入n-苄基-n-(2-环丙基乙酰基)甘氨酸乙酯(22.5g，81.72mmol)于四氢呋喃(100ml)中的溶液。将反应混合物在75℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭。用hcl(1m)将ph调整到3-4。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用98％二氯甲烷和2％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色固体的1-苄基-3-环丙基吡咯烷-2,4-二酮(12.9g，68.8％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:10.55(s,1h),7.15-7.35(m,5h),4.43(s,2h),3.60(s,2h),1.41-1.48(m,1h),0.89-0.92(m,2h),0.57-0.62(m,2h)。lc-ms:m/z230[m+h]+。[2789]步骤3：1-苄基-3-环丙基-3-(三氟甲基)吡咯烷-2,4-二酮[2790][2791]在0℃下，向1-苄基-3-环丙基吡咯烷-2,4-二酮(7.0g，30.5mmol)于n,n-二甲基乙酰胺(100ml)中的搅拌溶液中分批加入nah(1.3g，33.6mmol，60％，于矿物油中)。将反应混合物在25℃下搅拌0.5小时。在-55℃下加入三氟甲磺酸5-(三氟甲基)-5h-二苯并[b,d]噻吩-5-鎓酯(12.1g，30.5mmol)。将反应混合物在-55℃下搅拌1小时，并在25℃下再搅拌1小时。将反应混合物用水(400ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x400ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(3x800ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的1-苄基-3-环丙基-3-(三氟甲基)吡咯烷-2,4-二酮(4.9g，55.1％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.23-7.41(m,5h),4.63(s,2h),4.04-4.15(m,2h),1.35-1.41(m,1h),0.67-0.73(m,1h),0.57-0.65(m,2h),0.31-0.39(m,1h)。lc-ms:m/z298[m+h]+。[2792]步骤4：1-苄基-4-环丙基-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇[2793][2794]在0℃下，向1-苄基-3-环丙基-3-(三氟甲基)吡咯烷-2,4-二酮(4.3g，14.5mmol)于四氢呋喃(60ml)中的搅拌溶液中加入lialh4(2.2g，57.9mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至0℃。在搅拌的同时，加入h2o(2.2g)和naoh水溶液(10％，2.2g)，然后加入h2o(2.2g)。将所得混合物过滤并在真空下浓缩。将残留物通过使用98％二氯甲烷和2％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色固体的1-苄基-4-环丙基-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇(2.2g，7.71mmol，74.79％产率)。lc-ms:m/z286[m+h]+。[2795]步骤5：4-环丙基-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇盐酸盐[2796][2797]向1-苄基-4-环丙基-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇(2.2g，7.7mmol)于乙醇(60ml)中的搅拌溶液中加入pd/c(1.0g，10％)和hcl(1m，7.7ml)。将反应混合物在氢气下在25℃下搅拌16小时。然后在25℃下加入hcl(1m，7.7ml)，并将反应混合物在25℃下再搅拌0.5小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩，以得到呈黄色固体的4-环丙基-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇盐酸盐(1.5g，粗品)。lc-ms:m/z196[m+h]+。[2798]步骤6：3-环丙基-4-羟基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2799][2800]向4-环丙基-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇盐酸盐(1.5g，7.7mmol)于四氢呋喃(20ml)中的搅拌溶液中加入(boc)2o(2.5g，11.6mmol)和tea(3.9g，38.5mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色油状物的3-环丙基-4-羟基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.1g，94.1％产率)。lc-ms:m/z296[m+h]+。[2801]步骤7：3-环丙基-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2802][2803]在25℃下，向3-环丙基-4-羟基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(2.2g，7.3mmol)于二氯甲烷(50ml)中的搅拌混合物中加入pcc(7.8g，36.3mmol)和硅胶(16.0g)。将反应混合物在40℃下搅拌16小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的3-环丙基-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.4g，63.1％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:3.89-4.08(m,2h),3.65-3.75(m,1h),3.46(d,j＝12.4hz,1h),1.43(s,9h),1.18-1.26(m,1h),0.54-0.64(m,2h),0.34-0.44(m,2h)。lc-ms:m/z294[m+h]+。[2804]步骤8：(e)-4-环丙基-2-((二甲基氨基)亚甲基)-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[2805][2806]将3-环丙基-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.3g，4.5mmol)于dmf-dma(15ml)中的混合物在35℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩，以得到呈黄色固体的(e)-4-环丙基-2-((二甲基氨基)亚甲基)-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.5g，粗品)。lc-ms:m/z349[m+h]+。[2807]步骤9：2-氯-8-环丙基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[2808][2809]向(e)-4-环丙基-2-((二甲基氨基)亚甲基)-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.5g，4.2mmol)于甲苯(20ml)中的搅拌溶液中加入乙酸(2ml)和3-氯-1h-吡唑-5-胺(489mg，4.2mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌16小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(40ml)稀释。用乙酸乙酯(3x40ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-氯-8-环丙基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(567mg，33.8％产率)。lc-ms:m/z403[m+h]+。[2810]步骤10：2-氯-8-环丙基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[2811][2812]在25℃下，向2-氯-8-环丙基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(550mg，1.4mmol)于二氯甲烷(9ml)中的溶液加入tfa(3ml)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时，并在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(30ml)稀释。用乙酸乙酯(3x30ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用99％二氯甲烷和1％甲醇作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色固体的2-氯-8-环丙基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(197mg，72.6％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.39(s,1h),6.89(s,1h),5.89(s,1h),3.56(d,j＝12.0hz,1h),3.18(d,j＝12.0hz,1h),2.00-2.07(m,1h),0.67-0.74(m,1h),0.42-0.51(m,3h)。lc-ms:m/z303[m+h]+。[2813]步骤11：2-氯-8-环丙基-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2814][2815]向2-氯-8-环丙基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(70mg，231.3μmol)于二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中加入6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(方法q2步骤8；40mg，231.3μmol)、dppa(71mg，277.5μmol)和tea(116mg，1.2mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌2小时。使混合物冷却至25℃并在真空下浓缩。将残留物通过使用4％甲醇和96％二氯甲烷作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到80mg粗产物，对所述粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的2-氯-8-环丙基-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(50mg，45.9％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.79(s,1h),9.49(d,j＝2.4hz,1h),9.37(s,1h),8.19(d,j＝2.4hz,1h),7.25(t,j＝53.8hz,1h),7.12(s,1h),4.43(d,j＝11.6hz,1h),3.81(d,j＝12.0hz,1h),2.26-2.29(m,1h),0.83-0.92(m,1h),0.59-0.67(m,1h),0.48-0.56(m,2h)。lc-ms:m/z474[m+h]+。[2816]步骤12：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-8-环丙基-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(s)-2-氯-8-环丙基-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2817][2818]对2-氯-8-环丙基-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(50mg，105.5μmol)进行手性hplc：色谱柱：chiralpakia，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在12分钟内，20b到20b；254/220nm；rt1:7.818；rt2:9.92；注射体积：0.8ml；运行次数：5。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例144(18.8mg，37.6％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例145(16.7mg，33.4％产率)。实例144和145是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[2819]实例144：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.79(s,1h),9.50(d,j＝2.4hz,1h),9.37(s,1h),8.19(d,j＝2.8hz,1h),7.25(t,j＝53.8hz,1h),7.12(s,1h),4.43(d,j＝12.0hz,1h),3.81(d,j＝12.4hz,1h),2.23-2.29(m,1h),0.83-0.92(m,1h),0.60-0.67(m,1h),0.48-0.56(m,2h)。lc-ms:m/z474[m+h]+。[2820]实例145：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.77(s,1h),9.47(d,j＝2.8hz,1h),9.35(s,1h),8.17(d,j＝2.4hz,1h),7.23(t,j＝53.6hz,1h),7.10(s,1h),4.41(d,j＝12.4hz,1h),3.79(d,j＝12.0hz,1h),2.21-2.27(m,1h),0.81-0.90(m,1h),0.58-0.65(m,1h),0.46-0.54(m,2h)。lc-ms:m/z474[m+h]+。[2821]方法z4[2822][2823]实例146和147：由含有(r)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(s)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2824]步骤1：3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[2825][2826]向4-氟-1h-吡唑-5-胺(256mg，2.5mmol)于甲苯(10ml)中的溶液中加入(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(方法k1步骤8；817mg，2.5mmol)和乙酸(1ml)。将所得混合物在120℃下搅拌16小时。将所得溶液在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(350mg，38％产率)。lc-ms:m/z361[m+h]+。[2827]步骤2：3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[2828][2829]向3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(350mg，1.0mmol)于二氯甲烷(5ml)中的溶液中加入tfa(1ml)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将反应混合物用水(10ml)淬灭。将ph用饱和nahco3水溶液调整到7-8。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(100mg，40％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.35(s,1h),8.15(d,j＝3.3hz,1h),3.89(d,j＝12.6hz,1h),3.57(d,j＝12.6hz,1h),1.81(s,3h)；lc-ms:m/z261[m+h]+。[2830]步骤3：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2831][2832]向5-氯-6-(三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；113mg，579.5μmol)于四氢呋喃(8ml)中的搅拌溶液中加入三光气(69mg，233.1μmol)和tea(117mg，1.2mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将所得滤液加入到3-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(100mg，383.1μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到粗产物。将粗产物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈黄色固体的n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(30mg，16％产率)。lc-ms:m/z482[m+h]+。[2833]步骤4：分离对映异构体以获得(s)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2834][2835]对28mgn-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-3-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺进行手性hplc纯化：色谱柱：chiralpakia，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在30分钟内，10b到10b；220/254nm；rt1:20.819；rt2:25.766；注射体积：0.8ml；运行次数：5；将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈黄色固体的实例147(8.8mg，5％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈黄色固体的实例146(8.9mg，5％产率)。实例146和147是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[2836]实例146：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.71(br,1h),9.33(s,1h),8.75(d,j＝2.4hz,1h),8.51(d,j＝2.4hz,1h),8.42(d,j＝3.2hz,1h),8.18(s,2h),4.86(d,j＝11.6hz,1h),4.32(d,j＝11.6hz,1h),2.00(s,3h)；lc-ms:m/z482[m+h]+。[2837]实例147：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ9.71(br,1h),9.33(s,1h),8.75(d,j＝2.4hz,1h),8.51(d,j＝2.4hz,1h),8.42(d,j＝3.2hz,1h),8.18(s,2h),4.86(d,j＝11.6hz,1h),4.32(d,j＝11.6hz,1h),2.00(s,3h)；lc-ms:m/z482[m+h]+。[2838]方法a5[2839][2840]实例148：(r)-n-(3-氨基甲酰基-6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2‑‑8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2841]步骤1：(r)-n-(3-氨基甲酰基-6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2‑‑8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2842][2843]向(r)-2-氯-n-(3-氰基-6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(54mg，114.2μmol)于浓hcl(4ml)中的搅拌溶液中加入乙酸(4ml)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈淡黄色固体的(r)-n-(3-氨基甲酰基-6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2‑‑8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(13.5mg，23.8％产率)。[2844]实例148：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:12.73(br,1h),9.40(s,1h),9.22(br,1h),8.83(s,1h),8.51(br,1h),7.35(t,j＝54.0hz,1h),7.11(s,1h),4.63(d,j＝11.1hz,1h),4.39(d,j＝11.1hz,1h),2.01(s,3h)。lc-ms:m/z491[m+h]+。[2845]方法b5[2846][2847]实例149：(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(乙基(甲基)氨基甲酰基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2848]步骤1：5-溴-3-(二氟甲基)-n-乙基-n-甲基吡啶酰胺[2849][2850]向5-溴-3-(二氟甲基)吡啶甲酸(330mg，1.3mmol)于n,n-二甲基乙酰胺(6ml)中的搅拌溶液中加入n-甲基乙胺(93mg，1.6mmol)、edci(326mg，1.7mmol)、hobt(230mg，1.7mmol)和diea(508mg，3.9mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌6小时。将反应混合物用水(30ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x30ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的5-溴-3-(二氟甲基)-n-乙基-n-甲基吡啶酰胺(240mg，61％产率)。lc-ms:m/z293[m+h]+。[2851]步骤2：3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-n-乙基-n-甲基吡啶酰胺[2852][2853]在氮气气氛下，向5-溴-3-(二氟甲基)-n-乙基-n-甲基吡啶酰胺(200mg，682μmol)于二噁烷(10ml)中的混合物中加入二苯基甲亚胺(185mg，1.0mmol)、pd2(dba)3(62mg，68μmol)、xantphos(39mg，68μmol)和cs2co3(667mg，2.1mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌12小时。将反应混合物在真空下浓缩。将所得混合物用水(10ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-n-乙基-n-甲基吡啶酰胺(250mg，77％产率)。lc-ms:m/z394[m+h]+。[2854]步骤3：5-氨基-3-(二氟甲基)-n-乙基-n-甲基吡啶酰胺[2855][2856]向3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-n-乙基-n-甲基吡啶酰胺(250mg，635μmol)于二氯甲烷(5ml)中的搅拌混合物中加入tfa(1ml)。将所得混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(10ml)稀释。用二氯甲烷(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-氨基-3-(二氟甲基)-n-乙基-n-甲基吡啶酰胺(100mg，67％产率)。lc-ms:m/z230[m+h]+。[2857]步骤4：(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(乙基(甲基)氨基甲酰基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2858][2859]向5-氨基-3-(二氟甲基)-n-乙基-n-甲基吡啶酰胺(20mg，87μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌溶液中加入三光气(16mg，52μmol)和tea(18mg，174μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(24mg，87μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(11mg，87μmol)和tea(18mg，174μmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(乙基(甲基)氨基甲酰基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(13.6mg，29％产率)。实例149的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2860]实例149：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.56(s,1h),9.35(s,1h),8.92(d,j＝2.0hz,1h),8.37(d,j＝2.0hz,1h),7.11(t,j＝55.2hz,1h),7.07(s,1h),4.87(d,j＝11.2hz,1h),4.28(d,j＝11.6hz,1h),3.50(m,1h),3.17(m,1h),2.81-3.00(m,3h),1.99(s,3h),1.05-1.16(m,3h)。lc-ms:m/z532[m+h]+。[2861]方法c5[2862][2863]实例150：(r)-2-氯-n-(6-(环丙基氨基甲酰基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-8-甲ms:m/z228[m+h]+。[2873]步骤4：(r)-2-氯-n-(6-(环丙基氨基甲酰基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2874][2875]向5-氨基-n-环丙基-3-(二氟甲基)吡啶酰胺(20mg，88μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌溶液中加入三光气(16mg，52μmol)和tea(18mg，176μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(24mg，87μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(11mg，88μmol)和tea(18mg，176μmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(6-(环丙基氨基甲酰基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(17mg，36％产率)。实例150的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2876]实例150：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.61(s,1h),9.34(s,1h),8.96(d,j＝2.1hz,1h),8.83(d,j＝5.1hz,1h),8.46(d,j＝2.1hz,1h),7.89(t,j＝55.5hz,1h),7.06(s,1h),4.84(d,j＝11.7hz,1h),4.28(d,j＝11.7hz,1h),2.85-2.90(m,1h),1.96(s,3h),0.65-0.71(m,4h)。lc-ms:m/z530[m+h]+。[2877]方法d5[2878][2879]实例151(r)-2-氯-n-(6-(环丙基(甲基)氨基甲酰基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2880]步骤1：5-溴-n-环丙基-3-(二氟甲基)-n-甲基吡啶酰胺[2881][2882]向5-溴-3-(二氟甲基)吡啶甲酸(220mg，873μmol)于n,n-二甲基乙酰胺(5ml)中的搅拌溶液中加入n-甲基环丙胺(75mg，1.1mmol)、edci(218mg，1.1mmol)、hobt(153mg，1.1mmol)和diea(338mg，2.6mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(20ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x20ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-溴-n-环丙基-3-(二氟甲基)-n-甲基吡啶酰胺(81mg，30％产率)。lc-ms:m/z305[m+h]+。[2883]步骤2：n-环丙基-3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-n-甲基吡啶酰胺[2884][2885]在氮气气氛下，向5-溴-n-环丙基-3-(二氟甲基)-n-甲基吡啶酰胺(81mg，265μmol)于二噁烷(4ml)中的混合物中加入二苯基甲亚胺(48mg，265μmol)、pd2(dba)3(24mg，27μmol)、xantphos(15mg，27μmol)和cs2co3(259mg，796μmol)。将所得混合物在100℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物用水(10ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的n-环丙基-3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-n-甲基吡啶酰胺(81mg，30％产率)。lc-ms:m/z406[m+h]+。[2886]步骤3：5-氨基-n-环丙基-3-(二氟甲基)-n-甲基吡啶酰胺[2887][2888]向n-环丙基-3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)-n-甲基吡啶酰胺(83mg，205μmol)于二氯甲烷(5ml)中的搅拌混合物中加入tfa(1ml)。将所得混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(10ml)稀释。用二氯甲烷(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-氨基-n-环丙基-3-(二氟甲基)-n-甲基吡啶酰胺(35mg，71％产率)。lc-ms:m/z242[m+h]+。[2889]步骤4：(r)-2-氯-n-(6-(环丙基(甲基)氨基甲酰基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2890][2891]向5-氨基-n-环丙基-3-(二氟甲基)-n-甲基吡啶酰胺(35mg，145μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入三光气(26mg，87μmol)和tea(29mg，290μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(40mg，145μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(18mg，145μmol)和tea(29mg，290μmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(6-(环丙基(甲基)氨基甲酰基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(27.2mg，42％产率)。实例151的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2892]实例151：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.60(s,1h),9.36(s,1h),8.94(s,1h),8.38(s,1h),7.14(t,j＝55.2hz,1h),7.07(s,1h),4.85(d,j＝11.1hz,1h),4.29(d,j＝11.1hz,1h),3.03(s,3h),2.75-2.80(m,1h),1.98(s,3h),0.37-0.52(m,4h)。lc-ms:m/z544[m+h]+。[2893]方法e5[2894][2895]实例152和153：由含有(s)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺和(r)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2896]步骤1：3-氯-5-异氰酸基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶[2897][2898]向5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；100mg，0.511mmol)于四氢呋喃(干)(4.5ml)中的溶液中加入三乙胺(0.178ml，1.278mmol)。冷却至0℃后，加入三光气(77mg，0.261mmol)。将所得悬浮液在70℃下搅拌1.5小时。将反应混合物冷却至室温并滤出白色沉淀。将滤饼用etoac(5ml)洗涤，并将滤液在减压下浓缩，以得到呈黄色固体的3-氯-5-异氰酸基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶(110mg)，其直接用于步骤9。[2899]步骤2：3-甲基-4-(吡咯烷-1-基)-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯-1-甲酸叔丁酯[2900][2901]在氮气气氛下，将3-甲基-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(方法k1步骤7；1.75g，6.55mmol)溶解在吡咯烷(17.5ml，213mmol)中，并将反应溶液冷却至0℃。在30分钟内通过注射器将1m氯化钛(iv)于dcm(3.27ml，3.27mmol)中的溶液逐滴加入到反应混合物中。前半部分ticl4的加入速度应使反应混合物在加入下一滴之前脱色。获得深红色混合物。使反应混合物温热至室温过夜。将反应混合物在冰水浴中冷却并用二乙醚(25ml)稀释。将该均匀混合物逐滴加入到冰冷的饱和水溶液中。nahco3溶液(150ml)，同时搅拌。用二乙醚(2x150ml)萃取所得混合物。将合并的有机物用水(2x150ml)和盐水(150ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤，在减压下浓缩，溶解在二乙醚中，转移到含有搅拌棒的100ml圆底烧瓶中，并使用油泵在45℃下在真空下浓缩2小时。由此得到呈黄色油状物的3-甲基-4-(吡咯烷-1-基)-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯-1-甲酸叔丁酯(1.97g)，其直接用于下一步骤。[2902]步骤3：4,7-二氯-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-1-甲酸叔丁酯[2903][2904]将3-甲基-4-(吡咯烷-1-基)-3-(三氟甲基)-2,3-二氢1h-吡咯-1-甲酸叔丁酯(1.97g，6.15mmol)于无水甲苯(35ml)中的溶液在冰水浴中冷却。立即加入3,6-二氯-1,2,4,5-四嗪(0.42g，2.78mmol)并将所得红色溶液在0℃下搅拌30分钟。在减压下去除溶剂，并将残留物与庚烷共蒸发三次以去除过量的四嗪，并通过快速柱色谱法(220g，0％-10％乙酸乙酯/庚烷)进行纯化。这提供了呈橙色油状物的4,7-二氯-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-1-甲酸叔丁酯(800mg，35％产率)，其静置后会凝固。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:4.64(d,j＝12.6hz,1h),3.77(d,j＝12.6hz,1h),1.74(s,3h),1.54(s,9h)；gc-ms:m/z271[m-boc]+。[2905]步骤4：4-氯-7-肼基-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-1-甲酸叔丁酯[2906][2907]将4,7-二氯-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-1-甲酸叔丁酯(240mg，0.645mmol)溶解在乙醇(96％，10ml)中，并加入一水合肼(0.491ml，6.45mmol)。将反应混合物加热至70℃持续两小时，然后冷却至环境温度过夜。通过过滤收集沉淀，以获得呈白色固体的4-氯-7-肼基-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-1-甲酸叔丁酯(170mg，0.462mmol，71.7％产率)。lc-ms:m/z368[m+h]+。[2908]步骤5：4-叠氮基-7-肼基-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-1-甲酸叔丁酯[2909][2910]在氮气气氛下，将叠氮化钠(0.457g，7.04mmol)加入到4-氯-7-肼基-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-1-甲酸叔丁酯(1.294g，3.52mmol)于dmf(35ml)中的溶液中。将所得混合物在80℃下搅拌过夜。在减压下浓缩反应混合物，溶解在dmso中并通过制备型hplc纯化。将纯级分合并并冷冻干燥，以得到4-叠氮基-7-肼基-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-1-甲酸叔丁酯(790mg，60％产率)。lc-ms:m/z375[m+h]+。[2911]步骤6：4-叠氮基-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪[2912][2913]向4-叠氮基-7-肼基-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-1-甲酸叔丁酯(374mg，0.999mmol)于乙醇(35ml)中的搅拌溶液中加入水(35ml)和五水合硫酸铜(ii)(1247mg，5.00mmol)。将混合物在70℃下搅拌30小时。将反应混合物冷却至室温并经硅藻土过滤。将滤饼用乙醇洗涤，并将滤液在减压下浓缩。通过色谱法纯化残留物，以获得4-叠氮基-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪(151mg，62％产率)。lc-ms:m/z245[m+h]+。[2914]步骤7：3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-4-胺[2915][2916]向4-叠氮基-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪(151mg，0.619mmol)于乙酸(10ml)中的溶液中加入10％钯/活性炭(57mg，0.054mmol)。将所得悬浮液用氢气吹扫，并在氢气气氛下在70℃下剧烈搅拌16小时。将反应混合物过滤，将过滤器用乙酸乙酯冲洗，并将滤液在减压下浓缩，与甲苯和乙酸乙酯一起共蒸发，以得到呈黄色固体的3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-4-胺(135mg，97％产率)。lc-ms:m/z219[m+h]+。[2917]步骤8：2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪[2918][2919]随后向3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪-4-胺(129mg，0.591mmol)于2-丙醇(30ml)中的溶液中加入溴丙酮(0.052ml，0.621mmol)和dipea(0.206ml，1.182mmol)。