具有护肝效果的组合物及其制备方法与流程

医药医疗技术的改进;医疗器械制造及应用技术1.本发明涉及一种组合物及其制备方法，特别涉及一种具有护肝效 果的组合物及其制备方法。背景技术：2.橙皮苷为柑橘类水果中的一种黄酮类化合物，其主要储存于柑橘 类水果的果皮中。3.近年来有不少研究指出服用橙皮苷萃取物对于人体具有降血压、 降胆固醇、护肝和预防动脉硬化的效果，但却未见有人采用发酵的方 式使柑橘类水果中的橙皮苷含量增加，并使其功效不亚于橙皮苷萃取 物。技术实现要素：4.本发明的主要目的在于提供一种具有护肝效果的组合物及其制 备方法。5.技术方案：具有护肝效果的组合物，其系含有320～520μg/ml 的橙皮苷以及160～230μg/ml的橙皮素。6.具有护肝效果的组合物的制备方法，包括以下步骤：7.(1)、将柠檬压榨成柠檬汁；8.(2)、将步骤(1)得到的柠檬汁进行发酵，完成后即得到具有 护肝效果的组合物。9.进一步地，步骤(1)中该柠檬的压榨是将整颗柠檬连同果皮和 种子压榨成柠檬汁。10.进一步地，步骤(2)中直接将益生菌加入步骤(1)得到的柠檬 汁内进行发酵，且发酵的过程中需将温度控制在22℃～30℃之间并 持续搅拌10到22天，而在搅拌的过程中会不间断的透过搅拌设备将 空气打入柠檬汁内，使柠檬汁、益生菌以及空气三者能充分的混合。11.更进一步地，该益生菌由胚芽乳酸杆菌以及季也蒙有孢汉逊酵母 菌以混合比例介于(2～4):(3～5)之间。12.更进一步地，该柠檬汁和益生菌的混合比例介于(1～2):(0.03～ 0.3)之间。附图说明13.图1a-图1f：大鼠肝脏以苏木素-伊红染色(h.e.stain)的组织 图；14.图2a-图2f：大鼠肝脏以天狼星红染色(sirius red stain)的组 织图；15.图3：本发明的橙皮苷检测图谱；16.图4：橙皮素的标准图谱；17.图5：本发明稀释10倍后的橙皮素检测图谱。具体实施方式：18.为了让本发明的目的、功效、特征及结构能够有更为详尽的了解， 下面借助较佳实施例并配合图式说明如后。19.在一个实施例中，具有护肝效果的组合物，其含有橙皮苷和橙皮 素，其中：20.橙皮苷的含量为320μg/ml；21.橙皮素的含量为160μg/ml。22.另一个实施例中，具有护肝效果的组合物，其含有橙皮苷和橙皮 素，其中：23.橙皮苷的含量为520μg/ml；24.橙皮素的含量为230μg/ml。25.在又一个实施例中，具有护肝效果的组合物，其含有橙皮苷和橙 皮素，其中：26.橙皮苷的含量为402μg/ml；27.橙皮素的含量为205μg/ml。28.在一个实施例中，具有护肝效果的组合物的制备方法，包括以下 步骤：29.(1)、将柠檬压榨(裂解)成柠檬汁；30.(2)、再将柠檬汁进行发酵，最后得到具有护肝效果的组合物。31.进一步地，步骤(1)中该柠檬的压榨(裂解)是将整颗柠檬连 同果皮和种子压榨(裂解成柠檬汁)。32.进一步地，步骤(2)中将益生菌加入步骤(1)得到的柠檬汁内 进行发酵，且发酵的过程中需将温度控制在22℃并持续搅拌22天， 而在搅拌的过程中会不间断的透过搅拌设备将空气打入柠檬汁内，使 柠檬汁、益生菌以及空气三者能充分的混合。33.其中，该益生菌系由胚芽乳酸杆菌(lactobacillus plantarum) 以及季也蒙有孢汉逊酵母菌(hanseniaspora guilliermondii)以混 合比例为2:3所组成。34.该柠檬汁和益生菌的混合比例为1:0.03，该胚芽乳酸杆菌 (lactobacillus plantarum)寄存于德国菌种中心，寄存编号为dsm32004，该季蒙也有孢汉逊酵母菌(hanseniaspora guilliermondii) 寄存于德国菌种中心，寄存编号为dsm 32005。