高分子支撑的噻吩并氮呯化合物及其用途的制作方法

医药医疗技术的改进;医疗器械制造及应用技术高分子支撑的噻吩并氮呯化合物及其用途1.相关申请的交叉引用2.本非临时申请要求2019年10月25日提交的美国临时申请号62/926,324的优先权益，所述临时申请以全文引用的方式并入。发明领域3.本发明总体上涉及一种高分子支撑的化合物，所述高分子支撑的化合物包含缀合至一个或多个噻吩并氮呯分子的高分子支撑体。4.发明背景5.需要用于递送树突状细胞佐剂的新组合物和方法，以达到难以接近的肿瘤和/或扩展用于癌症患者和其它受试者的治疗选项。本发明提供了此类组合物和方法。技术实现要素：6.本发明总体上关于高分子支撑的化合物，所述高分子支撑的化合物包含通过缀合而连接至一个或多个噻吩并氮呯衍生物的高分子支撑体。本发明进一步关于包含反应性官能团的噻吩并氮呯衍生物中间体组合物。此类中间体组合物是适合用于形成高分子支撑的化合物的基质，其中高分子支撑体可以通过连接子l共价结合至具有下式的噻吩并氮呯(taz)部分：[0007][0008]其中r1、r2、r3和r4中的一者附接至l。r1、r2、r3和r4取代基在本文中定义。[0009]本发明的一个方面是一种高分子支撑的化合物，所述高分子支撑的化合物包含共价附接至连接子的高分子支撑体，所述连接子共价附接至一个或多个噻吩并氮呯部分。[0010]本发明的另一个方面是一种噻吩并氮呯-连接子化合物。[0011]本发明的另一个方面是一种用于治疗癌症的方法，所述方法包括施用治疗有效量的高分子支撑的化合物，所述高分子支撑的化合物包含通过缀合而连接至一个或多个噻吩并氮呯部分的高分子支撑体。[0012]本发明的另一个方面是一种高分子支撑的化合物用于治疗癌症的用途，所述高分子支撑的化合物包含通过缀合而连接至一个或多个噻吩并氮呯部分的高分子支撑体。[0013]本发明的另一个方面是一种通过一个或多个噻吩并氮呯部分与高分子支撑体缀合来制备高分子支撑的化合物的方法。具体实施方式[0014]现在将详细参考本发明的某些实施方案，其实例以所附结构和化学式说明。虽然将结合所列举的实施方案描述本发明，但应了解，并不意图将本发明限于那些实施方案。相反，本发明意图涵盖可以包括于如权利要求书所界定的本发明范围内的所有替代物、修改和等同物。[0015]本领域技术人员将识别类似或等同于本文所描述的那些的许多方法和材料，其可以用于实施本发明。本发明决不限于所描述的方法和材料。[0016]定义[0017]“佐剂”是指能够在暴露于佐剂的受试者中引发免疫反应的物质。短语“佐剂部分”是指如本文所描述，例如经由连接子共价键结至抗体构建体的佐剂。佐剂部分可以在键结至高分子支撑体时或在向受试者施用高分子支撑的化合物后从高分子支撑体裂解(例如，酶促裂解)之后引发免疫反应。[0018]术语“toll样受体”和“tlr”是指高度保守的哺乳动物蛋白家族的任何成员，所述成员识别病原体相关的分子模式并且充当先天免疫中的关键信号传导元件。tlr多肽共享特征结构，所述特征结构包括具有富亮氨酸重复的细胞外结构域、跨膜结构域和tlr信号传导中所涉及的细胞内结构域。[0019]术语“toll样受体7”和“tlr7”是指与公开可用的tlr7序列，例如人类tlr7多肽的genbank寄存编号aaz99026或鼠类tlr7多肽的genbank寄存编号aak62676共享至少约70％、约80％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或更高序列同一性的核酸或多肽。[0020]术语“toll样受体8”和“tlr8”是指与公开可用的tlr7序列，例如人类tlr8多肽的genbank寄存编号aaz95441或鼠类tlr8多肽的genbank寄存编号aak62677共享至少约70％、约80％、约90％、约95％、约96％、约97％、约98％、约99％或更高序列同一性的核酸或多肽。[0021]“tlr激动剂”是直接或间接结合至tlr(例如tlr7和/或tlr8)以诱导tlr信号传导的物质。tlr信号传导中任何可检测的差异可以指示激动剂刺激或活化tlr。信号传导差异可以表现为例如以下各者的变化：靶基因的表达、信号转导组分的磷酸化、诸如核因子-κb(nf-κb)的下游元件的细胞内定位、某些组分(诸如il-1受体相关激酶(irak))与其它蛋白质或细胞内结构的缔合，或诸如激酶(诸如有丝分裂原活化蛋白激酶(mapk))的组分的生物化学活性。[0022]如本文所用的短语“高分子支撑的化合物”是指经由连接部分共价键结至tlr激动剂的高分子支撑体。[0023]如本文所用的术语“高分子支撑体”、“高分子的支撑体”或“高分子”可以互换使用以指代在结构表面上具有可以进行修饰的化学部分的有机或无机结构。在一些实施方案中，高分子支撑体是可以用于治疗学、诊断学或化学测定的树脂、珠粒、探针、标签、孔、板或任何其它表面。树脂、珠粒、探针、标签、孔、板或任何其它表面可以由任何适合的材料制成，只要所述材料可以进行表面修饰即可。在一些实施方案中，高分子支撑体是具有至少约200da(例如，至少约500da、至少约1,000da、至少约2,000da、至少约5,000da或至少约10,000da)的分子量的化学结构(例如，生物结构或无机构架)。作为单一实体，高分子支撑体相对于本文所描述的tlr激动剂可以是生物活性的或生物非活性的。然而，当与tlr激动剂组合使用时，理想地增强tlr激动剂的生物活性，例如，通过提供靶向作用(即，tlr活性)、有益的脱靶作用(即，除tlr活性以外的生物活性)、改善的药物动力学特性(例如，半衰期延长)、增强的生物递送(例如，肿瘤穿透)，或额外的生物刺激、分化、上调和/或下调。在某些实施方案中，高分子支撑体和tlr激动剂的生物作用是协同的，即，高于作为单一实体的高分子支撑体和tlr激动剂中每一者的生物活性的总和。举例来说，高分子支撑体可以是生物聚合物(例如，含糖聚合物、纤维素聚合物等)、纳米粒子(例如，碳纳米管、量子点、金属纳米粒子(例如，银、金、二氧化钛、二氧化硅、二氧化锆、氧化铝或三氟化镱)，等)、脂质(例如，脂质囊泡、胶束、脂质体等)、碳水化合物(例如，糖、淀粉、纤维素、糖原等)、肽(例如，多肽、蛋白质、模拟肽、糖肽等)、抗体构建体(例如，抗体、抗体衍生物(包括fc融合体、fab片段和scfv)，等)、核苷酸(例如，rna、dna、反义、sirna、适体等)，或它们的任何组合。在一些实施方案中，高分子支撑体是肽、核苷酸、糖、脂质或抗体。在某些实施方案中，高分子支撑体是免疫检查点抑制剂。[0024]如本文所用的术语“生物聚合物”是指由活生物体产生的任何聚合物。举例来说，生物聚合物可以包括肽、多肽、蛋白质、寡核苷酸、核酸(例如，rna和dna)抗体、多糖、碳水化合物、糖、肽激素、糖蛋白、糖原等。或者，可以使用生物聚合物的亚单元，诸如脂肪酸、葡萄糖、氨基酸、琥珀酸盐、核糖核苷酸、核糖核苷、脱氧核糖核苷酸和脱氧核糖核苷。说明性实例包括抗体或其片段；细胞外基质蛋白，诸如层粘连蛋白、纤维连接蛋白、生长因子、肽激素和其它多肽。在一些实施方案中，生物聚合物包含软木脂、黑色素、木质素或纤维素，或生物聚合物是糖苷的。[0025]如本文所用的术语“纳米粒子”是指具有约1nm至约100nm的直径的支撑结构。示例性结构类型包括纳米粉末、纳米粒子、纳米簇、纳米棒、纳米管、纳米晶体、纳米球、纳米链、纳米礁、纳米盒和量子点。纳米粒子可以含有无机材料(例如，银、金、羟基磷灰石、粘土、二氧化钛、二氧化硅、二氧化锆、碳(石墨)、金刚石、氧化铝、三氟化镱等)或有机材料(例如，胶束、树状物、囊泡、脂质体等)。或者，纳米粒子可以具有有机材料与无机材料的混合物。[0026]如本文所用的术语“脂质”是指疏水性或两亲性生物分子。示例性脂质包括脂肪酸、蜡、固醇、脂溶性维生素、单酸甘油酯、二酸甘油酯、三酸甘油酯、磷脂、鞘脂、糖脂、聚酮、固醇脂、甘油磷脂、孕烯醇酮脂等。脂质可以存在于任何适合的高分子结构中，例如，囊泡、胶束、脂质体等。[0027]如本文所用的术语“碳水化合物”是指包含单糖、二糖、寡糖或多糖的任何化学实体。举例来说，化学实体可以包含糖(例如，果糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖、半乳糖等)、淀粉、糖原或纤维素。[0028]术语“多肽”、“肽”和“蛋白质”在本文中可互换使用以指代氨基酸残基的聚合物。这些术语还适用于其中一个或多个氨基酸残基是相应天然存在的氨基酸的人工化学模拟物的氨基酸聚合物，以及天然存在的氨基酸聚合物和非天然存在的氨基酸聚合物。肽可以具有任何适合的翻译后修饰(例如，磷酸化、羟基化、磺化、棕榈酰化、糖基化、二硫键形成、半乳糖基化、岩藻糖基化等)。[0029]如本文所用的短语“替代性蛋白质支架”是指非免疫球蛋白源性蛋白质或肽。此类蛋白质和肽一般可进行工程改造并且可以经过设计以赋予针对给定抗原的单特异性、赋予双特异性或多特异性。可以使用若干方法进行替代性蛋白质支架的工程改造。可以使用环接枝方法，其中将已知特异性的序列接枝于支架的可变环上。序列随机化和诱变可以用于开发突变体文库，所述文库可以使用各种展示平台(例如，噬菌体展示)进行筛选以鉴定新颖结合子。定点诱变也可以用作类似方法的一部分。替代性蛋白质支架以多种尺寸存在，范围从具有最小二级结构的小肽至具有与全尺寸抗体类似的尺寸的大蛋白质。支架的实例包括但不限于胱氨酸扭结的小蛋白(也称为扭结素(knottin))、环胱氨酸扭结的小蛋白(也称为大环寡肽(cyclotide))、高亲和性多聚体(avimer)、亲和体(affibody)、人类纤维连接蛋白的第十个iii型结构域、达尔潘(darpin)(设计的锚蛋白重复序列)和抗运载蛋白(anticalin)(也称为脂质运载蛋白(lipocalin))。具有已知特异性的天然存在的配体也可以进行工程改造以赋予对给定标靶的新颖特异性。可以进行工程改造的天然存在的配体的实例包括egf配体和vegf配体。工程改造的蛋白质可以作为单体蛋白质或作为多聚体产生，这取决于所需结合策略和特异性。蛋白质工程改造策略可以用于将替代性蛋白质支架融合至fc结构域。[0030]如本文所用的术语“核苷酸”是指包含脱氧核糖核酸(“dna”)、核糖核酸(“rna”)、脱氧核糖核酸衍生物或核糖核酸衍生物的任何化学实体。示例性的基于核苷酸的结构包括rna、dna、反义寡核苷酸、sirna、适体等。如本文所用的术语“脱氧核糖核酸衍生物”和“核糖核酸衍生物”分别是指已经例如通过去除磷酸骨架、使羟基甲基化或用硫醇基置换羟基而修饰的dna和rna。[0031]如本文所用的短语“抗体构建体”是指包含抗原结合结构域和fc结构域的多肽。抗体构建体可以包含抗体或是抗体。[0032]“抗体”是指包含来自免疫球蛋白基因的抗原结合区(包括互补决定区(cdr))的多肽或其片段。术语“抗体”特定涵盖展现所需生物活性的单克隆抗体(包括全长单克隆抗体)、多克隆抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)和抗体片段。示例性免疫球蛋白(抗体)结构单元包含四聚体。每个四聚体由两对相同多肽链组成，每一对具有由二硫键连接的一条“轻”链(约25kda)和一条“重”链(约50-70kda)。每条链由结构域组成，所述结构域称作免疫球蛋白结构域。这些结构域按大小和功能分为不同类别，例如，轻链和重链上的可变结构域或区(分别是vl和vh)以及轻链和重链上的恒定结构域或区(分别是cl和ch)。每条链的n端界定约100至110个或更多个氨基酸的可变区，称作互补位(paratope)，其主要负责抗原识别，即，抗原结合结构域。轻链分为κ或λ。重链分为γ、μ、α、δ或ε，其依次分别定义免疫球蛋白种类igg、igm、iga、igd和ige。igg抗体是由四条肽链组成的约150kda大分子。igg抗体含有两条约50kda的相同种类γ重链和两条约25kda的相同轻链，由此成为四聚四级结构。两条重链由二硫键彼此连接并且各自连接至轻链。所得四聚体具有两个相同半部分，它们一起形成类y形状。叉形物的每个末端含有相同抗原结合结构域。人类中存在四种igg子类(igg1、igg2、igg3和igg4)，以它们在血清中的丰度顺序命名(即，igg1最丰富)。通常，抗体的抗原结合结构域在结合至癌细胞的特异性和亲和力中将最为关键。[0033]“抗体构建体”是指包含(i)抗原结合结构域和(ii)fc结构域的抗体或融合蛋白。[0034]“表位”意指与抗原结合结构域结合的抗原的任何抗原决定子或表位决定子(即，在抗原结合结构域的互补位处)。抗原决定子通常由分子的化学活性表面基团，诸如氨基酸或糖侧链组成，并且通常具有特定三维结构特征以及特定电荷特征。[0035]术语“fc受体”或“fcr”是指结合至抗体的fc区的受体。存在三个主要种类的fc受体：(1)结合至igg的fcγr，(2)结合至iga的fcαr，以及(3)结合至ige的fcεr。fcγr家族包括若干成员，诸如fcγi(cd64)、fcγriia(cd32a)、fcγriib(cd32b)、fcγriiia(cd16a)和fcγriiib(cd16b)。fcγ受体对igg的亲和力不同，并且对igg子类(例如igg1、igg2、igg3和igg4)的亲和力也不同。[0036]“生物类似药(biosimilar)”是指具有类似于以下抗体的活性特性的经核准的抗体构建体：例如，先前经核准的pd-l1靶向抗体构建体，诸如阿特珠单抗(atezolizumab)(tecentriqtm,genentech,inc.)、得瓦鲁单抗(durvalumab)(imfinzitm,astrazeneca)和阿维鲁单抗(avelumab)(bavenciotm,emd serono,pfizer)；先前经核准的her2靶向抗体构建体，诸如曲妥珠单抗(trastuzumab)(herceptintm,genentech,inc.)和帕妥珠单抗(pertuzumab)(perjetatm,genentech,inc.)；或cea靶向抗体，诸如拉贝妥珠单抗(labetuzumab)(cea-cidetm,mn-14,hmn14,immunomedics)cas登记号219649-07-7)。[0037]“生物改良药(biobetter)”是指经核准的抗体构建体，其为诸如阿特珠单抗、得瓦鲁单抗、阿维鲁单抗、曲妥珠单抗、帕妥珠单抗和拉贝妥珠单抗的先前经核准的抗体构建体的改良。生物改良药相对于先前经核准的抗体构建体可以具有一个或多个修饰(例如改变的聚糖谱，或独特表位)。[0038]“氨基酸”是指可以并入肽、多肽或蛋白质中的任何单体单元。氨基酸包括天然存在的α-氨基酸及其立体异构体，以及非天然(非天然存在的)氨基酸及其立体异构体。给定氨基酸的“立体异构体”是指具有相同分子式和分子内键，但键和原子的三维排列不同的异构体(例如l-氨基酸和对应的d-氨基酸)。氨基酸可以经糖基化(例如n-连接的聚糖、o-连接的聚糖、磷酸聚糖、c-连接的聚糖，或糖基化阳离子(glypication))或去糖基化。氨基酸在本文中可以由通常已知的三字母符号或由iupac-iub生物化学命名委员会推荐的单字母符号来提及。[0039]天然存在的氨基酸是由遗传密码编码的那些氨基酸，以及后来经修饰的那些氨基酸，例如羟脯氨酸、γ-羧基谷氨酸和o-磷酸丝氨酸。天然存在的α-氨基酸包括但不限于丙氨酸(ala)、半胱氨酸(cys)、天冬氨酸(asp)、谷氨酸(glu)、苯丙氨酸(phe)、甘氨酸(gly)、组氨酸(his)、异亮氨酸(ile)、精氨酸(arg)、赖氨酸(lys)、亮氨酸(leu)、甲硫氨酸(met)、天冬酰胺(asn)、脯氨酸(pro)、谷氨酰胺(gln)、丝氨酸(ser)、苏氨酸(thr)、缬氨酸(val)、色氨酸(trp)、酪氨酸(tyr)和它们的组合。天然存在的α-氨基酸的立体异构体包括但不限于d-丙氨酸(d-ala)、d-半胱氨酸(d-cys)、d-天冬氨酸(d-asp)、d-谷氨酸(d-glu)、d-苯丙氨酸(d-phe)、d-组氨酸(d-his)、d-异亮氨酸(d-ile)、d-精氨酸(d-arg)、d-赖氨酸(d-lys)、d-亮氨酸(d-leu)、d-甲硫氨酸(d-met)、d-天冬酰胺(d-asn)、d-脯氨酸(d-pro)、d-谷氨酰胺(d-gln)、d-丝氨酸(d-ser)、d-苏氨酸(d-thr)、d-缬氨酸(d-val)、d-色氨酸(d-trp)、d-酪氨酸(d-tyr)和它们的组合。[0040]天然存在的氨基酸包括通过转译后修饰在蛋白质中形成的那些氨基酸，诸如瓜氨酸(cit)。[0041]非天然(非天然存在的)氨基酸包括但不限于氨基酸类似物、氨基酸模拟物、合成氨基酸、n-取代的甘氨酸和呈l-构型或d-构型的n-甲基氨基酸，所述非天然氨基酸以类似于天然存在的氨基酸的方式发挥功能。举例来说，“氨基酸类似物”可以是具有与天然存在的氨基酸相同的基本化学结构(即，键结至氢、羧基、氨基的碳)，但具有经修饰的侧链基团或经修饰的肽主链的非天然氨基酸，例如高丝氨酸、正亮氨酸、甲硫氨酸亚砜和甲硫氨酸甲基锍。“氨基酸模拟物”是指具有不同于氨基酸的一般化学结构的结构，但以类似于天然存在的氨基酸的方式发挥功能的化合物。[0042]“连接子”是指共价键结化合物或材料中的两个或更多个部分的官能团。举例来说，连接部分可以用于将佐剂部分共价键结至高分子支撑的化合物中的抗体构建体。[0043]“连接部分”是指共价键结化合物或材料中的两个或更多个部分的官能团。举例来说，连接部分可以用于将佐剂部分共价键结至高分子支撑的化合物中的高分子支撑体。可用于将连接部分连接至蛋白质和其它材料的键包括但不限于酰胺、胺、酯、氨基甲酸酯、脲、硫醚、硫代氨基甲酸酯、硫代碳酸酯和硫脲。[0044]“二价”是指含有用于连接两个官能团的两个附接点的化学部分；多价连接部分可以具有用于连接其它官能团的额外附接点。二价基团可以用后缀“二基”表示。举例来说，二价连接部分包括二价聚合物部分，诸如二价聚(乙二醇)、二价环烷基、二价杂环烷基、二价芳基和二价杂芳基。“二价环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基”是指具有用于共价连接分子或材料中的两个部分的两个附接点的环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基。环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基可以经取代或未经取代。环烷基、杂环烷基、芳基或杂芳基可以经一个或多个选自卤基、羟基、氨基、烷基氨基、酰胺基、酰基、硝基、氰基和烷氧基的基团取代。[0045]波形线代表指定化学部分的附接点。如果指定化学部分存在两条波形线那么应了解，可以双向使用所述化学部分，即，从左至右或从右至左读取。在一些实施方案中，存在两条波形线的指定部分视为以从左至右读取来使用。[0046]“烷基”是指具有所指示的碳原子数的直链(线性)或支链饱和脂肪族基团。烷基可以包括任何数目的碳，例如一个至十二个。烷基的实例包括但不限于甲基(me、-ch3)、乙基(et、-ch2ch3)、1-丙基(n-pr、正丙基、-ch2ch2ch3)、2-丙基(i-pr、异丙基、-ch(ch3)2)、1-丁基(n-bu、正丁基、-ch2ch2ch2ch3)、2-甲基-1-丙基(i-bu、异丁基、-ch2ch(ch3)2)、2-丁基(s-bu、仲丁基、-ch(ch3)ch2ch3)、2-甲基-2-丙基(t-bu、叔丁基、-c(ch3)3)、1-戊基(正戊基、-ch2ch2ch2ch2ch3)、2-戊基(-ch(ch3)ch2ch2ch3)、3-戊基(-ch(ch2ch3)2)、2-甲基-2-丁基(-c(ch3)2ch2ch3)、3-甲基-2-丁基(-ch(ch3)ch(ch3)2)、3-甲基-1-丁基(-ch2ch2ch(ch3)2)、2-甲基-1-丁基(-ch2ch(ch3)ch2ch3)、1-己基(-ch2ch2ch2ch2ch2ch3)、2-己基(-ch(ch3)ch2ch2ch2ch3)、3-己基(-ch(ch2ch3)(ch2ch2ch3))、2-甲基-2-戊基(-c(ch3)2ch2ch2ch3)、3-甲基-2-戊基(-ch(ch3)ch(ch3)ch2ch3)、4-甲基-2-戊基(-ch(ch3)ch2ch(ch3)2)、3-甲基-3-戊基(-c(ch3)(ch2ch3)2)、2-甲基-3-戊基(-ch(ch2ch3)ch(ch3)2)、2,3-二甲基-2-丁基(-c(ch3)2ch(ch3)2)、3,3-二甲基-2-丁基(-ch(ch3)c(ch3)3、1-庚基、1-辛基等。烷基可以经取代或未经取代。“经取代的烷基”基团可以经一个或多个选自卤基、羟基、氨基、氧代(＝o)、烷基氨基、酰胺基、酰基、硝基、氰基和烷氧基的基团取代。[0047]术语“烷二基”是指二价烷基。烷二基的实例包括但不限于亚甲基(-ch2-)、亚乙基(-ch2ch2-)、亚丙基(-ch2ch2ch2-)等。烷二基也可以称作“亚烷基”基团。[0048]“烯基”是指具有所指示的碳原子数和至少一个碳碳双键sp2的直链(线性)或支链不饱和脂肪族基团。烯基可以包括两个至约12个或更多个碳原子。烯基是具有“顺式”和“反式”取向或替代地具有“e”和“z”取向的基团。实例包括但不限于乙烯基(ethylenyl/vinyl)(-ch＝ch2)、烯丙基(-ch2ch＝ch2)、丁烯基、戊烯基和它们的异构体。烯基可以经取代或未经取代。“经取代的烯基”基团可以经一个或多个选自卤基、羟基、氨基、氧代(＝o)、烷基氨基、酰胺基、酰基、硝基、氰基和烷氧基的基团取代。[0049]术语“亚烯基”或“烯二基”是指直链或支链二价烃基。实例包括但不限于亚乙烯基(ethylenylene/vinylene)(-ch＝ch-)、烯丙基(-ch2ch＝ch-)等。[0050]“炔基”是指具有所指示的碳原子数和至少一个碳碳三键sp的直链(线性)或支链不饱和脂肪族基团。炔基可以包括两个至约12个或更多个碳原子。举例来说，c2-c6炔基包括但不限于乙炔基(-c≡ch)、丙炔基(炔丙基、-ch2c≡ch)、丁炔基、戊炔基、己炔基和它们的异构体。炔基可以经取代或未经取代。“经取代的炔基”基团可以经一个或多个选自卤基、羟基、氨基、氧代(＝o)、烷基氨基、酰胺基、酰基、硝基、氰基和烷氧基的基团取代。[0051]术语“亚炔基”或“炔二基”是指二价炔基。[0052]术语“碳环”、“碳环基”、“碳环状环”和“环烷基”是指含有3至12个环原子或所指示的原子数的饱和或部分不饱和单环、稠合双环或桥联多环组合体。饱和单环碳环包括例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基和环辛基。饱和双环和多环碳环包括例如降莰烷、[2.2.2]双环辛烷、十氢萘和金刚烷。碳环基团还可以是部分不饱和的，在环中具有一个或多个双键或三键。部分不饱和的代表性碳环基团包括但不限于环丁烯、环戊烯、环己烯、环己二烯(1,3-异构体和1,4-异构体)、环庚烯、环庚二烯、环辛烯、环辛二烯(1,3-异构体、1,4-异构体和1,5-异构体)、降莰烯和降莰二烯。[0053]术语“环烷二基”是指二价环烷基。[0054]“芳基”是指通过从母体芳香族环系统的单个碳原子上去除一个氢原子而得到的6-20个碳原子(c6-c20)的单价芳香族烃基。芳基可以是单环，稠合形成双环或三环基团，或由键连接形成联芳基。代表性芳基包括苯基、萘基和联苯基。其它芳基包括具有亚甲基连接基团的苯甲基。一些芳基具有6至12个环成员，诸如苯基、萘基或联苯基。其它芳基具有6至10个环成员，诸如苯基或萘基。[0055]术语“亚芳基”或“芳二基”意指通过从母体芳香族环系统的两个碳原子上去除两个氢原子而得到的6-20个碳原子(c6-c20)的二价芳香族烃基。一些芳二基在示例性结构中以“ar”表示。芳二基包括包含稠合至饱和、部分不饱和环或芳香族碳环的芳香族环的双环基团。典型芳二基包括但不限于从苯(苯二基)、经取代的苯、萘、蒽、亚联苯基、亚茚基、亚茚满基、1,2-二氢萘、1,2,3,4-四氢萘基等所得的基团。芳二基也称作“亚芳基”，并且任选地经一个或多个本文所描述的取代基取代。[0056]术语“杂环”、“杂环基”和“杂环状环”在本文中可互换使用并且是指3个至约20个环原子的饱和或部分不饱和(亦即，在环内具有一个或多个双键和/或三键)碳环基团，其中至少一个环原子是选自氮、氧、磷和硫的杂原子，其余环原子是c，其中一个或多个环原子任选地独立地经一个或多个下文所描述的取代基取代。杂环可以是具有3至7个环成员(2至6个碳原子和1至4个选自n、o、p和s的杂原子)的单环或具有7至10个环成员(4至9个碳原子和1至6个选自n、o、p和s的杂原子)的双环，例如：双环[4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6]系统。杂环描述于以下文献中：paquette,leo a.；"principles of modern heterocyclic chemistry"(w.a.benjamin,new york,1968)，尤其第1、3、4、6、7和9章；"the chemistry of heterocyclic compounds,a series of monographs"(john wiley&sons,new york,1950至今)，尤其第13、14、16、19和28卷；以及j.am.chem.soc.(1960)82:5566。“杂环基”还包括其中杂环基团与饱和、部分不饱和环或芳香族碳环或杂环稠合的基团。杂环的实例包括但不限于吗啉-4-基、哌啶-1-基、哌嗪基、哌嗪-4-基-2-酮、哌嗪-4-基-3-酮、吡咯烷-1-基、硫代吗啉-4-基、s-二氧代硫代吗啉-4-基、氮杂环辛烷-1-基、氮杂环丁烷-1-基、八氢吡啶并[1,2-a]吡嗪-2-基、[1,4]二氮杂环庚烷-1-基、吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶代、吗啉代、硫代吗啉代、氧硫杂环己烷基、哌嗪基、高哌嗪基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、高哌啶基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、硫氮杂环庚烷基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚啉基、2h-吡喃基、4h-吡喃基、二噁烷基、1,3-二氧杂环戊烷基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫杂环戊烷基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂双环[3.1.0]己基、3-氮杂双环[4.1.0]庚基、氮杂双环[2.2.2]己基、3h-吲哚基喹嗪基和n-吡啶基脲。螺杂环基部分也包括于本定义的范围内。螺杂环基部分的实例包括氮杂螺[2.5]辛基和氮杂螺[2.4]庚基。其中2个环原子经氧代(＝o)部分取代的杂环基的实例是嘧啶酮基和1,1-二氧代-硫代吗啉基。本文中的杂环基任选地独立地经一个或多个本文所描述的取代基取代。[0057]术语“杂环二基”是指3个至约20个环原子的二价饱和或部分不饱和(亦即，在环内具有一个或多个双键和/或三键)碳环基团，其中至少一个环原子是选自氮、氧、磷和硫的杂原子，其余环原子是c，其中一个或多个环原子任选地独立地经一个或多个所描述的取代基取代。5元和6元杂环二基的实例包括吗啉二基、哌啶二基、哌嗪二基、吡咯烷二基、二噁烷二基、硫代吗啉二基和s-二氧代硫代吗啉二基。[0058]术语“杂芳基”是指5元、6元或7元环的单价芳香族基团，并且包括5-20个原子的稠环系统(其中至少一个环是芳香族的)，其含有一个或多个独立地选自氮、氧和硫的杂原子。杂芳基的实例是吡啶基(包括例如2-羟基吡啶基)、咪唑基、咪唑并吡啶基、嘧啶基(包括例如4-羟基嘧啶基)、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噻唑基、噁二唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、四氢异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、吲哚嗪基、酞嗪基、哒嗪基、三嗪基、异吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、噻二唑基、噻二唑基、呋呫基、苯并呋呫基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和呋喃并吡啶基。杂芳基任选地独立地经一个或多个本文所描述的取代基取代。[0059]术语“杂芳二基”是指5元、6元或7元环的二价芳香族基团，并且包括5-20个原子的稠环系统(其中至少一个环是芳香族的)，其含有一个或多个独立地选自氮、氧和硫的杂原子。5元和6元杂芳二基的实例包括吡啶二基、咪唑二基、嘧啶二基、吡唑二基、三唑二基、吡嗪二基、四唑二基、呋喃二基、噻吩二基、异噁唑二基二基、噻唑二基、噁二唑二基、噁唑二基、异噻唑二基和吡咯二基。[0060]在可能的情况下，杂环或杂芳基可以是碳(碳连接)或氮(氮连接)键结的。举例来说并且不受限制，碳键结的杂环或杂芳基在以下位置处键结：吡啶的2、3、4、5或6位，哒嗪的3、4、5或6位，嘧啶的2、4、5或6位，吡嗪的2、3、5或6位，呋喃、四氢呋喃、硫代呋喃、噻吩、吡咯或四氢吡咯的2、3、4或5位，噁唑、咪唑或噻唑的2、4或5位，异噁唑、吡唑或异噻唑的3、4或5位，氮杂环丙烷的2或3位，氮杂环丁烷的2、3或4位，喹啉的2、3、4、5、6、7或8位，或异喹啉的1、3、4、5、6、7或8位。[0061]举例来说并且不受限制，氮键结的杂环或杂芳基在以下位置处键结：氮杂环丙烷、氮杂环丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、2-吡唑啉、3-吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、吲哚啉、1h-吲唑的1位，异吲哚或异吲哚啉的2位，吗啉的4位，以及咔唑或β-咔啉的9位。[0062]单独或作为另一取代基的一部分的术语“卤基”和“卤素”是指氟、氯、溴或碘原子。[0063]单独或作为另一取代基的一部分的术语“羰基”是指c(＝o)或-c(＝o)-，即，碳原子双键键结至氧并且结合至具有羰基的部分中的两个其它基团。[0064]如本文所用的短语“季铵盐”是指已用烷基取代基(例如c1-c4烷基，诸如甲基、乙基、丙基或丁基)季铵化的叔胺。[0065]术语“治疗(treat/treatment/treating)”是指成功治疗或改善损伤、病变、疾患(例如癌症)或症状(例如认知障碍)的任何指标，包括任何客观或主观参数，诸如消除；缓解；减轻症状或使患者更能忍受症状、损伤、病变或疾患；症状进展的速率降低；减少症状或疾患的频率或持续时间；或在一些情况下预防症状发作。症状的治疗或改善可以基于任何客观或主观参数，包括例如身体检查的结果。[0066]术语“癌症”、“赘瘤”和“肿瘤”在本文中用于指展现自主、不受调控的生长的细胞，使得细胞展现以对细胞增殖的控制显著损失为特征的异常生长表型。在本发明的情形中用于检测、分析和/或治疗的所关注细胞包括癌细胞(例如，来自患有癌症的个体的癌细胞)、恶性癌细胞、转移前癌细胞、转移性癌细胞和非转移性癌细胞。几乎每个组织的癌症都是已知的。短语“癌症负担”是指受试者中的癌细胞数量或癌症体积。因此，减少癌症负担是指减小受试者中的癌细胞数目或癌细胞体积。如本文所用的术语“癌细胞”是指成为癌细胞(例如，来自可治疗个体的任何癌症，例如从患有癌症的个体分离)或来源于癌细胞，例如癌细胞克隆体的任何细胞。举例来说，癌细胞可以来自已建立的癌细胞系，可以是从患有癌症的个体分离的初生细胞，可以是来自于从患有癌症的个体分离的初生细胞的子代细胞，等等。在一些实施方案中，这个术语还可以指癌细胞的一部分，诸如癌细胞的亚细胞部分、细胞膜部分或细胞溶解产物。本领域技术人员已知许多类型的癌症，包括实体肿瘤，诸如癌瘤、肉瘤、胶质母细胞瘤、黑色素瘤、淋巴瘤和骨髓瘤，以及循环癌，诸如白血病。[0067]如本文所用的术语“癌症”包括任何形式的癌症，包括但不限于实体肿瘤癌(例如皮肤癌、肺癌、前列腺癌、乳癌、胃癌、膀胱癌、结肠癌、卵巢癌、胰脏癌、肾癌、肝癌、胶质母细胞瘤、髓母细胞瘤、平滑肌肉瘤、头颈部鳞状细胞癌、黑色素瘤和神经内分泌癌)和液体癌(例如血液学癌症)；癌瘤；软组织肿瘤；肉瘤；畸胎瘤；黑色素瘤；白血病；淋巴瘤；以及脑癌，包括微小残留病，并且包括原发性和转移性肿瘤。[0068]“pd-l1表达”是指在细胞表面上具有pd-l1受体的细胞。如本文所用的“pd-l1过表达”是指与对应的非癌细胞相比具有更多pd-l1受体的细胞。[0069]“her2”是指蛋白质人类表皮生长因子受体2。[0070]“her2表达”是指在细胞表面上具有her2受体的细胞。举例来说，细胞在细胞表面上可以具有约20,000个至约50,000个her2受体。如本文所用的“her2过表达”是指具有超过约50,000个her2受体的细胞。举例来说，与对应的非癌细胞相比，细胞的her2受体数目是2、5、10、100、1,000、10,000、100,000或1,000,000倍(例如，约1百万或2百万个her2受体)。据估计，her2在约25％至约30％的乳癌中过表达。[0071]癌症的“病变”包括所有损害患者健康的现象。这包括但不限于异常或不可控的细胞生长、转移、干扰邻近细胞正常发挥功能、以异常水平释放细胞因子或其它分泌产物、抑制或加重炎症或免疫反应、赘瘤、癌前病变、恶性病以及侵入周围或远端组织或器官(诸如淋巴结)。[0072]如本文所用的短语“癌症复发”和“肿瘤复发”及其语法变型是指在诊断出癌症之后赘生性细胞或癌细胞的进一步生长。特别地，当癌组织中发生癌细胞进一步生长时可能会发生复发。类似地，当肿瘤细胞播散至局部或远端组织和器官中时发生“肿瘤扩散”，因此，肿瘤扩散涵盖肿瘤转移。当肿瘤生长局部扩散开以通过压缩、破坏或阻止正常器官功能来损害所涉及组织的功能时发生“肿瘤侵入”。[0073]如本文所用的术语“转移”是指癌性肿瘤在器官或身体部分中的生长，所述器官或身体部分不直接连接至原始癌性肿瘤的器官。转移应理解为包括微转移，其为在不直接连接至原始癌性肿瘤的器官的器官或身体部分中存在不可检测量的癌细胞。转移还可以定义为过程的若干步骤，诸如癌细胞从原始肿瘤部位离开以及癌细胞迁移和/或侵入身体的其它部分。[0074]短语“有效量”和“治疗有效量”是指对于施用来说产生治疗作用的物质，诸如高分子支撑的化合物的剂量或量。确切剂量将取决于治疗目的，并且将由本领域技术人员使用已知技术可确定(参见例如lieberman,pharmaceutical dosage forms(第1-3卷,1992)；lloyd,the art,science and technology of pharmaceutical compounding(1999)；pickar,dosage calculations(1999)；goodman&gilman's the pharmacological basis of therapeutics,第11版(mcgraw-hill,2006)；以及remington:the science and practice of pharmacy,第22版,(pharmaceutical press,london,2012))。在癌症的情况下，治疗有效量的高分子支撑的化合物可以减少癌细胞的数目；减小肿瘤大小；抑制(即，在一定程度上减缓并且优选地停止)癌细胞浸润至周边器官中；抑制(即，在一定程度上减缓并且优选地停止)肿瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；和/或在一定程度上缓解一种或多种与癌症相关的症状。在高分子支撑的化合物可以阻止现有癌细胞生长和/或杀死现有癌细胞的程度上，其可能具有细胞生长抑制性和/或细胞毒性。对于癌症疗法，可以例如通过评估疾病进展时间(ttp)和/或确定反应率(rr)来测量功效。[0075]“接受者”、“个体”、“受试者”、“宿主”和“患者”可互换使用并且是指需要诊断、治疗或疗法的任何哺乳动物受试者(例如人类)。用于治疗目的的“哺乳动物”是指归类为哺乳动物的任何动物，包括人类、家养和农场动物以及动物园动物、运动型动物或宠物，诸如犬、马、猫、牛、绵羊、山羊、猪、骆驼等。在某些实施方案中，哺乳动物是人类。[0076]在本发明的情形中，短语“协同佐剂”或“协同组合”包括两种免疫调节剂的组合，诸如受体激动剂、细胞因子和佐剂多肽，所述免疫调节剂以组合形式相对于单独施用的任一者对免疫引发协同作用。特别地，本文所公开的高分子支撑的化合物包含所要求的佐剂与抗体构建体的协同组合。举例来说，相对于在不存在其它部分的情况下施用抗体构建体或佐剂时，这些协同组合在施用后对免疫引发更大作用。此外，与单独施用抗体构建体或佐剂时相比，可以施用减少量的高分子支撑的化合物(如由作为高分子支撑的化合物的一部分施用的抗体构建体的总数或佐剂的总数来测量)。[0077]如本文所用的术语“施用”是指向受试者肠道外、静脉内、腹膜内、肌肉内、肿瘤内、病灶内、鼻内或皮下施用、经口施用、以栓剂施用、局部接触、鞘内施用或植入缓释装置，例如微型渗透泵。[0078]如本文中用于修饰数值的术语“约”和“左右”指示在所述数值周围的接近范围。因此，如果“x”是所述值，那么“约x”或“x左右”指示0.9x至1.1x，例如0.95x至1.05x或0.99x至1.01x的值。提及“约x”或“x左右”特定指示至少值x、0.95x、0.96x、0.97x、0.98x、0.99x、1.01x、1.02x、1.03x、1.04x和1.05x。因此，“约x”和“x左右”意图教示并提供对例如“0.98x”的权利要求限制的书面描述支持。[0079]噻吩并氮呯佐剂化合物[0080]本发明的高分子支撑的化合物包含噻吩并氮呯佐剂部分。本文所描述的佐剂部分是引发免疫反应的化合物(即，免疫刺激剂)。一般来说，本文所描述的佐剂部分是tlr激动剂。tlr是负责脊椎动物中先天免疫反应的起始的i型跨膜蛋白。tlr识别来自细菌、病毒和真菌的多种病原体相关分子模式并且充当对抗侵入性病原体的第一道防线。归因于细胞表达和tlr起始的信号传导路径不同，tlr引发重叠但截然不同的生物反应。一旦啮合(例如通过天然刺激或合成性tlr激动剂)，tlr起始信号转导级联，从而经由转接蛋白髓样分化初级反应基因88(myd88)活化核因子-κb(nf-κb)并募集il-1受体相关激酶(irak)。irak的磷酸化然后募集tnf受体相关因子6(traf6)，这引起nf-κb抑制剂i-κb磷酸化。因此，nf-κb进入细胞核并且起始其启动子含有nf-κb结合位点的基因(诸如细胞因子)的转录。用于tlr信号传导的额外调控模式包括含tir-结构域的转接子诱导干扰素-β(trif)依赖性tnf-受体相关因子6(traf6)诱导以及经由trif和traf3活化myd88非依赖性路径，从而引起干扰素反应因子3(irf3)的磷酸化。类似地，myd88依赖性路径还活化若干irf家族成员，包括irf5和irf7，而trif依赖性路径还活化nf-κb路径。[0081]通常，本文所描述的佐剂部分是tlr7和/或tlr8激动剂。tlr7和tlr8两者均在单核细胞和树突状细胞中表达。在人类中，tlr7也在浆细胞样树突状细胞(pdc)和b细胞中表达。tlr8主要在髓样来源的细胞，即，单核细胞、粒细胞和髓样树突状细胞中表达。tlr7和tlr8能够检测细胞内“外来”单股rna的存在，以此作为对病毒侵入作出反应的手段。用tlr8激动剂处理tlr8表达细胞可以产生高水平的il-12、ifn-γ、il-1、tnf-α、il-6和其它炎性细胞因子。类似地，用tlr7激动剂刺激tlr7表达细胞(诸如pdc)可以产生高水平的ifn-α和其它炎性细胞因子。tlr7/tlr8啮合以及所得细胞因子产生可以活化树突状细胞和其它抗原呈递细胞，从而驱动造成肿瘤破坏的各种先天和后天免疫反应机制。[0082]本发明的示例性噻吩并氮呯化合物(taz)示于表1a-c中。合成、纯化每种化合物，并且通过质谱法表征，并且显示具有所指示的质量。额外实验程序见于实施例中。根据实施例202测量针对表达人类tlr7或人类tlr8的hek293 nfkb报告体细胞的活性。表1a-c的噻吩并氮呯化合物证明tlr8激动剂选择性的令人惊讶并且意想不到的特性，其可以预测可用于治疗癌症和其它病症的治疗活性。[0083]表1a：噻吩并氮呯化合物(taz)[0084][0085][0086][0087][0088][0089][0090][0091]表1b：噻吩并氮呯化合物(taz)[0092][0093][0094][0095][0096][0097][0098][0099][0100][0101][0102][0103][0104][0105][0106][0107][0108][0109][0110][0111][0112]表1c：噻吩并氮呯化合物(taz)[0113][0114][0115][0116][0117][0118][0119][0120][0121][0122][0123][0124][0125][0126][0127][0128][0129][0130][0131][0132][0133][0134][0135][0136][0137][0138][0139][0140][0141][0142][0143][0144][0145][0146]噻吩并氮呯-连接子化合物[0147]本发明的高分子支撑的化合物是通过使高分子支撑体与噻吩并氮呯-连接子化合物缀合来制备。