用隔膜盖住烧瓶并将反应混合物在50℃下搅拌6小时。将反应混合物在减压下浓缩，并将残留物通过快速柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪(61mg，39％产率)。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:7.97(s,1h),7.59(s,1h),4.07(d,j＝10.9hz,1h),3.89(bs,1h),3.54(d,j＝10.9hz,1h),2.46(s,3h),1.86(s,3h)；lc-ms:m/z257[m+h]+。[2920]步骤9：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺[2921][2922]向2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪(30mg，0.117mmol)于二氯甲烷(1.25ml)中的溶液中加入3-氯-5-异氰酸基-2-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶(40mg，0.154mmol)，并将混合物搅拌10分钟。加入三乙胺(0.016ml，0.117mmol)，并将混合物搅拌14小时。将反应混合物在减压下浓缩，溶解在dmso中，并通过色谱法进行纯化，以得到n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺(38mg)lc-ms:m/z478[m+h]+。[2923]步骤10：离对映异构体以获得(s)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺和(r)-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺[2924][2925]对n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺(38mg)进行手性sfc(色谱柱：chiralpakic，4.6x100mm，5μm；流动相a：co2，流动相b：iproh‑‑hplc；流速：2.5毫升/分钟；梯度：在5分钟内，30b到50％b；210-320nm；rt1:3.572；rt2:3.907)。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干以得到实例152(10.6mg，19％产率)，并将第二个洗脱异构体浓缩并冻干以得到实例153(9.3mg，16.6％产率)。实例152和153是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[2926]实例152：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:9.31(s,1h),8.59(d,j＝2.4hz,1h),8.44(d,j＝2.4hz,1h),7.95(s,2h),7.78(s,1h),6.81(s,1h),4.56(d,j＝10.1hz,1h),4.04(d,j＝10.1hz,1h),2.52(s,3h),),2.01(s,3h)。lc-ms:m/z478[m+h]+。[2927]实例153：1hnmr(400mhz,cdcl3)δ:9.30(s,1h),8.59(d,j＝2.4hz,1h),8.44(d,j＝2.4hz,1h),7.95(s,2h),7.78(s,1h),6.80(s,1h),4.56(d,j＝10.1hz,1h),4.02(d,j＝10.1hz,1h),2.52(s,3h),),2.01(s,3h)。lc-ms:m/z478[m+h]+。[2928]方法f5[2929][2930]实例154：(r)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)-3-甲基哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2931]步骤1：(6-(二氟甲基)-3-甲基哒嗪-4-基)氨基甲酸叔丁酯[2932][2933]向(3-氯-6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)氨基甲酸叔丁酯(方法x4步骤2；520mg，1.9mmol)于二噁烷(16ml)和h2o(4ml)中的搅拌溶液中加入2,4,6-三甲基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三硼烷(26.9mg，214.5μmol)、pd(dppf)cl2(8.8mg，10.7μmol)和cs2co3(104.9mg，321.8μmol)。将混合物在氮气气氛下在100℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至25℃，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(6-(二氟甲基)-3-甲基哒嗪-4-基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，62％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.38(br,1h),8.26(s,1h),7.17(t,j＝54.0hz,1h),2.68(s,3h),1.54(s,9h)。lc-ms:m/z260[m+h]+。[2934]步骤2：6-(二氟甲基)3-甲基哒嗪-4-胺[2935][2936]向(6-(二氟甲基)-3-甲基哒嗪-4-基)氨基甲酸叔丁酯(270mg，1.0mmol)于二氯甲烷(9ml)中的搅拌溶液中加入tfa(3ml)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时，并在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(40ml)稀释。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈灰白色固体的6-(二氟甲基)3-甲基哒嗪-4-胺(130mg，78.8％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:6.92(t,j＝54.8hz,1h),6.81(s,1h),6.58(br,2h),2.42(s,3h)。lc-ms:m/z160[m+h]+。[2937]步骤3：(r)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)-3-甲基哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2938][2939]向6-(二氟甲基)-3-甲基哒嗪-4-胺(40mg，251.4μmol)于四氢呋喃(8ml)中的搅拌溶液中加入碳酸双(三氯甲基)酯(44.8mg，150.8μmol)和tea(38.2mg，377.0μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(55.6mg，201.1μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(254.4mg，2.5mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(61.4mg，502.7μmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将溶剂在真空下浓缩。将残留物通过使用96％二氯甲烷和4％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到90mg粗产物，将所述粗产物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)-3-甲基哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(25.6mg，21.8％产率)。实例154的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[2940]实例154：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.32(s,1h),8.88(br,1h),8.24(s,1h),7.24(t,j＝54.1hz,1h),7.09(s,1h),4.96(d,j＝11.7hz,1h),4.39(d,j＝11.7hz,1h),2.76(s,3h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z462[m+h]+。[2941]方法g5[2942][2943]实例155和156：由含有(s)-2-(2,2-二氟乙基)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-(2,2-二氟乙基)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2944]步骤1：2-溴-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[2945][2946]向(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(方法k1步骤8；7g，21.7mmol)于甲苯(100ml)中的搅拌溶液中加入3-溴-1h-吡唑-5-胺(3.5g，21.7mmol)和乙酸(10ml)。将混合物在95℃下搅拌16小时。将反应混合物冷却至25℃，并在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(100ml)稀释。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-溴-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(2.6g，28％产率)。lc-ms:m/z421[m+h]+。[2947]步骤2：(6-(叔丁氧基羰基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-2-基)硼酸[2948][2949]在氮气气氛下，向2-溴-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(2.6g，6.2mmol)和4,4,5,5-四甲基-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂戊硼烷-2-基)-1,3,2-二氧硼烷(1.9g，7.4mmol)于二噁烷(100ml)中的搅拌溶液中加入pd(dppf)cl2(903mg，1.2mmol)和乙酸钾(1.8g，18.5mmol)。将混合物在100℃下搅拌16小时。将混合物冷却至25℃。将所得混合物用乙酸乙酯(200ml)稀释。将所得混合物过滤。将滤饼用乙酸乙酯(3x200ml)洗涤。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(6-(叔丁氧基羰基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-2-基)硼酸(2g，67.1％产率)。lc-ms:m/z387[m+h]+。[2950]步骤3：2-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[2951][2952]向(6-(叔丁氧基羰基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-2-基)硼酸(1g，2.6mmol)于二噁烷(20ml)和水(4ml)中的搅拌溶液中加入钯、[1,3-双[2,6-双(1-丙基丁基)苯基]-4,5-二氯-1,3-二氢-2h-咪唑-2-亚基]二氯(3-氯吡啶-κn)-、(sp-4-1)-(239mg，258.9μmol)、1,1-二氟-2-碘乙烷(5g，26.0mmol)和磷酸三钾(1.1g，5.2mmol)。将反应混合物在氮气气氛下在90℃下搅拌16小时。将反应冷却至25℃，并在真空下浓缩。将残留物用水(100ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(400mg，28.9％产率)。lc-ms:m/z407[m+h]+。[2953]步骤4：2-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[2954][2955]向2-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(400mg，984.3μmol)于二氯甲烷(25ml)中混合物中加入tfa(5ml)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(20ml)稀释，并用二氯甲烷(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈棕色固体的2-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(230mg，63.3％产率)。lc-ms:m/z307[m+h]+。[2956]步骤5：2-(2,2-二氟乙基)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2957][2958]向2-(2,2-二氟乙基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(200mg，653.1μmol)和6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(方法q2步骤8；114mg，653.1μmol)于二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中加入dppa(191mg，783.7μmol)和tea(331mg，3.3mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌2小时。冷却至25℃后，将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到粗产物，对所述粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的2-(2,2-二氟乙基)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(60mg，19.1％产率)。lc-ms:m/z478[m+h]+。[2959]步骤6：分离对映异构体以获得(s)-2-(2,2-二氟乙基)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-(2,2-二氟乙基)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2960][2961]对2-(2,2-二氟乙基)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(55mg，117.5μmol)进行手性hplc：色谱柱：lux5umcellulose-2，2.12x25cm，5μm；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在19分钟内，50b到50b；220/254nm；rt1:8.682；rt2:17.225；注射体积：3ml；运行次数：3。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干以得到呈灰白色固体的实例155(17.5mg，7.42％产率)，并将第二个洗脱异构体浓缩并冻干以得到呈灰白色固体的实例156(15.5mg，6％产率)。实例155和156是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[2962]实例155：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.90(br,1h),9.51(d,j＝2.4hz,1h),9.29(s,1h),8.21(d,j＝2.4hz,1h),7.24(t,j＝54.4hz,1h),6.86(s,1h)，6.44(t,j＝56.0hz,1h),4.86(d,j＝11.2hz,1h),4.30(d,j＝11.2hz,1h),3.51-3.41(m,2h),2.01(s,3h)。lc-ms:m/z478[m+h]+。[2963]实例156：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.91(br,1h),9.52(d,j＝2.8hz,1h),9.29(s,1h),8.22(d,j＝2.4hz,1h),7.24(t,j＝54.4hz,1h),6.86(s,1h)，6.44(t,j＝56.0hz,1h),4.86(d,j＝11.2hz,1h),4.31(d,j＝11.6hz,1h),3.51-3.41(m,2h),2.01(s,3h)。lc-ms:m/z478[m+h]+。[2964]方法h5[2965][2966]实例157和158：由含有(s)-3-氨基-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-3-氨基-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2967]步骤1：n-(3-乙基-1h-吡唑-5-基)乙酰胺[2968][2969]在25℃下，向3-乙基-1h-吡唑-5-胺(10.0g，90.0mmol)于水(100ml)中的搅拌溶液中缓慢加入nahco3(22.7g，270.2mmol)和乙酸酐(18.3g，179.4mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌2小时。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。收集固体，以得到呈白色固体的n-(3-乙基-1h-吡唑-5-基)乙酰胺(5.3g，38％产率)。lc-ms:m/z154[m+h]+。[2970]步骤2：n-(3-乙基-4-硝基-1h-吡唑-5-基)乙酰胺[2971][2972]0℃下，向n-(3-乙基-1h-吡唑-5-基)乙酰胺(7.37g，48.1mmol)于浓硫酸(17ml)中的搅拌溶液中逐滴加入发烟硝酸(3.03g，48.1mmol)。将混合物在25℃下搅拌30分钟。将所得混合物用冰水(50ml)稀释。通过过滤收集沉淀的固体，并将滤饼用水(2x20ml)洗涤。这导致呈白色固体的n-(3-乙基-4-硝基-1h-吡唑-5-基)乙酰胺(5.4g，56％产率)。lc-ms:m/z199[m+h]+。[2973]步骤3：3-乙基-4-硝基-1h-吡唑-5-胺[2974][2975]将n-(3-乙基-4-硝基-1h-吡唑-5-基)乙酰胺(5.40g，27.2mmol)溶解在水(10ml)和浓hcl(10ml)中。将混合物在100℃下搅拌1小时。冷却至25℃后，浓缩反应混合物。将残留物用叔丁基甲基醚(100ml)稀释。通过过滤收集沉淀的固体，并将滤饼用叔丁基甲基醚(2x50ml)洗涤。这导致呈黄色固体的3-乙基-4-硝基-1h-吡唑-5-胺(3.8g，89％产率)。lc-ms:m/z157[m+h]+。[2976]步骤4：2-乙基-8-甲基-3-硝基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[2977][2978]向3-乙基-4-硝基-1h-吡唑-5-胺(500mg，3.2mmol)和(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(方法k1步骤8；1.03g，3.2mmol)于甲苯(20ml)中的搅拌溶液中加入乙酸(2ml)。将混合物在95℃下搅拌16小时。冷却至25℃后，将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的2-乙基-8-甲基-3-硝基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(240mg，18％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.39(s,1h),4.38(d,j＝12.0hz,1h),4.06(d,j＝12.0hz,1h),3.16(q,j＝7.6hz,2h),1.93(s,3h),1.54(s,9h),1.30(t,j＝8.0hz,3h)。lc-ms:m/z416[m+h]+。[2979]步骤5：2-乙基-8-甲基-3-硝基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[2980][2981]在0℃下，向2-乙基-8-甲基-3-硝基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(220mg，534.2μmol)于二氯甲烷(5ml)中的搅拌溶液中加入tfa(1ml)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(40ml)稀释。用二氯甲烷(3x30ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的2-乙基-8-甲基-3-硝基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(160mg，95％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.62(s,1h),6.45(br,1h),3.94-3.99(m,1h),3.60-3.69(m,1h),3.09(q,j＝7.6hz,2h),1.83(s,3h),1.28(t,j＝7.2hz,3h)。lc-ms:m/z316[m+h]+。[2982]步骤6：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-乙基-8-甲基-3-硝基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2983][2984]在0℃下，向5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；100mg，511.1μmol)于四氢呋喃(30ml)中的搅拌溶液中加入三光气(91mg，307.4μmol)和tea(77mg，762.3μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到2-乙基-8-甲基-3-硝基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(160mg，511.1μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(517mg，5.1mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(124mg，1.0mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将混合物用水(10ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc进行纯化，并将收集的级分在真空下浓缩，以得到呈黄色固体的n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-乙基-8-甲基-3-硝基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(180mg，65％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.78(s,1h),9.60(s,1h),8.74(d,j＝2.4hz,1h),8.51(d,j＝2.4hz,1h),8.16(s,2h),4.91(d,j＝11.6hz,1h),4.34(d,j＝11.6hz,1h),3.16(q,j＝7.6hz,2h),2.01(s,3h),1.32(t,j＝7.6hz,3h)。lc-ms:m/z537[m+h]+。[2985]步骤7：3-氨基-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2986][2987]向n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-乙基-8-甲基-3-硝基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(80mg，149.0μmol)于二氯甲烷(2ml)和甲醇(2ml)中的搅拌溶液中加入饱和nh4cl水溶液(2ml)和fe(83mg，1.5mmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(30ml)淬灭。然后用乙酸乙酯(3x30ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，并经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈黄色固体的3-氨基-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(44mg，57％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.47(br,1h),8.94(s,1h),8.72(d,j＝2.1hz,1h),8.50(d,j＝2.1hz,1h),8.15(s,2h),4.74(d,j＝11.4hz,1h),4.11-4.43(m,3h),2.72(q,j＝7.6hz,2h),1.95(s,3h),1.21(t,j＝7.6hz,3h)。lc-ms:m/z507[m+h]+。[2988]步骤8：分离对映异构体以获得(s)-3-氨基-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-3-氨基-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[2989][2990]对3-氨基-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(38mg，74.9μmol)进行手性hplc：色谱柱：chiralartcellulose-sb，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在18分钟内，50b到50b；254/220nm；rt1:11.603；rt2:15.848；注射体积：1ml；运行次数：9；将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例157(10.8mg，28％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例158(9.9mg，25％产率)。实例157和158是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[2991]实例157：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.47(br,1h),8.94(s,1h),8.72(d,j＝2.1hz,1h),8.50(d,j＝2.1hz,1h),8.15(s,2h),4.74(d,j＝11.4hz,1h),4.11-4.43(m,3h),2.72(q,j＝7.6hz,2h),1.96(s,3h),1.21(t,j＝7.6hz,3h)。lc-ms:m/z507[m+h]+。[2992]实例158：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.58(s,1h),8.97(s,1h),8.75(d,j＝2.1hz,1h),8.52(d,j＝2.1hz,1h),8.17(s,2h),4.77(d,j＝11.7hz,1h),4.23-4.38(m,3h),2.74(q,j＝7.6hz,2h),1.98(s,3h),1.24(t,j＝7.6hz,3h)。lc-ms:m/z507[m+h]+。[2993]方法i5[2994][2995]实例159和160：由含有(s)-3-氨基-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-3-氨基-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[2996]步骤1：n-(3-甲基-1h-吡唑-5-基)乙酰胺二甲基-3-硝基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(52mg，48％产率)。lc-ms:m/z523[m+h]+。[3014]步骤7：3-氨基-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3015][3016]在氮气下，向n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-3-硝基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(46mg，87.98μmol)于甲醇(25ml)和二氯甲烷(25ml)中的搅拌溶液中加入饱和nh4cl水溶液(25ml)和fe(49mg，879.8μmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。用二氯甲烷(3x30ml)萃取反应混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并浓缩。将残留物通过制备型hplc进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈黄色固体的3-氨基-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(28.6mg，66％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.58(br,1h),8.98(s,1h),8.74(d,j＝2.4hz,1h),8.52(d,j＝2.1hz,1h),8.18(s,2h),4.77(d,j＝11.7hz,1h),4.30(br,2h),4.25(d,j＝11.7hz,1h),2.35(s,3h),1.97(s,3h)。lc-ms:m/z493[m+h]+。[3017]步骤8：分离对映异构体以获得(s)-3-氨基-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-3-氨基-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3018][3019]对25mg3-氨基-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,8-二甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺进行手性hplc：chiralartcellulose-sb，2x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在21分钟内，50b到50b；220/254nm；rt1:14.363；rt2:19.752；注射体积：0.7ml；运行次数：10。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈黄色固体的实例159(3.1mg，12％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈黄色固体的实例160(3.5mg，14％产率)。实例159和160是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[3020]实例159：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.57(br,1h),8.96(s,1h),8.74(d,j＝2.3hz,1h),8.51(d,j＝2.3hz,1h),8.17(s,2h),4.76(d,j＝11.5hz,1h),4.30(br,2h),4.24(d,j＝11.5hz,1h),2.34(s,3h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z493[m+h]+。[3021]实例160：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.57(br,1h),8.96(s,1h),8.73(d,j＝2.3hz,1h),8.51(d,j＝2.3hz,1h),8.17(s,2h),4.76(d,j＝11.5hz,1h),4.30(br,2h),4.24(d,j＝11.5hz,1h),2.34(s,3h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z493[m+h]+。[3022]方法j5[3023][3024]实例161：(r)-n-(6-(二氟甲基)-3-甲基哒嗪-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3025]步骤1：(r)-n-(6-(二氟甲基)-3-甲基哒嗪-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3026]向6-(二氟甲基)-3-甲基哒嗪-4-胺(方法f5步骤2；40mg，251.4μmol)于四氢呋喃(8ml)中的搅拌溶液中加入三光气(45mg，150.8μmol)和tea(38mg，377μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到(r)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(方法k3异构体2；52mg，200μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(255mg，2.5mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(61mg，502.7μmol)。将混合物在40℃下搅拌1.5小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用96％二氯甲烷和4％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到90mg粗产物，将所述粗产物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-n-(6-(二氟甲基)-3-甲基哒嗪-4-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(29.2mg，33％产率)。实例161的对映异构体可以使用方法k3异构体1类似地制备。[3027]实例161：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.31(s,1h),8.87(br,1h),8.25(s,1h),7.30(t,j＝54.3hz,1h),6.71(d,j＝5.1hz,1h),4.96(d,j＝11.4hz,1h),4.38(d,j＝11.4hz,1h),2.78(s,3h),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z446[m+h]+。[3028]方法k5[3029][3030]实例162：(r)-n-(5-(二氟甲基)-6-(1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1h-吡唑-3-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3031]步骤1：1-(3-溴-1h-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇[3032][3033]向3-溴-1h-吡唑(10.0g，68.0mmol)于乙腈(100ml)中的搅拌混合物中加入碳酸铯(44.3g，136.1mmol)和2,2-二甲基环氧乙烷(24.5g，340.2mmol)。将混合物在80℃下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用水(100ml)稀释。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用95％石油醚和5％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的1-(3-溴-1h-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(18.5g，37％产率)。lc-ms:m/z219[m+h]+。[3034]步骤2：(1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1h-吡唑-3-基)硼酸[3035][3036]在氮气气氛下，向1-(3-溴-1h-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(8.0g，36.5mmol)于二噁烷(80ml)中的搅拌混合物中加入4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-双(1,3,2-二氧硼烷)(11.1g，43.8mmol)、乙酸钾(10.8g，109.6mmol)和pd(dppf)cl2(5.3g，7.3mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc进行纯化，并将收集的级分浓缩，以得到呈无色油状物的(1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1h-吡唑-3-基)硼酸(8.5g，38％产率)。lc-ms:m/z185[m+h]+。[3037]步骤3：2-溴-5-氯烟醛[3038][3039]在氮气气氛下在-40℃下，向2,3-二溴-5-氯吡啶(10.0g，36.9mmol)于四氢呋喃(50ml)中的搅拌溶液中逐滴加入异丙基镁(ii)氯化锂(31.2ml，40.6mmol，1.3m，于四氢呋喃中)。将反应混合物在-40℃下搅拌1小时。在-40℃下逐滴加入n,n-二甲基甲酰胺(20ml)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物用hcl(50ml，1m)淬灭。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的2-溴-5-氯烟醛(5.4g，66％产率)。lc-ms:m/z220[m+h]+。[3040]步骤4：2-溴-5-氯-3-(二氟甲基)吡啶[3041][3042]在0℃下，向2-溴-5-氯烟醛(5.4g，25.0mmol)于二氯甲烷(100ml)中的搅拌溶液中逐滴加入dast(12.1g，74.9mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭。用二氯甲烷(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-溴-5-氯-3-(二氟甲基)吡啶(1.3g，21％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.68-8.70(m,1h),8.26(d,j＝2.4hz,1h),7.15(t,j＝53.4hz,1h)。lc-ms:m/z242[m+h]+。[3043]步骤5：1-(3-(5-氯-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-1h-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇[3044][3045]在氮气气氛下，向2-溴-5-氯-3-(二氟甲基)吡啶(1.2g，5.0mmol)于二噁烷(30ml)和水(20ml)中的搅拌混合物中加入(1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1h-吡唑-3-基)硼酸(9.1g，49.5mmol)、碳酸铯(4.0g，12.4mmol)和pd(pph3)4(362.2mg，495.0μmol)。将反应混合物在110℃下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的1-(3-(5-氯-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-1h-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(1.8g，47％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.82-8.83(m,1h),8.22(d,j＝2.4hz,1h),7.94(t,j＝54.8hz,1h),7.81(d,j＝2.4hz,1h),6.89(d,j＝2.4hz,1h),4.75(s,1h),4.12(s,2h),1.12(s,6h)。lc-ms:m/z302[m+h]+。