OGA抑制剂化合物的制作方法

医药医疗技术的改进;医疗器械制造及应用技术oga抑制剂化合物技术领域1.本发明涉及具有式(i)所示结构的o-glcnac水解酶(oga)抑制剂[0002][0003]其中这些基团如在说明书中所定义。本发明还涉及包含此类化合物的药物组合物、用于制备此类化合物和组合物的方法、以及此类化合物和组合物用于预防和治疗其中oga的抑制是有益的障碍的用途，这些障碍是例如tau蛋白病，特别是阿尔茨海默氏病或进行性核上性麻痹；和伴有tau病理学的神经退行性疾病，特别是由c9orf72突变引起的肌萎缩侧索硬化或额颞叶痴呆；或α突触核蛋白病，特别是帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、以及由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。背景技术：[0004]o-glcn酰化是蛋白质的可逆修饰，其中n-乙酰基-d-葡糖胺残基被转移至丝氨酸残基和苏氨酸残基的羟基基团，产生o-glcn酰化蛋白。已经在真核生物的胞质溶胶和细胞核中鉴定了超过1000种这样的靶蛋白。该修饰被认为调节大范围的细胞过程，包括转录、细胞骨架过程、细胞周期、蛋白酶体降解和受体信号传导。[0005]o-glcnac转移酶(ogt)和o-glcnac水解酶(oga)是描述向靶蛋白添加(ogt)或从靶蛋白去除(oga)o-glcnac的仅有的两种蛋白质。oga最初于1994年从脾脏制剂中纯化，1998年鉴定为由脑膜瘤表达的抗原，并且称为mgea5，由作为细胞胞质区室中的单体的916个氨基酸(102915道尔顿)组成。它与er相关的和高尔基体相关的糖基化过程(其对于蛋白质的运输和分泌是重要的)不同，并且不同于oga具有酸性ph最佳值，而oga在中性ph下显示出最高活性。[0006]具有双天冬氨酸催化中心的oga催化结构域位于该酶的n-末端部分，该酶的侧翼是两个柔性结构域。c-末端部分由其前面是茎结构域的推定的hat(组蛋白乙酰转移酶结构域)组成。尚未证明hat结构域具有催化活性。[0007]o-glcn酰化蛋白以及ogt和oga本身在脑和神经元中特别丰富，表明这种修饰在中枢神经系统中起重要作用。实际上，研究证实o-glcn酰化代表了促进神经元通讯、记忆形成和神经退行性疾病的关键调节机制。此外，已经显示ogt对于几种动物模型中的胚胎发生是必需的，并且ogt无效小鼠是胚胎致死的。oga对于哺乳动物的发育也是必不可少的。两项独立研究表明，oga纯合无效小鼠在出生后存活不过24-48小时。oga缺失导致幼崽中糖原动员的缺陷，并且它在源自纯合敲除胚胎的mef中导致基因组不稳定性相关的细胞周期停滞。杂合动物存活至成年期，但它们在转录和代谢方面均表现出改变。[0008]已知o-glcnac循环中的扰动影响慢性代谢疾病，例如糖尿病以及癌症。oga杂合性抑制了apc-/+小鼠癌症模型中的肠道肿瘤发生，并且oga基因(mgea5)是一种有记录的人糖尿病易感基因位点。[0009]此外，o-glcnac修饰已经在几种参与神经退行性疾病的发展和进展的蛋白质上被鉴定，并且已表明o-glcnac水平的变化与tau在阿尔茨海默氏病中形成神经原纤维缠结(nft)蛋白的相关性。此外，已经描述了帕金森病中α-突触核蛋白的o-glcn酰化(levine,pm,等人pnas[美国国家科学院院刊]2019年1月29日,第116卷,第5期,第1511-1519页；lewis,ye等人acs chem biol.[acs化学生物学]2017年4月21日,第2卷,第4期,第1020-1027页；marotta,np等人nat chem.[自然化学]2015年11月,第卷第11期,第913-20页)。[0010]在中枢神经系统中已经描述了六种tau剪接变体。tau在17号染色体上编码，并且其中在中枢神经系统中表达的最长剪接变体由441个氨基酸组成。这些同种型的不同之处在于位于微管结合结构域内的两个n-末端插入物(外显子2和3)和外显子10。在tau蛋白病中外显子10是值得考虑的目标，因为它具有多个突变，使得tau易于聚集，如下所述。tau蛋白结合并稳定神经元微管细胞骨架，这对于调节细胞器沿轴突区室的细胞内运输是重要的。因此，tau在轴突的形成和维持其完整性中起重要作用。此外，还提出了树突棘生理学中的作用。[0011]tau聚集是多种所谓的tau蛋白病的潜在原因之一，例如psp(进行性核上性麻痹)、唐氏综合征(ds)、ftld(额颞叶痴呆)、ftdp-17(伴有帕金森综合征-17的额颞痴呆)、皮克氏病(pick’s disease，pd)、cbd(皮质基底节变性)、嗜银颗粒疾病(agryophilic grain disease，agd)和ad(阿尔茨海默氏病)。此外，tau病理学伴有其他神经退行性疾病，例如由c9orf72突变引起的肌萎缩侧索硬化(als)或ftld。在这些疾病中，tau通过过度磷酸化进行翻译后修饰，这被认为是使tau从微管分离并使其易于聚集。tau的o-glcn酰化调节磷酸化的程度，因为携带o-glcnac残基的丝氨酸或苏氨酸残基不适于磷酸化。这有效地使得tau不易于从微管分离并且减少聚集成最终导致神经毒性和神经元细胞死亡的神经毒性缠结。这种机制还可以减少神经元通过脑中相互连接的回路释放的tau聚集体的细胞间扩散，最近已经讨论这会加速tau相关性痴呆的病理学。实际上，从ad患者的脑中分离的过度磷酸化的tau显示出显著降低的o-glcn酰化水平。[0012]施用于jnpl3 tau转基因小鼠的oga抑制剂成功地减少了nft形成和神经元损失而没有明显的副作用。该观察结果已在另一种tau蛋白病啮齿动物模型中得到证实，其中可诱导ftd中发现的突变tau的表达(tg4510)。oga的小分子抑制剂的给药在减少tau聚集的形成和减弱皮质萎缩和脑室扩大方面是有效的。[0013]此外，淀粉样蛋白前体蛋白(app)的o-glcn酰化有利于通过非淀粉样蛋白生成途径加工以产生可溶性app片段并避免导致ad相关淀粉样蛋白-β(aβ)形成的切割。[0014]通过抑制oga维持tau的o-glcn酰化代表了减少上述神经退行性疾病中的tau-磷酸化和tau-聚集从而减弱或阻止神经退行性tau蛋白病-疾病的进展的潜在方法。[0015]wo 2012/117219(萨米特公开有限公司(summit corp.plc.)，公开于2012年9月7日)描述了n-[[5-(羟基甲基)吡咯烷-2-基]甲基]烷基酰胺和n-烷基-2-[5-(羟基甲基)吡咯烷-2-基]乙酰胺衍生物作为oga抑制剂。[0016]wo 2014/159234(默克专利有限公司(merck patent gmbh)，公开于2014年10月2日)主要披露了在位置1处被乙酰胺基-噻唑基甲基或乙酰胺基噁唑基甲基取代基取代的4-苯基或苄基哌啶和哌嗪化合物，以及化合物n-[5-[(3-苯基-1-哌啶基)甲基]噻唑-2-基]乙酰胺；[0017]wo 2016/0300443(神经内科公司(asceneuron s.a.)，2016年3月3日公开)、wo 2017/144633和wo 2017/0114639(神经内科公司，2017年8月31日公开)披露了1,4-双取代的哌啶或哌嗪作为oga抑制剂；[0018]wo 2017/144637(神经内科公司，2017年8月31日公开)披露了，更特别地，4-取代的1-[1-(1,3-苯并二氧杂环戊烯-5-基)乙基]-哌嗪；1-[1-(2,3-二氢苯并呋喃-5-基)乙基]-；1-[1-(2,3-二氢苯并呋喃-6-基)乙基]-；和1-[1-(2,3-二氢-1,4-苯并二噁英-6-基)乙基]-哌嗪衍生物作为oga抑制剂；[0019]wo 2017/106254(默沙东公司(merck sharp&dohme corp.)