噻吩并氮呯-连接子化合物包含共价附接至连接子单元的噻吩并氮呯(taz)部分。连接子单元包含影响高分子支撑的化合物的稳定性、渗透性、溶解性和其它药物动力学、安全性和功效特性的官能团和亚单元。连接子单元包括反应性官能团，其与高分子支撑体的反应性官能团反应，即，缀合。举例来说，高分子支撑体的亲核基团，诸如赖氨酸侧链氨基与taz-连接子化合物的亲电反应性官能团反应以形成高分子支撑的化合物。同样，举例来说，高分子支撑体的半胱氨酸硫醇与taz-连接子化合物的马来酰亚胺或溴乙酰胺基团反应以形成高分子支撑的化合物。[0148]适用于taz-连接子化合物的亲电反应性官能团包括但不限于n-羟基琥珀酰亚胺基(nhs)酯和n-羟基磺基琥珀酰亚胺基(磺基-nhs)酯(胺反应性)；碳二亚胺(胺和羧基反应性)；羟甲基膦(胺反应性)；马来酰亚胺(硫醇反应性)；卤化乙酰胺，诸如n-碘乙酰胺(硫醇反应性)；芳基叠氮化物(伯胺反应性)；氟化芳基叠氮化物(经由碳-氢(c-h)插入而具有反应性)；五氟苯基(pfp)酯(胺反应性)；四氟苯基(tfp)酯(胺反应性)；亚胺基酯(胺反应性)；异氰酸酯(羟基反应性)；乙烯基砜(硫醇、胺和羟基反应性)；吡啶基二硫化物(硫醇反应性)；以及二苯甲酮衍生物(经由c-h键插入而具有反应性)。其它试剂包括但不限于hermanson,bioconjugate techniques第2版,academic press,2008中所描述的那些试剂。[0149]本发明提供了针对高分子支撑的化合物的设计、制备和使用的局限性和挑战的解决方案。一些连接子可能在血流中不稳定，从而在靶细胞中内化之前释放不可接受量的佐剂/药物(khot,a.等(2015)bioanalysis 7(13):1633-1648)。其它连接子可能在血流中提供稳定性，但细胞内释放有效性可能受负面影响。提供所需细胞内释放的连接子通常在血流中具有较差稳定性。换句话说，血流稳定性与细胞内释放通常呈逆相关。另外，在标准缀合过程中，负载于抗体上的佐剂/药物部分的量(即，药物负荷)、在缀合反应中形成的聚集体的量以及可获得的最终纯化缀合物的产量相互关联。举例来说，聚集体形成一般与缀合至抗体的佐剂/药物部分及其衍生物的当量数呈正相关。在高药物负荷下，必须去除所形成的聚集体以用于治疗应用。因此，药物负荷介导的聚集体形成会降低高分子支撑的化合物产量并且可能使工艺规模扩大变得困难。[0150]示例性实施方案包括式ii的5-氨基-噻吩并氮呯-连接子化合物：[0151][0152]其中r1、r2、r3和r4中的一者附接至l；[0153]r1、r2、r3和r4独立地选自由h、c1-c12烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c12碳环基、c6-c20芳基、c2-c9杂环基和c1-c20杂芳基组成的组，其中烷基、烯基、炔基、碳环基、芳基、杂环基和杂芳基独立地并且任选地经一个或多个选自以下的基团取代：[0154]-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0155]-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0156]-(c1-c12烷二基)-or5；[0157]-(c3-c12碳环基)；[0158]-(c3-c12碳环基)-*；[0159]-(c3-c12碳环基)-(c1-c12烷二基)-nr5-*；[0160]-(c3-c12碳环基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0161]-(c3-c12碳环基)-nr5-c(＝nr5)nr5-*；[0162]-(c6-c20芳基)；[0163]-(c6-c20芳基)-*；[0164]-(c6-c20芳二基)-n(r5)-*；[0165]-(c6-c20芳二基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0166]-(c6-c20芳二基)-(c1-c12烷二基)-(c2-c20杂环二基)-*；[0167]-(c6-c20芳二基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0168]-(c6-c20芳二基)-(c1-c12烷二基)-nr5-c(＝nr5a)n(r5)-*；[0169]-(c2-c20杂环基)；[0170]-(c2-c20杂环基)-*；[0171]-(c2-c9杂环基)-(c1-c12烷二基)-nr5-*；[0172]-(c2-c9杂环基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0173]-(c2-c9杂环基)-c(＝o)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0174]-(c2-c9杂环基)-nr5-c(＝nr5a)nr5-*；[0175]-(c2-c9杂环基)-nr5-(c6-c20芳二基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0176]-(c2-c9杂环基)-(c6-c20芳二基)-*；[0177]-(c1-c20杂芳基)；[0178]-(c1-c20杂芳基)-*；[0179]-(c1-c20杂芳基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0180]-(c1-c20杂芳基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0181]-(c1-c20杂芳基)-nr5-c(＝nr5a)n(r5)-*；[0182]-(c1-c20杂芳基)-n(r5)c(＝o)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0183]-c(＝o)-*；[0184]-c(＝o)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0185]-c(＝o)-(c2-c20杂环二基)-*；[0186]-c(＝o)n(r5)2；[0187]-c(＝o)n(r5)-*；[0188]-c(＝o)n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝o)r5；[0189]-c(＝o)n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝o)n(r5)2；[0190]-c(＝o)nr5-(c1-c12烷二基)-n(r5)co2r5；[0191]-c(＝o)nr5-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝nr5a)n(r5)2；[0192]-c(＝o)nr5-(c1-c12烷二基)-nr5c(＝nr5a)r5；[0193]-c(＝o)nr5-(c1-c8烷二基)-nr5(c2-c5杂芳基)；[0194]-c(＝o)nr5-(c1-c20杂芳二基)-n(r5)-*；[0195]-c(＝o)nr5-(c1-c20杂芳二基)-*；[0196]-c(＝o)nr5-(c1-c20杂芳二基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0197]-c(＝o)nr5-(c1-c20杂芳二基)-(c2-c20杂环二基)-c(＝o)nr5-(c1-c12烷二基)-nr5-*；[0198]-n(r5)2；[0199]-n(r5)-*；[0200]-n(r5)c(＝o)r5；[0201]-n(r5)c(＝o)-*；[0202]-n(r5)c(＝o)n(r5)2；[0203]-n(r5)c(＝o)n(r5)-*；[0204]-n(r5)co2r5；[0205]-nr5c(＝nr5a)n(r5)2；[0206]-nr5c(＝nr5a)n(r5)-*；[0207]-nr5c(＝nr5a)r5；[0208]-n(r5)c(＝o)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0209]-n(r5)-(c2-c5杂芳基)；[0210]-n(r5)-s(＝o)2-(c1-c12烷基)；[0211]-o-(c1-c12烷基)；[0212]-o-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0213]-o-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0214]-s(＝o)2-(c2-c20杂环二基)-*；[0215]-s(＝o)2-(c2-c20杂环二基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0216]-s(＝o)2-(c2-c20杂环二基)-(c1-c12烷二基)-nr5-*；以及[0217]-s(＝o)2-(c2-c20杂环二基)-(c1-c12烷二基)-oh；[0218]或r2与r3一起形成5元或6元杂环基环；[0219]x1、x2、x3和x4独立地选自由一键、c(＝o)、c(＝o)n(r5)、o、n(r5)、s、s(o)2和s(o)2n(r5)组成的组；[0220]r5选自由h、c6-c20芳基、c3-c12碳环基、c6-c20芳二基、c1-c12烷基和c1-c12烷二基组成的组，或两个r5基团一起形成5元或6元杂环基环；[0221]r5a选自由c6-c20芳基和c1-c20杂芳基组成的组；[0222]其中星号*指示l的附接位点，并且其中r1、r2、r3和r4中的一者附接至l；[0223]l是选自由以下组成的组的连接子：[0224]q-c(＝o)-(peg)-；[0225]q-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-；[0226]q-c(＝o)-(peg)-o-；[0227]q-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-(pep)-；[0228]q-c(＝o)-(peg)-c(＝o)n(r5)-(c1-c12烷二基)-；[0229]q-c(＝o)-(peg)-c(＝o)n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝o)-(c2-c5单杂环二基)-；[0230]q-c(＝o)-(peg)-c(＝o)n(r5)-(c1-c12烷二基)-(mcgluc)-；[0231]q-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-(mcgluc)-；[0232]q-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-(pep)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-；[0233]q-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-(pep)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝o)-(c2-c5单杂环二基)-；[0234]q-c(＝o)-(peg)-n(r5)-；[0235]q-c(＝o)-(peg)-n(r5)c(＝o)-；[0236]q-c(＝o)-(peg)-n(r5)-(peg)-c(＝o)-(pep)-；[0237]q-c(＝o)-(peg)-n+(r5)2-(peg)-c(＝o)-(pep)-；[0238]q-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-n(r5)ch(aa1)c(＝o)-(peg)-c(＝o)-(pep)-；[0239]q-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-n(r5)ch(aa1)c(＝o)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-；[0240]q-c(＝o)-(peg)-ss-(c1-c12烷二基)-oc(＝o)-；[0241]q-c(＝o)-(peg)-ss-(c1-c12烷二基)-c(＝o)-；[0242]q-c(＝o)-(c1-c12烷二基)-c(＝o)-(pep)-；[0243]q-c(＝o)-(c1-c12烷二基)-c(＝o)-(pep)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-；[0244]q-c(＝o)-(c1-c12烷二基)-c(＝o)-(pep)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-c(＝o)；[0245]q-c(＝o)-(c1-c12烷二基)-c(＝o)-(pep)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝o)-(c2-c5单杂环二基)-；[0246]q-c(＝o)-ch2ch2och2ch2-(c1-c20杂芳二基)-ch2o-(peg)-c(＝o)-(mcgluc)-；[0247]q-c(＝o)-ch2ch2och2ch2-(c1-c20杂芳二基)-ch2o-(peg)-c(＝o)-(mcgluc)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝o)-(c2-c5单杂环二基)-；以及[0248]q-(ch2)m-c(＝o)-(pep)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝o)-(c2-c5单杂环二基)-；[0249]其中peg具有下式：-(ch2ch2o)n-(ch2)m-；m是1至5的整数，并且n是2至50的整数；[0250]pep具有下式：[0251][0252]其中aa1和aa2独立地选自氨基酸侧链，或者aa1或aa2和相邻氮原子形成5元环脯氨酸氨基酸，并且波形线指示附接点；并且[0253]r6选自由c6-c20芳二基和c1-c20杂芳二基组成的组，经-ch2o-c(＝o)-并且任选地经以下基团取代：[0254]并且[0255]mcgluc选自下组：[0256][0257]其中q是1至8，并且aa是氨基酸侧链；并且[0258]q选自由n-羟基琥珀酰亚胺基、n-羟基磺基琥珀酰亚胺基、马来酰亚胺和苯氧基组成的组，经一个或多个独立地选自f、cl、no2和so3-的基团取代；[0259]其中烷基、烷二基、烯基、烯二基、炔基、炔二基、芳基、芳二基碳环基、碳环二基、杂环基、杂环二基、杂芳基和杂芳二基独立地并且任选地经一个或多个独立地选自以下的基团取代：f、cl、br、i、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch＝ch2、-c≡ch、-c≡cch3、-ch2ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch(ch3)2、-ch2oh、-ch2och3、-ch2ch2oh、-c(ch3)2oh、-ch(oh)ch(ch3)2、-c(ch3)2ch2oh、-ch2ch2so2ch3、-ch2op(o)(oh)2、-ch2f、-chf2、-cf3、-ch2cf3、-ch2chf2、-ch(ch3)cn、-c(ch3)2cn、-ch2cn、-ch2nh2、-ch2nhso2ch3、-ch2nhch3、-ch2n(ch3)2、-co2h、-coch3、-co2ch3、-co2c(ch3)3、-coch(oh)ch3、-conh2、-conhch3、-con(ch3)2、-c(ch3)2co nh2、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-nhcoch3、-n(ch3)coch3、-nhs(o)2ch3、-n(ch3)c(ch3)2conh2、-n(ch3)ch2ch2s(o)2ch3、-nhc(＝nh)h、-nhc(＝nh)ch3、-nhc(＝nh)nh2、-nhc(＝o)nh2、-no2、＝o、-oh、-och3、-och2ch3、-och2ch2och3、-och2ch2oh、-och2ch2n(ch3)2、-o(ch2ch2o)n-(ch2)mco2h、-o(ch2ch2o)nh、-och2f、-ochf2、-ocf3、-op(o)(oh)2、-s(o)2n(ch3)2、-sch3、-s(o)2ch3和-s(o)3h。[0260]式ii的噻吩并氮呯-连接子化合物的示例性实施方案包括其中pep具有下式：[0261]ch2ch2ch3。[0278]式ii的噻吩并氮呯-连接子化合物的示例性实施方案包括其中x3-r3选自由以下组成的组：[0279][0280][0281]式ii的噻吩并氮呯-连接子化合物的示例性实施方案包括其中r2和r3中的一者选自：[0282]-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0283]-(c1-c12烷二基)-o-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0284]-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝nr5)-n(r5)-*；[0285]-(c1-c12烷二基)-(c6-c20芳二基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0286]-(c1-c12烷二基)-(c6-c20芳二基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-c(＝nr5)n(r5)-*；[0287]-(c2-c6炔二基)-n(r5)-*；以及[0288]-(c2-c6炔二基)-n(r5)c(＝nr5)n(r5)-*；[0289]x2和x3是一键，并且其中星号*指示l的附接位点。[0290]式ii的噻吩并氮呯-连接子化合物的示例性实施方案包括其中l选自由以下组成的组：[0291]q-c(＝o)-(peg)-；[0292]q-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-；[0293]q-c(＝o)-(peg)-o-；[0294]q-c(＝o)-(peg)-n(r5)-；以及[0295]q-c(＝o)-(peg)-n(r5)c(＝o)-。[0296]式ii的噻吩并氮呯-连接子化合物的示例性实施方案选自式iia-iic：[0297][0298]式ii的噻吩并氮呯-连接子化合物的示例性实施方案选自式iid-iih：[0299][0300]式ii的噻吩并氮呯-连接子化合物的示例性实施方案包括其中q选自：[0301][0302]式ii的噻吩并氮呯-连接子化合物的示例性实施方案包括其中q是经一个或多个f取代的苯氧基。[0303]式ii的噻吩并氮呯-连接子化合物的示例性实施方案包括其中q是2,3,5,6-四氟苯氧基。[0304]噻吩并氮呯-连接子(taz-l)化合物的示例性实施方案选自表2a-c。合成、纯化每种化合物，并且通过质谱法表征，并且显示具有所指示的质量。额外实验程序见于实施例中。表2a-c的噻吩并氮呯-连接子化合物证明tlr8激动剂选择性的令人惊讶并且意想不到的特性，其可以预测可用于治疗癌症和其它病症的治疗活性。表2a-c的噻吩并氮呯-连接子化合物用于通过实施例201的方法与高分子缀合以形成表3的高分子支撑的化合物(msc)。[0305]表2a噻吩并氮呯-连接子(taz-l)式ii化合物[0306][0307][0308][0309]表2b噻吩并氮呯-连接子(taz-l)式ii化合物[0310][0311][0312][0313][0314][0315][0316][0317][0318][0319][0320][0321][0322]表2c噻吩并氮呯-连接子(taz-l)式ii化合物[0323][0324][0325][0326][0327][0328][0329][0330][0331][0332][0333][0334][0335][0336][0337][0338][0339][0340][0341][0342][0343][0344][0345][0346][0347][0348][0349][0350][0351][0352][0353][0354][0355][0356][0357][0358][0359][0360][0361]高分子支撑的化合物[0362]高分子支撑的化合物的示例性实施方案包含通过连接子共价附接至一个或多个噻吩并氮呯(taz)部分的高分子支撑体，并且具有式i：[0363]ms-[l-taz]pꢀꢀi[0364]或其药学上可接受的盐，[0365]其中：[0366]ms是高分子支撑体；[0367]p是1至50的整数；[0368]taz是具有下式的5-氨基-噻吩并氮呯部分：[0369][0370]r1、r2、r3和r4独立地选自由h、c1-c12烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c3-c12碳环基、c6-c20芳基、c2-c9杂环基和c1-c20杂芳基组成的组，其中烷基、烯基、炔基、碳环基、芳基、杂环基和杂芳基独立地并且任选地经一个或多个选自以下的基团取代：[0371]-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0372]-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0373]-(c1-c12烷二基)-or5；[0374]-(c3-c12碳环基)；[0375]-(c3-c12碳环基)-*；[0376]-(c3-c12碳环基)-(c1-c12烷二基)-nr5-*；[0377]-(c3-c12碳环基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0378]-(c3-c12碳环基)-nr5-c(＝nr5)nr5-*；[0379]-(c6-c20芳基)；[0380]-(c6-c20芳基)-*；[0381]-(c6-c20芳二基)-n(r5)-*；[0382]-(c6-c20芳二基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0383]-(c6-c20芳二基)-(c1-c12烷二基)-(c2-c20杂环二基)-*；[0384]-(c6-c20芳二基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0385]-(c6-c20芳二基)-(c1-c12烷二基)-nr5-c(＝nr5a)n(r5)-*；[0386]-(c2-c20杂环基)；[0387]-(c2-c20杂环基)-*；[0388]-(c2-c9杂环基)-(c1-c12烷二基)-nr5-*；[0389]-(c2-c9杂环基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0390]-(c2-c9杂环基)-c(＝o)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0391]-(c2-c9杂环基)-nr5-c(＝nr5a)nr5-*；[0392]-(c2-c9杂环基)-nr5-(c6-c20芳二基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0393]-(c2-c9杂环基)-(c6-c20芳二基)-*；[0394]-(c1-c20杂芳基)；[0395]-(c1-c20杂芳基)-*；[0396]-(c1-c20杂芳基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0397]-(c1-c20杂芳基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0398]-(c1-c20杂芳基)-nr5-c(＝nr5a)n(r5)-*；[0399]-(c1-c20杂芳基)-n(r5)c(＝o)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0400]-c(＝o)-*；[0401]-c(＝o)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0402]-c(＝o)-(c2-c20杂环二基)-*；[0403]-c(＝o)n(r5)2；[0404]-c(＝o)n(r5)-*；[0405]-c(＝o)n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝o)r5；[0406]-c(＝o)n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝o)n(r5)2；[0407]-c(＝o)nr5-(c1-c12烷二基)-n(r5)co2r5；[0408]-c(＝o)nr5-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝nr5a)n(r5)2；[0409]-c(＝o)nr5-(c1-c12烷二基)-nr5c(＝nr5a)r5；[0410]-c(＝o)nr5-(c1-c8烷二基)-nr5(c2-c5杂芳基)；[0411]-c(＝o)nr5-(c1-c20杂芳二基)-n(r5)-*；[0412]-c(＝o)nr5-(c1-c20杂芳二基)-*；[0413]-c(＝o)nr5-(c1-c20杂芳二基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0414]-c(＝o)nr5-(c1-c20杂芳二基)-(c2-c20杂环二基)-c(＝o)nr5-(c1-c12烷二基)-nr5-*；[0415]-n(r5)2；[0416]-n(r5)-*；[0417]-n(r5)c(＝o)r5；[0418]-n(r5)c(＝o)-*；[0419]-n(r5)c(＝o)n(r5)2；[0420]-n(r5)c(＝o)n(r5)-*；[0421]-n(r5)co2r5；[0422]-nr5c(＝nr5a)n(r5)2；[0423]-nr5c(＝nr5a)n(r5)-*；[0424]-nr5c(＝nr5a)r5；[0425]-n(r5)c(＝o)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0426]-n(r5)-(c2-c5杂芳基)；[0427]-n(r5)-s(＝o)2-(c1-c12烷基)；[0428]-o-(c1-c12烷基)；[0429]-o-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0430]-o-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0431]-s(＝o)2-(c2-c20杂环二基)-*；[0432]-s(＝o)2-(c2-c20杂环二基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)2；[0433]-s(＝o)2-(c2-c20杂环二基)-(c1-c12烷二基)-nr5-*；以及[0434]-s(＝o)2-(c2-c20杂环二基)-(c1-c12烷二基)-oh；[0435]或r2与r3一起形成5元或6元杂环基环；[0436]x1、x2、x3和x4独立地选自由一键、c(＝o)、c(＝o)n(r5)、o、n(r5)、s、s(o)2和s(o)2n(r5)组成的组；[0437]r5选自由h、c6-c20芳基、c3-c12碳环基、c6-c20芳二基、c1-c12烷基和c1-c12烷二基组成的组，或两个r5基团一起形成5元或6元杂环基环；[0438]r5a选自由c6-c20芳基和c1-c20杂芳基组成的组；[0439]其中星号*指示l的附接位点，并且其中r1、r2、r3和r4中的一者附接至l；[0440]l是选自由以下组成的组的连接子：[0441]-c(＝o)-(peg)-；[0442]-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-；[0443]-c(＝o)-(peg)-o-；[0444]-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-(pep)-；[0445]-c(＝o)-(peg)-c(＝o)n(r5)-(c1-c12烷二基)-；[0446]-c(＝o)-(peg)-c(＝o)n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝o)-(c2-c5单杂环二基)-；[0447]-c(＝o)-(peg)-c(＝o)n(r5)-(c1-c12烷二基)-(mcgluc)-；[0448]-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-(mcgluc)-；[0449]-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-(pep)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-；[0450]-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-(pep)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝o)-(c2-c5单杂环二基)-；[0451]-c(＝o)-(peg)-n(r5)-；[0452]-c(＝o)-(peg)-n(r5)c(＝o)-；[0453]-c(＝o)-(peg)-n(r5)-(peg)-c(＝o)-(pep)-；[0454]-c(＝o)-(peg)-n+(r5)2-(peg)-c(＝o)-(pep)-；[0455]-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-n(r5)ch(aa1)c(＝o)-(peg)-c(＝o)-(pep)-；[0456]-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-n(r5)ch(aa1)c(＝o)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-；[0457]-c(＝o)-(peg)-ss-(c1-c12烷二基)-oc(＝o)-；[0458]-c(＝o)-(peg)-ss-(c1-c12烷二基)-c(＝o)-；[0459]-c(＝o)-(c1-c12烷二基)-c(＝o)-(pep)-；[0460]-c(＝o)-(c1-c12烷二基)-c(＝o)-(pep)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-；[0461]-c(＝o)-(c1-c12烷二基)-c(＝o)-(pep)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-c(＝o)；[0462]-c(＝o)-(c1-c12烷二基)-c(＝o)-(pep)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝o)-(c2-c5单杂环二基)-；[0463]-c(＝o)-ch2ch2och2ch2-(c1-c20杂芳二基)-ch2o-(peg)-c(＝o)-(mcgluc)-；[0464]-c(＝o)-ch2ch2och2ch2-(c1-c20杂芳二基)-ch2o-(peg)-c(＝o)-(mcgluc)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝o)-(c2-c5单杂环二基)-；以及[0465]-(琥珀酰亚胺基)-(ch2)m-c(＝o)-(pep)-n(r5)-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝o)-(c2-c5单杂环二基)-；[0466]peg具有下式：-(ch2ch2o)n-(ch2)m-；m是1至5的整数，并且n是2至50的整数；[0467]pep具有下式：[0468][0469]其中aa1和aa2独立地选自氨基酸侧链，或者aa1或aa2和相邻氮原子形成5元环脯氨酸氨基酸，并且波形线指示附接点；[0470]r6选自由c6-c20芳二基和c1-c20杂芳二基组成的组，经-ch2o-c(＝o)-并且任选地经以下基团取代：[0471]并且[0472]mcgluc选自下组：[0473][0474][0475]其中q是1至8，并且aa是氨基酸侧链；并且[0476]烷基、烷二基、烯基、烯二基、炔基、炔二基、芳基、芳二基、碳环基、碳环二基、杂环基、杂环二基、杂芳基和杂芳二基独立地并且任选地经一个或多个独立地选自以下的基团取代：f、cl、br、i、-cn、-ch3、-ch2ch3、-ch＝ch2、-c≡ch、-c≡cch3、-ch2ch2ch3、-ch(ch3)2、-ch2ch(ch3)2、-ch2oh、-ch2och3、-ch2ch2oh、-c(ch3)2oh、-ch(oh)ch(ch3)2、-c(ch3)2ch2oh、-ch2ch2so2ch3、-ch2op(o)(oh)2、-ch2f、-chf2、-cf3、-ch2cf3、-ch2chf2、-ch(ch3)cn、-c(ch3)2cn、-ch2cn、-ch2nh2、-ch2nhso2ch3、-ch2nhch3、-ch2n(ch3)2、-co2h、-coch3、-co2ch3、-co2c(ch3)3、-coch(oh)ch3、-conh2、-conhch3、-con(ch3)2、-c(ch3)2co nh2、-nh2、-nhch3、-n(ch3)2、-nhcoch3、-n(ch3)coch3、-nhs(o)2ch3、-n(ch3)c(ch3)2conh2、-n(ch3)ch2ch2s(o)2ch3、-nhc(＝nh)h、-nhc(＝nh)ch3、-nhc(＝nh)nh2、-nhc(＝o)nh2、-no2、＝o、-oh、-och3、-och2ch3、-och2ch2och3、-och2ch2oh、-och2ch2n(ch3)2、-o(ch2ch2o)n-(ch2)mco2h、-o(ch2ch2o)nh、-och2f、-ochf2、-ocf3、-op(o)(oh)2、-s(o)2n(ch3)2、-sch3、-s(o)2ch3和-s(o)3h。[0477]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中下标p是1至25的整数。[0478]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中下标p是1至6的整数。[0479]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中高分子支撑体是肽。[0480]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中高分子支撑体是核苷酸。[0481]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中高分子支撑体是碳水化合物。[0482]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中高分子支撑体是脂质。[0483]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中高分子支撑体是抗体构建体。[0484]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中高分子支撑体是生物聚合物。[0485]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中高分子支撑体是纳米粒子。[0486]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中高分子支撑体是免疫检查点抑制剂。[0487]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中pep具有下式：[0488][0489]其中aa1和aa2独立地选自天然存在的氨基酸的侧链。[0490]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中aa1或aa2与相邻氮原子一起形成5元环脯氨酸氨基酸。[0491]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中pep具有下式：[0492][0493]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中mcgluc具有下式：[0494][0495]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中aa1和aa2独立地选自h、-ch3、-ch(ch3)2、-ch2(c6h5)、-ch2ch2ch2ch2nh2、-ch2ch2ch2nhc(nh)nh2、-chch(ch3)ch3、-ch2so3h和-ch2ch2ch2nhc(o)nh2。[0496]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中aa1是-ch(ch3)2，并且aa2是-ch2ch2ch2nhc(o)nh2。[0497]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中aa1和aa2独立地选自glcnac天冬氨酸、-ch2so3h和-ch2opo3h。[0498]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中x1是一键，并且r1是h。[0499]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中x2是一键，并且r2是c1-c8烷基。[0500]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中x2和x3各自是一键，并且r2和r3独立地选自c1-c8烷基、-o-(c1-c12烷基)、-(c1-c12烷二基)-or5、-(c1-c8烷二基)-n(r5)co2r5和-o-(c1-c12烷基)-n(r5)co2r5。[0501]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中r2和r3各自独立地选自-ch2ch2ch3、-och2ch3、-ch2ch2cf3和-ch2ch2ch2oh。[0502]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中r2是c1-c8烷基并且r3是-(c1-c8烷二基)-n(r5)co2r4。[0503]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中r2是-ch2ch2ch3并且r3是-ch2ch2ch2nhco2(t-bu)。[0504]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中r2和r3各自是-ch2ch2ch3。