[3046]步骤6：1-(3-(3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)-1h-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇[3047][3048]在氮气气氛下，向1-(3-(5-氯-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-1h-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(1.8g，2.3mmol)于二噁烷(20ml)中的搅拌混合物中加入二苯基甲亚胺(846mg，4.7mmol)、pd2(dba)3(427mg，466.7μmol)和xantphos(270mg，466.7μmol)。将反应混合物在110℃下搅拌16小时。将反应混合物在减压下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的1-(3-(3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)-1h-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(2.0g，92％产率)。lc-ms:m/z447[m+h]+。[3049]步骤7：1-(3-(5-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-1h-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇[3050][3051]向1-(3-(3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)-1h-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(2.0g，2.2mmol)于二氯甲烷(15ml)中的搅拌混合物中加入tfa(5ml)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(50ml)稀释。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％二氯甲烷和20％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的1-(3-(5-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-1h-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(470mg，69％产率)。lc-ms:m/z283[m+h]+。[3052]步骤8：6-(1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-甲基丙基)-1h-吡唑-3-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-胺[3053][3054]向1-(3-(5-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-1h-吡唑-1-基)-2-甲基丙-2-醇(500mg，1.8mmol)于二氯甲烷(5ml)中的搅拌混合物中加入tea(538mg，5.3mmol)和二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸叔丁酯(936mg，3.5mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在减压下浓缩。将残留物用水(10ml)稀释。用乙酸乙酯(2x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用40％石油醚和60％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的6-(1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-甲基丙基)-1h-吡唑-3-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-胺(330mg，42％产率)。lc-ms:m/z397[m+h]+。[3055]步骤9：(r)-n-(6-(1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-甲基丙基)-1h-吡唑-3-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3056][3057]向6-(1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-甲基丙基)-1h-吡唑-3-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-胺(70mg，176.5μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌溶液中加入三光气(21mg，70.6μmol)和tea(17.9mg，176.5μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到(r)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(方法k3异构体2；31mg，117.7μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入tea(119mg，1.2mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(22mg，176.5μmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(10ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(r)-n-(6-(1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-甲基丙基)-1h-吡唑-3-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(44mg，21％产率)。lc-ms:m/z683[m+h]+。[3058]步骤10：(r)-n-(5-(二氟甲基)-6-(1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1h-吡唑-3-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3059][3060]向(r)-n-(6-(1-(2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)-2-甲基丙基)-1h-吡唑-3-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(44mg，64.5μmol)于二氯甲烷(2ml)中的搅拌溶液中加入2,2,2-三氟乙酸(2ml)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物在减压下浓缩。将残留物7.16(m,2h),6.80-6.85(m,2h),5.23(d,j＝6.4hz,1h),3.90-4.20(m,1h),3.70(s,3h),3.37-3.45(m,4h),2.65-2.71(m,2h)。lc-ms:m/z194[m+h]+。[3068]步骤2：5-氯-1-(1-(4-甲氧基苄基)氮杂环丁烷-3-基)-3-硝基-1h-吡唑[3069][3070]向5-氯-3-硝基-1h-吡唑(1.0g，6.8mmol)于四氢呋喃(100ml)中的搅拌溶液中加入1-(4-甲氧基苄基)氮杂环丁烷-3-醇(2.0g，10.1mmol)、偶氮二甲酸二苄酯(3.1g，13.5mmol)和三苯膦(3.6g，13.6mmol)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-氯-1-(1-(4-甲氧基苄基)氮杂环丁烷-3-基)-3-硝基-1h-吡唑(1g，60％产率)。lc-ms:m/z323[m+h]+。[3071]步骤3：1-(氮杂环丁烷-3-基)-5-氯-3-硝基-1h-吡唑[3072][3073]将5-氯-1-(1-(4-甲氧基苄基)氮杂环丁烷-3-基)-3-硝基-1h-吡唑(1.0g，3.1mmol)于三氟乙酸酐(20ml)中的混合物在25℃下搅拌16小时。浓缩混合物，并将残留物稀释在二甲亚砜(8ml)和水(4ml)中。向该混合物中加入k2co3(1.71g，12.4mmol)。将混合物在80℃下搅拌5小时。冷却至25℃后，将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩，以得到呈黄色固体的1-(氮杂环丁烷-3-基)-5-氯-3-硝基-1h-吡唑(620mg，粗品)，其为无需进一步纯化直接使用。lc-ms:m/z203[m+h]+。[3074]步骤4：3-(5-氯-3-硝基-1h-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯[3075][3076]向1-(氮杂环丁烷-3-基)-5-氯-3-硝基-1h-吡唑(200mg，987.1μmol)于四氢呋喃(10ml)中的搅拌溶液中加入(boc)2o(323mg，1.5mmol)和tea(300mg，3.0mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用85％石油醚和15％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的3-(5-氯-3-硝基-1h-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(120mg，40％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:7.44(s,1h),5.39-5.59(m,1h),4.36-4.38(m,2h),4.10-4.23(m,2h),1.42(s,9h)。lc-ms:m/z303[m+h]+。[3077]步骤5：3-(3-氨基-5-氯-1h-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯[3078][3079]向3-(5-氯-3-硝基-1h-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(150mg，495.5μmol)于四氢呋喃(4ml)中的搅拌混合物中加入乙醇(1ml)、水(1ml)、nh4cl(398mg，7.4mmol)和zn(324mg，5.0mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将固体滤出。将滤液浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的3-(3-氨基-5-氯-1h-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(100mg，74％产率)。lc-ms:m/z273[m+h]+。[3080]步骤6：(r)-3-(5-氯-3-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-1h-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯[3081][3082]向方法m1异构体2(40mg，144.6μmol)于四氢呋喃(2ml)中的混合物中加入三光气(26mg，86.8μmol)和tea(22mg，216.9μmol)。将混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到3-(3-氨基-5-氯-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(79mg，289.2μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(146mg，1.5mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(35mg，289.1μmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(r)-3-(5-氯-3-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-1h-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(40mg，48％产率)。lc-ms:m/z575[m+h]+。[3083]步骤7：(r)-n-(1-(氮杂环丁烷-3-基)-5-氯-1h-吡唑-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3084][3085]向(r)-3-(5-氯-3-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-1h-吡唑-1-基)氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯(40mg，69.5μmol)于二氯甲烷(4ml)中的搅拌溶液中加入tfa(2ml)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物浓缩，以得到呈黄色固体的(r)-n-(1-(氮杂环丁烷-3-基)-5-氯-1h-吡唑-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(40mg，粗品)，其无需进一步纯化即可直接使用。lc-ms:m/z475[m+h]+。[3086]步骤8：(r)-2-氯-n-(5-氯-1-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-1h-吡唑-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3087][3088]向(r)-n-(1-(氮杂环丁烷-3-基)-5-氯-1h-吡唑-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(50mg，105.2μmol)于二氯甲烷(2ml)和甲醇(2ml)中的搅拌混合物中加入甲醛(34mg，420.8μmol，37％，于水中)和三乙酰氧基硼氢化钠(89mg，420.8μmol)。将混合物在25℃下搅拌8小时。将反应混合物在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-1-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-1h-吡唑-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(15.0mg，29％产率)。实例163的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3089]实例163：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:10.01(s,1h),9.30(s,1h),7.04(s,1h),6.56(s,1h),4.94-5.05(m,1h),4.89(d,j＝11.6hz,1h),4.18(d,j＝11.6hz,1h),3.74-3.84(m,2h),3.38-3.47(m,2h),2.35(s,3h),1.94(s,3h)。lc-ms:m/z489[m+h]+。[3090]方法m5[3091][3092]实例164：(r)-2-氯-8-甲基-n-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3093]步骤1：(r)-2-氯-8-甲基-n-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3094][3095]向1-甲基-1h-吡唑-4-胺(21mg，217.4μmol)于四氢呋喃(6ml)中的搅拌溶液中加入三光气(20mg，65.2μmol)和tea(17mg，168.3μmol)。将所得混合物在28℃下搅拌0.5[3096]小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(30mg，108.7μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(27mg，217.4μmol)和tea(110mg，1.1mmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。使混合物冷却至25℃。将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到粗产物。对粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的(r)-2-氯-8-甲基-n-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(17.6mg，28％产率)。实例164的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3097]实例164：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.35(s,1h),9.13(br,1h),7.81(d,j＝0.8hz,1h),7.45(d,j＝0.8hz,1h),7.03(s,1h),4.67(d,j＝11.2hz,1h),4.16(d,j＝11.6hz,1h),3.81(s,3h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z400[m+h]+。[3098]方法n5[3099][3100]实例165和166：由含有(r)-2-氯-n-((r)-3,3-二氟环戊基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-((s)-3,3-二氟环戊基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[3101]步骤1：(8r)-2-氯-n-(3,3-二氟环戊基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3102][3103]向方法m1异构体2(40mg，144.6μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入三光气(26mg，86.8μmol)和tea(22mg，216.9μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到3,3-二氟环戊烷-1-胺盐酸盐(23mg，144.6μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(35mg，289.2μmol)和tea(146mg，1.5mmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(8r)-2-氯-n-(3,3-二氟环戊基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(28mg，46％产率)。lc-ms:m/z424[m+h]+。[3104]步骤2：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-n-((r)-3,3-二氟环戊基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-((s)-3,3-二氟环戊基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3105][3106]对(8r)-2-氯-n-(3,3-二氟环戊基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(28mg，66μmol)进行手性hplc纯化：色谱柱：chiralartcellulose-sb，2*25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在15分钟内，8b到8b；220/254nm；rt1:10.681；rt2:12.396；注射体积：0.5ml；运行次数：3；将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例165(6mg，10％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例166(3mg，5％产率)。实例165和166的对应的立体异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。实施例165和166是非对映异构体，其中与三氟甲基连接的立体中心是绝对的并且环戊基立体中心是相对的(即，实例165和166中的一个中的环戊基立体中心是(s)，实例165和166中的另一个中的环戊基立体中心是(r))。[3107]实例165：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.29(s,1h),7.20(d,j＝6.8hz,1h),7.01(s,1h),4.56(d,j＝11.6hz,1h),4.18-4.27(m,1h),4.00(d,j＝11.6hz,1h),2.43-2.52(m,1h),1.99-2.32(m,4h),1.92(s,3h),1.78-1.85(m,1h)。lc-ms:m/z424[m+h]+。[3108]实例166：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.29(s,1h),7.20(d,j＝6.8hz,1h),7.01(s,1h),4.56(d,j＝11.6hz,1h),4.20-4.25(m,1h),4.00(d,j＝11.6hz,1h),2.44-2.51(m,1h),1.98-2.32(m,4h),1.93(s,3h),1.78-1.86(m,1h)。lc-ms:m/z424[m+h]+。[3109]方法o5[3110][3111]实例167：(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-甲基吗啉-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3112]步骤1：2-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)-4-甲基吗啉-2-醇[3113][3114]在氮气气氛下在0℃下，向2,5-二溴-3-氯吡啶(18.8g，69.3mmol)于四氢呋喃(400ml)中的搅拌溶液中加入异丙基氯化镁(35ml，69.3mmol，2m，于四氢呋喃中)。将反应混合物在0℃下搅拌0.5小时，然后在0℃下逐滴加入4-甲基吗啉-2-酮(8g，69.3mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用饱和nh4cl水溶液(200ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x200ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)-4-甲基吗啉-2-醇(12g，50％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.45(d,j＝2.1hz,1h),8.05(d,j＝2.1hz,1h),6.84(br,1h),3.97-4.12(m,2h),2.60-2.79(m,2h),2.12-2.28(m,2h),2.19(s,3h)。lc-ms:m/z307[m+h]+。[3115]步骤2：1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)-2-((2-羟乙基)(甲基)氨基)乙-1-醇[3116][3117]在0℃下，向2-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)-4-甲基吗啉-2-醇(6g，19.5mmol)于乙醇(100ml)和水(40ml)中的搅拌溶液中加入nabh4(2.9g，78mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌3小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用水(100ml)稀释。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)-2-((2-羟乙基)(甲基)氨基)乙-1-醇(5g，83％产率)。lc-ms:m/z309[m+h]+。[3118]步骤3：2-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)-4-甲基吗啉[3119][3120]将1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)-2-((2-羟乙基)(甲基)氨基)乙-1-醇(4g，12.9mmol)于浓硫酸(40ml)中的溶液在90℃下搅拌24小时。将反应混合物冷却至25℃。将反应溶液倒入冰水(200ml)中，用naoh水溶液(4m)将ph调整到6-7，并用乙酸乙酯(3x200ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)-4-甲基吗啉(2g，52％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.26(d,j＝2.0hz,1h),7.79(d,j＝2.0hz,1h),4.60-4.62(m,1h),4.03-4.07(m,1h),3.82-3.88(m,1h),2.92(d,j＝11.6hz,1h),2.78(d,j＝11.6hz,1h),2.37(s,3h),2.21-2.32(m,1h),1.99-2.05(m,1h)。lc-ms:m/z291[m+h]+。[3121]步骤4：n-(5-氯-6-(4-甲基吗啉-2-基)吡啶-3-基)-1,1-二苯基甲亚胺[3122][3123]向2-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)-4-甲基吗啉(1g，3.4mmol)于二噁烷(20ml)中的搅拌溶液中加入二苯基甲亚胺(621mg，3.4mmol)、xantphos(396mg，685μmol)、pd2(dba)3chcl3(355mg，343μmol)和cs2co3(2.2g，6.8mmol)。将反应混合物在氮气下在85℃下搅拌2小时。将混合物冷却至25℃。将所得混合物过滤。将滤饼用乙酸乙酯(3x20ml)洗涤。在减压下浓缩滤液。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的n-(5-氯-6-(4-甲基吗啉-2-基)吡啶-3-基)-1,1-二苯基甲亚胺(1g，66％产率)。lc-ms:m/z392[m+h]+。[3124]步骤5：5-氯-6-(4-甲基吗啉-2-基)吡啶-3-胺[3125][3126]将n-(5-氯-6-(4-甲基吗啉-2-基)吡啶-3-基)-1,1-二苯基甲亚胺(400mg，1.0mmol)于tfa(20ml)中的溶液在25℃下搅拌6小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用水(20ml)稀释，并用饱和nahco3水溶液将ph调整到6-7。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈棕色油状物的5-氯-6-(4-甲基吗啉-2-基)吡啶-3-胺(100mg，30％产率)。lc-ms:m/z228[m+h]+。[3127]步骤6：(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-甲基吗啉-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3128][3129]在25℃下，向5-氯-6-(4-甲基吗啉-2-基)吡啶-3-胺(82mg，360μmol)于四氢呋喃(8ml)中的搅拌溶液中加入三光气(32mg，108μmol)和tea(36mg，360μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(50mg，180μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(44mg，360μmol)和tea(182mg，1.8mmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(50ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(8r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-甲基吗啉-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(12mg，12％产率)。实例167的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3130]实例167：1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:9.33(s,1h),8.34(s,1h),8.00(d,j＝2.0hz,1h),6.80(s,1h),4.77(d,j＝11.7hz,1h),4.62-4.65(m,1h),4.22(d,j＝11.7hz,1h),4.05-4.09(m,1h),3.79-3.87(m,1h),3.02(d,j＝11.7hz,1h),2.81(d,j＝11.7hz,1h),2.37(s,3h),2.25-2.33(m,1h),2.03-2.06(m,1h),2.05(s,3h)。lc-ms:m/z530[m+h]+。[3131]方法p5[3132][3133]实例168：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(1-羟基环丁基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3134]步骤1：1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)环丁-1-醇[3135][3136]在-78℃下，向2,5-二溴-3-氯吡啶(10.00g，36.8mmol)于四氢呋喃(60ml)中的搅拌溶液中逐滴加入n-buli(17.7ml，44.2mmol，2.5m，于己烷中)。将反应混合物在-78℃下搅拌1小时，然后在-78℃下将环丁酮(2.58g，36.8mmol)加入混合物中。将反应混合物在-78℃下搅拌3小时。将反应混合物通过盐水(200ml)淬灭并用乙酸乙酯(3x200ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)环丁-1-醇(1g，10％产率)。lc-ms:m/z262[m+h]+。[3137]步骤2：1-(3-氯-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)环丁-1-醇[3138][3139]向1-(5-溴-3-氯吡啶-2-基)环丁-1-醇(500mg，1.9mmol)和二苯基甲亚胺(345mg，1.9mmol)于二噁烷(3ml)中的搅拌溶液中加入pd2(dba)3(394mg，380.9μmol)、xantphos(330mg，571.3μmol)和cs2co3(1.86g，5.7mmol)。将所得混合物在氮气气氛下在110℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物用水(50ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的1-(3-氯-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)环丁-1-醇(375mg，86％产率)。lc-ms:m/z363[m+h]+。[3140]步骤3：1-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)环丁-1-醇[3141][3142]向1-(3-氯-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)环丁-1-醇(400mg，1.1mmol)于甲醇(10ml)中的搅拌溶液中加入盐酸羟胺(153mg，2.2mmol)和乙酸钠(375mg，2.7mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的1-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)环丁-1-醇(200mg，91％产率)。lc-ms:m/z199[m+h]+。[3143]步骤4：6-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丁基)-5-氯吡啶-3-胺[3144][3145]在氮气气氛下在0℃下，向1-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)环丁-1-醇(100mg，503.4μmol)于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中的搅拌溶液中加入咪唑(51mg，755.1μmol)和tbscl(91mg，604.1μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物用水(80ml)淬灭。用乙酸乙酯(2x80ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的6-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丁基)-5-氯吡啶-3-胺(150mg，95％产率)。lc-ms:m/z313[m+h]+。[3146]步骤5：(r)-n-(6-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丁基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3147][3148]向方法m1异构体2(22mg，79.9μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌混合物中加入tea(24mg，239.7μmol)和三光气(24mg，79.9μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到6-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丁基)-5-氯吡啶-3-胺(50mg，159.1μmol)于四氢呋喃(5ml)中的溶液中。向该溶液中加入nah(12mg，319.5μmol，60％，于矿物油中)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(10ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的(r)-n-(6-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丁基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(13mg，13％产率)。lc-ms:m/z615[m+h]+。[3149]步骤6：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(1-羟基环丁基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3150][3151]向(r)-n-(6-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环丁基)-5-氯吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(13mg，21.1μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌混合物中加入tbaf(1ml，1m，于thf中)。将反应混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到粗产物，将所述粗产物通过制备型hplc进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈淡黄色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(1-羟基环丁基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(2.6mg，24％产率)。实例168的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3152]实例168：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.27(s,1h),8.47(s,1h),8.01(d,j＝1.8hz1h)7.04(s,1h),5.87-5.91(m,1h),4.79(d,j＝12.0hz,1h),4.21(d,j＝12.0hz,1h),2.28-2.35(m,4h),1.91-1.97(m,4h),1.69-1.75(m,1h)。lc-ms:m/z501[m+h]+。[3153]方法q5[3154][3155]实例169：(r)-2-氯-8-甲基-n-(2-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3156]步骤1：(2-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯[3157][3158]在氮气气氛下在25℃下，向(2-氯-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(300mg，1.0mmol)于二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中加入叔丁醇钠(480mg，5.0mmol)、1-甲基氮杂环丁烷-3-胺(610mg，7.1mmol)和brettphospdg3(91mg，101.4μmol)。将所得混合物在120℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至25℃。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(2-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(130mg，37％产率)。lc-ms:m/z347[m+h]+。[3159]步骤2：n2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶-2,4-二胺[3160][3161]向(2-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(130mg，375.7μmol)于二氯甲烷(12ml)中的搅拌溶液中加入tfa(3ml)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(30ml)稀释。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％二氯甲烷和20％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的n2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶-2,4-二胺(80mg，87％产率)。lc-ms:m/z247[m+h]+。[3162]步骤3：(r)-2-氯-8-甲基-n-(2-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3163][3164]向n2-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)-6-(三氟甲基)吡啶-2,4-二胺(30mg,121.9μmol)于四氢呋喃(8ml)中的搅拌溶液中加入三光气(21mg，73.2μmol)和tea(31mg，304.7μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(34mg，121.9μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(121mg，1.2mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(18mg，146.3μmol)。将混合物在40℃下搅拌16小时。将溶剂在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到30mg粗产物，将所述粗产物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-8-甲基-n-(2-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氨基)-6-(三氟甲基)吡啶-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(12mg，18％产率)。