描述了取代的n-[5-[(4-亚甲基-1-哌啶基)甲基]噻唑-2-基]乙酰胺；wo2018/217558(礼来公司(eli lilly and company))描述了5-甲基-1,3,4-噁二唑-2-基，并且wo 2019/178191(比金马萨诸塞州股份有限公司(biogen ma inc)描述了[(杂)芳基-3-基甲基]吡咯烷-1-基甲基-和[(杂)芳基-3-基甲基]哌啶-1-基甲基-衍生化合物作为oga抑制剂；并且wo2018/140299(礼来公司)披露了n-[氟-5-[[(2s,4s)-2-甲基-4-[(5-甲基-1,2,4-噁二唑-3-基)甲氧基[-1-哌啶基]甲基]噻唑-2-基]乙酰胺作为oga抑制剂。[0020]仍然需要具有有利的特性平衡的oga抑制剂化合物，例如具有改善的效力、良好的生物利用度、药代动力学、和脑渗透和/或更好的毒性谱。因此，本发明的目的是提供克服这些问题中的至少一些问题的化合物。技术实现要素：[0021]本发明涉及具有式(i)的化合物[0022][0023]及其互变异构体和立体异构形式，其中[0024]r1选自下组，该组由以下组成：-c1-4烷基-c(＝o)nrxry；任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的c1-6烷基，该组由以下组成：卤代、-cn、-oc1-4烷基、oh、噁唑基、任选地被独立选择的一个或多个卤代取代基取代的c3-6环烷基；[0025]条件是-oc1-4烷基或-oh取代基在存在时是远离二环核的氮原子的至少两个碳原子；[0026]其中rx和ry各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、c1-4烷基、单卤代c1-4烷基、多卤代c1-4烷基、和c3-6环烷基；或rx和ry连同它们所附接的氮原子一起形成选自下组的杂环基环，该组由以下组成：氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和吗啉基；[0027]r2和r4在存在时各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、卤代、c1-4烷基和c3-6环烷基；并且[0028]r3是选自下组的5或6元单环芳基或杂芳基基团，该组由以下组成：吡唑基、苯基和吡啶基；其各自被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代，该组由以下组成：卤代、c1-4烷基、-cn、单卤代c1-4烷基、多卤代c1-4烷基、c1-4烷氧基、单卤代c1-4烷氧基、多卤代c1-4烷氧基、-(c＝o)c1-4烷基、和het；并且其中至少一个取代基位于与将r4与二环核结合的nh接头呈邻位的碳原子处；其中[0029]het选自下组，该组由以下组成：吡唑基、苯基、吡啶基，其任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代，该组由以下组成：卤代、c1-4烷基、-cn、c1-4烷氧基；[0030]及其药学上可接受的盐和溶剂化物。[0031]本发明例证了包含药学上可接受的载体以及上述化合物中的任一种的药物组合物。本发明例证了通过混合上述化合物中的任一种与药学上可接受的载体而制备的药物组合物。本发明例证了用于制备药物组合物的方法，该方法包括将上述化合物中的任一种与药学上可接受的载体混合。[0032]本发明例示了预防或治疗由o-glcnac水解酶(oga)的抑制介导的障碍的方法，该方法包括向有需要的受试者施用治疗有效量的上述化合物或药物组合物中的任一种。[0033]本发明进一步例示了抑制oga的方法，该方法包括向有需要的受试者施用预防或治疗有效量的上述化合物或药物组合物中的任一种。[0034]本发明的一个实例是预防或治疗选自tau蛋白病的障碍的方法，特别是选自下组的tau蛋白病，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、进行性核上性麻痹、唐氏综合征、额颞叶痴呆、伴有帕金森综合征-17的额颞痴呆、皮克氏病、皮质基底节变性、和嗜银颗粒疾病；或伴有tau病理学的神经退行性疾病，特别是选自由c9orf72突变引起的肌萎缩侧索硬化或额颞叶痴呆的神经退行性疾病，或预防或治疗选自α突触核蛋白病的障碍，特别是帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、或由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病，包括向有需要的受试者施用预防或治疗有效量的上述化合物或药物组合物中的任一种。[0035]本发明的另一个实例是上述化合物中的任一种用于在有需要的受试者中预防或治疗tau蛋白病，特别是选自下组的tau蛋白病，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、进行性核上性麻痹、唐氏综合征、额颞叶痴呆、伴有帕金森综合征-17的额颞痴呆、皮克氏病、皮质基底节变性、和嗜银颗粒疾病；或伴有tau病理学的神经退行性疾病，特别是选自由c9orf72突变引起的肌萎缩侧索硬化或额颞叶痴呆的神经退行性疾病，或用于在有需要的受试者中预防或治疗选自α突触核蛋白病的障碍，特别是帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、或由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。具体实施方式[0036]本发明涉及如上文所定义的具有式(i)的化合物及其药学上可接受的加成盐和溶剂化物。具有式(i)的化合物是o-glcnac水解酶(oga)的抑制剂，并且可用于预防或治疗tau蛋白病，特别是选自下组的tau蛋白病，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、进行性核上性麻痹、唐氏综合征、额颞叶痴呆、伴有帕金森综合征-17的额颞痴呆、皮克氏病、皮质基底节变性、和嗜银颗粒疾病；或者可用于预防或治疗伴有tau病理学的神经退行性疾病，特别是选自由c9orf72突变引起的肌萎缩侧索硬化或额颞叶痴呆的神经退行性疾病；或者可用于预防或治疗α突触核蛋白病，特别是帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、或由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。[0037]在另一个实施例中，本发明涉及如在本文中提及的具有式(i)的化合物及其互变异构体和立体异构形式，其中[0038]r1是-c1-4烷基-c(＝o)nrxry；其中rx和ry各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、c1-4烷基、单卤代c1-4烷基、多卤代c1-4烷基和c3-6环烷基；或rx和ry连同它们所附接的氮原子一起形成选自下组的杂环基环，该组由以下组成：氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基和吗啉基。