[0505]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中x3-r3选自由以下组成的组：[0506][0507]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中r2和r3中的一者选自：[0508]-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0509]-(c1-c12烷二基)-o-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0510]-(c1-c12烷二基)-n(r5)c(＝nr5)-n(r5)-*；[0511]-(c1-c12烷二基)-(c6-c20芳二基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-*；[0512]-(c1-c12烷二基)-(c6-c20芳二基)-(c1-c12烷二基)-n(r5)-c(＝nr5)n(r5)-*；[0513]-(c2-c6炔二基)-n(r5)-*；以及[0514]-(c2-c6炔二基)-n(r5)c(＝nr5)n(r5)-*；[0515]x2和x3是一键，并且其中星号*指示l的附接位点。[0516]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案包括其中l选自由以下组成的组：[0517]-c(＝o)-(peg)-；[0518]-c(＝o)-(peg)-c(＝o)-；[0519]-c(＝o)-(peg)-o-；[0520]-c(＝o)-(peg)-n(r5)-；以及[0521]-c(＝o)-(peg)-n(r5)c(＝o)-。[0522]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案选自式ia-ic：[0523][0524][0525]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案选自式id-ih：[0526]本发明包括式i实施方案的所有合理组合和特征排列。[0527]在某些实施方案中，本发明的高分子支撑的化合物包括具有免疫刺激活性的那些化合物。本发明的抗体-药物缀合物选择性地将有效剂量的噻吩并氮呯药物递送至肿瘤组织，从而可以达成相对于未缀合的噻吩并氮呯更大的选择性(即，较低有效剂量)，同时增加治疗指数(“治疗窗”)。[0528]药物负荷由p表示，即，式i的高分子支撑的化合物中每个抗体的taz部分的数目。药物(taz)负荷可以在每个抗体1个至约50个药物(佐剂)部分(d)的范围内。式i的高分子支撑的化合物包括与1个至约25个或1个至6个范围内的药物部分缀合的高分子支撑体混合物或集合。在一些实施方案中，可以缀合至高分子支撑体的药物部分的数目受反应性或可用亲核体，诸如氨基酸侧链残基，如赖氨酸和半胱氨酸的数目限制。在一些实施方案中，通过本文所描述的方法将游离半胱氨酸残基引入抗体氨基酸序列中。在此类方面，p可以是1、2、3、4、5、6、7或8及其范围，诸如1至8或2至5。在任何此类方面，p和n相等(即，p＝n＝1、2、3、4、5、6、7或8或介于之间的某个范围)。式i的示例性高分子支撑的化合物包括但不限于具有1、2、3或4个工程改造的半胱氨酸氨基酸的抗体(lyon,r.等(2012)methods in enzym.502:123-138)。在一些实施方案中，在不使用工程改造的情况下形成链内二硫键的抗体中已存在一个或多个游离半胱氨酸残基，在这种情况下可以使用现有游离半胱氨酸残基将抗体缀合至药物。在一些实施方案中，在抗体缀合之前使抗体暴露于还原条件，以产生一个或多个游离半胱氨酸残基。[0529]对于一些高分子支撑的化合物，p可能受高分子支撑体上的附接位点的数目限制。举例来说，在附接半胱氨酸硫醇的情况下，如在本文所描述的某些示例性实施方案中，抗体可能仅具有一个或有限数目的半胱氨酸硫醇基团，或可能仅具有一个或有限数目的充分反应性硫醇基团，药物可以附接至所述基团。在其它实施方案中，抗体中的一个或多个赖氨酸氨基对于与式ii的taz-连接子化合物缀合来说可以是可用的并且具有反应性。在某些实施方案中，较高药物负荷，例如p》5，可能导致某些高分子支撑体化合物的聚集、不溶性、毒性或细胞渗透性损失。在某些实施方案中，高分子支撑的化合物的平均药物负荷在1至约8、约2至约6或约3至约5的范围内。在某些实施方案中，使抗体经受变性条件以显露反应性亲核基团，诸如赖氨酸或半胱氨酸。[0530]高分子支撑的化合物的负荷(药物/抗体比率)可以按不同方式控制，并且例如通过：(i)限制taz-连接子中间化合物相对于高分子支撑体的摩尔过量；(ii)限制缀合反应时间或温度；以及(iii)用于优化的反应性的部分或限制性还原变性条件。[0531]应了解，在高分子支撑体的多于一个亲核基团与药物反应的情况下，那么所得产物是高分子支撑体化合物的混合物，其具有一个或多个taz药物部分附接至高分子支撑体的分布。可以通过对抗体具有特异性并且对药物具有特异性的双重elisa抗体测定从混合物计算每个抗体的平均药物数。可以通过质谱法在混合物中鉴定个别高分子支撑的化合物分子，并且通过hplc，例如疏水相互作用色谱法进行分离(参见例如mcdonagh等(2006)prot.engr.design&selection19(7):299-307；hamblett等(2004)clin.cancer res.10:7063-7070；hamblett,k.j.等"effect of drug loading on the pharmacology,pharmacokinetics,and toxicity of an anti-cd30 antibody-drug conjugate",摘要号624,american association for cancer research,2004annual meeting,2004年3月27-31日,proceedings of the aacr,第45卷,2004年3月；alley,s.c.等"controlling the location of drug attachment in antibody-drug conjugates",摘要号627,american association for cancer research,2004annual meeting,2004年3月27-31日,proceedings of the aacr,第45卷,2004年3月)。在某些实施方案中，可以通过电泳或色谱法从缀合混合物中分离具有单一负荷值的均质高分子支撑的化合物。[0532]式i的高分子支撑的化合物的示例性实施方案选自表3。bsa(牛血清白蛋白)具有众多生物化学应用，包括elisa(酶联免疫吸附测定)、免疫印迹和免疫组织化学。因为bsa是小的、稳定的、温和的非反应性蛋白，所以它常常用作免疫组织化学中的阻断剂。klh肽(thermo scientific imjecttmmariculture klh)是能够简单制备具有肽抗原的高度有效免疫原的纯化的钥孔戚血蓝素载体蛋白。[0533]表3高分子支撑的化合物(msc)[0534][0535]高分子支撑的化合物的组合物[0536]本发明提供了一种组合物，例如药学上或药理学上可接受的组合物或制剂，其包含多种如本文所描述的高分子支撑的化合物和其任选的载体，例如药学上或药理学上可接受的载体。高分子支撑的化合物在组成上可以相同或不同，即，组合物可以包含具有连接至抗体构建体上的相同位置的相同数目的佐剂的高分子支撑的化合物和/或具有连接至抗体构建体上的不同位置的相同数目的taz佐剂，具有连接至抗体构建体上的相同位置的不同数目的佐剂，或具有连接至抗体构建体上的不同位置的不同数目的佐剂的高分子支撑的化合物。[0537]在一个示例性实施方案中，包含高分子支撑的化合物的组合物包含高分子支撑的化合物的混合物，其中高分子支撑的化合物的混合物中每个高分子支撑体的平均药物(taz)负荷为约2至约5。[0538]本发明的高分子支撑的化合物的组合物可以具有约0.4至约10的平均佐剂与高分子支撑体比率(dar)。技术人员将认识到，在包含本发明的多种高分子支撑的化合物的组合物中，缀合至高分子支撑体，例如抗体构建体的噻吩并氮呯佐剂的数目可能随着高分子支撑的化合物的不同而变化，并且因此，可以用平均值测量佐剂与抗体构建体(例如抗体)比率，这可以称作药物与抗体比率(dar)。佐剂与抗体构建体(例如抗体)比率可以通过任何适合的手段来评估，其中许多手段在本领域中是已知的。[0539]在从缀合反应制备高分子支撑的化合物中每个高分子支撑体的佐剂部分的平均数目(dar)可以通过常规手段，诸如质谱法、elisa测定和hplc来表征。还可以确定高分子支撑的化合物在组合物中的定量分布，以p表示。在一些情况下，可以通过诸如反相hplc或电泳的手段，从具有其它药物负荷的高分子支撑的化合物中分离、纯化和表征其中p是一定值的均质高分子支撑的化合物。[0540]在一些实施方案中，高分子支撑的化合物还包含一种或多种药学上或药理学上可接受的赋形剂。举例来说，本发明的高分子支撑的化合物可以经配制用于肠道外施用，诸如静脉内施用或向器官的体腔或内腔中施用。或者，可以肿瘤内注射高分子支撑的化合物。注射用组合物通常将包含高分子支撑的化合物溶解于药学上可接受的载体中的溶液。可以采用的可接受媒剂和溶剂是水和一种或多种盐的等张溶液，诸如氯化钠，例如林格氏溶液(ringer's solution)。另外，无菌非挥发性油可以常规地用作溶剂或悬浮介质。出于此目的，可以采用任何温和的非挥发性油，包括合成单酸甘油酯或二酸甘油酯。另外，诸如油酸的脂肪酸同样可以用于可注射剂的制备中。这些组合物理想地是无菌的并且一般不含非所需的物质。这些组合物可以通过常规的熟知灭菌技术进行灭菌。组合物可以含有接近生理条件所需的药学上可接受的辅助物质，诸如ph调节剂和缓冲剂、毒性调节剂，例如乙酸钠、氯化钠、氯化钾、氯化钙、乳酸钠等等。[0541]组合物可以含有任何适合浓度的高分子支撑的化合物。组合物中高分子支撑的化合物的浓度可以广泛变化，并且将根据所选特定施用模式和患者需要，主要基于流体体积、粘度、体重等等来选择。在某些实施方案中，注射用溶液制剂中高分子支撑的化合物的浓度将在约0.1％(w/w)至约10％(w/w)的范围内。[0542]用高分子支撑的化合物治疗癌症的方法[0543]本发明提供了一种用于治疗癌症的方法。所述方法包括向有需要的受试者，例如患有癌症并且需要治疗癌症的受试者施用治疗有效量的如本文所描述的高分子支撑的化合物(例如，如本文所描述的组合物)。所述方法包括施用治疗有效量的高分子支撑的化合物。[0544]预期本发明的高分子支撑的化合物可以用于治疗各种过度增生性疾病或病症，例如以肿瘤抗原的过表达为特征。示例性过度增生性病症包括良性或恶性实体肿瘤和血液学病症，诸如白血病和淋巴样恶性病。[0545]在另一个方面，提供了一种用作药剂的高分子支撑的化合物。在某些实施方案中，本发明提供了一种用于治疗受试者的方法中的高分子支撑的化合物，所述方法包括向受试者施用有效量的高分子支撑的化合物。在一个此类实施方案中，所述方法还包括向受试者施用有效量的至少一种额外治疗剂，例如，如本文所描述。[0546]在另一个方面，本发明提供了高分子支撑的化合物在药剂制造或制备中的用途。在一个实施方案中，药剂用于治疗癌症，所述方法包括向患有癌症的受试者施用有效量的药剂。在一个此类实施方案中，所述方法还包括向受试者施用有效量的至少一种额外治疗剂，例如，如本文所描述。[0547]癌瘤是起源于上皮组织的恶性病。上皮细胞覆盖身体的外表面，内衬于内腔，并且形成腺组织的衬里。癌瘤的实例包括但不限于腺癌(始于腺(分泌)细胞的癌症，诸如乳癌、胰脏癌、肺癌、前列腺癌、胃癌、胃食管连接部癌症和结肠癌)；肾上腺皮质癌；肝细胞癌；肾细胞癌；卵巢癌；原位癌；导管癌；乳癌；基底细胞癌；鳞状细胞癌；移行细胞癌；结肠癌；鼻咽癌；多房囊性肾细胞癌；燕麦细胞癌；大细胞肺癌；小细胞肺癌；非小细胞肺癌；等等。在前列腺、胰脏、结肠、脑(通常是继发性转移)、肺、乳房和皮肤中可以发现癌瘤。在一些实施方案中，用于治疗非小细胞肺癌的方法包括施用含有能够结合pd-l1的抗体构建体(例如阿特珠单抗、得瓦鲁单抗、阿维鲁单抗、其生物类似药或其生物改良药)的高分子支撑的化合物。在一些实施方案中，用于治疗乳癌的方法包括施用含有能够结合pd-l1的抗体构建体(例如阿特珠单抗、得瓦鲁单抗、阿维鲁单抗、其生物类似药或其生物改良药)的高分子支撑的化合物。在一些实施方案中，用于治疗三阴性乳癌的方法包括施用含有能够结合pd-l1的抗体构建体(例如阿特珠单抗、得瓦鲁单抗、阿维鲁单抗、其生物类似药或其生物改良药)的高分子支撑的化合物。[0548]软组织肿瘤是来源于结缔组织的罕见肿瘤的高度多样化群组。软组织肿瘤的实例包括但不限于肺泡状软组织肉瘤；血管瘤样纤维组织细胞瘤；软骨粘液样纤维瘤；骨骼软骨肉瘤；骨骼外粘液样软骨肉瘤；透明细胞肉瘤；促结缔组织增生性小圆细胞瘤；隆突性皮肤纤维肉瘤；子宫内膜间质瘤；尤因氏肉瘤(ewing's sarcoma)；纤维瘤病(硬纤维)；婴儿纤维肉瘤；胃肠道间质瘤；骨巨细胞瘤；腱鞘巨细胞瘤；炎性肌纤维母细胞瘤；子宫平滑肌瘤；平滑肌肉瘤；脂肪母细胞瘤；典型脂肪瘤；梭形细胞或多形性脂肪瘤；非典型脂肪瘤；软骨样脂肪瘤；高分化脂肪肉瘤；粘液样/圆形细胞脂肪肉瘤；多形性脂肪肉瘤；粘液样恶性纤维组织细胞瘤；高度恶性纤维组织细胞瘤；粘液性纤维肉瘤；恶性周边神经鞘瘤；间皮瘤；神经母细胞瘤；骨软骨瘤；骨肉瘤；原始神经外胚层肿瘤；肺泡状横纹肌肉瘤；胚胎横纹肌肉瘤；良性或恶性神经鞘瘤；滑膜肉瘤；埃文氏肿瘤(evan's tumor)；结节性筋膜炎；硬纤维型纤维瘤病；孤立性纤维瘤；隆突性皮肤纤维肉瘤(dfsp)；血管肉瘤；上皮样血管内皮瘤；腱鞘巨细胞瘤(tgct)；色素绒毛结节性滑膜炎(pvns)；纤维性发育不良；粘液性纤维肉瘤；纤维肉瘤；滑膜肉瘤；恶性周边神经鞘瘤；神经纤维瘤；软组织多形性腺瘤；以及来源于纤维母细胞、肌纤维母细胞、组织细胞、血管细胞/内皮细胞和神经鞘细胞的赘瘤。[0549]肉瘤是罕见类型的癌症，其出现于间叶来源的细胞中，例如身体的骨骼中或软组织中，所述软组织包括软骨、脂肪、肌肉、血管、纤维组织或其它结缔组织或支持组织。不同类型的肉瘤基于癌症形成的部位。举例来说，骨肉瘤在骨骼中形成，脂肪肉瘤在脂肪中形成，并且横纹肌肉瘤在肌肉中形成。肉瘤的实例包括但不限于阿斯金氏肿瘤(askin's tumor)；葡萄状肉瘤；软骨肉瘤；尤因氏肉瘤；恶性血管内皮瘤；恶性神经鞘瘤；骨肉瘤；以及软组织肉瘤(例如肺泡状软组织肉瘤；血管肉瘤；叶状囊性肉瘤；隆突性皮肤纤维肉瘤(dfsp)；硬纤维瘤；促结缔组织增生性小圆细胞瘤；上皮样肉瘤；骨骼外软骨肉瘤；骨骼外骨肉瘤；纤维肉瘤；胃肠道间质瘤(gist)；血管外皮细胞瘤；血管肉瘤(hemangiosarcoma)(更常称作“血管肉瘤(angiosarcoma)”)；卡波西氏肉瘤(kaposi's sarcoma)；平滑肌肉瘤；脂肪肉瘤；淋巴管肉瘤；恶性周边神经鞘瘤(mpnst)；神经纤维肉瘤；滑膜肉瘤；以及未分化多形性肉瘤)。[0550]畸胎瘤是一种类型的生殖细胞肿瘤，其可以含有若干不同类型的组织(例如可以包括来源于以下三个胚层中的任一者和/或全部的组织：内胚层、中胚层和外胚层)，包括例如毛发、肌肉和骨骼。畸胎瘤最常出现于女性的卵巢、男性的睪丸和儿童的尾骨中。[0551]黑色素瘤是始于黑色素细胞(制造黑色素的细胞)的癌症形式。黑色素瘤可以始于黑痣(皮肤黑色素瘤)，但也可以始于其它有色素组织，诸如眼中或肠中。[0552]默克尔细胞癌(merkel cell carcinoma)是一种罕见类型的皮肤癌，其通常以肉色或蓝红色结节出现于面部、头部或颈部。默克尔细胞癌也称为皮肤神经内分泌癌。在一些实施方案中，用于治疗默克尔细胞癌的方法包括施用含有能够结合pd-l1的抗体构建体(例如阿特珠单抗、得瓦鲁单抗、阿维鲁单抗、其生物类似药或其生物改良药)的高分子支撑的化合物。在一些实施方案中，当进行施用时默克尔细胞癌已转移。[0553]白血病是始于血液形成组织(诸如骨髓)的癌症，并且导致大量异常血细胞产生并且进入血流。举例来说，白血病可以起源于通常在血流中成熟的骨髓源性细胞。白血病以疾病发展及进展的速度(例如急性对比慢性)和受影响的白血球类型(例如髓样对比淋巴样)而命名。髓样白血病也称为骨髓性或骨髓母细胞性白血病。淋巴样白血病也称为淋巴母细胞性或淋巴细胞性白血病。淋巴样白血病细胞可聚集于淋巴结中，从而淋巴结可变得肿胀。白血病的实例包括但不限于急性髓样白血病(aml)、急性淋巴母细胞性白血病(all)、慢性髓样白血病(cml)和慢性淋巴细胞性白血病(cll)。[0554]淋巴瘤是始于免疫系统细胞的癌症。举例来说，淋巴瘤可以起源于通常在淋巴系统中成熟的骨髓源性细胞。淋巴瘤存在两种基本类别。一种类别的淋巴瘤是霍奇金淋巴瘤(hodgkin lymphoma，hl)，其以称为里-斯二氏细胞(reed-sternberg cell)的细胞类型的存在为标志。当前存在6种公认的hl类型。霍奇金淋巴瘤的实例包括结节性硬化经典型霍奇金淋巴瘤(chl)、混合细胞型chl、淋巴细胞耗竭型chl、富淋巴细胞型chl和结节性淋巴细胞为主型hl。[0555]另一种类别的淋巴瘤是非霍奇金淋巴瘤(non-hodgkin lymphoma，nhl)，其包括免疫系统细胞癌的大型多样化群组。非霍奇金淋巴瘤可以进一步分为具有无痛性(缓慢生长)病程的癌症和具有侵袭性(快速生长)病程的癌症。当前存在61种公认的nhl类型。非霍奇金淋巴瘤的实例包括但不限于aids相关淋巴瘤、退行性大细胞淋巴瘤、血管免疫母细胞性淋巴瘤、母细胞性nk细胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤(burkitt's lymphoma)、伯基特样淋巴瘤(burkitt-like lymphoma)(小无裂细胞淋巴瘤)、慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞性淋巴瘤、皮肤性t细胞淋巴瘤、弥漫性大b细胞淋巴瘤、肠病型t细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、肝脾γ-δt细胞淋巴瘤、t细胞白血病、淋巴母细胞性淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、边缘区淋巴瘤、鼻部t细胞淋巴瘤、小儿淋巴瘤、周边t细胞淋巴瘤、原发性中枢神经系统淋巴瘤、转化性淋巴瘤、治疗相关t细胞淋巴瘤和瓦尔登斯特伦氏巨球蛋白血症(waldenstrom's macroglobulinemia)。[0556]脑癌包括脑组织的任何癌症。脑癌的实例包括但不限于神经胶质瘤(例如胶质母细胞瘤、星形细胞瘤、寡树突神经胶质瘤、室管膜瘤和类似癌症)、脑膜瘤、垂体腺瘤和前庭神经鞘瘤、原始神经外胚层肿瘤(髓母细胞瘤)。[0557]本发明的高分子支撑的化合物可以单独或与其它剂组合用于疗法中。举例来说，高分子支撑的化合物可以与至少一种额外治疗剂，诸如化学治疗剂共同施用。此类组合疗法涵盖组合施用(其中两种或更多种治疗剂包括于相同或独立制剂中)；以及独立施用，在这种情况下，高分子支撑的化合物的施用可以在额外治疗剂和/或佐剂施用之前、同时和/或之后进行。高分子支撑的化合物还可以与放射线疗法组合使用。[0558]本发明的高分子支撑的化合物(和任何额外治疗剂)可以通过任何适合的手段施用，包括肠道外、肺内和鼻内，并且必要时对于局部治疗，病灶内施用。肠道外输注包括肌肉内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下施用。给药可以通过任何适合的途径进行，例如通过注射，诸如静脉内或皮下注射，在部分程度上取决于施用是短暂的还是长期的。本文预期各种给药方案，包括但不限于单次施用或经多个时间点的多次施用、推注施用和脉冲输注。[0559]已知阿特珠单抗、得瓦鲁单抗、阿维鲁单抗、其生物类似药及其生物改良药可以用于治疗癌症，特别是乳癌，尤其三阴性(对雌激素受体、黄体酮受体和过量her2蛋白质测试呈阴性)乳癌、膀胱癌和默克尔细胞癌。本文所描述的高分子支撑的化合物与阿特珠单抗、得瓦鲁单抗、阿维鲁单抗、其生物类似药及其生物改良药可以用于治疗相同类型的癌症，特别是乳癌，尤其三阴性(对雌激素受体、黄体酮受体和过量her2蛋白质测试呈阴性)乳癌、膀胱癌和默克尔细胞癌。[0560]使用任何适合的给药方案，诸如用于阿特珠单抗、得瓦鲁单抗、阿维鲁单抗、其生物类似药及其生物改良药的给药方案，以任何治疗有效量向有需要的受试者施用高分子支撑的化合物。举例来说，所述方法可以包括施用高分子支撑的化合物以向受试者提供约100ng/kg至约50mg/kg的剂量。高分子支撑的化合物剂量可以在约5mg/kg至约50mg/kg、约10μg/kg至约5mg/kg、或约100μg/kg至约1mg/kg的范围内。高分子支撑的化合物剂量可以为约100、200、300、400或500μg/kg。高分子支撑的化合物剂量可以为约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10mg/kg。取决于特定缀合物以及所治疗的癌症的类型和严重性，高分子支撑的化合物剂量也可以在这些范围外。施用频率可以在每周单次给药至多次给药的范围内，或更高频率。在一些实施方案中，每月约一次至每周约五次施用高分子支撑的化合物。在一些实施方案中，每周一次施用高分子支撑的化合物。[0561]在另一个方面，本发明提供了一种用于预防癌症的方法。所述方法包括向受试者施用治疗有效量的高分子支撑的化合物(例如，如上文所描述的组合物)。在某些实施方案中，受试者易患某种有待预防的癌症。举例来说，所述方法可以包括施用高分子支撑的化合物以向受试者提供约100ng/kg至约50mg/kg的剂量。高分子支撑的化合物剂量可以在约5mg/kg至约50mg/kg、约10μg/kg至约5mg/kg、或约100μg/kg至约1mg/kg的范围内。高分子支撑的化合物剂量可以为约100、200、300、400或500μg/kg。高分子支撑的化合物剂量可以为约1、2、3、4、5、6、7、8、9或10mg/kg。取决于特定缀合物以及所治疗的癌症的类型和严重性，高分子支撑的化合物剂量也可以在这些范围外。施用频率可以在每周单次给药至多次给药的范围内，或更高频率。在一些实施方案中，每月约一次至每周约五次施用高分子支撑的化合物。在一些实施方案中，每周一次施用高分子支撑的化合物。[0562]本发明的一些实施方案提供用于治疗如上文所描述的癌症的方法，其中所述癌症是乳癌。乳癌可以起源于乳房的不同区域，并且许多不同类型的乳癌已表征。举例来说，本发明的高分子支撑的化合物可以用于治疗原位导管癌；浸润性导管癌(例如小管癌；髓质癌；粘液癌；乳突癌；或乳房筛状癌)；原位小叶癌；浸润性小叶癌；炎性乳癌；以及其它形式的乳癌，诸如三阴性(对雌激素受体、黄体酮受体和过量her2蛋白质测试呈阴性)乳癌。在一些实施方案中，用于治疗乳癌的方法包括施用含有能够结合her2的抗体构建体(例如曲妥珠单抗、帕妥珠单抗、其生物类似药或生物改良药)和能够结合pd-l1的抗体构建体(例如阿特珠单抗、得瓦鲁单抗、阿维鲁单抗、其生物类似药或生物改良药)的高分子支撑的化合物。在一些实施方案中，用于治疗结肠癌、肺癌、肾癌、胰脏癌、胃癌和食管癌的方法包括施用含有能够结合cea或过表达cea的肿瘤的抗体构建体(例如拉贝妥珠单抗、其生物类似药或生物改良药)的高分子支撑的化合物。[0563]在一些实施方案中，癌症容易发生由tlr7和/或tlr8诱导的促炎反应。[0564]实施例[0565]制备噻吩并氮呯化合物(taz)和中间体[0566]实施例1合成5-氨基-2-溴-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-1[0567][0568]向5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸taz-15(70mg，244μmol(微摩尔)，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中添加六氟磷酸1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物，六氟磷酸氮杂苯并三唑四甲基脲鎓hatu(110mg，293μmol，1.2当量)、n-丙基丙-1-胺(74.0mg，731μmol，100μl(微升)，3当量)和三乙胺et3n(49.0mg，488μmol，67.8μl，2当量)。在25℃下搅拌混合物1小时。过滤混合物并且通过制备型hplc(柱：nano-micro kromasil c18 100*30mm 8um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：20％-50％，10分钟)纯化，得到呈白色固体状的taz-1(27mg，72.91μmol，产率29.9％)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ11.66(s,1h),7.75(s,1h),7.22(s,1h),6.79(s,1h),3.40(s,4h),3.28(s,2h),1.68-1.57(m,4h),0.91(t,j＝7.2hz,6h)。lc/ms[m+h]370.0(计算值)；lc/ms[m+h]370.0(观测值)。[0569]实施例2合成5-氨基-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-2[0570][0571]向5-氨基-2-溴-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-1(70mg，189μmol，1当量)于乙酸乙酯etoac(5ml)中的溶液中添加钯碳pd/c(10mg，189μmol，纯度20％，1当量)。将悬浮液在真空下脱气并且用h2吹扫数次，然后在25℃下于h2(50psi)下搅拌1小时。过滤混合物并浓缩。通过制备型hplc(柱：nano-micro kromasil c18 100*30mm 8um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：15％-40％，10分钟)纯化残余物，得到呈白色固体状的taz-2(12mg，41.18μmol，产率21.78％)。1h nmr(meod-d4,400mhz)δ7.71(d,j＝5.6hz,1h),7.15-7.09(m,2h),3.44-3.40(m,4h),3.36(s,2h),1.72-1.61(m,4h),0.98-0.84(m,6h)。lc/ms[m+h]292.1(计算值)；lc/ms[m+h]292.1(观测值)[0572]实施例3合成(2-(1-(5-(5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-甲酰胺基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲酰胺基)乙基)氨基甲酸叔丁酯，taz-3[0573][0574]制备5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-甲酸甲酯，taz-20[0575]在n2下向5-氨基-2-溴-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-1(0.5g，1.30mmol，1当量)于meoh(5ml)中的溶液中添加et3n(409mg，4.05mmol，564μl，3当量)和[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)pd(dppf)cl2(99.0mg，135μmol，0.1当量)。将悬浮液在真空下脱气并且用一氧化碳co吹扫数次。在80℃下于co(50psi)下搅拌混合物12小时。过滤混合物并浓缩，得到呈红色固体状的taz-20(0.5g，粗物质)。1h nmr(meod-d4,400mhz)δ7.51(s,1h),6.91(s,1h),3.87(s,3h),3.43-3.35(m,4h),3.35(s,2h),1.73-1.60(m,4h),0.97-0.83(m,6h)。[0576]制备5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-甲酸，taz-22[0577]向5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-甲酸甲酯taz-20(450mg，1.29mmol，1当量)于meoh(10ml)和h2o(10ml)中的溶液中添加lioh.h2o(270mg，6.44mmol，5当量)，然后在25℃下搅拌2小时。在减压下浓缩反应混合物以去除meoh。用30ml h2o稀释残余物并且用etoac(10ml x 2)萃取。用(水性)hcl水溶液(1m)将水相ph调节至约4并且用etoac(10ml x 3)萃取。用盐水(10ml)洗涤有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到呈浅黄色固体状的taz-22(0.2g，596.27μmol，产率46.30％)。1h nmr(dmso-d6,400mhz)δ7.49(s,1h),6.99(s,1h),3.32-3.28(m,4h),3.16(s,2h),1.61-1.46(m,4h),0.82(br s,6h)。[0578]制备(2-(1-(5-(5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-甲酰胺基)吡啶-2-基)哌啶-4-甲酰胺基)乙基)氨基甲酸叔丁酯，taz-3[0579]向5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-甲酸(150mg，447μmol，1当量)于dmf(2ml)中的溶液中添加六氟磷酸7-氮杂-苯并三唑-1-基氧基-三吡咯烷基-鏻pyaop(256mg，491.9μmol，1.1当量)、et3n(45.0mg，447.2μmol，62.25μl，1当量)和n-[2-[[1-(5-氨基-2-吡啶基)哌啶-4-羰基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯(195.mg，536.6μmol，1.2当量)并且在25℃下将其搅拌12小时。过滤混合物并且通过制备型hplc(柱：welch xtimate c18 150*25mm*5um；流动相：[水(10mm nh4hco3)-acn]；b％：30％-60％，10.5分钟)纯化，得到呈灰色固体状的taz-3(62mg，91.06μmol，产率20.36％)。1hnmr(meod-d4,400mhz)δ8.35(d,j＝2.0hz,1h),7.89-7.82(m,1h),7.60(s,1h),7.51(s,1h),6.93(s,1h),6.91-6.84(m,1h),4.28(d,j＝12.8hz,2h),3.44-3.35(m,4h),3.27-3.21(m,2h),3.18-3.12(m,2h),2.97(s,2h),2.88(t,j＝11.6hz,2h),2.48-2.32(m,1h),1.90-1.80(m,2h),1.79-1.56(m,6h),1.43(s,9h),0.90(s,6h)。lc/ms[m+h]681.3(计算值)；lc/ms[m+h]681.4(观测值)。[0580]实施例4合成5-氨基-2-[3-[3-(羟甲基)氮杂环丁烷-1-基]磺酰基苯基]-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-4[0581][0582]在25℃下于n2下向5-氨基-2-溴-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-1(71.0mg，192μmol，1.1当量)于二噁烷(1ml)和h2o(0.5ml)中的溶液中添加[1-[3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)苯基]磺酰基氮杂环丁烷-3-基]甲醇(62.0mg，174μmol，1当量)、k2co3(48.0mg，348μmol，2当量)和[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)pd(dppf)cl2(6.0mg，8.7μmol，0.05当量)，然后在110℃下搅拌2小时。过滤混合物并浓缩。通过制备型hplc(柱：welch xtimate c18 150*25mm*5um；流动相：[水(10mm nh4hco3)-acn]；b％：30％-60％，10.5分钟)纯化残余物，得到呈浅黄色固体状的taz-4(22mg，42.58μmol，产率24.45％)。1h nmr(meod-d4,400mhz)δ8.04-7.97(m,2h),7.79-7.75(m,1h),7.73-7.67(m,1h),7.31(s,1h),6.92(s,1h),3.85(t,j＝8.2hz,2h),3.62-3.56(m,2h),3.45-3.37(m,6h),2.99(s,2h),2.63-2.52(m,1h),1.71-1.59(m,4h),0.99-0.83(m,6h)。lc/ms[m+h]517.2(计算值)；lc/ms[m+h]517.2(观测值)[0583]实施例5合成n-[2-[[1-[5-[[5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-羰基]氨基]-2-吡啶基]哌啶-4-羰基]氨基]乙基]氨基甲酸[4-[[(2s)-2-[[(2s)-2-(9h-芴-9-基甲氧基羰基氨基)-3-甲基-丁酰基]氨基]-5-脲基-戊酰基]氨基]苯基]甲酯，taz-5[0584][0585]制备5-氨基-n2-[6-[4-(2-氨基乙基氨甲酰基)-1-哌啶基]-3-吡啶基]-n7,n7-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2,7-二甲酰胺，5a[0586]向n-[2-[[1-[5-[[5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-羰基]氨基]-2-吡啶基]哌啶-4-羰基]氨基]乙基]氨基甲酸叔丁酯taz-3(50mg，73.4μmol，1当量)于dcm(1ml)中的溶液中添加tfa(84.0mg，734μmol，54.0μl，10当量)。在30℃下搅拌混合物2小时。过滤混合物并浓缩，然后冻干，得到呈灰色固体状的5a(59mg，72.95μmol，产率99.34％，2tfa)。1h nmr(meod-d4,400mhz)δ8.62(d,j＝2.4hz,1h),8.17(dd,j＝9.6,2.8hz,1h),7.89(s,1h),7.43(d,j＝9.6hz,1h),7.16(s,1h),4.21(d,j＝13.6hz,2h),3.52-3.39(m,8h),3.36-3.31(m,2h),3.07(t,j＝6.0hz,2h),2.68-2.61(m,1h),2.07-2.00(m,2h),1.90-1.78(m,2h),1.67(dq,j＝14.8,7.2hz,4h),0.93(s,6h)。[0587]制备taz-5[0588]向5a(50mg，61.8μmol，1当量，2tfa)于dmf(1ml)中的溶液中添加diea(32.0mg，247.2μmol，43.0μl，4当量)和碳酸[4-[[(2s)-2-[[(2s)-2-(9h-芴-9-基甲氧基羰基氨基)-3-甲基-丁酰基]氨基]-5-脲基-戊酰基]氨基]苯基]甲酯(4-硝基苯基)酯(52.0mg，68.0μmol，1.1当量)，然后在25℃下搅拌1小时。过滤混合物并且通过制备型hplc(柱：nano-micro kromasil c18 100*30mm 8um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：25％-45％，10分钟)纯化，得到呈浅黄色固体状的taz-5(36mg，27.2μmol，产率44.03％，tfa)。1h nmr(meod-d4,400mhz)δ8.58(s,1h),8.07(br d,j＝10.4hz,1h),7.93(br s,1h),7.86-7.72(m,3h),7.63(br t,j＝7.2hz,2h),7.57(br d,j＝8.2hz,2h),7.41-7.34(m,2h),7.33-7.25(m,4h),7.13(s,1h),5.03(br s,2h),4.41-4.29(m,3h),4.23-4.15(m,1h),4.13-4.03(m,2h),3.98-3.91(m,1h),3.51-3.34(m,5h),3.25-3.07(m,9h),2.52-2.31(m,1h),2.08(br d,j＝7.6hz,1h),1.99-1.36(m,12h),1.04-0.82(m,12h)。lc/ms[m+h]1208.6(计算值)；lc/ms[m+h]1208.5(观测值)。[0589]实施例6合成n-[5-[5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]戊-4-炔基]氨基甲酸叔丁酯，taz-6[0590][0591]将5-氨基-2-溴-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-1(20mg，54.0μmol，1当量)、n-戊-4-炔基氨基甲酸叔丁酯(29.69mg，162μmol，3当量)、pd(pph3)2cl2(1.90mg，2.70μmol，0.05当量)、cui(2.06mg，10.8μmol，0.2当量)和pph3(2.83mg，10.8μmol，0.2当量)于tea(0.2ml)和dmf(0.6ml)中的混合物脱气并且用n2吹扫3次，然后在140℃下于n2下搅拌3小时。在0℃下通过添加h2o(5ml)淬灭反应混合物，然后用etoac(5ml x 3)萃取。用盐水(5ml x 3)洗涤合并的有机层，经na2so4干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过制备型tlc(sio2，etoac:meoh＝10:1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的taz-6(8mg，16.9μmol，产率31.34％)。1h nmr(meod-d4,400mhz)δ6.87(s,1h),6.79(s,1h),3.42-3.34(m,4h),3.31(s,2h),3.17(t,j＝6.8hz,2h),2.48(t,j＝7.2hz,2h),1.75(q,j＝7.2hz,2h),1.69-1.56(m,4h),1.44(s,9h),0.92-0.87(m,6h)。lc/ms[m+h]473.2(计算值)；lc/ms[m+h]473.2(观测值)[0592]实施例7合成5-氨基-2-甲基-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-7[0593][0594]在n2下向5-氨基-2-溴-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-1(30mg，81.0μmol，1当量)于dmf(1ml)中的溶液中添加甲基硼酸(73.0mg，1.22mmol，15当量)、k2co3(22.0mg，162.03μmol，2当量)和[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)pd(dppf)cl2(2.96mg，4.05μmol，0.05当量)，然后在100℃下搅拌3小时。过滤混合物并浓缩。通过制备型hplc(柱：nano-micro kromasil c18 100*30mm 8um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：10％-40％，10分钟)纯化残余物，得到呈白色固体状的taz-7(8mg，26.19μmol，产率32.33％)。1h nmr(meod-d4,400mhz)δ7.00(s,1h)6.83(s,1h)3.43(br t,j＝7.2hz,4h)3.34(s,2h)2.53(s,3h)1.69-1.60(m,4h)0.98-0.85(m,6h)。lc/ms[m+h]306.2(计算值)；lc/ms[m+h]306.2(观测值)。[0595]实施例8合成n-[3-[(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]丙基]氨基甲酸叔丁酯，taz-8[0596][0597]在n2下向n-[3-[(5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]丙基]氨基甲酸叔丁酯taz-9(0.72g，1.48mmol，1当量)于etoac(10ml)中的溶液中添加钯碳pd/c(10％，0.2g)。将悬浮液在真空下脱气并且用h2吹扫数次，然后在25℃下于氢气h2(50psi)下搅拌12小时。过滤反应混合物并且在减压下浓缩。