实例169的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3165]实例169：1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:8.62(d,j＝4.4hz,1h),8.55(brs,1h),6.74-6.77(m,2h),5.99-6.02(m,1h),4.58-4.61(m,2h),4.34-4.41(m,2h),4.15-4.25(m,2h),3.75-3.88(m,1h),3.42-3.55(m,1h),3.17(s,3h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z549[m+h]+。[3166]方法r5[3167][3168]实例170：(8r)-2-氯-n-(2,2-二甲基四氢-2h-吡喃-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3169]步骤1：(8r)-2-氯-n-(2,2-二甲基四氢-2h-吡喃-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3170][3171]向2,2-二甲基四氢-2h-吡喃-4-胺(56mg，434.1μmol)于四氢呋喃(8ml)中的搅拌溶液中加入三光气(77mg，260.1μmol)和tea(65mg，650.1μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(39mg，140.8μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(438mg，4.3mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(105mg，853.6μmol)。将混合物在60℃下搅拌16小时。将混合物用水(10ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(8r)-2-氯-n-(2,2-二甲基四氢-2h-吡喃-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(25mg，13％产率)。实例170的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3172]实例170：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.29(s,1h),6.98(s,1h),6.85(br,1h),4.54-4.57(m,1h),3.85-4.01(m,2h),3.64-3.70(m,2h),1.92(s,3h),1.65-1.80(m,2h),1.26-1.47(m,2h),1.18(s,3h),1.15(s,3h)。lc-ms:m/z432[m+h]+。[3173]方法s5[3174][3175]实例171：(r)-2-氯-n-((1r,2r)-2-羟基环己基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3176]步骤1：(1r,2r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环己-1-胺[3177][3178]在0℃下，向(1r,2r)-2-氨基环己-1-醇(500mg，4.3mmol)于四氢呋喃(10ml)中的搅拌溶液中加入咪唑(880mg，12.9mmol)和叔丁基氯二甲基硅烷(780mg，5.2mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌18小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc进行纯化，并将收集的级分浓缩，以得到呈黄色油状物的(1r,2r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环己-1-胺(190mg，11％产率)。lc-ms:m/z230[m+h]+。[3179]步骤2：(r)-n-((1r,2r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环己基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3180][3181]向(1r,2r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环己-1-胺(62mg，162.6μmol)于四氢呋喃(3ml)中的搅拌溶液中加入三光气(29mg，97.7μmol)和tea(33mg，326.1μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(30mg，108.4μmol)于四氢呋喃(3ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(26mg，212.8μmol)和tea(110mg，1.09mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将所得混合物过滤。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色固体的(r)-n-((1r,2r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环己基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(45mg，78％产率)。lc-ms:m/z532[m+h]+。[3182]步骤3：(r)-2-氯-n-((1r,2r)-2-羟基环己基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3183][3184]向(r)-n-((1r,2r)-2-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)环己基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(30mg，56μmol)于二氯甲烷(2ml)中的混合物中加入tfa(1ml)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(5ml)稀释，并用二氯甲烷(3x5ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的(r)-2-氯-n-((1r,2r)-2-羟基环己基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(18.3mg，77％产率)。实例171的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3185]实例171：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.30(s,1h),6.98(s,1h),6.76(d,j＝7.6hz,1h),4.71(d,j＝4.4hz,1h),4.58(d,j＝11.6hz,1h),3.99(d,j＝11.6hz,1h),3.32-3.38(m,2h),1.92(s,3h),1.79-1.90(m,2h),1.60-1.67(m,2h),1.18-1.24(m,4h)。lc-ms:m/z418[m+h]+。[3186]方法t5[3187][3188]实例172：(r)-2-氯-8-甲基-n-(螺[2.5]辛-6-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3189]步骤1：(r)-2-氯-8-甲基-n-(螺[2.5]辛-6-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3190][3191]向方法m1异构体2(34mg，123.7μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入三光气(21mg，73.8μmol)和tea(25mg，247.4μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到螺[2.5]辛-6-胺氯化氢盐(20mg，123.7μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(30mg，246.5μmol)和tea(123mg，1.2mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的(r)-2-氯-8-甲基-n-(螺[2.5]辛-6-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(13.7mg，25％产率)。实例172的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3192]实例172：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.30(s,1h),6.99(s,1h),6.87(d,j＝7.6hz,1h),4.59(d,j＝12.0hz,1h),3.97(d,j＝12.0hz,1h),3.54-3.65(m,1h),1.92(s,3h),1.68-1.85(m,4h),1.42-1.51(m,2h),0.88-0.99(m,2h),0.20-0.36(m,4h)。lc-ms:m/z428[m+h]+。[3193]方法u5[3194][3195]实例173：(8r)-2-氯-8-甲基-n-(2-甲基四氢-2h-吡喃-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3196]步骤1：2-甲基四氢-2h-吡喃-4-胺[3197][3198]向2-甲基四氢-4h-吡喃-4-酮(2.0g，17.5mmol)于甲醇(94ml)中的搅拌溶液中加入乙酸铵(13.5g，175.0mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌0.5小时。然后向该溶液中加入nabh4(13.5g，19.3mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(500ml)淬灭。用二氯甲烷(3x300ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将合并的有机层在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的2-甲基四氢-2h-吡喃-4-胺(400mg，粗品)，其无需进一步纯化即可直接使用。lc-ms:m/z116[m+h]+。[3199]步骤2：(8r)-2-氯-8-甲基-n-(2-甲基四氢-2h-吡喃-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3200][3201]在25℃下，向方法m1异构体2(50mg，181.1μmol)于四氢呋喃(10ml)中的搅拌溶液中加入三光气(33mg，108.7μmol)和tea(28mg，271.7μmol)。将所得混合物在28℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到2-甲基四氢-2h-吡喃-4-胺(300mg，2.6mmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(183mg，1.8mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(44mg，362.3μmol)。将反应混合物在40℃下搅拌1小时。将混合物冷却至25℃。将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到粗产物，对所述粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(8r)-2-氯-8-甲基-n-(2-甲基四氢-2h-吡喃-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(3mg，4％产率)。实例173的立体异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3202]实例173：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.29(s,1h),6.99(s,1h),6.93(br,1h),4.56(d,j＝11.6hz,1h),3.98(d,j＝12.0hz,1h),3.86-3.87(m,1h),3.75-3.78(m,1h),3.40-3.44(m,2h),1.92(s,3h),1.80-1.85(m,2h),1.38-1.48(m,1h),1.05-1.22(m,4h)。lc-ms:m/z418[m+h]+。[3203]方法v5[3204][3205]实例174：(r)-2-氯-8-甲基-n-(1-氧杂螺[4.5]癸-8-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3206]步骤1：1-氧杂螺[4.5]癸-8-胺[3207][3208]在25℃下，向1-氧杂螺[4.5]癸-8-酮(500mg，3.2mmol)于甲醇(2ml)中的搅拌混合物中加入乙酸铵(2.50g，32.4mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌0.5小时。在0℃下，向混合物中分批加入nabh4(135mg，3.6mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌15小时。将反应混合物浓缩。将残留物通过制备型hplc进行纯化，并将收集的级分合并并在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的1-氧杂螺[4.5]癸-8-胺(60mg，12％产率)。lc-ms:m/z156[m+h]+。[3209]步骤2：(r)-2-氯-8-甲基-n-(1-氧杂螺[4.5]癸-8-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3210][3211]在25℃下，向方法m1异构体2(50mg，180.7μmol)于四氢呋喃(3ml)中的搅拌溶液中加入三光气(32mg，108.4μmol)和tea(27mg，271.1μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到1-氧杂螺[4.5]癸-8-胺(28mg，180.7μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(183mg，1.8mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(44mg，361.5μmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-8-甲基-n-(1-氧杂螺[4.5]癸-8-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(14.9mg，18％产率)。实例174的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3212]实例174：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.29(s,1h),6.98(s,1h),6.87(d,j＝7.6hz,1h),4.58(d,j＝11.6hz,1h),3.95(d,j＝11.6hz,1h),3.71(t,j＝6.4hz,2h),3.50-3.54(m,1h),1.91(s,3h),1.81-1.89(m,2h),1.62-1.70(m,8h),1.51-1.55(m,2h)。lc-ms:m/z458[m+h]+。[3213]方法w5[3214][3215]实例175：(r)-(5-氨基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-基)甲酮[3216]步骤1：(r)-(5-氨基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-基)甲酮[3217][3218]向方法m1异构体2(183mg，661.8μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入三光气(118mg，397.1μmol)和tea(100mg，992.8μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到5-(三氟甲基)-1h-吡唑-3-胺(100mg，661.8μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(162mg，1.3mmol)和tea(670mg，6.6mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-(5-氨基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-1-基)(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-基)甲酮(23.4mg，8％产率)。实例175的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3219]实例175：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.15(s,1h),7.14(s,1h),6.82(br,2h),5.74(s,1h),5.00(d,j＝12.8hz,1h),4.50(d,j＝12.8hz,1h),1.95(s,3h)。lc-ms:m/z454[m+h]+。[3220]方法x5[3221][3222]实例176：(r)-2-氯-n-(1,4-二甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3223]步骤1：(2,6-二氯-4-甲基吡啶-3-基)甲醇[3224][3225]在0℃下，向2,6-二氯-4-甲基烟酸(5.0g，24.3mmol)于四氢呋喃(50ml)中的搅拌溶液中加入硼烷(44.9ml，44.9mmol，1m，于四氢呋喃中)。将反应混合物在25℃下搅拌15小时。将反应混合物用饱和nahco3水溶液(200ml)淬灭。用二氯甲烷(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(2,6-二氯-4-甲基吡啶-3-基)甲醇(4.4g，84％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:7.15(s,1h),4.83(s,2h),2.50(s,3h),2.08(br,1h)。lc-ms:m/z192[m+h]+。[3226]步骤2：2,6-二氯-4-甲基烟醛[3227][3228]向(2,6-二氯-4-甲基吡啶-3-基)甲醇(4.2g，21.9mmol)于二氯甲烷(150ml)中的搅拌溶液中加入pcc(14.1g，65.6mmol)和硅胶(14.0g)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩，以得到呈白色固体的2,6-二氯-4-甲基烟醛(3.7g，85％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:10.53(br,1h),7.22(s,1h),2.61(s,3h)。lc-ms:m/z190[m+h]+[3229]步骤3：6-氯-4-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶[3230][3231]在25℃下，向2,6-二氯-4-甲基烟醛(3.5g，18.4mmol)于丁-1-醇(60ml)中的搅拌溶液中加入水合肼(3.4g，55.3mmol)。将反应混合物在125℃下搅拌16小时。将混合物冷却至25℃。在真空下去除溶剂。将残留物通过使用98％二氯甲烷和2％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的6-氯-4-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶(1.7g，49％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:13.73(br,1h),8.24(s,1h),7.08(s,1h),2.58(s,3h)。lc-ms:m/z168[m+h]+[3232]步骤4：6-氯-1,4-二甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶[3233][3234]在0℃下，向6-氯-4-甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶(1.6g，9.6mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(20ml)中的搅拌溶液中分批加入nah(572mg，14.3mmol，60％，于矿物油中)。将反应混合物在25℃下搅拌0.5小时。在0℃下逐滴加入碘甲烷(2.0g，14.3mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(200ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(3x500ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的6-氯-1,4-二甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶(1.2g，66％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.20(s,1h),7.05(s,1h),3.96(s,3h),2.55(s,3h)。lc-ms:m/z182[m+h]+。[3235]步骤5：n-(1,4-二甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-基)-1,1-二苯基甲亚胺[3236][3237]在氮气气氛下，向6-氯-1,4-二甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶(200mg，1.1mmol)于二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中加入二苯基甲亚胺(399mg，2.2mmol)、xantphos(191mg，330.4μmol)、cs2co3(1.1g，3.3mmol)和pd2(dba)3(302mg，330.4μmol)。在110℃下搅拌所得混合物1小时。将反应混合物冷却至25℃。在真空下去除溶剂。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的n-(1,4-二甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-基)-1,1-二苯基甲亚胺(320mg，62％产率)。lc-ms:m/z327[m+h]+。[3238]步骤6：1,4-二甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-胺[3239][3240]向n-(1,4-二甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-基)-1,1-二苯基甲亚胺(320mg，980.4μmol)于甲醇(6ml)中的搅拌溶液中加入盐酸羟胺(136mg，2.0mmol)和乙酸钠(201mg，2.5mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。在真空下去除溶剂。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的1,4-二甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-胺(160mg，96％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.73(s,1h),6.29(br,2h),6.12(s,1h),3.77(s,3h),2.33(s,3h)。lc-ms:m/z163[m+h]+。[3241]步骤7：(r)-2-氯-n-(1,4-二甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3242][3243]向1,4-二甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-胺(50mg，308.3μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入三光气(55mg，185.0μmol)和tea(47mg，462.4μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(60mg，215.8μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(75mg，616.6μmol)和tea(312mg，3.1mmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(1,4-二甲基-1h-吡唑并[3,4-b]吡啶-6-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(30mg，21％产率)。实例176的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3244]实例176：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.95(br,1h),9.33(s,1h),8.12(s,1h),7.59(s,1h),7.05(s,1h),5.04(d,j＝11.6hz,1h),4.28(d,j＝11.6hz,1h),3.99(s,3h),2.58(s,3h),1.95(s,3h)。lc-ms:m/z465[m+h]+。[3245]方法y5[3246][3247]实例177：(r)-(3-氨基-5-(二氟甲基)-1h-吡唑-1-基)(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-基)甲酮[3248]步骤1：(r)-(3-氨基-5-(二氟甲基)-1h-吡唑-1-基)(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-基)甲酮[3249][3250]在25℃下，向方法m1异构体2(50mg，181.2μmol)于四氢呋喃(8ml)中的搅拌溶液中加入三光气(33mg，180.7μmol)和tea(28mg，271.7μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到5-(二氟甲基)-1h-吡唑-3-胺(48mg，362.3μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(183mg，1.8mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(45mg，362.3μmol)。将反应混合物在40℃下搅拌1小时。将混合物冷却至25℃。将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到粗产物，对所述粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈黄色固体的(r)-(3-氨基-5-(二氟甲基)-1h-吡唑-1-基)(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-基)甲酮(12.6mg，16％产率)。实例177的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3251]实例177：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.14(s,1h),7.13(s,1h),6.89(t,j＝56.0hz,1h),6.66(br,2h),5.59(s,1h),5.00(d,j＝12.8hz,1h),4.52(d,j＝12.8hz,1h),1.94(s,3h)。lc-ms:m/z436[m+h]+。[3252]方法z5[3253][3254]实例178：(r)-2-氯-n-(4-(二氟甲基)-6-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3255]步骤1：2,6-二氯-4-(二氟甲基)吡啶[3256][3257]在氮气气氛下在-78℃下，向2,6-二氯吡啶-4-甲醛(10g，56.8mmol)于二氯甲烷(500ml)中的搅拌溶液中加入dast(27.5g，170.4mmol)。将所得混合物温热至25℃。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(500ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x500ml)萃取。将合并的有机层用盐水(500ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2,6-二氯-4-(二氟甲基)吡啶(10g，86％产率)。lc-ms:m/z198[m+h]+。[3258]步骤2：2-氯-4-(二氟甲基)-6-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶[3259][3260]向1-甲基氮杂环丁烷-3-醇(3.7g，42.1mmol)于四氢呋喃(100ml)中的搅拌溶液中加入2,6-二氯-4-(二氟甲基)吡啶(10g，50.5mmol)和叔丁醇钾(9.5g，84.2mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(500ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x500ml)萃取。将合并的有机层用盐水(500ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色油状物的2-氯-4-(二氟甲基)-6-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶(9.9g，73％产率)。lc-ms:m/z249[m+h]+。[3261]步骤3：(4-(二氟甲基)-6-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯[3262][3263]向2-氯-4-(二氟甲基)-6-(1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基-吡啶(560mg，2.2mmol)于二噁烷(10ml)中的搅拌溶液中加入氨基甲酸叔丁酯(1.1g，9.0mmol)、pd2(dba)3chcl3(233mg，225.2μmol)、xantphos(260mg，450.4μmol)和k2co3(1.5g，4.5mmol)。将反应混合物在氮气气氛下在85℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(200ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(4-(二氟甲基)-6-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(185mg，24％产率)。lc-ms:m/z330[m+h]+。[3264]步骤4：4-(二氟甲基)-6-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-2-胺[3265][3266]向(4-(二氟甲基)-6-((1-甲基氮杂环丁烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.3g，3.9mmol)于二氯甲烷(30ml)中的搅拌溶液中加入tfa(6ml)。将所得混合物在25℃二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3274]步骤1：3-甲基-5-硝基异噻唑[3275][3276]向铜(16.7g，262.8mmol)于水(150ml)中的搅拌混合物中加入亚硝酸钠(18.1g，262.8mmol)和hcl(0.3ml，12m)。将反应混合物在25℃下搅拌20分钟。然后在25℃下逐滴加入水(100ml)和hcl(10.9ml，12m)中的3-甲基异噻唑-5-胺(10g，87.6mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌3小时。将固体滤出。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取滤液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈红色固体的3-甲基-5-硝基异噻唑(3.4g，27％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.11(s,1h),2.50(s,3h)。[3277]步骤2：5-硝基异噻唑-3-甲酸[3278][3279]向3-甲基-5-硝基异噻唑(2.4g，16.6mmol)于硫酸(30ml)中的搅拌溶液中分份加入氧化铬(vi)(5.0g，49.9mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌72小时。将反应混合物用冰水(200ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的5-硝基异噻唑-3-甲酸(550mg，19％产率)。lc-ms:m/z175[m+h]+。[3280]步骤3：(5-硝基异噻唑-3-基)甲醇[3281][3282]向5-硝基异噻唑-3-甲酸(550mg，3.2mmol)于四氢呋喃(10ml)中的搅拌溶液中加入硼烷(4.7ml，4.7mmol，1m，于四氢呋喃中)。将反应混合物在25℃下搅拌12小时。在0℃下将反应混合物用甲醇(5ml)淬灭。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用水(10ml)稀释。用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(5-硝基异噻唑-3-基)甲醇(280mg，55％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.09(s,1h),5.75(t,j＝6.3hz,1h),4.57(d,j＝6.3hz,2h)。[3283]步骤4：5-硝基异噻唑-3-甲醛[3284][3285]向(5-硝基异噻唑-3-基)甲醇(300mg，1.9mmol)于二氯甲烷(10ml)中的搅拌溶液中加入戴斯-马丁高碘烷(953mg，2.3mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用饱和nahco3水溶液(10ml)淬灭。用二氯甲烷(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的5-硝基异噻唑-3-甲醛(160mg，54％产率)。lc-ms:m/z157[m-h]-。[3286]步骤5：3-(二氟甲基)-5-硝基异噻唑[3287][3288]在0℃下，向5-硝基异噻唑-3-甲醛(300mg，1.9mmol)于二氯甲烷(10ml)中的搅拌溶液中逐滴加入dast(917mg，5.7mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用饱和nahco3水溶液(10ml)淬灭。用二氯甲烷(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的3-(二氟甲基)-5-硝基异噻唑(200mg，58％产率)，其在不进行进一步纯化的情况下直接用于下一步骤。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.54(s,1h),7.16(t,j＝53.7hz,1h)。[3289]步骤6：3-(二氟甲基)异噻唑-5-胺[3290][3291]向3-(二氟甲基)-5-硝基异噻唑(200mg，1.1mmol)于乙酸(5ml)中的搅拌混合物中加入fe(186mg，3.3mmol)。将混合物在50℃下搅拌2小时。将混合物用乙酸乙酯(10ml)稀释，并将所得混合物用30％氢氧化铵溶液(20ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x20ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用40％石油醚和60％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的3-(二氟甲基)异噻唑-5-胺(60mg，36％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:6.99(s,2h),6.72(t,j＝54.6hz,1h),6.31(s,1h)。lc-ms:m/z151[m+h]+。[3292]步骤7：(r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)异噻唑-5-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3293][3294]向方法m1异构体2(74mg，266.4μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入三光气(40mg，133.2μmol)和tea(40mg，399.6μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到3-(二氟甲基)异噻唑-5-胺(40mg，266.4μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(65mg，532.8μmol)和tea(270mg，2.7mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈黄色固体的(r)-2-氯-n-(3-(二氟甲基)异噻唑-5-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(30mg，24％产率)。实例179的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3295]实例179：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:11.34(s,1h),9.34(s,1h),7.12(s,1h),7.08(s,1h),6.97(t,j＝54.6hz,1h),4.75(d,j＝11.4hz,1h),4.28(d,j＝11.4hz,1h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z453[m+h]+。[3296]方法b6[3297][3298]实例180：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(2-羟基丙-2-基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3299]步骤1：2-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯[3300][3301]向2,3-二氯-5-硝基吡啶(5g，25.9mmol)于乙腈(60ml)中的搅拌溶液中加入碳酸钾(9.8g,70.7mmol)和1h-1,2,3-三唑-5-甲酸甲酯(3.0g，23.6mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌16小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(4.8g，66％产率)。lc-ms:m/z284[m+h]+。[3302]步骤2：2-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯[3303][3304]向2-(3-氯-5-硝基吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(3g，10.1mmol)于四氢呋喃(20ml)和水(10ml)中的搅拌溶液中加入fe(2.8g，50.2mmol)和nh4cl(2.7g，50.2mmol)。将混合物在60℃下搅拌2小时。冷却至25℃后，滤出固体。