[0039]在另一个实施例中，本发明涉及如在本文中提及的具有式(i)的化合物及其互变异构体和立体异构形式，其中[0040]r1是-c1-4烷基-c(＝o)nrxry；其中rx和ry各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、c1-4烷基、单卤代c1-4烷基、多卤代c1-4烷基和c3-6环烷基。[0041]在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(i)的化合物，其中r1是-c1-4烷基-c(＝o)nrxry；其中rx和ry各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢和c1-4烷基。[0042]在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(i)的化合物，其中r1选自下组，该组由以下组成：任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的c1-6烷基，该组由以下组成：卤代、-cn、-oc1-4烷基、oh、和任选地被独立选择的一个或多个卤代取代基取代的c3-6环烷基；以及任选地被卤代或c1-4烷基取代的吡啶基；条件是-oc1-4烷基或-oh取代基在存在时是远离二环核的氮原子的至少两个碳原子。[0043]在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(i)的化合物，其中r1选自下组，该组由以下组成：任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代的c1-6烷基，该组由以下组成：卤代、-cn、-oc1-4烷基、oh、和任选地被独立选择的一个或多个卤代取代基取代的c3-6环烷基；条件是-oc1-4烷基或-oh取代基在存在时是远离二环核的氮原子的至少两个碳原子。[0044]在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(i)的化合物，其中r1选自下组，该组由以下组成：任选地被各自独立地选自卤代的一个或多个取代基取代的c1-6烷基。[0045]在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(i)的化合物，其中[0046]r3选自下组，该组由以下组成：(a)和(b)：[0047][0048]其中r1a、r2a、r1b和r2b各自独立地选自下组，该组由以下组成：氢、卤代、c1-4烷基、-cn、单卤代c1-4烷基、多卤代c1-4烷基、c1-4烷氧基、单卤代c1-4烷氧基、多卤代c1-4烷氧基、-(c＝o)c1-4烷基、和het；条件是r1a或r2a中的至少一个、以及r1b或r2b中的至少一个不是氢；[0049]z1和z2各自独立地选自n、ch或cr3b，条件是z1或z2中的至少一个是n；[0050]r3a和r3b在存在时各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、c1-4烷基、-cn、单卤代c1-4烷基、多卤代c1-4烷基、c1-4烷氧基、单卤代c1-4烷氧基、多卤代c1-4烷氧基、-(c＝o)c1-4烷基、和het；其中[0051]n代表0、1或2；并且[0052]het选自下组，该组由以下组成：吡唑基、苯基、吡啶基，其任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代，该组由以下组成：卤代、c1-4烷基、-cn、c1-4烷氧基。[0053]在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(i)的化合物，其中[0054]r3选自下组，该组由以下组成：(a)和(b)：[0055][0056]其中r1a、r2a、r1b和r2b各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、c1-4烷基、-cn、单卤代c1-4烷基、多卤代c1-4烷基、c1-4烷氧基、单卤代c1-4烷氧基、多卤代c1-4烷氧基、-(c＝o)c1-4烷基、和het；[0057]z1和z2各自独立地选自n、ch或cr3b，条件是z1或z2中的至少一个是n；[0058]r3a和r3b在存在时各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、c1-4烷基、-cn、单卤代c1-4烷基、多卤代c1-4烷基、c1-4烷氧基、单卤代c1-4烷氧基、多卤代c1-4烷氧基、-(c＝o)c1-4烷基、和het；其中[0059]n代表0、1或2；并且[0060]het选自下组，该组由以下组成：吡唑基、苯基、吡啶基，其任选地被各自独立地选自下组的一个或多个取代基取代，该组由以下组成：卤代、c1-4烷基、-cn、c1-4烷氧基。[0061]在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(i)的化合物，其中r3是组(a)或(b)：[0062][0063]其中r1a、r2a、r1b和r2b各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、c1-4烷基、-cn、单卤代c1-4烷基、多卤代c1-4烷基、c1-4烷氧基、单卤代c1-4烷氧基、和多卤代c1-4烷氧基；[0064]z1和z2各自独立地选自n、ch或cr3b，条件是z1或z2中的至少一个是n；并且[0065]r3a和r3b在存在时各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、c1-4烷基、-cn、单卤代c1-4烷基、多卤代c1-4烷基、c1-4烷氧基、单卤代c1-4烷氧基、和多卤代c1-4烷氧基；其中[0066]n代表0、1或2。[0067]在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(i)的化合物，其中r3是组(a)或(b)：[0068][0069]其中r1a、r2a、r1b和r2b各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、c1-4烷基、-cn、单卤代c1-4烷基、多卤代c1-4烷基、c1-4烷氧基、单卤代c1-4烷氧基、和多卤代c1-4烷氧基；[0070]z1和z2各自独立地选自n、ch或cr3b，条件是z1或z2中的至少一个是n；并且[0071]r3a和r3b在存在时各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、c1-4烷基、-cn、单卤代c1-4烷基、多卤代c1-4烷基、c1-4烷氧基、单卤代c1-4烷氧基、和多卤代c1-4烷氧基；其中[0072]n代表0、1或2。[0073]在另一个实施例中，本发明涉及如本文所述的具有式(i)的化合物，其中r3是组(a)或(b)：[0074][0075]其中r1a、r2a、r1b和r2b各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、c1-4烷基、-cn、多卤代c1-4烷基、c1-4烷氧基、和多卤代c1-4烷氧基；[0076]z1和z2各自独立地选自n、ch或cr3b，条件是z1或z2中的至少一个是n；并且[0077]r3a和r3b在存在时各自独立地选自下组，该组由以下组成：卤代、c1-4烷基、-cn、多卤代c1-4烷基、c1-4烷氧基、和多卤代c1-4烷氧基；其中[0078]n代表0或1。