35.在另一个实施例中，具有护肝效果的组合物的制备方法，包括以 下步骤：36.(1)、将柠檬压榨(裂解)成柠檬汁；37.(2)、再将柠檬汁进行发酵，最后得到具有护肝效果的组合物。38.进一步地，步骤(1)中该柠檬的压榨(裂解)是将整颗柠檬连 同果皮和种子压榨(裂解成柠檬汁)。39.进一步地，步骤(2)中将益生菌加入步骤(1)得到的柠檬汁内 进行发酵，且发酵的过程中需将温度控制在30℃并持续搅拌10天， 而在搅拌的过程中会不间断的透过搅拌设备将空气打入柠檬汁内，使 柠檬汁、益生菌以及空气三者能充分的混合。40.其中，该益生菌系由胚芽乳酸杆菌(lactobacillus plantarum) 以及季也蒙有孢汉逊酵母菌(hanseniaspora guilliermondii)以混 合比例为4:5所组成。41.该柠檬汁和益生菌的混合比例为2:0.3之间，该胚芽乳酸杆菌 (lactobacillus plantarum)寄存于德国菌种中心，寄存编号为dsm32004，该季蒙也有孢汉逊酵母菌(hanseniaspora guilliermondii) 寄存于德国菌种中心，寄存编号为dsm 32005。42.在又一个实施例中，具有护肝效果的组合物的制备方法，包括以 下步骤：43.(1)、将柠檬压榨(裂解)成柠檬汁；44.(2)、再将柠檬汁进行发酵，最后得到具有护肝效果的组合物。45.进一步地，步骤(1)中该柠檬的压榨(裂解)是将整颗柠檬连 同果皮和种子压榨(裂解成柠檬汁)。46.进一步地，步骤(2)中将益生菌加入步骤(1)得到的柠檬汁内 进行发酵，且发酵的过程中需将温度控制在25℃并持续搅拌14天， 而在搅拌的过程中会不间断的透过搅拌设备将空气打入柠檬汁内，使 柠檬汁、益生菌以及空气三者能充分的混合。47.其中，该益生菌系由胚芽乳酸杆菌(lactobacillus plantarum) 以及季也蒙有孢汉逊酵母菌(hanseniaspora guilliermondii)以混 合比例为3:4所组成。48.该柠檬汁和益生菌的混合比例为1.5:0.15，该胚芽乳酸杆菌 (lactobacillus plantarum)寄存于德国菌种中心，寄存编号为dsm32004，该季蒙也有孢汉逊酵母菌(hanseniaspora guilliermondi i) 寄存于德国菌种中心，寄存编号为dsm 32005。49.本实施例以动物实验作验证，借此来证实服用本发明的组合物确 实具有护肝的功效，有关动物实验的相关方法以及检测结果如下所 示。50.试验动物：选用来自乐斯科生物科技股份有限公司的雄性大鼠 (wistar)。51.饲育管理：实验用的大鼠饲养于某动物室，动物室的温度为22ꢀ±2℃，并控制光照期为早上八点到晚上八点，黑暗期则为晚上八点 到翌日早上八点，光照期与黑暗期各十二小时，最后经一周适应期后 才开始试验。52.饮食配方：大鼠的饲料使用进口饲料(prolab rmh 2500)，饮用 水则经逆渗透高压灭菌处理。53.试验设计：将大鼠分为控制组、负对照组、低剂量对照组、中剂 量对照组、高剂量对照组以及水飞蓟素(silymarin)对照组，各对照 组于每周投予四氯化碳(ccl4)溶液两次，投予的时间为早上8:00到 8:40之间，投予的量依照大鼠体重决定(每100g投予0.2ml四氯化 碳溶液)，并于四氯化碳(ccl4)溶液投予的前一天将不同剂量的本发 明投予各对照组；54.接着于四氯化碳(ccl4)溶液投满一、三、六周时，将大鼠在异氟 醚(isoflurane)麻醉下从尾动脉抽血，并于第八周将大鼠麻醉牺牲后 由腹动脉采血，并同时将大鼠的肝脏及脾脏取下，接着以冰冷生理食 盐水洗净并吸干水分后进行秤重，再根据体重算出相对重量，最后将 最大叶肝脏分成两部分，其中一部分浸泡于10％中性福尔马林溶液中 提供给病理切片使用，另外一部分则在秤重后于100℃的环境下完全 烘干，并用于测定胶原蛋白含量，而其余的肝脏则分装成四袋并储存 于-80℃的保存室中备用。