用乙酸乙酯(3x20ml)萃取滤液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的2-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(1.1g，41％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:8.30(s,1h),7.92(d,j＝2.7hz,1h),7.19(d,j＝2.4hz,1h),3.99(s,3h)。lc-ms:m/z254[m+h]+。[3305]步骤3：(r)-2-(3-氯-5-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯[3306][3307]向2-(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(55mg，216.9μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入三光气(80mg，271.1μmol)和tea(28mg，271.1μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(50mg，180.7μmol)于四氢呋喃(5ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(44mg，361.5μmol)和tea(183mg，1.8mmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(15ml)稀释。用乙酸乙酯(3x15ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(r)-2-(3-氯-5-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(70mg，35％产率)。lc-ms:m/z556[m+h]+。[3308]步骤4：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(2-羟基丙-2-基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3309][3310]在氮气气氛下在0℃下，向(r)-2-(3-氯-5-(2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)吡啶-2-基)-2h-1,2,3-三唑-4-甲酸甲酯(30mg，53.9μmol)于四氢呋喃(5ml)中的混合物中逐滴加入甲基溴化镁(43.1μl，129.3μmol，3m，于thf中)。将所得溶液在0℃下搅拌2小时。将反应混合物用饱和nh4cl水溶液(2ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x5ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(4-(2-羟基丙-2-基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(1.7mg，5％产率)。实例180的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3311]实例180：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.68(s,1h),9.36(s,1h),8.75(d,j＝2.1hz,1h),8.49(d,j＝2.1hz,1h),8.32(s,1h),7.08(s,1h),5.26(s,1h),4.85(d,j＝11.4hz,1h),4.30(d,j＝11.4hz,1h),1.99(s,3h),1.55(s,6h)。lc-ms:m/z556[m+h]+。[3312]方法c6[3313][3314]实例181：(r)-n-(6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3315]步骤1：(r)-n-(6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3316][3317]向6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-胺(方法y1步骤2；26mg，115.3μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌溶液中加入三光气(21mg，69.2μmol)和tea(23mg，226.9μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到(r)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(方法k3异构体2；30mg，115.3μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(21mg，173.0μmol)和tea(57mg，567.3μmol)。将混合物在40℃下搅拌1.5小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-n-(6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(31.7mg，53％产率)。[3318]实例181：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.40(s,1h),8.71-8.74(m,2h),7.96(s,2h),7.07(s,1h),6.36(d,j＝5.2hz,1h),4.62(d,j＝10.4hz,1h),4.07(d,j＝10.4hz,1h),2.05(s,3h)。lc-ms:m/z516[m+h]+。[3319]方法d6[3320][3321]实例182：(s)-n-(6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3322]步骤1：(s)-n-(6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3323][3324]向6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-胺(方法y1步骤2；26mg，115.3μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌溶液中加入三光气(21mg，69.2μmol)和tea(23mg，226.9μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到(s)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(方法k3异构体1；30mg，115.3μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(21mg，173.0μmol)和tea(57mg，567.3μmol)。将混合物在40℃下搅拌1.5小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(s)-n-(6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(三氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(32.3mg，54％产率)。[3325]实例182：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.40(s,1h),8.69-8.73(m,2h),7.96(s,2h),7.21(s,1h),6.36(d,j＝5.2hz,1h),4.62(d,j＝10.4hz,1h),4.06(d,j＝10.4hz,1h),2.04(s,3h)。lc-ms:m/z516[m+h]+。[3326]方法e6[3327][3328]实例183和184：由含有(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(5-((r)-1-羟乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(5-((s)-1-羟乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[3329]步骤1：1-(1-(3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)乙-1-酮[3330][3331]在氮气气氛下，向1-(1-(5-溴-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)-1h-1,2,3-三唑-5-基)乙-1-酮(方法m4步骤4；1.8g，5.7mmol)和二苯甲基亚胺(1.1g，6.2mmol)于二噁烷(20ml)中的搅拌溶液中加入pd2(dba)3(259mg，283.8μmol)、cs2co3(4.6g，14.1mmol)和xantphos(246mg，425.0μmol)。将反应混合物在90℃下搅拌3小时。冷却至25℃后，将反应混合物过滤。将滤饼用乙酸乙酯(10ml)洗涤。将滤液倒入水(50ml)中，并用乙酸乙酯(3x80ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油1-醇(140mg，548.5μmol)于二氯甲烷(10ml)中的搅拌溶液中加入二甲基甲硅烷基三氟甲磺酸叔丁酯(290mg，1.1mmol)和tea(167mg，1.7mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈淡黄色固体的6-(5-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-胺(170mg，79％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.29(s,1h),7.98(d,j＝2.7hz,1h),7.37(d,j＝2.7hz,1h),7.10(t,j＝54.6hz,1h),6.13(br,2h),5.09(q,j＝6.6hz,1h),1.49(d,j＝6.3hz,3h),0.85(s,9h),0.09(s,3h),0.01(s,3h)。lc-ms:m/z370[m+h]+。[3341]步骤5：(8r)-n-(6-(5-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3342][3343]向6-(5-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-胺(90mg，243.6μmol)于四氢呋喃(3ml)中的搅拌溶液中加入tea(37mg，365.4μmol)和三光气(43mg，146.2μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(47mg，170.5μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(60mg，487.2μmol)和tea(246mg，2.4mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的(8r)-n-(6-(5-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(150mg，79％产率)。lc-ms:m/z672[m+h]+。[3344]步骤6：(8r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(5-(1-羟乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3345][3346]在25℃下，向(8r)-n-(6-(5-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(150mg，223.3μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入四丁基氟化铵(1ml，1m，于四氢呋喃中)。将反应混合物在25℃下搅拌15小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用93％二氯甲烷和7％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的(8r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(5-(1-羟乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(60mg，48％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.67(s,1h),9.35(s,1h),8.96(d,j＝2.1hz,1h),8.58(d,j＝2.4hz,1h),8.52(s,1h),7.44(t,j＝54.3hz,1h),7.06(s,1h),4.89-4.96(m,1h),4.85(d,j＝11.4hz,1h),4.30(d,j＝11.4hz,1h),1.98(s,3h),1.48(d,j＝6.6hz,3h)。lc-ms:m/z558[m+h]+。[3347]步骤7：分离对映异构体以获得(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(5-((r)-1-羟乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(5-((s)-1-羟乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3348][3349]对(8r)-2-氯-n-(5-(二氟甲基)-6-(5-(1-羟乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(50mg，89.6μmol)进行手性hplc纯化：色谱柱：chiralpakia，3x25cm，5μm；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：40毫升/分钟；梯度：在28分钟内，15％b到15％b；波长：220/254nm；rt1(分钟)：19.3；rt2(分钟)：23.7；样品溶剂：etoh‑‑hplc；注射体积：0.5ml；运行次数：5。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例183(9.1mg，18％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例184(13.2mg，26％产率)。实例183和184的对应的立体异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。实施例183和184是非对映异构体，其中与三氟甲基连接的立体中心是绝对的并且甲醇立体中心是相对的(即，实例183和184中的一个中的甲醇立体中心是(s)，实例183和184中的另一个中的甲醇立体中心是(r))。[3350]实例183：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.70(s,1h),9.37(s,1h),8.98(d,j＝2.0hz,1h),8.60(d,j＝2.0hz,1h),8.53(s,1h),7.46(t,j＝54.4hz,1h),7.08(s,1h),5.44(d,j＝4.8hz,1h),4.92-4.96(m,1h),4.87(d,j＝11.6hz,1h),4.33(d,j＝11.6hz,1h),1.99(s,3h),1.49(d,j＝6.8hz,3h)。lc-ms:m/z558[m+h]+。[3351]实例184：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.67(s,1h),9.35(s,1h),8.97(d,j＝2.4hz,1h),8.58(d,j＝2.1hz,1h),8.51(s,1h),7.44(t,j＝54.0hz,1h),7.06(s,1h),5.40(d,j＝5.1hz,1h),4.91-4.95(m,1h),4.85(d,j＝11.4hz,1h),4.30(d,j＝11.4hz,1h),1.97(s,3h),1.47(d,j＝6.6hz,3h)。lc-ms:m/z558[m+h]+。[3352]方法f6[3353][3354]实例185：4-氯-6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-2-(((s)-吡咯烷-3-基)氧基)烟酸[3355]步骤1：2,4,6-三氯烟酸甲酯[3356][3357]在0℃下，向2,4,6-三氯烟酸(20g，88.3mmol)于乙腈(400ml)中的搅拌混合物中加入碘甲烷(62.6g，441.6mmol)和dbu(40.3g，291.8mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌14小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物用水(800ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x1000ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2,4,6-三氯烟酸甲酯(18.6g，84％产率)。lc-ms:m/z240[m+h]+。[3358]步骤2：(s)-2-((1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4,6-二氯烟酸甲酯[3359][3360]在25℃下，向(s)-3-羟基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(7g，37.4mmol)于四氢呋喃(200ml)中的搅拌混合物中加入2,4,6-三氯烟酸甲酯(9g，37.4mmol)和碳酸铯(24.4g，74.8mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(s)-2-((1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4,6-二氯烟酸甲酯(3.9g，26％产率)。lc-ms:m/z391[m+h]+。[3361]步骤3：(s)-2-((1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4-氯-6-((二苯基亚甲基)氨基)烟酸甲酯[3362][3363]向(s)-2-((1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4,6-二氯烟酸甲酯(3.9g，9.9mmol)于二噁烷(200ml)中的搅拌溶液中加入二苯基甲亚胺(2.7g，14.9mmol)、pd2(dba)3chcl3(1.0g，996.8μmol)、xantphos(1.1g，1.9mmol)和cs2co3(6.5g，19.9mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌16小时。将混合物冷却至25℃。将混合物在真空下浓缩。将残留物用水(200ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(200ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈黄色油状物的(s)-2-((1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4-氯-6-((二苯基亚甲基)氨基)烟酸甲酯(3g，13％产率)。lc-ms:m/z536[m+h]+。[3364]步骤4：(s)-6-氨基-2-((1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4-氯烟酸甲酯[3365][3366]向(s)-2-((1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4-氯-6-((二苯基亚甲基)氨基)烟酸甲酯(3g，5.6mmol)于甲醇(100ml)中的搅拌溶液中加入盐酸羟胺(583mg，8.4mmol)和乙酸钠(918mg，11.1mmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用水(200ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(200ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(s)-6-氨基-2-((1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4-氯烟酸甲酯(1g，44％产率)。lc-ms:m/z372[m+h]+。[3367]步骤5：2-(((s)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4-氯-6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)烟酸甲酯[3368][3369]向方法m1异构体2(49mg，179.3μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入三光气(31mg，107.5μmol)和tea(54mg，537.9μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到(s)-6-氨基-2-((1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4-氯烟酸甲酯(100mg，268.9μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(43mg，358.6μmol)和tea(108mg，1.1mmol)。将混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的2-(((s)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4-氯-6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)烟酸甲酯(100mg，66％产率)。lc-ms:m/z674[m+h]+。[3370]步骤6：2-(((s)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4-氯-6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)烟酸[3371][3372]向2-(((s)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4-氯-6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)烟酸甲酯(50mg，74μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入氢氧化钠(6mg，148.27μmol)和水(1ml)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。用hcl(1m)将ph调整到3。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将反应混合物浓缩，以得到呈白色固体的2-(((s)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4-氯-6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)烟酸(30mg，61％产率)。lc-ms:m/z660[m+h]+。[3373]步骤7：4-氯-6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-2-(((s)-吡咯烷-3-基)氧基)烟酸[3374][3375]向2-(((s)-1-(叔丁氧基羰基)吡咯烷-3-基)氧基)-4-氯-6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)烟酸(30mg，45μmol)于二氯甲烷(2ml)中的搅拌混合物中加入tfa(0.4ml)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的4-氯-6-((r)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺基)-2-(((s)-吡咯烷-3-基)氧基)烟酸(4.4mg，17％产率)。实例185的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3376]实例185：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:14.88(br,1h),9.38(s,1h),7.95(br,2h),7.01(s,1h),6.46(s,1h),5.41-5.43(m,1h),4.53(d,j＝11.6hz,1h),4.23(d,j＝11.6hz,1h),3.55-3.65(m,1h),3.28(s,3h),2.28-2.32(m,1h),2.15-2.16(m,1h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z560[m+h]+。[3377]方法g6[3378][3379]实例186：(r)-2-氯-8-甲基-n-(4-(甲基氨基)-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3380]步骤1：2-溴-4-硝基-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶[3381][3382]向2-溴-5-氟-4-硝基吡啶(2.80g，12.6mmol)于乙腈(20ml)中的搅拌溶液中加入2h-1,2,3-三唑(875mg，12.6mmol)和k2co3(3.50g，25.2mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌1小时。冷却至25℃后，将反应混合物用水(100ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-溴-4-硝基-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶(1.20g，35％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.14(s,1h),7.93(s,2h),7.81(s,1h)。lc-ms:m/z270[m+h]+。[3383]步骤2：2-溴-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-4-胺[3384][3385]在25℃下，向2-溴-4-硝基-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶(1.20g，4.4mmol)于乙醇(60ml)和水(20ml)中的搅拌溶液中加入fe(740mg，13.2mmol)和nh4cl(1.17g，22.0mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌1小时。冷却至25℃后，滤出固体。将滤液在真空下浓缩以去除乙醇。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-溴-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-4-胺(880mg，82％产率)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:8.56(s,1h),7.99(s,2h),7.05(s,1h)。lc-ms:m/z240[m+h]+。[3386]步骤3：2-溴-n-甲基-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-4-胺[3387][3388]向2-溴-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-4-胺(880mg，3.6mmol)于四氢呋喃(30ml)中的搅拌溶液中加入碘甲烷(484mg，3.4mmol)和叔丁醇钾(822mg，7.2mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分浓缩，以得到呈白色固体的2-溴-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-4-胺(520mg，55％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:8.76(s,1h),7.85(s,2h),7.67(s,1h),6.83(br,1h),2.97(d,j＝5.2hz,3h),0.07(s,1h)。lc-ms:m/z254[m+h]+。[3389]步骤4：2-((二苯基亚甲基)氨基)-n-甲基-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-4-胺[3390][3391]向2-溴-n-甲基-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-4-胺(520mg，2.0mmol)和二苯基甲亚胺(370mg，2.0mmol)于二噁烷(40ml)中的搅拌溶液中加入xantphos(355mg，613.9μmol)、pd2(dba)3(235mg，409.3μmol)和cs2co3(2.00g，6.1mmol)。将反应混合物在氮气气氛下在90℃下搅拌2小时。冷却至25℃后，滤出固体。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的2-((二苯基亚甲基)氨基)-n-甲基-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-4-胺(160mg，22％产率)。lc-ms:m/z355[m+h]+。[3392]步骤5：n4-甲基-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2,4-二胺[3393][3394]向2-((二苯基亚甲基)氨基)-n-甲基-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-4-胺(160mg，451.4μmol)于甲醇(10ml)中的搅拌溶液加入盐酸羟胺(62mg，892.2μmol)和乙酸钠(92mg，1.1mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的n4-甲基-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2,4-二胺(80mg，93％产率)。1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:8.41(s,1h),7.93(s,2h),5.99(s,1h),2.74(s,3h)。lc-ms:m/z191[m+h]+。[3395]步骤6：(r)-2-氯-8-甲基-n-(4-(甲基氨基)-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3396][3397]向方法m1异构体2(40mg，144.5μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入三光气(25mg，86.7μmol)和tea(22mg，216μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到n4-甲基-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2,4-二胺(27mg，144.5μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(146mg，1.4mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(35mg，289μmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(10ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-8-甲基-n-(4-(甲基氨基)-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(10.7mg，14％产率)。实例186的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3398]实例186：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.85(br,1h),9.35(s,1h),8.33(s,1h),8.15(s,2h),7.37(s,1h),7.00-7.05(m,2h),4.98(d,j＝11.6hz,1h),4.24(d,j＝11.6hz,1h),2.86(d,j＝4.8hz,3h),1.94(s,3h)。lc-ms:m/z493[m+h]+。[3399]方法h6[3400][3401]实例187：(r)-2-氯-8-甲基-n-(5-(甲基氨基)-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3402]步骤1：3-溴-5-硝基-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶[3403][3404]向3-溴-2-氯-5-硝基吡啶(10.0g，42.4mmol)于乙腈(200ml)中的搅拌溶液中加入2h-1,2,3-三唑(3.2g，46.6mmol)和k2co3(11.7g，84.7mmol)。将所得混合物在40℃下搅拌16小时。将混合物冷却至25℃。过滤反应混合物，并将收集的固体用乙酸乙酯(3x200ml)洗涤。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的3-溴-5-硝基-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶(2.0g，17％产率)。lc-ms:m/z270[m+h]+。[3405]步骤2：5-溴-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-胺[3406][3407]向3-溴-5-硝基-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶(1.0g，3.7mmol)于乙醇(45ml)和水(15ml)中的溶液中加入fe(1.0g，18.6mmol)、nh4cl(0.8g，14.8mmol)。将所得混合物在80℃下搅拌2小时。冷却至25℃后，滤出固体。将滤液在真空下浓缩以去除乙醇。将所得溶液用水(50ml)稀释，用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的5-溴-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-胺(0.8g，89％产率)。lc-ms:m/z240[m+h]+。[3408]步骤3：n3-甲基-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3,5-二胺[3409][3410]向5-(二氟甲基)-1h-吡唑-3-胺(500mg，3.3mmol)于甲胺(4ml，40％，于水中)中的搅拌溶液中加入铜(8mg，0.1mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌4小时。将混合物冷却至25℃。将反应混合物用水(20ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的n3-甲基-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3,5-二胺(280mg，71％产率)。lc-ms:m/z191[m+h]+。[3411]步骤4：(r)-2-氯-8-甲基-n-(5-(甲基氨基)-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3412][3413]在25℃下，向n3-甲基-2-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3,5-二胺(42mg，217μmol)于四氢呋喃(8ml)中的搅拌溶液中加入三光气(32mg，108μmol)和tea(22mg，217.4μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(48mg，173μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(220mg，2.2mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(53mg，434μmol)。将反应混合物在40℃下搅拌1小时。将反应混合物用水(20ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到粗产物。对粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-8-甲基-n-(5-(甲基氨基)-6-(1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(23mg，31％产率)。实例187的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3414]实例187：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.37(s,1h),9.26(br,1h),8.70(d,j＝1.2hz,1h),8.10(d,j＝2.0hz,1h),7.98(d,j＝1.2hz,1h),7.57(d,j＝2.0hz,1h),7.06(s,1h),6.76(br,1h),4.86(d,j＝11.2hz,1h),4.28(d,j＝11.2hz,1h),2.88(d,j＝4.0hz,3h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z493[m+h]+。[3415]方法i6[3416][3417]实例188：(8r)-n-(5-(二氟甲基)-6-(5-(1-羟乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3418]步骤1：(8r)-n-(6-(5-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3419][3420]向6-(5-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-胺(与方法m4步骤8类似地制备；30mg，81.2μmol)于四氢呋喃(3ml)中的搅拌溶液中加入tea(12mg，121.8μmol)和三光气(14mg，48.7μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到(r)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(方法k3异构体2；15mg，57.7μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(20mg，162.4μmol)和tea(82mg，800μmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的(8r)-n-(6-(5-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(25mg，45％产率)。lc-ms:m/z656[m+h]+。[3421]步骤2：(8r)-n-(5-(二氟甲基)-6-(5-(1-羟乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3422][3423]在25℃下，向(8r)-n-(6-(5-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(25mg，38.1μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入四丁基氟化铵(1ml，1m，于四氢呋喃中)。将反应在25℃下搅拌15小时。在真空下去除溶剂。将混合物在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(8r)-n-(5-(二氟甲基)-6-(5-(1-羟乙基)-1h-1,2,3-三唑-1-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(16.8mg，81％产率)。实例188的相对于与三氟甲基连接的手性中心的对应的立体异构体可以使用方法k3异构体1类似地制备。