[0079]定义[0080]“卤代”应当表示氟、氯以及溴；“c1-4烷基”应当表示分别具有1个、2个、3个或4个碳原子的直链或支链饱和烷基基团，例如甲基、乙基、1-丙基、2-丙基、丁基、1-甲基-丙基、2-甲基-1-丙基、1,1-二甲基乙基等；“c1-4烷氧基”应当表示醚基团，其中c1-4烷基如前所定义。[0081]一般而言，每当术语“取代”用于本发明时，除非另外指示或上下文中是明确的，否则意在指示在使用“取代”的表述中指示的原子或基团上的一个或多个氢(特别是1个至3个氢、优选地1个或2个氢、更优选地1个氢)被来自所指示基团的取代基的选择项替换，条件是未超过正常的化合价，并且该取代导致了化学稳定的化合物(即，足够稳健以承受从反应混合物分离至有用程度的纯度并且配制成治疗剂的化合物)。[0082]如本文所用的术语“受试者”是指动物，优选地是哺乳动物，最优选地是人类，该受试者是或已经成为治疗、观察或实验的对象。因此，如本文所用，术语“受试者”涵盖患者、以及具有发展如本文所定义的疾病或病症风险的无症状或症前个体。[0083]如本文所用的术语“治疗有效量”意指由研究员、兽医、医师或其他临床医生寻找的，在组织系统、动物或人类中引起生物学或医学应答的活性化合物或药物试剂的量，该应答包括正在被治疗的疾病或障碍的症状的减轻。如本文所用的术语“预防有效量”意指显著降低要预防的疾病或障碍发作可能性的活性化合物或药物试剂的量。[0084]如本文所用，术语“组合物”旨在涵盖包含处于特定量的特定成分的产品，以及直接或间接地源于处于特定量的特定成分的组合的任何产品。[0085]在上下文中，术语“具有式(i)的化合物”意指包括其加成盐、溶剂化物以及立体异构体。[0086]在上下文中，术语“立体异构体”或“立体化学异构形式”可互换地使用。[0087]本发明包括呈纯立体异构体形式或呈两种或更多种立体异构体的混合物的具有式(i)的化合物的所有立体异构体。[0088]对映异构体为彼此不可重叠的镜像的立体异构体。对映异构体对的1:1混合物是外消旋体或外消旋混合物。非对映异构体(或非对映立体异构体)为不是对映异构体的立体异构体，即它们并非为镜像关系。如果化合物含有双键，则这些取代基可以呈e或z构型。如果化合物含有双取代的环烷基基团，则这些取代基可以呈顺式或反式构型。因此，本发明包括对映异构体、非对映异构体、外消旋体、e异构体、z异构体、顺式异构体、反式异构体及其混合物。[0089]绝对构型是根据卡恩-英戈尔德-普雷洛格(cahn-ingold-prelog)系统指定的。不对称原子处的构型由r或s规定。绝对构型未知的已拆分的化合物可以根据它们旋转平面偏振光的方向而由(+)或(-)指定。[0090]当鉴定特定的立体异构体时，这意指所述立体异构体基本上不含其他异构体，即与小于50％、优选地小于20％、更优选地小于10％、甚至更优选地小于5％，特别是小于2％并且最优选地小于1％的其他立体异构体相关联。因此，当具有式(i)的化合物例如被指定为(r)时，这意指该化合物基本上不含(s)异构体；当具有式(i)的化合物例如被指定为e时，这意指该化合物基本上不含z异构体；当具有式(i)的化合物例如被指定为顺式时，这意指该化合物基本上不含反式异构体。[0091]用于在医学中使用，本发明的化合物的加成盐是指无毒性“药学上可接受的加成盐”。然而，其他盐可以适用于制备根据本发明的化合物或其药学上可接受的加成盐。化合物的适合的药学上可接受的加成盐包括可以例如通过将化合物的溶液与药学上可接受的酸的溶液混合而形成的酸加成盐，该药学上可接受的酸如盐酸、硫酸、富马酸、马来酸、琥珀酸、乙酸、苯甲酸、柠檬酸、酒石酸、碳酸或磷酸。此外，在本发明的化合物携带酸性部分时，其适合的药学上可接受的加成盐可以包括碱金属盐，例如钠盐或钾盐；碱土金属盐，例如钙盐或镁盐；以及与适合的有机配体形成的盐，例如季铵盐。[0092]可以在药学上可接受的加成盐的制备中使用的代表性酸包括但不限于以下：乙酸、2,2-二氯乙酸、酰化氨基酸、己二酸、海藻酸、抗坏血酸、l-天冬氨酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙酰氨基苯甲酸、(+)-樟脑酸、樟脑磺酸、癸酸、己酸、辛酸、肉桂酸、柠檬酸、环拉酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羟基-乙磺酸、甲酸、富马酸、半乳糖二酸、龙胆酸、葡庚糖酸、d-葡糖酸、d-葡萄糖醛酸、l-谷氨酸、β-氧代-戊二酸、乙醇酸、马尿酸、氢溴酸、盐酸、(+)-l-乳酸、(±)-dl-乳酸、乳糖酸、马来酸、(-)-l-苹果酸、丙二酸、(±)-dl-扁桃酸、甲磺酸、萘-2-磺酸、萘-1,5-二磺酸、1-羟基-2-萘甲酸、烟酸、硝酸、油酸、乳清酸、草酸、棕榈酸、双羟萘酸、磷酸、l-焦谷氨酸、水杨酸、4-氨基-水杨酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、单宁酸、(+)-l-酒石酸、硫氰酸、对甲苯磺酸、三氟甲基磺酸以及十一碳烯酸。可以在药学上可接受的加成盐的制备中使用的代表性碱包括但不限于以下：氨、l-精氨酸、苯乙苄胺、苯乍生、氢氧化钙、胆碱、二甲基乙醇胺、二乙醇胺、二乙胺、2-(二乙基氨基)-乙醇、乙醇胺、乙二胺、n-甲基-葡糖胺、海巴明、1h-咪唑、l-赖氨酸、氢氧化镁、4-(2-羟基乙基)-吗啉、哌嗪、氢氧化钾、1-(2-羟基乙基)吡咯烷、仲胺、氢氧化钠、三乙醇胺、缓血酸胺以及氢氧化锌。[0093]化合物的名称根据由化学文摘社(chemical abstracts service)(cas)商定的命名规则或者根据由国际纯粹与应用化学联合会(international union of pure and applied chemistry)(iupac)商定的命名规则来产生。[0094]药理学[0095]本发明的化合物及其药学上可接受的组合物抑制o-glcnac水解酶(oga)并且因此可以用于治疗或预防涉及tau病理学(也称为tau蛋白病)的疾病，以及具有tau包涵体的疾病。此类疾病包括但不限于阿尔茨海默氏病、肌萎缩侧索硬化和帕金森综合征-痴呆复合征、嗜银颗粒疾病、慢性创伤性脑病、皮质基底节变性、弥散性神经原纤维缠结伴钙化、唐氏综合征、家族性英国型痴呆、家族性丹麦型痴呆、与17号染色体连锁的伴有帕金森综合征的额颞痴呆(由mapt突变引起)、额颞叶变性(某些病例由c9orf72突变引起)、吉斯特曼-斯召斯列疾病(gerstmann‑‑scheinker disease)、帕金森病、瓜德罗普岛帕金森综合征(guadeloupean parkinsonism)、强直性肌营养不良、神经退行性病变伴有脑铁沉积、c型尼曼-皮克病(niemann-pick disease,type c)、具有神经原纤维缠结的非关岛运动神经元疾病、皮克氏病、脑炎后帕金森综合征、朊病毒蛋白脑淀粉样血管病、进行性皮层下神经胶质增生、进行性核上性麻痹、slc9a6相关的精神发育迟滞、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结痴呆、以及具有球状胶质包涵体的白质tau蛋白病。[0096]本发明的化合物及其药学上可接受的组合物抑制o-glcnac水解酶(oga)并且因此可以用于治疗或预防涉及α突触核蛋白病的疾病，特别是帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、或由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。