通过柱色谱法(sio2，etoac:etoh＝1:0至3:1)纯化残余物，得到呈浅黄色固体状的taz-8(0.4g，984μmol，产率66.34％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.67(d,j＝5.6hz,1h),7.13-7.05(m,2h),3.50(t,j＝7.6hz,2h),3.44(t,j＝7.6hz,2h),3.30-3.24(m,2h),3.07(s,2h),1.84-1.78(m,2h),1.72-1.61(m,2h),1.41(s,9h),0.93-0.88(m,3h)。lc/ms[m+h]407.2(计算值)；lc/ms[m+h]407.2(观测值)。[0598]实施例9合成n-[3-[(5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]丙基]氨基甲酸叔丁酯，taz-9[0599][0600]在25℃下向5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸taz-15(0.5g，1.74mmol，1当量)于dmf(5ml)中的混合物中添加六氟磷酸1-[双(二甲基氨基)亚甲基]-1h-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物，六氟磷酸氮杂苯并三唑四甲基脲鎓hatu(795mg，2.09mmol，1.2当量)和dipea(675mg，5.22mmol，910μl，3当量)。15分钟后，在25℃下添加n-[3-(丙基氨基)丙基]氨基甲酸叔丁酯(489.70mg，2.26mmol，1.3当量)，然后搅拌1小时。在0℃下通过添加h2o(30ml)淬灭反应混合物，然后用etoac(15ml x 3)萃取。用盐水(10ml x 3)洗涤合并的有机层，经na2so4干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至0/1)和(sio2，etoac:meoh＝1:0至5:1)纯化残余物，得到呈浅黄色固体状的taz-9(0.73g，1.50mmol，产率86.36％)。1h nmr(meod,400mhz)δ6.95(s,1h),6.86(s,1h),3.50-3.43(m,2h),3.42-3.35(m,2h),3.07-3.01(m,4h),1.84-1.74(m,2h),1.69-1.57(m,2h),1.41(s,9h),0.91-0.86(m,3h)。lc/ms[m+h]485.1(计算值)；lc/ms[m+h]485.1(观测值)。[0601]实施例10合成n-[4-[(5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]丁-2-炔基]氨基甲酸叔丁酯，taz-10[0602][0603]在25℃下向5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸taz-15(0.2g，697μmol，1当量)于dmf(4ml)中的溶液中添加hatu(318mg，836μmol，1.2当量)和dipea(270mg，2.09mmol，3当量)。15分钟后，在25℃下添加n-[4-(丙基氨基)丁-2-炔基]氨基甲酸叔丁酯(205mg，906μmol，1.3当量)，然后在25℃下搅拌1小时。在0℃下通过添加h2o(20ml)淬灭反应混合物，然后用etoac(10ml x 3)萃取。用盐水(5ml x 3)洗涤合并的有机层，经na2so4干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至0/1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的taz-10(150mg，302.77μmol，产率43.47％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.20-7.18(m,2h),4.29(s,2h),3.84(s,2h),3.58-3.50(m,2h),3.40(s,2h),1.76-1.66(m,2h),1.43(s,9h),0.94(t,j＝7.2hz,3h)。lc/ms[m+h]495.1(计算值)；lc/ms[m+h]495.1(观测值)。[0604]实施例11合成5-氨基-n-(3-氨基丙基)-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-11[0605][0606]在25℃下向n-[3-[(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]丙基]氨基甲酸叔丁酯taz-8(1.4g，3.44mmol，1当量)于etoac(10ml)和meoh(1ml)中的溶液中添加hcl/etoac(4m，20ml，23.23当量)，然后搅拌0.5小时。在减压下浓缩反应混合物，得到呈浅黄色固体状的taz-11(1.28g，粗物质，hcl)。1h nmr(meod-d4,400mhz)δ7.74(d,j＝5.6hz,1h),7.20(s,1h),7.15(d,j＝5.6hz,1h),3.59(t,j＝6.8hz,2h),3.49(t,j＝7.2hz,2h),3.41(s,2h),3.00(t,j＝7.2hz,2h),2.08-1.97(m,2h),1.75-1.62(m,2h),0.91(t,j＝7.2hz,3h)。lc/ms[m+h]307.2(计算值)；lc/ms[m+h]307.1(观测值)。[0607]实施例12合成5-氨基-2-[1-[3-(羟甲基)氮杂环丁烷-1-基]磺酰基吡唑-4-基]-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-12[0608][0609]制备1-氯磺酰基氮杂环丁烷-3-甲酸甲酯，12b[0610]在-78℃下向硫酰氯(3.34g，24.7mmol，2.47ml，1.5当量)于dcm(50ml)中的混合物中添加氮杂环丁烷-3-甲酸甲酯12a(2.5g，16.49mmol，1当量，hcl)和diea(8.53g，65.97mmol，11.49ml，4当量)于dcm(30ml)中的溶液，然后在此温度下搅拌2小时。用水稀释混合物并且用etoac(60ml x 3)萃取。用盐水洗涤有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/0，0/1)纯化残余物，得到呈无色油状的12b(2.75g，12.87mmol，产率78.05％)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ4.36-4.25(m,4h),3.80(s,3h),3.57-3.47(m,1h)。[0611]制备1-(4-溴吡唑-1-基)磺酰基氮杂环丁烷-3-甲酸甲酯，12c[0612]在25℃下向4-溴-1h-吡唑(1.58g，10.77mmol，1.0当量)于dcm(40ml)中的混合物中一次性添加dabco(1.57g，14.0mmol，1.54ml，1.3当量)和12b(2.3g，10.8mmol，1.0当量)且将其搅拌2小时。用水稀释混合物并且用etoac(50ml x 3)萃取。用盐水洗涤有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/0，3/1)纯化残余物，得到呈黄色油状的12c(3g，9.25mmol，产率85.97％)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ8.03(s,1h),7.77(s,1h),4.32-4.27(m,4h),3.73(s,3h),3.41-3.34(m,1h)。[0613]制备[1-(4-溴吡唑-1-基)磺酰基氮杂环丁烷-3-基]甲醇，12d[0614]在0℃下于n2下向12c(3.3g，10.2mmol，1当量)于dcm(50ml)中的溶液中缓慢添加dibal-h(1m，40.7ml，4当量)，然后在此温度下搅拌2小时。用水(1.5ml)淬灭混合物并且经na2so4干燥，过滤并浓缩，获得呈黄色油状的12d(1.19g，粗物质)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ8.04(s,1h),7.77(s,1h),4.18-4.14(t,j＝8.4hz,2h),3.96(dd,j＝5.6,8.4hz,2h),3.66(d,j＝5.6hz,2h)。[0615]制备[1-[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)吡唑-1-基]磺酰基氮杂环丁烷-3-基]甲醇，12e[0616]在25℃下于n2下向12d(0.1g，338μmol，1.0当量)于二噁烷(2ml)中的混合物中一次性添加pin2b2(129mg，507μmol，1.5当量)、乙酸钾koac(66.3mg，675μmol，2.0当量)和pd(dppf)cl2(12.4mg，16.9μmol，0.05当量)并且在100℃下将其搅拌2小时。然后用水稀释混合物并且用etoac(10ml x 3)萃取。用盐水洗涤有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到呈黑色油状的12e(0.1g，粗物质)。[0617]制备taz-12[0618]在25℃下于n2下向5-氨基-2-溴-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-1(54mg，146μmol，1.0当量)和12e(50mg，146μmol，1.0当量)于二噁烷(2ml)和h2o(0.2ml)中的混合物中一次性添加k2co3(60.4mg，437μmol，3.0当量)和pd(dppf)cl2(5.3mg，7.28μmol，0.05当量)。在90℃下搅拌混合物2小时。然后用水稀释反应物并且用etoac(10ml x 3)萃取。用盐水洗涤有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过制备型hplc(柱：phenomenex gemini-nx c1875*30mm*3um；流动相：[水(10mm nh4hco3)-acn]；b％：30％-50％，10.5分钟)进一步纯化残余物，得到呈白色固体状的5-氨基-2-[1-[3-(羟甲基)氮杂环丁烷-1-基]磺酰基吡唑-4-基]-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺(9mg，17.8μmol，产率12.19％)。1h nmr(meod,400mhz)δ8.56(s,1h),8.28(s,1h),7.42(s,1h),7.38-7.35(m,2h),6.85(s,1h),4.13(t,j＝8.8hz,2h),3.89(dd,j＝6.0,8.4hz,2h),3.49(d,j＝6.0hz,2h),3.43-3.37(m,4h),2.97(s,2h),2.72-2.67(m,1h),1.69-1.61(m,4h),0.93-0.87(m,6h)。lc/ms[m+h]507.2(计算值)；lc/ms[m+h]507.2(观测值)。[0619]实施例13合成n-[5-[5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]戊基]氨基甲酸叔丁酯，taz-13[0620][0621]在n2下向n-[5-[5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]戊-4-炔基]氨基甲酸叔丁酯taz-6(0.8g，1.69mmol，1.0当量)于meoh(30ml)中的溶液中添加pd(oh)2/c(10％，0.3g)。将悬浮液在真空下脱气并且用h2吹扫数次。在25℃下于h2(50psi)下搅拌混合物12小时。过滤反应混合物并浓缩。通过快速硅胶色谱法(isco；20g sepaflash二氧化硅快速柱，洗脱剂0至100％乙酸乙酯/石油醚梯度，在60ml/min下)纯化残余物，得到呈黄色油状的taz-13(0.6g，1.26mmol，产率74.37％)。1h nmr(meod,400mhz)δ6.80(s,1h),6.62(s,1h),3.43-3.35(m,4h),3.03(t,j＝7.2hz,2h),2.91(s,2h),2.78(t,j＝7.2hz,2h),1.69-1.60(m,6h),1.50-1.40(m,13h),0.92-0.87(m,6h)。lc/ms[m+h]477.3(计算值)；lc/ms[m+h]477.3(观测值)[0622]实施例14合成5-氨基-2-(5-氨基戊基)-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-14[0623][0624]在25℃下向n-[5-[5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]戊基]氨基甲酸叔丁酯taz-13(0.31g，650μmol，1.0当量)于etoac(10ml)中的溶液中添加hcl/etoac(4m，4.88ml，30.0当量)，然后在此温度下搅拌1小时。在减压下浓缩混合物，得到呈黄色固体状的taz-14(0.26g，630μmol，产率96.80％，hcl)。1hnmr(meod,400mhz)δ7.02(s,1h),6.92(s,1h),3.45-3.43(m,4h),3.35(s,2h),2.98-2.86(m,4h),1.82-1.62(m,8h),1.55-1.45(m,2h),0.92-0.87(m,6h)。lc/ms[m+h]377.2(计算值)；lc/ms[m+h]377.2(观测值)。[0625]实施例15合成5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸，taz-15[0626][0627]制备3-(叔丁氧基羰基氨基)噻吩-2-甲酸甲酯，15b[0628]在25℃下向3-氨基噻吩-2-甲酸甲酯15a(19g，121mmol，1当量)和et3n(14.7g，145mmol，20.2ml，1.2当量)于dcm(100ml)中的溶液中逐滴添加含boc2o(29.0g，133mmol，30.5ml，1.1当量)的dcm(50ml)，然后将dmap(738mg，6.0mmol，0.05当量)添加至混合物中。在25℃下搅拌所得混合物3小时。用水(100ml)稀释混合物并且用dcm(50ml x 3)萃取。用盐水(30ml)洗涤有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过快速硅胶色谱法(isco；20gsepaflash二氧化硅快速柱，洗脱剂0至20％乙酸乙酯/石油醚梯度，在45ml/min下)纯化残余物，得到呈白色固体状的15b(12g，46.64mmol，产率38.58％)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ9.36(s,1h),7.89(d,j＝5.6hz 1h),7.42(d,j＝5.6hz,1h),3.88(s,3h),1.53(s,9h)。[0629]制备5-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)噻吩-2-甲酸甲酯，15c[0630]在-78℃下向15b(8.9g，34.6mmol，1当量)于thf(50ml)中的溶液中添加lda(2m，60.0ml，3.5当量)，在-78℃下搅拌混合物1小时，然后添加1,2-二溴-1,1,2,2-四氟-乙烷(53.92g，207.54mmol，6当量)，然后在此温度下搅拌1小时。将混合物倾倒至冷氯化铵溶液(100ml)中，同时剧烈搅拌，并且用etoac(50ml x 3)萃取。用盐水(50ml)洗涤有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过快速硅胶色谱法(isco；10g sepaflash二氧化硅快速柱，洗脱剂0至20％乙酸乙酯/石油醚梯度，在45ml/min下)纯化残余物，得到呈灰白色固体状的15c(4g，11.90mmol，产率34.40％)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ9.33(s,1h),7.97(s,1h),3.86(s,3h),1.54(s,9h)[0631]制备n-[5-溴-2-(羟甲基)-3-噻吩基]氨基甲酸叔丁酯，15d[0632]在0℃下于n2下向15c(4g，11.9mmol，1当量)于dcm(60ml)中的溶液中添加dibal-h(1m，59.0ml，5当量)，然后在25℃下搅拌2小时。在0℃下通过添加1ml h2o淬灭反应混合物，然后在0℃下添加15％naoh(0.5ml)和h2o(1ml)。在25℃下搅拌混合物30分钟，过滤并且用etoac(50ml)洗涤滤饼，浓缩滤液，得到呈黄色固体状的15d(3g，9.7mmol，产率81.82％)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ7.21(s,1h),6.68(s,1h),4.60(s,2h),1.51(s,9h)。[0633]制备n-(5-溴-2-甲酰基-3-噻吩基)氨基甲酸叔丁酯，15e[0634]在25℃下向15d(3g，9.73mmol，1当量)于dcm(30ml)中的溶液中添加mno2(8.5g，97.34mmol，10当量)。在50℃下搅拌混合物12小时。过滤混合物并浓缩，得到呈黄色固体状的15e(1.5g，4.90mmol，产率50.33％)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ9.82(s,1h),9.51(s,1h),8.03(s,1h),1.53(s,9h)。[0635]制备(e)-3-[5-溴-3-(叔丁氧基羰基氨基)-2-噻吩基]-2-(氰基甲基)丙-2-烯酸乙酯，15f[0636]在25℃下向15e(1.5g，4.90mmol，1当量)于甲苯(15ml)中的溶液中添加3-氰基-2-(三苯基-亚膦基)丙酸乙酯(2.5g，6.4mmol，1.3当量)，然后在75℃下搅拌2小时。浓缩混合物并且通过快速硅胶色谱法(isco；2g sepaflash二氧化硅快速柱，洗脱剂0至80％乙酸乙酯/石油醚梯度，在45ml/min下)纯化残余物，得到呈黄色固体状的15f(1.65g，3.97mmol，产率81.10％)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ7.81(s,1h),7.73(s,1h),6.72(s,1h),4.35(q,j＝7.2hz,2h),3.68(s,2h),1.54(s,9h),1.39(t,j＝7.2hz,3h)。[0637]制备5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸乙酯，15g[0638]在25℃下向15f(1.3g，3.13mmol，1当量)于etoac(10ml)中的溶液中添加hcl/etoac(4m，13.00ml，16.6当量)。在25℃下搅拌混合物2小时，然后浓缩，获得呈黄色固体状的15g(1g，粗物质)。1h nmr(dmso-d6,400mhz)δ10.13(s,1h),9.29(s,1h),7.91(s,1h),7.37(s,1h),4.24(q,j＝7.2hz,2h),3.52(s,2h),1.28(t,j＝7.2hz,3h)。[0639]制备5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸，taz-15[0640]向15g(1g，3.17mmol，1当量)于etoh(10ml)和h2o(1ml)中的溶液中添加lioh.h2o(665mg，15.8mmol，5当量)，然后在25℃下搅拌12小时。在减压下浓缩反应混合物以去除etoh。用h2o(30ml)稀释残余物，然后用hcl水溶液(1m)将混合物的ph调节至4，并且用etoac(20ml x 3)萃取。用盐水(10ml)洗涤有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到呈黄色固体状的taz-15(0.85g，2.96mmol，产率93.30％)。1h nmr(dmso-d6,400mhz)δ7.65(s,1h),7.34(br s,2h),6.97(s,1h),2.97(s,2h)。[0641]实施例16合成n-[4-[(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]丁-2-炔基]氨基甲酸叔丁酯，taz-16[0642][0643]制备5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸，16a[0644]在n2下向5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸taz-15(1g，3.48mmol，1当量)于meoh(20ml)中的溶液中添加pd/c(10％，0.2g)和氢氧化铵水溶液nh3.h2o(4.88g，34.8mmol，5.37ml，纯度25％，10当量)。将悬浮液在真空下脱气并且用h2吹扫数次，然后在25℃下于h2(50psi)下搅拌12小时。经celite(johns manville)过滤反应混合物并且在0℃下用2n hcl将滤液的ph调节至约6，然后在减压下浓缩以去除meoh。过滤固体并且在减压下干燥，得到呈浅黄色固体状的16a(0.54g，2.59mmol，产率74.46％)。1h nmr(dmso-d6,400mhz)δ7.71(s,1h),7.61(d,j＝5.2hz,1h),6.98(br s,2h),6.83(d,j＝5.2hz,1h),2.91(s,2h)。[0645]制备taz-16[0646]在0℃下向16a(0.33g，1.58mmol，1当量)于dmf(4ml)中的溶液中添加hatu(662.82mg，1.74mmol，1.1当量)和dipea(1.02g，7.92mmol，1.38ml，5当量)。10分钟后，在0℃下添加n-[4-(丙基氨基)丁-2-炔基]氨基甲酸叔丁酯(394.51mg，1.74mmol，1.1当量)，然后在25℃下搅拌所得混合物30分钟。在0℃下通过添加h2o(30ml)淬灭反应混合物，然后用etoac(15ml x 3)萃取。用盐水(5ml x 3)洗涤合并的有机层，经na2so4干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过制备型hplc(tfa条件；柱：phenomenex luna c18 100*30mm*5um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：15％-45％，10分钟)纯化残余物，得到呈浅黄色固体状的taz-16(0.185g，444.14μmol，产率28.03％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.74(d,j＝5.6hz,1h),7.29(s,1h),7.13(d,j＝5.6hz,1h),4.30(s,2h),3.84(s,2h),3.54-3.52(m,2h),3.38(s,2h),1.76-1.67(m,2h),1.43(s,9h),0.94(t,j＝7.6hz,3h)。lc/ms[m+h]417.2(计算值)；lc/ms[m+h]417.2(观测值)。[0647]实施例17合成5-氨基-n-(4-氨基丁-2-炔基)-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-17[0648][0649]在25℃下向n-[4-[(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]丁-2-炔基]氨基甲酸叔丁酯taz-16(0.45g，1.08mmol，1当量)于etoac(2ml)中的溶液中添加hcl/etoac(4m，15.00ml，55当量)，然后在此温度下搅拌0.5小时。在减压下浓缩反应混合物，得到呈浅黄色固体状的taz-17(496mg，粗物质，hcl)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.76(d,j＝5.6hz,1h),7.23(s,1h),7.15(d,j＝5.6hz,1h),4.40(s,2h),3.87(s,2h),3.57(t,j＝7.2hz,2h),3.40(s,2h),1.81-1.65(m,2h),0.95(t,j＝7.6hz,3h)。lc/ms[m+h]317.1(计算值)；lc/ms[m+h]317.1(观测值)。[0650]实施例18合成5-氨基-2-苯基-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-18[0651][0652]在25℃下于n2下向苯基硼酸(34.5mg，283μmol，1.5当量)、k2co3(52.0mg，378μmol，2.0当量)和5-氨基-2-溴-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-1(70.0mg，190μmol，1.0当量)于二噁烷(2ml)和h2o(0.2ml)中的混合物中添加pd(dppf)cl2(7.0mg，9.45μmol，0.05当量)，然后在100℃下搅拌1小时。过滤混合物并且通过制备型hplc(柱：nano-micro kromasil c18 100*30mm 8um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：25％-50％，10分钟)纯化，得到呈白色固体状的taz-18(54mg，147μmol，产率77.7％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.69(d,j＝7.2hz,2h),7.49-7.37(m,4h),7.11(s,1h),3.54-3.38(m,6h),1.68(六重峰,j＝7.4hz,4h),0.99-0.92(m,6h)。lc/ms[m+h]368.2(计算值)；lc/ms[m+h]368.1(观测值)。[0653]实施例19合成5-氨基-n,n-二丙基-2-(1-((2-(三甲基硅基)乙氧基)甲基)-1h-吡唑-4-基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-19[0654][0655]在25℃下于n2下向5-氨基-2-溴-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-1(100mg，270μmol，1.0当量)、k2co3(75.0mg，540μmol，2.0当量)和三甲基-[2-[[4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)吡唑-1-基]甲氧基]乙基]硅烷(96mg，297μmol，1.1当量)于二噁烷(3ml)和h2o(0.2ml)中的混合物中添加pd(dppf)cl2(9.88mg，13.50μmol，0.05当量)，然后在95℃下搅拌1小时。过滤混合物并且在真空中浓缩。通过制备型hplc(柱：phenomenex gemini-nx c18 75*30mm*3um；流动相：[水(10mm nh4hco3)-acn]；b％：40％-60％，10.5分钟)纯化残余物，得到呈浅黄色固体状的taz-19(80mg，164μmol，产率60.7％)。1h nmr(meod,400mhz)δ8.09(s,1h),7.80(s,1h),6.97(s,1h),6.85(s,1h),5.45(s,2h),3.61(t,j＝8.0hz,2h),3.46-3.36(m,4h),2.96(s,2h),1.72-1.57(m,4h),0.90(t,j＝8.0hz,8h),0.00(s,9h)。lc/ms[m+h]488.2(计算值)；lc/ms[m+h]488.2(观测值)。[0656]实施例20合成5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-甲酸甲酯，taz-20[0657][0658]在n2下向5-氨基-2-溴-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-1(1.2g，3.24mmol，1.0当量)和et3n(984mg，9.72mmol，1.35ml，3当量)于meoh(20ml)中的溶液中添加pd(dppf)cl2(118.56mg，162.03μmol，0.05当量)。将悬浮液在真空下脱气并且用co吹扫数次。在80℃下于co(50psi)下搅拌混合物12小时。过滤混合物并且在真空中浓缩，得到呈白色固体状的taz-20(1.1g，3.15mmol，产率97.14％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.72(s,1h),7.14(s,1h),3.92(s,3h),3.58-3.37(m,6h),1.69-1.62(m,4h),0.99-0.90(m,6h)。lc/ms[m+h]350.2(计算值)；lc/ms[m+h]350.2(观测值)。[0659]实施例21合成5-氨基-n,n-二丙基-2-(1h-吡唑-4-基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-21[0660][0661]在25℃下向5-氨基-n,n-二丙基-2-[1-(2-三甲基硅基乙氧基甲基)吡唑-4-基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-19(66.0mg，135μmol，1.0当量)于meoh(4ml)中的混合物中添加hcl/meoh(4m，338μl，10.0当量)，然后在此温度下搅拌12小时。在真空中浓缩混合物，并且通过制备型hplc(柱：phenomenex gemini-nx c18 75*30mm*3um；流动相：[水(10mm nh4hco3)-acn]；b％：20％-50％，10.5分钟)纯化残余物，得到呈白色固体状的taz-21(22mg，61.5μmol，产率45.5％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.87(s,2h),6.95(s,1h),6.85(s,1h),3.44-3.35(m,4h),2.96(s,2h),1.66-1.60(m,4h),0.99-0.89(m,6h)。lc/ms[m+h]358.2(计算值)；lc/ms[m+h]358.2(观测值)。[0662]实施例22合成5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-甲酸，taz-22[0663][0664]在25℃下向5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-甲酸甲酯taz-20(1.1g，3.15mmol，1.0当量)于meoh(20ml)中的混合物中添加含lioh·h2o(396mg，9.44mmol，3.0当量)的h2o(5ml)，然后在此温度下搅拌2小时。用hcl水溶液(4m)淬灭混合物直至ph达到5，灰白色固体从混合物中沉淀出，然后过滤，得到呈灰白色固体状的taz-22(0.85g，2.53mmol，产率80.5％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.41(s,1h),6.92(s,1h),3.37-3.25(m,4h),3.05(s,2h),1.61-1.45(m,4h),0.86-0.75(m,6h)。lc/ms[m+h]336.1(计算值)；lc/ms[m+h]336.1(观测值)。[0665]实施例23合成5-氨基-n2-苯基-n7,n7-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2,7-二甲酰胺，taz-23[0666][0667]在25℃下向5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-甲酸taz-22(50mg，150μmol，1.0当量)、hatu(62mg，164μmol，1.1当量)和diea(58mg，447μmol，3.0当量)于dmf(1ml)中的混合物中添加苯胺(28mg，298μmol，2.0当量)，然后在25℃下搅拌30分钟。过滤混合物并且通过制备型hplc(柱：nano-micro kromasil c18 100*30mm 8um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：10％-40％，10分钟)纯化，得到呈白色固体状的taz-23(34mg，82.8μmol，产率55.6％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.87(s,1h),7.67(d,j＝8.0hz,2h),7.38(t,j＝8.0hz,2h),7.18(d,j＝8.0hz,1h),7.15(s,1h),3.49-3.42(m,6h),1.70-1.65(m,4h),0.98-0.90(m,6h)。lc/ms[m+h]411.2(计算值)；lc/ms[m+h]411.1(观测值)。[0668]实施例24合成5-氨基-n2-乙基-n7,n7-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2,7-二甲酰胺，taz-24[0669][0670]在25℃下向5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-甲酸taz-1(50mg，149μmol，1.0当量)、hatu(62.4mg，164μmol，1.1当量)和diea(58mg，447μmol，3.0当量)于dmf(1ml)中的混合物中添加乙胺(20mg，298μmol，2.0当量)，然后在此温度下搅拌0.5小时。过滤混合物并且通过制备型hplc(柱：nano-micro kromasil c18 100*30mm 8um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：5％-35％，10分钟)纯化。得到呈白色固体状的taz-24(28mg，77.2μmol，产率51.8％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.62(s,1h),7.13(s,2h),3.54-3.35(m,8h),1.73-1.61(m,4h),1.23(t,j＝7.2hz,3h),0.97-0.90(m,6h)。lc/ms[m+h]363.2(计算值)；lc/ms[m+h]363.2(观测值)。[0671]实施例25合成3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[5-[5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]戊基-甲基-氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，taz-25[0672][0673]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[5-[5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]戊基-甲基-氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸叔丁酯，25a[0674]在25℃下向5-氨基-2-(5-氨基戊基)-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-14(0.2g，484μmol，1.0当量，hcl)于meoh(80ml)中的溶液中添加et3n(73.5mg，726μmol，101μl，1.5当量)和3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-氧代乙氧基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸叔丁酯(368.1mg，629μmol，1.3当量)。在25℃下搅拌混合物10分钟，然后添加nabh3cn(60.8mg，968μmol，2.0当量)，并且在相同温度下将其搅拌16小时。添加甲醛(117.9mg，1.45mmol，108μl，3.0当量)，继而添加nabh3cn(60.9mg，968μmol，2.0当量)，然后在25℃下搅拌2小时。浓缩混合物并且通过制备型hplc(柱：xtimate c18 100*30mm*3um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：15％-50％，10分钟)纯化残余物，得到呈无色油状的25a(0.4g，416.98μmol，产率86.11％)。[0675]制备taz-25[0676]在25℃下向25a(0.39g，406μmol，1.0当量)于h2o(20ml)中的溶液中添加tfa(927mg，8.13mmol，602μl，20当量)。在85℃下搅拌混合物1小时，然后在50℃下于减压下浓缩。通过制备型hplc(柱：nano-micro kromasil c18 100*30mm 8um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：10％-30％，15分钟)纯化残余物，得到呈浅黄色油状的taz-25(0.18g，199.30μmol，产率49.02％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.02(s,1h),6.90(s,1h),3.84-3.82(m,2h),3.75-3.59(m,41h),3.45-3.42(m,4h),3.35(s,2h),2.96-2.87(m,5h),2.54(t,j＝6.4hz,2h),1.84-1.76(m,4h),1.71-1.60(m,4h),1.54-1.44(m,2h),0.94-0.89(m,6h)。lc/ms[m+h]903.5(计算值)；lc/ms[m+h]903.5(观测值)。[0677]实施例26合成5-氨基-2-苯甲基-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-26[0678][0679]在25℃下于n2下向5-氨基-2-溴-n,n-二丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-1(0.11g，297μmol，1.0当量)、k2co3(82mg，594μmol，2当量)和2-苯甲基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷(324mg，1.49mmol，5.0当量)于dmf(3ml)和h2o(0.2ml)中的混合物中添加pd(dppf)cl2(11mg，14.8μmol，0.05当量)。在120℃下搅拌混合物2小时，然后过滤并浓缩。通过制备型hplc(柱：xtimate c18 100*30mm*3um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：25％-45％，10分钟)纯化残余物，得到呈浅黄色固体状的taz-26(16mg，41.9μmol，产率14.1％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.40-7.21(m,5h),6.98(s,1h),6.88(s,1h),4.17(s,2h),3.41(t,j＝7.6hz,4h),3.34(s,2h),1.66-1.62(m,4h),0.96-0.86(m,6h)。lc/ms[m+h]382.2(计算值)；lc/ms[m+h]382.1(观测值)。