[3424]实例188：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.67(s,1h),9.36(s,1h),8.98(d,j＝2.4hz,1h),8.60(d,j＝2.4hz,1h),8.53(s,1h),7.45(t,j＝54.0hz,1h),6.70(d,j＝4.8hz,1h),5.43(d,j＝5.2hz,1h),4.92-4.98(m,1h),4.85(d,j＝11.6hz,1h),4.31(d,j＝11.6hz,1h),1.98(s,3h),1.49(d,j＝6.4hz,3h)。lc-ms:m/z542[m+h]+。[3425]方法j6[3426][3427]实例189和190：由含有(s)-2-氰基-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氰基-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[3428]步骤1：2-溴-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[3429][3430]向3-溴-1h-吡唑-5-胺(280mg，1.7mmol)于甲苯(10ml)中的搅拌溶液中加入乙酸(1ml)和(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(方法k1步骤8；557mg，1.7mmol)。将反应混合物在95℃下搅拌10小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(10ml)稀释。用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的2-溴-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(420mg，57％产率)。lc-ms:m/z421[m+h]+。[3431]步骤2：8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-2-甲腈[3432][3433]在氮气气氛下，向2-溴-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(200mg，474.8μmol)于n,n-二甲基甲酰胺(5ml)中的搅拌溶液中加入zn(cn)2(112mg，949.6μmol)和pdcl2(dppf)(52mg，71.2μmol)。将最终的反应混合物在180℃下用微波辐射照射0.5小时。冷却至25℃后，滤出固体。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-2-甲腈(100mg，76％产率)。lc-ms:m/z268[m+h]+。[3434]步骤3：2-氰基-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3435][3436]在25℃下，向8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-2-甲腈(50mg，187.1μmol)和6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(方法q2步骤8；33mg，187.1μmol)于二噁烷(5ml)中的搅拌溶液中加入dppa(55mg，224.5μmol)和tea(95mg，935.6μmol)。将所得混合物在100℃下搅拌2小时。将反应冷却至25℃。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用水(10ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的2-氰基-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(15mg，18％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.99(s,1h),9.51(s,2h),8.21(d,j＝2.8hz,1h),7.78(s,1h),7.25(t,j＝54.4hz,1h),4.91(d,j＝11.6hz,1h),4.35(d,j＝11.6hz,1h),1.99(s,3h)。lc-ms:m/z439[m+h]+。[3437]步骤4：分离对映异构体以获得(s)-2-氰基-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氰基-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3438][3439]对2-氰基-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(15mg，34.2μmol)进行手性hplc：色谱柱：lux5umcellulose-2，2.12*25cm，5μm；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在25分钟内，40b到40b；254/220nm；rt1:13.242；rt2:19.844；注射体积：1ml；运行次数：2。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈淡黄色固体的实例189(6.7mg，44％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈淡黄色固体的实例190(6.4mg，42％产率)。实例189和190是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[3440]实例189：1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ:9.57(s,1h),9.48(d,j＝2.4hz,1h),8.34(d,j＝2.4hz,1h),7.40(s,1h),6.96(t,j＝54.3hz,1h),4.85(d,j＝10.5hz,1h),4.28(d,j＝10.5hz,1h),2.06(s,3h)。lc-ms:m/z439[m+h]+。[3441]实例190：1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ:9.57(s,1h),9.49(d,j＝2.4hz,1h),8.34(d,j＝2.4hz,1h),7.40(s,1h),6.97(t,j＝54.3hz,1h),4.85(d,j＝11.7hz,1h),4.29(d,j＝11.7hz,1h),2.06(s,3h)。lc-ms:m/z439[m+h]+。[3442]方法k6[3443][3444]实例191：(8r)-n-(5-(二氟甲基)-6-(4-(1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3445]步骤1：(8r)-n-(6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3446][3447]在25℃下，向6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-胺(40mg，108.2μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌混合物中加入三光气(19mg，64.96μmol)和tea(16mg，162.4μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到(r)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(20mg，75.8μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(109mg，1.1mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(26mg，216.5μmol)。将混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈白色固体的(8r)-n-(6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(15mg，21％产率)。lc-ms:m/z656[m+h]+。[3448]步骤2：(8r)-n-(5-(二氟甲基)-6-(4-(1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3449][3450]向(8r)-n-(6-(4-(1-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(15mg，22.88umol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌混合物中加入四丁基氟化铵(1ml，1m，于四氢呋喃中)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩。将残留物通过使用100％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到粗产物。对粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的(8r)-n-(5-(二氟甲基)-6-(4-(1-羟乙基)-2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(4.5mg，36％产率)。实例191的相对于与三氟甲基连接的手性中心的对应的立体异构体可以使用方法k3异构体1类似地制备。[3451]实例191：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.65(s,1h),9.36(s,1h),8.95(d,j＝2.4hz,1h),8.57(d,j＝2.4hz,1h),8.09(s,1h),7.41(t,j＝54.4hz,1h),6.69(d,j＝4.8hz,1h),5.55(d,j＝5.2hz,1h),4.93-4.99(m,1h),4.86(d,j＝11.6hz,1h),4.31(d,j＝11.6hz,1h),1.97(s,3h),1.48(d,j＝6.4hz,3h)。lc-ms:m/z542[m+h]+。[3452]方法l6[3453][3454]实例192：(r)-2-氯-8-甲基-n-(6-(甲基氨基)-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3455]步骤1：3-溴-6-甲氧基吡啶甲酸[3456][3457]在25℃下，向3-溴-6-甲氧基吡啶甲腈(850mg，3.9mml)于乙醇(15ml)中的搅拌溶液中加入氢氧化钠(1.60g，39.9mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌4小时。冷却至25℃后，将反应溶液用水(50ml)淬灭。用hcl(1m)将ph调整到3。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取混合物。将合并的有机层用盐水(60ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈黄色固体的3-溴-6-甲氧基吡啶甲酸(850mg，75％产率)。lc-ms:m/z232[m+h]+。[3458]步骤2：6-甲氧基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶甲酸[3459][3460]在25℃下，向3-溴-6-甲氧基吡啶甲酸(500mg，2.1mmol)和2h-1,2,3-三唑(297mg，4.3mmol)于二噁烷(10ml)和水(0.05ml)中的搅拌混合物中加入(1s,2r)-环己烷-1,2-二胺(49mg，430.9μmol)、碘化铜(i)(82mg，430.9μmol)和cs2co3(1.4g，4.3mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌2小时。冷却至25℃后，将反应溶液用水(50ml)淬灭。用hcl(1m)将ph调整到5。用乙酸乙酯(4x80ml)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈黄色固体的6-甲氧基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶甲酸(250mg，52％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:13.43(s,1h),8.17-8.20(m,1h),8.11(s,2h),7.14-7.16(m,1h),3.93(s,3h)。lc-ms:m/z221[m+h]+。[3461]步骤3：(6-甲氧基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯[3462][3463]在25℃下，向6-甲氧基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶甲酸(500mg，2.2mmol)于2-甲基丙-2-醇(10ml)中的搅拌溶液中加入tea(758mg，7.4mmol)和二苯基磷酰叠氮化物(2.1g，7.4mmol)。将所得混合物在90℃下搅拌2小时。冷却至25℃后，将反应混合物用水(100ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x150ml)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(6-甲氧基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(450mg，68％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.59(br,1h),8.03(s,2h),8.01(d,j＝8.8hz,1h),6.74(d,j＝8.8hz,1h),3.88(s,3h),1.28(s,9h)。lc-ms:m/z292[m+h]+。[3464]步骤4：(6-甲氧基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯[3465][3466]在25℃下，向(6-甲氧基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(2.3g，7.9mmol)于四氢呋喃(120ml)中的搅拌溶液中加入叔丁醇钾(1.7g，15.7mmol)和碘甲烷(3.3g，23.6mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(300ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x300ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(300ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(6-甲氧基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(2g，82％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.12(s,2h),8.09(d,j＝8.7hz,1h),6.94(d,j＝8.7hz,1h),3.93(s,3h),3.33(s,3h),1.08(s,9h)。lc-ms:m/z306[m+h]+。[3467]步骤5：6-(甲基氨基)-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-醇[3468][3469]在氮气气氛下在0℃下，向(6-甲氧基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(1.2g，3.9mmol)于1,2-二氯乙烷(15ml)中的搅拌溶液中逐滴加入三溴硼烷(11.7ml，11.7mmol，1m，于二氯甲烷中)。将所得混合物在60℃下搅拌1小时。在0℃下将反应用甲醇(10ml)淬灭。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的6-(甲基氨基)-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-醇(400mg，53％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.03(s,2h),7.75(d,j＝8.4hz,1h),5.86(d,j＝8.4hz,1h),2.88(s,3h)。lc-ms:m/z192[m+h]+。[3470]步骤6：三氟甲磺酸6-(甲基氨基)-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基酯[3471][3472]向6-(甲基氨基)-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-醇(430mg，2.2mmol)于二氯甲烷(15ml)中的搅拌溶液中加入tea(682mg，6.7mmol)。在氮气气氛下在0℃下加入三氟甲磺酸酐(951mg，3.3mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x150ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(200ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用75％石油醚和25％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的三氟甲磺酸6-(甲基氨基)-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基酯(500mg，68％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.25(d,j＝8.1hz,1h),8.22(m,2h),7.87(br,1h),6.74(d,j＝8.4hz,1h),2.92(d,j＝4.5hz,3h)。lc-ms:m/z324[m+h]+。[3473]步骤7：6-((二苯基亚甲基)氨基)-n-甲基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-胺[3474][3475]在氮气气氛下，向三氟甲磺酸6-(甲基氨基)-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基酯(650mg，2.0mmol)和二苯基甲亚胺(728mg，4.0mmol)于甲苯(30ml)中的搅拌混合物中加入pd(oac)2(135mg，603μmol)、binap(392mg，603μmol)和cs2co3(1.3g，4.0mmol)。将所得混合物在氮气气氛下在100℃下搅拌2小时。冷却至25℃后，将反应混合物用水(50ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x80ml)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用20％石油醚和80％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的6-((二苯基亚甲基)氨基)-n-甲基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-胺(610mg，68％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.09(s,2h),7.81(d,j＝8.1hz,1h),7.66-7.74(m,3h),7.48-7.60(m,3h),7.34-7.36(m,3h),7.18-7.22(m,2h),6.06(d,j＝8.1hz,1h),2.75(d,j＝4.8hz,3h)。lc-ms:m/z355[m+h]+。[3476]步骤8：n2-甲基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2,6-二胺[3477][3478]在25℃下，向6-((二苯基亚甲基)氨基)-n-甲基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-胺(300mg，846.5μmol)于甲醇(8ml)中的搅拌混合物中加入盐酸羟胺(117mg，1.6mmol)和乙酸钠(173mg，2.1mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈黄色固体的n2-甲基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2,6-二胺(120mg，74％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.97(s,2h),7.57(d,j＝8.4hz,1h),6.74-6.78(m,1h),5.95(br,2h),5.75(d,j＝8.4hz,1h),2.85(d,j＝4.4hz,3h)。lc-ms:m/z191[m+h]+。[3479]步骤9：(r)-2-氯-8-甲基-n-(6-(甲基氨基)-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3480][3481]向n2-甲基-3-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2,6-二胺(60mg，315.4μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌混合物中加入三光气(56mg，189.2μmol)和tea(47mg，473.7μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(80mg，252.3μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入tea(319mg，3.1mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(77mg，630.9μmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈淡黄色固体的(r)-2-氯-8-甲基-n-(6-(甲基氨基)-5-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-2-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(27.8mg，17％产率)。实例192的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3482]实例192：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.39(br,1h),9.34(s,1h),8.13(s,2h),8.00(d,j＝8.4hz,1h),7.26-7.29(m,2h),7.05(s,1h),5.05(d,j＝11.6hz,1h),4.27(d,j＝11.6hz,1h),3.01(d,j＝4.8hz,3h),1.96(s,3h)。lc-ms:m/z493[m+h]+。[3483]方法m6[3484][3485]实例193：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-a]吡咯并[3,2-c]吡啶-7-甲酰胺[3486]步骤1：2-溴-3-碘吡啶-4-胺[3487][3488]向2-溴吡啶-4-胺(50.0g，289.0mmol)和乙酸钠(78.6g，578.0mmol)于乙酸(160ml)中的搅拌溶液中加入一氯化碘(46.9g，289.0mmol)。将反应混合物在75℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(500ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x500ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(2x1000ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈灰白色固体的2-溴-3-碘吡啶-4-胺(28.0g，32％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:7.90(d,j＝5.4hz,1h),6.50(d,j＝5.4hz,1h),4.94(br,2h)。lc-ms:m/z299[m+h]+。[3489]步骤2：n-(2-溴-3-碘吡啶-4-基)-3,3,3-三氟-2-甲基丙酰胺[3490][3491]向2-溴-3-碘-吡啶-4-胺(20.0g，66.9mmol)、六氟磷酸n,n,n',n'-四甲基氯甲脒酯(56.3g，200.7mmol)和1-甲基咪唑(27.4g，334.5mmol)于乙腈(190ml)中的溶液中加入3,3,3-三氟-2-甲基丙酸(9.5g，66.9mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌16小时。将反应溶液在真空下浓缩。将残留物用水(500ml)淬灭。用二氯甲烷(3x500ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(1000ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的n-(2-溴-3-碘吡啶-4-基)-3,3,3-三氟-2-甲基丙酰胺(5.5g，19％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:8.22-8.32(m,2h),8.17(br,1h),3.25-3.41(m,1h),1.57(d,j＝7.2hz,3h)。lc-ms:m/z423[m+h]+。[3492]步骤3：n-(2-溴-3-碘吡啶-4-基)-3,3,3-三氟-n-(4-甲氧基苄基)-2-甲基丙酰胺[3493][3494]在0℃下，向n-(2-溴-3-碘代吡啶-4-基)-3,3,3-三氟-2-甲基丙酰胺(5.0g，12.1mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(100ml)中的搅拌溶液中分批加入氢化钠(520mg，13.4mmol，60％，于矿物油中)。将混合物在0℃下搅拌0.5小时。然后将1-(溴甲基)-4-甲氧基苯(2.8g，14mmol)加入到反应混合物中。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用冰/水(200ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(500ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的n-(2-溴-3-碘吡啶-4-基)-3,3,3-三氟-n-(4-甲氧基苄基)-2-甲基丙酰胺(5.2g，77％产率)。lc-ms:m/z543[m+h]+。[3495]步骤4：n-(2-氰基-3-碘吡啶-4-基)-3,3,3-三氟-n-(4-甲氧基苄基)-2-甲基丙酰胺[3496][3497]向n-(2-溴-3-碘吡啶-4-基)-3,3,3-三氟-n-(4-甲氧基苄基)-2-甲基丙酰胺(1.5g，2.7mmol)于1-甲基-2-吡咯烷酮(30ml)中的搅拌溶液中加入氰化铜(i)(517mg，5.5mmol)。将反应混合物在90℃下搅拌3小时。将反应混合物用水(200ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(600ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的n-(2-氰基-3-碘吡啶-4-基)-3,3,3-三氟-n-(4-甲氧基苄基)-2-甲基丙酰胺(1.0g，74％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:8.55-8.57(m,1h),7.03-7.08(m,2h),6.80-6.88(m,3h),5.67(d,j＝14.1hz,1h),3.96(d,j＝14.4hz,1h),3.82(s,3h),2.63-2.73(m,1h),1.50(d,j＝6.6hz,3h)。lc-ms:m/z490[m+h]+。[3498]步骤5：1-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-2-氧代-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-甲腈[3499][3500]向n-(2-氰基-3-碘吡啶-4-基)-3,3,3-三氟-n-(4-甲氧基苄基)-2-甲基丙酰胺(500mg，1.1mmol)于四氢呋喃(5ml)和丙酮(5ml)中的搅拌溶液中加入n,n-二异丙基乙胺(660mg，5.1mmol)和三(2-苯基吡啶)铱(6mg，10.2μmol)。将反应混合物在25℃下搅拌12小时，用450nmled照射。将反应混合物浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的1-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-2-氧代-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-甲腈(60mg，16％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:8.54(d,j＝5.4hz,1h),7.18(d,j＝5.7hz,2h),6.84-6.93(m,3h),5.09(d,j＝15.6hz,1h),4.74(d,j＝15.3hz,1h),3.81(s,3h),1.97(s,3h)。lc-ms:m/z362[m+h]+。[3501]步骤6：1-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-2-氧代-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-甲酰胺[3502][3503]向1-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-2-氧代-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-甲腈(670mg，1.8mmol)和k2co3(512mg，3.7mmol)于二甲亚砜(10ml)中的搅拌混合物中加入过氧化氢(630mg，5.5mmol，30％，于水中)。将反应混合物在60℃下搅拌0.5小时。将反应混合物用冰/水(100ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(200ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈黄色固体的1-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-2-氧代-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-甲酰胺(600mg，85％产率)。lc-ms:m/z380[m+h]+。[3504]步骤7：4-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-3-(三氟甲基)-1,3-二氢-2h-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-酮[3505][3506]向1-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-2-氧代-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-甲酰胺(600mg，1.9mmol)于乙醇(20ml)和水(10ml)中的搅拌混合物中加入氢氧化钠(253mg，6.3mmol)和次氯酸钠(6.05g，7.91mmol，10％，于水中)。将反应混合物在70℃下搅拌15小时。将反应混合物在真空下浓缩以去除乙醇。用乙酸乙酯(3x30ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(50ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的4-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-3-(三氟甲基)-1,3-二氢-2h-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-酮(400mg，72％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:7.97(d,j＝5.7hz,1h),7.18(d,j＝8.7hz,2h),6.88(d,j＝8.7hz,2h),6.29(d,j＝5.4hz,1h),5.00(d,j＝15.6hz,1h),4.97(br,2h),4.69(d,j＝15.6hz,1h),3.80(s,3h),1.77(s,3h)。lc-ms:m/z352[m+h]+。[3507]步骤8：1-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺[3508][3509]在25℃下，向4-氨基-1-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-3-(三氟甲基)-1,3-二氢-2h-吡咯并[3,2-c]吡啶-2-酮(400mg，1.1mmol)于四氢呋喃(10ml)中的搅拌溶液中加入硼烷(1n，于四氢呋喃中，20ml)。将混合物在50℃下搅拌15小时。将反应混合物用甲醇(50ml)淬灭。将所得溶液浓缩。将残留物溶解在hcl(20ml，1m)中。用乙酸乙酯(3x30ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(60ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。通过制备型hplc纯化残留物，以得到呈黄色油状物的1-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺(160mg，41％产率)。lc-ms:m/z338[m+h]+。[3510]步骤9：7-(4-甲氧基苄基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑[1,2-a]吡咯[3,2-c]吡啶[3511][3512]在25℃下，向1-(4-甲氧基苄基)-3-甲基-3-(三氟甲基)-2,3-二氢-1h-吡咯并[3,2-c]吡啶-4-胺(160mg，474.3μmol)于二氯甲烷(30ml)中的搅拌溶液中加入1-溴丙烷-2-酮(1.95g，14.2mmol)。将混合物在25℃下搅拌4小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用90％乙酸乙酯和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的7-(4-甲氧基苄基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑[1,2-a]吡咯[3,2-c]吡啶(70mg，39％产率)。lc-ms:m/z376[m+h]+。[3513]步骤10：2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-a]吡咯并[3,2-c]吡啶[3514][3515]将7-(4-甲氧基苄基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑[1,2-a]吡咯[3,2-c]吡啶(70mg，186.4μmol)于tfa(5ml)中的混合物在40℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩。将残留物通过制备型hplc进行纯化。将收集的级分合并，并在真空下浓缩，以得到呈灰白色固体的2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-a]吡咯并[3,2-c]吡啶(15mg，31％产率)。lc-ms:m/z256[m+h]+。[3516]步骤11：n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-a]吡咯并[3,2-c]吡啶-7-甲酰胺[3517][3518]在0℃下，向5-氯-6-(三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；14mg，70.5μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入三光气(10mg，35.2μmol)和tea(9mg，88.1μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-a]吡咯并[3,2-c]吡啶(15mg，58.7μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(59mg，587.7μmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(14mg，117.5μmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将反应混合物用水(10ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-2,9-二甲基-9-(三氟甲基)-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-a]吡咯并[3,2-c]吡啶-7-甲酰胺(11.4mg，40％产率)。[3519]实例193：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.50(br,1h),8.76(d,j＝2.4hz,1h),8.49(d,j＝2.4hz,1h),8.48(s,1h),8.17(s,2h),7.66-7.71(m,2h),4.70(d,j＝11.6hz,1h),4.19(d,j＝11.6hz,1h),2.32(s,3h),1.90(s,3h)。lc-ms:m/z477[m+h]+。[3520]方法n6[3521][3522]实例194和195：由含有(s)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[3523]步骤1：2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[3524][3525]向3-乙基-1h-吡唑-5-胺(56mg，511.9μmol)于甲苯(10ml)中的搅拌溶液中加入乙酸(1ml)和(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(方法k1步骤8；165mg，511.9μmol)。将反应混合物在120℃下搅拌12小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(10ml)稀释。用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(109mg，57％产率)。lc-ms:m/z371[m+h]+。[3526]步骤2：2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[3527][3528]向2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(102mg，275.4μmol)于二氯甲烷(5ml)中的搅拌溶液中加入tfa(1ml)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(10ml)稀释。用二氯甲烷(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(30ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(60mg，81％产率)。lc-ms:m/z271[m+h]+。[3529]步骤3：n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3530][3531]在25℃下，向2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(50mg，185μmol)和6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(方法q2步骤8；48mg，277.5μmol)于二噁烷(5ml)中的搅拌溶液中加入dppa(101mg，370μmol)和tea(94mg，925.1μmol)。将所得混合物在100℃下搅拌2小时。将反应冷却至25℃。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用水(10ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(32mg，35％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.86(br,1h),9.51(d,j＝2.4hz,1h),9.23(s,1h),8.22(d,j＝2.4hz,1h),7.24(t,j＝54.3hz,1h),6.74(s,1h),4.84(d,j＝11.4hz,1h),4.29(d,j＝11.4hz,1h),2.84(q,j＝7.8hz,2h),2.01(s,3h),1.30(t,j＝7.5hz,3h)。