[0097]如本文所用，术语“治疗”旨在是指其中可能存在一种疾病的进展的减慢、中断、遏制或阻止或者症状的减轻的所有过程，但未必指示所有症状的全部消除。如本文所用，术语“预防”旨在是指其中可能存在一种疾病的发作的减慢、中断、遏制或阻止的所有过程。[0098]本发明还涉及根据通式(i)的化合物、其立体异构形式或其药学上可接受的酸或碱加成盐，用于治疗或预防选自下组的疾病或病症，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、肌萎缩侧索硬化和帕金森综合征-痴呆复合征、嗜银颗粒疾病、慢性创伤性脑病、皮质基底节变性、弥散性神经原纤维缠结伴钙化、唐氏综合征、家族性英国型痴呆、家族性丹麦型痴呆、与17号染色体连锁的伴有帕金森综合征的额颞痴呆(由mapt突变引起)、额颞叶变性(某些病例由c9orf72突变引起)、吉斯特曼-斯召斯列疾病、瓜德罗普岛帕金森综合征、强直性肌营养不良、神经退行性病变伴有脑铁沉积、c型尼曼-皮克病、具有神经原纤维缠结的非关岛运动神经元疾病、皮克氏病、脑炎后帕金森综合征、朊病毒蛋白脑淀粉样血管病、进行性皮层下神经胶质增生、进行性核上性麻痹、slc9a6相关的精神发育迟滞、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结痴呆、具有球状胶质包涵体的白质tau蛋白病、帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、以及由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。[0099]本发明还涉及根据通式(i)的化合物、其立体异构形式或其药学上可接受的酸或碱加成盐，用于治疗、预防、改善、控制选自下组的疾病或病症或者降低其风险，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、肌萎缩侧索硬化和帕金森综合征-痴呆复合征、嗜银颗粒疾病、慢性创伤性脑病、皮质基底节变性、弥散性神经原纤维缠结伴钙化、唐氏综合征、家族性英国型痴呆、家族性丹麦型痴呆、与17号染色体连锁的伴有帕金森综合征的额颞痴呆(由mapt突变引起)、额颞叶变性(某些病例由c9orf72突变引起)、吉斯特曼-斯召斯列疾病、瓜德罗普岛帕金森综合征、强直性肌营养不良、神经退行性病变伴有脑铁沉积、c型尼曼-皮克病、具有神经原纤维缠结的非关岛运动神经元疾病、皮克氏病、脑炎后帕金森综合征、朊病毒蛋白脑淀粉样血管病、进行性皮层下神经胶质增生、进行性核上性麻痹、slc9a6相关的精神发育迟滞、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结痴呆、具有球状胶质包涵体的白质tau蛋白病、帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、以及由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。特别地，这些疾病或病症可以特别是选自tau蛋白病，更特别是选自下组的tau蛋白病，该组由以下组成：阿尔茨海默氏病、进行性核上性麻痹、唐氏综合征、额颞叶痴呆、伴有帕金森综合征-17的额颞痴呆、皮克氏病、皮质基底节变性、和嗜银颗粒疾病；或者这些疾病或病症可以特别是伴有tau病理学的神经退行性疾病，更特别是选自由c9orf72突变引起的肌萎缩侧索硬化或额颞叶痴呆的神经退行性疾病。[0100]特别地，这些疾病或病症可以特别是选自α突触核蛋白病，更特别是选自下组的tau蛋白病，该组由以下组成：帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、以及由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病。[0101]阿尔茨海默氏病和tau蛋白病疾病的临床前状态：[0102]近年来，美国国家老龄化研究所和国际工作组(united states(us)national institute for aging and the international working group)提出了更好地确定ad临床前(无症状)阶段的指南(dubois b等人,lancet neurol.[柳叶刀神经学]2014；13:614-629；sperling,ra等人,alzheimers dement.[阿尔茨海默氏病与痴呆]2011；7:280-292)。假设模型假定aβ累积和tau聚集在明显的临床损害发作前许多年开始。升高的淀粉样蛋白累积、tau聚集和ad发展的关键风险因素是年龄(即65岁或以上)、apoe基因型和家族史。大约三分之一的75岁以上的临床正常老年人表现出pet淀粉样蛋白和tau成像研究(后者目前不太先进)中aβ或tau累积的证据。此外，观察到csf测量中降低的aβ水平，而csf中未修饰的和磷酸化的tau的水平升高。在大型尸检研究中可以看到类似的发现，并且已经表明早在20岁及更年轻时就在脑中检测到tau聚集体。淀粉样蛋白阳性(aβ+)临床上正常的个体一致地展示出在其他生物标志物上的“ad样内表型”的证据，包括功能性磁共振成像(mri)和静息态连接两者中扰乱的功能性网络活性、氟脱氧葡萄糖18f(fdg)代谢减退、皮质变薄以及加速萎缩。累积的纵向数据也强烈地表明aβ+临床上正常的个体认知减退和进展为轻度认知损害(mci)和ad痴呆的风险增加。阿尔茨海默氏病的科学界达成共识，即这些aβ+临床上正常的个体代表ad病理学连续体中的早期阶段。因此，有人认为，如果在广泛的神经退行性病变已发生之前的疾病阶段开始，用降低aβ产生或tau聚集的治疗剂进行干预可能更有效。许多医药公司目前正在测试在前驱ad中的bace抑制作用。[0103]得益于不断发展的生物标志物研究，现在可以在第一症状发生之前的临床前阶段识别出阿尔茨海默氏病。所有与临床前阿尔茨海默氏病相关的不同问题，如定义和词汇、限制、自然史、进展标志物和在无症状阶段检测疾病的伦理后果，都在alzheimer’s&dementia[阿尔茨海默氏病与痴呆]12(2016)292-323中进行了综述。[0104]在临床前阿尔茨海默氏病或tau蛋白病中可以识别两类个体。在pet扫描中明显具有淀粉样蛋白β或tau聚集，或者在csf aβ、tau和磷酸化tau方面发生改变的认知上正常的个体被定义为处于“阿尔茨海默氏病的无症状风险状态(ar-ad)”或处于“tau蛋白病的无症状状态”。据说患有家族性阿尔茨海默氏病的完全渗透性显性常染色体突变的个体患有“症前阿尔茨海默氏病”。已经针对多种形式的tau蛋白病描述了tau蛋白内的显性常染色体突变。[0105]因此，在一个实施例中，本发明还涉及根据通式(i)的化合物，其立体异构形式或其药学上可接受的酸或碱加成盐，用于控制或降低临床前阿尔茨海默氏病、前驱性阿尔茨海默氏病、或在不同形式的tau蛋白病中观察到的与tau相关的神经退行性病变的风险。[0106]还研究了帕金森病的前驱性状态。因此，在一个实施例中，本发明还涉及根据通式(i)的化合物，其立体异构形式或其药学上可接受的酸或碱加成盐，用于控制或降低前驱性帕金森病的风险。[0107]如在上文已经提及的，术语“治疗”未必指示所有症状的全部消除，而是还可以指在上面提及的任何障碍中的对症治疗。鉴于具有式(i)的化合物的效用，提供治疗罹患任一种上文中提及的疾病的受试者如温血动物(包括人类)的方法，或预防受试者如温血动物(包括人类)罹患任一种上文中提及的疾病的方法。