[0680]实施例27合成5-氨基-n7,n7-二丙基-n2-嘧啶-5-基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2,7-二甲酰胺，taz-27[0681][0682]在25℃下向5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-甲酸taz-22(50mg，149μmol，1当量)、嘧啶-5-胺(18.4mg，194μmol，1.3当量)和1-甲基咪唑(42.8mg，522μmol，3.5当量)于ch3cn(2ml)中的混合物中添加六氟磷酸氯-n,n,n',n'-四甲基甲脒鎓tcfh(50.19mg，179μmol，1.2当量)，然后在此温度下搅拌16小时。在0℃下通过添加h2o(10ml)淬灭反应混合物，然后用etoac(10ml x3)萃取。用盐水(5ml)洗涤合并的有机层，经na2so4干燥，过滤并且在减压下浓缩。通过制备型hplc(tfa条件；柱：phenomenex luna c18 100*30mm*5um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：10％-40％，10分钟)纯化残余物，得到呈灰白色固体状的taz-27(13mg，31.5μmol，产率21.14％)。1h nmr(meod,400mhz)δ9.17(s,2h),8.94(s,1h),7.90(s,1h),7.18(s,1h),3.54-3.40(m,6h),1.76-1.59(m,4h),0.99-0.90(m,6h)。lc/ms[m+h]413.2(计算值)；lc/ms[m+h]413.1(观测值)。[0683]实施例28合成2-氨基-n,n-二丙基-3h-苯并[4,5]噻吩并[3,2-b]氮呯-4-甲酰胺，taz-28[0684][0685]制备3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]苯并噻吩-2-甲酸甲酯，28b[0686]向3-氨基苯并噻吩-2-甲酸甲酯28a(3g，14.5mmol，1.0当量)于吡啶pyr(30ml)中的混合物中添加dmap(177mg，1.45mmol，0.1当量)。然后在0℃下将boc2o(6.32g，29.0mmol，6.65ml，2.0当量)于吡啶(10ml)中的溶液缓慢添加至混合物中，然后在25℃下搅拌16小时。在真空中浓缩混合物。将残余物溶解于etoac(20ml)中并且相继用饱和nahco3水溶液和盐水洗涤。经na2so4干燥混合物，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/0，5/1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的3-[双(叔丁氧基羰基)氨基]苯并噻吩-2-甲酸甲酯(5.6g，13.7mmol，产率94.94％)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ7.83(d,j＝7.6hz,1h),7.68(d,j＝7.6hz,1h),7.52-7.42(m,2h),3.94(s,3h),1.35(s,18h)。[0687]制备n-[2-(羟甲基)苯并噻吩-3-基]氨基甲酸叔丁酯，28c[0688]在0℃下于n2下向28b(3.8g，9.33mmol，1.0当量)于dcm(40ml)中的混合物中缓慢添加dibal-h(1m，37.3ml，4.0当量)，然后在相同温度下搅拌2小时。用水(2ml)淬灭反应物并且经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/0，3/1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的28c(2.3g，8.23mmol，产率88.29％)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ7.83-7.78(m,1h),7.63(dd,j＝2.0,6.8hz,1h),7.43-7.35(m,2h),4.75(d,j＝6.4hz,2h),1.55(s,9h)。[0689]制备n-(2-甲酰基苯并噻吩-3-基)氨基甲酸叔丁酯，28d[0690]在25℃下向28c(1.8g，6.44mmol，1.0当量)于dcm(30ml)中的溶液中一次性添加mno2(4.48g，51.6mmol，8.0当量)，然后搅拌12小时。过滤反应物并浓缩。通过柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至5/1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的28d(1.2g，4.33mmol，产率67.15％)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ10.07(s,1h),8.22(s,1h),8.10(d,j＝8.0hz,1h),7.83(d,j＝8.0hz,1h),7.55-7.50(m,1h),7.47-7.43(m,1h),1.57(s,9h)。[0691]制备(e)-3-[3-(叔丁氧基羰基氨基)苯并噻吩-2-基]-2-(氰基甲基)丙-2-烯酸乙酯，28e[0692]在25℃下向28d(0.6g，2.16mmol，1.0当量)和3-氰基-2-(三苯基-亚膦基)丙酸乙酯(1.09g，2.81mmol，1.3当量)于甲苯(15ml)中的溶液中并且在80℃下将其搅拌12小时。然后浓缩混合物。用水稀释残余物并且用etoac(30ml x 3)萃取。用盐水洗涤有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝1/0，5/1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的28e(0.6g，1.55mmol，产率71.88％)。1h nmr(dmso,400mhz)δ8.08(d,j＝7.2hz,1h),8.00(s,1h),7.78(d,j＝7.2hz,1h),7.56-7.47(m,2h),4.28(q,j＝7.2hz,2h),3.90(s,2h),1.47(s,9h),1.29(t,j＝7.2hz,3h)。[0693]制备2-氨基-3h-苯并噻吩并[3,2-b]氮呯-4-甲酸乙酯，28f[0694]在25℃下向28e(0.2g，518μmol，1.0当量)于etoac(2ml)中的溶液中一次性添加hcl/etoac(10ml)并且在50℃下将其搅拌12小时。浓缩混合物，得到呈绿色固体状的28f(0.25g，粗物质)。[0695]制备2-氨基-3h-苯并噻吩并[3,2-b]氮呯-4-甲酸，28g[0696]在25℃下向28f(0.25g，774μmol，1.0当量)于meoh(6ml)中的混合物中添加lioh·h2o(162mg，3.87mmol，5.0当量)于h2o(1ml)中的溶液。在50℃下搅拌混合物12小时。用hcl水溶液(1m)淬灭混合物直至ph达到5，然后浓缩以去除meoh。所需固体从混合物中沉淀出，然后过滤，获得呈黄色固体状的28g(0.15g，粗物质)。[0697]制备2-氨基-n,n-二丙基-3h-苯并[4,5]噻吩并[3,2-b]氮呯-4-甲酰胺，taz-28[0698]向28gm(0.05g，194μmol，1.0当量)于dmf(2ml)中的混合物中添加hatu(88.3mg，232μmol，1.2当量)和diea(125mg，968μmol，169μl，5.0当量)并且在25℃下将其搅拌2分钟。将n-丙基丙-1-胺(25.5mg，252μmol，34.7μl，1.3当量)添加至混合物中，然后搅拌1小时。过滤反应混合物并且通过制备型hplc(柱：nano-micro kromasil c18 100*30mm 8um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：15％-45％，10分钟)纯化，得到呈白色固体状的taz-28(19mg，55.64μmol，产率28.74％)。1h nmr(meod,400mhz)δ8.00-7.92(m,2h),7.58-7.53(m,2h),7.18(s,1h),3.48(s,6h),1.74-1.65(m,4h),0.94(s,6h)。lc/ms[m+h]342.2(计算值)；lc/ms[m+h]342.2(观测值)。[0699]实施例29合成(4-((5-氨基-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺基)甲基)苯甲基)氨基甲酸叔丁酯，taz-29[0700][0701]制备(4-((丙基氨基)甲基)苯甲基)氨基甲酸叔丁酯，29b[0702]将(4-(氨基甲基)苯甲基)氨基甲酸叔丁酯29a(0.98g，4.15mmol，1当量)溶解于10ml dmf中。添加碳酸钾(2.9g，20.7mmol，5当量)，继而添加丙基溴(0.38ml，4.15mmol，1当量)。搅拌反应混合物2小时，然后过滤，浓缩，并且通过反相色谱法纯化，得到29b(0.36g，1.29mmol，31％)。lc/ms[m+h]279.21(计算值)；lc/ms[m+h]279.24(观测值)。[0703]制备(4-((5-氨基-2-溴-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺基)甲基)苯甲基)氨基甲酸叔丁酯，29c[0704]将5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸taz-15(0.330g，1.15mmol，1当量)和29b(0.32g，1.15mmol，1当量)悬浮于5ml dmf中。添加dipea(1.2ml，6.9mmol，6当量)，继而添加六氟磷酸7-氮杂-苯并三唑-1-基氧基-三吡咯烷基-鏻pyaop(0.90g，1.72mmol，1.5当量)。通过lcms监测反应。起始物质消耗后，将反应混合物添加至100ml水中，过滤，并且通过快速色谱法(含1％tea的meoh/dcm)纯化沉淀物，得到29c(0.35g，0.64mmol，56％)。lc/ms[m+h]547.14/549.14(计算值)；lc/ms[m+h]547.40/549.35(观测值)。[0705]制备taz-29[0706]将中间体29c(0.35g，0.64mmol，1当量)溶解于5ml thf中。添加三乙胺(0.89ml，6.4mmol，10当量)和[1,1'-双(二苯膦基)二茂铁]二氯化钯(ii)pd(dppf)cl2(0.023g，0.032mmol，0.05当量)，继而添加硼氢化钠(0.12g，3.2mmol，5当量)。2小时后，添加另一份硼氢化钠(0.073g，1.9mmol，3当量)并且搅拌反应物30分钟。浓缩反应混合物并且通过hplc纯化，得到taz-29(0.129g，0.28mmol，43％)。lc/ms[m+h]469.23(计算值)；lc/ms[m+h]469.42(观测值)。[0707]实施例30合成5-氨基-n-(4-(氨基甲基)苯甲基)-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-30[0708][0709]将(4-((5-氨基-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺基)甲基)苯甲基)氨基甲酸叔丁酯taz-29(0.129g，0.28mmol，1当量)溶解于100μl tfa中。15分钟后，浓缩产物并且通过hplc纯化，得到taz-30(0.063g，0.17mmol，61％)。lc/ms[m+h]547.14/549.14(计算值)；lc/ms[m+h]547.40/549.35(观测值)。[0710]实施例52合成5-氨基-n-[[4-(氨基甲基)-2-(三氟甲基)苯基]甲基]-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-52[0711][0712]制备n-[[4-氰基-3-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯，52b[0713]在n2下向4-溴-2-(三氟甲基)苯甲腈52a(0.5g，2.00mmol，1.0当量)、(叔丁氧基羰基氨基)甲基-三氟-硼氢化钾，也称为(((叔丁氧基羰基)氨基)甲基)三氟硼酸钾，cas注册号1314538-55-0(711mg，3.00mmol，1.5当量)和na2co3(678mg，6.40mmol，3.2当量)于etoh(20ml)和h2o(4ml)中的混合物中添加pd(pph3)2cl2(154mg，219umol，0.11当量)。将悬浮液在真空下脱气并且用n2吹扫数次，然后在80℃下搅拌12小时。在真空中浓缩反应物，得到残余物。将残余物倾倒至冰水(5ml)中并且搅拌5分钟。用乙酸乙酯(5ml x 3)萃取水相。用盐水(20ml x 2)洗涤合并的有机相，经无水na2so4干燥，过滤并且在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1，1/1)纯化残余物，得到呈黄色油状的52b(0.5g，1.67mmol，产率83.2％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.95(d,j＝6.8hz,1h),7.81(s,1h),7.71(d,j＝6.8hz,1h),4.36(s,2h),1.45(s,9h)。[0714]制备n-[[4-(氨基甲基)-3-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯，52c[0715]在25℃下于n2下向52b(0.5g，1.67mmol，1.0当量)于meoh(10ml)中的溶液中添加nh3·h2o(17mg，166umol，纯度33％，0.1当量)和雷尼镍(raney-ni)(1.43g，1.67mmol，纯度10％，1.0当量)。将悬浮液在真空下脱气并且用h2吹扫数次，然后在25℃下于h2(50psi)下搅拌10小时。然后将其过滤并且在真空中浓缩滤液。通过硅胶色谱法(石油醚/乙酸乙酯＝10/1，1/1)纯化残余物，得到呈黄色油状的52c(200mg，657.23umol，产率39.47％)。1h nmr(meod,400mhz)δ6.99-6.92(m,2h),6.89-6.86(m,1h),3.62(s,2h),2.66(s,2h),0.80(s,9h)[0716]制备n-[[4-(丙基氨基甲基)-3-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯，52d[0717]向52c(190mg，624umol，1当量)于meoh(2ml)和thf(2ml)中的混合物中添加丙醛(47mg，812umol，1.3当量)，30分钟后，在25℃下添加nabh3cn(117mg，1.87mmol，3.0当量)和acoh(3mg，62umol，3ul，0.1当量)，然后搅拌2小时。在真空中浓缩混合物。通过制备型hplc(柱：phenomenex gemini-nx c18 75*30mm*3um；流动相：[水(10mm nh4hco3)-acn]；b％：30％-60％，12分钟)纯化残余物，得到呈白色固体状的52d(100mg，277umol，产率44.39％，纯度96％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.65-7.57(m,2h),7.53-7.50(m,1h),4.27(s,2h),3.91(s,2h),2.58(t,j＝7.6hz,2h),1.63-1.59(m,2h),1.45(s,9h),0.93(t,j＝7.2hz,3h)[0718]制备n-[[4-[[(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]甲基]-3-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯，52e[0719]在25℃下向5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸16a(24.0mg，115umol，1.0当量)于dmf(1ml)中的溶液中一次性添加diea(74mg，577umol，100ul，5当量)和pyaop(66mg，127umol，1.1当量)，并且将其搅拌30分钟，然后添加52d(60mg，173.22umol，1.5当量)，然后再搅拌2小时。此后，浓缩反应物并且通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：25％-50％，10分钟)纯化，得到呈白色固体状的52e(15mg，27.95umol，产率24.21％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.75-7.68(m,1h),7.65(s,1h),7.57(d,j＝7.6hz,1h),7.44(d,j＝7.6hz,1h),7.30-7.10(m,2h),4.92(s,2h),4.29(s,2h),3.48(t,j＝7.2hz,2h),3.32(s,2h),1.66-1.64(m,2h),1.45(s,9h),0.94-0.86(m,3h)。lc/ms[m+h]537.2(计算值)；lc/ms[m+h]537.1(观测值)。[0720]制备taz-52[0721]在25℃下向52e(10mg，18.6umol，1.0当量)于etoac(2ml)中的溶液中一次性添加hcl/etoac(4m，140ul，30当量)。在25℃下搅拌混合物3小时。继而浓缩混合物，得到呈黄色固体状的taz-52(8mg，18.3umol，产率98.35％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.80(s,1h),7.70-7.63(m,2h),7.51(d,j＝7.6hz,1h),7.20-7.17(m,1h),7.03(d,j＝4.0hz,1h),4.85(s,2h),4.13(s,2h),3.45-3.37(m,2h),3.31(s,2h),1.62-1.50(m,2h),0.87-0.68(m,3h)。lc/ms[m+h]437.2(计算值)；lc/ms[m+h]437.1(观测值)。[0722]实施例54合成5-氨基-n-[[4-(氨基甲基)-2-(三氟甲基)苯基]甲基]-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-54[0723][0724]制备4-氰基-n-丙基-2-(三氟甲基)苯甲酰胺，54b[0725]在n2下向4-溴-3-(三氟甲基)苯甲腈54a(4.00g，16.0mmol，1.0当量)于dmf(20ml)中的溶液中添加丙-1-胺(2.84g，48.0mmol，3.95ml，3.0当量)、et3n(4.86g，48.0mmol，6.68ml，3.0当量)和pd(dppf)cl2(585mg，800umol，0.05当量)。将悬浮液在真空下脱气并且用co吹扫数次，并且在80℃下于co(50psi)下搅拌混合物15小时。将水(50ml)添加至混合物中并且用乙酸乙酯(30ml*3)萃取水相，用盐水(50ml)洗涤合并的有机相，经无水na2so4干燥，过滤并且在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(柱高度：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝10/1，1/1)纯化残余物，得到呈白色固体状的54b(4.00g，15.6mmol，产率97.5％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.13(s,1h),8.01(d,j＝8.0hz,1h),7.85(d,j＝8.0hz,1h),6.49(br s,1h),3.37(q,j＝7.2hz,2h),1.66-1.54(m,2h),0.92(t,j＝7.2hz,3h)[0726]制备n-[[4-(丙基氨甲酰基)-3-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯，54c[0727]在25℃下于n2下向54b(2.30g，8.98mmol，1.0当量)于meoh(30ml)中的溶液中添加雷尼镍(0.5g，1.0当量)和boc2o(9.80g，44.8mmol，10.3ml，5.0当量)。将悬浮液在真空下脱气并且用h2吹扫数次。在25℃下于h2(50psi)下搅拌混合物5小时。过滤反应混合物并且在真空中浓缩滤液。通过硅胶色谱法(柱高度：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝10/1，1/1)纯化残余物，得到呈白色固体状的54c(2.50g，6.94mmol，产率77.2％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ8.04(s,1h),7.89(d,j＝8.0hz,1h),7.63(d,j＝8.0hz,1h),6.26(s,1h),5.02(s,1h),4.53(d,j＝6.0hz,2h),3.44(q,j＝6.8hz,2h),1.70-1.62(m,2h),1.46(s,9h),1.00(t,j＝7.6hz,3h)。[0728]制备n-[[4-(丙基氨基甲基)-3-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯，54d[0729]在20℃下于n2下向54c(1.03g，2.86mmol，1.0当量)和rhh(co)(pph3)3(263mg，286umol，0.1当量)于thf(30ml)中的混合物中一次性添加二苯基硅烷(3.16g，17.1mmol，3.16ml，6.0当量)，然后在20℃下搅拌8小时。在真空中浓缩反应混合物，通过硅胶色谱法(柱高度：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝10/1，0/1至乙酸乙酯/甲醇＝5/1)纯化残余物，得到呈黄色油状的54d(0.4g，1.15mmol，产率40.40％)。1h nmr(400mhz,meod)δ7.89(s,1h),7.77(d,j＝8.0hz,1h),7.66(d,j＝8.0hz,1h),4.48(s,2h),4.29(s,2h),3.08-3.01(m,2h),1.82-1.71(m,2h),1.48(s,9h),1.05(t,j＝7.6hz,3h)[0730]制备n-[[4-[[(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]甲基]-3-(三氟甲基)苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯，54e[0731]在20℃下于n2下向5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸16a(12.0mg，57.7umol，1.0当量)于dmf(1ml)中的溶液中添加hatu(19.7mg，52.0umol，0.9当量)和et3n(17.53mg，173umol，24.1ul，3.0当量)，在20℃下搅拌混合物10分钟，然后添加54d(20mg，57.7umol，1.0当量)，然后在20℃下搅拌2小时。过滤反应混合物，通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：30％-55％，10分钟)纯化滤液，得到呈白色固体状的54e(5.00mg，7.47umol，产率12.9％，纯度97.1％，tfa)。1h nmr(400mhz,meod)δ7.74(d,j＝5.6hz,1h),7.60-7.52(m,3h),7.22(s,1h),7.12(br d,j＝5.6hz,1h),4.82(br s,2h),4.45(s,2h),3.51(br t,j＝7.2hz,2h),3.42-3.35(m,2h),1.75-1.64(m,2h),1.49(s,9h),0.96-0.90(m,3h)。lc/ms[m+h]537.2(计算值)；lc/ms[m+h]537.1(观测值)。[0732]制备taz-54[0733]在20℃下向54e(50.0mg，93.2umol，1.0当量)于etoac(1ml)中的溶液中添加hcl/etoac(4m，2.33ml，100当量)，然后在20℃下搅拌2小时。在真空中浓缩反应混合物并且冷冻干燥，得到呈黄色固体状的taz-54(30.0mg，62.8umol，产率67.4％，纯度99.0％，hcl)。1h nmr(400mhz,meod)δ7.67(br s,1h),7.65-7.61(m,3h),7.10(s,1h),7.04(d,j＝5.2hz,1h),4.75(s,2h),4.22(s,2h),3.45-3.38(m,2h),3.29(br s,2h),1.63-1.52(m,2h),0.79(br t,j＝7.2hz,3h)。lc/ms[m+h]437.2(计算值)；lc/ms[m+h]437.1(观测值)。[0734]实施例65合成5-氨基-2-[5-(二甲基氨基)戊基]-n-[[4-(甲基氨基甲基)苯基]甲基]-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-65[0735][0736]制备n-[[4-[[(5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]甲基]苯基]甲基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯，65b[0737]向5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸65a(1.0g，3.48mmol，1.0当量)于dmf(20ml)中的溶液中添加hatu(1.46g，3.83mmol，1.1当量)、diea(1.35g，10.45mmol，1.82ml，3.0当量)和n-甲基-n-[[4-(丙基氨基甲基)苯基]甲基]氨基甲酸叔丁酯(1.07g，3.66mmol，1.05当量)，然后在25℃下搅拌1小时。通过添加h2o(100ml)淬灭反应混合物，然后用etoac(100ml x 3)萃取。用盐水(20ml x 2)洗涤合并的有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩。最后，通过柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝200/1至0/1)纯化残余物，得到呈黄色油状的65b(1.80g，3.21mmol，产率92.04％)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ7.25-7.15(m,4h),6.92(s,1h),6.77(s,1h),4.72(s,2h),4.42(s,2h),3.40(t,j＝7.2hz,2h),2.86(s,2h),2.81(s,3h),1.69-1.58(m,2h),1.49(s,9h),0.89(t,j＝7.2hz,3h)。[0738]制备n-[[4-[[[5-氨基-2-(4-氰基丁-1-炔基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基]-丙基-氨基]甲基]苯基]甲基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯，65c[0739]在15℃下向65b(2.25g，4.01mmol，1.0当量)和戊-4-炔腈(951mg，12.0mmol，3.0当量)于tea(13.2ml)和dmf(44ml)中的混合物中添加pd(pph3)2cl2(140.6mg，200.34umol，0.050当量)、cui(152.6mg，801.38umol，0.20当量)和pph3(210mg，801umol，0.20当量)，然后在140℃下于n2气氛下搅拌3小时。在25℃下通过添加h2o(220ml)淬灭反应混合物，然后用dcm/异丙醇＝3/1(200ml x 3)萃取。用h2o(40ml x 4)洗涤合并的有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝200/1至0/1至乙酸乙酯/meoh＝50/1至5/1)纯化残余物，得到呈黄色油状的65c(1.62g，2.89mmol，产率72.23％)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ7.21-7.20(m,4h),7.00(s,1h),6.81(s,1h),4.73(s,2h),4.42(s,2h),3.40(t,j＝6.4hz,2h),2.83-2.81(m,7h),2.68-2.65(m,2h),1.64-1.62(m,2h),1.49(s,9h),0.89(t,j＝7.2hz,3h)[0740]制备n-[[4-[[[5-氨基-2-(4-氰基丁基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基]-丙基-氨基]甲基]苯基]甲基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯，65d[0741]在n2气氛下向65c(1.47g，2.63mmol，1.0当量)于meoh(30ml)中的溶液中添加pd(oh)2/c(369mg，262umol，纯度10％，0.10当量)。将悬浮液脱气并且用h2吹扫3次。在25℃下于h2(50psi)下搅拌混合物12小时。过滤反应混合物并且浓缩滤液，得到呈黄色油状的65d(1.15g，2.04mmol，产率77.67％)。1h nmr(cdcl3,400mhz)δ7.21-7.19(m,4h),6.86(s,1h),6.67(s,1h),4.74(s,2h),4.42(s,2h),3.40(t,j＝6.4hz,2h),2.86-2.82(m,5h),2.37(t,j＝6.8hz,2h),1.88-1.83(m,2h),1.78-1.74(m,2h),1.64-1.61(m,2h),1.49(m,9h),0.89(t,j＝7.6hz,3h)。[0742]制备n-[[4-[[[5-氨基-2-(5-氨基戊基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基]-丙基-氨基]甲基]苯基]甲基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯，65e[0743]在n2下向65d(1.15g，2.04mmol，1.0当量)于meoh(23ml)中的溶液中添加nh3·h2o(2.86g，20.4mmol，3.14ml，纯度25％，10当量)和ni(100mg)。将悬浮液在真空下脱气并且用h2吹扫数次。在25℃下于h2(50psi)下搅拌混合物3小时。过滤反应混合物并且浓缩滤液，得到呈黄色油状的65e(1.03g，1.81mmol，产率88.93％)。[0744]制备n-[[4-[[[5-氨基-2-[5-(二甲基氨基)戊基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基]-丙基-氨基]甲基]苯基]甲基]-n-甲基-氨基甲酸叔丁酯，65f[0745]向65e(300mg，528umol，1.0当量)于meoh(8ml)中的溶液中添加acoh(3.1mg，52.8umol，0.10当量)、hcho(171.5mg，2.11mmol，157.3ul，纯度37％，4.0当量)和nabh3cn(99.6mg，1.59mmol，3.0当量)，然后在25℃下搅拌1小时。通过添加h2o(10ml)淬灭混合物并浓缩以去除meoh。用dcm/异丙醇＝3/1(10ml x 3)萃取水相。经na2so4干燥合并的有机层，过滤并浓缩，得到呈黄色油状的65f(314mg，粗物质)。[0746]制备taz-65[0747]向65f(50mg，83.9umol，1.0当量)于h2o(0.5ml)中的溶液中添加hcl(12m，140ul，20.0当量)，然后在80℃下搅拌1小时。在真空中浓缩混合物。通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：5％-35％，10分钟)纯化残余物，得到呈无色油状的taz-65(10mg，13.74umol，产率16.37％，纯度99.44％，2tfa)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.50-7.40(m,4h),7.09(s,1h),6.89(s,1h),4.78(s,2h),4.19(s,2h),3.45-3.35(m,4h),3.32(s,2h),3.14-3.10(m,2h),2.88(s,6h),2.72铵，133b[0754]将5-氨基-2-(5-(双(叔丁氧基羰基)氨基)戊基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸乙酯133a(0.188g，0.36mmol，1当量)溶解于最少的tfa中。完全去保护后，浓缩溶液并且产物从乙醚中沉淀出，得到呈黄色粉末状的133b(0.082g，0.188mmol，52％)。lc/ms[m+h]322.16(计算值)；lc/ms[m+h]322.25(观测值)。[0755]制备5-氨基-2-(5-(((苯甲氧基)羰基)氨基)戊基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸，133c[0756]将中间体133b(0.296g，0.68mmol，1当量)悬浮于2ml dmf中。添加可力丁(collidine)(0.27ml，2mmol，3当量)，继而添加氯甲酸苯甲酯cbz-cl，cas注册号501-53-1(0.1ml，0.68mmol，1当量)。通过lcms监测反应。胺起始物质消耗后，浓缩反应物并且再溶解于7ml 3:1:3 thf:meoh:水中。添加氢氧化锂(0.16g，6.8mmol，10当量)并且在室温下搅拌反应物。完成后，浓缩反应混合物并且通过反相hplc纯化，得到133c(0.246g，0.58mmol，85％)。lc/ms[m+h]428.16(计算值)；lc/ms[m+h]428.32(观测值)。[0757]制备(5-(5-氨基-7-((3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基)(丙基)氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)戊基)氨基甲酸苯甲酯，133d[0758]将中间体133c(0.29g，0.68mol，1当量)和(3-(丙基氨基)丙基)氨基甲酸叔丁酯(0.225g，1.0mmol，1.53当量)溶解于1ml dmf中。添加二异丙基乙胺dipea(0.59ml，1.0mmol，1.53当量)，继而添加pyaop(0.541g，1.0mmol，1.53当量)。在室温下搅拌反应物，然后浓缩并且通过反相快速色谱法纯化，得到133d(0.201g，0.32mmol，47％)。lc/ms[m+h]626.34(计算值)；lc/ms[m+h]626.51(观测值)。[0759]制备taz-133[0760]将中间体133d(0.2g，0.32mmol，1当量)溶解于2ml meoh中。添加三乙胺(0.1ml)和甲酸(0.049ml，1.29mmol，4当量)，继而添加10％w/w pd/c(0.04g)。将搅拌的反应物加热至60℃。一小时后，添加20％w/w pd(oh)2(0.02g)。完成后，过滤反应物，浓缩，并且通过hplc纯化，得到taz-133(0.139g，0.28mmol，88％)。lc/ms[m+h]492.30(计算值)；lc/ms[m+h]492.45(观测值)。[0761]实施例176合成5-氨基-n-乙氧基-2-[2-(4-哌啶基)乙基]-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-176[0762][0763]制备5-氨基-2-[2-(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)乙炔基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸乙酯，176a[0764]在25℃下于n2下向5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸乙酯15g(2g，6.35mmol，1.0当量)于ch3cn(60ml)中的混合物中一次性添加4-乙炔基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.73g，8.25mmol，1.3当量)、cs2co3(6.20g，19.0mmol，3.0当量)、cui(242mg，1.27mmol，0.2当量)和pd(pph3)2cl2(445mg，635umol，0.1当量)并且在100℃下将其搅拌2小时。浓缩混合物，得到残余物。通过硅胶色谱法(柱高度：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝1/0，10/1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的176a(3.5g，粗物质)。[0765]制备5-氨基-2-[2-(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)乙炔基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸，176b[0766]在25℃下向176a(3.5g，7.89mmol，1.0当量)于etoh(50ml)和h2o(8ml)中的混合物中一次性添加lioh.h2o(1.32g，31.6mmol，4.0当量)并且在30℃下将其搅拌2小时。浓缩混合物并且用水(30ml)稀释残余物。然后过滤混合物。在25℃下用ch3cn湿磨滤饼持续0.5小时，然后过滤，得到呈黄色固体状的176b(2.3g，5.54mmol，产率70.2％)。[0767]制备4-[2-[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]乙炔基]哌啶-1-甲酸甲酯，176c[0768]在25℃下向176b(1g，2.41mmol，1.0当量)于dcm(10ml)和dma(10ml)中的混合物中一次性添加n-乙氧基丙-1-胺(353mg，2.53mmol，1.05当量，hcl)和edci(1.85g，9.63mmol，4.0当量)并且在25℃下将其搅拌1小时。浓缩混合物以去除dcm，用水(50ml)稀释残余物并且用饱和nahco3将混合物的ph调节至约8，然后用etoac(30ml x 3)萃取。用盐水洗涤有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(柱高度：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，乙酸乙酯/meoh＝1/0，10/1)纯化残余物，得到呈浅黄色固体状的176c(0.63g，1.26mmol，产率52.3％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.27(s,1h),6.88(s,1h),3.89(q,j＝氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸乙酯15g(2.1g，6.66mmol，1当量)、pd2(dba)3(610mg，666umol，0.1当量)、xphos(953mg，2.00mmol，0.3当量)和na2co3(2.12g，20.0mmol，3当量)于二噁烷(50ml)和h2o(5ml)中的搅拌混合物中。在100℃下于n2下搅拌所得混合物12小时，然后过滤，浓缩滤液以去除thf和二噁烷，将etoac(100ml)和水(100ml)倾倒至混合物中。用盐水洗涤有机层，经无水na2so4干燥，浓缩，得到残余物。通过柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝1:0至0:1，然后etoac:meoh＝10:1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的183a(2g，2.47mmol，产率37.0％)。