55.试验剂量的配制：本发明的成人建议剂量为一天50ml，再依照 人与大鼠间代谢换算比例6.2计算，低剂量对照组大鼠投予50/60×ꢀ6.2＝5.2ml/kg的本发明、中剂量对照组大鼠投予50/60×6.2×2＝10 ml/kg的本发明、高剂量对照组大鼠投予50/60×6.2×5＝26ml/kg 的本发明。56.临床症状观察：试验期间每日进行临床观察，并记录大鼠是否有 异常临床症状或死亡，并每周定时量测大鼠体重变化。57.血浆生化学检验：将取得的血液以4700rpm离心15分钟后取出 血浆，再使用市售检验试剂(roche)以及血清生化自动分析仪(cobasmira)测定，而第一、三、六周所取得的血液只进行丙胺酸转胺酶(alt) 和天门冬胺酸转胺酶(ast)的检验，最后于第八周增加白蛋白 (albumin)的测定。58.肝组织谷胱甘肽(glutathione)含量测定：依据希辛和希夫 (hissin and hilf)的方法，将0.5公克的肝脏组织加入5ml的1.15％ 氯化钾(kcl)溶液后，以均质机均质化后取1ml的均浆与1ml的三氯 乙酸(trichloroacetic acid)混合均匀，再以3000×g离心15分钟 后收集0.01ml的上清液，最后再加入0.18ml的磷酸-伸乙二胺四乙 酸(phosphate-edta)缓冲液以及新鲜配制的0.01mlσ-邻苯二甲醛 (σ-phthaldehyde)溶液混合均匀后，以420奈米的波长的荧光、激 发光波长350奈米进行侦测。59.肝脏组织脂质过氧化(lipid peroxidation)的测定：依据大川 (ohkawa)等人的方法，以1.15％氯化钾(kcl)溶液制备10％肝组织 均质液，经4000rpm、4℃离心5分钟。取上清液和硫巴比妥酸 (thiobarbituric acid)溶液加热反应，以正丁醇(n-butanol)、吡啶 (pyridine)混合液(混合比例15:1)萃取，在532nm测吸光度，脂质 过氧化的程度以nmol丙二醛(malondialdehyde(mda))/mg蛋白 (protein)表示之。60.肝脏组织蛋白质含量测定：使用脂质过氧化测定的肝组织均质液 上清液，以市售蛋白质测定试剂coomassie blue(kenlor indus.inc.； usa)呈色，于540nm测吸光值，并以牛血清白蛋白为标准品，而蛋白 质量以mg/g组织表示之。61.肝脏组织胶原蛋白(hydroxyproline)含量及肝脏含水量的测定： 依照纽曼和洛根(1950)(neuman and logan(1950))的方法，将肝 脏干组织水解后加双氧水(h2o2)氧化，再以对-二甲基胺基苯甲醛 (p-dimethylaminobenzoaldehyde)呈色，于540nm测吸光值，胶原蛋 白(hydroxyproline)量以μg/g组织表示之。62.肝脏组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,sod)、过氧 化氢酶(catalase)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase, gsh-px)活性测定：63.sod活性测定依据xia et al.的方法，活性的测定使用市售sod 活性检验试剂ransod(randox lab.ltd.uk)，sod活性定义为抑制 2-(-碘苯基)-3-(4-硝基苯酚)-5-苯基四唑氯化物(2-(-iodophenyl)-3-(4-nitrophenol)-5-phenyltetrazoliumchloride)还原反应速率50％所需酵素的量为一个单位(u)，以u/mg 蛋白表示之。