[0108]所述方法包括向受试者如温血动物(包括人类)施用，即，全身施用或局部施用，优选口服施用预防或治疗有效量的具有式(i)的化合物、其立体异构形式、其药学上可接受的加成盐或溶剂化物。[0109]因此，本发明还涉及用于预防和/或治疗任何上文中提及的疾病的方法，该方法包括向有需要的受试者施用预防或治疗有效量的根据本发明的化合物。[0110]本发明还涉及用于调节o-glcnac水解酶(oga)活性的方法，该方法包括向有需要的受试者施用预防或治疗有效量的根据本发明的和如权利要求书中所定义的化合物或根据本发明的和如权利要求书中所定义的药物组合物。[0111]治疗方法还可包括以每天一到四次摄入之间的方案施用活性成分。在这些治疗方法中，根据本发明的化合物优选地在施用之前进行配制。如在下文中所述的，适合的药物配制品通过已知程序使用熟知并且容易可得的成分来制备。[0112]可适合于治疗或预防上面提及的任何障碍或其症状的本发明的化合物可以单独施用或与一种或多种另外的治疗剂组合施用。联合疗法包括：含有具有式(i)的化合物以及一种或多种另外的治疗剂的单个药物剂量配制品的施用，以及具有式(i)的化合物和以其自身分开的药物剂量配制品存在的每种另外的治疗剂的施用。例如，可以向患者施用一起处于单个口服剂量组合物(如片剂或胶囊)中的具有式(i)的化合物和治疗剂，或可以将每种药剂以分开的口服剂量配制品施用。[0113]技术人员将熟悉本文提及的疾病或病症的替代性命名、疾病分类学以及分类系统。例如，美国精神病学协会(american psychiatric association)精神障碍诊断和统计手册(diagnostic&statistical manual of mental disorders，dsm-5tm)第五版采用术语如神经认知障碍(ncd)(重度和轻度)，特别是由阿尔茨海默氏病引起的神经认知障碍。技术人员可以使用此类术语作为用于一些本文提及的疾病或病症的替代性命名。[0114]药物组合物[0115]本发明还提供了用于预防或治疗其中o-glcnac水解酶(oga)的抑制是有益的疾病的组合物，这些疾病如阿尔茨海默氏病、进行性核上性麻痹、唐氏综合征、额颞叶痴呆、伴有帕金森综合征-17的额颞痴呆、皮克氏病、皮质基底节变性、嗜银颗粒疾病、肌萎缩侧索硬化、由c9orf72突变引起的额颞叶痴呆、帕金森病、由帕金森病引起的痴呆(或由帕金森病引起的神经认知障碍)、路易体痴呆、多系统萎缩、或由戈谢氏病引起的α突触核蛋白病，所述组合物包含治疗有效量的根据式(i)的化合物以及药学上可接受的载体或稀释剂。[0116]虽然活性成分可以单独施用，但优选地其作为药物组合物呈现。因此，本发明进一步提供了药物组合物，该药物组合物包含根据本发明的化合物以及药学上可接受的载体或稀释剂。该载体或稀释剂在与该组合物的其他成分相容的意义上必须是“可接受的”并且对于其接受者是无害的。[0117]可以通过制药领域所熟知的任何方法来制备本发明的药物组合物。治疗有效量的呈碱形式或加成盐形式的作为活性成分的特定化合物与药学上可接受的载体组合成紧密混合物，该载体可以取决于施用所希望的制剂形式而采用多种多样的形式。这些药物组合物希望为适合于、优选地适合于全身施用(如口服、经皮或肠胃外施用)；或局部施用(如经由吸入、鼻喷雾、滴眼剂或经由霜剂、凝胶剂、洗发剂等)的单一剂型。例如，在制备为口服剂型的组合物时，可以采用任何常见的药物介质，在口服液体制剂(如悬浮液、糖浆剂、酏剂和溶液剂)的情况下，采用例如像水、二醇类、油类、醇类等；或在散剂、丸剂、胶囊剂和片剂的情况下，采用固体载体如淀粉、糖、高岭土、润滑剂、粘合剂、崩解剂等。片剂和胶囊剂由于其施用简易性而代表了最有利的口服剂量单位形式，在该情况下显然采用固体药物载体。对于肠胃外组合物而言，载体通常将至少在很大程度上包含无菌水，但也可以包括其他成分例如以辅助溶解性。例如可制备可注射溶液，其中载体包含盐溶液、葡萄糖溶液或盐水和葡萄糖溶液的混合物。也可以制备可注射悬浮液，在这种情况下可以采用适当的液体载体、助悬剂等。在适合于经皮施用的组合物中，载体任选地包含渗透增强剂和/或适合的可湿润剂，任选地与小比例的具有任何性质的适合的添加剂组合，这些添加剂不会对皮肤造成任何显著有害作用。所述添加剂可以促进向皮肤施用并且/或者可以有助于制备所希望的组合物。这些组合物能够以不同方式，例如作为透皮贴剂、作为滴剂或作为软膏剂施用。[0118]特别有利的是，将上述药物组合物以剂量单位形式配制，以实现施用的简易性和剂量的均匀性。如本说明书和权利要求书中所用的剂量单位形式在本文中是指适合作为单位剂量的物理离散单位，每一单位含有经计算以与所希望的药物载体结合而产生所希望的治疗效果的预定量的活性成分。此类剂量单位形式的实例是片剂(包括刻痕或包衣片剂)、胶囊剂、丸剂、散剂包、糯米纸囊剂、可注射溶液或悬浮液、茶匙剂、汤匙剂等，以及分离的多个这些剂量单位形式。[0119]如本领域的技术人员所熟知的，施用的确切剂量和频率取决于所使用的具有式(i)的特定化合物，所治疗的特定病症，所治疗的病症的严重程度，特定患者的年龄、体重、性别、障碍程度以及总体身体健康状况，以及个体可以服用的其他药物。此外，显而易见的是，所述有效日用量可以降低或提高，这取决于所治疗的受试者的应答和/或取决于给出本发明的化合物处方的医生的评估。[0120]取决于施用模式，该药物组合物将包含按重量计从0.05％至99％，优选地按重量计从0.1％至70％，更优选地按重量计从0.1％至50％的活性成分，以及按重量计从1％至99.95％，优选地按重量计从30％至99.9％，更优选地按重量计从50％至99.9％的药学上可接受的载体，所有的百分数都基于该组合物的总重量。[0121]本发明的化合物可以用于全身施用(如口服、经皮或肠胃外施用)；或局部施用(如经由吸入、鼻喷雾、滴眼剂或经由霜剂、凝胶剂、洗发剂等)。化合物优选地口服施用。如本领域的技术人员所熟知的，施用的确切剂量和频率取决于所使用的根据式(i)的特定化合物，所治疗的特定病症，所治疗的病症的严重程度，特定患者的年龄、体重、性别、障碍程度以及总体身体健康状况，以及个体可以服用的其他药物。此外，显而易见的是，所述有效日用量可以降低或提高，这取决于所治疗的受试者的应答和/或取决于给出本发明的化合物处方的医生的评估。[0122]可以与载体材料组合以产生单一剂型的具有式(i)的化合物的量将取决于所治疗的疾病、哺乳动物种类以及特定施用模式而变化。然而，作为一般指导，本发明的化合物的适合的单位剂量可以例如优选地含有0.1mg至约1000mg之间的活性化合物。优选的单位剂量是在1mg至大约500mg之间。更优选的单位剂量是在1mg至大约300mg之间。甚至更优选的单位剂量是在1mg至大约100mg之间。这样的单位剂量可以每天超过一次地施用，例如一天2、3、4、5或6次，但是优选地每天1次或2次，这样使得对于一个70kg的成人每次施用的总剂量是每kg受试者体重在0.001至大约15mg的范围中。优选的剂量是每次施用每kg受试者体重0.01至约1.5mg，并且此类疗法可以持续多个星期或月，并且在一些情况中，持续多年。然而，应当理解，任何特定患者的具体剂量水平取决于各种因素，包括采用的特定化合物的活性；所治疗的个体的年龄、体重、总体健康状况、性别和饮食；施用时间和途径；排泄速率；先前施用的其他药物；及进行医疗的特定疾病的严重程度，如本领域技术人员所理解的。[0123]典型剂量可以是一天服用一次或一天多次的一片1mg至约100mg片剂或1mg至约300mg，或者一天服用一次的、并且含有在比例上含量较高的活性成分的一粒延时释放(time-release)的胶囊或片剂。