[0777]制备5-氨基-2-[(1-叔丁氧基羰基氮杂环丁烷-3-基)甲基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸，183b[0778]向183a(2g，4.93mmol，1当量)于thf(10ml)和h2o(10ml)中的混合物中添加lioh.h2o(621mg，14.8mmol，3当量)，然后在15℃下搅拌3小时。浓缩混合物以去除thf，然后用hcl(4m)将水相的ph调节至约7。所需固体从混合物中沉淀出并过滤，得到呈黄色固体状的183b(1.5g，3.97mmol，产率80.6％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.65(s,1h),6.94(s,2h),6.66(s,1h),4.05-3.93(m,2h),3.70-3.55(m,2h),3.07(d,j＝7.6hz,2h),2.88(s,2h),2.80-2.65(m,1h),1.43(s,9h)。[0779]制备3-[[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯，183c[0780]向183b(0.2g，530umol，1当量)和n-乙氧基丙-1-胺(96.2mg，689umol，1.3当量，hcl)于dma(3ml)和dcm(3ml)中的混合物中添加edci(406mg，2.12mmol，4当量)，然后在15℃下搅拌2小时。浓缩混合物，得到残余物。通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：25％-55％，8分钟)纯化残余物，得到呈浅黄色固体状的183c(130mg，273umol，产率51.6％，纯度97.2％)。1h nmr(400mhz,meod)δ7.47(s,1h),6.93(s,1h),4.07(br t,j＝8.4hz,2h),3.95(q,j＝7.2hz,2h),3.82-3.63(m,4h),3.44(s,2h),3.18(d,j＝7.6hz,2h),3.02-2.81(m,1h),1.76(六重峰,j＝7.2hz,2h),1.45(s,9h),1.20(t,j＝7.2hz,3h),0.99(t,j＝7.2hz,3h)。lc/ms[m+h]463.2(计算值)；lc/ms[m+h]463.1(观测值)。[0781]制备taz-183[0782]向183c(0.11g，238umol，1当量)于dcm(10ml)中的混合物中添加tfa(1.54g，13.5mmol，1ml，56.8当量)。在15℃下搅拌混合物1小时。用饱和nahco3水溶液将混合物的ph调节至约7，然后用dcm/i-proh(3:1，10ml*3)萃取。经na2so4干燥有机层，浓缩，得到呈浅黄色固体状的taz-183(60mg，151umol，产率63.3％，纯度90.95％)。1h nmr(400mhz,meod)δ7.20(s,1h),6.63(s,1h),4.04(br t,j＝9.6hz,2h),3.83-3.75(m,4h),3.59(t,j＝7.2hz,2h),3.36-3.30(m,1h),3.05(d,j＝7.6hz,2h),2.88(s,2h),1.62(六重峰,j＝7.2hz,2h),1.08-1.00(m,3h),0.85(t,j＝7.2hz,3h)。lc/ms[m+h]363.2(计算值)；lc/ms[m+h]363.1(观测值)。[0783]实施例185合成n-[3-[[5-氨基-2-(4-哌啶基甲基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基]-丙基-氨基]丙基]氨基甲酸环丁酯，taz-185[0784][0785]制备5-氨基-2-[(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)甲基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸乙酯，185a[0786]将4-亚甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(4.51g，22.8mmol，2.0当量)和9-bbn(1m，57.1ml，5.0当量)的混合物加热至70℃并且在70℃下搅拌2小时，然后在冷却至20℃后将5-氨基-2-溴-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸乙酯15g(3.60g，11.4mmol，1.0当量)、xantphos(1.59g，2.74mmol，0.24当量)、pd2(dba)3(836mg，913umol，0.08当量)、k2co3(4.74g，34.2mmol，3.0当量)、h2o(5ml)和二噁烷(50ml)添加至此混合物中，然后在100℃下于n2下搅拌混合物4小时。添加水(200ml)并且用乙酸乙酯(50ml*4)萃取水相，用盐水(100ml*1)洗涤合并的有机相，经无水na2so4干燥，过滤并且在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(柱高度：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝10/1，0/1)纯化残余物，得到呈棕色油状的185a(1.8g，4.15mmol，产率36.35％)。[0787]制备5-氨基-2-[(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)甲基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸，185b[0788]在20℃下于n2下向l-185a(1.80g，4.15mmol，1.0当量)于etoh(3ml)和h2o(5ml)中的溶液中一次性添加lioh·h2o(696mg，16.6mmol，4.0当量)，然后在20℃下搅拌4小时。用hcl(4m)淬灭反应混合物直至ph＝6，然后在真空中去除etoh。过滤沉淀物并干燥，得到呈黄色固体状的185b(1.20g，2.96mmol，产率71.2％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ7.61(s,1h),6.58(s,1h),3.86(d,2.0hz,2h),2.92(s,2h),2.65(d,j＝6.4hz,2h),1.65-1.60(m,3h),1.35(s,9h),1.07-0.96(m,2h)[0789]制备4-[[5-氨基-7-[3-(环丁氧基羰基氨基)丙基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯，185c[0790]在20℃下于n2下向l-185b(200mg，493umol，1.0当量)和n-[3-(丙基氨基)丙基]氨基甲酸环丁酯(148mg，591umol，1.2当量，hcl)于dmf(2ml)中的混合物中一次性添加hatu(187mg，493umol，1.0当量)和diea(191mg，1.48mmol，257ul，3.0当量)，在20℃下搅拌混合物1小时。添加水(10ml)并且用乙酸乙酯(10ml*3)萃取水相，用盐水(15ml*2)洗涤合并的有机相，经无水na2so4干燥，过滤并且在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(柱高度：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝5/1，0/1至乙酸乙酯/甲醇＝10/1)纯化残余物，得到呈棕色固体状的185c(180mg，299umol，产率60.6％)。1h nmr(400mhz,meod)δ6.88(s,1h),6.68(s,1h),4.88-4.80(m,1h),4.08(d,j＝12.4hz,2h),3.49(t,j＝7.2hz,2h),3.41(t,j＝7.6hz,2h),3.11(s,2h),2.75(d,j＝6.8hz,3h),2.36-2.23(m,2h),1.86-1.59(m,10h),1.47(s,9h),1.22-1.09(m,2h),0.90(t,j＝4.0,3h)[0791]制备taz-185[0792]在20℃下于n2下向185c(180mg，299umol，1.0当量)于etoac(1ml)中的溶液中一次性添加hcl/etoac(4m，3.74ml，50当量)，然后在20℃下搅拌1小时。在真空中浓缩反应混合物，得到呈黄色油状的taz-185(140mg，260umol，产率86.98％，hcl)。[0793]实施例198合成5-氨基-n-乙氧基-2-(4-哌啶基甲基)-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-198[0794][0795]制备4-[[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯，198a[0796]在20℃下于n2下向5-氨基-2-[(1-叔丁氧基羰基-4-哌啶基)甲基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸185b(200mg，493umol，1.0当量)和n-乙氧基丙-1-胺(82.6mg，591umol，1.2当量，hcl)于dma(1ml)和dcm(2ml)中的混合物中添加edci(378mg，1.97mmol，4.0当量)，然后在20℃下搅拌2小时。在真空中去除dcm(2ml)，然后用nahco3水溶液淬灭水相直至ph＝8，用etoac(15ml*3)萃取水相，用盐水(15ml)洗涤合并的有机相，经无水na2so4干燥，过滤并且在真空中浓缩。通过硅胶色谱法(柱高度：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，石油醚/乙酸乙酯＝5/1，0/1至乙酸乙酯/甲醇＝10/1)纯化残余物，得到呈棕色固体状的198a(150mg，305umol，产率61.9％)。1h nmr(400mhz,meod)δ7.35(s,1h),6.68(s,1h),4.08(d,j＝13.2hz,2h),3.90(q,j＝7.2hz,2h),3.71(t,j＝7.2hz,2h),3.33(s,2h),3.08(d,j＝8.0hz 2h),2.76(d,j＝6.8hz,3h),1.80-1.70(m,5h),1.47(s,9h),1.20-1.10(m,5h),0.97(t,j＝7.2hz,3h)[0797]制备taz-198[0798]在20℃下于n2下向198a(150mg，305umol，1.0当量)于etoac(1ml)中的溶液中添加hcl/etoac(4m，3.82ml，50当量)，在20℃下搅拌混合物1小时。在真空中浓缩反应混合物，得到呈黄色油状的taz-198(100mg，234umol，产率76.6％，hcl)。[0799]实施例238合成n-[2-[[5-氨基-2-(氮杂环丁烷-3-基甲基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基]-丙基-氨基]氧基乙基]氨基甲酸环丁酯，taz-238[0800][0801]制备3-[[5-氨基-7-[2-(环丁氧基羰基氨基)乙氧基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯，238a[0802]在0℃下向5-氨基-2-[(1-叔丁氧基羰基氮杂环丁烷-3-基)甲基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸261a(200mg，529.86umol，1当量)和n-[2-(丙基氨基氧基)乙基]氨基甲酸环丁酯(174.09mg，688.82umol，1.3当量，hcl)于dcm(2ml)和dma(2ml)中的溶液中添加edci(304.72mg，1.59mmol，3当量)，然后在25℃下搅拌1小时。在减压下浓缩反应混合物，得到残余物。用h2o(10ml)稀释残余物并且在0℃下用na2co3水溶液将混合物的ph调节至约9，并且将其用etoac(10ml*3)萃取。用盐水(5ml*3)洗涤合并的有机层，经na2so4干燥，过滤并且在减压下浓缩，得到残余物。通过柱色谱法(sio2，石油醚/乙酸乙酯＝1/0至0/1)，然后(sio2，etoac:meoh＝1:0至3:1)纯化残余物，得到呈黄色固体状的238a(0.2g，347.39umol，产率65.56％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.32(s,1h),6.69(s,1h),4.81(s,1h),4.08-3.99(m,2h),3.89(t,j＝5.2hz,2h),3.72-3.62(m,4h),3.29-3.25(m,2h),3.09(d,j＝7.6hz,2h),3.02(s,2h),2.95-2.83(m,1h),2.32-2.21(m,2h),2.05-1.94(m,2h),1.77-1.54(m,4h),1.45-1.40(m,9h),0.94(t,j＝7.6hz,3h)。lc/ms[m+h]576.3(计算值)；lc/ms[m+h]576.3(观测值)。[0803]制备taz-238[0804]在25℃下向238a(0.31g，538umol，1.0当量)于dcm(6ml)中的混合物中一次性添加tfa(1.23g，10.8mmol，797ul，20.0当量)，然后在25℃下搅拌2小时。浓缩混合物，得到残余物，用h2o(15ml)稀释残余物，用mtbe(10ml*2)萃取混合物以去除过量tfa，冷冻干燥水相，得到呈黄色固体状的taz-238(0.38g，521umol，产率96.7％，纯度96.4％，tfa盐)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.47(s,1h),6.96(s,1h),4.81-4.74(m,1h),4.22-4.13(m,2h),3.96-3.86(m,4h),3.71(t,j＝7.2hz,2h),3.41(s,2h),3.29-3.22(m,5h),2.25(d,j＝7.2hz,2h),2.03-1.89(m,2h),1.80-1.55(m,4h),0.96(t,j＝7.6hz,3h)。lc/ms[m+h]476.2(计算值)；lc/ms[m+h]476.1(观测值)。[0805]实施例253合成5-氨基-2-(氮杂环丁烷-3-基甲基)-n-异丙氧基-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-253[0806][0807]制备n-异丙氧基丙-1-胺[0808]向o-异丙基羟胺(2g，17.9mmol，1当量，hcl)于thf(15ml)中的溶液中添加nahco3(3.01g，35.8mmol，1.39ml，2当量)于h2o(5ml)中的溶液和碳酸叔丁氧基羰基叔丁酯(5.87g，26.9mmol，6.18ml，1.5当量)，然后在20℃下于n2气氛下搅拌2小时。将h2o(50ml)添加至混合物中，然后用etoac(80ml x 3)萃取，用盐水(50ml x 3)洗涤合并的有机相，经无水na2so4干燥，过滤并且在真空中浓缩。通过用(石油醚:乙酸乙酯＝1:0，1:1)洗脱进行硅胶色谱法来纯化粗产物。获得呈浅黄色油状的n-异丙氧基氨基甲酸叔丁酯(2.81g，16.0mmol，产率89.46％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.00(br s,1h),4.10-1.00(m,1h),1.49(s,9h),1.22(d,j＝6.4hz,6h)。[0809]在0℃下于n2下向n-异丙氧基氨基甲酸叔丁酯(2.80g，15.9mmol，1当量)于dmf(10ml)中的溶液中添加nah(959mg，23.9mmol，纯度60％，1.5当量)且将其搅拌0.5小时，然后添加1-碘丙烷(5.43g，32.0mmol，3.12ml，2当量)。在25℃下于n2气氛下搅拌混合物2小时。在0℃下通过添加(50ml)饱和nh4cl溶液淬灭反应混合物，然后用etoac(80ml x 3)萃取，用盐水(30ml x 3)洗涤合并的有机相，经无水na2so4干燥，过滤并且在真空中浓缩。通过用石油醚/乙酸乙酯＝0:1-1:1洗脱进行硅胶色谱法来纯化粗产物。获得呈无色油状的n-异丙氧基-n-丙基-氨基甲酸叔丁酯(3.8g，粗物质)。1hnmr(meod,400mhz)δ4.12-4.02(m,1h),3.39(t,j＝7.2hz,2h),1.70-1.61(m,2h),1.49(s,9h),1.21(d,j＝6.0hz,6h),0.90(t,j＝7.2hz,3h)。[0810]向n-异丙氧基-n-丙基-氨基甲酸叔丁酯(3.2g，14.7mmol，1当量)于etoac(5ml)中的溶液中添加hcl/etoac(4m，55.2ml，15当量)，然后在20℃下搅拌2小时。在减压下浓缩反应混合物，得到残余物。获得呈无色油状的n-异丙氧基丙-1-胺(1.61g，10.48mmol，产率71.16％，hcl)。1h nmr(meod,400mhz)δ4.76-4.67(m,1h),3.23-3.16(m,2h),2.00-1.89(m,2h),1.41(d,j＝6.2hz,6h),1.03(t,j＝7.6hz,3h)。[0811]制备3-[[5-氨基-7-[异丙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯，253a[0812]向5-氨基-2-[(1-叔丁氧基羰基氮杂环丁烷-3-基)甲基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸183b(400mg，1.06mmol，1当量)和n-异丙氧基丙-1-胺(244mg，1.59mmol，1.50当量，hcl)于dma(2ml)和dcm(2ml)中的混合物中添加edci(610mg，3.18mmol，3当量)，然后在20℃下搅拌1小时。向反应混合物中添加h2o(20ml)，然后用nahco3水溶液将混合物的ph调节至约8，用etoac(30ml x 3)萃取，用盐水(10ml x 3)洗涤合并的有机相，经无水na2so4干燥，过滤并且在真空中浓缩。通过用(乙酸乙酯:甲醇＝1:0，5:1)洗脱进行硅胶色谱法来纯化粗产物，得到呈浅黄色固体状的253a(410mg，860umol，产率81.17％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.34(s,1h),6.73(s,1h),4.20-4.15(m,1h),4.09-4.00(m,2h),3.74-3.63(m,4h),3.06(d,j＝8.0hz,2h),2.95(s,2h),2.90-2.84(m,1h),1.76-1.67(m,2h),1.43(s,9h),1.17(d,j＝6.2hz,6h),0.94(t,j＝7.6hz,3h)。[0813]制备taz-253[0814]向253a(410mg，860umol，1当量)于ch3cn(2ml)和h2o(2ml)中的溶液中添加tfa(785mg，6.88mmol，510ul，8当量)，然后在80℃下于n2气氛下搅拌2小时。在减压下浓缩反应混合物以去除ch3cn，用mtbe(15ml x 3)萃取水相以去除过量tfa，冷冻干燥水相，得到呈浅黄色固体状的taz-253(320mg，850umol，产率98.80％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.43(s,1h),6.95(s,1h),4.27-4.20(m,1h),4.20-4.14(m,2h),3.97-3.87(m,2h),3.73(br t,j＝7.2hz,2h),3.40(s,2h),3.30-3.25(m,3h),1.81-1.69(m,2h),1.18(d,j＝6.2hz,6h),0.96(t,j＝7.4hz,3h)。lc/ms[m+h]377.2(计算值)；lc/ms[m+h]377.1(观测值)。[0815]实施例260合成n-[2-[[5-氨基-2-(氮杂环丁烷-3-基甲基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基]-丙基-氨基]氧基乙基]氨基甲酸异丙酯，taz-260[0816][0817]制备3-[[5-氨基-7-[2-(异丙氧基羰基氨基)乙氧基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯，260a[0818]在25℃下向n-[2-(丙基氨基氧基)乙基]氨基甲酸异丙酯(158mg，654umol，1.3当量，hcl)和5-氨基-2-[(1-叔丁氧基羰基氮杂环丁烷-3-基)甲基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸261a(0.19g，503umol，1.0当量)于dcm(4ml)和dma(0.5ml)中的混合物中一次性添加edci(289mg，1.51mmol，3.0当量)，然后在25℃下搅拌0.5小时。浓缩混合物以去除dcm。然后用水(20ml)稀释混合物，用饱和nahco3将水相的ph调节至约8，然后用etoac(20ml x 3)萃取混合物。用盐水洗涤有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过硅胶色谱法(柱高度：250mm，直径：100mm，100-200目硅胶，乙酸乙酯/meoh＝1/0，10/1)纯化残余物，得到呈黄色油状的260a(0.18g，319umol，产率63.44％)。1h nmr(meoh,400mhz)δ7.30(s,1h),6.67(s,1h),4.83-4.75(m,1h),4.07-4.03(m,2h),3.89(t,j＝5.4hz,2h),3.68(t,j＝7.0hz,4h),3.30-3.26(m,2h),3.08(d,j＝7.6hz,2h),3.00(s,2h),2.90-2.85(m,1h),1.76-1.67(m,2h),1.43(s,9h),1.18(d,j＝6.0hz,6h),0.94(t,j＝7.2hz,3h)。[0819]制备taz-260[0820]在25℃下向260a(0.18g，319umol，1.0当量)于ch3cn(2ml)和h2o(2ml)中的混合物中添加tfa(291mg，2.55mmol，189ul，8.0当量)并且在80℃下将其搅拌0.5小时。浓缩混合物以去除ch3cn。然后用mtbe(10ml x 3)萃取混合物以去除过量tfa。冷冻干燥水相，得到呈黄色固体状的taz-260(0.25g，310.30umol，产率97.18％，tfa盐)。1h nmr(meoh,400mhz)δ7.47(s,1h),6.96(s,1h),4.81-4.76(m,1h),4.23-4.09(m,2h),3.98-3.86(m,4h),3.71(t,j＝6.8hz,2h),3.41(s,2h),3.29-3.18(m,5h),1.83-1.64(m,2h),1.25-1.12(m,6h),0.96(t,j＝7.6hz,3h)。lc/ms[m+h]464.2(计算值)；lc/ms[m+h]464.1(观测值)。[0821]实施例261合成5-氨基-2-(氮杂环丁烷-3-基甲基)-n-[2-(乙基氨甲酰基氨基)乙氧基]-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺，taz-261[0822][0823]制备3-[[5-氨基-7-[2-(乙基氨甲酰基氨基)乙氧基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-甲酸叔丁酯，261b[0824]向2-[(1-叔丁氧基羰基氮杂环丁烷-3-基)甲基]-5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸261a(230mg，607.76umol，1当量)和1-乙基-3-[2-(丙基氨基氧基)乙基]脲(192mg，851umol，1.4当量，hcl)于dcm(3.00ml)和dma(3.00ml)中的溶液中添加edci(350mg，1.82mmol，3当量)，然后在25℃下搅拌1小时。浓缩混合物以去除dcm并且用水(20ml)稀释，并且用饱和na2co3将混合物的ph调节至约9，并且用etoac(20ml x 3)萃取。用盐水(20ml x 3)洗涤有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩。通过快速硅胶色谱法(isco；0.5gsepaflash二氧化硅快速柱，洗脱剂0至30％乙酸乙酯/meoh，在35ml/min下)纯化残余物，得到呈浅黄色固体状的261b(270mg，492umol，产率80.97％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.29(s,1h),6.68(s,1h),4.10-4.00(m,2h),3.88(t,j＝5.2hz,2h),3.74-3.61(m,4h),3.29(br s,2h),3.12-3.05(m,4h),3.01(s,2h),2.95-2.83(m,1h),1.72(六重峰,j＝7.2hz,2h),1.43(s,9h),1.06(t,j＝7.2hz,3h),0.94(t,j＝7.6hz,3h)。[0825]制备taz-261[0826]向261b(270mg，492umol，1当量)于ch3cn(3.00ml)和h2o(3.00ml)中的溶液中添加tfa(449mg，3.94mmol，291ul，8当量)，然后在80℃下搅拌1小时。浓缩混合物并且用水(20ml)稀释，并且用mtbe(20ml x 2)萃取以去除过量tfa，并且冷冻干燥水相，得到呈浅黄色固体状的taz-261(300mg，443.38umol，产率90.10％，2tfa)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.45(s,1h),6.96(s,1h),4.21-4.13(m,2h),3.97-3.86(m,4h),3.71(t,j＝7.2hz,2h),3.42(s,2h),3.30-3.20(m,3h),3.06(q,j＝7.2hz,2h),1.80-1.68(m,2h),1.05(t,j＝7.2hz,3h),0.96(t,j＝7.6hz,3h)。lc/ms[m+h]449.2(计算值)；lc/ms[m+h]449.1(观测值)。[0827]实施例l-1合成(e)-40-(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-35-((3-氰基苯基)亚胺基)-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-34,36,40-三氮杂四十三烷酸2,3,5,6-四氟苯酯，taz-l-1[0828][0829]制备(e)-40-(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-35-((3-氰基苯基)亚胺基)-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-34,36,40-三氮杂四十三烷酸叔丁酯，l-1a[0830]将taz-11(0.05g，0.16mmol，1当量)和1-((3-氰基苯基)亚胺基)-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十氧杂-2-氮杂三十五-1-烯-35-酸叔丁酯peg10-二酰亚胺(0.116g，0.16mmol，1当量)溶解于dmf中。添加三乙胺(0.068ml，0.49mmol，3当量)，并且在周围温度下搅拌反应物。胺起始物质消耗后，浓缩反应物并且通过hplc纯化，得到l-1a(0.102g，0.10mmol，62％)。lc/ms[m+h]1018.55(计算值)；lc/ms[m+h]1018.91(观测值)。[0831]制备(e)-40-(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-35-((3-氰基苯基)亚胺基)-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-34,36,40-三氮杂四十三烷酸，l-1b[0832]将l-1a(0.102g，0.100mmol，1当量)溶解于100μl tfa中。15分钟后，用乙醚湿磨产物，然后在真空下浓缩，得到l-1b(94.4mg，0.98mmol，98％)。lc/ms[m+h]962.49(计算值)；lc/ms[m+h]962.85(观测值)。[0833]制备taz-l-1[0834]将l-1b(0.094g，0.098mmol，1当量)和2,3,5,6-四氟苯酚tfp(0.033g，0.20mmol，2当量)溶解于dmf中。添加可力丁(0.064ml，0.49mmol，5当量)，继而添加1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐edc-hcl(0.038g，0.20mmol，2当量)。在室温下搅拌反应物直至完成，然后通过hplc纯化，得到taz-l-1(0.057g，0.051mmol，52％)。lc/ms[m+h]1110.48(计算值)；lc/ms[m+h]1110.87(观测值)。[0835]实施例l-2合成(e)-41-(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-35-((3-氰基苯基)亚胺基)-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-34,36,41-三氮杂四十四-38-炔酸2,3,5,6-四氟苯酯，taz-l-2[0836][0837]制备(e)-41-(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-35-((3-氰基苯基)亚胺基)-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-34,36,41-三氮杂四十四-38-炔酸叔丁酯，l-2a[0838]将taz-17(0.05g，0.16mmol，1当量)和1-((3-氰基苯基)亚胺基)-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十氧杂-2-氮杂三十五-1-烯-35-酸叔丁酯peg10-二酰亚胺(0.112g，0.16mmol，1当量)溶解于dmf中。添加三乙胺(0.066ml，0.47mmol，3当量)，并且在周围温度下搅拌反应物。胺起始物质消耗后，浓缩反应物并且通过hplc纯化，得到l-2a(0.120g，0.12mmol，74％)。lc/ms[m+h]1028.54(计算值)；lc/ms[m+h]1028.92(观测值)。[0839]制备(e)-41-(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-35-((3-氰基苯基)亚胺基)-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-34,36,41-三氮杂四十四-38-炔酸，l-2b[0840]将l-2a(0.120g，0.12mmol，1当量)溶解于100μl tfa中。15分钟后，浓缩产物并且通过hplc纯化，得到l-2b(84.9mg，0.087mmol，75％)。lc/ms[m+h]972.47(计算值)；lc/ms[m+h]972.83(观测值)。[0841]制备taz-l-2[0842]将l-2b(0.085g，0.087mmol，1当量)和tfp(0.029g，0.17mmol，2当量)溶解于dmf中。添加可力丁(0.058ml，0.44mmol，5当量)，继而添加1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐edc-hcl(0.033g，0.17mmol，2当量)。在室温下搅拌反应物直至完成，然后通过hplc纯化，得到taz-l-2(0.057g，0.055mmol，62％)。lc/ms[m+h]1120.47(计算值)；lc/ms[m+h]1120.85(观测值)。[0843]实施例l-3合成39-(5-氨基-7-(二丙基氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)-34-甲基-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-34-氮杂三十九烷酸2,3,5,6-四氟苯酯，taz-l-3[0844][0845]将taz-25(0.18g，0.20mmol，1当量)和tfp(0.066g，0.40mmol，2当量)溶解于1ml dmf中。添加可力丁(0.13ml，1.0mmol，5当量)，继而添加1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐edc-hcl(0.115g，0.60mmol，3当量)。在室温下搅拌反应物直至完成，然后通过hplc纯化，得到taz-l-3(0.103g，0.098mmol，49％)。lc/ms[m+h]1051.53(计算值)；lc/ms[m+h]1051.74(观测值)。[0846]实施例l-4合成1-(4-((5-氨基-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺基)甲基)苯基)-2-甲基-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十氧杂-2-氮杂三十五烷-35-酸2,3,5,6-四氟苯酯，taz-l-4[0847][0848]制备1-(4-((5-氨基-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺基)甲基)苯基)-2-甲基-5,8,11,14,17,20,23,26,29,32-十氧杂-2-氮杂三十五烷-35-酸，l-4a[0849]将5-氨基-n-(4-(氨基甲基)苯甲基)-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-30(0.063g，0.17mmol，1当量)和1-氧代-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-十氧杂三十三烷-33-酸(0.09g，0.17mmol，1当量)溶解于甲醇中。添加三乙胺(0.14ml，1.0mmol，6当量)，继而添加氰基硼氢化钠(0.032g，0.51mmol，3当量)。通过lcms监测反应。2小时后，添加甲醛(14μl，0.17mmol，于水中的37％w/w溶液，1当量)并且再搅拌反应物30分钟。胺消耗后，浓缩反应物并且通过hplc纯化，得到l-4a(0.045g，0.050mmol，29％)。lc/ms[m+h]895.47(计算值)；lc/ms[m+h]895.80(观测值)。[0850]制备taz-l-4[0851]将中间体l-4a(0.045g，0.05mmol，1当量)和tfp(0.017g，0.10mmol，2当量)溶解于1ml dmf中。添加可力丁(0.033ml，0.25mmol，5当量)，继而添加1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐edc-hcl(0.029g，0.15mmol，3当量)。在室温下搅拌反应物直至完成，然后通过hplc纯化，得到taz-l-4(0.031g，0.030mmol，59％)。lc/ms[m+h]1043.47(计算值)；lc/ms[m+h]1043.79(观测值)。[0852]实施例l-10合成3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[[4-[[[5-氨基-2-[5-(二甲基氨基)戊基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基]-丙基-氨基]甲基]苯基]甲基-甲基氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(2,3,5,6-四氟苯基)酯，taz-l-10[0853][0854][0855]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[[4-[[[5-氨基-2-[5-(二甲基氨基)戊基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基]-丙基-氨基]甲基]苯基]甲基-甲基-氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸叔丁酯，l-10a[0856]向5-氨基-2-[5-(二甲基氨基)戊基]-n-[[4-(甲基氨基甲基)苯基]甲基]-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-65(300mg，527umol，1.0当量，2hcl)于meoh(10ml)中的溶液中添加3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-氧代乙氧基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸叔丁酯(617mg，1.06mmol，2.0当量)、acoh(3.1mg，52.7umol，0.10当量)和nabh3cn(66.3mg，1.06mmol，2.0当量)。在25℃下搅拌混合物12小时，然后将其浓缩并且通过制备型hplc(柱：nano-micro kromasil c18 100*40mm 10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：5％-45％，8分钟)纯化，得到呈无色油状的l-10a(350mg，328umol，产率62.33％)。[0857]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[[4-[[[5-氨基-2-[5-(二甲基氨基)戊基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基]-丙基-氨基]甲基]苯基]甲基-甲基氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-10b[0858]在25℃下向l-10a(100mg，84.8umol，1.0当量，tfa)于h2o(2ml)中的混合物中添加hcl(12m，141ul，20.0当量)，然后在80℃下搅拌1小时。浓缩混合物，得到呈浅黄色油状的l-10b(80.0mg，76.6umol，产率90.2％，hcl)。[0859]制备taz-l-10[0860]在15℃下向l-10b(50.0mg，49.6umol，1.0当量)于dcm(2ml)和dma(0.1ml)中的混合物中添加1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐edci(95.0mg，495umol，10.0当量)，然后搅拌0.5小时。在真空中浓缩混合物，得到残余物。通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：25％-50％，8分钟)纯化残余物，获得呈浅黄色油状的taz-l-10(21.0mg，16.5umol，产率34.5％，tfa)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.57-7.50(m,2h),7.48-7.43(m,3h),7.12(s,1h),6.92(s,1h),4.80(s,2h),4.50-4.32(m,2h),3.90-3.87(m,4h),3.70-3.59(m,38h),3.38-3.40(m,6h),3.01-2.99(m,2h),2.90-2.98(m,2h),2.90(s,9h),1.79-1.78(m,4h),1.70-1.65(m,2h),1.52-1.49(m,2h),0.93-0.87(m,3h)。