64.过氧化氢酶(catalase)活性测定依据埃比(aebi)的方法，其 活性定义以k(一级反应的速率常数min-1)为一个单位(u)，以u/mg 蛋白表示之，k的计算方法为k＝(2.3/t2-t1)(loga1/a2)，其中a1 为t1＝0秒时的吸光值，a2为t2＝25秒时的吸光值。65.gsh-px活性测定使用市售gsh-px活性检验试剂ransel(randoxlab.ltd.uk)，gsh-px活性定义为每分钟氧化1μmol nadph所需 酵素的量为为一个单位(u)，肝组织的gsh-px活性以mu/mg蛋白 表示之。66.病理检验：肝脏组织经福尔马林固定后进行石腊包埋及切片制 作，并使用两种染色法，一种为一般的h.e.染色(苏木精和伊红染 色)(h.e.stain(hematoxylin and eosin stain))，另一种为胶 原蛋白的特殊染色即天狼星红染色(sirius red stain)，再依护肝 功能评估办法将肝脏的损伤分为四个等级并加以评分。67.在本实施例中在本次动物试验中，主要系探讨本发明对于保护肝 脏的功效，并将试验分为正常组(给予灭菌水)、负对照组(给予四氯 化碳以及灭菌水)、低剂量对照组(给予四氯化碳以及1倍相对人体剂 量的本发明)、中剂量对照组(给予四氯化碳及2倍相对人体剂量的本 发明)、高剂量对照组(给予四氯化碳以及5倍相对人体剂量的本发 明)、水飞蓟素对照组(给予四氯化碳以及200mg/kg市售水飞蓟素)， 且每组均为10只试验动物，经8周后进行血液、肝脏之相关检测， 而实验所得数据均以单尾变异数分析(one-way analysis of variance)，并进行邓肯多重差距检定(duncan's multiple range test)，当p《0.05时表示组间具有显著性差异，其结果如下列所示：68.首先，就各组大鼠的每周平均体重变化的纪录如下表(一)所示：[0069][0070]表(一)[0071]表(一)中所有数据均以mean±sd(n＝10-12)表示，以英文字母 a及b表示统计的结果，而相同字母表示组间不具统计上差异 (p》0.05)。[0072]由表(一)可看出大鼠投予四氯化碳后，负对照组于第一至第八周 平均体重较控制组，而低、中、高剂量以及水飞蓟素对照组的大鼠体 重与负对照组相比没有明显差异。[0073]接着，就各组大鼠于第一、三、六、八周中血浆内丙胺酸转胺酶 (alt)、天门冬胺酸转胺酶(ast)以及白蛋白(albumin)的纪录如下表 (二)至表(五)所示：[0074]第一周剂量ast(u/l)alt(u/l)控制组无72.7±6.2a44.4±4.1a负对照组无329.0±98.6c163.8±59.2c低剂量对照组5(ml/kg)184.2±71.5b93.6±13.4b中剂量对照组10(ml/kg)160.5±41.0b83.8±24.9b高剂量对照组26(ml/kg)319.1±82.1c158.3±46.2c水飞蓟素对照组200(mg/kg)224.3±100.6b111.6±67.2b[0075]表(二)[0076][0077][0078]表(三)[0079]第六周剂量ast(u/l)alt(u/l)控制组无68.7±9.1a44.2±4.0a负对照组无2195.5±1348.6c1793.3±878.6c低剂量对照组5(ml/kg)1270.5±442.1b1055.7±274.9b中剂量对照组10(ml/kg)897.3±306.8b798.6±274.9b高剂量对照组26(ml/kg)1307.5±555.9b1063.0±449.5b水飞蓟素对照组200(mg/kg)1328.5±738.8b1030.0±648.6b[0080]表(四)[0081][0082][0083]表(五)[0084]表(二)至表(五)中所有数据均以mean±sd(n＝10-12)表示，以英 文字母a、b、c、d表示统计的结果，而相同字母表示组间不具统计 上差异(p》0.05)。