延时释放效应可以通过在不同的ph值下溶解的胶囊材料、通过经渗透压造成的缓慢释放的胶囊、或者通过控制释放的任何其他已知手段来获得。[0124]如本领域技术人员将理解的，在一些情况下有必要使用这些范围外的剂量。此外，应当注意临床医生或治疗医师结合个体患者应答将知道如何以及何时开始、中断、调节或终止治疗。[0125]本发明还提供了试剂盒，其包含根据本发明的化合物、处方信息(也称为“说明书”)、泡罩包装或瓶、以及容器。此外，本发明提供了试剂盒，其包含根据本发明的药物组合物、处方信息(也称为“说明书”)、泡罩包装或瓶、以及容器。处方信息优选包括关于施用根据本发明的化合物或药物组合物而给患者的建议或指导。特别地，处方信息包括如下给患者的建议或指导：关于根据本发明的所述化合物或药物组合物的施用，关于如何使用根据本发明的化合物或药物组合物，以在有需要的受试者中预防和/或治疗tau蛋白病。因此，在一个实施例中，本发明提供了套装试剂盒，其包含具有式(i)的化合物或其立体异构体，或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或包含所述化合物的药物组合物，以及用于预防或治疗tau蛋白病的指导。本文提及的试剂盒特别地可以是适于商业销售的药物包装。[0126]对于以上提供的组合物、方法以及试剂盒，本领域技术人员将理解，用于各个的优选化合物是根据以上优选提到的那些化合物。用于组合物、方法和试剂盒的其他优选化合物是在以下非限制性实例中提供的那些化合物。[0127]实验部分[0128]在下文中，术语“m.p.”意指熔点，“min”意指分钟，“acn”意指乙腈，“aq.”意指水性，“boc”意指叔丁氧基羰基，“dcm”意指二氯甲烷，“diad”意指偶氮二甲酸二异丙酯，“dmf”意指二甲基甲酰胺，“dmso”意指二甲基亚砜，“pd(pph3)4”意指四(三苯基膦)钯(0)，“pd2(dba)3”意指三(二亚苄基丙酮)二钯(0)，“x-phos”意指2-二环己基膦基-2',4',6'-三-异丙基-1,1'-联苯基，“rt”或“rt”意指室温，“rac”或“rs”意指外消旋，“lc-ms”意指液相色谱法/质谱法，“hplc”意指高效液相色谱法，“rp”意指反相，“rt”意指保留时间(以分钟计)，“[m+h]+”意指化合物的游离碱的质子化质量，“wt”意指重量，“etoac”意指乙酸乙酯，“meoh”意指甲醇，“sat”意指饱和，“soltn”或“sol.”意指溶液，“tbaf”意指四丁基氟化铵，“tfa”意指三氟乙酸，“tmda”意指n,n,n’n’‑四甲基乙二胺，“sfc”意指超临界流体色谱法，并且“sfc-ms”意指超临界流体色谱法/质谱法。[0129]除非另外指明，否则无论何时在本文中表明符号“rs”，其都是指化合物是在所指示中心的外消旋混合物。当将一种或多种混合物分离时，已经将在一些化合物中心的立体化学构型指定为“r”或“s”；对于一些化合物，尽管该化合物本身已经作为单一的立体异构体被分离并且是对映异构体纯的/非对映体纯的，但是当绝对立体化学未确定时，已经将在所指示中心的立体化学构型指定为“r*”或“s*”。通过由超临界流体色谱法(sfc)分析外消旋混合物，随后sfc比较该一种或多种分离的对映异构体，来确定在本文中报道的化合物的对映异构体过量。[0130]微波辅助的反应是在单模式反应器中进行的：initiatortm sixty exp微波反应器(拜泰齐公司(biotage ab))。[0131]使用试剂级溶剂，在硅胶60f254板(默克公司(merck))上进行薄层色谱法(tlc)。使用标准技术，在硅胶上进行开口柱色谱法，粒度网目＝230-400(默克公司)。[0132]使用易连接筒柱，在不规则硅胶(粒度15μm-40μm)上(正相一次性快速柱)，在以下不同的快速系统上运行自动快速柱色谱法：来自阿尔钦仪器公司(armen instrument)的spot或laflash系统、或来自因特奇美拉公司(interchim)的430evo系统、或来自安捷伦公司(agilent)的971-fp系统、或来自拜泰齐公司的isolera1sv系统。[0133]中间体的制备[0134]中间体1.4-溴-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪[0135][0136]在rt下，将氧溴化磷(v)[7789-59-5](6.94g，24.2mmol)添加至4-溴-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪(barsanti,p.a.；pan,y；lu,y；jain,r；cox,m；等人acs med.chem.lett.[acs医药化学通讯]2015,6,42-46)[1639979-55-7](1.4g，4.839mmol)在二氯乙烷(10ml)中的搅拌溶液中。将反应混合物在70℃下搅拌48h。将溶剂在真空中蒸发，并将所得残余物在dcm和nahco3的饱和水溶液之间分配。将混合物过滤，并将沉淀物在真空中干燥以产出呈白色固体的i-1(400mg，42％)。将有机层经mgso4干燥，过滤，并将溶剂在真空中蒸发以产出呈黄色固体的4-溴-1-[(4-甲基苯基)磺酰基]-1h-吡咯并[2,3-d]哒嗪i[1639979-55-7](600mg，43％)。[0137]中间体2.2-(4-溴吡咯并[2,3-d]哒嗪-1-基)-n,n-二甲基-乙酰胺[0138][0139]在n2气氛下，向i-1(0.4g，2.02mmol)在dmf(5ml)中的混合物中经1min分批添加nah 60％[7646-69-7](121mg，3.03mmol)。将rm(反应混合物)在rt下搅拌1h，然后逐滴添加2-氯-n,n-二甲基乙酰胺[2675-89-0](0.25ml，1.182g/ml，2.42mmol)，并将混合物在rt下搅拌1.5h。将溶剂在真空中蒸发，并将所得残余物在acoet和水之间分配。将有机层用水(x2)和盐水洗涤，然后分离，经mgso4干燥，过滤，并将溶剂在真空中蒸发。将所得残余物通过硅胶快速柱色谱法，使用洗脱液(梯度：庚烷/etoac，100/0至0/100)纯化以产出呈白色固体的i-2(237mg，41％)。[0140]从所指示的中间体和试剂以类似的方式合成以下中间体：[0141][0142]最终化合物的制备[0143]化合物1.[0144][0145]在n2气氛下，将pd2dba3[51364-51-3](26.6mg，0.029mmol)、xantphos[161265-03-8](28mg，0.048mmol)和碳酸铯[534-17-8](473mg，1.45mmol)添加至处于密封管中的i-2(137mg，0.48mmol)在dmf[68-12-2](5ml)中的脱气溶液中。10min后，添加2,6-二甲基-4-(三氟甲基)苯胺[144991-53-7](119mg，0.63mmol)，并将混合物在rt下搅拌10min，然后将混合物加热至95℃，持续18h。将混合物通过用甲醇充分洗涤的硅藻土垫过滤。将滤液在真空中蒸发，并将所得残余物通过rp(72％[25mm nh4hco3]-28％[mecn:meoh 1:1]至36％[25mm nh4hco3]-64％[mecn:meoh 1:1])纯化。在60℃下，收集所希望的级分并在真空中浓缩。添加acn(10ml x 3次)，并将溶剂在真空中浓缩以产出呈黄色固体的化合物编号1(9mg，5％)。[0146]从所指示的中间体和试剂以类似的方式合成以下化合物：[0147][0148][0149]分析部分[0150]熔点[0151]值是峰值，并且所获得的值具有通常与这种分析方法相关的实验不确定性。