lc/ms[m+h]1156.6(计算值)；lc/ms[m+h]1156.6(观测值)。[0861]实施例l-13合成3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[5-[5-氨基-7-[[4-[(二甲基氨基)甲基]苯基]甲基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]戊基-甲基氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(2,3,5,6-四氟苯基)酯，taz-l-13h2o淬灭反应混合物并且在真空中将其浓缩，得到残余物。通过制备型hplc(柱：phenomenex luna c18 250*50mm*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：30％-60％，10分钟)纯化残余物，得到呈无色油状的l-13a(100mg，86.92umol，产率38％)。[0865]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[5-[5-氨基-7-[[4-(甲基氨基甲基)苯基]甲基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]戊基-甲基-氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-13b[0866]向l-13a(100mg，86.9umol，1.0当量)于h2o(0.5ml)中的溶液中添加hcl(12m，145ul，20.0当量)，然后在80℃下搅拌0.5小时。在压力下浓缩反应混合物，得到呈无色油状的l-13b(92mg，粗物质)。[0867]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[5-[5-氨基-7-[[4-[(二甲基氨基)甲基]苯基]甲基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]戊基-甲基氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-13c[0868]在15℃下向甲醛hcho(30.4mg，375umol，纯度37％，5.0当量)和l-13b(80mg，74.9umol，1.0当量，2hcl)于meoh(1ml)中的混合物中添加nabh3cn(9.4mg，150umol，2.0当量)，然后在15℃下搅拌1小时。过滤混合物并且通过制备型hplc(柱：phenomenex luna c18 80*40mm*3um；流动相：[水(0.04％hcl)-acn]；b％：5％-35％，7分钟)纯化滤液，获得呈无色油状的l-13c(55mg，50.87umol，产率67.86％，2hcl)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.56(d,j＝8.0hz,2h),7.48(d,j＝7.2hz,2h),7.13(s,1h),6.95(s,1h),4.83(s,2h),4.35(s,2h),3.76-3.70(m,2h),3.70-3.62(m,40h),3.50-3.47(m,6h),3.35-3.28(m,2h),2.94-2.91(m,5h),2.88(s,6h),2.56(t,j＝6.4hz,2h),1.82-1.81(m,3h),1.69-1.65(m,2h),1.53-1.49(m,2h),0.91(t,j＝7.2hz,3h)[0869]制备taz-l-13[0870]在15℃下向l-13c(50mg，49.6umol，1.0当量)于dcm(2ml)和dma(0.1ml)中的混合物中添加1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐edci(95.0mg，496umol，10.0当量)，然后在15℃下搅拌0.5小时。在减压下浓缩混合物，得到残余物。通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：20％-40％，10分钟)纯化残余物，得到呈浅黄色油状的taz-l-13(23mg，19.89umol，产率40.11％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.53-7.51(m,2h),7.46-7.40(m,3h),7.11(s,1h),6.92(s,1h),4.80(s,2h),4.33(s,2h),3.89(t,j＝6.4hz,2h),3.89-3.85(m,2h),3.70-3.63(m,38h),3.54-3.42(m,4h),3.39(s,2h),2.99(t,j＝6.0hz,2h),2.94-2.91(m,5h),2.87(s,6h),1.80(d,j＝6.4hz,4h),1.69-1.64(m,2h),1.52-1.50(m,2h),0.90(t,j＝6.8hz,3h)。lc/ms[m+h]1156.6(计算值)；lc/ms[m+h]1156.6(观测值)。[0871]实施例l-16合成3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[[4-[[(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]甲基]-2-(三氟甲基)苯基]甲基-甲基-氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(2,3,5,6-四氟苯基)酯，taz-l-16[0872][0873]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[[4-[[(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]甲基]-2-(三氟甲基)苯基]甲基-甲基-氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸叔丁酯，l-16a[0874]在20℃下向5-氨基-n-[[4-(氨基甲基)-3-(三氟甲基)苯基]甲基]-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-54(80.0mg，145umol，1.0当量，tfa)和3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-氧代乙氧基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸叔丁酯(110mg，189umol，1.3当量)于meoh(20ml)中的混合物中添加nabh3cn(22.8mg，363umol，2.5当量)，然后在此温度下搅拌20小时。将hcho(70.7mg，872umol，64.9ul，纯度37％，6.0当量)和nabh3cn(22.8mg，363umol，2.5当量)添加至混合物中，并且在20℃下将其再搅拌1小时。在真空中浓缩反应混合物并且通过制备型hplc(柱：nano-micro kromasil c18 100*40mm 10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：3％-40％，8分钟)纯化，得到呈无色油状的l-16a(88.0mg，86.3umol，产率59.4％)。1h nmr(400mhz,meod)δ7.90-7.83(m,2h),7.83-7.78(m,1h),7.76(d,j＝5.2hz,1h),7.22(d,j＝6.4hz,1h),7.16(d,j＝4.8hz,1h),4.73-4.55(m,2h),3.93-3.84(m,2h),3.71-3.70(m,4h),3.68-3.57(m,38h),3.49(s,2h),3.41(s,2h),2.95(s,3h),2.48(t,j＝6.0hz,2h),1.75-1.67(m,2h),1.47(s,9h),0.93(br t,j＝7.6hz,3h)。[0875]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[[4-[[(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]甲基]-2-(三氟甲基)苯基]甲基-甲基-氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-16b[0876]在20℃下于n2下向l-16a(78.0mg，76.5umol，1.0当量)于h2o(0.5ml)和mecn(0.1ml)中的溶液中添加hcl(12m，191ul，30当量)，将混合物加热至80℃，然后搅拌1小时。在真空中浓缩反应混合物，得到呈无色油状的l-16b(70.0mg，72.6umol，产率94.9％)。[0877]制备taz-l-16[0878]在20℃下于n2下向l-16b(60mg，62.3umol，1当量)和2,3,5,6-四氟苯酚(51.7mg，311umol，5.0当量)于dcm(1ml)和dma(0.1ml)中的混合物中添加edci(59.7mg，311umol，5.0当量)，然后在20℃下搅拌1小时。在真空中浓缩反应混合物。通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：25％-50％，7分钟)纯化残余物，得到呈无色油状的taz-l-16(15mg，13.5umol，产率21.67％)。1h nmr(400mhz,meod)δ7.88-7.83(m,2h),7.82-7.78(m,1h),7.76(d,j＝5.6hz,1h),7.48-7.41(m,1h),7.22(s,1h),7.16(d,j＝5.6hz,1h),4.96(s,2h),3.92-3.87(m,4h),3.71-3.58(m,38h),3.52-3.48(m,2h),3.41(s,2h),3.34(s,2h),2.99(t,j＝6.0hz,2h),2.95(s,3h),1.75-1.66(m,2h),0.92(t,j＝7.2hz,3h)。lc/ms[m+h]1111.5(计算值)；lc/ms[m+h]1111.5(观测值)。[0879]实施例l-22合成3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[[4-[[(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]甲基]-3-(三氟甲基)苯基]甲基-甲基-氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(2,3,5,6-四氟苯基)酯，taz-l-22[0880][0881]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[[4-[[(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]甲基]-3-(三氟甲基)苯基]甲基-甲基-氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸叔丁酯，l-22a[0882]在25℃下向3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-氧代乙氧基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸叔丁酯(51.9mg，89umol，1.4当量)于meoh(3ml)中的混合物中添加5-氨基-n-[[4-(氨基甲基)-2-(三氟甲基)苯基]甲基]-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-52(30mg，63umol，1.0当量，hcl)。搅拌混合物10分钟，然后添加nabh3cn(7.97mg，126.86umol，2当量)并且在25℃下将其搅拌23小时，然后添加甲醛(15.44mg，190.29umol，14.17ul，3当量)和nabh3cn(7.97mg，126.86umol，2当量)并且再搅拌反应物1小时。继而浓缩反应混合物并且通过制备型hplc(柱：phenomenex luna c18 150*30mm*5um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：25％-55％，10分钟)纯化，得到呈无色油状的l-22a(60mg，粗物质)。[0883]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[[4-[[(5-氨基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基)-丙基-氨基]甲基]-3-(三氟甲基)苯基]甲基-甲基-氨基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-22b[0884]在15℃下向l-22a(60mg，58.87umol，1当量)于h2o(0.5ml)中的混合物中一次性添加hcl(12m，150ul，30当量)，然后在80℃下搅拌2小时。在真空中浓缩混合物，获得呈浅黄色油状的l-22b(45mg，45.02umol，产率76.47％，hcl)。[0885]制备taz-l-22[0886]在15℃下向l-22b(40mg，40umol，1.0当量，hcl)于dcm(0.2ml)和dma(0.02ml)中的混合物中添加2,3,5,6-四氟苯酚(53.2mg，320umol，8.0当量)和edci(76.7mg，400umol，10当量)，然后搅拌30分钟。在30℃下于减压下浓缩反应物并且通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：20％-50％，8分钟)纯化，得到呈浅黄色油状的taz-l-22(24.7mg，22.23umol，产率55.55％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.98(s,1h),7.86-7.84(m,1h),7.76-7.72(m,1h),7.65(d,j＝8.0hz,1h),7.48-7.39(m,1h),7.14(d,j＝5.2hz,1h),4.96(s,2h),4.70-4.41(m,2h),3.92-3.82(m,4h),3.70-3.54(m,38h),3.44-3.40(m,4h),3.34(s,2h),2.97(t,j＝6.0hz,2h),2.91(s,3h),1.75-1.59(m,2h),0.91(t,j＝6.8hz,3h)。lc/ms[m+h]1111.5(计算值)；lc/ms[m+h]1111.4(观测值)。[0887]实施例l-32合成40-(5-氨基-7-((3-(3,3-二甲基丁酰胺基)丙基)(丙基)氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)-34-氧代-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-35-氮杂四十烷酸2,3,5,6-四氟苯酯，taz-l-32[0888][0889]将4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂三十四烷二酸双(2,3,5,6-四氟苯基)酯(10mg，0.12mmol，1当量)溶解于0.5ml乙腈acn中。向此溶液中逐滴添加5-氨基-2-(5-氨基戊基)-n-(3-(3,3-二甲基丁酰胺基)丙基)-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-109的三氟乙酸盐(7.4mg，0.012mmol，1当量)和三乙胺tea(0.01ml，0.073mmol，6当量)于1ml acn中的溶液。完成后，通过hplc纯化反应物，得到呈无色玻璃状的taz-l-32(4mg，0.03mmol，28％)。lc/ms[m+h]1178.59(计算值)；lc/ms[m+h]1178.83(观测值)。[0890]实施例l-34合成39-(5-氨基-7-((3-(3,3-二甲基丁酰胺基)丙基)(丙基)氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)-34-甲基-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-34-氮杂三十九烷酸2,3,5,6-四氟苯酯，taz-l-34[0891][0892]制备39-(5-氨基-7-((3-(3,3-二甲基丁酰胺基)丙基)(丙基)氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)-34-甲基-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-34-氮杂三十九烷酸，l-34a[0893]在-78℃下将乙二酰氯(0.023ml，0.27mmol，3当量)溶解于2.5ml dcm中。逐滴添加二甲亚砜dmso(0.038ml，0.54mmol，6当量)。在-78℃下搅拌反应物15分钟，然后逐滴添加1-羟基-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-十氧杂三十三烷-33-酸叔丁酯(0.052g，0.089mmol，1当量)于0.5ml dcm中的溶液。在-78℃下搅拌反应物30分钟，然后逐滴添加三乙胺tea(0.112ml，0.80mmol，9当量)。在-78℃下再搅拌反应物30分钟，然后从冷却中移出并且经30分钟升温至周围温度以形成粗醛中间体。将5-氨基-2-(5-氨基戊基)-n-(3-(3,3-二甲基丁酰胺基)丙基)-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-109的三氟乙酸盐(0.054g，0.089mmol，1当量)和三乙酰氧基硼氢化钠stab(0.186g，0.88mmol，9.8当量)悬浮于2ml dcm与额外0.05ml tea中。将粗醛溶液添加至搅拌溶液中。在室温下搅拌反应物3小时，然后添加甲醛(0.0073g，0.089mmol，1当量，37wt.％，于h2o中)。15分钟后，浓缩反应物并且通过hplc纯化，得到无色残余物，将其溶解于最少的tfa中并且静置15分钟。然后浓缩溶液并且用乙醚湿磨，得到l-34a(0.042g，0.041mmol，46％)。lc/ms[m+h]1016.62(计算值)；lc/ms[m+h]1016.95(观测值)。[0894]制备taz-l-34[0895]将中间体l-34a(0.042g，0.041mmol，1当量)和2,3,5,6-四氟苯酚tfp(0.014g，0.082mmol，2当量)溶解于3ml acn中。添加可力丁(0.054ml，0.406mmol，9.83当量)，继而添加1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐edc-hcl(0.017g，0.088mmol，2.13当量)。在室温下搅拌反应物并且通过lcms监测，然后用2ml h2o稀释并且通过hplc纯化，得到taz-l-34(0.0198g，0.017mmol，41％)。lc/ms[m+h]1164.61(计算值)；lc/ms[m+h]1164.81(观测值)。[0896]实施例l-52合成40-(5-氨基-7-(丙基(3-(2-(三氟甲氧基)乙酰胺基)丙基)氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)-34-氧代-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-35-氮杂四十烷酸2,3,5,6-四氟苯酯，taz-l-52[0897][0898]制备40-(5-氨基-7-(丙基(3-(2-(三氟甲氧基)乙酰胺基)丙基)氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)-34-氧代-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-35-氮杂四十烷酸，l-52a[0899]将2-(三氟甲氧基)乙酸2,3,5,6-四氟苯酯(0.012g，0.041mmol，1当量)和三氟乙酸3-(5-氨基-2-(1-羧基-33-氧代-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-十氧杂-34-氮杂三十九烷-39-基)-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺基)丙-1-铵l-53b(0.038g，0.041mmol，1当量)于乙腈中合并。添加可力丁(0.027ml，0.205mmol，5当量)，并且通过hplc监测反应。完成后，浓缩反应物并且通过hplc纯化，得到呈糖浆状的l-52a(0.07g，0.066mmol，160％)，其含有大量的残余可力丁。粗物质未经进一步纯化即用于下一步骤。lc/ms[m+h]1058.52(计算值)；lc/ms[m+h]1058.84(观测值)。[0900]制备taz-l-52[0901]将中间体l-52a(0.07g，0.066mmol，1当量)和2,3,5,6-四氟苯酚(0.011g，0.66mmol，1当量)溶解于1ml乙腈中。添加可力丁(0.017ml，0.16mmol，2当量)，继而添加edc(0.013g，0.66mmol，1当量)。在室温下搅拌反应物并且通过lcms监测，然后用水稀释并且通过反相hplc纯化，得到taz-l-52(0.095g，0.075mmol，49％)。lc/ms[m+h]1206.51(计算值)；lc/ms[m+h]1206.51(观测值)。[0902]实施例l-53合成40-(5-氨基-7-((3-((环丁氧基羰基)氨基)丙基)(丙基)氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)-34-氧代-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-35-氮杂四十烷酸2,3,5,6-四氟苯酯，taz-l-53[0903][0904]制备40-(5-氨基-7-((3-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基)(丙基)氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)-34-氧代-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-35-氮杂四十烷酸，l-53a[0905]将(3-(5-氨基-2-(5-氨基戊基)-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺基)丙基)氨基甲酸叔丁酯taz-133(0.234g，0.48mmol，1当量)和34-氧代-34-(2,3,5,6-四氟苯氧基)-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂三十四烷酸(0.34g，0.48mmol，1当量)溶解于dmf中。添加三乙胺(0.33g，2.4mmol，5当量)并且在室温下搅拌反应物。胺起始物质消耗后，用水稀释反应物并且通过反相hplc纯化，得到l-53a(0.385g，0.40mmol，84％)。lc/ms[m+h]1032.58(计算值)；lc/ms[m+h]1032.89(观测值)。[0906]制备三氟乙酸3-(5-氨基-2-(1-羧基-33-氧代-3,6,9,12,15,18,21,24,27,30-十氧杂-34-氮杂三十九烷-39-基)-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺基)丙-1-铵，l-53b[0907]将中间体l-53a(0.27g，0.26mmol，1当量)溶解于最少的tfa中并且在室温下静置。起始物质完全消耗后，浓缩反应物并且用乙醚湿磨，得到l-53b(0.268g，0.256mmol，98％)。lc/ms[m+h]932.53(计算值)；lc/ms[m+h]932.81(观测值)。[0908]制备taz-l-53[0909]将氯甲酸环丁酯(0.1ml，0.094mmol，1.24当量)、2,3,5,6-四氟苯酚(0.065g，0.39mmol，5当量)和可力丁(0.103ml，0.78mmol，10当量)溶解于1ml乙腈中并且静置一小时。将中间体l-53b(0.073g，0.078mmol，1当量)溶解于此反应混合物中并且通过lcms监测反应。胺消耗后将edc(0.03g，0.157mmol，2当量)添加至溶液中，并且在室温下搅拌反应物。完成后，浓缩反应物并且通过hplc纯化，得到taz-l-53(0.027g，0.023mmol，29％)。lc/ms[m+h]1178.56(计算值)；lc/ms[m+h]1178.85(观测值)。[0910]实施例l-59合成(r)-2-((5-(5-氨基-7-((3-(3,3-二甲基丁酰胺基)丙基)(丙基)氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)戊基)氨甲酰基)-4,37-二氧代-37-(2,3,5,6-四氟苯氧基)-7,10,13,16,19,22,25,28,31,34-十氧杂-3-氮杂三十七烷-1-磺酸，taz-l-59[0911][0912]制备(r)-43-(5-氨基-7-((3-(3,3-二甲基丁酰胺基)丙基)(丙基)氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)-34,37-二氧代-36-(磺甲基)-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-35,38-二氮杂四十三烷酸，l-59b[0913]将(r)-2-氨基-3-((5-(5-氨基-7-((3-(3,3-二甲基丁酰胺基)丙基)(丙基)氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)戊基)氨基)-3-氧代丙烷-1-磺酸l-59a(0.034g，0.053mmol，1当量)溶解于dmf(1.5ml)中。向此溶液中添加dipea(0.046ml，0.265mmol，5当量)，继而添加34-氧代-34-(2,3,5,6-四氟苯氧基)-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧4.80(m,1h),3.85(d,j＝4.8hz,2h),3.75-3.57(m,40h),3.56-3.43(m,6h),3.38(s,2h),3.11(dd,j＝4.0,5.4hz,2h),3.08-2.97(m,2h),2.91(d,j＝6.4hz,2h),2.36-2.23(m,2h),2.10-1.92(m,5h),1.87-1.75(m,3h),1.72-1.54(m,5h),1.47(s,9h),0.93(s,3h)[0920]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[4-[[5-氨基-7-[3-(环丁氧基羰基氨基)丙基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]-1-哌啶基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-83b[0921]在20℃下于n2下向l-83a(100mg，93.4umol，1.0当量)于mecn(0.5ml)和h2o(2ml)中的溶液中一次性添加hcl(12m，233ul，30当量)，然后在80℃下搅拌1小时。在真空中浓缩反应混合物，得到呈无色油状的l-83b(80.0mg，78.8umol，产率84.4％)。[0922]制备taz-l-83[0923]在20℃下于n2下向l-83b(80.0mg，78.8umol，1.0当量)和2,3,5,6-四氟苯酚(131mg，788umol，10当量)于dcm(2ml)和dma(0.5ml)中的混合物中一次性添加edci(151mg，788umol，10当量)，在20℃下搅拌混合物1小时。在真空中去除dcm(2ml)并且过滤混合物，通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*30mm*4um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：20％-50％，8分钟)纯化滤液，得到呈无色油状的taz-l-83(43.0mg，36.3umol，产率46.0％，纯度98.20％)。1h nmr(400mhz,meod)δ7.49-7.42(m,1h),7.07(s,1h),6.95(s,1h),3.89(t,j＝6.0hz,2h),3.87-3.83(m,2h),3.70-3.46(m,42h),3.37(s,2h),3.17-3.08(m,3h),3.00(t,j＝6.0hz,4h),2.91(d,j＝6.8hz,2h),2.34-2.25(m,2h),2.09-1.96(m,5h),1.87-1.58(m,8h),0.92(t,j＝4.0hz,3h)。lc/ms[m+h]1162.6(计算值)；lc/ms[m+h]1162.4(观测值)。[0924]实施例l-84合成3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[4-[[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]-1-哌啶基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(2,3,5,6-四氟苯基)酯，taz-l-84[0925][0926]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[4-[[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]-1-哌啶基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸叔丁酯，l-84a[0927]在20℃下于n2下向5-氨基-n-乙氧基-2-(4-哌啶基甲基)-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-198(60.0mg，153umol，1.0当量)和3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-氧代乙氧基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸叔丁酯(449mg，768umol，5.0当量)于meoh(5ml)中的混合物中一次性添加nabh3cn(28.9mg，460umol，3.0当量)，然后在20℃下搅拌40小时。在真空中浓缩反应混合物并且通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*30mm*4um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：20％-45％，8分钟)纯化残余物，得到呈无色油状的l-84a(100mg，104umol，产率67.8％)。1h nmr(400mhz,meod)δ7.48(s,1h),6.97(s,1h),3.95(q,j＝7.2hz,2h),3.85(d,j＝4.4hz,2h),3.77-3.65(m,40h),3.45(s,2h),3.01(d,j＝12.4hz,2h),2.92(d,j＝6.4hz,2h),2.49(t,j＝6.4hz,2h),2.05-2.00(m,3h),1.82-1.72(m,2h),1.66-1.54(m,2h),1.47(s,9h),1.20(t,j＝7.2hz,3h),1.00(t,j＝7.2hz,3h)。[0928]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[4-[[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]-1-哌啶基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-84b[0929]在20℃下于n2下向l-84a(100mg，104umol，1.0当量)于mecn(0.5ml)和h2o(2ml)中的溶液中一次性添加hcl(12m，260.62ul，30当量)，然后在80℃下搅拌1小时。在真空中浓缩反应混合物，得到呈无色油状的l-84b(80mg，88.58umol，产率84.97％)。[0930]制备taz-l-84[0931]在20℃下于n2下向l-84b(80mg，88.5umol，1.0当量)和2,3,5,6-四氟苯酚(147mg，885umol，10当量)于dcm(2ml)和dma(0.5ml)中的混合物中一次性添加edci(84.9mg，acn]；b％：12％-42％，8分钟)纯化残余物，得到呈黄色油状的l-87a(0.18g，165.55umol，产率48.67％，tfa)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.45(s,1h),6.94(s,1h),3.96-3.90(m,2h),3.86-3.82(m,2h),3.75-3.71(m,2h),3.70-3.67(m,6h),3.66-3.59(m,36h),3.42(s,2h),3.06-2.90(m,4h),2.47(t,j＝6.2hz,2h),2.13-2.00(m,2h),1.87-1.60(m,6h),1.60-1.48(m,2h),1.45(s,10h),1.18(t,j＝7.2hz,3h),0.97(t,j＝7.6hz,3h)。[0936]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[4-[2-[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]乙基]-1-哌啶基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-87b[0937]在25℃下向l-87a(0.18g，166umol，1.0当量，tfa)于h2o(2.5ml)和ch3cn(0.3ml)中的混合物中一次性添加hcl(12m，345ul，25.0当量)并且在80℃下将其搅拌1小时。浓缩混合物，得到呈黄色油状的l-87b(0.15g，粗物质，hcl)。[0938]制备taz-l-87[0939]在25℃下向l-87b(0.05g，52.4umol，1.0当量，hcl)于dcm(1ml)和dma(0.2ml)中的混合物中一次性添加2,3,5,6-四氟苯酚(69.7mg，419umol，8.0当量)和edci(101mg，524umol，10.0当量)并且在25℃下将其搅拌0.5小时。浓缩混合物，得到残余物。通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*30mm*4um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：20％-50％，8分钟)纯化残余物，得到呈黄色油状的taz-l-87(14.5mg，12.30umol，产率23.45％，tfa)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.49-7.38(m,2h),6.92(s,1h),3.93(q,j＝8hz,2h),3.87(t,j＝6.0hz,2h),3.85-3.81(m,2h),3.74-3.70(m,2h),3.69-3.61(m,40h),3.42(s,2h),3.03-2.91(m,6h),2.07(d,j＝13.6hz,2h),1.79-1.66(m,5h),1.58-1.43(m,2h),1.18(t,j＝7.2hz,3h),0.97(t,j＝7.6hz,3h)。lc/ms[m+h]1065.5(计算值)；lc/ms[m+h]1065.4(观测值)。[0940]实施例l-88合成3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[4-[2-[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]乙基]-1-哌啶基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(2,3,5,6-四氟苯基)酯，taz-l-88[0941][0942]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[4-[2-[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]乙基]-1-哌啶基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-88a[0943]在25℃下向5-氨基-n-乙氧基-2-[2-(4-哌啶基)乙基]-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-176(60.0mg，136umol，1.0当量，hcl)和3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-氧代-3-(2,3,5,6-四氟苯氧基)丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(106mg，150umol，1.1当量)于dmf(0.5ml)中的混合物中一次性添加diea(52.8mg，408umol，71.1ul，3.0当量)并且在25℃下将其搅拌0.5小时。然后过滤混合物并且通过制备型hplc(柱：welch xtimate c18 150*25mm*5um；流动相：[水(0.04％hcl)-acn]；b％：20％-35％，8分钟)纯化，得到呈黄色油状的l-88a(40mg，42.32umol，产率31.11％)。[0944]制备taz-l-88[0945]在25℃下向l-88a(40mg，40.8umol，1.0当量)于dcm(1ml)和dma(0.2ml)中的混合物中一次性添加2,3,5,6-四氟苯酚(54.1mg，326umol，8.0当量)和edci(78.1mg，407umol，10.0当量)并且在25℃下将其搅拌0.5小时。浓缩混合物，得到残余物，并且通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*30mm*4um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：30％-60％，8分钟)纯化残余物，得到呈黄色油状的taz-l-88(36.2mg，33.11umol，产率81.26％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.46(s,1h),7.45-7.39(m,1h),6.90(s,1h),4.53(d,j＝13.2hz,1h),4.04(d,j＝13.6hz,1h),3.93(q,j＝7.2hz,2h),3.87(t,j＝6.0hz,2h),3.77-3.69(m,4h),3.66-3.60(m,36h),3.42(s,2h),3.06(t,j＝12.0hz,1h),2.98(t,j＝6.0hz,2h),2.93(t,j＝7.6hz,2h),2.78-2.51(m,3h),1.89-1.63(m,7h),1.30-1.07(m,5h),0.97(t,j＝7.6hz,3h)。lc/ms[m+h]1093.5(计算值)；lc/ms[m+h]1093.4(观测值)。