[0085]由表(二)至表(五)可看出大鼠在投予四氯化碳后，负对照组于第 一、三、六、八周血浆中的丙胺酸转胺酶(alt)、天门冬胺酸转胺酶 (ast)值均显著高于控制组。[0086]由表(二)可知，第一周的低剂量对照组、中剂量对照组及水飞蓟 素对照组血浆中的丙胺酸转胺酶(alt)、天门冬胺酸转胺酶(ast)值均 显著低于负对照组，而高剂量对照组血浆中的丙胺酸转胺酶(alt)、 天门冬胺酸转胺酶(ast)值则与负对照组并无明显差异。[0087]由表(三)可知，第三周的低剂量对照组、中剂量对照组、高剂量 对照组及水飞蓟素对照组血浆中的天门冬胺酸转胺酶(ast)值显著低 于负对照组，而低剂量对照组及水飞蓟素对照组血浆中的丙胺酸转胺 酶(alt)显著低于负对照组，但中剂量对照组、高剂量对照组血浆中 的丙胺酸转胺酶(alt)与负对照组比较没有差异。[0088]由表(四)、表(五)可知，低剂量对照组、中剂量对照组、高剂量 对照组及水飞蓟素对照组的大鼠血浆中丙胺酸转胺酶(alt)、天门冬 胺酸转胺酶(ast)值均显著低于负对照组。[0089]由表(五)可知，负对照组大鼠血浆中的白蛋白浓度显著低于控制 组，而低剂量对照组、中剂量对照组、高剂量对照组及水飞蓟素对照 组血浆中的白蛋白浓度高于负对照组。[0090]接着，就各组大鼠肝脏和脾脏的纪录如下表(六)及(七)所示：[0091][0092][0093]表(六)[0094][0095]表(七)[0096]表(六)、表(七)中所有数据均以mean±sd(n＝10-12)表示，以英 文字母a、b、c、d表示统计的结果，而相同字母表示组间不具统计 上差异(p》0.05)。[0097]由表(六)可知，负对照组的肝脏绝对重量及相对重量较控制组 高，而中剂量对照组、高剂量对照组及水飞蓟素对照组的肝脏绝对重 量及相对重量低于负对照组，另外低剂量对照组的肝脏绝对重量及相 对重量则和负对照组没有显著差异。[0098]由表(六)可知，负对照组的肝脏含水量百分比高于控制组，而低 剂量对照组、中剂量对照组、高剂量对照组的肝脏含水量百分比显著 低于负对照组，但水飞蓟素对照组的肝脏含水量百分比和负对照组没 有差异。[0099]由表(七)可知，负对照组的脾脏绝对重量及相对重量较控制组 高，而低量对照组、中剂量对照组、高剂量对照组及水飞蓟素对照组 的脾脏绝对重量及相对重量显著低于负对照组。[0100]接续，就各组大鼠肝脏谷胱甘肽(glutathione)含量、脂质过氧 化程度的影响如下表(八)所示：[0101][0102]表(八)[0103]表(八)中所有数据均以mean±sd(n＝10-12)表示，以英文字母a、 b、c表示统计的结果，而相同字母表示组间不具统计上差异(p》0.05)。[0104]由表(八)可知，负对照组肝脏中的脏谷胱甘肽(glutathione)含 量减少，而低量对照组、中剂量对照组、高剂量对照组及水飞蓟素对 照组的脏谷胱甘肽(glutathione)含量高于负对照组，且其含量和控 制组没有明显差异。[0105]由表(八)可知，负对照组肝脏中丙二醛(malondialdehyde)的含 量增加，即代表脂质过氧化程度明显提升，而低量对照组、中剂量对 照组、高剂量对照组及水飞蓟素对照组的丙二醛(malondialdehyde) 明显低于负对照组。