lc-ms:m/z442[m+h]+。[3532]步骤4：分离对映异构体以获得(s)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3533][3534]对n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-2-乙基-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(30mg，68.0μmol)进行手性hplc：色谱柱：chiralpakia，2x25cm，5μm；流动相a：hex(0.1％fa)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在36分钟内，5b到5b；220/254nm；rt1:35.529；rt2:43.483；注射体积：0.7ml；运行次数：4。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例194(2.3mg，3％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例195(2.4mg，3％产率)。实例194和195是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[3535]实例194：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.43(s,1h),9.26(s,1h),8.20(s,1h),7.20(t,j＝54.4hz,1h),6.72(s,1h),4.82(d,j＝11.6hz,1h),4.27(d,j＝11.6hz,1h),2.83(q,j＝7.6hz,2h),2.00(s,3h),1.30(t,j＝7.6hz,3h)。lc-ms:m/z442[m+h]+。[3536]实例195：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.42(s,1h),9.26(s,1h),8.20(s,1h),7.19(t,j＝54.8hz,1h),6.72(s,1h),4.82(d,j＝11.6hz,1h),4.27(d,j＝11.6hz,1h),2.81(q,j＝7.2hz,2h),2.00(s,3h),1.30(t,j＝7.6hz,3h)。lc-ms:m/z442[m+h]+。[3537]方法o6[3538][3539]实例196和197：由含有(s)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[3540]步骤1：5,5,5-三氟-3-氧代戊腈[3541][3542]在氮气气氛下在-78℃下，向2-氰基乙酸(3.5g，40.9mmol)和2,2'-联吡啶(32mg，204.8μmol)于四氢呋喃(120ml)中的搅拌溶液中逐滴加入n-buli(32.8ml，82.0mmol，2.5m，于四氢呋喃中)。将反应混合物在-10℃下搅拌15分钟。然后在-78℃下，向该混合物中逐滴加入3,3,3-三氟丙酰氯(3.1g，20.4mmol)。将反应混合物在-78℃下搅拌3小时。在-78℃下将反应混合物用水(400ml)淬灭。向该溶液中加入hcl(50ml，1m)。用乙酸乙酯(3x500ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用83％石油醚和17％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈红色固体的5,5,5-三氟-3-氧代戊腈(2.2g，67％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:3.66(s,2h),3.48(q,j＝9.9hz,2h)。lc-ms:m/z152[m+h]+。[3543]步骤2：3-(2,2,2-三氟乙基)-1h-吡唑-5-胺[3544][3545]向5,5,5-三氟-3-氧代戊腈(500mg，3.3mmol)于乙醇(10ml)中的搅拌溶液中加入水合肼(497mg，9.9mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌16小时。将混合物冷却至25℃。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色固体的3-(2,2,2-三氟乙基)-1h-吡唑-5-胺(260mg，43％产率)。lc-ms:m/z166[m+h]+。[3546]步骤3：8-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[3547][3548]向3-(2,2,2-三氟乙基)-1h-吡唑-5-胺(200mg，1.2mmol)于甲苯(10ml)中的搅拌溶液中加入乙酸(1ml)和(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-甲基-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(方法k1步骤8；558mg，1.2mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌16小时。将混合物冷却至25℃。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(40ml)稀释。用乙酸乙酯(3x40ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色固体的8-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(380mg，70％产率)。lc-ms:m/z425[m+h]+。[3549]步骤4：8-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[3550][3551]向8-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(300mg，706.9μmol)于二氯甲烷(6ml)中的搅拌溶液中加入tfa(2.5ml)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将所得溶液在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(40ml)稀释。用二氯甲烷(3x40ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用99％二氯甲烷和1％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的8-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(220mg，91％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:8.35(s,1h),6.72(s,1h),5.91(br,1h),3.81-3.92(m,3h),3.58(d,j＝11.7hz,1h),1.84(s,3h)。lc-ms:m/z325[m+h]+。[3552]步骤5：n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3553][3554]在25℃下，向8-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶于二噁烷(6ml)中的搅拌溶液中加入6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(方法q2步骤8；54mg，308.4μmol)、tea(156mg，1.5mmol)和dppa(102mg，370μmol)。将反应混合物在100℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至25℃，并将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到粗产物。对粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(60mg，39％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.90(br,1h),9.50(d,j＝2.4hz,1h),9.33(s,1h),8.22(d,j＝2.4hz,1h),7.24(t,j＝54.4hz,1h),6.92(s,1h),4.86(d,j＝11.6hz,1h),4.31(d,j＝11.6hz,1h),3.97(q,j＝11.2hz,2h),2.01(s,3h)。lc-ms:m/z496[m+h]+。[3555]步骤6：分离对映异构体以获得(s)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3556][3557]对n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(50mg，100.9μmol)进行手性hplc纯化：色谱柱：chiralpakih，2x25cm，5μm；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在19分钟内，20b到20b；220/254nm；rt1:10.496；rt2:12.863；注射体积：0.5ml；运行次数：5。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例196(11mg，23％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例197(15mg，30％产率)。实例196和197是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[3558]实例196：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.91(br,1h),9.52(d,j＝2.4hz,1h),9.33(s,1h),8.23(d,j＝2.4hz,1h),7.25(t,j＝54.3hz,1h),6.92(s,1h),4.87(d,j＝11.7hz,1h),4.32(d,j＝11.7hz,1h),3.97(q,j＝11.4hz,2h),2.02(s,3h)。lc-ms:m/z496[m+h]+。[3559]实例197：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.91(br,1h),9.52(d,j＝2.4hz,1h),9.33(s,1h),8.23(d,j＝2.4hz,1h),7.25(t,j＝54.3hz,1h),6.92(s,1h),4.87(d,j＝11.4hz,1h),4.32(d,j＝11.4hz,1h),3.97(q,j＝11.4hz,2h),2.02(s,3h)。lc-ms:m/z496[m+h]+。[3560]方法p6[3561][3562]实例198：(r)-2-氯-n-(4-(二氟甲氧基)-6-(((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3563]步骤1：(r)-2-氯-n-(4-(二氟甲氧基)-6-(((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3564][3565]在0℃下，向(r)-2-氯-n-(4-(二氟甲氧基)-6-(((s)-吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(实例133；9mg，16.4μmol)于甲醇(0.5ml)中的搅拌溶液中加入乙酸(5μl)和甲醛(4μl，19μmol，40％，于水中)。将混合物在0℃下搅拌10分钟。然后在0℃下加入氰基硼氢化钠(3mg，41μmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-2-氯-n-(4-(二氟甲氧基)-6-(((s)-1-甲基吡咯烷-3-基)氧基)吡啶-2-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(4.1mg，44％产率)。实例198的相对于与三氟甲基连接的手性中心的对应的差向异构体可以使用实例133的差向异构体类似地制备。[3566]实例198：1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:9.41(s,1h),7.51(d,j＝1.2hz,1h),6.76(s,1h),6.66(t,j＝72.4hz,1h),6.21(d,j＝1.6hz,1h),5.53(s,1h),4.67(d,j＝10.8hz,1h),4.11(d,j＝10.8hz,1h),3.30-3.77(m,1h),2.91-3.32(m,3h),2.71(s,3h),2.43-2.54(m,1h),2.06-2.23(m,1h),2.08(s,3h)。lc-ms:m/z562[m+h]+。[3567]方法q6[3568][3569]实例199和200：由含有(s)-2-(二氟甲氧基)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-(二氟甲氧基)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[3570]步骤1：2-(5-羟基-1h-吡唑-3-基)异二氢吲哚-1,3-二酮[3571][3572]在25℃下，向5-氨基-1h-吡唑-3-醇(10.0g，100.9mmol)于乙酸(250ml)中的搅拌混合物中分份加入异苯并呋喃-1,3-二酮(15.0g，101.3mmol)。将所得混合物在130℃下搅拌1小时。将反应冷却至25℃。收集沉淀的固体，以得到呈黄色固体的2-(5-羟基-1h-吡唑-3-基)异二氢吲哚-1,3-二酮(18.6g，82％产率)。lc-ms:m/z230[m+h]+。[3573]步骤2：5-(二氟甲氧基)-1h-吡唑-3-胺甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(187mg，92％产率)。lc-ms:m/z309[m+h]+。[3582]步骤5：2-(二氟甲氧基)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3583][3584]在25℃下，向2-(二氟甲氧基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(103mg，334.2μmol)和6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(方法q2步骤8；70mg，401.0μmol)于二噁烷(5ml)中的搅拌溶液中加入dppa(138mg，501.3μmol)和tea(169mg，1.7mmol)。将所得混合物在100℃下搅拌2小时。将反应冷却至25℃。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用水(10ml)稀释并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的2-(二氟甲氧基)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(24mg，15％产率)。lc-ms:m/z480[m+h]+。[3585]步骤6：分离对映异构体以获得(s)-2-(二氟甲氧基)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-(二氟甲氧基)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3586][3587]对2-(二氟甲氧基)-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(24mg，50.0μmol)进行手性hplc：色谱柱：chiralartcellulose-sb，2*25cm，5μm；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在15分钟内，20％b到20％b；波长：220/254nm；rt1(分钟)：10.623；rt2(分钟)：13.043；样品溶剂：etoh‑‑hplc；注射体积：1ml；运行次数：2。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例199(6.4mg，4％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例200(6.1mg，4％产率)。实例199和200是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[3588]实例199：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.91(s,1h),9.50(s,1h),9.31(s,1h),8.21(s,1h),7.54(t,j＝72.6hz,1h),7.24(t,j＝54.0hz,1h),6.67(s,1h),4.86(d,j＝11.4hz,1h),4.30(d,j＝11.4hz,1h),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z480[m+h]+。[3589]实例200：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.90(s,1h),9.50(s,1h),9.30(s,1h),8.21(s,1h),7.54(t,j＝72.9hz,1h),7.24(t,j＝54.0hz,1h),6.65(s,1h),4.86(d,j＝11.4hz,1h),4.30(d,j＝11.4hz,1h),1.97(s,3h)。lc-ms:m/z480[m+h]+。[3590]方法r6[3591][3592]实例201：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-羟基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3593]步骤1：4-(苄氧基)-3-((三乙基甲硅烷基)氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[3594][3595]在0℃下，向4-(苄氧基)-3-羟基-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(方法t4步骤3；7.1g，19mmol)于四氢呋喃(140ml)中的溶液中加入nah(1.5g，39mmol，60％，于矿物油中)。将反应混合物在0℃下搅拌0.5小时。在0℃下，向混合物中加入氯代三乙基硅烷(4.4g，29mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌3小时。通过加入水(200ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(200ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用70％石油醚和30％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的4-(苄氧基)-3-((三乙基甲硅烷基)氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(7g，59％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:7.24-7.39(m,5h),4.57(s,2h),4.22-4.28(m,1h),3.64-3.69(m,1h),3.55-3.59(m,1h),3.38-3.41(m,1h),3.18-3.23(m,1h),1.37(s,9h),0.86(t,j＝8.0hz,9h),0.50-0.64(m,6h)。lc-ms:m/z476[m+h]+。[3596]步骤2：4-羟基-3-((三乙基甲硅烷基)氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[3597][3598]向4-(苄氧基)-3-((三乙基甲硅烷基)氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(12g，25.2mmol)于甲醇(240ml)中的溶液中加入pd(oh)2/c(6g，20％)。将反应混合物在氢气气氛下在25℃下搅拌16小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的4-羟基-3-((三乙基甲硅烷基)氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(7g，72％产率)。lc-ms:m/z386[m+h]+。[3599]步骤3：4-氧代-3-((三乙基甲硅烷基)氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[3600][3601]向4-羟基-3-((三乙基甲硅烷基)氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(6g，15.5mmol)于二氯甲烷(100ml)中的溶液中加入戴斯-马丁高碘烷(33g，77.8mmol)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用饱和nahco3水溶液(200ml)稀释。用二氯甲烷(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的4-氧代-3-((三乙基甲硅烷基)氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.6g，26％产率)。lc-ms:m/z384[m+h]+。[3602]步骤4：(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-3-氧代-4-((三乙基甲硅烷基)氧基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[3603][3604]将4-氧代-3-((三乙基甲硅烷基)氧基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.6g，4.2mmol)于dmf-dma(30ml)中的溶液在35℃下搅拌3小时。将混合物冷却至25℃。将所得溶液在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-3-氧代-4-((三乙基甲硅烷基)氧基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.6g，粗品)，其无需进一步纯化即可直接使用。lc-ms:m/z439[m+h]+。[3605]步骤5：2-氯-8-((三乙基甲硅烷基)氧基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[3606][3607]向(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-3-氧代-4-((三乙基甲硅烷基)氧基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.6g，3.6mmol)于甲苯(30ml)中的溶液中加入3-氯-1h-吡唑-5-胺(420mg，3.6mmol)和乙酸(3ml)。将所得混合物在95℃下搅拌16小时。将混合物冷却至25℃。将所得溶液在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(100ml)稀释。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用80％石油醚和20％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-氯-8-((三乙基甲硅烷基)氧基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(200mg，11％产率)。lc-ms:m/z493[m+h]+。[3608]步骤6：2-氯-8-((三乙基甲硅烷基)氧基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[3609][3610]向2-氯-8-((三乙基甲硅烷基)氧基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(200mg，405μmol)于乙酸乙酯(4ml)中的溶液中加入hcl(2ml，4.0m，于乙酸乙酯中)。将所得混合物在25℃下搅拌16小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(50ml)稀释。用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的2-氯-8-((三乙基甲硅烷基)氧基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(66mg，41％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:8.33(s,1h),6.73(s,1h),4.06-4.14(m,1h),3.70-3.75(m,1h),0.86(t,j＝7.8hz,9h),0.37-0.46(m,6h)。lc-ms:m/z393[m+h]+。[3611]步骤7：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-((三乙基甲硅烷基)氧基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3612][3613]向5-氯-6-(三唑-2-基)吡啶-3-胺(方法a1步骤2；34mg，175μmol)于四氢呋喃(3ml)中的溶液中加入三光气(21mg，70μmol)和tea(18mg，175μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将所得滤液加入到2-氯-8-((三乙基甲硅烷基)氧基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(46mg，117μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(118mg，1.2mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(29mg，234μmol)。将混合物在40℃下搅拌16小时。通过加入水(20ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x20ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用10％甲醇和90％二氯甲烷作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-((三乙基甲硅烷基)氧基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(36mg，40％产率)。lc-ms:m/z614[m+h]+。[3614]步骤8：2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-羟基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3615][3616]向2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-((三乙基甲硅烷基)氧基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(36mg，58μmol)于四氢呋喃(3ml)中的搅拌混合物中加入四丁基氟化铵(0.29ml，290μmol，1m，于四氢呋喃中)。将所得混合物在25℃下搅拌2小时。通过加入水(20ml)来淬灭反应混合物。用乙酸乙酯(3x20ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用饱和nh4cl水溶液(3x20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的2-氯-n-(5-氯-6-(2h-1,2,3-三唑-2-基)吡啶-3-基)-8-羟基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(5.3mg，18％产率)。[3617]实例201：1hnmr(400mhz,甲醇-d4)δ:9.48(s,1h),8.71(d,j＝2.4hz,1h),8.55(d,j＝2.4hz,1h),8.02(s,2h),6.84(s,1h),4.81(d,j＝12hz,1h),4.34-4.38(m,1h)；lc-ms:m/z500[m+h]+。[3618]方法s6[3619][3620]实例202：(r)-n-(5-氯-6-(1h-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3621]步骤1：3-氯-5-硝基-2-(1h-1,2,4-三唑-1-基)吡啶[3622][3623]向2,3-二氯-5-硝基吡啶(1.0g，5.1mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(10ml)中的搅拌溶液中加入1h-1,2,4-三唑(465mg，6.7mmol)和cs2co3(3.4g，10.4mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭。用二氯甲烷(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(300ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的3-氯-5-硝基-2-(1h-1,2,4-三唑-1-基)吡啶(800mg，68％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.37(d,j＝2.0hz,1h),9.28(s,1h),9.13(d,j＝2.0hz,1h),8.42(s,1h)。[3624]步骤2：5-氯-6-(1h-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-3-胺[3625][3626]在25℃下，向3-氯-5-硝基-2-(1h-1,2,4-三唑-1-基)吡啶(300mg，1.3mmol)于乙醇(3ml)和水(1ml)中的搅拌混合物中加入fe(148mg，2.6mmol)和nh4cl(142mg，2.6mmol)。将所得混合物在85℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至25℃。将反应混合物过滤，并将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用40％石油醚和60％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的5-氯-6-(1h-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-3-胺(120mg，46％产率)。lc-ms:m/z196[m+h]+。[3627]步骤3：(r)-n-(5-氯-6-(1h-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3628][3629]在25℃下，向5-氯-6-(1h-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-3-胺(18mg，92.4μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌混合物中加入三光气(13mg，46.1μmol)和tea(15mg，153.7μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到(r)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(方法k3异构体2；220mg，76.8μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。向该溶液中加入tea(77mg，768.6μmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(18mg，153.7μmol)。将反应混合物在40℃下搅拌2小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-n-(5-氯-6-(1h-1,2,4-三唑-1-基)吡啶-3-基)-2-氟-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(14mg，38％产率)。实例202的对应的对映异构体可以使用方法k3异构体1类似地制备。[3630]实例202：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.66(br,1h),9.33(s,1h),9.05(s,1h),8.70(s,1h),8.47(d,j＝2.1hz,1h),8.28(s,1h),6.68(d,j＝5.7hz,1h),4.82(d,j＝11.4hz,1h),4.27(d,j＝11.4hz,1h),1.95(s,3h)。lc-ms:m/z482[m+h]+。[3631]方法t6(dba)3(85mg，82.4μmol)、xantphos(48mg，82.4μmol)和cs2co3(269mg，824.4μmol)。将所得混合物在100℃下搅拌12小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物用水(10ml)稀释，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的氮杂环丁烷-1-基(3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)甲酮(80mg，74％产率)。lc-ms:m/z392[m+h]+。[3640]步骤3：(5-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)(氮杂环丁烷-1-基)甲酮[3641][3642]向氮杂环丁烷-1-基(3-(二氟甲基)-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)甲酮(80mg，204.4μmol)于二氯甲烷(5ml)中的搅拌混合物中加入tfa(1ml)。将所得混合物在25℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(10ml)稀释。用二氯甲烷(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用90％二氯甲烷和10％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的(5-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)(氮杂环丁烷-1-基)甲酮(40mg，86％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ7.95(d,j＝2.4hz,1h),7.54(t,j＝56.0hz,1h),7.19(d,j＝2.4hz,1h),6.16(br,2h),4.32-4.40(m,2h),3.94-4.01(m,2h),2.13-2.23(m,2h)。lc-ms:m/z228[m+h]+。[3643]步骤4：(r)-n-(6-(氮杂环丁烷-1-羰基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3644][3645]向(5-氨基-3-(二氟甲基)吡啶-2-基)(氮杂环丁烷-1-基)甲酮(40mg，176.1μmol)于四氢呋喃(2ml)中的搅拌溶液中加入三光气(31mg，105.6μmol)和tea(27mg，264.1μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌1小时，然后过滤。将滤液加入到方法m1异构体2(58mg，211.3μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(43mg，352.1μmol)和tea(178mg，1.8mmol)。将混合物在40℃下搅拌3小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的(r)-n-(6-(氮杂环丁烷-1-羰基)-5-(二氟甲基)吡啶-3-基)-2-氯-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(60mg，26％产率)。lc-ms:m/z479[m+h]+。[3653]步骤2：分离对映异构体以获得(s)-2-氯-n-(5-氯-6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3654][3655]对2-氯-n-(5-氯-6-(二氟甲氧基)吡啶-3-基)-8-(二氟甲基)-8-甲基-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(50mg，104.3μmol)进行手性hplc：色谱柱：chiralpakia，5x25cm，5um；流动相a：hex(0.5％2mnh3-meoh)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在18分钟内，10b到10b；220/254nm；rt1:15.075；rt2:23.483；注射体积：0.5ml；运行次数：16。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干以得到呈灰白色固体的实例204(14.2mg，28％产率)，并将第二个洗脱异构体浓缩并冻干以得到呈灰白色固体的实例205(15.4mg，30％产率)。实例204和205是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[3656]实例204：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.32(s,1h),9.28(br,1h),8.37(d,j＝2.4hz,1h),8.33(d,j＝2.4hz,1h),7.70(t,j＝72.0hz,1h),7.01(s,1h),6.78(t,j＝56.0hz,1h),4.62(d,j＝10.8hz,1h),4.12(d,j＝10.8hz,1h),1.78(s,3h)。lc-ms:m/z479[m+h]+。[3657]实例205：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.32(s,1h),9.28(br,1h),8.37(d,j＝2.4hz,1h),8.33(d,j＝2.4hz,1h),7.70(t,j＝72.0hz,1h),7.01(s,1h),6.78(t,j＝56.0hz,1h),4.62(d,j＝10.8hz,1h),4.12(d,j＝10.8hz,1h),1.78(s,3h)。lc-ms:m/z479[m+h]+。[3658]方法v6[3659][3660]实例206：n-(5-氯-6-(二甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺[3661]步骤1：n-(5-氯-6-(二甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺[3662][3663]向5-氨基-3-氯-n,n-二甲基吡啶酰胺(方法j4步骤4；7mg，34.6μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌溶液中加入三光气(6mg，20.7μmol)和tea(5mg，51.9μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪(方法s4步骤10；7mg，34.6μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(8mg，69.2μmol)和tea(35mg，346.1μmol)。将反应混合物在40℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的n-(5-氯-6-(二甲基氨基甲酰基)吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺(7mg，51％产率)。[3664]实例206：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.24(br,1h),9.13(s,1h),8.74(d,j＝2.0hz,1h),8.29(d,j＝2.0hz,1h),7.97(s,1h),4.08(s,2h),3.02(s,3h),2.78(s,3h),2.37(s,3h),1.60(s,6h)。