[0946]实施例l-92合成3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(2,3,5,6-四氟苯基)酯，taz-l-92[0947][0948]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸叔丁酯，l-92a[0949]向5-氨基-2-(氮杂环丁烷-3-基甲基)-n-乙氧基-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-183(0.06g，166umol，1当量)和3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-(2-氧代乙氧基)乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸叔丁酯(290mg，497umol，3当量)于meoh(5ml)中的混合物中添加nabh3cn(20.8mg，331umol，2当量)和acoh(9.94mg，166umol，1当量)，然后在15℃下搅拌10小时。浓缩混合物，得到残余物。通过制备型hplc(tfa)(柱：phenomenex synergi c18 150*30mm*4um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：20％-45％，8分钟)纯化残余物，得到呈黄色固体状的l-92a(20mg，19.1umol，产率11.6％，tfa)。[0950]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-92b[0951]在25℃下向l-92a(20mg，19.1umol，1当量，tfa)于h2o(0.5ml)中的混合物中添加tfa(10.9mg，95.7umol，5当量)，然后在80℃下搅拌4小时。浓缩混合物，得到残余物。通过制备型hplc(柱：phenomenex gemini-nx c18 75*30mm*3um；流动相：[水(10mm nh4hco3)-acn]；b％：25％-45％，6分钟)纯化残余物，得到呈无色油状的l-92b(13mg，14.9umol，产率77.6％)。[0952]制备taz-l-92[0953]向l-92b(12mg，13.7umol，1当量)和2,3,5,6-四氟苯酚(18.2mg，110umol，8当量)于dcm(1ml)和dma(0.1ml)中的混合物中添加edci(26.3mg，137umol，10当量)，然后在15℃下搅拌0.5小时。浓缩混合物，得到残余物。通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*30mm*4um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：20％-50％，8分钟)纯化残余物，得到呈无色油状的taz-l-92(6.3mg，5.54umol，产率40.4％，纯度100％，tfa)。1h nmr(400mhz,meod)δ7.57-7.32(m,2h),6.98(br s,1h),4.43-3.79(m,8h),3.77-3.52(m,40h),3.44(s,2h),3.33-3.26(m,4h),3.18-3.11(m,1h),3.00(t,j＝6.0hz,2h),1.83-1.68(m,2h),1.20(t,j＝7.2hz,3h),0.99(t,j＝7.6hz,3h)。lc/ms[m+h]1023.5(计算值)；lc/ms[m+h]1023.3(观测值)。[0954]实施例l-93合成3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[4-[[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]-1-哌啶基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(2,3,5,6-四氟苯基)酯，taz-l-93[0955][0956]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[4-[[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]-1-哌啶基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-93a[0957]在20℃下于n2下向5-氨基-n-乙氧基-2-(4-哌啶基甲基)-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-198(30.0mg，70.3umol，1.0当量，hcl)和3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-氧代-3-(2,3,5,6-四氟苯氧基)丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(54.6mg，77.3umol，1.1当量)于dmf(0.5ml)中的混合物中一次性添加diea(27.2mg，210umol，36.7ul，3.0当量)，然后在20℃下搅拌1小时。过滤反应混合物并且通过制备型hplc(柱：xtimate c18 100*30mm*3um；流动相：[水(0.04％hcl)-acn]；b％：22％-45％，8分钟)纯化滤液，得到呈无色油状的l-93a(60.0mg，64.4umol，产率91.7％)。[0958]制备taz-l-93[0959]在20℃下于n2下向l-93a(60.0mg，64.4umol，1.0当量)和2,3,5,6-四氟苯酚(107mg，644umol，10当量)于dcm(2ml)和dma(0.5ml)中的混合物中一次性添加edci(123.53mg，644.37umol，10当量)，然后在20℃下搅拌1小时。过滤反应混合物并且通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*30mm*4um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：30％-55％，8分钟)纯化滤液，得到呈无色油状的taz-l-93(44.2mg，40.2umol，产率62.4％，纯度98.2％)。1h nmr(400mhz,meod)δ7.49(s,1h),7.47-7.41(m,1h),6.92(s,1h),4.56(d,j＝12.8hz,1h),4.06(d,j＝13.6hz,1h),3.95(q,j＝7.2hz,2h),3.89(t,j＝6.0hz,2h),3.80-3.71(m,4h),3.70-3.58(m,36h),3.45(s,2h),3.10(t,j＝12.0hz,1h),3.00(t,j＝6.0hz,2h),2.86(d,j＝7.0hz,2h),2.77-2.57(m,3h),1.95-1.90(m,1h),1.80-1.75(m,4h),1.35-1.20(m,5h),0.99(t,j＝7.2hz,3h)。lc/ms[m+h]1079.5(计算值)；lc/ms[m+h]1079.4(观测值)。[0960]实施例l-98合成3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[3-[[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(2,3,5,6-四氟苯基)酯，taz-l-98[0961][0962]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[3-[[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-98a[0963]向5-氨基-2-(氮杂环丁烷-3-基甲基)-n-乙氧基-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-183(150mg，315umol，1当量，tfa)和diea(102mg，787umol，137ul，2.5当量)于dmf(2ml)中的混合物中添加3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-氧代-3-(2,3,5,6-四氟苯氧基)丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(223mg，315umol，1当量)，然后在20℃下搅拌0.5小时。浓缩混合物，得到残余物。通过制备型hplc(柱：waters xbridge prep obd c18 150*40mm*10um；流动相：[水(10mm nh4hco3)-acn]；b％：5％-40％，8分钟)纯化残余物，得到呈黄色油状的l-98a(0.08g，88.6umol，产率28.1％)。[0964]制备taz-l-98[0965]向l-98a(0.08g，88.6umol，1当量)和2,3,5,6-四氟苯酚(118mg，709umol，8当量)于dcm(3ml)和dma(0.3ml)中的混合物中添加edci(170mg，886umol，10当量)。在15℃下搅拌混合物0.5小时。浓缩混合物，得到残余物。通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：25％-50％，10分钟；以及柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：25％-50％，8分钟)纯化残余物，得到呈无色油状的taz-l-98(34.3mg，31.9umol，产率36.0％，纯度97.7％)。1h nmr(400mhz,meod)δ7.49-7.38(m,2h),6.92(s,1h),4.42-4.35(m,1h),4.10(t,j＝9.2hz,1h),4.06-3.97(m,1h),3.93(q,j＝7.2hz,2h),3.89-3.85(m,2h),3.73-3.69(m,4h),3.66-3.51(m,37h),3.40(s,2h),3.19(br d,j＝7.6hz,2h),2.99-2.96(m,3h),2.48-2.24(m,2h),1.74(q,j＝7.2hz,2h),1.18(t,j＝7.2hz,3h),0.97(t,j＝7.2hz,3h)。lc/ms[m+h]1051.5(计算值)；lc/ms[m+h]1051.3(观测值)。[0966]实施例l-128合成4-[3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[3-[[5-氨基-7-[2-(环丁氧基羰基氨基)乙氧基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酰氧基]-2,3,5,6-四氟-苯磺酸，taz-l-128[0967][0968]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[3-[[5-氨基-7-[2-(环丁氧基羰基氨基)乙氧基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，128a[0969]在0℃下向n-[2-[[5-氨基-2-(氮杂环丁烷-3-基甲基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基]-丙基-氨基]氧基乙基]氨基甲酸环丁酯taz-238(0.12g，171umol，1.0当量，tfa)于dmf(2ml)中的混合物中一次性添加diea(66.1mg，512umol，89.1ul，3.0当量)和3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-氧代-3-(2,3,5,6-四氟苯氧基)丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(121mg，171umol，1.0当量)，然后在0℃下搅拌0.5小时。过滤混合物并且通过制备型hplc(柱：welch xtimate c18 100*25mm*3um；流动相：[水(0.05％hcl)-acn]；b％：20％-40％，8分钟)纯化，得到呈黄色油状的128a(45mg，42.8umol，产率25.1％，hcl)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.51(s,1h),6.96(s,1h),4.81-4.76(m,1h),4.40(t,j＝8.4hz,1h),4.11(t,j＝9.2hz,1h),4.03(dd,j＝5.6,8.8hz,1h),3.92(t,j＝5.2hz,2h),3.77-3.68(m,7h),3.66-3.55(m,36h),3.42(s,2h),3.30-2.25(m,2h),3.20(d,j＝8.0hz,2h),3.06-2.89(m,1h),2.54(t,j＝6.4hz,2h),2.44-2.31(m,2h),2.30-2.20(m,2h),2.05-1.90(m,2h),1.80-1.68(m,3h),1.66-1.52(m,1h),0.96(t,j＝7.6hz,3h)[0970]制备taz-128[0971]在25℃下向128a(40mg，38.0umol，1.0当量，hcl)和2,3,5,6-四氟-4-羟基-苯磺酸钠(50.9mg，190umol，5.0当量)于dcm(1.5ml)和dma(0.2ml)中的混合物中一次性添加edci(51.0mg，266umol，7.0当量)，然后在25℃下搅拌0.5小时。然后浓缩混合物。通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：15％-45％，8分钟)纯化残余物，得到呈黄色固体状的taz-128(35.2mg，28.3umol，产率74.5％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.49(s,1h),6.96(s,1h),4.79-4.73(m,1h),4.43-4.35(m,1h),4.16-3.98(m,2h),3.97-3.83(m,4h),3.77-3.67(m,5h),3.66-3.57(m,34h),3.42(s,2h),3.30-3.25(m,4h),3.19(d,j＝8.0hz,2h),2.98(t,j＝5.6hz,3h),2.44-2.19(m,4h),2.03-1.89(m,2h),1.80-1.54(m,4h),0.96(t,j＝7.6hz,3h)。lc/ms[m+h]1244.5(计算值)；lc/ms[m+h]1244.2(观测值)。[0972]实施例l-131合成4-[3-[2-[2-[3-[4-[2-[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]乙基]-1-哌啶基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酰氧基]-2,3,5,6-四氟-苯磺酸，taz-l-131[0973][0974]制备3-[2-[2-[3-[4-[2-[5-氨基-7-[乙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]乙基]-1-哌啶基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-131a[0975]在0℃下向5-氨基-n-乙氧基-2-[2-(4-哌啶基)乙基]-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-176(0.1g，227umol，1.0当量，hcl)于dmf(2ml)中的混合物中一次性添加diea(87.9mg，680umol，118ul，3.0当量)和3-[2-[2-[3-氧代-3-(2,3,5,6-四氟苯氧基)丙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(90.3mg，227umol，1.0当量)并且在0℃下将其搅拌0.5小时。通过制备型hplc(柱：welch xtimate c18 100*25mm*3um；流动相：[水(0.05％hcl)-acn]；b％：15％-35％，8分钟)纯化混合物，得到呈黄色油状的l-131a(0.06g，94.22umol，产率41.55％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.46(s,1h),6.89(s,1h),4.54(d,j＝13.6hz,1h),4.04(d,j＝13.6hz,1h),3.93(q,j＝7.2hz,2h),3.77-3.69(m,6h),3.63-3.58(m,8h),3.42(s,2h),3.15-3.01(m,1h),2.94(t,j＝7.6hz,2h),2.75-2.51(m,5h),1.88-1.78(m,2h),1.78-1.71(m,2h),1.70-1.65(m,2h),1.29-1.07(m,5h),0.97(t,j＝7.6hz,3h)。[0976]制备taz-l-131[0977]在25℃下向l-131a(0.06g，89.1umol，1.0当量，hcl)和2,3,5,6-四氟-4-羟基-苯磺酸钠(95.6mg，356umol，4.0当量)于dcm(1.5ml)和dma(0.3ml)中的混合物中一次性添加edci(103mg，535umol，6.0当量)并且在25℃下将其搅拌0.5小时。浓缩混合物，得到残余物，并且通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.2％fa)-acn]；b％：20％-45％，8分钟)纯化残余物，得到呈白色固体状的taz-l-131(31.7mg，36.65umol，产率41.13％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.43(s,1h),6.88(s,1h),4.51(d,j＝13.2hz,1h),4.01(d,j＝13.6hz,1h),3.96-3.84(m,4h),3.78-3.69(m,4h),3.68-3.54(m,8h),3.42(s,2h),3.07-3.01(m,1h),2.98(t,j＝5.6hz,2h),2.88(t,j＝7.2hz,2h),2.74-2.53(m,3h),1.84-1.68(m,4h),1.68-1.55(m,3h),1.25-1.03(m,5h),0.97(t,j＝7.6hz,2.19(m,2h),2.02-1.91(m,2h),1.76-1.71(m,3h),1.67-1.54(m,1h),1.45(s,9h),0.96(t,j＝7.6hz,3h)。[0983]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[[5-氨基-7-[2-(环丁氧基羰基氨基)乙氧基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-133b[0984]在25℃下向l-133a(0.2g，173umol，1.0当量，tfa)于h2o(3ml)和ch3cn(0.5ml)中的混合物中一次性添加hcl(12m，216ul，15.0当量)，然后在80℃下搅拌0.5小时。浓缩混合物。通过制备型hplc(柱：welch xtimate c18 100*25mm*3um；流动相：[水(0.05％hcl)-acn]；b％：10％-30％，8分钟)纯化残余物，得到呈黄色油状的l-133b(40mg，39.0umol，产率22.6％，hcl)。[0985]制备taz-l-133[0986]在25℃下向l-133b(40mg，39.0umol，1.0当量，hcl)和2,3,5,6-四氟-4-羟基-苯磺酸钠(41.9mg，156umol，4.0当量)于dcm(1ml)和dma(0.1ml)中的混合物中一次性添加edci(52.4mg，273umol，7.0当量)，然后在25℃下搅拌0.5小时。过滤混合物并浓缩。通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：10％-30％，8分钟)纯化残余物，得到呈黄色油状的taz-l-133(14.7mg，12.1umol，产率30.9％)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.48(s,1h),7.02-6.96(m,1h),4.84-4.84(m,1h),4.41-4.25(m,2h),4.15-4.14(m,1h),4.19-3.97(m,2h),3.95-3.84(m,4h),3.76-3.68(m,4h),3.68-3.58(m,38h),3.52-3.44(m,2h),3.42(s,2h),3.28-3.21(m,3h),2.99(t,j＝5.6hz,2h),2.25(q,j＝8.4hz,2h),2.04-1.90(m,2h),1.80-1.54(m,4h),0.96(t,j＝7.6hz,3h)。lc/ms[m+h]1216.5(计算值)；lc/ms[m+h]1216.6(观测值)。[0987]实施例l-139合成4-[3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[3-[[5-氨基-7-[异丙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酰氧基]-2,3,5,6-四氟-苯磺酸，taz-l-139[0988][0989]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[3-[[5-氨基-7-[异丙氧基(丙基)氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-139a[0990]向5-氨基-2-(氮杂环丁烷-3-基甲基)-n-异丙氧基-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-253(100mg，204umol，1当量，tfa)和3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-氧代-3-(2,3,5,6-四氟苯氧基)丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(158mg，224umol，1.1当量)于thf(3ml)中的混合物中添加et3n(61.9mg，612umol，85.1ul，3当量)，然后在20℃下搅拌1小时。将残余物倾倒至水(5ml)中并且用1m hcl将混合物的ph调节至约6。用乙酸乙酯(8ml x 1)萃取水相-弃去，用二氯甲烷/异丙醇＝3:1(8ml x 3)进一步萃取水相，用无水na2so4干燥合并的有机相，过滤并且在真空中浓缩，得到呈浅黄色油状的l-139a(150mg，164umol，产率80.23％)。[0991]制备taz-l-139[0992]向l-139a(100mg，109umol，1当量)于dcm(1.5ml)和dma(0.5ml)中的溶液中添加2,3,5,6-四氟-4-羟基-苯磺酸钠(117mg，436umol，4当量)和edci(83.6mg，436umol，4当量)，然后在20℃下搅拌2小时。过滤反应混合物并且在减压下浓缩。通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：15％-35％，8分钟)纯化残余物，得到呈浅黄色固体状的taz-l-139(69.7mg，55.3umol，产率50.76％，tfa)。1h nmr(meod,400mhz)δ7.45(s,1h),6.96(s,1h),4.85-4.80(m,1h),4.39(t,j＝8.6hz,1h),4.26-4.20(m,1h),4.11(t,j＝9.2hz,1h),4.02(dd,j＝5.2,8.5hz,1h),3.87(t,j＝5.8hz,2h),3.82-3.67(m,6h),3.66-3.58(m,34h),3.42(s,2h),3.18(d,j＝7.8hz,2h),3.05-2.95(m,3h),2.42-2.31(m,2h),1.79-1.69(m,2h),1.18(d,j＝6.2hz,6h),0.95(t,j＝7.4hz,3h)。lc/ms[m+h]1145.4(计算值)；lc/ms[m+h]1145.4(观测值)。[0993]实施例l-144合成4-[3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[3-[[5-氨基-7-[2-(异丙氧基羰基氨基)乙氧基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酰氧基]-2,3,5,6-四氟-苯磺酸，taz-l-144[0994][0995]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[3-[[5-氨基-7-[2-(异丙氧基羰基氨基)乙氧基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-144a[0996]在0℃下向n-[2-[[5-氨基-2-(氮杂环丁烷-3-基甲基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-羰基]-丙基-氨基]氧基乙基]氨基甲酸异丙酯taz-260(0.13g，161umol，1.0当量，tfa盐)于thf(4ml)中的混合物中一次性添加et3n(49.0mg，484umol，67.4ul，3.0当量)和3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-氧代-3-(2,3,5,6-四氟苯氧基)丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(114mg，161umol，1.0当量)，然后在0℃下搅拌0.5小时。用水(5ml)稀释混合物并且用tfa将混合物的ph调节至约6。接着将其用etoac(10ml)萃取-弃去。用dcm:i-proh＝3:1(10ml x 3)进一步萃取水相。经na2so4干燥有机层，过滤并浓缩，得到呈黄色油状的l-144a(0.21g，粗物质，3tfa)。[0997]制备taz-l-144[0998]在25℃下向l-144a(0.2g，199umol，1.0当量)于dcm(3ml)和dma(0.3ml)中的混合物中一次性添加2,3,5,6-四氟-4-羟基-苯磺酸钠(267mg，996umol，5.0当量)和edci(267mg，1.39mmol，7.0当量)，然后在25℃下搅拌0.5小时。浓缩混合物，得到残余物。通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：15％-40％，8分钟)纯化残余物，得到呈浅黄色油状的taz-l-144(98.2mg，79.69umol，产率40.01％)。1hnmr(meoh,400mhz)δ7.49(s,1h),6.96(s,1h),4.82-4.74(m,1h),4.39(t,j＝8.8hz,1h),4.11(t,j＝9.2hz,1h),4.03(dd,j＝5.6,9.2hz,1h),3.93(t,j＝5.2hz,2h),3.87(t,j＝6.0hz,2h),3.76-3.69(m,5h),3.68-3.52(m,38h),3.43(s,2h),3.18(d,j＝7.6hz,2h),2.98(t,j＝6.0hz,3h),2.43-2.30(m,2h),1.79-1.68(m,2h),1.17(d,j＝6.4hz,6h),0.95(t,j＝7.6hz,3h)。lc/ms[m+h]1232.5(计算值)；lc/ms[m+h]1232.7(观测值)。[0999]实施例l-145合成4-[3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[3-[[5-氨基-7-[2-(乙基氨甲酰基氨基)乙氧基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酰氧基]-2,3,5,6-四氟-苯磺酸，taz-l-145[1000][1001]制备3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-[3-[[5-氨基-7-[2-(乙基氨甲酰基氨基)乙氧基-丙基-氨甲酰基]-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基]甲基]氮杂环丁烷-1-基]-3-氧代-丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸，l-145a[1002]向5-氨基-2-(氮杂环丁烷-3-基甲基)-n-[2-(乙基氨甲酰基氨基)乙氧基]-n-丙基-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酰胺taz-261(120mg，177umol，1当量，tfa)于thf(3.00ml)中的溶液中添加et3n(54.0mg，532umol，3当量)和3-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[2-[3-氧代-3-(2,3,5,6-四氟苯氧基)丙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]乙氧基]丙酸(125mg，177umol，1当量)，然后在0℃下搅拌1小时。用水(10ml)稀释混合物并且用tfa将混合物的ph调节至约ph 6，并且用mtbe(10ml)萃取-弃去，并且用dcm:i-proh＝3:1(20ml x 3)进一步萃取水相。用盐水(30ml x 3)洗涤有机层，经na2so4干燥，过滤并浓缩，得到呈浅黄色油状的l-145a(170mg，172umol，产率96.90％)。[1003]制备taz-l-145[1004]向l-145a(170mg，172umol，1当量)和2,3,5,6-四氟-4-羟基苯磺酸钠(184mg，687umol，4当量)于dcm(3.00ml)和dma(0.15ml)中的溶液中添加edci(132mg，687umol，4当量)，然后在25℃下搅拌1小时。浓缩混合物，得到残余物。通过制备型hplc(柱：phenomenex synergi c18 150*25*10um；流动相：[水(0.1％tfa)-acn]；b％：20％-40％，8分钟)纯化残余物，得到呈浅黄色油状的taz-l-145(103mg，77.37umol，产率45.02％，tfa)。1hnmr(meod,400mhz)δ7.47(s,1h),6.95(s,1h),4.39(t,j＝8.5hz,1h),4.11(t,j＝9.0hz,1h),4.02(dd,j＝5.3,8.8hz,1h),3.89(td,j＝5.6,13.9hz,4h),3.76-3.68(m,6h),3.67-3.56(m,36h),3.44(s,2h),3.18(d,j＝7.5hz,2h),3.07(q,j＝7.3hz,3h),2.98(t,j＝5.9hz,2h),2.44-2.30(m,2h),1.79-1.69(m,2h),1.05(t,j＝7.2hz,3h),0.96(t,j＝7.4hz,3h)。lc/ms[m+h]1217.5(计算值)；lc/ms[m+h]1217.6(观测值)。[1005]实施例l-147合成4-((40-(5-氨基-7-((2-((环丁氧基羰基)氨基)乙氧基)(丙基)氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)-34-氧代-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-35-氮杂四十烷酰基)氧基)-2,3,5,6-四氟苯磺酸，taz-l-147[1006][1007]制备氯化5-(5-氨基-7-((2-((环丁氧基羰基)氨基)乙氧基)(丙基)氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)戊-1-铵，l-147b[1008]将5-氨基-2-(5-((叔丁氧基羰基)氨基)戊基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-7-甲酸l-147a(0.78g，1.98mmol，1当量)和(2-((丙基氨基)氧基)乙基)氨基甲酸环丁酯(0.5g，1.98mmol，1当量)于dmf中合并。添加可力丁(0.52ml，3.9mmol，1.98当量)，继而添加edci，也称为edc1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺，cas注册号1892-57-5(0.38g，1.98mmol，1当量)。通过lcms监测反应，然后浓缩并且通过反相快速色谱法纯化。冻干合并的级分，然后溶于4n hcl/二噁烷中。通过反相快速色谱法纯化去保护的产物，得到l-147b(0.8g，1.51mmol，82％)。lc/ms[m+h]492.26(计算值)；lc/ms[m+h]492.45(观测值)。[1009]制备40-(5-氨基-7-((2-((环丁氧基羰基)氨基)乙氧基)(丙基)氨甲酰基)-6h-噻吩并[3,2-b]氮呯-2-基)-34-氧代-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂-35-氮杂四十烷酸，l-147c[1010]将中间体l-147b(0.148g，0.3mmol，1当量)和34-氧代-34-(2,3,5,6-四氟苯氧基)-4,7,10,13,16,19,22,25,28,31-十氧杂三十四烷酸(0.23g，0.32mmol，1.07当量)溶解于3ml dmf中。添加可力丁(0.2ml，1.5mmol，5当量)，并且在周围温度下搅拌反应物。通过反相hplc纯化反应物，得到l-147c(0.16g，0.16mmol，52％)。lc/ms[m+h]1032.54(计算值)；lc/ms[m+h]1032.81(观测值)。[1011]制备taz-l-147[1012]将中间体l-147c(0.16g，0.155mmol，1当量)和2,3,5,6-四氟-4-羟基苯磺酸(0.083g，0.31mmol，2当量)溶解于2ml dmf中。添加可力丁(0.1ml，0.78mmol，5当量)，继而添加edc(0.045g，0.23mmol，1.5当量)。在室温下搅拌反应物并且通过lcms监测，然后用水稀释并且通过反相hplc纯化，得到taz-l-147(0.095g，0.075mmol，49％)。lc/ms[m+h]1260.49(计算值)；lc/ms[m+h]1260.70(观测值)。[1013]实施例201制备高分子支撑的化合物(msc)[1014]在示例性程序中，使用g-25sephadextm脱盐柱(sigma-aldrich,st.louis,mo)将高分子进行缓冲液交换成含有100mm硼酸、50mm氯化钠、1mm乙二胺四乙酸的缀合缓冲液(ph 8.3)。然后使用缓冲液将洗脱液各自调节至约1-10mg/ml的浓度，然后进行无菌过滤。将高分子预热至20-30℃并且与2-20(例如7-10)摩尔当量的式ii噻吩并氮呯-连接子(taz-l)化合物快速混合。使反应在30℃下进行约16小时，并且通过在ph 7.2磷酸盐缓冲盐水(pbs)中平衡的两个连续g-25脱盐柱上过柱而使msc与反应物分离，以提供表3的msc。通过在连接至xevotm g2-xs tof质谱仪(waters corporation)的acquitytm uplc h级(waters corporation,milford,ma)上使用c4反相柱进行液相色谱质谱分析来确定佐剂-高分子比率(dar)。[1015]对于缀合来说，可以将高分子溶解于本领域中已知的水性缓冲系统中，所述生理缓冲系统不会不利地影响高分子的稳定性或抗原结合特异性。可以使用磷酸盐缓冲盐水。将噻吩并氮呯-连接子(taz-l)中间体化合物溶解于包含如本文别处所描述的至少一种极性非质子性溶剂的溶剂系统中。在一些此类方面，将噻吩并氮呯-连接子(taz-l)中间体以约5mm、约10mm、约20mm、约30mm、约40mm或约50mm及其范围，诸如约5mm至约50mm或约10mm至约30mm的浓度溶解于ph 8tris缓冲液(例如50mm tris)中。在一些方面，将噻吩并氮呯-连接子中间体溶解于dmso(二甲亚砜)、dma(二甲基乙酰胺)或乙腈或另一种适合的偶极非质子溶剂中。[1016]或者，在缀合反应中，可以稀释当量过量的噻吩并氮呯-连接子(taz-l)中间体溶液并且与高分子溶液合并。可以用至少一种极性非质子性溶剂和至少一种极性质子性溶剂(其实例包括水、甲醇、乙醇、正丙醇和乙酸)适当稀释噻吩并氮呯-连接子中间体溶液。噻吩并氮呯-连接子中间体与抗体的摩尔当量可以为约1.5:1、约3:1、约5:1、约10:1、约15:1或约20:1和其范围，诸如约1.5:1至约20:1、约1.5:1至约15:1、约1.5:1至约10:1、约3:1至约15:1、约3:1至约10:1、约5:1至约15:1或约5:1至约10:1。可以通过本领域中已知的方法，诸如lc-ms适当监测反应的完成。缀合反应通常在约1小时至约16小时的范围内完成。反应完成后，可以将试剂添加至反应混合物中以淬灭反应物。如果高分子硫醇基与硫醇反应基，诸如噻吩并氮呯-连接子中间体的马来酰亚胺反应，那么未反应的高分子硫醇基可以与封端试剂反应。适合封端试剂的实例是乙基马来酰亚胺。[1017]缀合后，可以通过本领域中已知的纯化方法纯化msc并且与未缀合的反应物和/或缀合物聚集体分离，所述纯化方法诸如并且不限于尺寸排阻色谱法、疏水相互作用色谱法、离子交换色谱法、色谱聚焦、超滤、离心超滤、切向流过滤和它们的组合。举例来说，在纯化之前可以稀释msc，诸如在20mm丁二酸钠(ph 5)中。将经稀释的溶液施加至阳离子交换柱，继而用例如至少10柱体积的20mm丁二酸钠(ph 5)洗涤。可以用诸如pbs的缓冲液适当洗脱缀合物。[1018]实施例202hek报告体测定[1019]表达人类tlr7或人类tlr8的hek293报告体细胞购自invivogen，并且对于细胞繁殖和实验遵循供货商方案。简单来说，在5％co2下于补充有10％fbs、吉欧霉素(zeocin)和杀稻瘟菌素(blasticidin)的dmem中使细胞生长至80-85％汇合。然后将细胞以4x104个细胞/孔与含有hek检测介质和免疫刺激分子的基质一起接种于96孔平板中。在620-655nm波长下使用板读取器测量活性。[1020]实施例203试管内高分子支撑的化合物(msc)活性的评估[1021]本实施例显示高分子支撑的化合物(msc)可以有效引发髓样活化，并且可用于治疗癌症。[1022]人类抗原呈递细胞的分离：通过使用含有针对cd14、cd16、cd40、cd86、cd123和hla-dr的单克隆抗体的rosetteseptm人类单核细胞富集混合液(stem cell technologies,vancouver,canada)进行密度梯度离心，从获自健康供血者(stanford blood center,palo alto,california)的人类周边血液中阴性选择人类髓样抗原呈递细胞(apc)。随后经由使用含有针对cd14、cd16、cd40、cd86、cd123和hla-dr的单克隆抗体而cd16未耗竭的easyseptm人类单核细胞富集试剂盒(stem cell technologies)进行阴性选择将未成熟apc纯化至》90％纯度。[1023]髓样apc活化测定：在含有伊斯科夫改良达尔伯克培养基(iscove's modified dulbecco's medium，imdm)(lonza)的96孔板(corning,corning,ny)中孵育2x 105个apc，所述培养基补充有10％fbs、100u/ml青霉素、100μg/ml(微克/毫升)链霉素、2mm l-谷氨酰胺、丙酮酸钠、非必需氨基酸以及如有指示，各种浓度的未缀合(裸)pd-l1或her2抗体和msc(如根据上述实施例制备)。曲妥珠单抗和阿维鲁单抗用作抗体构建体。18小时后，经由elisa分析无细胞上清液以测量tnfα分泌作为促炎反应的读出。[1024]本文引用的所有参考文献，包括公布、专利申请和专利，特此以引用的方式并入，其程度如同每个参考文献个别地和特定地指示以引用的方式并入并且在本文中以全文阐述一样。









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