[0106]接续，就各组大鼠肝脏蛋白质和胶原蛋白(hydroxyproline)含量 的影响如下表(九)所示：[0107][0108]表(九)[0109]表(九)中所有数据均以mean±sd(n＝10-12)表示，以英文字母a、 b、c表示统计的结果，而相同字母表示组间不具统计上差异(p》0.05)。[0110]由表(九)可知，负对照组的肝脏蛋白质显著低于对照组，而高剂 量对照组的肝脏蛋白质含量高于负对照组，而低剂量对照组、中剂量 对照组及水飞蓟素对照组的肝脏蛋白质含量与负对照组比较没有差 异。[0111]由表(九)可知，负对照组肝脏胶原蛋白(hydroxyproline)的含量 增加，而低剂量对照组、中剂量对照组、高剂量对照组及水飞蓟素对 照组的肝脏胶原蛋白(hydroxyproline)含量明显较负对照组低。[0112]接续，就各组大鼠肝脏中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,sod)、过氧化氢酶(catalase)、谷胱甘肽过氧化物酶 (glutathione peroxidase,gsh-px)活性的影响如下表(十)所示：[0113][0114][0115]表(十)[0116]表(十)中所有数据均以mean±sd(n＝10-12)表示，以英文字母a、 b、c表示统计的结果，而相同字母表示组间不具统计上差异(p》0.05)。[0117]由表(十)可知，负对照组肝脏中的三种抗氧化酵素(超氧化物歧 化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶)活性明显低于控制组，而 低剂量对照组、中剂量对照组、高剂量对照组及水飞蓟素对照组的超 氧化物歧化酶(sod)、过氧化氢酶(catalase)活性与负对照组比较没 有差异性，另外就甘肽过氧化物酶(gsh-px)活性的部分，低剂量对照 组、中剂量对照组、高剂量对照组的甘肽过氧化物酶(gsh-px)活性与 负对照组比较没有差异，而水飞蓟素对照组的甘肽过氧化物酶 (gsh-px)活性则高于负对照组。[0118]再来，就各组大鼠肝脏组织的病理变化如下表(十一)、表(十二) 所示：[0119][0120][0121]表(十一)[0122][0123][0124]表(十二)[0125]表(十一)、表(十二)中所有数据均以mean±sd(n＝10-12)表示， 以英文字母a、b、c表示统计的结果，而相同字母表示组间不具统计 上差异(p》0.05)，另外，表(十一)、表(十二)中的(0)代表的是正常， (1)代表非常轻微，(2)代表轻微，(3)代表中度，(4)代表为严重。[0126]由表(十一)、表(十二)再搭配图1a-图1f，1a-图1f中的肝脏 组织别对应控制组(图1a)、负对照组(图1b)、低剂量对照组(图1c)、 中剂量对照组(图1d)、高剂量对照组(图1e)及水飞蓟素对照组(图 1f)，因此从染色中可明显看出负对照组(图1b)肝脏组织空泡化和坏 死的情形，而低剂量对照组(图1c)、中剂量对照组(图1d)及水飞蓟 素对照组(图1f)的肝脏组织空泡化的情形与负对照组(图1b)相比较 没有差异，且高剂量对照组(图1e)组肝脏组织空泡化程度显著高于 负对照组(图1b)，又低剂量对照组(图1c)、中剂量对照组(图1d)、 高剂量对照组(图1e)及水飞蓟素对照组(图1f)肝脏组织坏死的情形 与负对照组(图1b)相比较没有差异。[0127]如图2a-图2f所示，图2a-图2f 2中的肝脏组织分别对应控制 组(图2a)、负对照组(图2b)、低剂量对照组(图2c)、中剂量对照组(图2d)、高剂量对照组(图2e)及水飞蓟素对照组(图2f)，可明确看 出负对照组(图2b)组织纤维化情形，而低剂量对照组(图2c)、中剂 量对照组(图2d)、高剂量对照组(图2e)及水飞蓟素对照组(图2f)的 肝脏组织纤维化程度显著低于负对照组(图2b)。