[0152]dsc823e(a):对于多种化合物，熔点是用dsc823e(梅特勒-托利多公司(mettler-toledo))装置来测定的。使用10℃/分钟的温度梯度来测量熔点。最高温度是300℃。值是峰值(a)。[0153]梅特勒-托利多mp50(b)：对于多种化合物，熔点是在mettler fp81ht/fp90装置上在开管毛细管中测定的。使用1℃/分钟、3℃/分钟、5℃/分钟或10℃/分钟的温度梯度来测量熔点。最高温度是300℃。从数字显示器(b)读取熔点。[0154]lcms[0155]通用程序[0156]使用lc泵、二极管阵列(dad)或uv检测器以及如在对应的方法中所指定的柱进行高效液相色谱法(hplc)测量。如果必要的话，包括其他检测器(参见下文的方法表格)。[0157]将来自柱的流带至配置有大气压离子源的质谱仪(ms)。设置调谐参数(例如扫描范围、停留时间等)以便获得允许鉴定化合物的标称单一同位素分子量(mw)的离子和/或准确质量单一同位素分子量的离子在技术人员的知识内。利用适当的软件进行数据采集。[0158]通过其实验保留时间(rt)和离子描述化合物。如果未在数据表中不同地指定，那么报告的分子离子对应于[m+h]+(质子化的分子)和/或[m-h]-(去质子化的分子)。获得的所有结果具有通常与所使用的方法相关的实验不确定性。[0159]在下文中，“sqd”单四极检测器、“msd”质量选择检测器、“qtof”四极杆飞行时间、“rt”室温、“beh”桥接的乙基硅氧烷/二氧化硅杂合物、“hss”高强度二氧化硅、“csh”带电的表面杂化、“uplc”超高效液相色谱法、“dad”二极管阵列检测。℃；以min表示运行时间)。[0160]表1.lc-ms方法(以ml/min表示流量；以℃表示柱温(t)；以min表示运行时间)。[0161][0162]表2.分析数据-lcms：[m+h]+意指该化合物的游离碱的质子化质量，[m-h]-意指该化合物的游离碱的去质子化质量或指定的加合物的类型([m+ch3coo]-)。rt意指保留时间(以min计)。对于一些化合物，确定准确质量。[0163][0164]nmr[0165]对于多种化合物，在以400mhz操作的bruker av iii hd光谱仪上，或在以500mhz操作的bruker avance neo上，或在以400mhz操作的bruker avance neo光谱仪上，使用氯仿-d(氘化的氯仿，cdcl3)或dmso-d6(氘化的dmso，二甲基-d6亚砜)作为溶剂记录1h nmr谱。化学位移(δ)被报告为相对于四甲基硅烷(tms)(用作内部标准)的百万分率(ppm)。[0166]化合物编号1：1h nmr(300mhz,氯仿-d)δppm 2.29(s,6h),3.04(s,3h),3.16(s,3h),4.96(s,2h),5.59(br s,1h),7.01(d,j＝2.75hz,1h),7.36-7.47(m,2h),8.73(br s,1h)。signaling)，#9875)对o-glcn酰化蛋白进行免疫细胞化学(icc)检测来评估oga抑制(dorfmueller等人,2010chemistry&biology[化学与生物学],17:1250)。oga的抑制将导致o-glcn酰化蛋白水平的增加，导致实验中的信号增加。细胞核用hoechst染色以提供细胞培养物质量对照和粗略估计的即时化合物毒性(如果有的话)。icc图片用珀金埃尔默公司opera phenix平板显微镜成像，并用提供的软件珀金埃尔默公司harmony 4.1进行定量。[0177]按照标准程序，将细胞在dmem高葡萄糖(西格玛公司，#d5796)中繁殖。细胞测定前2天将细胞分开，计数并接种于聚-d-赖氨酸(pdl)包被的96孔(葛莱娜公司(greiner)，#655946)板(细胞密度为12,000个细胞/cm2(4,000个细胞/孔))的100μl测定培养基中(低葡萄糖培养基用于降低glcn酰化的基础水平)(park等人,2014the journal of biological chemistry[生物化学杂志]289:13519)。在化合物测试当天，从测定板中去除培养基并用90μl新鲜测定培养基补充。将10μl的10倍最终浓度的化合物添加至孔中。在细胞孵育箱中孵育6小时之前不久将板离心。dmso浓度设定为0.2％。通过施加真空丢弃培养基。为了细胞染色，去除培养基，并用100μl d-pbs(西格玛公司，#d8537)洗涤细胞一次。从下一步开始，除非另有说明，否则测定体积总是50μl，并且在没有搅拌和在室温下进行孵育。在室温下，将细胞在50μl 4％多聚甲醛(pfa，阿法埃莎公司(alpha aesar)，#043368)pbs溶液中固定15分钟。然后将pfa pbs溶液丢弃并在10mm tris缓冲液(生命技术公司(lifetechnologies)，#15567-027)、150mm nacl(生命技术公司，#24740-0110)，0.1％triton x(阿法埃莎公司，#a16046)(ph 7.5(icc缓冲液))中洗涤细胞一次，之后在相同缓冲液中透化10分钟。随后在室温下，将样品在含有5％山羊血清(西格玛公司，#g9023)的icc中封闭45-60分钟。然后将样品与第一抗体(来自商业提供者的1/1000，参见上文)在4℃下孵育过夜，并且随后在icc缓冲液中洗涤3次，持续5分钟。将样品与第二荧光抗体(1/500稀释，生命技术公司，#a-21042)一起孵育，并用在icc(生命技术公司，#h3570)中最终浓度为1μg/ml的hoechst33342进行细胞核染色1小时。在分析之前，将样品在icc碱缓冲液中手动洗涤2次，持续5分钟。[0178]使用珀金埃尔默公司phenix opera使用水20x物镜并每孔记录9个视野进行成像。在488nm处的强度读数用作孔中总蛋白质的o-glcn酰化水平的量度。为了评估化合物的潜在毒性，使用hoechst染色计数细胞核。使用参数非线性回归模型拟合计算ic50值。作为最大抑制，在每个平板上存在200um浓度的thiamet g。另外，在每个板上计算thiamet g的浓度应答。[0179]表5.生化测定和细胞测定中的结果。[0180]









图片声明：本站部分配图来自人工智能系统AI生成,觅知网授权图片,PxHere摄影无版权图库。本站只作为美观性配图使用,无任何非法侵犯第三方意图,一切解释权归图片著作权方,本站不承担任何责任。如有恶意碰瓷者,必当奉陪到底严惩不贷!




内容声明：本文中引用的各种信息及资料（包括但不限于文字、数据、图表及超链接等）均来源于该信息及资料的相关主体（包括但不限于公司、媒体、协会等机构）的官方网站或公开发表的信息。部分内容参考包括:(百度百科,百度知道,头条百科,中国民法典,刑法,牛津词典,新华词典,汉语词典,国家院校,科普平台)等数据,内容仅供参考使用,不准确地方联系删除处理！本站为非盈利性质站点,发布内容不收取任何费用也不接任何广告!




免责声明：我们致力于保护作者版权，注重分享，被刊用文章因无法核实真实出处，未能及时与作者取得联系，或有版权异议的，请联系管理员，我们会立即处理，本文部分文字与图片资源来自于网络，部分文章是来自自研大数据AI进行生成,内容摘自(百度百科,百度知道,头条百科,中国民法典,刑法,牛津词典,新华词典,汉语词典,国家院校,科普平台)等数据,内容仅供学习参考,不准确地方联系删除处理!的,若有来源标注错误或侵犯了您的合法权益，请立即通知我们，情况属实，我们会第一时间予以删除，并同时向您表示歉意,谢谢!