lc-ms:m/z428[m+h]+。[3665]方法w6[3666][3667]实例207：n-(5-氯-6-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-羰基)吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺[3668]步骤1：(5-溴-3-氯吡啶-2-基)(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲酮[3669][3670]向5-溴-3-氯吡啶甲酸(方法j4步骤1；900mg，3.8mmol)于n,n-二甲基乙酰胺(25ml)中的搅拌溶液中加入3-甲氧基氮杂环丁烷盐酸盐(949mg，4.9mmol)、hobt(669mg，4.9mmol)、edci(950mg，4.9mmol)和diea(1.5g，11.4mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(200ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x200ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(3x500ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的(5-溴-3-氯吡啶-2-基)(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲酮(900mg，73％产率)。1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.72(d,j＝2.0hz,1h),8.50(d,j＝2.0hz,1h),4.23-4.29(m,2h),4.12-4.17(m,1h),3.77-3.93(m,2h),3.20(s,3h)。lc-ms:m/z305[m+h]+。[3671]步骤2：(3-氯-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲酮[3672][3673]在氮气气氛下，向(5-溴-3-氯吡啶-2-基)(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲酮(600mg，2.0mmol)于二噁烷(18ml)中的搅拌溶液中加入二苯基甲亚胺(534mg，2.9mmol)、pd2(dba)3(203mg，196.1μmol)、xantphos(114mg，196.4μmol)和cs2co3(1.9g，5.9mmol)。将反应混合物在100℃下搅拌2小时。将反应混合物冷却至25℃。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物用水(50ml)稀释并用乙酸乙酯(3x50ml)萃取。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用98％二氯甲烷和2％甲醇作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈棕色油状物的(3-氯-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲酮(500mg，56％产率)。lc-ms:m/z406[m+h]+。[3674]步骤3：(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲酮[3675][3676]向(3-氯-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲酮(400mg，985.5μmol)于甲醇(12ml)中的搅拌溶液中加入羟胺盐酸盐(171mg，2.5mmol)和乙酸钠(242mg，2.9mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲酮(200mg，75％产率)。lc-ms:m/z242[m+h]+。[3677]步骤4：n-(5-氯-6-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-羰基)吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺[3678][3679]向(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-基)甲酮(11mg，44.5μmol)于四氢呋喃(1ml)中的搅拌溶液中加入三光气(7mg，22.2μmol)和tea(6mg，55.6μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将滤液加入到2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪(方法s4步骤10；7mg，37.1μmol)于四氢呋喃(1ml)中的溶液中。向该溶液中加入n,n-二甲基吡啶-4-胺(9mg，74.2μmol)和tea(38mg，370.8μmol)。将混合物在40℃下搅拌1小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的n-(5-氯-6-(3-甲氧基氮杂环丁烷-1-羰基)吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺(6mg，36％产率)。[3680]实例207：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.29(br,1h),9.12(s,1h),8.74(d,j＝2.0hz,1h),8.29(d,j＝2.0hz,1h),7.97(s,1h),4.18-4.27(m,3h),4.08(s,2h),3.84-3.89(m,2h),3.21(s,3h),2.37(s,3h),1.60(s,6h)。lc-ms:m/z470[m+h]+。[3681]方法x6[3682][3683]实例208：n-(5-氯-6-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺[3684]步骤1：(5-溴-3-氯吡啶-2-基)(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)甲酮[3685][3686]向5-溴-3-氯吡啶甲酸(方法j4步骤1；1.80g，7.6mmol)于n,n-二甲基乙酰胺(10ml)中的搅拌溶液中加入氮杂环丁烷-3-醇(834mg，7.6mmol)、edci(1.90g，9.9mmol)、diea(2.95g，22.8mmol)和hobt(1.34g，9.9mmol)。将混合物在25℃下搅拌16小时。将反应混合物用水(100ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得混合物。将合并的有机层用盐水(100ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的(5-溴-3-氯吡啶-2-基)(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)甲酮(800mg，36％产率)。lc-ms:m/z291[m+h]+。[3687]步骤2：(3-氯-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)甲酮[3688][3689]向(5-溴-3-氯吡啶-2-基)(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)甲酮(300mg，1.0mmol)于二噁烷(20ml)中的搅拌溶液中加入二苯基甲亚胺(223mg，1.2mmol)、xantphos(178mg，308μmol)、pd2(dba)3(188mg，205μmol)和cs2co3(1.01g，3.1mmol)。将混合物在氮气气氛下在90℃下搅拌1小时。冷却至25℃后，滤出固体。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用90％石油醚和10％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈黄色固体的(3-氯-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)甲酮(180mg，44％产率)。lc-ms:m/z392[m+h]+。[3690]步骤3：(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)甲酮[3691][3692]向(3-氯-5-((二苯基亚甲基)氨基)吡啶-2-基)(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)甲酮(180mg，459μmol)于甲醇(5ml)中的搅拌溶液中加入羟胺盐酸盐(80mg，1.1mmol)和乙酸钠(113mg，1.4mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。对残留物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分浓缩，以得到呈黄色固体的(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)甲酮(90mg，86％产率)。lc-ms:m/z228[m+h]+。[3693]步骤4：(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)氮杂环丁烷-1-基)甲酮[3694][3695]在0℃下，向(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(3-羟基氮杂环丁烷-1-基)甲酮(80mg，351μmol)于二氯甲烷(2ml)中的搅拌溶液中加入三氟甲磺酸叔丁基二甲基甲硅烷基酯(557mg，2.1mmol)和tea(213mg，2.1mmol)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈白色固体的(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)氮杂环丁烷-1-基)甲酮(95mg，79％产率)。1hnmr(300mhz,甲醇-d4)δ:7.88(d,j＝2.4hz,1h),7.08(d,j＝2.4hz,1h),4.72-4.81(m,1h),4.28-4.43(m,2h),3.88-4.05(m,2h),0.93(s,9h),0.02(s,6h)。lc-ms:m/z342[m+h]+。[3696]步骤5：n-(6-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)氮杂环丁烷-1-羰基)-5-氯吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺[3697][3698]向(5-氨基-3-氯吡啶-2-基)(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)氮杂环丁烷-1-基)甲酮(50mg，148.3μmol)于四氢呋喃(5ml)中的搅拌溶液中加入三光气(17mg，57.3μmol)和tea(15mg，148.33μmol)。将所得混合物在25℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪(方法s4步骤10；20mg，98μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(100mg，988μmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(24mg，197μmol)。将混合物在40℃下搅拌16小时。将混合物用水(10ml)淬灭，并用乙酸乙酯(3x10ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(20ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到呈黄色固体的n-(6-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)氮杂环丁烷-1-羰基)-5-氯吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺(20mg，35％产率)。lc-ms:m/z570[m+h]+。[3699]步骤6：n-(5-氯-6-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺[3700][3701]向n-(6-(3-((叔丁基二甲基甲硅烷基)氧基)氮杂环丁烷-1-羰基)-5-氯吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺(18mg，31.57μmol)于四氢呋喃(2ml)中的溶液中加入四丁基氟化铵(1ml，1m，于四氢呋喃中)。将混合物在25℃下搅拌2小时。将所得混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用使用90％二氯甲烷醚和10％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到粗产物(30mg)。对粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的n-(5-氯-6-(3-羟基氮杂环丁烷-1-羰基)吡啶-3-基)-2,9,9-三甲基-8,9-二氢-7h-咪唑并[1,2-b]吡咯并[3,2-d]哒嗪-7-甲酰胺(3.7mg，25％产率)。[3702]实例208：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.28(br,1h),9.12(s,1h),8.74(d,j＝2.4hz,1h),8.29(d,j＝2.4hz,1h),7.98(s,1h),5.82(s,1h),4.51(s,1h),4.20-4.29(m,1h),4.12-4.19(m,1h),4.08(s,2h),3.74-3.83(m,2h),2.37(s,3h),1.60(s,6h)。lc-ms:m/z456[m+h]+。[3703]方法y6[3704][3705]实例209：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3706]步骤1：3-氯-5-硝基-2-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶[3707][3708]向3-氯-5-硝基吡啶(158mg，1.0mmol)于二甲亚砜(2ml)中的搅拌混合物中加入氧杂环丁烷-3-甲酸(1.0g，10.0mmol)、吡啶甲酸(13mg，0.1mmol)、溴酸钠(300mg，2.0mmol)和七水硫酸亚铁(14mg，50μmol)。将反应混合物在氮气下在25℃下搅拌16小时，用450nmled照射。将残留物用氢氧化钠水溶液(50ml，1m)稀释，并用乙酸乙酯(3x50ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的3-氯-5-硝基-2-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶(17mg，8％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:9.39(d,j＝2.4hz,1h),8.49(d,j＝2.4hz,1h),4.95-5.15(m,4h),4.67-4.91(m,1h)。lc-ms:m/z215[m+h]+。[3709]步骤2：5-氯-6-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-3-胺[3710][3711]向3-氯-5-硝基-2-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶(70mg，326μmol)于乙醇(12ml)和水(4ml)中的溶液中加入fe(91mg，1.6mmol)、nh4cl(52mg，978μmol)。将所得混合物在80℃下搅拌1小时。将混合物冷却至25℃。过滤反应混合物，并用乙酸乙酯(3x25ml)洗涤收集的固体。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用25％石油醚和75％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的5-氯-6-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-3-胺(30mg，49％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:7.91(d,j＝3.0hz,1h),6.98(d,j＝3.0hz,1h),5.54(br,2h),4.71-4.83(m,4h),4.38-4.54(m,1h)。lc-ms:m/z185[m+h]+。[3712]步骤3：(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3713][3714]向5-氯-6-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-3-胺(32mg，173μmol)于四氢呋喃(8ml)中的搅拌溶液中加入三光气(26mg，87μmol)和tea(26mg，260μmol)。将所得混合物在40℃下搅拌0.5小时，然后过滤。将所得滤液加入到方法m1异构体2(48mg，173μmol)于四氢呋喃(1.5ml)中的溶液中。然后向该溶液中加入tea(175mg，1.7mmol)和n,n-二甲基吡啶-4-胺(42mg，346μmol)。将混合物在40℃下搅拌2小时。将溶剂在真空下浓缩。将残留物通过使用使用97％二氯甲烷和3％甲醇作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到20mg粗产物。将得到的粗产物通过制备型hplc纯化法进行纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈灰白色固体的(r)-2-氯-n-(5-氯-6-(氧杂环丁烷-3-基)吡啶-3-基)-8-甲基-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(6mg，7％产率)。实例209的对映异构体可以使用方法m1异构体1类似地制备。[3715]实例209：1hnmr(400mhz,dmso-d6)δ:9.41(br,1h),9.34(s,1h),8.73(d,j＝2.0hz,1h),8.19(d,j＝2.0hz,1h),7.06(s,1h),4.80-4.95(m,5h),4.60-4.69(m,1h),4.28(d,j＝12.0hz,1h),1.98(s,3h)。lc-ms:m/z487[m+h]+。[3716]方法z6[3717][3718]实例210和211：由含有(s)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺的外消旋混合物获得的单一对映异构体[3719]步骤1：2-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)乙腈[3720][3721]向叔丁醇钾(203.81g，1.8mol)于1,2-二甲氧基-乙烷(600ml)中的溶液中加入1,2-二甲氧基-乙烷(800ml)中的甲磺酰甲基异氰化物(186.17g，953.5mmol)和1,2-二甲氧基-乙烷(600ml)中的1-甲基吡唑-4-甲醛(100g，908.1mmol)。将反应混合物在-55℃下搅拌1小时。然后将甲醇(1000ml)加入混合物中。将所得溶液在80℃下搅拌16小时。冷却至25℃后，将反应混合物浓缩，然后用水(1000ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x1000ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的2-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)乙腈(60g，54％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:7.40(s,1h),7.37(s,1h),3.86(s,3h),3.56(s,2h)。lc-ms:m/z122[m+h]+。[3722]步骤2：2-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)乙酸[3723][3724]向2-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)乙腈(70g，577.8mmol)于水(200ml)中的溶液中加入水(200ml)中的氢氧化钠(115.56g，2.9mol)。将所得溶液在100℃下搅拌2小时。冷却至25℃后，将反应混合物用乙酸乙酯(2x300ml)洗涤。用hcl(1m)将水层的ph调整到3-4。用乙酸乙酯(6x500ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩，以得到呈黄色固体的2-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)乙酸(55g，68％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:12.25(br,1h),7.55(s,1h),7.29(s,1h),3.78(s,3h),3.39(s,2h)。lc-ms:m/z141[m+h]+。[3725]步骤3：n-苄基-n-(2-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)乙酰基)甘氨酸乙酯[3726][3727]向2-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)乙酸(50g，356.8mmol)于乙腈(1000ml)中的溶液中加入苄基甘氨酸乙酯(68.95g，356.8mmol)、tcfh(150.16g，535.2mmol)和nmi(87.88g，1.0mol)。将所得溶液在25℃下搅拌1小时。将反应混合物浓缩，然后用水(1000ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x1000ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过制备型hplc进行纯化，并将收集的级分浓缩，以得到呈黄色油状物的n-苄基-n-(2-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)乙酰基)甘氨酸乙酯(100g，88％产率)。lc-ms:m/z316[m+h]+。[3728]步骤4：1-苄基-3-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡咯烷-2,4-二酮[3729][3730]在0℃下，向氢化钠(4.57g，114.15mmol，60％纯度)于四氢呋喃(600ml)中的溶液中逐滴加入四氢呋喃(100ml)中的n-苄基-n-(2-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)乙酰基)甘氨酸乙酯(30g，95.13mmol)。将所得混合物在75℃下搅拌16小时。冷却至25℃后，将反应混合物用水(500ml)淬灭。将所得溶液在真空下浓缩以去除四氢呋喃。用hcl(1m)将ph调整到6。通过过滤收集固体，以得到呈白色固体的1-苄基-3-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡咯烷-2,4-二酮(16.5g，64％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:11.43(br,1h),8.01(s,1h),7.83(s,1h),7.21-7.38(m,5h),4.54(s,2h),3.85(s,3h),3.81(s,2h)。lc-ms:m/z270[m+h]+。[3731]步骤5：1-苄基-3-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-2,4-二酮[3732][3733]在0℃下，向1-苄基-3-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)吡咯烷-2,4-二酮(75g，278.5mmol)于n,n-二甲基甲酰胺(1000ml)中的搅拌溶液中分批加入氢化钠(12.25g，306.3mmol，60％，于矿物油中)。将反应混合物在25℃下搅拌0.5小时。在-55℃下分批加入三氟甲磺酸5-(三氟甲基)-5h-二苯并[b,d]噻吩-5-鎓酯(112.33g，278.5mmol)。将反应混合物在-55℃下搅拌1小时，并在25℃下再搅拌1小时。将反应混合物用水(5000ml)淬灭。用乙酸乙酯(3x5000ml)萃取所得溶液。将合并的有机层用盐水(3x5000ml)洗涤，经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用10％石油醚和90％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈淡黄色油状物的1-苄基-3-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-2,4-二酮(2.2g，2％产率)。1hnmr(400mhz,氯仿-d)δ:7.78(s,1h),7.76(s,1h),7.33-7.45(m,3h),7.25-7.27(m,2h),4.85(d,j＝14.8hz,1h),4.63(d,j＝14.8hz,1h),3.94(s,3h),3.91(d,j＝18.0hz,0.5h),3.79(d,j＝18.0hz,0.5h)。lc-ms:m/z338[m+h]+。[3734]步骤6：1-苄基-4-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇[3735][3736]在0℃下，向1-苄基-3-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-2,4-二酮(2.5g，7.4mmol)于四氢呋喃(120ml)中的搅拌混合物中分批加入lialh4(898mg，23.7mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至0℃。在搅拌的同时，加入水(900mg)和naoh水溶液(10％，900mg)，然后加入水(900mg)。将所得混合物过滤并在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的1-苄基-4-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇(2g，粗品)。lc-ms:m/z326[m+h]+。[3737]步骤7：4-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇[3738][3739]向1-苄基-4-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇(2g，6.15mmol)于乙醇(100ml)中的搅拌混合物中分批加入hcl(1n，2ml)和pd/c(2g，10％)。将反应混合物在氢气下在25℃下搅拌12小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩，以得到呈黄色固体的4-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇(1.7g，粗品)。lc-ms:m/z236[m+h]+。[3740]步骤8：4-羟基-3-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[3741][3742]向4-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-(三氟甲基)吡咯烷-3-醇(1.7g，7.2mmol)于四氢呋喃(100ml)中的搅拌混合物中加入tea(3.66g，36.1mmol)和(boc)2o(2.37g，10.8mmol)。将反应混合物在25℃下搅拌2小时。将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用10％石油醚和90％乙酸乙酯作为洗脱剂的硅胶柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色油状物的4-羟基-3-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.2g，50％，三步)。lc-ms:m/z336[m+h]+。[3743]步骤9：3-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[3744][3745]向4-羟基-3-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(1.2g，3.6mmol)于二氯甲烷(150ml)中的搅拌混合物中加入硅胶(770mg)和pcc(771mg，3.6mmol)。将反应混合物在40℃下搅拌12小时。将固体滤出。将滤液在真空下浓缩。将残留物通过使用60％石油醚和40％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈无色油状物的3-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(420mg，35％产率)。lc-ms:m/z334[m+h]+。[3746]步骤10：(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯[3747][3748]将3-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-4-氧代-3-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(300mg，900.0μmol)于dmf-dma(1ml)中的混合物在35℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩，以得到呈黄色油状物的(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(400mg，粗品)。lc-ms:m/z389[m+h]+。[3749]步骤11：2-氯-8-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯[3750][3751]向(e)-2-((二甲基氨基)亚甲基)-4-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-3-氧代-4-(三氟甲基)吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(400mg，1.0mmol)于甲苯(5ml)中的搅拌溶液中加入乙酸(0.5ml)和3-氯-1h-吡唑-5-胺(121mg，1.0mmol)。将反应混合物在110℃下搅拌12小时。冷却至25℃后，将混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(80ml)稀释。用乙酸乙酯(3x100ml)萃取所得溶液。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的2-氯-8-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(80mg，20％，两步产率)。lc-ms:m/z443[m+h]+。[3752]步骤12：2-氯-8-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶[3753][3754]向2-氯-8-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酸叔丁酯(80mg，180.6μmol)于二氯甲烷(5ml)中的搅拌溶液中加入tfa(2ml)。将反应混合物在25℃下搅拌1小时。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物用饱和nahco3水溶液(40ml)稀释。用乙酸乙酯(3x40ml)萃取所得混合物。将合并的有机层经无水硫酸钠干燥，并在真空下浓缩。将残留物通过使用95％二氯甲烷和5％甲醇作为洗脱剂的柱色谱法进行纯化，以得到呈黄色固体的2-氯-8-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(50mg，80％产率)。1hnmr(300mhz,氯仿-d)δ:8.32(s,1h),7.82(s,1h),7.56(s,1h),6.71(s,1h),4.31(d,j＝11.4hz,1h),4.10(d,j＝11.4hz,1h),3.91(s,3h)。lc-ms:m/z343[m+h]+。[3755]步骤13：2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3756][3757]向2-氯-8-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶(60mg，175.1μmol)和6-(二氟甲基)哒嗪-4-甲酸(方法q2步骤8；45mg，262.6μmol)于二噁烷(1ml)中的搅拌溶液中加入tea(53mg，525.2μmol)和dppa(51mg，210.1μmol)。将反应混合物在110℃下搅拌2小时。冷却至25℃后，将混合物在真空下浓缩。将残留物通过使用50％石油醚和50％乙酸乙酯作为洗脱剂的制备型tlc进行纯化，以得到80mg粗产物。对粗产物进行制备型hplc纯化，并将收集的级分冻干，以得到呈白色固体的2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(53mg，58％产率)。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:9.93(br,1h),9.50(d,j＝2.1hz,1h),9.41(s,1h),8.20(d,j＝2.1hz,1h),7.99(s,1h),7.66(s,1h),7.25(t,j＝54.3hz,1h),7.11(s,1h),5.00(d,j＝11.7hz,1h),4.79(d,j＝11.1hz,1h),3.62(s,3h)。lc-ms:m/z514[m+h]+。[3758]步骤14：分离对映异构体以获得(s)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺和(r)-2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺[3759][3760]对2-氯-n-(6-(二氟甲基)哒嗪-4-基)-8-(1-甲基-1h-吡唑-4-基)-8-(三氟甲基)-7,8-二氢-6h-吡唑并[1,5-a]吡咯并[2,3-e]嘧啶-6-甲酰胺(50mg，97.3μmol)进行手性hplc：色谱柱：chiralartcellulose-sc，2x25cm，5μm；流动相a：hex(0.1％fa)‑‑hplc，流动相b：etoh‑‑hplc；流速：20毫升/分钟；梯度：在13.25分钟内，30％b到30％b；波长：220/254nm；rt1(分钟)：9.79；rt2(分钟)：12.16；样品溶剂：meoh:dcm＝1:1；注射体积：1ml；运行次数：3。将第一个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例210(18.0mg，36％产率)。将第二个洗脱异构体浓缩并冻干，以得到呈白色固体的实例211(17.3mg，34％产率)。实例210和211是对映异构体，但它们的绝对立体化学性质尚不清楚。[3761]实例210：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:10.01(br,1h),9.42-9.44(m,2h),8.19(d,j＝2.4hz,1h),7.98(s,1h),7.66(s,1h),7.22(t,j＝54.3hz,1h),7.09(s,1h),5.00(d,j＝11.7hz,1h),4.75(d,j＝11.4hz,1h),3.82(s,3h)。lc-ms:m/z514[m+h]+。[3762]实例211：1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ:10.01(br,1h),9.42-9.45(m,2h),8.19(d,j＝2.4hz,1h),7.99(s,1h),7.66(s,1h),7.22(t,j＝54.3hz,1h),7.09(s,1h),5.00(d,j＝11.7hz,1h),4.75(d,j＝11.7hz,1h),3.82(s,3h)。lc-ms:m/z514[m+h]+。[3763]生物测定[3764]malt1蛋白酶测定[3765]使用四肽作为底物和从杆状病毒感染的昆虫细胞中纯化的全长malt1蛋白his-malt1(1-824)在体外测定中评估malt1蛋白酶活性。四肽底物是ac-lrsr-amc(sm生化公司(smbiochemicals)，其中在约100μm下测量km。[3766]最终测定缓冲液包含1nm(测定2)或2nm(测定1)的malt1全长蛋白、50μmac-lrsr-amc底物、50mmtrisph7.5、600mm柠檬酸钠、1mmdtt、1mmedta和0.05％bsa，使用黑色微量滴定方形孔板(optiplate384-f，珀金埃尔默公司(perkinelmer))，采用384孔板格式。[3767]将测试化合物以10mm的原液溶解在100％dmso中，最终dmso浓度为0.1％。将测试化合物与malt1蛋白一起在室温下预温育2小时。预温育后加入底物，并在室温下温育8小时后，使用envision在355nm激发和460nm发射处测量荧光信号。在此期间测定信号的增加是线性的并且与酶含量的增加成正比。[3768]利用以下公式，通过使用高对照(hc，来自含有malt1蛋白、底物和dmso的孔的荧光信号的中值)和低对照(lc，来自仅含有底物的孔的荧光信号的中值)将荧光单位转换为剩余活性的百分比：[3769][3770]使用graphpadprism(美国graphpad软件公司(graphpadsoftware,inc,usa))和非线性回归分析获得ic50和希尔系数(hillcoefficient)。本文所述的某些化合物的malt1抑制ic50值提供于下表a中。[3771]人il10分泌测定[3772]il10是通过活化nf-kb信号传导来调节的细胞因子之一。例如，在abc-dlbcl细胞系中，活化的nf-kb信号传导导致il10分泌增加。已显示，nf-kb信号传导的抑制导致il10分泌减少。[3773]测定1：在96孔圆底板(corning3799，康宁公司(corning))中以每孔3x105个细胞将oci-ly10细胞接种在补充有20％胎牛血清的imem中，从10mm开始，用100nl的3倍系列化合物稀释液进行处理。所有孔中的最终媒剂浓度为0.1％dmso。温育24小时后，将细胞转移到96-pcr板(axygen：pcr-96-flt-c)并离心，然后将16μl细胞培养基转移到htrf板中，并使用人il-10测定试剂盒(cisbio)使用htrf格式测量il10水平。通过使用高对照(hc，来自含有用dmso处理的细胞的孔的信号的中值)和低对照(lc，来自没有细胞的孔的信号的中值)将信号转换为剩余活性的百分比。使用4参数曲线拟合确定ic50值(nm)，并使用graphpadprism(美国graphpad软件公司(graphpadsoftware,inc,usa))和非线性回归分析获得希尔系数。[3774]测定2：在96孔v型底细胞培养板(康宁，3894)中以每孔4.8x105个细胞/160μl将oci-ly10细胞接种在补充有20％胎牛血清的imem中，从4mm开始，用120nl的3倍系列化合物稀释液进行处理。所有孔中的最终媒剂浓度为0.075％dmso。温育24小时后，将人il-10预包被板(mesoscalediscovery)用pbst洗涤3次，将50μl培养基吸入msd板中，并在4℃下温育过夜。然后弃去上清液并用pbst将孔洗涤3次。根据mesoscaleprotocol将sulfo-tag抗人il-10抗体(50x)稀释50倍，然后加入25μl的sulfo-tag抗人il-10抗体(1x)。在室温下温育2小时后，弃去上清液并用pbst将孔洗涤3次。加入2x读取缓冲液，并在msdsectors600上读取信号。相对于dmso的影响，示出了特定化合物对il10分泌的影响；设置为100％。使用4参数曲线拟合确定ic50值(nm)。[3775]使用上述测定法的某些化合物的生物活性显示在表a中。malt1ic50和il10分泌细胞测定法ic50的范围如下：a表示ic50《10nm；b表示10nm≤ic50《100nm；c表示100nm≤ic50《1000nm；d表示ic50≥1000nm。na表示该测定未确定特定化合物的值。[3776]表a.选定的式(i)化合物的ic50值[3777][3778][3779][3780][3781][3782]当前第1页12当前第1页12









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