[0128]续请参阅表(十三)以及图3，表(十三)为本发明的橙皮苷含 量检测结果，图3为本发明的橙皮苷检测图谱。[0129]橙皮苷含量检测结果[0130][0131]表(十三)[0132]再来，本发明更进一步的将组合物的成分进行分析，并以此来检 测本发明中的橙皮苷以及橙皮素含量和其图谱分析。[0133]接着，将取任意三组利用相同配比和制程所制造出的本发明进行 橙皮苷含量检测，而其结果如表(十三)所示，由表(十三)中可看 出橙皮苷含量分别为491.39±2.89、485.96±2.23、489.01±2.25 μg/ml。[0134]再来如图3所示，图3由上而下分别为标准的橙皮苷图谱以及三 组本发明的图谱，且从图谱中可看出三组送验的本发明在显示橙皮苷 的区段有产生峰值，且该峰值与标准的橙皮苷峰值有所重叠，因此本 发明中确实是含有橙皮苷。[0135]续请参阅图4以及图5，图4为橙皮素的标准图谱，图5为本发 明稀释10倍后的橙皮素检测图谱。[0136]接着，将图3所示的图谱与表(十三)所示的图谱相比，可发现 本发明在显示橙皮素的区段有产生峰值，且该峰值与标准的橙皮素峰 值有所重叠，因此本发明中确实是含有橙皮素。[0137]综合上述的检测结果，可将本发明的效果整理如下列所示：[0138]1.本试验使用四氯化碳诱发肝损伤来使血浆中丙胺酸转胺酶 (alt)、天门冬胺酸转胺酶(ast)的活性明显上升，且结果显示服用不 同剂量的对照组血清中的丙胺酸转胺酶(alt)、天门冬胺酸转胺酶 (ast)活性明显降低，显示服用本发明能减轻四氯化碳对肝脏的伤害。[0139]2.血浆中的白蛋白主要来自于肝脏的合成，因此在慢性肝炎引起 肝脏纤维化时血浆白蛋白含量会逐渐下降，而服用不同剂量的对照组 织白蛋白含量均大于负对照组，显示服用本发明能改善四氯化碳所引 起的肝脏蛋白质合成功能减退。[0140]3.当肝脏纤维化后会使血流进入肝脏受到阻力，进而引起门脉高 压并连带影响到脾脏的血流并使得脾脏肿大，而上述检测中显示显示 服用本发明能改善脾脏肿大的情形并有减缓门脉高压的作用。[0141]4.当肝脏受到损伤时会有发炎的情形，也同时会启动其再生的功 能并使肝脏重量增加，而本实验中的中、高剂量对照组对增加的肝脏 重量显现减轻作用，同时对肝脏含水量也有减少作用，由此可知服用 本发明能舒缓肝脏发炎的症状。[0142]5.慢性肝炎会引起肝脏纤维化即结缔组织增生，而结缔组织主要 由胶原蛋白构成，且胶原蛋白(hydroxyproline)是胶原蛋白特有的 成分，因此测定胶原蛋白的可以反应出胶原蛋白的量，并可用来表示 纤维化的程度，而各剂量对照组检测出的胶原蛋白含量均低于负对照 组，显示服用本发明可以减轻肝脏纤维化的作用。[0143]6.已知由四氯化碳诱发的肝脏纤维化与自由基的伤害造成脂质 过氧化有关，在本试验中负对照组的肝脏组织脂质过氧化程度明显上 升，而服用本发明的各对照组具有减少脂质过氧化程度。[0144]7.谷胱甘肽(glutathione)参与很多肝脏细胞功能，诸如解毒、 清除自由基及调节细胞周期等，在本试验中负对照组降低肝脏谷胱 甘肽(glutathione)含量，而服用本发明的各剂量对照组能提升肝脏 谷胱甘肽(glutathione)含量。[0145]以上所述技术方案仅系本发明的较佳实施例而已，凡是应用本发 明说明书及申请专利范围所为的其它等效结构变化的技术方案，理应 包含在本发明的申请专利范围内。









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